CN105531363A - 细胞悬浮液过滤器具以及包含细胞悬浮液的点滴用溶液的制备方法 - Google Patents

细胞悬浮液过滤器具以及包含细胞悬浮液的点滴用溶液的制备方法 Download PDF

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Abstract

一种用于去除细胞悬浮液中的异物而使用的过滤器具，将过滤器容器制成为使用透明或半透明的原材料并且能够容易地取出被过滤器捕捉到的固形物的结构。具体而言，制成为用剪刀切断过滤器容器从而能够取出被过滤器捕捉到的固形物的结构。通过该构成，防止异物混入细胞悬浮液中，并且若异物混入时取出异物进行分析，从而容易地弄清异物混入的原因。

Description

细胞悬浮液过滤器具以及包含细胞悬浮液的点滴用溶液的制备方法
技术领域
本发明涉及用于去除细胞悬浮液中的异物的过滤器具、以及使用了所述过滤器具的包含细胞悬浮液的点滴用溶液的制备方法。
背景技术
在免疫疗法和其他的治疗方法中，通过从包含培养细胞的细胞悬浮液分离细胞并对所述细胞进行清洗，使经过分离的目标细胞再悬浮于生理盐水等中而制备的细胞悬浮液被用作点滴用溶液。由于培养细胞时所需要的液体成分与用于点滴等时的液体成分不同，因此在细胞培养后，暂时分离细胞，清洗之后，用生理盐水等使其再悬浮，由此可以制备包含细胞悬浮液的点滴用溶液。
作为从细胞悬浮液分离细胞并对所述细胞进行清洗的方法，已知有：通过离心分离将所述细胞悬浮液分离为目标细胞和上清的方法；使细胞悬浮液通过过滤器构件从而在过滤器构件上捕捉目标细胞，接着从与细胞悬浮液通过过滤器构件的方向相反的方向使液体通过，从而回收在过滤器上捕捉到的目标细胞的方法等。
另外，将细胞悬浮液用于治疗时，需要防止异物混入细胞悬浮液中。提出了例如通过离心分离从包含培养细胞的细胞悬浮液分离细胞并对所述细胞进行清洗时能够防止细菌、异物等混入的形状的离心分离用一次性容器(专利文献1)。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：日本特开2011-125813号公报
发明内容
发明要解决的问题
如上述那样，虽然提出了在从包含培养细胞的细胞悬浮液中分离细胞并对所述细胞进行清洗的工序中防止异物混入的各种方法，但在制备包含细胞悬浮液的点滴用溶液时，在分离目标细胞并对所述分离目标进行清洗的工序之后，具有将包含目标细胞的细胞悬浮液注入点滴用容器内的生理盐水中的工序，除了分离和清洗的工序以外，也存在异物混入的风险。
另外，异物因某些原因混入时，需要分析该异物并弄清异物混入的原因，在消除异物混入的原因的基础上进行其后的细胞培养等。现有技术中，虽然研究了防止异物混入这样的事先预防措施，但没有意识到异物因某些原因混入时分析该异物以弄清原因这样的事后措施的重要性。
用于解决问题的方案
本发明的目的在于，在从包含培养细胞的细胞悬浮液中分离细胞并对所述细胞进行清洗，制备包含使目标细胞再悬浮的细胞悬浮液的点滴用溶液时，通过使用特定的过滤装置防止异物混入，另外若因某些原因混入异物时，容易地进行该异物的分析。
即，本案的第一发明为特征在于用于过滤细胞悬浮液的过滤器具，
前述过滤器具包括：流入口：其具备可连结内含细胞悬浮液的容器的连结部；排出口：其具备可连结细胞悬浮液排出单元的连结部；过滤器；以及过滤器容器：其内部具备前述过滤器，
前述过滤器容器为细胞悬浮液由流入口流入直至通过过滤器由排出口排出为止不与外部接触那样的形状，
前述过滤器容器的原材料为能够用目视确认被过滤器捕捉到的固体成分那样的透明或半透明的原材料，
前述过滤器容器为能够容易地取出被过滤器捕捉到的固形物的结构。
前述过滤器具中，作为内含细胞悬浮液的容器，可以举出注射筒、培养袋等。
前述过滤器具中，作为细胞悬浮液排出单元，可以举出注射针，吸液管头(pipettechip)等。
前述过滤器容器为能够容易地取出被过滤器捕捉到的固形物的结构，具体而言，过滤器容器由可用剪刀容易地切断的原材料构成，可以举出通过用剪刀切断而能够容易地取出被过滤器捕捉到的固形物的结构。
前述过滤器具优选过滤器容器的过滤器前室部的内径大于流入口的内径和排出口的内径。
另外，前述过滤器容器优选可用剪刀切断过滤器前室部而不切断或损伤过滤器的形状。
作为前述过滤器容器的材质，只要是透明或半透明的、可用剪刀容易地切断并且即使与细胞接触也不损伤细胞的原材料，就没有特别限制。具体而言，可以例示聚氯乙烯、聚酯、聚丙烯、聚乙烯、聚苯乙烯、聚酰胺等树脂。
过滤器的孔径优选为10～100μm。过滤器的原材料只要是不损伤细胞的原材料就没有特别限制，例如可以举出聚酯、聚氯乙烯、聚丙烯、聚乙烯、聚苯乙烯、聚酰胺、聚酰亚胺、芳纶、纸浆等。
本案的第二发明为包含细胞悬浮液的点滴用溶液的制备方法，其特征在于，通过离心分离将包含培养细胞的细胞悬浮液分离为包含细胞的沉淀块(pellet)和上清，去除上清，对沉淀块加入生理盐水使其再悬浮从而制备细胞悬浮液，其后，
将前述再悬浮的细胞悬浮液抽吸到注射筒中，将前述注射筒与前述第一发明的过滤器具的流入口连接，将该过滤器具的排出口与注射针连接，
将前述注射针扎入装有生理盐水的点滴用容器，由注射筒通过前述过滤器具将前述细胞悬浮液注入到点滴用容器中。
本案的第三发明为一种包含细胞悬浮液的给药用溶液的制备方法，其特征在于，将内含细胞悬浮液的容器与前述第一发明的过滤器具的流入口连接，将该过滤器具的排出口与细胞悬浮液排出口连接，所述细胞悬浮液由体外培养的细胞和可对人体给药的液体构成。
将装有可对人体给药的液体的给药用容器与前述细胞悬浮液排出口连接，由内含细胞悬浮液的容器通过前述过滤器具将前述细胞悬浮液注入到给药用容器中。
可对人体给药的液体优选为生理盐水。
给药用溶液优选为作为点滴而给药的溶液、可向皮内/皮下等注射的溶液。
发明的效果
本发明的过滤器具中，将再悬浮的细胞悬浮液抽吸到注射筒之后直至注入到点滴用容器中为止细胞悬浮液不与外部接触，因此能够防止新的异物混入。另外，若再悬浮的细胞悬浮液中混入异物，则可用过滤器具的过滤器去除异物，本发明的过滤器具的过滤器容器为透明或半透明的，因此能够用目视容易地识别该异物的存在。进而，本发明的过滤器具通过用剪刀切断过滤器容器等的方法能够容易地取出被过滤器去除的异物，从而能够容易地进行异物的分析。由此能够容易地分析异物的混入原因。
另外，本发明的过滤器具通过使过滤器容器的过滤器前室部的内径大于流入口的内径和排出口的内径，能够抑制排出细胞悬浮液时对细胞施加过度的压力导致的细胞的损伤。
附图说明
图1是示出本发明的过滤器具的实施方式的说明图。
具体实施方式
下面，通过实施例说明本发明，本发明只要不超出其主旨，就不限于实施例。
实施例1
将本实施例的过滤器具的说明图示于图1。将具有某种程度强度的聚氯乙烯整形来制作流入口1、排出口6。流入口1和排出口6设置有鲁尔端口(luerport)以在排出细胞悬浮液时不使注射筒、注射针脱落。前室部2、3、5是使用聚氯乙烯制作而成的。本实施例中使用的聚氯乙烯是柔软到可用剪刀切断的程度且透明到能够用目视确认前室部内的程度的树脂。过滤器4使用了将聚酯作为材料的、平均孔径为42μm的过滤器。在排出口6的前室部侧设置过滤器4，并用前室部5的部分压接，从而固定过滤器4和排出口6。在另一侧，将前室部2的部分压接，从而固定流入口1和前室部。使前室部3的两端的边缘成为曲线以在排出细胞悬浮液时不易残留液体。另外，将前室部3的直径设定为大于流入口1的直径和排出口6的直径，以在排出细胞悬浮液时不过大地施加压力。
接着，对使用了本发明的过滤器具的包含细胞悬浮液的点滴用溶液的制备方法进行说明。
使目标细胞悬浮于细胞培养用培养基中，用通常的方法培养细胞之后，通过离心分离将细胞培养液分离为沉淀块(细胞)和上清。抽吸去除上清之后，在离心管中加入生理盐水，制备细胞悬浮液。将制备的细胞悬浮液抽吸到注射筒中。
将本发明的过滤器具的流入口1与内含细胞悬浮液的注射筒的抽吸口连接，并将排出口6与塑料针连接。接着，将前述塑料针扎入装有生理盐水的点滴用容器，从注射筒向点滴用容器注入细胞悬浮液。通过该操作，细胞悬浮液被以过滤器4过滤之后被填充到点滴剂中而不与外部空气接触。
将细胞悬浮液填充到点滴用容器中后，用目视确认过滤器容器内的前室部3中是否具有残留物。
进而，一边注意不切断过滤器4一边用不锈钢制剪刀切断前室部3。切断后，确认前室部3中是否存在异物。若存在异物，则可以取出异物进行分析。
产业上的可利用性
根据本发明，在制备包含细胞悬浮液的点滴用溶液时能够防止异物的混入，若异物混入时能够容易地识别该异物的存在，还能够容易地进行该异物的分析。由此，能够同时进行异物混入的事先防止以及若异物混入时的事后措施这两者，能够简便且安全地制备包含细胞悬浮液的点滴用溶液。
附图标记说明
1流入口
2前室部的压接部分
3前室部
4过滤器
5前室部的压接部分
6排出口

Claims (6)

1.一种过滤器具，其特征在于，其是用于过滤细胞悬浮液的过滤器具，
所述过滤器具包括：
流入口：其具备可连结内含细胞悬浮液的容器的连结部；
排出口：其具备可连结细胞悬浮液排出单元的连结部；
过滤器；以及
过滤器容器：其内部具备所述过滤器，
所述过滤器容器为细胞悬浮液由流入口流入直至通过过滤器由排出口排出为止不与外部接触的形状，并且
所述过滤器容器的原材料为能够用目视确认被过滤器捕捉到的固体成分的透明或半透明的原材料，
所述过滤器容器为能够容易地取出被过滤器捕捉到的固形物的结构。
2.根据权利要求1所述的过滤器具，其特征在于，所述过滤器容器由可用剪刀容易地切断的原材料构成，从而制成为能够容易地取出被过滤器捕捉到的固形物的结构。
3.根据权利要求1或2所述的过滤器具，其特征在于，所述过滤器容器的过滤器前室部的内径大于流入口的内径和排出口的内径。
4.根据权利要求1～3所述的过滤器具，其特征在于，所述过滤器容器为可用剪刀切断过滤器前室部而不切断或损伤过滤器的形状。
5.一种包含细胞悬浮液的点滴用溶液的制备方法，其特征在于，通过离心分离将包含培养细胞的细胞悬浮液分离为包含细胞的沉淀块和上清，去除上清，对沉淀块加入生理盐水使其再悬浮从而制备细胞悬浮液，其后，
将所述再悬浮的细胞悬浮液抽吸到注射筒中，将所述注射筒与权利要求1～4所述的过滤器具的流入口连接，将该过滤器具的排出口与注射针连接，
将所述注射针扎入装有生理盐水的点滴用容器，由注射筒通过所述过滤器具将所述细胞悬浮液注入到点滴用容器中。
6.一种包含细胞悬浮液的给药用溶液的制备方法，其特征在于，
将内含细胞悬浮液的容器与权利要求1～4所述的过滤器具的流入口连接，将该过滤器具的排出口与细胞悬浮液排出口连接，所述细胞悬浮液由体外培养的细胞和可对人体给药的液体构成，
将装有可对人体给药的液体的给药用容器与所述细胞悬浮液排出口连接，由内含细胞悬浮液的容器通过所述过滤器具将所述细胞悬浮液注入给药用容器中。
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