CN105517561A - 预防和治疗组织损伤相关疾病和病症的组织保护肽和肽类似物 - Google Patents

预防和治疗组织损伤相关疾病和病症的组织保护肽和肽类似物 Download PDF

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Abstract

本发明提供了具有组织保护活性同时具有很低或不具有潜在不希望的造血效应的肽和肽类似物。所述肽和肽类似物在预防和治疗多种组织损伤相关疾病和病症中是有用的。

Description

预防和治疗组织损伤相关疾病和病症的组织保护肽和肽类似物
相关申请的引用
本专利申请主张2013年7月17日提交的美国临时专利申请序列号No.61/847,455的优先权，该专利申请的全部内容并入本文作为参考。
1.简介
本发明提供了预防或治疗组织损伤相关疾病或病症和/或其损伤、影响或症状的组织保护肽和肽类似物，所述疾病或病症包括，但不限于癌症、炎症和暴露于毒性剂。尤其是，本发明提供了与几乎不具有或不具有全长配体的潜在不希望的造血效应的I型细胞因子受体配体的片段共用共有序列的组织保护肽和肽类似物。
这些肽还包括设计用于模拟组织保护性受体配体(例如，EPO)内关键氨基酸残基的空间位置的片段、嵌合体和肽。出于治疗、预防或改善所述疾病或病症的目的，本发明还提供了这些肽调节由组织损伤相关疾病或病症导致的受试者应答和/或症状的方法和用途。
另外，本发明提供了用于在对其有需要的受试者中治疗组织损伤相关疾病或病症或其损伤、作用或症状(包括但不限于癌症、炎症和暴露于毒性剂)的药物组合物，其包含肽和可药用载体、赋形剂或稀释剂。
2.发明背景
组织损伤能够由缺血性、创伤性、毒性或炎症性损伤造成的组织的大量损失而引起，其中组织内的细胞通过细胞凋亡或坏死而被破坏。组织损伤可以在一些急性和慢性疾病和病况中发生。发生组织损伤的程度受多种因素调节，包括疾病或损伤的类型、疾病或损伤相关的炎症或创伤的水平或严重程度、组织损伤的位置和组织的血管充足性。
最近的证据表明，通常与维持血细胞比容有关的促红细胞生成素(EPO)(其为1型细胞因子家族成员)还可以通过与其受体EPOR的相互作用在减轻组织损伤中发挥重要作用(Brines等人,2004,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,101(41):14907-12)。尽管假设EPO可以提供用于改善缺氧细胞环境并调节由代谢应激造成的程序性细胞死亡的补偿性应答，但是尚不能清楚了解潜在的分子机制。
基于该观察结果，研究人员已探索了EPO在多种适应症中的使用。例如，基于观察到用于在肿瘤患者中治疗贫血的EPO不仅改善了贫血还使得肿瘤患者的健康状况提高，研究人员已探索了EPO作为癌症的潜在疗法的使用。(参见美国专利No.6,579,525和BlauC.A.,2007,StemCells25(8):2094-7)。授予Haran-Ghera等人的美国专利No.6,579,525涉及将重组EPO用于治疗多发性骨髓瘤的用途并假设了EPO引起对肿瘤的免疫应答。另外，美国专利申请No.11/093,177(公开号no.US2005/0267027)公开了EPO通过降低肿瘤中的HIF-1α和/或VEGF的表达来抑制肿瘤中的血管生成的用途。
然而，由于其红细胞生成作用，作为潜在组织保护剂的EPO存在严重的问题。尤其是对于长期剂量施用(如在诸如癌症和炎症的适应症中所预见的)，频繁应用治疗剂量的EPO会显著提高受试者的血细胞比容，这会导致高血压、癫痫和血管栓塞。
此外，对于癌症，尚未认识到EPO作为治疗剂的潜能。已经确定几种类型的癌症(如乳腺癌)表达并且倾向于过度表达促红细胞生成素受体。这导致了这样的担心，即，将EPO治疗性地用于治疗癌症将会导致肿瘤的进一步生长，而非导致肿瘤发展的退化(参见Blau，2007，同上，和美国专利申请No.10/432,899，作为US2005/0260580公开)。这种担心已在临床上显现出来，这是因为，由于肿瘤生长导致死亡率升高，EPO在多种癌症适应症中的一些试验被停止(Blau)。鉴于这些不良的临床结果，FDA已经在已批准的EPO产品上附上黑框，警告不得将它们用于未经批准的癌症适应症。
另外，成熟人EPO蛋白是165个氨基酸的蛋白，经质谱测量的分子量为约30.4kDa。重组蛋白可以通过高度规范的、昂贵的且劳动密集的工艺在中国仓鼠卵巢细胞中生产。此外，EPO必须在严格条件下贮存以维持其活性。考虑到这些限制，EPO不是解决公共紧急事件(例如，毒性剂(如辐射试剂或化学试剂)的释放，无论由于工业事故还是恐怖主义行动或战争引起)的理想候选物，而公共紧急事件需要治疗剂的快速大量生产以供广泛分发。
因此，对于具有很低或不具有潜在有害作用且可供公众方便获得的组织保护处理仍存在需要。
3.发明概述
本发明提供了在应答性细胞、组织或器官中具有组织保护活性的分离的肽和肽类似物。在某些实施方式中，所述肽和肽类似物几乎没有或不具有潜在的不期望的造血效应。在一种实施方式中，所述组织保护肽具有15-29个氨基酸并且包含氨基酸序列RYLLEAKEAENITTG(SEQIDNO：1)。在另一种实施方式中，所述组织保护肽由氨基酸序列RYLLEAKEAENITTG(SEQIDNO：1)组成。
在某些方面，本发明提供了具有至少一种组织保护活性的分离的肽和肽类似物。示例性的组织保护活性包括，但不限于保护、维持、增强和恢复应答性哺乳动物细胞、组织或器官的功能或活力。因此，在一个方面，本发明提供了本发明的分离的肽和肽类似物用于制备用于保护、维持、增强或恢复应答性哺乳动物细胞以及它们相关的细胞、组织和器官的功能或活力的药物组合物的用途。在相关实施方式中，所述组合物用于向对其有需要的受试者施用。
在其他方面，本发明的分离的肽和肽类似物还具有很低的或不具有红细胞生成活性，例如，它们不会显著提高受试者中的血红蛋白或血细胞比容，或更一般地，几乎没有或不具有造血活性，例如，它们不会显著提高血细胞组分，如红细胞、淋巴细胞核骨髓细胞。在具体的实施方式中，分离的肽和肽类似物几乎没有或不具有选自以下的活性：血管活性动作(例如，血管收缩)、过度激活血小板、促凝血活性和刺激血小板或红细胞生成依赖性细胞(erythropoietic-dependentcells)的增殖或产生。(参见Coleman等人，2006,Proc.Natl.Acad.Sci.USA103:5965-5970)。
本发明还提供了包含这些组织保护肽和肽类似物以及可药用载体、赋形剂或稀释剂的药物组合物，以及制备这些组合物的方法和它们用于治疗组织损伤相关疾病和病症的用途。在其他方面，本发明提供了使用本文所述的分离的肽或肽类似物来制备保护或预防对其有需要的受试者中应答性组织损伤、恢复或复原所述受试者中应答性组织或应答性组织功能的药物组合物的方法。在一个具体方面，由于紧密的内皮细胞屏障，应答性哺乳动物细胞以及它们相关的细胞、组织或器官位于脉管系统的远端。在另一个具体方面，所述细胞、组织、器官或其他身体部分分离自哺乳动物身体，如预期用于移植的那些。在本发明的某些方面，兴奋性组织为中枢神经系统组织、周围神经系统组织、心脏组织或视网膜组织。在另一个方面，应答性细胞或其相关细胞、组织或器官不是兴奋性细胞、组织或器官，它们也不主要包含兴奋性细胞或组织。
在另一种实施方式中，本发明涉及通过施用有效量的肽来预防、治疗、改善或控制对其有需要的患者中的炎症、癌症或肿瘤病症或暴露于化学试剂的方法。
在某些实施方式中，本发明涉及调节癌症介体活性、身体对毒性试剂的应答和炎症的方法。具体地，本发明涉及对炎症介体活性的调节。优选地，本发明所述的肽能够调节一种或多种炎症介体的作用。
在另一种实施方式中，本发明涉及阻止细胞生长的方法，包括将需要阻止生长的细胞与有效量的肽接触。
在另一种实施方式中，本发明涉及导致癌症或赘生性细胞死亡的方法，其包括将癌症或赘生性细胞与有效量的肽接触。
在另一种实施方式中，本发明涉及抑制血管向癌性或赘生性细胞生成或者降低导致有丝分裂或血管生成的分子产生的方法。
在另一种实施方式中，本发明涉及治疗或预防与化疗或放射疗法有关的副作用的方法，包括向需要这种治疗或预防的患者施用有效量的肽。与化疗或放射疗法有关的副作用包括恶病质、低血细胞计数、恶心、腹泻、口腔病变和脱发。
在另一种实施方式中，本发明涉及治疗或预防患者中的癌症或肿瘤疾病的方法，包括将癌症或赘生性细胞与有效量的肽接触。
在另一种实施方式中，本发明涉及治疗或预防患者中癌症或肿瘤疾病的方法，包括向需要这种治疗或预防的患者施用有效量的肽。
在某些实施方式中，本发明涉及所述肽用于制备用于预防、治疗、改善或控制对其有需要的受试者中癌症或肿瘤病症的药物组合物的用途。
在另一种实施方式中，本发明涉及治疗或预防与炎症或炎性病症病症有关的症状的方法。在其他实施方式中，本发明涉及治疗或预防对其有需要的患者中炎症或炎性病症的方法。可通过本发明方法治疗的炎性病症为过敏症和过敏性疾病、风湿病以及运动相关损伤。
在另一种实施方式中，本发明涉及治疗、预防、改善或控制需要治疗的人中对暴露于毒性试剂的影响的方法。所述毒性试剂被认为是生物试剂、化学试剂和放射性试剂。
在某些实施方式中，本发明还涉及包含向对其有需要的受试者施用的上述分离的肽的药物组合物。在根据该实施方式的具体方面，本发明的药物组合物还包含可药用载体。可以将这些药物组合物配制为用于口服、鼻内、经眼、吸入、透皮、直肠、舌下、阴道或肠胃外施用或者配制成离体维持细胞、组织或器官活力的灌流溶液。在相关实施方式中，本发明的受试者是哺乳动物，优选地，本发明的受试者是人。
参考以下描述和所附权利要求，将更好地理解本发明的这些及其他特征、方面和优势。
4.缩写和术语
4.1缩写
如本文所使用的，遗传编码的L-对映体氨基酸的缩写是常规的并且如下所示：
氨基酸 单字母符号 常规缩写
丙氨酸 A Ala
精氨酸 R Arg
天门冬酰胺 N Asn
门冬氨酸 D Asp
半胱氨酸 C Cys
谷氨酰胺 Q Gln
谷氨酸 E Glu
甘氨酸 G Gly
组氨酸 H His
异亮氨酸 I Ile
亮氨酸 L Leu
赖氨酸 K Lys
蛋氨酸 M Met
苯丙氨酸 F Phe
脯氨酸 P Pro
丝氨酸 S Ser
苏氨酸 T Thr
色氨酸 W Trp
酪氨酸 Y Tyr
缬氨酸 V Val
焦谷胺酸 U pGlu(Glp)
4.2术语。
除非另外定义，否则本文所使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的技术人员通常所理解的相同含义。如本文所使用的，除非另外指定，否则以下术语具有属于它们的含义。
(i)如本文所使用的，当与数字联合使用时，术语“约”或“大约”是指在所涉及的数字的1、5、10、15或20％范围内的任何数字。
(ii)在本发明所述的方法的语境中，术语“与…联合施用”是指在疾病、病症或病况发病之前、同时和/或之后施用化合物。
(iii)术语“过敏原”是指能够产生即时型超敏应答(过敏)的抗原性物质。常见的过敏原包括，但不限于，细菌、病毒、动物寄生虫、昆虫和昆虫螫刺、化学物质(胶乳)、灰尘、尘螨、霉菌、动物皮屑、药物(如抗生素、血清、磺胺类药物、抗惊厥剂、胰岛素制剂、局部麻醉剂、碘和阿司匹林)、食物(如牛奶、巧克力、草莓、蛋类、大豆、坚果、鱼、贝类、小麦)、香料、植物、花粉和烟。
(iv)术语“过敏性疾病”是指由过敏引起或与其相关的病症或疾病。过敏性疾病包括，但不限于，哮喘、过敏性肺病、鼻炎、鼻窦炎、特应性湿疹、接触性皮炎、过敏性结膜炎(间歇性和持续性)、春季结膜炎(枯草热)、特应性角膜结膜炎、巨乳突状结膜炎、风疹(荨麻疹)、血管性水肿、过敏性肺炎、嗜酸性支气管炎、血管炎、过敏性血管炎、抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)相关的血管炎、Wegner's肉芽肿、变应性肉芽肿性血管炎(ChurgStraussvasculitis)、显微镜下多血管炎、颞动脉炎、乳糜泻、肥大细胞增多症和过敏反应。
(v)术语“过敏症状”或“过敏反应”是指身体对过敏原的应答。过敏反应可以局限在一个区域(与过敏原接触的皮肤)或遍布全身。过敏反应可以包括，但不限于，皮疹、发痒、荨麻疹、肿胀、呼吸困难、哮喘、血管性水肿、吞咽困难、鼻塞、流鼻涕、呼吸短促、恶心、胃痉挛、腹痛、呕吐和/或低血压。
(vi)术语“过敏”是指由于暴露于特定抗原(过敏原)导致对随后的暴露发生有害的免疫反应而诱发的过敏性状况。
(vii)术语“氨基酸”或对具体氨基酸的任何提及意味着包括天然存在的蛋白质性(proteogenic)氨基酸和非天然存在的氨基酸，如氨基酸类似物。本领域技术人员知道，除非另外具体指明，否则该定义包括天然存在的蛋白质性(L)-氨基酸、其光学(D)-异构体、化学修饰的氨基酸，包括氨基酸类似物，如青霉胺(3-巯基-D-缬氨酸)、天然存在的非蛋白质性氨基酸，如正亮氨酸，和具有本领域已知的氨基酸特征性质的化学合成的氨基酸。另外，术语“氨基酸等同物”是指与天然存在的氨基酸的结构不同的化合物，但其基本上具有氨基酸的结构，由此它们可以在肽内被取代，并且尽管发生取代，但所述肽仍保持其生物活性。因此，例如，氨基酸等同物可以包括具有侧链修饰或取代的氨基酸，而且也包括相关的有机酸、酰胺等。术语“氨基酸”意在包括氨基酸等同物。术语“残基”是指氨基酸和氨基酸等同物两者。如本领域惯常已知的，氨基酸也可以归入以下各组：(1)酸性的＝Asp、Glu；(2)碱性的＝Lys、Arg、His；(3)非极性(疏水性的)＝Cys、Ala、Val、Leu、Ile、Pro、Phe、Met、Trp、Gly、Tyr；和(4)不带电且极性的＝Asn、Gln、Ser、Thr。非极性氨基酸可以细分成：强疏水性的＝Ala、Val、Leu、Ile、Met、Phe；和适度疏水性的＝Gly、Pro、Cys、Tyr、Trp。作为替代方式，所有氨基酸可以分组为(1)酸性的＝Asp、Glu；(2)碱性的＝Lys、Arg、His；(3)脂肪族的＝Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Ser、Thr，其中Ser和Thr任选地可被单独分组为脂肪族-羟基的；(4)芳香族的＝Phe、Tyr、Trp；(5)酰胺＝Asp、Glu；和(6)含硫的＝Cys和Met。(参见，例如，Biochemistry,第4版,L.Stryer主编,WHFreemanandCo.,1995，该文献以其全部内容作为参考并入本文)。
(viii)如本文所使用的术语“生物试剂”是指活的生物体或源自它们的材料(如细菌、病毒、真菌和毒素)，所述生物体或材料在人、动物或植物中引起疾病或对其造成伤害，或者引起材料变质。这些生物试剂在自然界中普遍存在，且可被设计或优化用于战争或恐怖主义(生物恐怖主义)。这些生物试剂可以由朊病毒、病毒、微生物(细菌和真菌)乙基一些单细胞和多细胞的真核生物(即寄生虫)组成。具体地，所述生物试剂(在可行时，通过其通用名、生物学名称和NATO标准参考字母代码识别)可以包括，但不限于，真菌试剂(球孢子菌病(Coccidioidesmycosis)、OC、Coccidioidesposadasil、粗球孢子菌(Coccidioidesimmitis)),细菌试剂(炭疽(皮肤、吸入、胃肠道)(炭疽芽孢杆菌(Bacillusanthracis)、N和TR)、鼠疫(腺鼠疫、肺鼠疫)(鼠疫耶尔森氏菌(Yersiniapestis)、LE)、野兔热(野兔热弗朗西丝氏菌(Francisellatularensis)、UL(schuS4)、TT(湿型)、ZZ(干型)和SR和JT(425))、霍乱(霍乱弧菌(Vibriocholerae)、HO)、牛布鲁氏菌病(bovinebrucellosis，AB)、猪布鲁氏菌病(porcinebrucellosis，US和NX)、山羊布鲁氏菌病(caprinebrucellosis，AM和BX)、流产布鲁氏菌(Brucellaabortus)、马耳他布鲁氏菌(Brucellamelitenis)、猪布鲁氏菌(Brucellasuis)、细菌性痢疾(志贺氏菌病(shigellosis)、弯曲菌病(campylobacteriosis)、沙门氏菌病(salmonellosis))(Y)、鼻疽(鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderiamallei)、LA)、类鼻疽(类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderiapseudomallei)、HI)、白喉(白喉棒状杆菌(Corynebacteriumdiphtheriae)、DK)、李斯特菌病(listeriosis)(单核细胞增生李斯特菌(Listeriamonocytogenes)、TQ))、衣原体剂(鹦鹉病“鹦鹉热”(鹦鹉热衣原体(Chlamydophiliapsittici)、SI)、立克次体剂(落肌山斑疫热(立氏立克次体(Rickettsiarickettsii)、RI和UY)、Q热(贝氏柯克斯体(Coxiellaburnetti)、OU、MN(湿型)和NT(干型))、人斑疫伤寒(普氏立克次体(Rickettsiaprowazekii)、YE)、鼠斑疫伤寒(斑疫伤寒立克次体(Rickettsiatyphi)、AV))、病毒制剂(黄热病(黄病毒科虫媒病毒(Arbovirusflavivirdae)、OJ、UT和LU)、立谷热(RVF白蛉热病毒属布尼病毒科(Phlebovirusbunyaviridae)、FA)、甲病毒(例如，东方马脑炎(ZX)、西方马脑炎、委内瑞拉马脑炎(NU、TD和FX))、天花(ZL)、日本乙型脑炎(AN)、猕猴疱疹病毒1(乙型疱疹病毒)、克里米亚-刚果出血热病毒、病毒性出血热(丝状病毒科(Filoviridae)(埃博拉和马尔堡病毒)和沙粒病毒科(Arenaviridae)(拉沙和马丘波))、猴痘病毒、重构的1918流感病毒、南美出血热病毒(Flexal、瓜纳里托(Guanarito)、鸠宁(Junin)、马丘波(Machupo)、Sabia)、蜱媒脑膜脑炎(TEBV)病毒(中欧蜱媒脑炎、远东蜱媒脑炎、卡萨努森林病、鄂木斯克出血热、俄罗斯春夏病毒)、亨得拉病毒、尼帕病毒、汉坦病毒(朝鲜出血热)、非洲马瘟病毒、优化猪瘟病毒、赤羽病病毒、禽流感病毒、蓝舌病毒、骆驼痘病毒、古典猪瘟病毒、口蹄疫病毒、山羊痘病毒、结节性皮肤病病毒、恶性卡他热病毒(狷羚疱疹病毒1型)、Menangle病毒、新城疫病毒、小反刍兽疫病毒、狂犬病病毒、牛瘟病毒、绵羊痘病毒、猪水疱病病毒、水疱性口炎病毒)、毒素(肉毒杆菌毒素(梭状芽胞杆菌(Clostridium)，X和XR)、蓖麻毒素(蓖麻(Ricinuscommunis)、W和WA)、葡萄球菌肠毒素B(UC和PG)、石房蛤毒素(麻痹性贝毒)(TZ和SS)、河豚毒素(PP)、芋螺毒素、产气荚膜梭菌(clostridiumperfringens)ε毒素、tricothecene真菌毒素(T-2毒素)、志贺毒素)和simuants(molasisresidium(MR)、球芽抱杆菌(Bacillusglobigii)(BG、BS和U)、沙雷菌(Serratiamarescens)(SM和P)、烟曲霉(Aspergillusfumigatus)突变体C-2(AF)、大肠杆菌(E.coli(EC))、Bacillusthursidius(BT)、草生欧文氏菌(Erwiniaherbicola)(EH)、荧光微粒(FP))、黑麦麦角病、麻风、狂犬病、肠伤寒、产气荚膜梭菌(clostridiumperfringens)(气性坏疽)、黄曲霉毒素、鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphimurium)、肠毒素、阿根廷出血热、耐多药肺结核(MTB)、玻利维亚出血热、嗜肺性军团菌(legionellapneumophilia)、海生毒素、脚气、疟疾、糙皮病、登革热、sclerotiumrolfoil、神经营养性脑炎、志贺氏菌(Y)、SEB(UC)和真菌毒素、蛇形菌素(Diaacetoxyscirpenol)、反当动物考德里氏体(Cowdriaruminantium)、山羊支原体(Mycoplasmacapricolum)M.F38/山羊丝状支原体(M.Mycoidescapri)、丝状支原体(Mycoplasmamycoides)丝状、相思豆毒素。生物制剂可以靶向人(例如，天花、埃博拉病毒、重构的1918流感病毒、蓖麻毒素等)、动物，如家畜(例如，非洲马瘟病毒、非洲猪瘟病毒、口蹄疫病等)或两者(东方马脑炎病毒等)。此外，考虑到它们可能被重新工程化以产生更强致命性从而被用作生物武器，即使非致命性生物试剂也可能具有威胁。因此，即使造成普通感冒的病毒也可能具有风险。
(ix)如本文所使用的术语“癌症”是指任何呈现如下恶性性质的异常生长：(1)不受正常限制地生长和分裂的能力，(2)入侵并破坏邻近组织的能力，以及(3)在一些情况下，扩散到身体中其他部位的能力。癌症包括中枢神经系统、外周神经系统、胃肠道/消化系统、泌尿生殖器系统、妇科、头颈部、血液/血、肌肉骨骼/软组织、呼吸道和乳房的癌症或肿瘤病症。癌症或肿瘤病症的其他实例包括，但不限于，脑(星形细胞瘤、胶质母细胞瘤、胶质瘤(glioma))、脊髓、脑垂体、乳房(浸润性、侵袭前、炎性癌症、佩吉特病、转移性和复发性乳腺癌)、血(霍奇金氏病、白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤)、淋巴结癌、肺(腺癌、燕麦细胞、非小细胞、小细胞、鳞状细胞、间皮瘤)、皮肤(黑色素瘤、基底细胞、鳞状细胞、卡波西肉瘤)、骨癌(尤因氏瘤、骨肉瘤、软骨肉瘤)、头颈部(喉、咽(鼻腔和窦腔)和食道癌)、口腔(颌、唾液腺、咽喉、甲状腺、舌和扁桃体癌)、眼、妇科(子宫颈、子宫内膜、输卵管、卵巢、子宫、阴道和外阴)、泌尿生殖系统(膀胱、肾、阴茎、前列腺、睾丸和尿路癌)、肾上腺(皮质腺瘤、皮质癌、嗜铬细胞瘤)和胃肠道(阑尾、胆管(肝外胆管)、结肠、胆囊、胃、肠、结肠、肝、胰腺、直肠和胃癌)的那些癌症或肿瘤病症，以及下面列举的癌症或肿瘤病症：(关于这些病症的综述，参见Fishman等，1985,Medicine,第2版,J.B.LippincottCo.,Philadelphia)：白血病：急性白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性髓细胞性白血病、成髓细胞性白血病、前髓细胞性白血病、髓单核细胞性白血病、单核细胞性红白血病、慢性白血病、慢性髓细胞性(粒细胞性)白血病、慢性淋巴细胞性白血病、脾大性红细胞增多症；胃癌、淋巴瘤(恶性和非恶性)：霍奇金氏病、非霍奇金氏病、多发性骨髓瘤、Waldenstrom's巨球蛋白血症、重链病、实体瘤肉瘤和癌：纤维肉瘤、黏液肉瘤、脂肪肉瘤、软骨肉瘤、骨源性肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、内皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管内皮肉瘤、滑膜瘤、间皮瘤、尤因氏瘤、平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、鳞状细胞癌、口腔鳞状细胞癌、肝细胞癌、基底细胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳突状癌、乳突状腺癌：囊腺癌、髓样癌、支气管癌、肾细胞癌、肝癌、胆管癌、恶性合胞体瘤、精原细胞瘤、胚胎性癌、肾母细胞瘤、子宫颈癌、子宫颈腺癌、子宫癌、睾丸肿瘤、肺癌、小细胞肺癌、非小细胞肺腺癌、膀胱癌、上皮癌、胶质瘤、恶性胶质瘤、胶质母细胞瘤、多形性星形细胞胶质瘤、成神经管细胞瘤、颅咽管瘤、室管膜瘤、松果体瘤、成血管细胞瘤、听神经瘤、少突胶质细胞瘤、脑膜瘤、黑色素瘤、成神经细胞瘤或成视网膜细胞瘤。
(x)如本文所使用的术语“化学剂”是指对人或动物造成严重死亡或伤害的化学物质。当化学剂已经优化到通过武器或散布装置投递的程度时，该试剂是化学武器。一般而言，用作武器的化学剂可以根据其作用方法分类，如：血液试剂、糜烂剂、神经试剂、肺部试剂和失能剂。可行时，以下各种化学剂通过其NATO标准参考字母代码识别。
(xi)“血液试剂”是指阻止细胞使用氧气的化学剂。该类中的化学剂包括，但不限于，胂(亚当氏毒气(二苯胺氯胂)、ClarkI(二苯氯胂)、ClarkII(二苯氰化胂))和氰化物(氯化氰(CK)、氰化氢(AC)等)化合物。胂化合物引起血管内溶血，导致肾衰竭。氰化物化合物阻止细胞使用氧气，然后细胞被迫采用缺氧呼吸，从而产生过量乳酸，导致代谢性酸中毒。血液试剂的受害者可能呈现的症状包括，但不限于，头痛、眩晕、恶心、呕吐、粘膜刺激、呼吸困难、意识障碍、昏迷、惊厥、过速-和过缓-心律异常、低血压、心血管性虚脱和脸色苍白(acyanosis)。
(A)“神经试剂”是指使乙酰胆碱酯酶失活的那些化学药剂。神经递质乙酰胆碱在受害者的突触中累积，导致毒蕈碱和烟碱作用。该类中的化合物包括，但不限于，环沙林(甲氟膦酸环己酯，GF)、沙林(甲氟膦酸异丙酯，GB)、硫代沙林、索曼(甲氟磷酸叔己酯，GC)、塔崩(N,N-二甲氨基氰磷酸乙酯，GA)、VX(O-乙基-[s]-[2-二异丙基氨乙基-甲基硫代膦酸酯)、VR(N,N-二乙基-2-(甲基-(2-甲基丙氧基)磷酰基)硫基乙胺)、VE(O-乙基-S-[2-(二乙基氨基)乙基]硫代膦酸酯)、VG(O,O-二乙基-S-[2-(二乙基氨基)乙基]硫代磷酸酯)、VM(O-乙基-S-[2-(二乙基氨基)乙基]甲基硫代膦酸酯)、乙基沙林(乙氟膦酸异丙酯，GE)、EDMP(乙基-2-二异丙基氨基乙基甲基膦酸酯)、DF(甲基膦酰二氟)、诺维乔克(Novichok)剂、GV(P-[2-(二甲基氨基)乙基]-N,N-二甲基膦酰胺氟)、Gd42、Gd83、Tammelin酯、氟磷酸胆碱、磷酸硫代胆酸酯(phosphothiocholates)、DFP和杀虫剂(吩噻嗪、有机磷酸酯(dichorous、马拉硫磷、对硫磷、倍硫磷、美沙酮、对氧磷、毒死蜱、内吸磷、焦磷酸、TOCP))。神经试剂的受害者可能呈现的症状包括，但不限于，心动过缓、瞳孔缩小、唾液分泌过多、呕吐、腹泻、无意识的排尿、肌肉颤抖、初始去极化的弛缓性麻痹、棘波放电和惊厥、中间综合征、神经毒性酯酶抑制、和有机磷酸酯诱发的延迟的神经病变。
(B)“糜烂剂”是指作为成酸化合物的试剂，其损伤受害者的皮肤和呼吸系统，导致灼烧和呼吸问题。该类中的化学剂包括，但不限于，硫芥子气(1,2双(2-氯乙硫基)乙烷(倍半芥子气，Q)、l,3双(2-氯乙硫基)-正丙烧、1,4-双(2-氯乙硫基)-正丁烷、1，5-双(2-氯乙硫基)-正戊烷、2-氯乙基氯甲基硫化物、双(2-氯乙基)硫化物(HD)、双(2-氯乙硫基)甲烷、双(2-氯乙基硫甲基)醚、双(2-氯乙基硫乙基)醚、二-2'-氯乙基硫化物及其组合(HT、HL、HQ))、氮芥(双(2-氯乙基)乙胺(HN1)、双(2-氯乙基)甲胺(HN2)、三(2-氯乙基)胺(HN3)、2-氯-N-(2-氯乙基)-N-甲基乙胺-N-氧化物盐酸盐、环磷酰胺、苯丁酸氮芥、乌拉莫司汀、美法仑)、路易式毒气(2-氯乙烯基二氯胂、双(2-氯乙烯基)氯胂、三(2-氯乙烯基)胂、二氯(2-氯乙烯基)胂)、乙基二氯胂、甲基二氯胂、苯基二氯胂和光气肟(二氯甲醛肟)。糜烂剂的受害者可能呈现的症状包括，但不限于，红斑、水肿、坏死和水疱、黑皮病、气管支气管炎、支气管痉挛、支气管阻塞、出血性肺水肿、呼吸衰竭、细菌性肺炎、眼红斑、流泪、眼部不适、眼中严重疼痛、眼睑痉挛、虹膜炎、失明、恶心、呕吐、骨髓抑制、路易式毒气休克、肝坏死和低灌注继发的肾衰竭。
(D)“肺部试剂”是指与糜烂剂相似但对呼吸系统具有更显著作用并导致呼吸系统充水和受害者窒息的试剂。该类中的化学剂包括，但不限于，亚当氏毒气、丙烯醛、双(氯甲基)醚、氯气、三氯硝基甲烷、diphosphogene、氯磺酸甲酯、氯化锡、氯化氢、氮氧化物和光气。肺部试剂的受害者可能呈现的症状包括，但不限于，灼烧感(眼、鼻咽、口咽)、大量流泪、鼻溢、撕哑咳嗽、呼吸困难、吞咽痛、结膜炎、角膜损伤、鼻-口咽损伤/水肿、声门结构的炎症引起的呼吸窘迫、分泌和/或喉痉挛、急性呼吸道综合征和应答性气道功能障碍综合征。
(E)“失能剂”是指不太致命且主要通过生理或精神作用或两者使个体丧失能力的试剂。常见的一类失能剂是催泪剂，刺激眼睛引发流泪、疼痛和甚至暂时失明的化学试剂。催泪剂包括，但不限于，a-氯甲苯、苄基溴、溴丙酮(BA)、溴苄基氰(CA)、溴甲基乙基酮、辣椒素(OC)、氯乙酰苯(CN)、氯甲酸氯甲酯、二苯氧氮平类(CR)、碘乙酸乙酯、邻氯苯亚甲基丙二腈(CS)、氯甲酸三氯甲酯和甲苄基溴。其他的失能剂包括，但不限于，二苯羟乙酸-3-喹咛环酯(幻觉剂；BZ)、氢氰酸(麻痹剂)、二苯氯胂(催嚏剂；DA)、二苯氰胂(DC)、KOLOKOL-1(芬太尼衍生物)、曼陀罗、Hellborne、颠茄、天仙子(Hyoscyamusfalezlez)、吲哚(麦角酰二乙胺(LSD-25))、大麻衍生物(DMHP)、苯丙胺类、可卡因、咖啡因、尼古丁、士的宁、环戊并四唑、巴比妥酸盐(美索比妥)、阿片类物质、抗精神病剂(氟哌啶醇)、苯二氮类、芬太尼同类物、二甲-4-羟色胺磷酸、伊菠因、骆驼蓬碱、迷幻药、PCP、阿托品、东莨菪碱、奥昔布宁、盐酸奥昔布宁(ditropan)、抗胆碱能的抗组胺剂、贝那替秦和镇静剂。
许多以上提到的化学物质具有除武器用途之外的用途，并且还可在制造业内使用。因此，这些化学试剂在制造中或从化工厂意外或有意地释放将对工厂的雇员以及住在这些工厂附近的人群造成风险。有毒的工业制造化学物质的实例包括，但不限于，氨、胂、三氯化硼、三氟化硼、二硫化碳、氯、乙硼烷、环氧乙烷、氟、甲醛、溴化氢、氯化氢、氰化氢、氟化氢、硫化氢、硝酸、光气、三氯化磷、二氧化硫、硫酸、六氟化钨、丙酮氰醇、丙烯醛、丙烯腈、烯丙醇、烯丙胺、氯碳酸烯丙酯、三溴化硼、一氧化碳、羰基硫、氯丙酮、氯乙酰基腈、氯磺酸、二酮、1,2-二甲基肼、二溴乙烷、硒化氢、甲烷磺酰氯、溴甲烷、氯甲酸甲酯、甲基氯硅烷、甲基肼、异氰酸甲酯、甲硫醇、二氧化氮、磷化氢、三氯氧磷、五氟化磷、六氟化硒、四氟化硅、stiloine、三氧化硫、硫酰氯、硫酰氟、六氟化碲、正辛硫醇、四氯化钛、三氯乙酰氯、三氟乙酰氯、异硫氰酸烯丙酯、三氯化砷、溴、氯化溴、五氟化溴、三氟化溴、羰基氟、五氟化氯、三氟化氯、氯乙醛、氯乙酰氯、巴豆醛、氯化氰、硫酸二甲酯、二苯基甲烷-4,4'-二异氰酸酯、氯甲酸乙酯、氯硫代甲酸乙酯、乙基硫代膦酰二氯、乙基二氯磷酸、乙撑亚胺、六氯代环戊二烯、碘化氢、五羰基铁、氯甲酸异丁酯、氯甲酸异丙酯、异氰酸异丙酯、氯甲酸正丁酯、异氰酸正丁酯、一氧化氮、氯甲酸正丙酯、对硫磷、全氯甲硫醇、异氰酸仲丁酯、异氰酸叔丁酯、四乙基铅、焦磷酸四乙酯、四甲基铅、甲苯2,4-二异氰酸酯和甲苯2,6-二异氰酸酯。
(xi)如本文所使用的，“有效量”包括肽的量，该量足以调节任何组织损伤相关疾病或病症或其损伤、效应或症状，优选地，足以抑制、压制或缓解对组织损伤相关疾病或病症的身体应答的有害影响，包括但不限于对癌症、炎症或暴露于毒性剂的身体应答。另外，“有效量”包括肽的量，该量足以减轻、改善、减少或预防任何组织损伤相关疾病或病症，或在受组织损伤相关疾病或病症折磨的患者中提供治疗益处。
(xii)如本文所使用的，“红细胞生成活性”是指受试者中血红蛋白或血细胞比容水平的任何显著增加。“很少或没有红细胞生成活性”是指依照本领域认可的标准，受试者血红蛋白或血细胞比容增加的水平是不足以在受试者中引起有害作用的增加。“显著增加的红细胞生成活性”是指依照本领域认可的标准，受试者血红蛋白或血细胞比容水平与对照相比的差异是显著的，其可增加高血压、癫痫和血管栓塞等的可能性。
(xiii)“兴奋性组织”是指包含兴奋性细胞的组织。兴奋性细胞是对电刺激主动应答且具有跨细胞膜的电荷差的细胞。兴奋性细胞一般能够经受动作电位。这些细胞通常表达通道，如电压门控、配体门控和胁迫通道，所述通道允许离子流(钾、钠、钙、氯等)穿过膜。兴奋性组织包括神经组织、肌肉组织和腺体组织。兴奋性组织包括，但不限于，神经元组织，如外周神经系统(耳和视网膜)和中枢神经系统(脑和脊髓)组织；心血管组织，如心脏和相关神经的细胞；以及腺体组织，如胰腺，其中T型钙通道以及细胞-细胞缝隙连接参与胰岛素分泌。兴奋性组织的示例性列表包括器官和组织，其包括神经、骨骼肌、平滑肌、心肌、子宫、中枢神经系统、脊髓、脑、视网膜、嗅觉系统、听觉系统等。
(xiv)术语“造血活性”是指血细胞成分，如红细胞、淋巴细胞和骨髓细胞的任何显著增加。进一步地，造血活性是指分离的肽或肽类似物是否具有选自以下的活性：血管活性动作(例如，血管收缩)、过度激活血小板、促凝血活性和刺激血小板或红细胞生成依赖性细胞(erythropoietic-dependentcells)的增殖或产生。
(xv)如本文所使用的术语“宿主细胞”是指用核酸分子转染的特定受试者细胞以及这些细胞的子代或潜在子代。由于在随后的传代或在核酸分子向宿主细胞基因组的整合中可能发生的突变或环境影响，这些细胞的子代可能与用核酸分子转染的亲代细胞不完全相同。
(xvi)如本文所使用的术语“炎症性病况”是指具有炎症成分的多种疾病或创伤，无论是机械或化学诱发的。其包括在一个或多个器官或组织中产生炎症的病况，包括但不限于，脑、脊髓、结缔组织、心脏、肺、肾、尿路、胰腺、眼和前列腺。这些病况的非限制性实例包括，但不限于，阑尾炎、睑缘炎、支气管炎、滑囊炎、子宫颈炎、胆管炎、胆囊炎、绒毛膜羊膜炎、结膜炎、膀胱炎、泪腺炎、皮炎、心内膜炎、子宫内膜炎、上髁炎、附睾炎、纤维组织炎、胃炎、牙龈炎、舌炎、化脓性汗腺炎、虹膜炎、喉炎、乳腺炎、心肌炎、肌炎、肾炎、脐炎、卵巢炎、睾丸炎、骨炎、耳炎、腮腺炎、心包炎、腹膜炎、咽炎、胸膜炎、静脉炎、肺炎(肺炎)、前列腺炎、肾盂肾炎、鼻炎、输卵管炎、鼻窦炎、口腔炎、滑膜炎、扁桃体炎、葡萄膜炎、尿道炎、阴道炎、外阴炎、哮喘、全身性红斑狼疮、重症肌无力、腱炎、脉管炎、慢性支气管炎、胰腺炎、骨髓炎、关节炎(类风湿性和牛皮癣性)、肾小球肾炎、视神经炎、颞动脉炎、脑炎、脑膜炎、横贯性脊髓炎、皮肌炎、多肌炎、坏死性筋膜炎、肝炎、坏死性小肠结肠炎、盆腔炎、炎症性肠炎(溃疡性结肠炎、克罗恩氏病、回肠炎和小肠炎)、直肠炎、血管炎、血管狭窄、再狭窄、低血压、1型糖尿病、川崎病、Decum's病、慢性阻塞性肺病、牛皮癣、动脉粥样硬化、硬皮病、干燥综合征、混合性结缔组织病、红斑痤疮、胃溃疡、十二指肠溃疡、阿尔茨海默氏病、成人Still病(adultonsetStill’sdisease)、急性视网膜色素上皮炎、泰齐综合征(Tietze'ssyndrome)、白塞病(Bechcet'sdisease)、白点综合征(急性眼后多灶性板状色素上皮病、匍行性脉络膜炎、鸟枪弹样脉络膜视网膜病变、多灶性脉络膜炎伴全葡萄膜炎、弥漫性视网膜下纤维化综合征、点状内部脉络膜病变、多发性一过性白点综合征和弥漫性单侧亚急性视神经视网膜炎)、环状肉芽肿、肠易激综合征、肠胃炎、Grave's病、多发性硬化、掌腱膜挛缩症(Dupuytren'scontracture)、移植排斥疾病(包括同种异体移植排斥和移植物抗宿主病，例如，皮肤移植物排斥、实体器官移植排斥、骨髓移植排斥)、炎症性皮肤病、病毒性皮肤病(如源自人乳头瘤病毒、HIV或RLV感染的皮肤病)、细菌性/真菌性和/或其他寄生虫性皮肤病、皮肤红斑狼疮和高IgG4疾病。进一步的“炎症性病况”可以是指缺血性或非缺血性病况导致的炎症，包括但不限于钝性创伤、挫伤、过敏和过敏性疾病、风湿性疾病(儿童关节炎、类风湿性关节炎、Churg-Strauss综合征、纤维肌痛、巨细胞(颞)动脉炎、痛风、过敏性紫癜(Henoch-Schoenlinpurpura)、过敏性血管炎、强直性脊柱炎、囊炎、风湿热、风湿性心脏病、全身性红斑狼疮、风湿性多肌痛、骨关节炎(手、髋、膝等)、多发性结节性动脉炎、赖特综合征(Reiter'ssyndrome)、运动相关损伤(跑步膝、网球肘、肩周炎、跟腱炎、足底筋膜炎、滑囊炎、奥-施二氏病)、重复性应激损伤(累积性创伤疾病、局部肌张力障碍、腕管综合征、交叉综合征、反射性交感神经营养不良综合征、狭窄性腱鞘炎(拇长展肌腱鞘炎(DeQuervain'ssyndrome)、扳机指/扳机拇指)、胸廓出口综合征、腱炎、腱鞘炎、桡管综合征、雷诺氏病(Raynaud’sdisease)、腱鞘囊肿、游戏指(gamer'sthumb)、Wii-itis等)、感染(包括病毒性、真菌性和细菌性感染)。“炎症性病况”可以是急性或慢性的。
(xvii)“分离的”或“纯化的”肽基本不包含从中获得所述蛋白或肽的细胞或组织源的细胞材料或其他污染蛋白；或当化学合成时基本不含化学前体或其他化学物质。语言“基本不含细胞材料”包括肽制剂，其中该肽与从中分离或重组产生该肽的细胞的细胞组分相分离。因此，基本不含细胞材料的肽包括肽制剂，其具有少于约30％、20％、10％或5％(按干重计算)的异源蛋白(本文中也称作“污染蛋白”)。当重组产生肽时，所述肽还优选地基本不含培养基，即培养基占少于约20％、10％或5％的蛋白质制剂体积。当通过化学合成产生肽时，所述肽优选地基本不含化学前体或其他化学物质，即它与蛋白合成中涉及的化学前体或其他化学物质分离。因此，这些肽制剂除所关心的肽之外含有低于约30％、20％、10％、5％(按干重计算)的化学前体或化合物。在优选实施方式中，本发明的肽是分离的或纯化的。
(xviii)“分离的”核酸分子是与该核酸分子天然来源中存在的其他核酸分子分离的核酸分子。此外，“分离的”核酸分子(如cDNA分子)在通过重组技术产生时基本不含其他细胞材料或培养基，或在化学合成时基本不含化学前体或其他化学物质。在具体的实施方式中，编码本发明的肽的核酸分子是分离的或纯化的。
(xix)如本文所使用的，术语“控制”包括提供一种或多种患者从肽获得的有益副作用，在一种实施方式中，所述副作用不能逆转组织损伤相关疾病或病症的损伤、作用或症状。在某些实施方式中，向患者施用肽来“控制”组织损伤相关疾病或病症的症状，从而防止症状的进展或恶化。
(xx)术语“调节”等是指化合物增加或降低对组织损伤相关疾病或病症的身体应答的介体的功能和/或表达的能力，包括转录调节活性和/或蛋白结合。如本文所述，调节包括直接或间接地抑制、拮抗、部分拮抗、激活、激动或部分激动与介体相关的功能或特征，和/或上调或下调介体的表达。在优选的实施方式中，调节是直接的，并且更优选地，调节通过介体的抑制剂或拮抗剂发生，该抑制剂或拮抗剂是与介体结合，部分或全部阻断刺激，降低、预防、抑制、延迟激活，灭活，脱敏或下调信号转导的化合物。在本发明的方法中有用的特定肽的抑制介体功能的能力可以在生物化学测定(例如，结合测定)、基于细胞的测定(例如，瞬时转染测定)或体内测定(例如，神经元损伤、癌症、炎症或化学或辐射损伤的动物模型，如大鼠或小鼠模型)中证明。
(xxi)如本文所使用的，有关肽内结构的术语“基序”是指肽链的氨基酸序列内的一组连续的氨基酸，和/或所述肽的二级和/或三级结构内的一组线性或空间邻近的氨基酸。因为基序可能全部或部分地由蛋白折叠而形成，因此在所述基序中邻近的氨基酸可能在所述肽的线性氨基酸序列内被0个、1个或多个、5个或多个、10个或多个、15个或多个或20个或多个氨基酸隔开。
(xxii)如本文所使用的，术语“肽”、“多肽”和“蛋白”可互换使用，并且最广义地指受约束的(即具有一些结构元件，例如，存在启动β转角或β折叠的氨基酸，或者例如，通过存在的二硫键连接的Cys残基而环化)或不受约束的(例如，线性)氨基酸序列。在某些实施方式中，本发明的肽由少于30个氨基酸组成。然而，在阅读了本文公开内容后，技术人员将认识到不是特定肽的长度而是其与组织保护受体复合物结合和/或与本文描述的肽竞争结合的能力可区分出在本发明的方法中有用的肽。术语“肽”、“多肽”和“蛋白”还表示包含氨基酸等同物或其他非氨基酸基团同时仍保留肽或蛋白所期望的功能活性的化合物。肽等同物可以通过用相关的有机酸(如PABA)、氨基酸等同物等来替代一个或多个氨基酸，或通过侧链或官能团的取代或修饰而与常规的肽区别开来。
(xxiii)术语“预防组织损伤相关疾病或病症的损伤、作用或症状”是指延迟此类损伤、作用或症状的发生，阻碍其发展，阻碍其出现，防止、抑制或消除其出现或降低其发生率。术语“预防”的使用并不意味着施用了预防性疗法的患者群体中的所有患者将不再受预防所针对的组织损伤相关疾病或病症的影响或不再对其产生症状，而是患者群体在该疾病或病症的损伤、作用或症状方面呈现减轻。例如，多种流感疫苗在施用了该疫苗的人群中并非100％有效地预防流感。本领域技术人员可以容易地识别预防性疗法将使其受益的患者和情况，例如但不限于将要参与可能将其暴露于多种毒性剂或创伤的活动的个体(例如，参与军事行动的士兵、化学或食品加工工人、应急人员或第一响应者等)或可能暴露于毒性剂的个体(例如，住在化学、核或制造设备附近的个体，或者处于军事或恐怖分子袭击威胁下的个体)。
(xxiv)如本文所使用的，“预防有效量”是指肽的量，其足以引起对组织损伤相关疾病或病症导致的损伤、作用或症状的预防。预防有效量可以表示肽的量，其足以预防组织损伤相关疾病或病症导致的损伤、作用或症状。此外，关于另一种预防剂的预防有效量是指与肽组合的该预防剂的量，该量在组织损伤相关疾病或病症导致的损伤、作用或症状的预防中提供预防益处。当与肽的量结合使用时，术语“预防有效量”可以涵盖改善整体预防或增强另一种预防剂的预防功效或提供与其协同作用的量。
(xxv)术语“肿瘤”是指缺乏癌性肿瘤的恶性性质的异常生长，而且通常是良性和非进行性肿瘤。肿瘤包括，但不限于，胎块、子宫肌瘤、甲状腺腺瘤、肾上腺皮质腺瘤、垂体腺瘤和畸胎瘤。
(xxvi)如本文所使用的术语“辐射剂”是指任何可以杀死或损伤受试者而且可以用来引起城市或国家的破坏的放射性材料。对辐射剂的暴露可能通过使用武器(核弹(裂变、聚变、中子、加强裂变或盐弹)、包含贫铀的炮弹)、恐怖分子装置(“脏弹”)或者由于核武器爆炸或核电站故障而导致的放射尘而发生。放射性试剂可以包括，但不限于，137Cs、60Co、241Am、252Cf、192Ir、238Pu、90Sr、226Ra、91Sr、92Sr、95Zr、99Mo、106Ru、131Sb、132Te、139Te、140Ba、141La、144Ce、233U、235U、238U、228P、229P、230P、231P、232P、233P、234P、235P、236P、237P、238P、239P、240P、241P、242P、243P、244P、245P、246P、247P和131I。暴露于放射性试剂可以导致癌变、不育、白内障形成、放射性皮炎、β烧伤、γ烧伤、细胞损失(尤其是，骨髓、消化道细胞)、对造血、胃肠道、中枢神经、心血管、皮肤和/或生殖系统的损伤，急性辐射综合征，慢性辐射综合征和皮肤辐射综合征。急性辐射综合征一般由短时间内发生的对受试者身体的大剂量辐射所引起。该综合征具有可预期的进程，首先恶心，随后呕吐、一般疾病和疲劳、免疫系统压抑、毛发脱落、无法控制的出血(口腔、皮下、肾)、大量腹泻、谵妄、昏迷和死亡。皮肤辐射综合征是急性辐射综合征的一个亚类，是指对皮肤的辐射作用，其包括，但不限于，炎症、红斑、干性或湿性脱屑、毛发脱落、起疱、变红、溃疡、皮脂腺和汗腺损伤、萎缩、纤维化、减轻或加重的皮肤色素沉着和坏死。
(xxvii)如本文所使用的，术语“受试者”、“患者”和“受害者”可互换使用。如本文所使用的，术语“受试者”是指动物，优选地，哺乳动物，包括非灵长类动物(例如，牛、猪、马、猫、狗、大鼠和小鼠)和灵长类动物(例如，猴、猿或人)，并且更优选地，术语“受试者”是人。
(xxviii)如本文所使用的，术语“肿瘤或癌症相关综合征”是指肿瘤通过“占位效应”(肿瘤引起的对重要器官的压迫)或“功能性肿瘤”(受肿瘤影响的器官过度产生激素)直接作用导致的综合征。这些综合征包括，但不限于，Beckwith-Wiedmann综合征、SBLA综合征、Li-Fraumeni综合征、家族性腺瘤性息肉病综合征(Gardner综合征)、遗传性非息肉结肠直肠癌、Turcot综合征、Cowden综合征、CarneyTriad综合征、多发性内分泌腺瘤综合征(Wermer(MEN-1)、Sipple(MEN-2a、MEN-2b)、VonHipple-Lindau综合征、库欣综合征、爱迪生综合征、VernerMorrison综合征、Zollinger-Ellison综合征、WDHA综合征、胰性霍乱、Isaac's综合征、波纹肌肉综合征、僵人综合征、副肿瘤共济失调、Yo综合征、Tr综合征、Hu综合征、CV-2综合征、CRMP-5综合征、斜视眼阵挛/肌阵挛、Ma综合征、Morvan's纤维性舞蹈症、Bannayan-Riley-Runalcaba综合征、皮肤粘膜色素沉着肠道息肉综合征、Muir-Torre综合征、先天性巨结肠、Lynch综合征、Lambert-EatonMyastenic综合征、重症肌无力、神经性肌强直、副肿瘤小脑变性、副肿瘤性边缘叶脑炎、急性热性嗜中性皮肤病、Birt-Hogg-Dube综合征、痣样基底细胞癌综合征、广义基底样毛囊综合征、错构瘤综合征、Bazex综合征、BrookeSpiegler综合征、家族性圆柱瘤、多发性家族性毛发上皮瘤、雄激素阻断综合征、治疗相关的骨髓增生异常综合征、嗜睡综合征、海湾战争综合征和生长抑制素瘤综合征。
(xxvix)如本文所使用的，术语“组织保护活性”或“组织保护”是指抑制或延迟细胞、组织或器官的损伤或死亡的作用。除非另外指明，否则细胞、组织或器官的损伤或死亡的“延迟”是相对于不使用本发明的肽的对照条件进行评价的。组织保护活性是对表达组织保护受体复合物的组织、细胞和/或器官(即分别为应答组织细胞和/或器官)特异的，例如但不限于中枢神经系统组织。在具体的实施方式中，应答细胞不是红细胞祖细胞。
(xxx)如本文所使用的，术语“组织保护受体复合物”是指包含至少一种促红细胞生成素受体亚基和至少一个β共同受体亚基的复合物。组织保护受体复合物可以包含多个促红细胞生成素受体亚基和/或β共同受体亚基，以及其他类型的受体或蛋白。参见WO2004/096148，该专利以其全部内容作为参考并入本文。
(xxxi)如本文所使用的，术语“毒性剂”是指以上提到的生物、化学和辐射剂。
(xxxii)为了确定两段氨基酸序列的同一性百分比，对序列进行比对以实现最佳比较目的。然后，比较相应氨基酸位置上的氨基酸残基。当第一段序列中的一个位置被与第二段序列中相应位置相同的氨基酸残基占据时，那么两个分子在该位置是相同的。两段序列之间的同一性百分比是序列共有的相同位置的数目的函数(即，同一性％＝相同重叠位置数目×100/位置总数)。在一种实施方式中，两段序列是相同长度的。在一个代替的实施方式中，序列具有不同长度，并且因此同一性百分比是指较短序列与较长序列的一部分相比，其中所述部分的长度与所述较短序列相同。
(xxxiii)如本文所使用的，术语“治疗”包括消除、减少、控制或限制组织损伤相关疾病或病症或其损伤、作用或症状所导致的损伤、作用或症状。
5.附图说明
图1示出了本发明的肽在大鼠坐骨神经损伤模型中的作用。
图2示出了本发明的肽对通过在大鼠模型中皮内注射组胺引起的水肿的作用。
图3A-图3D示出了在恶病质模型中，本发明的肽对(A)重量减轻、(B)附睾脂肪、(C)肌肉量和(D)身体活动的作用。
6.发明详述
6.1分离的多肽
本发明提供了调节对组织损伤相关疾病或病症的身体应答的作用的方法。此外，本发明提供了通过施用来源于促红细胞生成素或另一种1型细胞因子的肽在受组织损伤相关疾病或病症折磨的患者中预防、治疗、改善或控制损伤、作用或症状的方法。优选地，在本方法中使用的肽是组织保护、神经保护、神经突生长或抗凋亡的。
一些来源于1型细胞因子(如EPO)的肽已经在本领域中公开，如：(a)2011年12月6日授权的美国专利8071554、2012年6月7日公开的美国专利公开No：2012-0142595、2012年10月18日公开的美国专利公开No：2012-0264682，所有专利均授予Cerami等人；(b)2011年10月27日公开的授予Cerami等人的美国专利公开No.2011-0263504；(c)Bock等人，作为WO2006/119767和WO2007/071248(“Bock”)公开的PCT专利申请No.DK2006/000246；(d)O’Brien等人，美国专利No.5,571,787、5,700,909、5,696,080、5,714,459、6,590,074、6,559,124、6,271,196、6,268,347和6,849,602(“O'Brien”)；(e)Smith-Swintowsky等人，美国专利No.7,259,146和美国专利公开No.20030130197(“Smith-Swintowsky”)和(f)Yuan等人，作为WO/2007/052154公开的PCT/IB2006/003581(“Yuan”)，这些发明中的每一个以其全部内容并入本文。
如上所述，在一种实施方式中，在患有组织损伤相关疾病或病症的受试者中对于调节对组织损伤相关疾病或病症的身体应答和/或对于预防、治疗、改善和控制损伤、作用或症状有用的肽具有基于氨基酸序列RYLLEAKEAENITTG(SEQIDNO：1)或者包含氨基酸序列RYLLEAKEAENITTG(SEQIDNO：1)的肽的基序。
本发明具有氨基酸序列RYLLEAKEAENITTG(SEQIDNO：1)的分离的肽还可以在其一端或两端或内部延伸具有额外的氨基酸残基，这些残基基本上不干扰，并且在一些实施方式中甚至增强了所述肽或肽类似物的结构和/或功能性。实际上，延伸的核心肽和肽类似物包含多达16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28或29个氨基酸残基并且被认为包括在本发明的范围内。然而，在本发明的一个方面，本发明所述的延伸的核心肽或肽类似物不具有RYLLEAKEAENITTGC(SEQIDNO：2)的氨基酸序列或者本发明所述的延伸的核心肽或肽类似物不具有SEQIDNO：1之外的EPO的氨基酸序列。
6.3融合肽
本发明还考虑了可以将两种或更多种上述的肽与相关或不相关的蛋白(如促红细胞生成素、白蛋白等)连接。可以生成这类融合肽以实现协同效益，增加肽的循环半衰期或增加肽穿透内皮屏障(如血脑屏障、血液-视网膜屏障等)的能力，或反之亦然，即实现与PCT/US01/49479(其作为WO2002/053580公开，该专利以其全部内容作为参考并入本文)中公开的类似的转运机制。
6.5肽的产生
可以使用本领域公知的重组或合成技术来制备在本发明所述的方法中有用的肽。具体地，固相蛋白合成非常适合长度相对短的肽并且可以提供更高的产率和更一致的结果。另外，固相蛋白合成就肽的产生而言可以提供额外的灵活性。例如，可以在合成阶段将希望的化学修饰引入到肽中：与赖氨酸相反，可以在肽的合成中使用高瓜氨酸，借此避免在合成后将肽氨基甲酰化的需要，或者可以在合成期间在肽上保留具有保护性官能团的氨基酸。
合成
可以使用常规的分步液相合成或固相合成法来制备在本发明的方法中有用的分离的肽和肽类似物(参见，例如，Merrifield,R.B.,1963,J.Am.Chem.Soc.85:2149-2154；ChemicalApproachestotheSynthesisofPeptidesandProteins,Williams等人主编,1997,CRCPress,BocaRatonFla.以及其中引用的参考文献；SolidPhasePeptideSynthesis:APracticalApproach,Atherton&Sheppard主编,1989,IRLPress,Oxford,England以及其中引用的参考文献)。
作为另外一种选择，可以通过片段缩合的方式来制备在本发明中有用的肽和肽类似物，如在以下文献中所述的，例如：Liu等人,1996,TetrahedronLett.37(7):933-936；Baca,等人,1995,J.Am.Chem.Soc.117:1881-1887；Tam等人,1995,Int.J.PeptideProteinRes.45:209-216；SchnolzerandKent,1992,Science256:221-225；Liu和Tam,1994,J.Am.Chem.Soc.116(10):4149-4153；Liu和Tam,1994,Proc.Natl.Acad.Sci.USA91:6584-6588；Yamashiro和Li,1988,Int.J.PeptideProteinRes.31:322-334)。这特别适合包含Gly(G)的肽。在Nakagawa等人,1985,J.Am.Chem.Soc.107:7087-7092中描述了对合成本发明所述的肽和肽类似物有用的其他方法。
重组技术
可以使用多种宿主-表达载体系统来生产肽和肽类似物。这些宿主-表达系统代表了可以通过其产生并随后纯化的所关心的肽的媒介物，其还代表了当被合适的核苷酸编码序列转化或转染时可以原位呈现修饰的促红细胞生成素基因产物的细胞。这些系统包括，但不限于，细菌、昆虫、植物、哺乳动物(包括人宿主系统)，例如但不限于被包含所述肽编码序列的重组病毒表达载体(例如，杆状病毒)感染的昆虫细胞系统；被包含促红细胞生成素相关的分子编码序列的重组病毒表达载体(例如，花椰菜花叶病毒CaMV；烟草花叶病毒TMV)感染或被包含促红细胞生成素相关的分子编码序列的重组质粒表达载体(例如，Ti质粒)转化的植物细胞系统；或含有重组表达构建体的哺乳动物细胞系统，包括人细胞系统，例如，HT1080、COS、CHO、BHK、293、3T3、PERC6，所述重组表达构建体包含来源于哺乳动物细胞基因组的启动子(例如，金属硫蛋白启动子)或来自哺乳动物病毒的启动子(例如，腺病毒晚期启动子；牛痘病毒7.5K启动子)。
另外，可以选择宿主细胞株，其调节插入序列的表达，或以希望的具体方式修饰和加工基因产物。蛋白产物的这些修饰和加工可能对蛋白功能是重要的。如本领域那些技术人员已知的，不同的宿主细胞具有特定的蛋白和基因产物的翻译后加工和修饰机制。可以选择合适的细胞系或宿主系统来确保表达的外源蛋白的正确修饰和加工。为了这个目的，可以使用真核宿主细胞，其具有的细胞体系能够适当地加工基因产物的初级转录本、糖基化和磷酸化。这些哺乳动物宿主细胞包括人宿主细胞，其包括但不限于HT1080、CHO、VERO、BHK、HeLa、COS、MDCK、293、3T3和WI38。
对于重组肽的长期、高产量制备，稳定表达是优选的。例如，可以工程化稳定表达重组组织保护细胞因子相关分子基因产物的细胞系。可以用被合适的表达控制元件控制的DNA和可选择标志物转化宿主细胞，而不使用包含病毒复制起点的表达载体，所述表达控制元件例如启动子、增强子、序列、转录终止子、多腺苷酸化位点等。引入外源DNA后，可以让工程细胞在富集培养基中生长1-2天，然后转换到选择性培养基。重组质粒中的可选择标志物赋予了选择抗性，并且允许细胞在其染色体中稳定整合质粒并生长以形成灶，其继而可以被克隆并扩增成细胞系。本方法可以有利地用来工程化表达组织保护产物的细胞系。这些工程细胞系可能在筛选和评价影响EPO相关分子基因产物的内源活性的化合物方面是特别有用的。
进一步修饰
具有额外修饰的肽也可以在本发明用于预防、治疗、改善或控制组织损伤相关疾病或病症或由此产生的损伤、作用或症状的方法中使用。例如，可以用一个或多个(D)-氨基酸合成上述结构基序的肽。在本发明的肽中包含(L)-或(D)-氨基酸的选择部分取决于肽的期望特征。例如，一个或多个(D)-氨基酸的引入可以使得肽在体外或体内的稳定性增加。一个或多个(D)-氨基酸的引入也可以增加或降低肽的结合活性，如(例如)使用本文描述的生物测定或本领域中熟知的其他方法所确定的。
用相应的对映体(D)-氨基酸序列替代全部或部分的(L)-氨基酸序列在肽链的相应部分中提供了光学异构结构。反转全部或部分的(L)-氨基酸序列的序列提供了肽的逆向-类似物(retro-analogue)。对映体(L至D或D至L)置换和序列反转的结合提供了肽的逆向-反转-类似物(retro-inverso-analogue)。本领域技术人员已知对映体肽、它们的逆向-类似物以及它们的逆向-反转-类似物维持了与其母体肽显著的拓扑关系，并且对于母体肽以及它们的逆向-反转-类似物，通常获得了特别高的相似度。这种关系和相似度可以反映在肽的生物化学性质中，特别是相应的肽和类似物与受体蛋白的高结合度。对肽的逆向-反转-类似物性质的合成已在(例如)MethodsofOrganicChemistry(Houben-Weyl),SynthesisofPeptidesandPeptidomimetics-WorkbenchEditionVolumeE22c(GoodmanM.主编)2004(GeorgeThiemeVerlagStuttgart,NewYork)和其中引用的参考文献中讨论，所述文献以其全部内容作为参考并入本文。
氨基酸“修饰”是指改变天然存在的氨基酸以产生非天然存在的氨基酸。可以通过化学合成或通过生物合成期间向肽中位点特异性地掺入非天然氨基酸来制备含有非天然存在的氨基酸的本发明所述的肽的衍生物，如ChristopherJ.Noren,SpencerJ.Anthony-Cahill,MichaelC.Griffith,PeterG.Schultz,1989Science,244:182-188中所述，该文献以其全部内容作为参考并入本文。
与治疗有用的肽结构类似的肽模拟物可以用于产生等同的治疗或预防作用。通常，拟肽与范例多肽(即具有生物化学性质或药理活性的多肽)结构类似，但具有任选地被选自下列的键取代的一个或多个肽键：-CH2-NH-、-CH2S-、-CH2-CH2-、-CH＝CH-(顺式和反式)、-COCH2-、-CH(OH)CH2-和-CH2SO-，所述取代是通过本领域已知的和在以下参考文献中进一步描述的方法进行的：Spatola,A.F.in“ChemistryandBiochemistryofAminoAcids,Peptides,andProteins,”B.Weinstein主编,MarcelDekker,NewYork,p267(1983)；Spatola,A.F.,VegaData(March1983),Vol.1.Issue3,“PeptideBackboneModifications”(一般综述)；Morely,J.S.,TrendsPharmaSci(1980)pp.463-468(一般综述)；Hudson,D.等人,(1979)IntJPeptProtRe14:177-185(-CH2-NH-、-CH2-CH2-)；Spatola,A.F.等人,(1986)LifeSci38:1243-1249(-CH2-S-)；Hann,M.M.,(1982)JChemSocPerkinTransI307-314(-CH＝CH-，顺式和反式)；Almquist,R.G.等人,(1980)JMedChem23:1392(-COCH2-)；Jennings-White,C等人,(1982)TetrahedronLett23:2533(-COCH2-)；Szelke,M等人,EuropeanAppln.EP45665(1982)CA:97:39405(1982)(-CH(OH)CH2-)；Holladay,M.W.等人,(1983)TetrahedronLett24:4401-4404(-C(OH)CH2-)；和Hruby,V.J.,(1982)LifeSci31:189-199(-CH2-S-)；以上每篇文献作为参考并入本文。
在另一种实施方式中，特别优选的非肽键是-CH2NH-。这些肽模拟物可能比肽实施方式具有显著的优势，包括(例如)更加经济的生产、更强的化学稳定性、增强的药理特性(半衰期、吸收、效力、功效等)、改变的特异性(例如，广谱生物活性)、降低的抗原性等。
肽模拟物的多种设计是可能的。例如，本发明特别考虑了其中通过非肽稳定必要构象的环肽，Lobl等人的美国专利No.5,192,746、Aversa等人的美国专利No.5,576,423、Shashoua的美国专利No.5,051,448和Gaeta等人的美国专利No.5,559,103，所有文献作为参考并入本文，其描述了产生这些化合物的多种方法。模拟肽序列的非肽化合物的合成也是本领域已知的。Eldred等人,J.Med.Chem.37:3882(1994)，该文献以其全部内容作为参考并入本文，其描述了模拟肽序列的非肽拮抗剂。Likewise,Ku等人,J.Med.Chem38:9(1995)(该文献以其全部内容作为参考并入本文)进一步说明了一系列这类化合物的合成。
合成后可以进行进一步的修饰。例如，肽可以被进一步化学修饰，即氨基甲酰化、乙酰化、琥珀酰化、胍基化、硝化、三硝基苯基化、脒基化等，所述修饰依照美国专利申请No.10/188,905(其作为20030072737-A1在2003年4月17日公开，并公开了化学修饰的EPO)和依照2003年7月1日提交的美国专利申请No.10/612,665和2000年12月29日提交的美国专利申请No.09/753,132进行，这些专利以其全部内容作为参考并入本文。
另外，肽可以由重组肽-突变蛋白(mutein)组成。公开的突变可以包括取代、缺失(包括内部缺失)、添加(包括产生融合蛋白的添加)或氨基酸序列内和/或附近的保守取代(但这导致“沉默”改变)和非保守氨基酸改变以及较大的插入和缺失，如此前在标题为“RecombinantTissueProtectiveCytokinesandEncodingNucleicAcidsThereofforProtection,Restoration,andEnhancementofResponsiveCells,Tissues,andOrgans”的PCT/US03/20964中公开的(该专利以其全部内容作为参考并入本文)。
保守或非保守的氨基酸取代可以在一个或多个氨基酸残基处发生。保守和非保守取代均可以进行。保守取代是在其侧链相关的一类氨基酸内发生的那些取代。可以将遗传编码的氨基酸分成四类：(1)酸性＝Asp(D)、Glu(G)；(2)碱性＝Lys(K)、Arg(R)、His(H)；(3)非极性(疏水性)＝Cys(C)、Ala(A)、Val(V)、Leu(L)、Ile(I)、Pro(P)、Phe(F)、Met(M)、Trp(W)、Gly(G)、Tyr(Y)；和(4)无电荷且极性的＝Asn(N)、Gln(Q)、Ser(S)、Thr(T)。非极性可以再分成：强疏水性＝Ala(A)、Val(V)、Leu(L)、Ile(I)、Met(M)、Phe(F)；和适度疏水性＝Gly(G)、Pro(P)、Cys(C)、Tyr(Y)、Trp(W)。在替代的方式中，氨基酸整体可以分为(1)酸性＝Asp(D)、Glu(G)；(2)碱性＝Lys(K)、Arg(R)、His(H)；(3)脂肪族＝Gly(G)、Ala(A)、Val(V)、Leu(L)、Ile(I)、Ser(S)、Thr(T)，其中Ser(S)和Thr(T)任选地被单独分组为脂肪族-羟基；(4)芳香族＝Phe(F)、Tyr(Y)、Trp(W)；(5)酰胺＝Asn(N)、Glu(Q)；和(6)含硫＝Cys(C)和Met(M)。(参见，例如，Biochemistry,第4版,L.Stryer主编,WHFreemanandCo.,1995，该文献以其全部内容作为参考并入本文)。
作为另外一种选择，可以通过(如)饱和突变沿肽编码序列的全部或部分随机引入突变，并且可以筛选所得突变体的生物活性以鉴别保留活性的突变体。突变后，可以重组表达所编码的肽并且可以确定所述重组肽的活性。
在另一种实施方式中，可以通过添加聚合物(如聚乙二醇)、糖或额外的蛋白(如融合构建体)对肽进行进一步修饰以力求延长肽的半衰期或增强肽的组织保护作用。在WO/04022577A3和WO/05025606A1中公开了这些修饰的实例，这些专利作为参考并入本文。例如，聚乙二醇聚合物可以与肽IC相连以生成肽IW(参见，WO/05025606A1中的SEQIDNO.298；PEG-QEQLERALNSS(本文中的SEQIDNO：3))。
根据所选的缀合化学和肽上已存在或产生出的反应位点数目，可以以可重复的方式添加一个、两个或所选数目的聚合物。PEG及其衍生物与肽连接的主要模式是通过肽氨基酸残基的非特异性键合(参见，例如，美国专利No.4,088,538、美国专利No.4,496,689、美国专利No.4,414,147、美国专利No.4,055,635和PCTWO87/00056)。PEG与肽连接的另一种模式是通过糖肽上糖基残基的非特异性氧化(参见，例如，WO94/05332)。在这些非特异性方法中，PEG以随机、非特异性方式添加到肽主链上的反应性残基上。
7.用于测试肽的测定
可以使用多种测定来确定以上提及的肽在本发明的治疗方法中使用的实用性。使用本领域已知的和在美国专利申请No.10/554,517、10/612,665和11/997,898中公开的多种测定将确认肽的组织保护活性。此外，将使用多种体外测定确认缺乏红细胞生成活性或红细胞生成活性降低的肽，如EPO依赖性细胞系(UT-7)、小鼠脾生物测定(Krystal，G.(1983)(asimplemicroassayforerythropoietinbasedon3H-thymidineincorporationintospleencellsforphenylhydrazinetreatedmice.Exp.Hematol.11,649–660))或克隆测定(Spivak,J.L.,Seiber,F.(1983).Erythropoietin.Horm.Norm.Abnorm.Hum.Tissues3,63–96)或者使用体内测定进行确定，如低氧红细胞增多小鼠测定(CotesPM,BanghamDR,Bio-assayoferythropoietininmicemadepolycythaemicbyexposuretoairatareducedpressure,Nature.1961Sep9；191:1065-7)。另外，本领域的技术人员将认识到，可以通过多种体外和体内测定确认肽预防、减轻或治疗组织损伤相关疾病或病症或由此产生的损伤、作用或症状的能力，尽管在某些实施方式中体内测定可能是优选的。
7.1组织保护测定和模型
本发明方法中使用的肽呈现组织保护特性，即抗凋亡、神经突生长、神经保护特性、抗恶病质、抗炎等。可以测试根据本发明的肽的组织保护活性，例如，保护细胞、组织或器官。可以使用体外和体内测定进一步测试保护活性。指示组织保护活性的体外测试包括(例如)细胞增殖测定、细胞分化测定或检测被组织保护受体复合物(例如组织保护细胞因子受体复合物)上调的蛋白或核酸的存在和活性，例如，核仁蛋白、脑红蛋白、细胞球蛋白或frataxin。例如，脑红蛋白可能参与促进氧气的运输或短期储存。因此，氧气运输或储存测定可以用作鉴别或筛选调节组织保护活性的化合物的测定。
脑红蛋白对缺氧或缺血产生应答而在中枢神经系统的细胞和组织中表达，并且可以提供保护以免受损伤(Sun等人2001,PNAS98:15306-15311；Schmid等人,2003,J.Biol.Chem.276:1932-1935，以上每篇文献以其全部内容作为参考并入本文)。细胞球蛋白可能在保护中起类似作用，但在多种组织中以不同水平表达(Pesce等人,2002,EMBO3:1146-1151，该文献以其全部内容作为参考并入本文)。在本发明的一种实施方式中，可以在将肽与细胞接触前后测量细胞中上调的蛋白的水平。在某些实施方式中，与组织保护活性有关的上调的蛋白在细胞中的存在可以用来确认肽的组织保护活性。
核仁蛋白可以保护细胞免于损伤。它在细胞中起到多种作用，包括调节转录过程、序列特异性RNA-结合蛋白、胞质分裂、成核、信号转导、T-细胞诱导的凋亡、染色质重构或复制。它还可以作为细胞表面受体DNA/RNA解旋酶、DNA依赖性ATP酶、蛋白穿梭、转录因子成分或转录抑制因子发挥功能(Srivastava和Pollard,1999,FASEBJ.,13:1911-1922；和Ginisty等人,1999,J.CellSci.,112:761-772，以上每篇文献以其全部内容作为参考并入本文)。
Frataxin是线粒体铁代谢中涉及的蛋白，并且此前已经显示在体内和体外均被EPO强烈上调(Sturm等人(2005)EurJClinInvest35:711，该文献以其全部内容作为参考并入本文)。
可以通过检测细胞中对应于该蛋白的mRNA水平来检测上调蛋白的表达。mRNA可以与特异性结合编码该上调蛋白的核酸的探针杂交。杂交可以包括(例如)RNA印迹、DNA印迹、阵列杂交、亲和色谱或原位杂交。
还可以使用体外神经保护测定检测本发明的肽的组织保护活性。例如，可以通过胰蛋白酶消化从新生大鼠海马制备原代神经元培养物，并且通过如本领域已知的和/或本文描述的任何方法培养，例如，在MEM-II生长培养基(Invitrogen)、20mMD-葡萄糖、2mML-谷氨酰胺、10％Nu-血清(牛；BectonDickinson,FranklinLakes,NJ)、2％B27补充剂(Invitrogen)、26.2mMNaHCO3、100U/ml青霉素和1mg/ml抗生蛋白链菌素(参见，例如，Leist等人,2004,Science305:239-242，该文献以其全部内容作为参考并入本文)。接种一天后，加入1μM胞嘧啶阿拉伯-呋喃糖苷。然后，将培养了13天的培养物用提高剂量的所关心的肽(3-3000pM)预孵育24小时。在第14天，去除培养基，并用含300μMNMDA的PBS在室温(RT)下激发培养物。5分钟后，将预处理培养基返回到培养物中，然后将该培养物返回到孵育箱中24小时。将细胞在多聚甲醛中固定，用Hoechst33342(MolecularProbes,Eugene,OR)染色，并且可以对固缩的凋亡细胞核进行计数。包含NGF(50ng/ml)和MK801(1μM)作为阳性对照。
可以使用动物模型系统来证实化合物的组织保护活性，或证实通过本发明上述筛选方法鉴别的化合物的安全性和效力。然后，可以使用动物模型测试在测定中鉴别的化合物对所关心的一类组织损伤、疾病、病况或综合征的生物活性。这些包括工程化从而包含与功能性读出系统偶联的组织保护受体复合物的动物，如转基因小鼠。
可以用来测试鉴别的化合物的细胞或组织保护活性的效力的动物模型是本领域已知的并且包括(例如)针对Lewis大鼠中急性实验性过敏性脑脊髓炎发作的保护，在接受脑创伤、脑缺血(“中风”)或由兴奋毒素刺激的癫痫后的小鼠中减弱的认知功能的恢复或保护(Brines等人，2000,PNAS,97:10295-10672,该文献以其全部内容作为参考并入本文)，针对所引起的视网膜缺血的保护(Rosenbaum等人,1997,Vis.Res.37:3443-51，该文献以其全部内容作为参考并入本文)，针对坐骨神经损伤的保护和针对心脏的缺血-再灌注损伤的保护(体外心肌细胞研究和体内缺血-再灌注损伤，参见，例如，Calvillo等人,2003,PNAS100:4802-4806和Fiordaliso等人,2005,PNAS102:2046-2051，以上每篇文献以其全部内容作为参考并入本文)。这些测定在Grasso等人(2004)MedSciMonit10:BR1-3、PCT公开no.WO02/053580或PCT申请PCT/US2006/031061中进一步详细描述，以上每篇文献以其全部内容作为参考并入本文。其中描述的体内方法针对EPO的施用，然而，已经发现代替EPO施用的组织保护蛋白也呈现类似的生物活性，例如，Leist等人(2004)Science305:239-242，该文献以其全部内容作为参考并入本文。对于测试，也可以替换肽。对于本领域技术人员来说，用于确定肽的组织保护活性的其他测定是公知的。
作为另外一种选择，可以使用细胞结合测定评价本发明的肽。例如，所关心的肽可以与生物标志物结合，如易于检测的荧光或放射标记的标志物，并测试与表达EPOR和/或βc受体的经转染的BaF3细胞的结合。在96孔板中，将所关心的肽在生长培养基(RPMI1640、10％胎牛血清、1mM丙酮酸钠、2mML-谷氨酰胺)中的8个1:2连续稀释铺板，从而使每孔中的最终体积为约100μl。可以用生长培养基(参见上文)将BaF3亲本系和用EPOR和/或βc受体转染的BaF3细胞洗涤三次，用生长培养基将细胞颗粒重悬，对细胞进行计数，并且在生长培养基中将细胞稀释到5000个细胞/100μl。然后，向每个肽稀释液中加入100μl经稀释的细胞。然后，将测定板在37℃培育箱中孵育三至四天。然后，清洗板/细胞，并在荧光酶标仪上读板，或通过其他适合的方法来检测与所关心的肽的生物活性相关的生物标志物的水平。
类似地，可以使用竞争性测定来确定肽是否是组织保护性的。在竞争性测定中，可以将已知是组织保护性的化合物与适合的生物标志物连接，所述化合物包括但不限于组织保护细胞因子，如在美国专利申请No.10/188,905和10/185,841(以上每篇专利以其全部内容作为参考并入本文)中公开的那些化合物。
在96孔板中，将已知的组织保护化合物/生物标志物在适合的生长培养基中的8个1:2连续稀释以及已知的组织保护化合物/生物标志物的相同稀释系列和过量的所关心的肽铺板。各稀释物的最终体积应为约100μl。同样地，如以上所公开的，将BaF3细胞接种到板中并进行培育。在合适的时间量后，清洗细胞，并在荧光酶标仪上读板，或通过本领域已知的任何其他合适的方法来检测生物标志物。如果包含已知的组织保护化合物/生物标志物和所关心的肽的板和/或孔的读数小于仅包含已知的组织保护化合物/生物标志物的板的读数，那么所关心的肽是组织保护性的。
到目前为止发现的多种蛋白因子，包括所有已知的细胞因子，已在一个或多个因子依赖性细胞增殖测定中呈现活性，并因此这些测定用作细胞因子活性的方便的确认手段。肽的活性可以通过一些对细胞系的常规因子依赖性细胞增殖测定中的任何一个来证实，所述细胞系无限制地包括32D、DA2、DA1G、T10、B9、B9/11、BaF3、MC9/G、M+(preBM+)、2E8、RB5、DA1、123、T1165、HT2、CTLL2、TF-l、Mo7e和CMK。这些细胞在肽的存在或缺乏下培养，并且通过(例如)测量氚化胸腺嘧啶的掺入或通过基于3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四氮唑溴(MTT)的代谢分解的比色分析(Mosman,1983,J.Immunol.Meth.65:55-63，该文献以其全部内容作为参考并入本文)来检测细胞增殖。
如果肽呈现出组织保护活性，则本领域技术人员将认识到使用本领域技术人员已知的神经保护和组织保护测定中的一种来验证结果将是有益的，所述测定例如但不限于P-19和PC-12细胞测定。另外，多种体内模型，如与脊髓损伤、缺血性中风、外周神经损伤、伤口或心脏、眼、肾等的损伤相关的动物模型将有助于进一步对肽进行表征。在美国专利申请No.10/188,905和10/185,841中公开了适合的体外和体内测定，以上每篇专利以其全部内容作为参考并入本文。
7.2对具体适应症的测定
A.毒性剂。
可以使用本领域已知的或本文描述的多种测定证明在本发明的方法中使用的分离的肽在体外或体内抑制由暴露于毒性剂所导致的损伤、作用或症状。
可以在本领域的多种体外测定中检测在本发明的方法中使用的其他肽，以确定其预防、治疗、改善或控制由暴露于毒性剂所导致的损伤、作用或症状的能力。一般而言，如下完成所述测定：选择合适的细胞系，将该细胞与所关心的毒性剂接触，用所关心的肽治疗一部分细胞，并确定在存在毒性剂的情况下以及在存在毒性剂和所关心的肽的情况下细胞的存活或应答。如果细胞在存在肽的情况下呈现出存活的改善或损伤、作用或症状的减少，则该肽可以被认为是毒性暴露的可能治疗剂。此外，本领域的技术人员将认识到可以通过在毒性剂激发前用肽处理细胞来评价肽作为保护剂的能力。
例如，对毒性剂的适合的测定包括但不限于：化学试剂：a)皮肤细胞系，如J-774(来源于小鼠巨噬细胞的细胞系)、CHO-Kl(来源于中国仓鼠卵巢细胞的上皮细胞系株)和HeLa(人子宫颈癌)(Sawyer,T.等人,Hypothermiaasanadjuncttovesicant-inducedskininjury,Eplasty2008；8:e25)；b)针对糜烂剂的角膜细胞系(Amir,A.等人,Thecornealepitheliuminsulfurmustardocularinjury-Invitroandexvivostudies,ProceedingsoftheU.S.ArmyMedicalDefenseBioscienceReview,AberdeenProvingGround,MD(2004))；c)巨噬细胞(AmirA.,等人,Sulfurmustardtoxicityinmacrophages:effectofdexamethasone,JApplToxicol,20Suppl1:S51-8(2000))；d)上呼吸道细胞系(Andrew,D.J.和C.D.Lindsay,Protectionofhumanupperrespiratorytractcelllinesagainstsulphurmustardtoxicitybygluthioneesters,HumExpToxicol17(7):387-95(1998)；Calvet等人,Airwayepithelialdamageandreleaseofinflammatorymediatorsinhumanlungparenchymaaftersulfurmustardexposure,HumExpToxicol18(2):77-81(1999)；Langford,A.M.等人,Theeffectofsulphurmustardonglutathionelevelsinratlungslicesandtheinfluenceoftreatmentwitharylthiolsandcysteineesters,HumExpToxicol15(8):619-24)；e)皮肤模型(Blaha等人,EffectsofCEESoninflammatorymediators,heatshockprotein70A,histologyandultrastructureintwoskinmodels,JApplToxicol20Suppl1:S101-8(2000)；Henemyre-Harris等人,Aninvitrowoundhealingmodeltoscreenpharmacologicalinterventionsfortheeffectivetreatmentofcutaneoussulfurmustardinjuries,ProceedingsoftheU.S.ArmyMedicalDefenseBioscienceReview,AberdeenProvingGround,MD(2004))(通常，有关适合的体外研究的其他文献，参见www.counteract.rutgers.edu/invitro.html)；辐射剂：a)内皮细胞(Abderrahmani,R.等人,Roleofplasminogenactivatorinhibitortype-1inradiation-inducedendothelialcellapoptosis,Radioprotection2008,vol43,no.5)；b)神经免疫细胞(传入神经、肠感觉神经、肥大细胞)(Wang,J.等人,Neuroimmuneinteractions:potentialtargetformitigatingortreatingintestinalradiationinjury,BritishJournalofRadiology(2007)80,S41-S48)；c)血液或淋巴细胞培养物(LloydDC等人,PhysMedBiol18(3):421-31(1973)；LloydDC等人,Mutat.Res.179(2):197-208(1987)；BlakelyWF等人,StemCells13(Suppl1):223-30(1995)；GotohE等人,Int.J.Radiation.Biol.81(1):33-40(2005))；生物试剂：(a)周围血单核细胞(Rasha,H.等人，ModelingofSEB-inducedhostgeneexpressiontocorrelateinvitrotoinvivoresponses:Microarraysforbiodefenseandenvironmentalapplications,BiosensorsandBioelectrics(2004)vol.20,no.4,719-727)。
此外，用于评价治疗剂对毒性剂暴露的作用的适合的体内试验在本领域是已知的。考虑了使用大鼠、小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、雪貂、狗和非人灵长类的动物模型，以及特别易受毒性剂影响的转基因动物(CD46小鼠)。具体地，本领域中已知的测定包括但不限于：化学试剂：(1)Reid,F.M.,Sulfurmustardinducedskinburnsinweanlingswineevaluatedclinicallyandhistopathologically,Journalofappliedtoxicology,vol.20(S1),pagesS153-S160(2001)；(2)Isidore,M.A.等人,Adorsalmodelforcutaneousvesicantinjury2-chloroethylethylsulfideusingc57bl/6mice,Cutaneousandoculartoxicology,Vol.26(3),265-276(2007)；(3)一般地，参见www.counteract.rutgers.edu/animal.html；(4)KassaJ.,等人,TheChoice:HI-6,pradoximeorObidoximeagainstNerveAgents？,www.asanlte.com/ASANews-97/Antidot-Choice.html；(5)Shih,TM等人,Organophosphorusnerveagents-inducedseizuresandefficacyofatropinesulfateasanticonvulsanttreatment,Pharmacol-Biochem-Behav.1999Sep,64(1),147-53；(6)Luo,C等人,Comparisonofoximereactivationandagingofthenerveagent-inhibitedmonkeyandhumanacetylcholinesterases,Chemico-BiologicalInteractions,175(1-3),261-266(2008)；辐射试剂：(1)W.F.Blakely等人,InVitroandAnimalModelsofPartial-BodyDoseExposure:UseofCytogenicandMolecularBiomarkersforAssesmentofInhomogeneousDoseExposuresandRadiationInjury,PB-Rad-Injury2008Workshop,May5-6,2008AFRRI,Bethesda,Maryland；(2)Augustine,A等人,MeetingReport:AnimalModelsofRadiationInjury,ProtectionandTherapy,RadiationResearch164:100-109(2005)；(3)Houchen,C等人，ProsurvivalandantiapoptoticeffectsofPGE2inradiationinjuryaremediatedbyEP2receptorinintestine,AmJPhysiolGastrointestLiverPhysiol,284:G490-G498,2003；(4)JichunChen,AnimalModelsforAcquiredBoneMarrowFailureSyndromes,ClinicalMedicine&Research3(2):102-108；生物试剂：(1)Biodefense:ResearchMethodologyandAnimalModels,JamesR.Swearengen(主编)2006CRCPress。
B.炎症
另外，可以使用炎症的多种体外模型来评价肽保护或治疗炎症对身体的损伤、症状或作用的能力。首先，可以在用肽治疗后通过使用已知方法在炎症测定中测量炎症介质的水平来确认肽调节炎症介质的能力，所述方法包括但不限于ELISA、流式细胞微珠阵列分析、高灵敏度和免疫浊度测定。例如，为确定肽是否调节TNF-α或IL-1，将进行LPS-介导的细胞因子产生的鼠模型。用所关心的肽预处理鼠模型中的一些小鼠，然后用LPS激发，而其他小鼠用盐水处理。然后收集血液，并且可以通过ELISA试剂盒(OPT-EIA小鼠TNF-α和IL-1ELISA试剂盒(BDBiosciences))来确定血液中的TNF-α和IL-I水平。如果治疗动物中的TNF-α水平低于盐水处理动物中的TNF-α水平，那么可以认为该肽调节TNF-α。优选地，测试肽调节多于一种炎症介质的能力，并且更优选地，所述介质不是TNF-α或是除TNF-α以外的介质，并且最优选地，所述介质是组胺。类似地，可以在其他体外测定中测试肽，其包括但不限于，在Lopata,AndreasL.,SpecializedinvitroDiagnosticMethodsInTheEvaluationOfHypersensitivity–AnOverview,CurrentAllergy&ClinicalImmunology,March2006,Vol.19,No.1,(组胺和类胰蛋白酶测定)和Arulmozhi等人,PharmacologicalInvestigationsofSapindustrifoliatusinvariousinvitroandinvivomodelsofinflammation,IndianJournalofPharmacology,vol.37:2,96-102(2005)(5-脂氧合酶(5-LO)、环加氧酶(COX)、白细胞三烯B4(LTB4)和一氧化氮合酶(NOS))中公开的那些测定。
此外，炎症的体内测定在评价肽作为针对毒性剂的治疗剂的实用性中是有用的。体内测定，包括但不限于鼠EAE模型、使用转基因小鼠的测定(如严重结肠炎的MDBiosciencesDSSIBD鼠模型)、炎症性肠炎的MDBioscienceTNBSIBD鼠模型、涉及美国专利No.6,437,216中公开的IL-1敲除小鼠的模型或涉及TNF-α的转基因小鼠模型，如在以下文献中所公开的：Probert等人SpontaneousinflammatorydemyelinatingdiseaseintransgenicmiceshowingCNS-specificexpressionoftumornecrosisfactorα.Proc.Natl.Acad.Sci.1995USA92,11294–11298；Kontoyiannis等人Impairedon/offregulationofTNFbiosynthesisinmicelackingTNFAU-richelements:implicationsforjointandgut-associatedimmunopathologies.Immunity10:387-398,1999；Keffer等人，Transgenicmiceexpressinghumantumournecrosisfactor:apredictivegeneticmodelofarthritis.EMBOJ.1991Dec；10(13):4025-31或使用化学或合成物激发以引起炎症的模型，如在JPET307:373-385,2003中公开的哮喘和慢性阻塞性肺病模型、在EP1777234中公开的佐剂性关节炎模型；鼠LPS休克模型、鼠LPS肺模型、急性爪炎症模型或组氨酸激发的风疹形成模型，如以下详细公开的。
此外，使用熟知的临床研究检测化合物在人中的功效，如皮肤点刺测试和支气管激发测试，如在Ravensberg等，“Validatedsafetypredictionsofairwayresponsestohousedustmitesinasthma,”ClinicalandExperimentalAllergy,37:100-107(2007)中公开；哮喘研究，如在Diamant等人，“Methodsusedinclinicaldevelopmentofnovelanti-asthmatherapies,”RespiratoryMedicine(2008)102,332-338中公开的；或鼻过敏原激发，如在Boot等人，“NasalNitricOxide:longitudinalreproducibilityandtheeffectsofanasalallergenchallengeinpatientswithallergicrhinitis,”rhinitis,”Allergy2007:62:378-384中公开的。
C.癌症。
可以使用本领域已知的或本文描述的多种测定证明在本发明的方法中使用的分离的肽在体外或体内抑制肿瘤细胞增殖、细胞转化和肿瘤发生。这些测定可以使用癌细胞系的细胞或来自患者的细胞。可以使用本领域熟知的多种测定来评价这种存活和/或生长；例如，细胞增殖可以通过测量3H-胸苷的掺入、通过直接细胞计数、通过检测已知基因(如原癌基因(例如，fos、myc))或细胞周期标志物(Rb、cdc2、细胞周期蛋白A、Dl、D2、D3或E)的转录、翻译或活性的变化来测定。可以通过本领域熟知的任何方法确定该蛋白和mRNA的水平和活性。例如，蛋白可以通过已知的免疫诊断法来定量，如使用可商购的抗体(例如，多种细胞周期标志物抗体来自SantaCruz,Inc.)的免疫印迹或免疫沉淀。mRNA可以通过本领域熟知和常规的方法定量，例如通过RNA分析、RNA酶保护、与反转录相关的聚合酶链反应等。细胞活力可以通过使用台盼蓝染色或本领域已知的其他细胞死亡或活力标志物来评价。分化可以根据形态学的改变等来目视评价。
本发明提供了通过本领域已知的多种技术进行的细胞周期和细胞增殖分析，其包括但不限于以下的技术：
作为一个实例，可以将溴脱氧尿苷(“BRDU”)的掺入用作识别增殖细胞的测定。BRDU测定通过BRDU向新合成的DNA中的掺入来鉴别经历DNA合成的细胞群体。然后，新合成的DNA可以使用抗BRDU抗体检测(参见Hoshino等人,1986,Int.J.Cancer38,369；Campana等人,1988,J.Immunol.Meth.107,79)。
细胞增殖还可以使用(3H)-胸苷的掺入来检验(参见，例如，Chen,J.,1996,Oncogene13:1395403；Jeoung,J.,1995,J.Biol.Chem.270:1836773)。该测定使得能够对S期的DNA合成进行定量表征。在该测定中，合成DNA的细胞将3H-胸苷掺入到新合成的DNA中。然后，可以通过本领域标准技术测量所述掺入，如通过闪烁计数器(例如，BeckmanLS3800液体闪烁计数器)对放射性同位素计数。
对增殖细胞核抗原(PCNA)的检测也可用于测量细胞增殖。PCNA是36千道尔顿的蛋白，其在增殖细胞，具体地在细胞周期的G1早期和S期中的表达升高，并因此该蛋白可用作增殖细胞的标志物。通过使用抗-PCNA抗体的免疫染色来鉴别阳性细胞(参见，Li等人,1996,Curr.Biol.6:189199；Vassilev等人,1995,J.CellSci.108:120515)。
可以通过随时间对细胞群体样品进行计数(例如，每日细胞计数)来测量细胞增殖。可以使用血球计数器和光学显微镜对细胞进行计数(例如，HyLite血球计数器，HausserScientific)。为了获得所关心群体的生长曲线，可以将细胞数对时间作图。在优选的实施方式中，通过本方法计数的细胞首先与染料台盼蓝(Sigma)混合，从而活细胞排除染料，并作为群体中有活力的成员进行计数。
可以(例如)基于细胞的DNA倍体值测量细胞的DNA含量和/或有丝分裂指数。例如，处在细胞周期的G1期的细胞通常含有2NDNA倍体值。其中DNA已经复制但还没有进行有丝分裂的细胞(例如，S-期中的细胞)将呈现比2N高且多至4NDNA含量的倍体值。可以使用碘化丙啶测定进一步测量倍体值和细胞周期动力学(参见，例如，Turner,T.,等人,1998,Prostate34:17581)。作为另外一种选择，DNA倍性可以通过在计算机微密度测定染色系统(参见，例如，Bacus，S.，1989,Am.J.Pathol.135:78392)中对DNA福尔根染色反应(其以化学计量方式与DNA结合)的定量来确定。在另一种实施方式中，DNA含量可以通过制备染色体分散(chromosomalspread)来分析(Zabalou,S.,1994,Hereditas.120:12740；Pardue,1994,Meth.CellBiol.44:333351)。
细胞周期蛋白(例如，CycA、CycB、CycE、CycD、cdc2、Cdk4/6、Rb、p21或p27)的表达提供了与细胞或细胞群体的增殖状态相关的关键信息。例如，抗增殖信号通路中的鉴别可以通过p21cip1的诱导来表示。p21在细胞中的表达水平的提高导致延迟进入细胞周期的G1期(Harper等人,1993,Cell75:805816；Li等人,1996,Curr.Biol.6:189199)。可以通过使用可业购的特异性抗-p21抗体(例如，来自SantaCruz,Inc.)免疫染色来鉴别p21诱导。类似地，可以通过使用可商购抗体进行的免疫印迹分析来检验细胞周期蛋白。在另一种实施方式中，在检测细胞周期蛋白前，使细胞群体同步。还可以使用抗所关心的蛋白的抗体，通过FACS(荧光激活细胞分选仪)分析检测细胞周期蛋白。
对细胞周期长度或细胞周期速度变化的检测还可以用于测量本发明的肽对细胞增殖的抑制。在一种实施方式中，通过细胞群体的倍增时间来确定细胞周期的长度(例如，使用与本发明的一种或多种肽接触或未接触的细胞)。在另一种实施方式中，使用FACS分析来分析细胞周期进展的阶段，或纯化G1、S和G2/M部分(参见，例如，Delia,D.等人,1997,Oncogene14:213747)。
可以通过本文所述的方法或通过本领域已知的任何方法来检验细胞周期检控点的失效和/或细胞周期检控点的诱导。无限制地，细胞周期检控点是确保某些细胞事件以特定顺序发生的机制。检控点基因定义为在早期事件没完成前允许晚期事件发生的突变(Weinert,T.,andHartwell,L.,1993,Genetics,134:6380)。细胞周期检控点基因的诱导或抑制可以(例如)通过免疫印迹分析或通过免疫染色等方法测定。可以通过在特定事件没发生前细胞进展通过检控点(例如，在没有完全复制基因组DNA的情况下进展到有丝分裂)来进一步评价细胞周期检控点的失效。
除了特定细胞周期蛋白表达的影响，参与细胞周期的蛋白的活性和翻译后修饰可以在细胞调节和增殖状态中发挥不可或缺的作用。本发明提供了涉及通过本领域已知的任何方法检测的翻译后修饰(例如，磷酸化)的测定。例如，检测磷酸化酪氨酸残基的抗体是可商购的，并且可以在免疫印迹分析中用于检测具有这些修饰的蛋白质。在另一个实例中，可以在薄层色谱或反相HPLC上检测修饰(如十四烷基化)(参见，例如，Glover,C.,1988,Biochem.J.250:48591；Paige,L.,1988,BiochemJ.；250:48591)。
信号和细胞周期蛋白和/或蛋白复合物的活性通常通过激酶活性来介导。本发明提供了通过测定(如组蛋白H1测定)对激酶活性的分析(参见，例如，Delia,D.等人,1997,Oncogene14:213747)。
还可以使用本领域公知的方法证明本发明的方法中使用的肽在体外培养细胞中改变细胞增殖。细胞培养模型的具体实例包括但不限于，针对肺癌的原发性大鼠肺肿瘤细胞(Swafford等人,1997,Mol.Cell.Biol.,17:13661374)和大细胞未分化癌细胞系(Mabry等人,1991,CancerCells,3:5358)；针对结肠癌的结肠直肠细胞系(ParkandGazdar,1996,J.CellBiochem.Suppl.24:131141)；针对乳腺癌的多个已建立的细胞系(Hambly等人,1997,BreastCancerRes.Treat.43:247258；Gierthy等人,1997,Chemosphere34:14951505；Prasad和Church,1997,Biochem.Biophys.Res.Commun.232:1419)；针对前列腺癌的多种充分表征的细胞模型(Webber等人,1996,Prostate,部分1,29:386394；部分2,30:5864；和部分3,30:136142；Boulikas,1997,AnticancerRes.17:14711505)；针对泌尿生殖系统癌症的连续的人膀胱癌细胞系(Ribeiro等人,1997,Int.J.Radiat.Biol.72:1120)；转移细胞癌的器官培养(Booth等人,1997,LabInvest.76:843857)和大鼠进展模型(Vet等人,1997,Biochim.BiophysActa1360:3944)；以及针对白血病和淋巴瘤的已建立的细胞系(Drexler,1994,Leuk.Res.18:919927,Tohyama,1997,Int.J.Hematol.65:309317)。
还可以证实本发明的肽体外抑制细胞转化(或进展为恶性表型)。在这一实施方式中，将具有转化的细胞表型的细胞与一种或多种本发明的肽接触，并检验与转化表型相关的特征(与体内致瘤能力相关的一组体外特征)的变化，例如但不限于软琼脂中的集落形成、更圆的细胞形态、更松的底层附着、接触抑制的丧失、贴壁依赖性的丧失、蛋白酶(如纤维蛋白溶酶原活化因子)的释放、糖运输的增加、血清需求的降低或胚胎性抗原的表达等(参见Luria等人,1978,GeneralVirology,第3版,JohnWiley&Sons,NewYork,pp.436446)。
侵袭性的丧失或附着的降低还可以用于证明本发明的方法中使用的肽的抗癌作用。例如，转移性癌症形成的关键方面是前癌细胞或癌细胞从疾病的原发位点脱离并在继发位点建立新的生长集落的能力。细胞侵袭外周位点的能力反映了癌状态的潜力。可以通过本领域已知的多种技术来测量侵袭性的丧失，包括(例如)对E-钙粘蛋白-介导的细胞-细胞附着的诱导。这种E-钙粘蛋白-介导的附着可以导致表型回复和侵袭性丧失(Hordijk等人,1997,Science278:146466)。
可以进一步通过细胞迁移的抑制来检验侵袭性的丧失。多种2-维和3-维细胞基质是可商购的(Calbiochem-NovabiochemCorp.SanDiego,Calif.)。可以通过显微镜、延时摄影或摄像或通过本领域允许测量细胞迁移的任何方法来检测细胞迁移穿越或进入基质。在相关实施方式中，通过对肝细胞生长因子(HGF)的应答来检验侵袭性的丧失。HGF-诱发的细胞分散与细胞(如Madin-Darby犬肾(MDCK)细胞)的侵袭性有关。该测定鉴别了在对HGF应答中已经丧失了细胞分散活性的细胞群体(Hordijk等人,1997,Science278:146466)。
作为另外一种选择，可以通过细胞在趋化小室(Neuroprobe/PrecisionBiochemicalsInc.Vancouver,BC)中的迁移来测量侵袭性的丧失。在该测定中，将化学引诱剂置在小室的一侧(例如，底部小室)培育，而将细胞在分隔出相反一侧(例如，顶部小室)的滤过器上铺板。为了使细胞从顶部小室移动到底部小室，细胞必须积极通过滤器的小孔迁移。然后，可以将已经迁移的细胞数目的棋盘分析与侵袭性相关联(参见，例如Ohnishi,T.,1993,Biochem.Biophys.Res.Commun.193:51825)。
还可以证实在本发明的方法中使用的肽在体内抑制肿瘤形成。本领域已知多种过度增殖病症的动物模型，包括肿瘤发生和转移性扩散(参见表317-1，第317章，"PrinciplesofNeoplasia,"inHarrison'sPrinciplesofInternalMedicine,第13版,Isselbacher等人主编,McGraw-Hill,N.Y.,p.1814和Lovejoy等人,1997,J.Pathol.181:130135)。具体实例包括：对于肺癌，肿瘤结节向大鼠中的移植(Wang等人,1997,Ann.Thorac.Surg.64:216219)或在缺失NK细胞的SCID小鼠中肺癌转移的建立(Yono和Sone,1997,GanToKagakuRyoho24:489494)；对于结肠癌，人结肠癌细胞向裸鼠中的结肠癌移植(Gutman和Fidler,1995,WorldJ.Surg.19:226234)，人溃疡性结肠炎的棉冠狨猴模型(Warren,1996,Aliment.Pharmacol.Ther.10Supp12:4547)和具有腺瘤性息肉病肿瘤抑制物突变的小鼠模型(Polakis,1997,Biochim.Biophys.Acta1332:F127F147)；对于乳腺癌，乳腺癌的转基因模型(Dankort和Muller,1996,CancerTreat.Res.83:7188；Amundadittir等人,1996,BreastCancerRes.Treat.39:119135)和大鼠中肿瘤的化学诱导(Russo和Russo,1996,BreastCancerRes.Treat.39:7-20)；对于前列腺癌，化学诱导的和转基因的啮齿动物模型和人异种移植模型(Royai等人,1996,Semin.Oncol.23:3540)；对于泌尿生殖系统癌症，大鼠和小鼠中诱导的膀胱肿瘤(Oyasu,1995,FoodChem.Toxicol33:747755)和人转移细胞癌向裸大鼠中的异种移植(Jarrett等人,1995,J.Endourol.9:17)；以及对于造血系统癌症，动物中的同种异体骨髓移植(Appelbaum,1997,Leukemia11(Suppl.4):S15S17)。此外，已经描述了可适用于多种类型癌症的一般动物模型，其包括但不限于p53-缺陷型小鼠模型(Donehower,1996,Semin.CancerBiol.7:269278)、Min小鼠(Shoemaker等人,1997,Biochem.Biophys.Acta,1332:F25F48)和大鼠中对肿瘤的免疫应答(Frey,1997,Methods,12:173188)。
例如，可以向测试动物施用在本发明的方法中使用的肽，在一种实施方式中，测试动物对发展一类肿瘤易染，并且随后与未施用本发明的肽的动物相比，检验测试动物中肿瘤形成发生率的降低。作为另外一种选择，可以向患有肿瘤的测试动物(例如，已经通过引入恶性、肿瘤性或已转化的细胞或通过施用致癌物在其中诱导了肿瘤的动物)施用本发明的肽，并随后与未施用本发明的肽的动物相比，检验测试动物中肿瘤的消退。
8.治疗性应用
A.对身体应答的介体的调节
本领域的技术人员将认识到本发明的肽可以用于调节身体对组织损伤相关疾病或病症的应答的作用。具体地，可以使用上述肽调节的介体的一个实例是炎症介体，其包括但不限于来源于血浆的炎症介体，如血管舒缓激肽、C3、C5a、因子XII、膜攻击复合物、Hageman因子、纤溶酶、凝血酶、淋巴因子(巨噬细胞活化因子(MAF)、巨噬细胞迁移抑制因子(MMIF)、巨噬细胞趋化因子(MCF)、白细胞迁移抑制因子(LMIF)、组胺释放因子(HRF)和转移因子(TF))；白细胞介素(IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、…IL-15)；肿瘤坏死因子(TNF-α(恶液质素)、TNF-β(淋巴毒素))；干扰素(IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IFN-ω、IFN-τ)；集落刺激因子(粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和多集落刺激因子(IL-3))；多肽生长因子(酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)；神经生长因子(NGF)、血小板源生长因子(PDGF)和血管内皮生长因子(VEGF))；转化生长因子(TGF-α和TGF-β)、α-趋化因子(IL-8、中性粒细胞激活蛋白2(NAP-2)、血小板因子-4(PF-4)和β-血小板球蛋白(βTG))；β-趋化因子(单核细胞趋化蛋白l(MCP-1)、MCP-3、MIP-1α、巨噬细胞炎症蛋白1β(MIP-1β)、活化调节的正常T细胞表达和假定分泌趋化因子(RANTES)和应激蛋白(热休克蛋白(HSP)、葡萄糖相关蛋白(GSP)、泛素和超氧化物歧化酶(Mn))、白血病抑制因子(LIF)、制瘤素(OSM)、睫状神经营养因子(CNTF)、血小板碱性蛋白(PBP)、溶酶体颗粒、组胺、血清素、白细胞三烯B4、一氧化氮和/或前列腺素。在优选实施方式中，肽抑制或压制介质的活性，并且更优选地抑制TNF-α、组胺、一氧化氮和白细胞介素的活性。最优选地，肽抑制两种或多种炎症介质的活性。
B.多种疾病、病症和病况的治疗或预防
本发明的组织保护肽和肽类似物作为治疗或预防多种疾病、病症和病况的治疗剂也是有用的。本领域技术人员也将认识到这些肽和肽类似物可以用于实现对组织保护受体复合物的调节，例如，组织保护细胞因子复合物。在PCT申请No.PCT/USO1/49479、美国专利申请No.10/188,905和10/185,841中公开了可以用于评价(例如)通过以上公开的本发明测定鉴别的化合物的治疗适应症的体外和体内技术。
一般地，对于以下人类疾病或病症的预防、治疗性治疗或预防性治疗来说，本发明上述的组织保护肽和肽类似物可以是有用的，所述疾病或病症：具有主要神经或精神症状的中枢神经系统或外周神经系统的疾病或病症、眼部疾病、心血管疾病、心肺疾病、呼吸疾病、肾、泌尿和生殖系统疾病、骨疾病、皮肤疾病、结缔组织疾病、胃肠疾病以及内分泌和代谢异常。使用的实例包括但不限于，保护和修复由以下组织的创伤和炎症所导致的损伤：脑(缺血性中风、钝性创伤、蛛网膜下出血)、脊髓(缺血、钝力创伤)、外周神经(坐骨神经损伤、糖尿病性神经病变、腕管综合征)、视网膜(黄斑水肿、糖尿病性视网膜病、青光眼)和心脏(心肌梗塞、慢性心力衰竭)。具体地，这些疾病、病症和病况包括缺氧状况，其不利地影响应答组织，如兴奋性组织，其包括但不限于以上4.2节(xiii)中指明的那些组织或那些应答性细胞组织或器官，表达适当的1型细胞因子受体的那些组织，例如，EPO-R受体或组织保护受体复合物。因此，本发明的组织保护肽和肽类似物可以用于治疗或预防多种状况和环境下由缺氧状况导致的对应答组织的损伤。在本文下面的表格中提供了这些状况和环境的非限制性实例。
组织保护肽和肽类似物在干细胞活性的调节中也是所关心的。已经确定呈现组织保护活性的细胞因子(例如，EPO)能够动员干细胞，刺激向损伤区域迁移并协助修复过程，例如，发挥再生作用。例如，在实验性中风中，EPO介导成神经细胞向缺血性损伤区域的迁移，从而在恢复期间再生神经元(Tsai等人,J.Neurosci(2006)26:1269-74)。作为另一个实例，EPO和氨基甲酰化EPO(CEPO)将内皮祖细胞从骨髓动员到循环中。然后，这些细胞归巢至远方区域并参与新血管的形成(关于EPO的作用，参见Bahlmann等人,2003,KidneyInt.64:1648-1652)。尽管不希望受任何具体理论的限制，据信本文公开的分离的肽和肽类似物对干细胞迁移具有类似作用。
在使用本发明的组织保护肽和肽类似物可治疗和可预防的神经元组织病理保护的实例中，这些病理包括由神经元组织的氧合作用降低导致的那些病理。可以使用本发明的组织保护肽和肽类似物治疗任何降低神经元组织的氧气可用性，导致应激、损伤和最终神经元细胞死亡的状况。这些状况一般被称作缺氧和/或缺血，其产生于或包括，但不限于，中风、血管闭塞、出生前或出生后缺氧、窒息、气哽、溺水、一氧化碳中毒、烟雾吸入、创伤，包括手术和放疗、窒息、癫痫、低血糖、慢性阻塞性肺病、肺气肿、成人呼吸窘迫综合征、低血压休克、败血性休克、过敏性休克、胰岛素休克、镰形细胞危象、心脏停搏、节律异常、氮麻醉、血氧不足性缺氧(高原病、高原肺水肿、高原脑水肿、睡眠呼吸暂停、呼吸不足、呼吸停止、分流)、高铁血红蛋白血症、组织中毒性缺氧、宫内缺氧和心肺旁路过程引起的神经功能缺损。
在一种实施方式中，例如，使用上述测定鉴别的本发明的组织保护肽和肽类似物可以在手术程序或医学程序之前、期间或之后，单独或作为组合物的一部分施用，以预防伤害或组织损伤风险导致的伤害或组织损伤。例如，手术程序可以包括肿瘤切除或动脉瘤修复，而医学程序可以包括分娩或接生。使用本发明的组织保护肽和肽类似物可治疗的由低血糖引起或导致的其他病理包括胰岛素过量(也称作医源性高胰岛素血症)、胰岛素瘤、生长激素缺乏、肾上腺皮质功能减退、药物过量和某些肿瘤。
由可兴奋神经组织损伤导致的其他病理包括癫痫病症，如癫痫、惊厥或慢性癫痫病症。其他可治疗的病况和疾病包括但不限于如下疾病，例如中风、多发性硬化、低血压、心脏停搏、慢性心力衰竭、阿尔茨海默氏病、帕金森氏症、脑瘫、脑或脊髓创伤、AIDS痴呆、年龄相关的认知功能丧失、记忆丧失、肌萎缩性侧索硬化症、癫痫病症、酒精中毒、视网膜缺血、青光眼导致的视神经损伤和神经元缺失。
本发明的具体的组织保护肽和肽类似物可以用于治疗或预防疾病状况或多种创伤导致的炎症，如物理或化学引起的炎症。还考虑了将组织保护肽和肽类似物用于治疗和预防一种或多种器官或组织中的炎症状况，所述器官或组织包括，但不限于，脑、脊髓、结缔组织、心脏、肺、肾和尿道、胰腺、眼和前列腺。这些创伤的非限制性实例包括，但不限于，第4.2节(xvi)中列举的那些。此外，组织保护肽可以用于治疗或预防缺血性和非缺血性病况导致的炎症，其包括但不限于，过敏、过敏性疾病、过敏症状、风湿性疾病、运动相关损伤、暴露于毒性剂、感染(包括病毒性、真菌性和细菌性)，在以上4.2节(iv)、(v)和(xvi)中公开了这些病况的其他实例。炎症可以是急性或慢性的。在2004年9月29日提交的PCT/US2004/031789(其作为WO2005/032467公开)内记录了炎症领域中的其他应用。
本发明具体的组织保护肽和肽类似物可以用于治疗脱髓鞘或髓鞘损害导致的中枢神经和外周神经系统疾病。这些疾病定义为主要包括起源未知的炎症性髓鞘病变，但髓鞘形成缺乏疾病，如脑白质营养不良和明显起因引起的疾病除外。多发性硬化(MS)是脱髓鞘疾病中的典型疾病，并且病理上其特征为改变，主要为炎症性脱髓鞘和神经胶质增生的变化。由于其病因未知，其诊断是基于其临床特征做出的，即中枢神经系统病况的空间多样性和随时间多样性。此外，脱髓鞘疾病包括急性播散性脑脊髓炎(ADEM)、炎症性弥漫性硬化、急性和亚急性坏死性出血性脑脊髓炎和横贯性脊髓炎。另外，外周神经组织依赖Schwann细胞来维持髓鞘，如果这些细胞被损害，则引起外周脱髓鞘疾病。
本发明的组织保护肽和肽类似物可以用于治疗或预防心脏的状况和损伤，其包括任何涉及心脏和/或相关组织(例如，心包、主动脉和其他相关血管)的慢性或急性病理事件，包括缺血-再灌注损伤；充血性心力衰竭；心脏停搏；心肌梗塞；动脉粥样硬化、二尖瓣漏、心房扑动、化合物，如药物(例如，多柔比星、赫赛汀、硫利达嗪和西沙必利)引起的心脏中毒；寄生性感染引起的心脏损伤(细菌、真菌、立克次体和病毒，例如，梅毒、慢性克氏锥虫(Trypanosomacruzi)感染)；暴发性心脏淀粉样变性；心脏手术；心脏移植；血管成形术、腹腔镜手术、创伤性心脏损伤(例如，穿透性或钝性心脏损伤和主动脉瓣膜破裂)、胸主动脉瘤的手术修复；肾上腺主动脉瘤；心肌梗塞或心力衰竭引起的心源性休克；神经源性休克和过敏反应。本发明的组织保护肽和肽类似物也可以用于治疗有心脏病，如心力衰竭(即，心脏不能够以代谢组织需要的速率泵血，或心脏仅在具有提高的充盈压时可以这样做)风险的那些个体。这些有风险的患者将包括患有心肌梗塞、冠心病、心肌炎、化疗、心肌病、高血压、瓣膜心脏疾病(最常见的是二尖瓣关闭不全和主动脉瓣狭窄)和毒素引起的心肌病(例如，乙醇、可卡因等)等或存在患这些疾病风险的患者。
本发明的组织保护肽和肽类似物可以用于治疗或预防眼，例如视网膜组织的病况和损伤。这些病症包括，但不限于，视网膜缺血、黄斑变性、视网膜脱离、视网膜色素变性、动脉硬化性视网膜病变、高血压性视网膜病变、视网膜动脉阻塞、视网膜静脉阻塞、视网膜水肿、低血压和糖尿病视网膜病变。
在另一种实施方式中，本发明的组织保护肽和肽类似物和本发明的原理可以用于预防或治疗暴露于毒性剂导致的损伤，即应答组织的辐射或化学损伤。在本发明的一种实施方式中，上述肽作为治疗剂是有用的，以调节身体对毒性剂应答的介体，优选地压制或抑制这些介体的活性。另外，上述肽作为治疗剂是有用的，以治疗、预防、改善或控制暴露于毒性剂的损伤、作用或症状。所述肽可以用于治疗对多种毒性剂的暴露，包括生物试剂、化学试剂或辐射剂。
这些肽可以用于治疗生物试剂引起的损伤、作用或症状，所述生物试剂如朊病毒、病毒、微生物(细菌和真菌)和一些单细胞和多细胞真核生物(即寄生物)，其包括但不限于以上第4.2节(viii)中列举的那些生物毒素。此外，本发明的肽可以用于预防、治疗、改善或控制化学试剂引起的损伤、作用或症状。这些试剂包括，但不限于，血液试剂、糜烂剂、神经剂、肺部试剂和失能剂。另外，本发明的肽可以用于预防、治疗、改善或控制对工业化学品的毒性暴露引起的损伤、作用或症状，所述工业化学品包括但不限于第4.2节(x)中所列举的那些。暴露于辐射剂所引起的损伤、作用或症状是使用本发明的肽可预防、可治疗或可控制的。所述肽可以预防、治疗、改善或控制放射性试剂引起的损伤、作用或症状，所述放射性试剂包括α、β或γ幅射，并且更具体地可以包括，但不限于，137Cs、60Co、241Am、252Cf、192Ir、238Pu、90Sr、226Ra、91Sr、92Sr、95Zr、99Mo、106Ru、131Sb、132Te、139Te、140Ba、141La、144Ce、233U、235U、238U、228P、229P、230P、231P、232P、233P、234P、235P、236P、237P、238P、239P、240P、241P、242P、243P、244P、245P、246P、247P和131I。此外，本领域的技术人员将认识到所述肽还可以用于预防、介导、治疗或改善由于这些毒性剂的累积或协同使用(即在散布生物试剂前使用放射性试剂使得受害者将对生物试剂更敏感；将糜烂剂与神经试剂结合施用以防止受害者有效地寻求庇护或帮助；用生物或放射性试剂污染子弹或榴霰弹以抑制愈合进程或令其复杂化等)所引起的损伤、作用或症状。优选地，本发明的肽将能够治疗、调节、改善或预防对(例如)以下两种或多种细胞、器官或组织中的几种不同类型的细胞、器官或组织的有毒作用，所述细胞、器官或组织：中枢神经、外周神经、眼、心血管、心肺、呼吸道、肾、泌尿、生殖、肌肉骨骼、皮肤、结缔组织、胃肠道、造血、内分泌和代谢。此外，本发明的肽作为治疗剂或预防剂对同一种类中的超过一种毒性剂(即针对多于一种类型的化学、生物或放射性试剂-例如，针对糜烂剂和神经试剂的预防剂)或不同种类的毒性剂(即对于暴露于放射性试剂和化学剂的治疗剂)将是有效的。本发明的组织保护肽和肽类似物的其他用途在于中毒的治疗，如神经毒素中毒(例如，软骨藻酸贝类中毒)、毒素(乙醇、可卡因等)、由于化疗剂的辐射暴露；羽扇豆中毒(neurolathyrism)；关岛病；肌萎缩性侧索硬化症；和帕金森氏症。
如上所述，本发明还提供了通过外周施用上述组织保护肽在哺乳动物中用于提高应答细胞、组织和器官的组织功能的本发明的组织保护肽和肽类似物。多种疾病和病况适于使用该方法治疗。例如，甚至在不存在任何状况或疾病时，该方法对于提高可兴奋组织的功能，从而导致认知功能增强是有用的。此外，组织保护细胞因子对于改善伤口愈合的质量、减少愈合需要的时间、改善愈合组织的质量和降低伤口造成的粘着的发生率是有用的。参见2004年9月29日提交的PCT/US2004/031789，其作为WO2005/032467公开。此外，本发明的组织保护肽可以在治疗、预防或控制化学剂引起的皮肤上或沿呼吸道的损害中是有用的，所述化学剂如发疱剂或糜烂剂或工业化学物质。
在下文中进一步详细描述了本发明的肽的这些应用，并且其包括在人和非人哺乳动物两者中学习和训练的提高。
在另一种实施方式中，本发明的组织保护肽和肽类似物通常可以用于预防、治疗性治疗、预防性治疗或控制以下系统的多种癌症或肿瘤病症：中枢神经系统、外周神经系统、胃肠道/消化系统、泌尿生殖系统、肾上腺、妇科、头颈部、造血/血液、肌肉骨骼/软组织、呼吸道和乳房。所述使用的实例包括，但不限于，保护防止和修复4.2节(ix)和(xxv)中列举的癌症或肿瘤病症导致的损伤。此外，本发明的肽可以用于预防、治疗性治疗、预防性治疗或控制肿瘤或癌症相关的多种综合征，其包括但不限于以上第4.2节(xxviii)中列举的那些综合征。可以依照本发明的方法使用肽来解决上述综合征。例如，可以施用肽通过延迟疾病的肿瘤方面的发作、降低综合征相关的肿瘤生长的数目或总体上增强受这些状况折磨的患者的生活质量或寿命来解决遗传性综合征，如LiFraumeni、遗传性非息肉结肠直肠癌、家族性腺瘤性息肉病和VonHippel-Lindau综合征。还可以预防性地施用肽以解决与肿瘤病症或癌症的某些治疗、化疗或放疗相关的综合征，如雄激素阻断综合征、疗法相关的骨髓增生异常综合征或嗜睡综合征，从而希望预防综合征或降低综合征的严重程度。
此外，可以使用肽来治疗或预防恶病质和恶病质相关的疾病。这些疾病包括但不限于，癌症恶病质、厌食症、无力、贫血、肺结核、AIDS、充血性心力衰竭、肾衰竭、肝功能衰竭、慢性阻塞性肺病、肺气肿、肌肉萎缩、糖尿病和内毒素血症。
使用本发明提供的组织保护肽和肽类似物可治疗或可预防的中枢神经系统状况和疾病，其包括但不限于，情感性精神障碍、焦虑症、抑郁症、孤独症、注意力缺乏多动症和认知功能障碍。这些病况受益于神经元功能的增强。其他依照本发明的教导可治疗的病症包括睡眠破坏，例如，睡眠呼吸暂停和旅行相关病症；蛛网膜下和动脉瘤出血、低血压休克、震荡伤、败血性休克、过敏性休克和多种脑炎和脑膜炎的后遗症，例如，结缔组织疾病相关的脑炎，如狼疮。其他使用包括预防或保护免于神经毒素中毒，如软骨藻酸贝类中毒、羽扇豆中毒(neurolathyrism)和关岛病、肌萎缩性侧索硬化症、帕金森氏症；栓性或缺血性损伤的手术后治疗；全脑辐射；镰形细胞危象；和子痫。
使用本发明的组织保护肽和肽类似物可治疗或可预防的其他病况组包括线粒体功能障碍，无论是遗传性的还是获得性的，它是多种神经性疾病的起因，典型代表为神经元损伤和死亡。例如，Leigh病(亚急性坏死性脑病)的特征在于神经元脱落引起的进行性视力丧失和脑病以及肌病。在这些情况下，缺陷型线粒体代谢不能提供足够高能量的底物来为可兴奋细胞的代谢提供能量。组织保护肽或肽类似物优化了多种线粒体疾病中的失败功能。如上所述，缺氧状况有害地影响可兴奋组织。可兴奋组织包括，但不限于，神经元组织，如外周神经系统(耳和视网膜)和中枢神经系统(脑和脊髓)组织；心血管组织，如心脏和相关神经的细胞；以及腺体组织，如胰腺，其中T型钙通道以及细胞-细胞缝隙连接参与胰岛素分泌。可兴奋组织的示例性列表包括，但不限于，器官和组织，其包括神经、骨骼肌、平滑肌、心肌、子宫、中枢神经系统、脊髓、脑、视网膜、嗅觉系统和听觉系统。除上述状况外，本发明的组织保护肽和肽类似物可用于吸入中毒的治疗，如一氧化碳和烟雾吸入、严重哮喘、成人呼吸窘迫综合征以及气哽和溺水。造成缺氧状况或通过其他方式引起应答组织(如可兴奋组织)损伤的其他状况包括低血糖，其可能由胰岛素的不适当剂量施用或伴随产生胰岛素的肿瘤(胰岛素瘤)而发生。
多种描述为来源于可兴奋组织损伤的神经心理学病症是可使用本发明的组织保护肽和肽类似物可治疗的。涉及神经元损伤并且本发明可治疗或可预防的慢性病症包括中枢神经系统和/或外周神经系统相关病症，其包括年龄相关的认知功能丧失和老年痴呆症、慢性癫痫病症、阿尔茨海默氏病、帕金森氏症、痴呆、记忆丧失、肌萎缩性侧索硬化症、多发性硬化、结节性硬化症、威尔森氏病、脑性和进行性核上性麻痹、关岛病、路易体痴呆、朊病毒病，如海绵状脑病，例如克-雅氏病，亨廷顿舞蹈症、强直性肌营养不良、Freidrich's共济失调和其他共济失调以及抽动秽语综合征、癫痫病症，如癫痫和慢性癫痫病症、中风、脑或脊髓损伤、AIDS痴呆、酒精中毒、孤独症、视网膜缺血、青光眼、自主神经功能障碍，如高血压和睡眠障碍，和神经精神病症，其包括，但不限于，精神分裂症、分裂情感障碍、注意力缺乏症、恶劣心境障碍、严重抑郁症、躁狂症、强迫症、精神活性物质使用障碍、焦虑、惊恐障碍以及单相和双相情感障碍。其他神经精神和神经退行性病症包括(例如)在美国精神病学会的精神疾病诊断与统计手册(DSM)中列举的那些。
使用本发明的组织保护肽和肽类似物可治疗或可预防的另一组病况包括肾疾病，如急性和慢性肾衰竭。对肾的血液供给可以由于一些原因被切断，包括侵入血流的感染(败血症)引起的休克、内部或外部出血、由于严重腹泻或烧伤所造成的体液损失、对输血的应答、心脏停搏或心律失常、外科手术损伤和肾移植。上述病况导致的血液向肾流动的减少可能将血流量降低到危险低水平一段时间，其足以引起急性肾衰竭的形成。降低的血流量还导致肾脏中的坏死或组织死亡，从而损伤肾小管细胞。肾衰竭还可以由疾病(间质性和糖尿病性)肾病综合征、感染、损伤(CPB-引起的)、毒素(造影剂引起的、化疗引起的、环孢霉素)、自体免疫性炎症(例如，狼疮、红细胞增多等)导致。本发明的组织保护肽和肽类似物帮助修复或防止该损伤，从而有助于改善急性肾功能衰竭。此外，本发明的肽可以用于治疗、预防或改善尿路的疾病或病症，其包括，但不限于，尿路感染、刺激性膀胱和对膀胱的创伤或辐射损伤。
关于适于上述组织保护肽和肽类似物治疗的多种状况和疾病，下表列举了其他示例性的非限制性适应症。
表I
适于组织保护肽和肽类似物治疗的疾病和病症
如上所述，这些疾病、病症或病况仅是本发明的组织保护肽和肽类似物提供的益处范围的说明。因此，本发明一般地提供了对机械性创伤或人类疾病的后果的防止性、治疗性或预防性治疗。考虑了对CNS和/或外周神经系统的疾病、病症或病况的预防或者治疗性或预防性治疗。提供了对具有精神成分的疾病、病症或病况的预防或者治疗性或预防性治疗。提供了对疾病、病症或病况的预防或者治疗性或预防性治疗，其包括，但不限于，具有眼、心血管、心肺、呼吸道、肾、尿路、生殖、胃肠、内分泌或代谢成分的那些疾病、病症或病况。肽可以用于在一个或多个(优选地，至少两个)器官或组织中防止、治疗性治疗、预防性治疗或控制组织损伤相关的疾病或病症及其损伤、作用或症状，所述器官或组织包括，但不限于，脑、脊髓、结缔组织、皮肤、胃肠道、生殖器官、肝、心脏、肺、肾、尿路、胰腺、眼和前列腺。
在某些实施方式中，本发明的方法可以排除用于特定适应症的本发明的肽。例如，在本发明的方法中可以将根据结构基序C的肽(如2011年10月27日公开的授予Cerami等人的美国专利公开No.2011-0263504中所述)排除在WO2006/119767和WO2007/071248中公开的适应症之外，所述适应症包括：手术后神经损伤；创伤性神经损伤；脊髓损伤、神经纤维损害的髓鞘形成；缺血后损伤；中风；帕金森氏症；阿尔茨海默氏病；亨廷顿舞蹈症；精神分裂症、痴呆；多发性硬化、多梗塞性痴呆；糖尿病相关的神经变性；神经肌肉变性、影响生物钟或神经肌肉连接的病症；器官移植；遗传性或创伤性肌肉萎缩病症；性腺、胰腺、肾、心脏、肝和肠的退行性状况；I或II型糖尿病；肾病；精神病；神经症性障碍；人格障碍；性别偏差和障碍；智力低下；神经系统和感觉器官的疾病；认知异常；中枢神经系统的炎症性疾病；大脑变性；短期或长期记忆刺激；锥体外系疾病和异常运动障碍；运动神经元疾病；脊髓疾病；自主神经系统病症、外周神经系统疾病；神经病变；影响眼中多个结构的病症；耳朵疾病和乳突；新生儿中器官和软组织异常；在分娩和接生中施用麻醉剂或其他镇静剂的并发症；皮肤的疾病和损伤；神经和脊髓的损伤；药物中毒；医药和生物物质；代谢病症；内分泌腺病症；嘌呤和嘧啶代谢病症；骨病症；肿瘤；癌症；脑的病毒性感染；格林-巴利综合征；疼痛综合征；孤独症和学习能力的刺激。另外，例如，在本发明的方法中可以将根据结构基序D的肽(如2011年10月27日公开的授予Cerami等人的美国专利公开No.2011-0263504中所述，该专利作为参考并入本文)排除在美国专利No.5,571,787、5,700,909、5,696,080、5,714,459、6,590,074、6,559,124、6,271,196、6,268,347和6,849,602中公开的适应症之外，所述适应症包括：神经瘤引起的神经性疼痛(截肢、神经横断)、神经压迫(嵌压性神经病变或肿瘤压迫)、神经创伤(压伤、拉伸或不完全横断)；糖尿病；辐射、缺血、血管炎、脊髓灰质炎后综合征、酒精、淀粉样蛋白、毒素、HIV、甲状腺机能减退、尿毒症、维生素缺乏、化疗、ddC(扎西他滨)、Fabry's病、压迫(盘、肿瘤、疤痕组织)、根性撕脱、炎症(疱疹后神经痛)、脊髓挫伤、脊髓肿瘤、脊髓半切除和脑干、丘脑或皮层的梗塞、肿瘤或创伤；和脱髓鞘疾病，包括多发性硬化、急性播散性脑白质炎、进行性多灶性脑白质炎、异染性脑白质营养不良和肾上腺性脑白质营养不良。对于另一个实例，在本发明的方法中可以将根据结构基序E的肽(如2011年10月27日公开的授予Cerami等人的美国专利公开No.2011-0263504中所述，该专利作为参考并入本文)排除在美国专利No.7,259,146和美国专利公开No.20030130197中公开的适应症之外，所述适应症包括：急性神经退行性病症：脑缺血或梗塞，包括栓性闭塞和血栓性闭塞；急性缺血后的再灌注；围产期缺氧-缺血性损伤；心脏停搏；颅内出血；颅内和脊柱内损害；和震荡摇晃婴儿综合征；慢性神经退行性病症：阿尔茨海默氏病、皮克氏病、弥散性路易体病、进行性核上性麻痹、多系统变性、慢性癫痫状况、运动神经元疾病、朊病毒病、外周疾病(包括EPO缺乏)相关的神经和精神表现、失血、肾衰竭、终末期肾病、肾移植和贫血相关的其他疾病，包括血液和非血液恶性病/肿瘤、化疗和其他药物相关的并发症、血液病症、炎症性和感染性病症、慢性全身性自体免疫性疾病、过敏性紫癜、溶血性尿毒症综合征、神经系统的化学、毒性、感染性和辐射损伤，和脑病；神经丛病变；神经病变；腓骨肌萎缩症；Friedreich's共济失调；异染性脑白质营养不良；Refsum's病；肾上腺脊髓神经病变；共济失调-毛细管扩张；Djerine-Sottas神经病变；Lambert-Eaton综合征；和颅神经障碍。作为其他实例，在本发明的方法中可以将根据结构基序F的肽(如2011年10月27日公开的授予Cerami等人的美国专利公开No.2011-0263504中所述，该专利作为参考并入本文)排除在W0/2007/052154中公开的适应症之外，所述适应症包括：免疫介导炎症；自体免疫性疾病，包括桥本甲状腺炎、胰岛素依赖性糖尿病、全身性红斑狼疮；脱髓鞘疾病，包括多发性硬化、横贯性脊髓炎、Guillain-Barre综合征和进行性多灶性脑白质病以及有机磷酸酯暴露导致的脱髓鞘；关节炎；急性脑血管损伤；急性脊髓损伤；急性脑损伤；急性心血管损伤；中风；创伤性损伤；移植排斥；和移植物排斥。
C.疾病、病症或病况的损伤、作用或症状的预防、治疗、改善或控制
在本发明的其他实施方式中，本发明的治疗方法对于预防、治疗、改善或控制上述疾病和病症的损伤、作用或症状是有用的。具体地，本治疗方法可以用于解决症状，其包括，但不限于，恶病质、癌变、绝育、白内障形成、放射性皮炎、β烧伤、γ烧伤、细胞丧失(尤其是，骨髓、消化道细胞)、造血、胃肠、中枢神经、心血管、皮肤和/或生殖系统的损伤、急性辐射综合征(恶心感、呕吐、一般疾病和疲劳、免疫系统压抑、毛发脱落、无法控制的出血(口腔、皮下、肾)、大量腹泻、谵妄、昏迷和死亡)、慢性辐射综合征、皮肤辐射综合征(炎症、红斑、干性或湿性脱屑、毛发脱落、起疱、变红、溃疡、皮脂腺和汗腺损伤、萎缩、纤维化、减轻或加重的皮肤色素沉着和坏死)、头痛、眩晕、恶心、呕吐、粘膜刺激、呼吸困难、意识障碍、昏迷、惊厥、过速-和过缓-节律异常、低血压、心血管性虚脱、脸色苍白(acyanosis)、心动过缓、瞳孔缩小、唾液分泌过多、腹泻、无意识排尿、肌肉颤抖、初始去极化的弛缓性麻痹、棘波放电和惊厥、中间综合征、神经毒性酯酶抑制、有机磷酸酯引起的延迟的神经病变、红斑、水肿、坏死和水疱、黑皮病、气管支气管炎、支气管痉挛、支气管阻塞、出血性肺水肿、呼吸衰竭、细菌性肺炎、眼红斑、流泪、眼部不适、眼部严重疼痛、眼睑痉挛、虹膜炎、失明、骨髓抑制、路易式毒气休克、肝坏死、灌注不足继发的肾衰竭、灼烧感(眼、鼻咽、口咽)、大量流泪、鼻溢、撕哑咳嗽、呼吸困难、吞咽痛、结膜炎、角膜损伤、鼻-口咽损伤/水肿、声门结构炎症、分泌和/或喉痉挛引起的呼吸困难、急性呼吸道综合征、定向障碍、行为改变和应答性气道功能障碍综合征。
如上所述，这些组织损伤相关疾病或病症或由此产生的损伤、作用或症状仅是在本发明的方法中使用的肽可解决的病症范围的说明。因此，本发明通常提供了组织损伤相关疾病或病症或由此产生的损伤、效应或症状的防止性、治疗性或预防性治疗。
可以通过施用有效量的本发明的肽来治疗或预防组织损伤相关疾病或病症或由此产生的损伤、作用或症状。在某些实施方式中，本发明提供了治疗或预防本文所述的疾病或病症的方法，其包括向患有所述疾病或病症的受试者施用能有效治疗或预防所述疾病或病症的量的本发明的肽的步骤。在一种实施方式中，施用包含有效量的一种或多种本发明的肽或其药物可用的盐的组合物。
D.为了累积或协同作用，与其他治疗剂组合治疗
在某些实施方式中，本发明涵盖了用于治疗、调节、改善或预防组织损伤相关疾病或病症或由此产生的损伤、作用或症状的方法，其包括向对其有需要的患者施用有效量的肽和另一种适合的治疗剂，其分别根据适合于药物的方案施用。可以进行该方法来实现肽和治疗剂的作用的加成、协同或抵消(抵消治疗剂的副作用)益处。这包括肽和适合的治疗剂的同时、基本同时或不同时施用。肽和适合的治疗剂的不同时施用包括肽和适合的治疗剂的顺序、交替和急性及慢性施用。另外，肽和适合的治疗剂可以在相同或单独的药物组合物中施用，并且如果单独施用，它们可以通过相同的施用途径或不同的途径施用。适合的治疗方法和试剂可以包括，但不限于，氨基甲酸酯(吡啶斯的明、毒扁豆碱、氨基斯的明、新斯的明、普鲁斯的明、依斯的明、茂巴、一甲呋喃丹(decarbofuran))、抗胆碱能剂(苯海索、贝那替秦、双环哌丙醇、东莨菪碱、阿普罗芬、阿托品、东莨菪碱、阿地芬宁、卡拉美芬、五甲铵、美卡拉明、苯海索)PANPAL、氨基苯酚(毒扁豆酚碱)、有机磷酸酯(TEPP、Paraxon、乙基-4-硝基苯基磷酸酯)、他克林、7-MEO-TA、石杉碱甲、胆碱脂酶(BuChE、AChE、三酯酶、对氧磷酶)、肟/重活化剂(HI-6、PAM、双复磷、双解磷、甲肟、Hlo-7、BI-6、K048、K033、氯解磷定(2-PAMCl)、P2S、TMB4、2-PAMI)、苏拉明、苯二氮类、筒箭毒碱、美金刚、丙环定、尼莫地平、可乐定、解磷定、地西泮、脑啡肽、苯甲磺酰氟、碳酸氢钠、维生素E类似物(α-生育酚琥珀酸酯、γ-生育三烯酚)、超氧化物歧化酶/过氧化氢酶模拟物(EUK189)、硒、苄基苯乙烯基砜、截短的鞭毛蛋白、他汀类、染料木黄酮、加兰他敏、低温、5-雄烯二醇、CpG-寡聚脱氧核苷酸、抗菌剂、干细胞移植、氨磷汀、坦波尔(Tempol)、异黄酮、苄砜类似物、GM-CSF、G-CSF、碘化钾、氢氧化铝、普鲁士蓝、螯合剂(二乙烯三胺五乙酸(Ca-DTPA)、二乙烯三胺五乙酸锌(Zn-DTPA))、角质细胞生长因子、肠肽激素、β葡聚糖、奥曲肽、己酮可可碱、血管紧张素转化酶抑制剂、血管紧张素II受体阻滞剂、高铁血红蛋白形成剂(亚硝酸异戊酯、亚硝酸钠)、硫代硫酸钠、钴化合物(羟钴胺素(维生素B12a))、类毒素、抗毒素、疫苗、被动抗体、化疗剂(包括但不限于，甲氨蝶呤、紫杉醇、巯基嘌呤、硫鸟嘌呤、羟基脲、阿糖胞苷、环磷酰胺、异环磷酰胺、亚硝基脲、顺铂、卡铂、丝裂霉素、达卡巴嗪、丙卡巴肼、依托泊苷、喜树碱、博来霉素、多柔比星、伊达比星、柔红霉素、放线菌素D、普卡霉素、米托蒽醌、门冬酰胺酶、长春碱、长春新碱、长春瑞滨、紫杉醇和多西紫杉醇)；辐射：γ-辐射；烷化剂；氮芥：环磷酰胺、异环磷酰胺曲磷胺、苯丁酸氮芥；亚硝基脲：卡莫司汀(BCNU)、洛莫司汀(CCNU)、烷基磺酸白消安、曲奥舒凡；三氮烯：达卡巴嗪；含铂化合物：顺铂、卡铂、植物生物碱；长春花生物碱：长春新碱、长春碱、长春地辛、长春瑞滨；紫杉烷：紫杉醇、多西紫杉醇；DNA拓扑异构酶抑制剂表鬼臼酯：依托泊苷、替尼泊苷、拓扑替康、9-氨基喜树碱伊立替康(Campto.RTM.)、克立那托；丝裂霉素：丝裂霉素C；抗代谢物剂、抗叶酸剂：DHFR抑制剂：甲氨蝶呤、三甲曲沙；IMP脱氢酶抑制剂：麦考酚酸、噻唑呋林、利巴韦林EICAR；核糖核苷酸还原酶抑制剂：羟基脲；去铁胺；嘧啶类似物：尿嘧啶类似物、5-氟尿嘧啶、氮尿苷、去氧氟尿苷、雷替曲塞；胞嘧啶类似物：阿糖胞苷(araC)、胞嘧啶阿拉伯糖苷氟达拉滨；嘌呤类似物：巯基嘌呤、硫鸟嘌呤；激素治疗；受体拮抗剂：抗雌激素、他莫昔芬、雷洛昔芬甲地孕酮；LHRH激动剂：戈舍瑞林、醋酸亮脯利特；抗-雄激素：氟他胺、比卡鲁胺；类视黄醇/Deltoids维生素D3类似物：EB1089、CB1093、KH1060；光动力学治疗：维替泊芬(BPD-MA)、酞菁光敏剂、Pc4去甲氧基-竹红菌素A(2BA-2-DMHA)；细胞因子：干扰素-α、干扰素-γ、肿瘤坏死因子；异戊二烯化抑制剂：洛伐他汀；多巴胺能神经毒素：1-甲基-4-苯基吡啶盐离子；细胞周期抑制剂：星孢菌素；放线菌素：放线菌素D、放线菌素D；博来霉素：博来霉素A2、博来霉素B2、培洛霉素；蒽环类：柔红霉素、多柔比星(阿霉素)、伊达比星、表柔比星、吡柔比星、佐柔比星、米托蒽醌；MDR抑制剂：维拉帕米；Ca2+ATP酶抑制剂：毒胡萝卜素；TNF-α抑制剂/沙利度胺血管生成抑制剂3-(3,4-二甲氧基-苯基)-3-(1-氧-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-丙酰胺(SelCIDs)、ImiDs、Revlimid、Actimid。在本发明的另一个方面，根据本发明的药物组合物可以在制剂中包含肽以及至少一种呈现组织保护功能的小分子。适合的小分子包括，但不限于，类固醇(例如，拉扎洛依和糖皮质激素)、抗氧化剂(例如，辅酶Q10、α硫辛酸和NADH)、抗分解代谢的酶(例如，谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、合成催化清除剂以及模拟物)、吲哚衍生物(例如，吲哚胺、咔唑和咔啉)、硝酸中和剂、腺苷/腺苷激动剂、植物化学成分(黄酮类)、草药提取物(银杏(Glnkobiloba)和姜黄)、维生素(维生素A、E和C)、氧化酶电子受体抑制剂(例如，黄嘌呤氧化酶电子抑制剂)、矿物质(例如，铜、锌和镁)、非类固醇抗炎症药物(例如，阿司匹林、萘普生和布洛芬)及其组合。可以与本药物组合物结合使用的其他药剂包括，但不限于，抗炎药(例如，皮质类固醇、泼尼松和氢化可的松)、糖皮质激素、类固醇、非类固醇抗炎药(例如，阿司匹林、布洛芬、双氯芬酸和COX-2抑制剂)、β-激动剂、抗胆碱剂和甲基黄嘌呤)、免疫调节剂(例如，小有机分子、T细胞受体调节剂、细胞因子受体调节剂、T-细胞消耗剂、细胞因子拮抗剂、单核因子拮抗剂、淋巴细胞抑制剂或抗癌剂)、金注射剂、柳氮磺胺吡啶、青霉胺、抗血管生成剂(例如，血管生成抑制因子)、TNF-α拮抗剂(例如，抗-TNFα抗体)和内皮抑制素)、氨苯砜、补骨脂素(例如，甲氧沙林和三甲沙林)、抗疟剂(例如，羟基氯喹)、抗病毒剂、抗组胺剂和抗生素(例如，红霉素和青霉素)。
在其他实施方式中，用于治疗、调节、改善或预防组织损伤相关疾病或病症或由此产生的损伤、作用或症状的本发明的方法还包括与诸如以下的治疗方法结合施用肽：化疗、放疗(X-射线辐射、高能兆伏级(大于1MeV能量的辐射)、电子束、中电压X-射线辐射、发射γ-射线的放射性同位素(镭、钴和其他元素的放射性同位素))、高压舱、心脏旁路机、血管成形术、低温、手术、血管成形术等，以实现肽和治疗方法作用的加成、协同或抵消(抵消治疗方法的副作用)益处。举例来说，在具体的实施方式中，可以向经历手术作为癌症治疗并同时接受化疗或放疗的患者施用肽。在另一具体实施方式中，在施用肽之前或之后施用化疗剂或放疗疗法，优选地在至少1小时、5小时、12小时、1天、1周、1个月，更优选地，几个月(例如，多至3个月)之前或之后。另外，本发明提供了用肽作为化疗或放疗的替代来治疗癌症或肿瘤疾病的方法，其中化疗或放疗已证明或可证明毒性过大，例如，对正在治疗的患者造成不可接受或不可承受的副作用。作为另外一种选择，本发明提供了治疗方法，其中在用化疗或放疗进行治疗之前、同时或之后施用肽以力求预防或改善治疗方法的毒性副作用。如实施例2中证明的，根据本方法施用的肽能够改善已知化疗剂顺铂的副作用。尽管上述实施例涉及癌症的治疗，但是应理解肽可以与本领域用于治疗组织损伤相关疾病或病症和由此产生的损伤、作用或症状(包括炎症和暴露于毒性剂)的其他方法结合施用以实现协同、加成或抵消结果。
E.肽的制剂和施用
在一种实施方式中，本发明的方法提出可将包含肽的药物组合物全身施用以保护或治疗靶向的细胞、组织或器官。这种施用可以是肠胃外、通过吸入或经粘膜的施用，例如，口服、含服、鼻、直肠、阴道内、舌下、经眼、粘膜下或经皮施用。优选地，施用是肠胃外的，例如，通过静脉内或腹腔内注射，并且还包括，但不限于，动脉内、肌内、皮内和皮下施用。
对于其他施用途径，如通过使用灌注液、注射入器官或其他局部施用，将提供产生上述类似的肽水平的药物组合物。约15pM-30nM的水平是优选的。
本发明的药物组合物可以包含治疗有效量的化合物和可药用载体。在具体的实施方式中，术语“药物可用的”是指已被联邦或州政府的管理机构批准，或者在美国药典或其他普遍认可的外国药典中列举的用于动物，并且更具体地用于人的。术语“载体”是指与治疗剂一同施用的稀释剂、佐剂、赋形剂或媒介物。这些药物载体可以是无菌液体，如水中的盐溶液和油，其包括石油、动物、植物或合成来源的那些，如花生油、豆油、矿物油、芝麻油等。当静脉内施用药物组合物时，盐溶液是优选的载体。盐溶液以及葡萄糖和甘油水溶液也可以用作液体载体，具体地用于可注射溶液。适合的药物赋形剂包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、大米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石、氯化钠、脱脂奶粉、甘油、丙二醇、水、乙醇等。如果需要，所述组合物还可以含有少量的湿润剂或乳化剂或pH缓冲剂。这些组合物可以采用溶液、混悬液、乳液、片剂、丸剂、胶囊、粉末、缓释制剂等形式。可以将所述组合物与常规的粘结剂和如甘油三酯的载体一起配制为栓剂。可以将本发明所述的化合物配制为中性或盐的形成。药物可用的盐包括与自由氨基所形成的那些，如来源于盐酸、磷酸、醋酸、草酸、酒石酸等的那些，以及与自由羧基所形成的那些，如来源于钠、钾、铵、钙、氢氧化铁、异丙胺、三乙胺、2-乙胺基乙醇、组氨酸、普鲁卡因等的那些。在E.W.Martin的“Remington'sPharmaceuticalSciences”中描述了适合的药物载体的实例，该文献以其全部内容作为参考并入本文。这些组合物将含有治疗有效量的所述化合物(优选地为纯化形式)以及适合的量的载体，从而提供适合对患者施用的形式。制剂应适合施用形式。
本发明还考虑了提高肽(例如，长效肽)的经粘膜吸收的制剂。适合于口服施用的药物组合物可以作为以下形式提供：胶囊或片剂；粉剂或颗粒剂；溶液、糖浆或混悬液(在水或非水液体中)；可食用泡沫或搅成泡沫状；或乳液。片剂或硬明胶胶囊可以包含乳糖、淀粉或其衍生物、硬脂酸镁、糖精钠、纤维素、碳酸镁、硬脂酸或其盐。软明胶胶囊可以包含植物油、蜡、脂肪、半固体或液体的多元醇等。溶液和糖浆可以包含水、多元醇和糖。
可以用延迟活性剂在胃肠道中崩解和/或吸收的材料(例如，可以使用单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯)对设计用于口服施用的活性剂进行包衣或与之混合。因此，可以实现活性剂在数小时内的缓释，并且如有必要，可以保护活性剂在胃内不被分解。可以配制用于口服施用的药物组合物以有利于活性剂由于特定的pH或酶条件而在特定胃肠位置释放。
适合于经皮施用的药物组合物可以作为离散型贴片提供，其旨在使药物组合物在持续的一段时间与受体表皮保持紧密接触。适合于局部施用的药物组合物可以作为软膏剂、乳膏剂、混悬液、洗剂、粉剂、溶液、糊剂、凝胶剂、喷雾剂、气溶胶或油剂提供。对于向皮肤、口腔、眼或其他外部组织的局部施用，局部软膏剂或乳膏剂是优选使用的。当以软膏剂配制时，可以将所述活性成分与石蜡或水可混溶的软膏基质一起使用。作为另外一种选择，可以将所述活性成分配制成具有水包油乳膏基质或油包水乳膏基质的乳膏剂。适合于对眼局部施用的药物组合物包括滴眼剂。在这些组合物中，可以将活性成分溶解或悬浮在适合的载体(例如，水溶剂)中。适合于在口腔中局部施用的药物组合物包括糖锭剂、含锭剂和漱口剂。
适合于鼻和肺施用的药物组合物可以包括固体载体，如粉剂(优选地，具有范围在20至500微米内的颗粒尺寸)。粉剂可以用鼻嗅的方式施用，即由置于鼻附近的粉末容器经由鼻快速吸入。作为另外一种选择，适合鼻施用的组合物可以包括液体载体，例如，鼻喷雾剂或滴鼻剂。作为另外一种选择，化合物向肺中的直接吸入可以通过深吸或由咬嘴进入咽部的装置来实现。这些组合物可以包括活性成分的水或油溶液。通过吸入施用的组合物可以使用专门适配的装置提供，其包括，但不限于，加压气溶胶、喷雾器或吹入器，其可以构建成提供预定剂量的活性成分。在优选的实施方式中，将本发明的药物组合物直接施用至鼻腔或通过鼻腔或口咽施用至肺。
适合于直肠施用的药物组合物可以作为栓剂或灌肠剂提供。适合于阴道施用的药物组合物可以作为阴道栓剂、卫生棉塞、乳膏剂、凝胶剂、糊剂、泡沫或喷雾制剂提供。
适合于肠胃外施用的药物组合物包括水性和非水性无菌可注射溶液或混悬液，其可以包含抗氧化剂、缓冲液、抑菌剂和溶质，其使得组合物与预期受体的血液基本等渗。可以存在于这些组合物中的其他成分包括(例如)水、醇、多元醇、甘油和植物油。适合于肠胃外施用的组合物可以存在于单位剂量或多剂量容器中，例如，密封的安瓿和小瓶，并且可以冷冻干燥(冻干)状态储存，其仅要求在使用前立即加入无菌液体载体，例如，注射用无菌盐水溶液。临时注射溶液和混悬液可以由无菌粉剂、颗粒剂和片剂制备。在一种实施方式中，可以提供包含肽的可注射溶液的自动注射器以供救护车、急诊室和战场环境的紧急使用，并且甚至供在居家环境中自我施用，特别是在可能发生创伤性截肢的可能性时，例如，由于割草机的不慎使用。通过在最快时间向断落部分的多个位点施用肽，甚至在医疗人员抵达现场或在带有断趾的遭受痛苦的个体到达急诊室前施用肽，可以增加断足或断趾中的细胞和组织在重新连接后存活的可能性。
在优选的实施方式中，可以根据常规程序将所述组合物配制成适合于静脉内施用于人的药物组合物。通常，用于静脉内施用的组合物是无菌等渗缓冲水溶液中的溶液。必要时，所述组合物还可以包含增溶剂和局部麻醉剂(如利多卡因)以减轻注射位点的疼痛。通常，将成分分开或混合在一起在单位剂量形式中提供，例如，作为干燥的冻干粉或无水浓缩物在气密容器(如指示活性剂的量的安瓿或小袋)中提供。当组合物通过输注施用时，它可以用含有无菌医药级水或盐水的输液瓶配制。当组合物通过注射施用时，可以提供一安瓿无菌盐水，以便成分可以在施用前混合。
栓剂通常包含范围在按重量计0.5％至10％的活性成分；口服制剂优选地包含10％到95％的活性成分。
可以提供灌注液组合物以用于原位灌注。这些药物组合物可以包含不适合对个体急性或慢性、局部或全身施用的肽的水平或肽的形式，但将作为器官浴、器官灌注液或原位灌流液发挥本文所期望的功能，之后在将经处理的器官或组织暴露于或返回常规循环前去除或降低其中包含的肽的水平。
本发明还提供了包含装填了一种或多种本发明的药物组合物的成分的一个或多个容器的药物包或试剂盒。以管理药物或生物制品的生产、使用或销售的政府部门所规定的形式的报告书可以任选地与该容器相关，该报告书反映了用于人施用的生产、使用或销售部门的批准。
在另一种实施方式中，例如，可以在控释系统中递送肽。例如，可以使用静脉输注、可植入渗透泵、透皮贴剂、脂质体或其他施用方式施用肽。在一种实施方式中，可以使用泵(参见Langer,同上；Sefton,1987,CRCCrit.Ref.Biomed.Eng.14:201；Buchwald等人,1980,Surgery88:507；Saudek等人,1989,N.Engl.J.Med.321:574，以上每篇文献以其全部内容作为参考并入本文)。在另一种实施方式中，所述化合物可以在小囊(具体地，脂质体)中递送(参见Langer,Science249:1527-1533(1990)；Treat等人,inLiposomesintheTherapyofInfectiousDiseaseandCancer,Lopez-BeresteinandFidler(主编),Liss,NewYork,pp.353-365(1989)；WO91/04014；美国专利No.4,704,355；Lopez-Berestein,同上,pp.317-327；一般地参见以上参考文献)。在另一种实施方式中，可以使用聚合物材料(参见MedicalApplicationsofControlledRelease,LangerandWise(主编),CRCPress:BocaRaton,Florida,1974；ControlledDrugBioavailability,DrugProductDesignandPerformance,SmolenandBall(主编),Wiley:NewYork(1984)；RangerandPeppas,J.Macromol.Sci.Rev.Macromol.Chem.23:61,1953；还参见Levy等人,1985,Science228:190；During等人,1989,Ann.Neurol.25:351；Howard等人,1989,J.Neurosurg.71:105，(以上每篇文献以其全部内容作为参考并入本文)。
在另一种实施方式中，缓释系统可以放置在治疗靶点(即靶向的细胞、组织或器官)的附近，因此仅需要全身剂量的一部分(参见，例如，Goodson,pp.115-138inMedicalApplicationsofControlledRelease,vol.2,同上,1984，该文献以其全部内容作为参考并入本文)。在Langer的综述(1990,Science249:1527-1533，该文献通过参考被完整并入本文)中讨论了其他缓释系统。
在另一种实施方式中，可以通过鼻、含服、口服、直肠、阴道、经眼、经皮、肠胃外、吸入或舌下施用来施用经适当配制的肽。
在具体的实施方式中，可以期望对需要治疗的区域局部施用本发明的肽；这可以通过例如，但不限于以下方式实现：手术期间的局部输注、局部施用(例如，与手术后伤口敷料结合)、通过注射、借由导管、借由栓剂或借由植入物，所述植入物是多孔的、无孔的或凝胶状的材料，包括膜，如硅胶膜或纤维。这些实施方式的非限制性实例可以是被植入血管、导管等的一部分中的本发明的肽涂覆的支架或其他骨架。
基于对一些因素的考虑，对于技术人员来说，优选的有效剂量的选择将是易于可确定的，这对于本领域的技术人员将是已知的。这些因素包括肽的特殊形式及其药代动力学参数，如生物利用度、代谢、半衰期等，它们将在获得药物化合物的监管审批中通常使用的常规开发程序期间确立。考虑剂量的其他因素包括：待治疗的病况或疾病或在正常个体中待实现的益处、患者的体重、施用途径、施用是急性的还是慢性的、同时的用药和其他熟知的将影响药剂施用效力的因素。因此，精确的剂量应根据从业医师的判断和每位患者的情况决定，例如，根据个体患者的状况和免疫状态并且根据标准临床技术。
在本发明的另一方面，提供了用于移植器官的灌注和储存的灌注液或灌流溶液，所述灌流溶液包括有效保护应答细胞和相关细胞、组织或器官的一定量的肽或肽类似物。移植包括但不限于：同种异体移植，其中从供体获取器官(包括细胞、组织或其他身体部分)，并将其移植到不同的受体中，供体和受体是相同物种的；自体移植，其中从身体的一部分取出器官并在另一部分进行替换，包括离体手术程序，其中可以移走器官，且在离体时对其进行切除、修复或者以其他方式处理(如肿瘤移除)，然后将该器官返回到原始位置；或异种移植，其中在物种之间移植组织或器官。在一种实施方式中，灌流溶液是威斯康星大学(UW)溶液(美国专利No.4,798,824，该文献以其全部内容作为参考并入本文)，其包含5％羟乙基淀粉(具有约200,000至约300,000的分子量并且基本不含乙二醇、氯乙醇、氯化钠和丙酮)；25mMKH2PO4；3mM谷胱甘肽；5mM腺苷；10mM葡萄糖；10mMHEPES缓冲液；5mM葡萄糖酸镁；1.5mMCaCl2；105mM葡萄糖酸钠；200,000单位青霉素；40单位胰岛素；16mg地塞米松；12mg酚红；并且具有7.4-7.5的pH值和约320mOsm/l的渗透压，并补充了适当量的本发明的肽。该特定灌注液仅是可通过包含有效量的肽而适合本发明用途的一些此类溶液的示例。在其他实施方式中，灌注液溶液包含约1至约500ng/ml的肽，或约40至约320ng/ml的肽。如上所述，任何形式的肽都可以在本发明的这个方面中使用。
尽管对于本发明的总体目的而言，优选的肽受体是人，但本文中的方法同等地适用于其他哺乳动物，具体地，驯化的动物、家畜、伙伴和动物园动物。但是，本发明不是如此限制的，其益处可以应用于任何哺乳动物。
在离体发明的其他方面，可以使用任何肽，例如但不限于如上所述的那些。
在本发明的另一个方面，提供了用于在没有通过内皮细胞屏障与血管分离的细胞、组织或器官中预防、治疗或控制组织损伤相关疾病或病症或由此产生的损伤、作用或症状的方法和组合物，其通过将所述细胞、组织或器官直接暴露于包含肽的药物组合物，或向组织或器官的血管施用或令其接触包含肽的药物组合物来实现。
与其他基于促红细胞生成素的组织保护化合物类似，本发明的肽有可能可以从腔面输送到具有内皮细胞紧密连接的器官毛细血管的内皮细胞的基底膜表面，包括(例如)脑、视网膜和睾丸。因此，可以治疗组织损伤相关疾病或病症或由此产生的损伤、作用或症状对穿越屏障的细胞的作用。尽管不希望受任何具体理论限制，转胞作用后，肽可以与细胞上的组织保护受体相互作用，例如，神经元、眼(例如，视网膜)、脂肪、结缔组织、毛发、牙齿、粘膜、胰腺、内分泌、耳、上皮、皮肤、肌肉、心脏、肺、肝、肾、小肠、肾上腺(例如，肾上腺皮质、肾上腺髓质)、毛细血管、内皮、睾丸、卵巢、干细胞或子宫内膜细胞，并且受体结合可以启动信号转导级联，从而导致应答细胞或组织内的基因表达程序的激活，导致保护细胞或组织或器官免受损害，如由于暴露于毒性剂、炎症、缺氧等造成的损害。在另一实施方式中，根据PCT申请No.PCT/US01/49479、美国专利申请No.10/188,905和10/185,841的教导(以上专利作为参考并入本文)，肽可以与能够穿过屏障的化合物(如CEPO)交联从而输送穿越屏障。
因此，在本文以下部分详细描述了用于保护组织免于组织损伤相关疾病或病症或由此产生的损伤、作用或症状的方法。
在本发明的一种实施方式的实践中，哺乳动物患者经历了针对癌症治疗(包括放疗)的全身化疗，所述治疗通常具有副作用，如神经、肺、心脏、卵巢或睾丸损伤。包含上述组织保护肽或肽类似物的药物组合物的施用是在化疗和/或放疗之前和期间进行的，以保护多个组织和器官免受化疗剂损伤，从而保护睾丸。治疗可以持续，直到化疗剂的循环水平已经降至低于对哺乳动物身体具有潜在危险的水平。
在本发明的另一种实施方式的实践中，计划从汽车事故的受害者中获得多个器官用于移植到多个受体中，其中一些需要运输一段距离和时间段。在获取器官前，用包含本文所述的组织保护肽和肽类似物的药物组合物输注供体。用包含如本文所述的组织保护肽或肽类似物的灌注液灌注获取的供运输的器官，并将其储存在包含组织保护肽或肽类似物的浴中。用脉动灌注装置并使用包含根据本发明的组织保护肽和肽类似物的灌注液连续灌注某些器官。在运输期间并且在植入及器官原位再灌注时发生器官功能的最小破坏。
在本发明的另一种实施方式中，在将个体暴露于毒性剂的危险活动中的参与者可以服用一个剂量的药物组合物，所述药物组合物包含的肽足以预防(即延迟其发作、抑制或停止)、保护或缓和暴露于毒性剂的作用。具体地，这种治疗方法可以在多种涉及与毒性剂接触的职业中具有应用，如矿工、化学制造商、军事人员(士兵、伞兵)、应急人员(警察、消防员、EMS和灾难救援人员)、建筑工人、食品加工者和动力反应堆的雇员。
在本发明的另一种实施方式中，修复心脏瓣膜的手术程序需要暂时的心脏停搏和动脉闭塞。在手术前，将组织保护肽或肽类似物输注到患者中。这种治疗预防了缺氧缺血性细胞损伤，特别是在再灌注后。另外，可以预防性地使用根据本发明所述的药物组合物以使个体为手术作好准备，力求限制手术程序相关的创伤或帮助个体从手术程序中恢复。尽管使用包含了组织保护肽和肽类似物的药物组合物的本治疗方法为手术程序提供了预防使用，但是其在引起暂时缺血性事件的程序中可能是特别有用的，所述事件包括，但不限于，旁路程序(冠状动脉旁路手术)、血管成形术程序、截肢和移植以及直接对应答细胞、组织或器官进行的那些程序，如脑和脊髓手术和心脏开放程序。这些程序可能涉及心肺(心脏、肺)旁路的使用。
在本发明的另一种实施方式中，在任何手术程序，如心肺旁路手术中，可以使用本发明的组织保护肽或肽类似物。在一种实施方式中，如上所述的包含组织保护肽和肽类似物的药物组合物的施用在旁路程序之前、期间和/或之后进行，以保护脑、心脏和其他器官的功能。
在其中将肽用于离体应用或体内应用以治疗组织损伤相关疾病或病症或由此产生的损伤、作用或症状的上述实例中，本发明提供了剂量单位形式的药物组合物，所述剂量单位形式适合于预防、治疗或控制暴露于毒性剂的损伤和作用或其症状，所述剂量单位形式包含以下范围内的量的肽和可药用载体，所述范围：约0.01pg至30mg、0.5pg至25mg、1pg至20mg、500pg至10mg、1ng至10mg、500ng至10mg、1μg至10mg、500μg至10mg或1mg至10mg。在优选的实施方式中，肽的量在约0.5pg至1mg的范围内。在优选的实施方式中，所述制剂含有非红细胞生成的肽。
此外，本发明的这一恢复性方面针对本发明的任何肽在制备用于恢复细胞、组织或器官功能障碍的药物组合物中的使用，其中治疗在造成功能障碍的原发损伤后和相当一段时间之后开始。此外，使用本发明的肽的治疗可以跨越疾病或病况在急性期和慢性期的过程。
本发明的肽可以全身施用，其每次施用的剂量为约1ng至约300μg/kg体重，优选地为约5-150μg/kg-体重，最优选地为约10-100μg/kg-体重。例如，只要临床需要，可以每小时、每日重复施用，或在适合的间隔后重复施用，例如，每1-12小时，优选地，每6到12小时；每2-6天，优选地，每2-4天；每1到12周，优选地每1到3周。在一种实施方式中，可以将有效量的肽和可药用载体包装在单个剂量的小瓶或其他容器中。在另一种实施方式中，使用能够发挥本文所述的活性但不会造成血红蛋白浓度或血细胞比容增加的肽。这些肽在其中预期长期提供本发明的方法的实例中是优选的。
实施例
实施例1：肽合成的方法。
可以在Wang树脂上使用标准Fmoc固相肽合成来合成RYLLEAKEAENITTG(SEQIDNO：1)，通过制备HPLC和离子交换层析纯化，并冷冻干燥。乙酸盐和铵以离子形式结合至肽分子的碱性和酸性基团，从而形成混合盐。
实施例2：肽在坐骨神经损伤测定中具有活性
使用坐骨神经损伤测定，测试了RYLLEAKEAENITTG(SEQIDNO：1)的组织保护活性。使用异氟烷麻醉斯普拉-道来氏大鼠(250-300克)(每组6只，包括对照)。然后，将大鼠置于恒温毯上以确保手术期间大鼠的体心温度保持在35-37℃。通过直肠探针监控体心温度。通过四头肌切开，在大腿中段暴露麻醉大鼠的右侧坐骨神经；用15号手术刀平行于并在四头肌上方穿过皮肤划开2cm切口，并使用粘连剥离剪切割四头肌以暴露坐骨神经。然后，将坐骨神经与周围的膜分离。2-0号编织丝线(Ethicon，685-G)在神经下通过，缝合线的末端通过保持与神经垂直的引导器。然后，将缝合线的末端与非弹性索系在一起，然后将非弹性索绕在滑轮系统(带有NYL滑轮的MTD1/4”B(04174-01号)，具有稳定器)上，并且缓慢释放连接到非弹性索上的100克重量。将该重量悬挂1分钟，然后切断丝线缝合线释放重量。
然后，使用1/2cc的胰岛素注射器将50mcg/kg剂量的RYLLEAKEAENITTG(SEQIDNO：1)或PBS注入尾静脉中。然后，闭合肌肉和手术切口，并向大鼠皮下注射5ml乳酸盐林格氏溶液。在恢复过程中，使用加热毯使大鼠的体心温度保持在35-37℃。
在之后4天，将大鼠置于数字扫描仪扫描表面上的直径为30cm的丙烯酸管中，确定大鼠的后趾外张。等待5分钟使其顺从后，对大鼠的后足进行扫描，其清楚地显示了全部5趾。每只大鼠进行三次可接受的扫描。通过扫描，测量趾伸展(ToeSpread)(第一趾球部与第五趾球部之间的距离)和中间趾伸展(IntermediateToeSpread)(第二趾球部与与第四趾球部之间的距离)。然后，根据S.Erbayraktar等人,2003,ProcNatlAcadSciUSA100,6741-6746(该文献以其全部内容作为参考并入本文)计算静态坐骨神经指数(SSI)并进行统计学分析。
图1出了示在该测定中RYLLEAKEAENITTG(SEQIDNO：1)减轻了坐骨神经损伤。
实施例3.组胺引起的风疹形成
在异氟烷麻醉下，将12只Sprague-Dawley大鼠的腹部剃毛和脱毛。然后，对每只大鼠静脉内注射(通过颈内静脉)伊文思蓝的稀释溶液(30mg/ml，于盐水中，1ml/kg体重)。5分钟后，以矩形样式在每只大鼠的腹部施用6次小剂量的组胺(皮内施用20微升组胺二磷酸盐)。15分钟后，当风疹达到其最大尺寸时，对风疹拍照，并通过数字面积测量法测定起疱面积。为了测试肽的效力，在组胺注射后不久，以30mcg/kg的剂量对大鼠静脉内施用RYLLEAKEAENITTG(SEQIDNO：1)或安慰剂。如图2所示，RYLLEAKEAENITTG(SEQIDNO：1)显著降低了风疹面积。
实施例4.恶病质模型
用108个Yoshida肝癌AH-130细胞腹膜内接种8周龄的体重约200g的雄性WistarHan大鼠。在肿瘤接种前和处死当天评价体重和身体组成。在第0天和第10/11天测量生活质量指示指标(自发性活动、食物和水摄入)。在研究的最后一天对肿瘤细胞计数。每天用(1)低剂量(0.17μg/kg/d)RYLLEAKEAENITTG(SEQIDNO：1)、(2)高剂量(1.7μg/kg/d)RYLLEAKEAENITTG(SEQIDNO：1)或(3)生理盐水(安慰剂)处理大鼠(n＝22)。使用EchoMRI-700(EchoMedicalSystems,Houston,Texas,USA)分析动物的身体组成。身体结构的分析基于核磁共振。使用Supermex活动监测系统(MuromachiKikaiCo.,LTD.,Tokyo,Japan)在24小时内通过红外扫描器测量自发性活动。
癌症恶病质是支持疾病最后阶段的严重并发症，并且其特征为肌肉的大量损失，并通常伴有脂肪的损失。RYLLEAKEAENITTG(SEQIDNO：1)的处理减轻了体重损失(图3A)，保持了附睾脂肪(图3B)，降低了肌肉损失(3C)并且提高了身体活动(图3D)，从而降低了恶病质的副作用。

Claims (22)

1.分离的肽，其包含在应答性细胞、组织或器官中具有组织保护活性的15至29个残基的肽或肽类似物并且包含RYLLEAKEAENITTG(SEQIDNO：1)的氨基酸序列，其中一个氨基酸残基任选地被保守或非保守取代替换，所述取代是具有侧链修饰或侧链取代的氨基酸或氨基酸等价物。
2.根据权利要求1所述的分离的肽，其中，所述肽的氨基酸序列由RYLLEAKEAENITTG(SEQIDNO：1)组成。
3.药物组合物，其包含根据权利要求1-2中任一项所述的分离的肽和可药用载体。
4.根据权利要求3所述的药物组合物，其中，所述组合物配制成用于口服施用、鼻内施用、经眼施用、吸入施用、透皮施用、直肠施用、舌下施用或肠胃外施用。
5.根据权利要求3所述的药物组合物，其中，所述组合物配制为灌流溶液。
6.对患有组织损伤相关疾病的受试者进行治疗的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的权利要求1-2中任一项所述的分离的肽或权利要求3所述的药物组合物的步骤。
7.根据权利要求6所述的方法，其中，所述与组织损伤相关的疾病是由癌症、缺血性损伤、外伤性损伤、毒性损伤或炎症性损伤引起的。
8.根据权利要求6所述的方法，其中，所述组织损伤相关疾病为心血管疾病、心肺疾病、呼吸道疾病、肾病、泌尿系统疾病、生殖系统疾病、骨病、皮肤病、胃肠疾病、内分泌异常、代谢异常、认知功能障碍，或者中枢或外周神经系统的疾病或病症。
9.预防、治疗、改善或控制有需要的受试者中癌症、肿瘤病症、炎症或毒性剂暴露的方法，包括向所述受试者施用有效量的包含在应答性细胞、组织或器官中具有组织保护活性的15至29个残基的肽或肽类似物并且包含RYLLEAKEAENITTG(SEQIDNO：1)的氨基酸序列的分离的肽，其中一个氨基酸残基任选地被保守或非保守取代替换，所述取代是具有侧链修饰或侧链取代的氨基酸或氨基酸等价物。
10.根据权利要求9所述的方法，其中，所述肽的氨基酸序列由RYLLEAKEAENITTG(SEQIDNO：1)组成。
11.根据权利要求9或10中任一项所述的方法，其中，所述癌症为浸润性乳腺癌、浸润前乳腺癌、炎性乳腺癌、畸形性骨炎、转移性乳腺癌、复发性乳腺癌、阑尾癌、胆管癌、肝外胆管癌、结肠癌、食道癌、胆囊癌、胃癌、肠癌、肝癌、胰癌、直肠癌、胃癌、肾上腺癌、膀胱癌、肾癌、阴茎癌、前列腺癌、睾丸癌、泌尿系统癌、宫颈癌、子宫内膜癌、输卵管癌、卵巢癌、子宫癌、阴道癌、外阴癌、眼癌、头颈癌、颌癌、喉癌、咽癌、口腔癌、鼻腔癌、唾液腺癌、窦癌、咽喉癌、甲状腺癌、舌癌、扁桃体癌、霍奇金氏病、白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性粒细胞性白血病、急性髓性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、慢性髓性白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、B细胞淋巴瘤、淋巴结癌、骨癌、骨肉瘤、黑素瘤、皮肤癌、基底细胞癌、鳞状细胞癌、肉瘤、尤文氏肉瘤、卡波西肉瘤、脑癌、星形细胞瘤、胶质母细胞瘤、胶质瘤、垂体癌、脊髓癌、肺癌、腺癌、燕麦细胞癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、鳞状细胞癌或间皮瘤。
12.根据权利要求6所述的方法，其中，所述组织损伤相关疾病为炎症。
13.根据权利要求12所述的方法，其中，所述炎症为阑尾炎、睑缘炎、支气管炎、滑囊炎、宫颈炎、胆管炎、胆囊炎、绒毛膜羊膜炎、结膜炎、膀胱炎、泪腺炎、皮炎、心内膜炎、子宫内膜炎、上髁炎、附睾炎、纤维组织炎、胃炎、齿龈炎、舌炎、化脓性汗腺炎、虹膜炎、喉炎、乳腺炎、心肌炎、肌炎、肾炎、脐炎、卵巢炎、睾丸炎、骨炎、耳炎、腮腺炎、心包炎、腹膜炎、咽炎、胸膜炎、静脉炎、肺炎(急性肺炎)、前列腺炎、肾盂肾炎、鼻炎、输卵管炎、窦炎、口腔炎、滑膜炎、扁桃腺炎、葡萄膜炎、尿道炎、阴道炎、外阴炎、哮喘、全身性红斑狼疮、重症肌无力、肌腱炎、脉管炎、慢性支气管炎、胰腺炎、骨髓炎、类风湿性关节炎、牛皮癣关节炎、肾小球肾炎、视神经炎、颞动脉炎、脑炎、脑膜炎、横贯性脊髓炎、皮肤肌炎、多肌炎、坏死性筋膜炎、肝炎、坏死性小肠结肠炎、盆腔炎、炎症性肠病、溃疡性结肠炎、克罗恩病、回肠炎、肠炎、直肠炎、血管炎、血管狭窄、再狭窄、低血压、1型糖尿病、川崎氏病、Decum's病、慢性阻塞性肺病、银屑病、动脉粥样硬化、硬皮病、干燥综合征、混合性结缔组织病、红斑痤疮、胃溃疡、十二指肠溃疡、阿尔茨海默氏病、成人斯蒂尔病、急性视网膜色素上皮炎、泰齐综合征、白塞病、白点综合征、急性眼后多灶性板状色素性上皮病、匐行性脉络膜炎、鸟枪弹样脉络膜视网膜病变、多灶性脉络膜炎伴全葡萄膜炎、弥漫性视网膜下纤维化综合征、点状内层脉络膜病变、多发性一过性白点综合征、弥漫性单侧亚急性视神经视网膜炎、环状肉芽肿、过敏性肠综合征、肠胃炎、格雷夫斯病、多发性硬化、掌腱膜挛缩症、移植排斥病、同种异体移植排斥、移植物抗宿主病、皮肤移植物排斥、实体器官移植排斥、骨髓移植排斥、炎症性皮肤病、病毒性皮肤病如来源于人乳头状瘤病毒、HIV或RLV感染的那些疾病、细菌、真菌和/或其他寄生性皮肤病、皮肤型红斑狼疮、高IgG4病、过敏症、过敏性疾病、由钝性创伤引起的炎症、由挫伤引起的炎症、由过敏症引起的炎症、风湿性疾病、儿童关节炎、类风湿性关节炎、Churg-Strauss综合征、纤维性肌痛、巨细胞(颞)动脉炎、痛风、过敏性紫癜、过敏性血管炎、强直性脊柱炎、囊炎、风湿热、风湿性心脏病、全身性红斑狼疮、风湿性多肌痛、骨关节炎、多发性结节性动脉炎、赖特综合征、运动相关损伤、跑步膝、网球肘、肩周炎、跟腱炎、足底筋膜炎、滑囊炎、奥-施二氏病、重复性应激损伤、累积性创伤疾病、局限性肌张力障碍、腕管综合征、交叉综合征、反射性交感神经营养不良综合征、狭窄性腱鞘炎、DeQuervain综合征、扳机指/扳机拇指、胸廓出口综合征、腱炎、腱鞘炎、桡管综合征、雷诺氏病、腱鞘囊肿、游戏指、Wii-itis、由感染引起的炎症。
14.根据权利要求6所述的方法，其中，所述组织损伤相关疾病由暴露于毒性剂引起。
15.根据权利要求14所述的方法，其中，所述毒性剂为生物试剂、化学试剂或辐射试剂。
16.根据权利要求6-15中任一项所述的方法，其中，所述受试者为哺乳动物。
17.根据权利要求16所述的方法，其中，所述哺乳动物为人。
18.保护、维持或增强分离自哺乳动物的应答性细胞、组织或器官的活力的方法，包括将所述细胞、组织或器官暴露于权利要求3所述的药物组合物。
19.分离的核酸，其包含编码权利要求1-2中任一项所述的分离的肽的核苷酸序列。
20.包含权利要求19所述的核酸的表达载体。
21.包含权利要求20所述的表达载体的宿主细胞。
22.重组产生分离的肽的方法，包括从权利要求21所述的宿主细胞分离所述肽的步骤。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109310741A (zh) * 2016-04-29 2019-02-05 阿拉伊姆药品公司 用于预防和治疗与组织损伤相关的疾病和障碍的组织保护肽

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8962015B2 (en) 2007-09-28 2015-02-24 Sdg, Inc. Orally bioavailable lipid-based constructs
KR102167641B1 (ko) * 2018-08-27 2020-10-19 주식회사 사이루스 에리스로포이에틴 유래 펩티드를 함유하는 세포증식 촉진용 조성물
CN113056286A (zh) 2018-09-10 2021-06-29 冷泉港实验室 用于治疗胰腺炎的方法
DE102022112056A1 (de) 2021-05-28 2022-12-01 Shimano Inc. Komponente für ein mit menschenkraft angetriebenes fahrzeug und elektrisches system für ein mit menschenkraft angetriebenes fahrzeug

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101378772A (zh) * 2005-08-05 2009-03-04 阿拉伊姆药品公司 组织保护性肽及其用途
CN102066413A (zh) * 2008-01-22 2011-05-18 阿拉伊姆药品公司 用于预防和治疗组织损伤相关疾病和病症的组织保护肽和肽类似物

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0715633A4 (en) * 1993-07-28 1997-11-19 Medvet Science Pty Ltd ANTAGONISTS OF THE HEMOPOIETIC GROWTH FACTOR
IL124015A0 (en) * 1998-04-08 1999-01-26 Yeda Res & Dev Pharmaceutical compositions comprising a protein
CN1318084C (zh) * 2000-05-26 2007-05-30 奥索-麦克尼尔药品公司 神经保护肽
PL362396A1 (en) * 2001-02-06 2004-11-02 Merck Patent Gmbh Modified erythropoietin (epo) with reduced immunogenicity
EP1527094B1 (en) * 2002-08-09 2008-07-16 MERCK PATENT GmbH T-cell epitopes in erythropoietin
US7718363B2 (en) * 2003-04-25 2010-05-18 The Kenneth S. Warren Institute, Inc. Tissue protective cytokine receptor complex and assays for identifying tissue protective compounds
WO2008065372A2 (en) * 2006-11-28 2008-06-05 Nautilus Biotech, S.A. Modified erythropoietin polypeptides and uses thereof for treatment
PT2492355E (pt) * 2007-11-29 2015-09-10 Molecular Health Gmbh Recetor de eritropoietina protetora de tecido (nepor) e métodos de utilização
WO2011022056A2 (en) * 2009-08-18 2011-02-24 Medical College Of Georgia Research Institute, Inc. PEPTIDE MODULATORS OF THE δPKC INTERACTION WITH THE D SUBUNIT OF F1FO ATP SYNTHASE/ATPASE AND USES THEREOF

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101378772A (zh) * 2005-08-05 2009-03-04 阿拉伊姆药品公司 组织保护性肽及其用途
CN102066413A (zh) * 2008-01-22 2011-05-18 阿拉伊姆药品公司 用于预防和治疗组织损伤相关疾病和病症的组织保护肽和肽类似物

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109310741A (zh) * 2016-04-29 2019-02-05 阿拉伊姆药品公司 用于预防和治疗与组织损伤相关的疾病和障碍的组织保护肽

Also Published As

Publication number Publication date
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US10864253B2 (en) Tissue protective peptides for preventing and treating diseases and disorders associated with tissue damage
BRINES et al. Patent 2918223 Summary
CERAMI et al. Patent 2712757 Summary

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