CN105494101A - 干旱沙漠化地区红树莓工厂化育苗方法 - Google Patents

干旱沙漠化地区红树莓工厂化育苗方法 Download PDF

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岳雷
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Abstract

本发明公开了干旱沙漠化地区红树莓工厂化育苗方法，属于植物栽培技术领域；它包含以下步骤：无菌材料的获得：选取大田生长健壮、无病虫害侵染的半木质化枝条作为原始材料；初代培养；继代培养；生根培养；炼苗、驯化及移栽：将生根瓶苗移至室外散射光下锻炼5-7天，取出生根苗，用清水将幼苗根部的培养基洗净，工艺高效、快速，无需通过采集大量外植体来获得无菌苗，通过各培养阶段的培养基调节，采用不同生长调节剂的混用和轮用，达到提高芽增殖几率、减少变异的目的，提高移栽成活率，大田定植时摘去育苗袋或营养钵后直接栽种即可。实现红树莓优良品种种苗在西北干旱沙漠化地区的规模化和标准化生产。

Description

干旱沙漠化地区红树莓工厂化育苗方法
技术领域
本发明涉及植物栽培技术领域，具体涉及干旱沙漠化地区红树莓工厂化育苗方法。
背景技术
西北地区为干旱半干旱区，土地广阔，但水资源相对贫乏，水资源是当地经济社会发展和生态保护的主要限制因子。
西北地区西部降水从80年代末呈增加趋势已得到气象和水文资料的证实（刘春蓁，2000；任国玉等，2000；周陈超等，2005）。但关于温度升高后蒸发的变化趋势则有不同的认识。一些研究认为陆面蒸发量会增加，而另一些研究则认为蒸发会下降（任国玉，2005）。特别是对气候暖湿（或暖干）转变导致的内陆河流域两个水源地——冰雪带与森林带径流变化对山区总径流变化的综合效应，仍需深入探讨。
流域生态需水量是指维持流域正常的生态和环境功能所必需蓄存和消耗的水资源量(刘昌明，2004)。长期以来，由于对生态需水的重视不够，西北干旱区水资源过度开发利用的现象普遍存在。生态需水被大量挤占，生态和环境质量恶化问题非常严重。如塔里木河、黑河、石羊河，由于水资源的过度开发利用，导致了其河流下游水资源量锐减、河道断流、湖泊沼泽萎缩（台特玛湖、居延海、青土湖等已干涸）、地下水位下降、植被（胡杨、红柳等）枯死、生物栖息地破碎、消失等生态和环境退化现象。在西北干旱地区，由于降水稀少，使水成为维系生态系统的关键因子。只有在降雨较多的山区和平原的河流两岸才有较好的植被分布。西北地区生产、生活用水与生态用水矛盾非常突出。
据北方地区实测的样方资料，目前西北五省区草地总面积11975万ha，因各种因素造成的退化草地总面积为6960万ha，占草地总面积的58%。其中轻度退化面积3020.9万ha，占退化总面积的43.4%；中度退化2650.7万ha，占退化总面积的38%；重度退化面积1289万ha，占退化总面积的18.5%。与80年代和90年代的调查结果比较，草地退化有加剧的趋势。
现有的干旱沙漠化地区育苗方法效率低下，需要通过采集大量的外植体来获得无菌苗，且成活率很低。
发明内容
针对上述问题，本发明要解决的技术问题是提供一种工艺高效、无需通过采集大量外植体来获得无菌苗的干旱沙漠化地区红树莓工厂化育苗方法。
本发明的干旱沙漠化地区红树莓工厂化育苗方法，它包含以下步骤：
1、无菌材料的获得：选取大田生长健壮、无病虫害侵染的半木质化枝条作为原始材料；供试品种为哈瑞太兹和秋英；将两个品种的枝条用流水冲洗2-3h，在超净工作台上将洗净的枝条剪切成1cm左右的带一个腋芽或茎芽的茎段，先将剪切好的带芽茎段用75%的乙醇溶液浸洗15s，然后再用0.1%的升汞溶液浸泡8min，并不断搅动；为提高灭菌效果，可分别在75%的乙醇溶液和0.1%的升汞溶液中滴入几滴吐温80；灭菌后用无菌水冲洗3-5次，用无菌滤纸吸干水分后接种；接种时将芽体向上接种到诱导培养基上，每瓶接种3个外植体，每个处理接种20瓶，3个重复；
2、初代培养：将经过消毒灭菌的带芽茎段接种到下列诱导培养基上：
A:MS培养基+GA36mg/L+6-BA0.5mg/L
B:MS培养基+GA33mg/L+6-BA1mg/L+活性炭2g/L
pH:5.8-6.0
在光照强度1400-2000Lx、温度23℃-28℃、光照周期为12-14h/d的培养条件下培养至外植体萌发分化成4-5cm高的芽丛，切下芽丛，将其剪成1cm左右的带芽茎段接种到继代培养基上继代，以30-35天为一个周期转接继代一次；
3、继代培养：将剪切下的初代培养苗切成1cm左右、带1-2个腋芽或顶芽的茎段，接种到下列培养基上：
A:MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L
B:MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.05mg/L
pH:5.8-6.0
在光照强度1400-2000Lx、温度19℃-28℃、光照周期为12-14h/d的培养条件下培养至芽苗高4-5cm、一般以30-35天为一个周期继代一次，获得增殖倍数为2.4的芽丛。如此反复进行增殖培养获得所需数量的芽丛，待芽丛有3-5个腋芽、高4-5cm时剪下，进行生根培养；
4、生根培养：将剪下的继代芽苗接种到下列培养基上：
A:1/2MS+NAA0.5mg/L+IBA0.1mg/L
B:1/2MS+NAA1mg/L+IBA0.05mg/L
pH:5.8-6.0
在光照强度1400-2000Lx、温度19℃-28℃、光照周期为12-14h/d的培养条件下培养至芽苗长大并生根；30d后观察生根情况；
5、炼苗、驯化及移栽：将生根瓶苗移至室外散射光下锻炼5-7天，取出生根苗，用清水将幼苗根部的培养基洗净，用质量浓度为0.1%的多菌灵溶液浸根1-2min灭菌，并用800mg/L的海藻素溶液蘸根后定植于沙床驯化；当幼苗在沙床生长至6-8cm、有3-4片新叶长出后，定植于基质比例为田园土：草炭=2:1（加入5%左右的珍珠岩）的营养钵中继续培育即可。
本发明以栽培品种红树莓的茎尖或带芽茎段作为外植体，在诱导培养基中诱导培养形成幼芽，在增殖培养基中交替进行继代培养获得所需数量的茎芽后，接种到生根培养基上进行生根，将生根的幼苗经炼苗、驯化后植入育苗袋或8x8cm的营养钵培养获得红树莓种苗。
本发明的有益效果：工艺高效、快速，无需通过采集大量外植体来获得无菌苗，通过各培养阶段的培养基调节，采用不同生长调节剂的混用和轮用，达到提高芽增殖几率、减少变异的目的，提高移栽成活率，大田定植时摘去育苗袋或营养钵后直接栽种即可。实现红树莓优良品种种苗在西北干旱沙漠化地区的规模化和标准化生产。
具体实施方式：
本具体实施方式采用以下技术方案：它包含以下步骤：
1、无菌材料的获得：选取大田生长健壮、无病虫害侵染的半木质化枝条作为原始材料；供试品种为哈瑞太兹和秋英；将两个品种的枝条用流水冲洗2-3h，在超净工作台上将洗净的枝条剪切成1cm左右的带一个腋芽或茎芽的茎段，先将剪切好的带芽茎段用75%的乙醇溶液浸洗15s，然后再用0.1%的升汞溶液浸泡8min，并不断搅动；为提高灭菌效果，可分别在75%的乙醇溶液和0.1%的升汞溶液中滴入几滴吐温80；灭菌后用无菌水冲洗3-5次，用无菌滤纸吸干水分后接种；接种时将芽体向上接种到诱导培养基上，每瓶接种3个外植体，每个处理接种20瓶，3个重复；
2、初代培养：将经过消毒灭菌的带芽茎段接种到下列诱导培养基上：
A:MS培养基+GA36mg/L+6-BA0.5mg/L
B:MS培养基+GA33mg/L+6-BA1mg/L+活性炭2g/L
pH:5.8-6.0
在光照强度1400-2000Lx、温度23℃-28℃、光照周期为12-14h/d的培养条件下培养至外植体萌发分化成4-5cm高的芽丛，切下芽丛，将其剪成1cm左右的带芽茎段接种到继代培养基上继代，以30-35天为一个周期转接继代一次；
3、继代培养：将剪切下的初代培养苗切成1cm左右、带1-2个腋芽或顶芽的茎段，接种到下列培养基上：
A:MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L
B:MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.05mg/L
pH:5.8-6.0
在光照强度1400-2000Lx、温度19℃-28℃、光照周期为12-14h/d的培养条件下培养至芽苗高4-5cm、一般以30-35天为一个周期继代一次，获得增殖倍数为2.4的芽丛。如此反复进行增殖培养获得所需数量的芽丛，待芽丛有3-5个腋芽、高4-5cm时剪下，进行生根培养；
4、生根培养：将剪下的继代芽苗接种到下列培养基上：
A:1/2MS+NAA0.5mg/L+IBA0.1mg/L
B:1/2MS+NAA1mg/L+IBA0.05mg/L
pH:5.8-6.0
在光照强度1400-2000Lx、温度19℃-28℃、光照周期为12-14h/d的培养条件下培养至芽苗长大并生根；30d后观察生根情况；
5、炼苗、驯化及移栽：将生根瓶苗移至室外散射光下锻炼5-7天，取出生根苗，用清水将幼苗根部的培养基洗净，用质量浓度为0.1%的多菌灵溶液浸根1-2min灭菌，并用800mg/L的海藻素溶液蘸根后定植于沙床驯化；当幼苗在沙床生长至6-8cm、有3-4片新叶长出后，定植于基质比例为田园土：草炭=2:1（加入5%左右的珍珠岩）的营养钵中继续培育即可。
本具体实施方式以栽培品种红树莓的茎尖或带芽茎段作为外植体，在诱导培养基中诱导培养形成幼芽，在增殖培养基中交替进行继代培养获得所需数量的茎芽后，接种到生根培养基上进行生根，将生根的幼苗经炼苗、驯化后植入育苗袋或8x8cm的营养钵培养获得红树莓种苗。
本具体实施方式的有益效果：工艺高效、快速，无需通过采集大量外植体来获得无菌苗，通过各培养阶段的培养基调节，采用不同生长调节剂的混用和轮用，达到提高芽增殖几率、减少变异的目的，提高移栽成活率，大田定植时摘去育苗袋或营养钵后直接栽种即可。实现红树莓优良品种种苗在西北干旱沙漠化地区的规模化和标准化生产。
以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征以及本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。

Claims (2)

1.干旱沙漠化地区红树莓工厂化育苗方法，其特征在于它包含以下步骤：
(1)、无菌材料的获得：选取大田生长健壮、无病虫害侵染的半木质化枝条作为原始材料；供试品种为哈瑞太兹和秋英；将两个品种的枝条用流水冲洗2-3h，在超净工作台上将洗净的枝条剪切成1cm左右的带一个腋芽或茎芽的茎段，先将剪切好的带芽茎段用75％的乙醇溶液浸洗15s，然后再用0.1％的升汞溶液浸泡8min，并不断搅动；为提高灭菌效果，可分别在75％的乙醇溶液和0.1％的升汞溶液中滴入几滴吐温80；灭菌后用无菌水冲洗3-5次，用无菌滤纸吸干水分后接种；接种时将芽体向上接种到诱导培养基上，每瓶接种3个外植体，每个处理接种20瓶，3个重复；
(2)、初代培养：将经过消毒灭菌的带芽茎段接种到下列诱导培养基上：
A:MS培养基+GA36mg/L+6-BA0.5mg/L
B:MS培养基+GA33mg/L+6-BA1mg/L+活性炭2g/L
pH:5.8-6.0
在光照强度1400-2000Lx、温度23℃-28℃、光照周期为12-14h/d的培养条件下培养至外植体萌发分化成4-5cm高的芽丛，切下芽丛，将其剪成1cm左右的带芽茎段接种到继代培养基上继代，以30-35天为一个周期转接继代一次；
(3)、继代培养：将剪切下的初代培养苗切成1cm左右、带1-2个腋芽或顶芽的茎段，接种到下列培养基上：
A:MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L
B:MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.05mg/L
pH:5.8-6.0
在光照强度1400-2000Lx、温度19℃-28℃、光照周期为12-14h/d的培养条件下培养至芽苗高4-5cm、一般以30-35天为一个周期继代一次，获得增殖倍数为2.4的芽丛。如此反复进行增殖培养获得所需数量的芽丛，待芽丛有3-5个腋芽、高4-5cm时剪下，进行生根培养；
(4)、生根培养：将剪下的继代芽苗接种到下列培养基上：
A:1/2MS+NAA0.5mg/L+IBA0.1mg/L
B:1/2MS+NAA1mg/L+IBA0.05mg/L
pH:5.8-6.0
在光照强度1400-2000Lx、温度19℃-28℃、光照周期为12-14h/d的培养条件下培养至芽苗长大并生根；30d后观察生根情况；
(5)、炼苗、驯化及移栽：将生根瓶苗移至室外散射光下锻炼5-7天，取出生根苗，用清水将幼苗根部的培养基洗净，用质量浓度为0.1％的多菌灵溶液浸根1-2min灭菌，并用800mg/L的海藻素溶液蘸根后定植于沙床驯化；当幼苗在沙床生长至6-8cm、有3-4片新叶长出后，定植于基质比例为田园土：草炭＝2:1(加入5％左右的珍珠岩)的营养钵中继续培育即可。
2.根据权利要求1所述的干旱沙漠化地区红树莓工厂化育苗方法，其特征在于它以栽培品种红树莓的茎尖或带芽茎段作为外植体，在诱导培养基中诱导培养形成幼芽，在增殖培养基中交替进行继代培养获得所需数量的茎芽后，接种到生根培养基上进行生根，将生根的幼苗经炼苗、驯化后植入育苗袋或8x8cm的营养钵培养获得红树莓种苗。
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