CN105517538A - 镁-脂质体 - Google Patents

Abstract

本发明涉及具有延迟的镁释放的镁-脂质体及其制备方法。本发明进一步涉及用于治疗伴随镁缺乏而出现的疾病的镁-脂质体。

Description

镁-脂质体

技术领域

本发明涉及具有延迟的镁释放的镁-脂质体及其制备方法。此外，本发明涉及用于治疗伴随镁缺乏而出现的疾病的镁-脂质体。

镁是在人体内第四最常见的阳离子并且是超过300种酶的辅酶。镁对于ATP和核酸的形成以及对肌肉功能来说是重要的。

尽管它的重要性，但许多患者未察觉地患有低镁血症，也就是说具有过低的镁水平。

这可能具有临床影响，因为低镁血症与糖尿病、血脂异常、内皮功能障碍、氧化应激、哮喘、高血压和炎症相关联。尤其是在血管中的炎症和血管钙化导致心血管疾病，并可能引起过早死亡。病态的心血管变化广泛普遍并与众多其它疾病相关联。例如在患有慢性肾病（CKD）的患者中，它们是最常见的死亡原因。

在CKD患者中可表明，较高的镁值与较少的钙化和死亡率相关联。此外，镁通过直接的细胞作用而抑制不期望的钙化。

约300毫克的所需日剂量一般通过均衡的饮食来实现。增加的需求量可以通过营养补充剂或药物来满足。这可以例如通过片剂，特别是泡腾片来实现。

然而，在CKD患者中在口服给予镁时出现遵从问题。因为在家里在没有医生的照料下服用片剂，对服用的有效控制是不可能的。肾病患者必须每天服用至少12片，例如铁制剂、磷酸盐-和钾粘合剂。多达30片的日用量并非不寻常的。在此种情况下，所述患者只能饮用最多一升的水。其结果是，许多片剂完全没有被服用。

另外，镁的口服给药导致胃肠不规整性。可再吸收性差的镁离子导致肠内的渗透梯度，其结果是液体流入消化道。这增加了肠内容物的流动性，因此具有轻泻作用。

另一种可能性在于，将镁以无菌硫酸镁溶液的形式静脉内给药。在急救医学中，这例如用于治疗子痫。

呼吸停止是镁的静脉内给药的可怕的副作用。其大多由自主反射故障（反射消失）来表现。因此必须仅非常缓慢地静脉内注射镁。其它副作用为头痛、心悸、头晕、恶心和呕吐。

硫酸镁溶液的静脉内给药导致血清镁水平短时间显著增加，但随后又快速下降。硫酸镁的丸剂给药不适合于将人体内的镁水平提高较长时间，例如数小时或数天。

将药物包入脂质体是现有技术公知的。通过药物的脂质体制剂，使得亲脂性活性物质的可生物利用性成为可能。此外，敏感药物可在给药后的可能代谢之前通过包入脂质体而得到保护，从而增加活性物质的血浆半衰期。

脂质体作为“药物递送系统”使得药物能够有目的且选择性地运输到生物体内需要它们的那些位置。由此，脂质体配制的药物的副作用减少，并且因为可给药较低剂量，疗效和治疗范围增大。亲水性药物被包封，并位于脂质体的亲水性内部。将亲脂性药物嵌入膜内，两亲性药物位于膜内和水相之间的界面处。

镁-脂质体是现有技术公知的。US5501859公开了一种口服给药的可吸收性镁组合物，其包含镁盐和来自1-棕榈酰基-2-油酰基-磷脂酰胆碱的脂质体。

WO88/07852公开了静脉内、肌内或皮下给药的包含镁的带正电荷且单层的脂质体。然而，带正电荷的脂质体有毒，由单核吞噬细胞系统迅速地辨认出并从血液循环中除去。带正电荷的脂质体因而也不适于将人体内的镁水平提高较长时间，即例如数小时或数天。

发明描述

本发明涉及静脉内给药的具有延迟的镁释放的镁-脂质体。

镁-脂质体指的是包含呈盐形式的镁的脂质体。

嵌入脂质体的镁盐包括可由镁与选自以下的酸的反应获得的各种药学上可接受的镁盐：盐酸、氢溴酸、磷酸、硝酸、硫酸、乙酸、2,2-二氯乙酸、己二酸、抗坏血酸（它的D型或L型，特别是它的L型）、天冬氨酸（它的D型或L型，特别是它的L型）、苯磺酸、苯甲酸、4-乙酰氨基苯甲酸、樟脑酸（它的(+)-或(-)型，特别是它的(+)型）、樟脑-10-磺酸（它的(+)-或(-)型，特别是它的(+)型）、癸酸（癸酸）、己酸（己酸）、辛酸（辛酸）、碳酸、肉桂酸、柠檬酸、环己烷氨基磺酸、十二烷基硫酸酯、乙烷-1,2-二磺酸、乙磺酸、2-羟基-乙磺酸、甲酸、富马酸、半乳糖二酸、龙胆酸、葡庚糖酸（它的D型或L型，特别是它的D型）、葡糖酸（它的D型或L型，特别是它的D型）、葡糖醛酸（它的D型或L型，特别是它的D型）、谷氨酸、戊二酸、2-氧代戊二酸、甘油磷酸、乙醇酸、马尿酸、异丁酸、乳酸（它的D型或L型）、乳糖酸、月桂酸、马来酸、苹果酸（它的D型或L型）、丙二酸、扁桃酸（它的D型或L型）、甲磺酸、萘-1,5-二磺酸、萘-2-磺酸、1-羟基-2-萘甲酸、烟酸、油酸、乳清??酸、草酸、棕榈酸、亚甲基双羟萘酸（扑酸）、丙酸、焦谷氨酸（它的D型或L型，特别是它的L型）、水杨酸、4-氨基水杨酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸、酒石酸（它的D型或L型）、硫氰酸、甲苯磺酸（特别是p-异构体）和十一碳烯酸或它们的溶剂合物、水合物或它们的混合物。

镁盐优选是水溶性的。硫酸镁和氯化镁是特别优选的。

镁-脂质体具有多层或单层的结构，并且包含胆固醇、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸以及其它成分，例如脂肪酸是油酸、棕榈酸和亚麻酸。

磷脂酰胆碱的混合物可从例如鸡蛋（蛋-磷脂酰胆碱,E-PC）或大豆中获得。磷脂酰胆碱的其它实例为1,2-二植烷酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱（DPhyPC）、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱（DPPC）、1,2-二月桂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱（DLPC）、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱（DOPC）、1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱（DMPC）、1,2-(顺式-顺式-9,12-十八碳二烯酰基)-sn-甘油-3-磷脂酰胆碱（DUPC）、1-棕榈酰基-2-亚油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱（PLPC）、1-棕榈酰基-2-油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱（POPC）、1-硬脂酰基-2-油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱（SOPC）。

磷脂酰乙醇胺的实例为1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺（DMPE）、1,2-二月桂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺（DLPE）、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺（DOPE）、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺（DPPE）、1-棕榈酰基-2-油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺（POPE）。

磷脂酰丝氨酸的实例为1,2-二-(9Z-十八烯酰基)-sn-甘油-3-磷酸-L-丝氨酸（DOPS）。

制备脂质体的方法对于本领域技术人员是常见的。单层脂质体例如可以通过将脂质的乙醇或含醚溶液缓慢滴入到水相中来制备。其它方法为洗涤剂-脂质混合物的渗析或水溶液在之前干燥的脂质薄膜上的超声波处理和振动。制备脂质体，特别是多层囊泡（MLV）的优选方法包括通过特定孔径（例如100nm）的膜例如聚碳酸酯膜或高压均化以挤出脂质混合物的步骤。

本发明的镁-脂质体的电荷可以是正的、负的或中性的。在一个优选的实施方案中，本发明的镁-脂质体的电荷是中性的。已发现与带正电荷或带负电荷的脂质体相比，中性的镁-脂质体引起较少的补体激活，因此其在血液循环中的半衰期得以延长。

本发明的镁-脂质体具有小于400nm，优选70nm至250nm的平均直径。100nm至200nm的平均直径是特别优选的，因为一方面镁-脂质体足够小，以仅延迟地吸收于肝脏中或由巨噬细胞吸收，另一方面仍旧有足够的空间提供给镁盐。

本发明的镁-脂质体不仅包括未改性的脂质体还包括经由聚亚烷基二醇链或聚甘油改性的脂质体。可例如使用聚乙二醇（PEG）、聚丙二醇等作为聚亚烷基二醇。在一个优选的实施方案中，聚亚烷基二醇是聚乙二醇。可以以各种方式使用例如聚乙二醇来进行对脂质体的表面改性。聚乙二醇优选地通过共价化学键固定在脂质体的表面上。为此提供两种合成路线。其一，聚乙二醇可固定在成品脂质体上，其二，可在第一步骤内合成聚乙二醇-脂质-缀合物并在第二步骤中在制备脂质体时使用该缀合物。聚(乙二醇)-磷脂酰乙醇胺（PEG-PE）是这类聚乙二醇-缀合物的一个实例。

当使用聚乙二醇时，可使用分子量至约7000道尔顿，优选1000至5000道尔顿的这类。

用于将镁-脂质体改性的聚亚烷基二醇化合物的量没有特别限制。基于全部脂质计，聚亚烷基二醇的优选使用量为约0.2至5摩尔％，优选约0.28至3摩尔％，特别优选0.3至2.5摩尔％。

本发明还涉及适用于静脉内给药本发明的镁-脂质体的药物制剂。在本发明的一个优选实施方案中，本发明的镁-脂质体是冻干的。包含根据本发明的镁-脂质体的药物制剂可包含其它辅助剂，例如二糖，特别是蔗糖、乳糖或海藻糖。

冻干的镁-脂质体可被装入安瓿、小瓶或注射小瓶（Durchstechflasche）中。在给药之前，添加合适的悬浮介质例如等渗食盐溶液并制备脂质体悬浮体。

本发明还涉及用于镁-脂质体给药的给药方案，其通过单核吞噬细胞系统使得镁-脂质体的降解得以延迟。

降解可例如由此得以延迟：首先给药带负电荷的脂质体或不具有涂覆表面的这类或“空”脂质体即不具有镁盐的脂质体，并通过这种方式使单核吞噬细胞系统饱和。随后再给药含镁的脂质体。

在另一个实施方案中，同时给药“空”脂质体和含镁脂质体。在这种情况下，“空”脂质体与含镁脂质体的物质量比为10:1至1:10，优选5:1至1:2，特别优选为2:1至1:1。

另一个优选实施方案涉及包含无镁脂质体和含镁脂质体的药物制剂，其中无镁脂质体与含镁脂质体的物质量比为10:1至1:10，优选5:1至1:2，特别优选为2:1至1:1。

根据本发明的镁-脂质体适合用于与低镁血症有关的疾病的预防和治疗。

根据本发明的镁-脂质体适合用于治疗具有增加的心血管疾病风险的患者，特别是CKD-患者，无论其血清镁水平如何。

根据本发明的镁-脂质体特别适合用于炎性血管疾病的预防和治疗。

根据本发明的镁-脂质体特别适合用于血管钙化的预防和治疗。

根据本发明的镁-脂质体适合用于治疗具有代谢综合征、2型糖尿病（非胰岛素依赖型糖尿病（NIDDM））的患者。

根据本发明的镁-脂质体适合用于先兆子痫或子痫的预防和治疗。

根据本发明的镁-脂质体适合用于血压升高的预防和治疗。

根据本发明的镁-脂质体适合用于疲劳综合征的预防和治疗。

实施例

参照实施例说明本发明。

实施例1：脂质体的制备和镁盐的包封

在搅拌下将蛋-磷脂酰胆碱（E-PC，10mg）和胆固醇（2mg）溶于三氯甲烷（1ml）中。随后在旋转式蒸发器中去除三氯甲烷。随后添加MgCl2-溶液（1ml，浓度为1mol/l）并且在室温下在圆底烧瓶内旋转着水合40分钟。所得混合物通过聚碳酸酯膜（孔径200nm）挤出21次。

实施例2：由聚(乙二醇)-磷脂酰乙醇胺（PEG-PE）合成经PEG保护的镁-脂质体

在32ml0.3M的柠檬酸盐缓冲液（pH4.0）中加入包含摩尔比为18:10:0.5的磷脂酰胆碱（PC）、胆固醇和聚(乙二醇)-磷脂酰乙醇胺（PEG-PE）的脂质混合物（3.2g）并且水合。随后通过使用液氮和加热浴（60℃）对该混合物三次冷冻和解冻，制备多层脂质体。随后添加氯化镁水溶液用于包封，其中用量为每100mg脂质中0.5ml的20mg/ml氯化镁水溶液。该悬浮体通过孔径为200nm的均孔（isopore）聚碳酸酯膜挤出数次。所得的脂质体悬浮体通过1MNaOH的逐滴添加得以中和。

Claims (16)

1.镁-脂质体，其特征在于，所述脂质体至少部分地涂覆有聚亚烷基二醇或聚甘油化合物。

2.根据权利要求1的镁-脂质体，其中所述聚亚烷基二醇化合物为聚乙二醇。

3.根据前述权利要求中任一项所述的镁-脂质体，其中所述聚乙二醇基团的平均分子量为500至7000道尔顿，优选1000至5000道尔顿。

4.根据前述权利要求中任一项所述的镁-脂质体，其中所述脂质体的平均大小为70至250nm，优选100至250nm，特别优选100至200nm。

5.根据前述权利要求中任一项所述的镁-脂质体，其中所述脂质体包含可由镁与选自以下的酸的反应获得的镁盐：盐酸、氢溴酸、磷酸、硝酸、硫酸、乙酸、2,2-二氯乙酸、己二酸、抗坏血酸（它的D型或L型，特别是它的L型）、天冬氨酸（它的D型或L型，特别是它的L型）、苯磺酸、苯甲酸、4-乙酰氨基苯甲酸、樟脑酸（它的(+)或(-)型，特别是它的(+)型）、樟脑-10-磺酸（它的(+)或(-)型，特别是它的(+)型）、癸酸（癸酸）、己酸（己酸）、辛酸（辛酸）、碳酸、肉桂酸、柠檬酸、环己烷氨基磺酸、十二烷基硫酸酯、乙烷-1,2-二磺酸、乙磺酸、2-羟基-乙磺酸、甲酸、富马酸、半乳糖二酸、龙胆酸、葡庚糖酸（它的D型或L型，特别是它的D型）、葡糖酸（它的D型或L型，特别是它的D型）、葡糖醛酸（它的D型或L型，特别是它的D型）、谷氨酸、戊二酸、2-氧代戊二酸、甘油磷酸、乙醇酸、马尿酸、异丁酸、乳酸（它的D型或L型）、乳糖酸、月桂酸、马来酸、苹果酸（它的D型或L型）、丙二酸、扁桃酸（它的D型或L型）、甲磺酸、萘-1,5-二磺酸、萘-2-磺酸、1-羟基-2-萘甲酸、烟酸、油酸、乳清??酸、草酸、棕榈酸、亚甲基双羟萘酸（扑酸）、丙酸、焦谷氨酸（它的D型或L型，特别是它的L型）、水杨酸、4-氨基水杨酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸、酒石酸（它的D型或L型）、硫氰酸、甲苯磺酸（特别是p-异构体）和十一碳烯酸或它们的溶剂合物、水合物或它们的混合物。

6.包含根据前述权利要求中任一项所述的镁-脂质体的药物组合物。

7.根据权利要求5的药物组合物，其中所述镁-脂质体为冻干的。

8.根据权利要求5或6的药物制剂，其中所述组合物另外含有不含镁的脂质体。

9.制备根据前述权利要求中任一项所述的镁-脂质体的方法，所述方法包括以下步骤：

a)制备脂质混合物，

b)包封镁盐，

c)挤出或高压均化所述脂质混合物。

10.根据前述权利要求中任一项所述的镁-脂质体，其用于治疗与低镁血症有关的疾病。

11.根据前述权利要求中任一项所述的镁-脂质体，其用于治疗心血管疾病，特别是CKD-患者的心血管疾病。

12.根据前述权利要求中任一项所述的镁-脂质体，其用于治疗代谢综合征或2型糖尿病（非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)）。

13.根据前述权利要求中任一项所述的镁-脂质体，其用于预防和治疗血管钙化。

14.根据前述权利要求中任一项所述的镁-脂质体，其用于预防和治疗先兆子痫或子痫。

15.根据前述权利要求中任一项所述的镁-脂质体，其用于预防和治疗血压升高。

16.根据前述权利要求中任一项所述的镁-脂质体，其用于治疗疲劳综合征。