CN105477627B - 治疗前列腺癌的组合物及其用途 - Google Patents

Abstract

本申请提供了治疗前列腺癌的组合物，其包含抗癌有效成分以及药学上可接受的载体，其中所述抗癌有效成分优选为胶原酶Ⅱ。本申请还提供了该组合物在制备用于治疗前列腺癌的药物中的用途。上述组合物适用于前列腺内注射或植入、前列腺癌内注射或植入、前列腺癌手术后瘤腔内注射或植入。该抗癌组合物可制成各种药物剂型，优选为注射剂和植入剂。

Description

治疗前列腺癌的组合物及其用途

技术领域

本申请涉及一种治疗前列腺癌的组合物，具体地，涉及一种包含基质金属蛋白酶的抗癌组合物以及其在制备治疗前列腺癌的药物中的用途。

背景技术

前列腺癌是男性泌尿生殖系最常见的肿瘤。2009年美国有192280例新发病例,占所有恶性肿瘤新发病例的25％。虽然我国属于前列腺癌发病率较低的国家,但随着人口老龄化、工业水平提高、环境污染严重、饮食习惯改变等,近年来国内部分发达地区的前列腺癌发病率迅速升高。前列腺癌的治疗方法包括根治性前列腺切除术、放疗和激素抑制。局部前列腺癌的优选治疗是根治性前列腺切除术。但这种治疗可能会导致死亡、失禁、阳痿、直肠受损或肺栓塞。

细胞外基质(extracellular matrix,ECM)降解和肿瘤血管生长在肿瘤发生发展、浸润、扩散、转移方面起着重要的作用。科学家一直试图通过抑制或降低负责降解ECM的基质金属蛋白酶(MMPs)活性或表达来实现治疗肿瘤的目的，如使用MMPs抑制剂、抗胶原酶单抗等。但到目前为止此类尝试尚未见临床成功的先例。

另外，也有研究试图通过激活或促进细胞外基质降解以实现治疗肿瘤的目的，但均未能取得理想疗效。

基质金属蛋白酶(MMPs)种类繁多，功能尚不清楚。已有报道的MMP就有二十多种，根据其蛋白结构和作用底物的特异性又可以分为5个亚型：(1)胶原酶(MMP1,8,13)、(2)明胶酶(MMP2,9)、(3)间质溶解素(MMP3,10,11)、(4)模型MTMMPs(MMP14,15,16,17,24,25)和(5)其他亚群(MMP7,12,20,23)等。MMP亚型中的胶原酶至少有5种以上，不同胶原酶之间的关系尚不清楚，与其它MMPs的关系更有待探讨。粗制的胶原酶还含有其它水解酶，因此容易产生其它意想不到的副作用。

因此，需要寻求一种有效的抗癌组合物来改善前列腺癌的治疗方法，或降低目前治疗方法中的不良作用。

发明内容

一方面，本申请提供了一种治疗前列腺癌的组合物，其包含抗癌有效成分以及药学上可接受的载体，其中所述抗癌有效成分包含胶原酶Ⅱ、MMP-12或其组合。

在优选的实施方案中，抗癌组合物中的有效成分选自胶原酶Ⅱ、MMP-12或其组合。在更优选的实施方案中，抗癌组合物中的有效成分为胶原酶Ⅱ。

在某些实施方案中，上述抗癌组合物被配制成药学上可接受的剂型，优选为注射剂或植入剂。在某些实施方案中，胶原酶Ⅱ的浓度为0.5-250,000U/ml，优选为25-25,000U/ml，更优选为50-25,000U/ml，最优选为300-10,000U/ml。

另一方面，提供了上述组合物在治疗前列腺癌中的用途。

另一方面，提供了本发明的组合物在制备用于治疗前列腺癌的药物中的用途。

在某些实施方案中，包含本发明抗癌有效成分的药物以注射、灌注或植入的方式给药，优选地，所述药物经局部给药。在优选的实施方案中，所述药物经前列腺内注射、前列腺癌内或癌周注射、或前列腺癌手术后瘤腔内注射给药，优选地经前列腺癌内注射给药。在另一实施方案中，所述药物经前列腺内植入、前列腺癌内或癌周植入、或前列腺癌手术后瘤腔内植入给药，优选地经前列腺癌内植入给药。

在一些实施方案中，本发明的抗癌有效成分，优选为胶原酶Ⅱ的给药剂量为每千克个体体重给予0.01到5,000,000U。在优选的实施方案中，胶原酶Ⅱ的给药剂量为每千克个体体重给予10到500,000U。在更优选的实施方案中，胶原酶Ⅱ的给药剂量为10-50,000U/kg个体体重，例如为10-1,000U/kg个体体重。

再一方面，提供了治疗前列腺癌的方法，该方法包括将抗癌组合物给予患病个体来治疗前列腺癌。前列腺癌可以是原发性的，也可以是转移癌。在优选的实施方案中，该治疗方法涉及应用外源性的胶原酶Ⅱ，优选的是局部应用胶原酶Ⅱ。单独应用胶原酶Ⅱ对前列腺癌的生长具有明显的剂量依赖性抑制作用，局部应用作用更加明显。

具体实施方式

本申请提供了一种治疗前列腺癌的组合物，其包含抗癌有效成分以及药学上可接受的载体，其中所述抗癌有效成分包含胶原酶Ⅱ、MMP-12或其组合。

在优选的实施方案中，上述抗癌组合物包含的抗癌有效成分选自胶原酶Ⅱ、MMP-12或其组合。在更优选的实施方案中，所述抗癌有效成分为胶原酶Ⅱ。

本发明所述的“胶原酶Ⅱ”和“MMP-12”是基质金属蛋白酶(MMPs)家族的成员。MMPs是一类对细胞外基质(ECM)有特殊降解作用的蛋白水解酶，能够降解细胞外基质的多种成分。

本发明的“胶原酶Ⅱ”，又称MMP-8。胶原酶Ⅱ作为一种金属蛋白酶，在体内少量蛋白水解酶存在的情况下便可以增加其活性，即所存在的蛋白酶的量不能高到蛋白酶将胶原酶消化到使其失活的程度。胶原酶Ⅱ不仅可以裂解多种胶原蛋白，还参与机体免疫及蛋白跨膜运动。除胶原蛋白外，胶原酶Ⅱ对其它细胞外间质及其中的巨噬细胞、免疫细胞、细胞生长因子、血管生长因子可能也有不同程度的直接或间接的降解作用。在本文中,胶原酶Ⅱ和MMP-8可以互换使用.

本发明人经过大量研究发现，单独应用胶原酶Ⅱ或MMP-12或其组合能够抑制癌症的生长，特别是单独应用胶原酶Ⅱ对癌症的生长具有明显的剂量依赖性抑制作用。本发明应用的外源性胶原酶Ⅱ可能在作用于癌细胞、降解肿瘤细胞的胶原蛋白的同时，还会作用于细胞外间质，降解胶原蛋白或结缔组织、肿瘤血管和/或肿瘤细胞基膜，通过对间质的水解作用使肿瘤生长失去支撑和必要的营养。结果，肿瘤的供血减少或停止，导致肿瘤细胞死亡。这一过程还可能激活一系列的细胞免疫，从而导致免疫系统向肿瘤进一步的攻击。

本申请所述的“药学上可接受的载体”指不干扰活性成分的生物活性有效性的载体。本申请的药学上可接受的载体可以为固体或液体，包括药学上可接受的赋形剂、缓冲剂、乳化剂、稳定剂、防腐剂、稀释剂、封装剂、填充剂等。例如，药学上可接受的缓冲剂进一步包括磷酸盐、醋酸盐、柠檬酸盐、硼酸盐以及碳酸盐等。

本申请的药物组合物可以呈现为单位剂量形式，并且可以通过任一制药领域公知的方法制备。所有方法都包括将本申请的活性成分与一种或几种药学上可接受的载体结合的步骤。通常，通过将活性成分与液体载体、固体载体或二者结合来制备组合物，随后根据需要来定型制备的产物。例如，适于胃肠外给药的组合物可以是包含活性组分的无菌水性或非水性制剂。可以根据已知的方法，使用合适的分散剂或湿润剂以及悬浮剂制备上述制剂。在可接受的载体或溶剂中，可以使用水、林格氏液以及等渗的氯化钠溶液等。

在某些实施方案中，本发明所述的抗癌组合物被配制成药学上或临床上可接受的任一剂型。在优选的实施方案中，所述剂型为缓释剂。更优选地，配制的剂型为注射剂或植入剂。

本发明的“注射剂”是指由药物制成的供注入体内的溶液(包括乳浊液和混悬液)以及供临用前配成溶液或混悬液的粉末或溶液。所述注射剂包括但不限于水溶液注射剂、微球注射剂、凝胶型注射剂、脂质体注射剂、纳米粒注射剂、储库型控释注射剂、无针注射释药系统等。

本发明的“植入剂”指将药物与辅料制成的小块状或条状供植入体内的无菌固体制剂。植入剂可采用特制的注射器植入，也可用手术切开植入。本发明的植入剂还包括以液体形式注射于人体、在生理条件下转变为固体或半固体药物贮库的植入剂形式，即注射型原位形成植入剂(injectable in situ forming implants)。

在优选的实施方案中，将本发明的抗癌组合物制备成局部应用的水溶液。优选地，将所述组合物制备成在相对小体积中胶原酶Ⅱ浓度较高的水溶液。可选地，也可以将本发明的抗癌组合物先冷冻干燥，装在安剖瓶中，临用前将其配制成适用于注射入前列腺或肿瘤内的药学上可接受的水溶液。

优选地，用新鲜蒸馏的去离子无菌水来制备用于可注射用溶液的缓冲液。可以使用任何合适的缓冲溶液如磷酸缓冲液、Ringers缓冲液或Tris缓冲液来配制抗癌组合物。优选的缓冲液的pH范围约为6.0到8.0，优选为6.5到7.5，更优选为6.7-7.0。例如，可以使用浓度为约0.1-0.25mol/L、优选0.15-0.2mol/L的氯化钠来溶解或稀释组合物。再例如，使用的磷酸缓冲液的浓度为0.02-0.2mol/L，优选为0.05-0.15mol/L。

在某些实施方案中，本发明的抗癌活性成分胶原酶Ⅱ在注射剂中的浓度为0.5-250,000U/ml，优选为25-25,000U/ml，更优选为50-25,000U/ml，最优选为300-10,000U/ml。

本发明所用的胶原酶Ⅱ可以自制，也可以商购。可以是重组的蛋白，也可以是从人及动物组织细胞分离纯化的。在一优选实施方案中，胶原酶Ⅱ从Life Technologies公司购得，冷冻干燥的胶原酶Ⅱ的酶活力为34200U/100mg/支，用无热原的盐水重新溶解至所需的浓度。所有酶的活性都以每mg国际单位表示。一个单位胶原酶活性的定义为在钙离子存在时，在温度为37℃以及pH为7.4的条件下，5小时内能从天然胶原释放肽(相当于茚三酮颜色)成1微摩尔L-亮氨酸的胶原酶量。可以按本领域已知的方法确定胶原酶和其它酶的活性。Gokcen等人的美国专利No.5,116,615公开了胶原酶分析的实例，本文将其纳入作为参考。

另一方面，提供了本发明的组合物在治疗前列腺癌中的用途。

本文所用的“治疗”包括抑制、治愈和减轻前列腺癌或其症状以及预防或延缓前列腺癌的转移。

另一方面，提供了本发明的组合物在制备用于治疗前列腺癌的药物中的用途。在优选的实施方案中，所述药物的有效成分为MMP-8、MMP-12或其组合。在更优选的实施方案中，所述抗癌有效成分为MMP-8，即胶原酶Ⅱ。

在优选的实施方案中，本发明的抗癌有效成分、优选为胶原酶Ⅱ的给药剂量为每千克个体体重给予0.01到5,000,000U，优选为10到500,000U，更优选为10-50,000U，例如为10-1,000U。胶原酶Ⅱ的剂量在实际应用时可以按照医生的要求选用。

给药剂量可以按患者的年龄、病症的特性、肿瘤体积、组合物的效力及给药途径变化。例如，对小于5g的肿瘤，可以应用单次灌输的剂量。灌输剂量可以为3-5ml，缓慢地将药物注射入肿瘤，如约5-10分钟。如果需要在此注射后还可再次注射。当肿瘤为5到10g时，在第一次注射剂量后还可以再次施用较大剂量的抗癌组合物。例如，第一次施用5ml灌注剂量。然后，缓慢地施用第二份20-40ml的相同组合物，例如给药时间为10-20分钟。如果需要可以顺序给药，但一般不超过80ml总体积。例如，可以再次应用这种治疗，如每周或每月给药一次。对于大于10到15g的肿瘤，第一次给药的灌注剂量可以至多为50ml，随后可以应用更大的剂量，但一般不超过80ml的总体积。

在某些实施方案中，上述药物以注射、灌注或植入的方式给药，优选地，所述药物经局部给药。将此组合物局部应用于前列腺。局部给药包括将药物应用于前列腺和/或癌细胞或肿瘤内或其附近，优选为肿瘤内。局部给药还包括用药物包围前列腺和/或癌性肿瘤或将药物应用于前列腺和/或癌性肿瘤的表面。在一实施方案中，将药物通过直接的前列腺内注射或灌注给药于癌症局部。例如，小容量如约2ml或更少的药物通过注射给药。而较大的容量如6ml以上的药物则通过缓慢灌注约10-30分钟给药。

在优选的实施方案中，所述药物经前列腺内注射、前列腺癌内或癌周注射、或前列腺癌手术后瘤腔内注射给药，优选地经前列腺癌内注射给药。在另一实施方案中，所述药物经前列腺内植入、前列腺癌内或癌周植入、或前列腺癌手术后瘤腔内植入给药，优选地经前列腺癌内植入给药。

可选地，可以通过任意其他方式，将酶特异性导向前列腺内、前列腺癌内或前列腺癌周围。可以选用的方式例如利用不同的载体系统将组合物递送到所需的部位。通常，合适的载体将治疗剂递送到其靶点而不会丧失特异性或反应性。优选地，载体能与治疗性酶连接且可保持复合物状态直到递送完成。可以应用缓释组合物，例如可以用缓释植入法提供这种制剂，或以微胶囊或吸附于生物可降解聚合物提供这种制剂。其它载体系统文献已有描述，例如将酶制剂包埋在生物可降解小泡中的方法，以保护酶的活性且有利于特异性递送。将组织特异性蛋白质(单克隆抗体)附着于这些小泡，可以实现对细胞病理特异性位点的定位。例如可以将酶包埋在脂质体或其它生物可降解微胶囊中，与用于特异性定位的组织特异性单克隆抗体相连。各种形式的酶包埋技术可用于包埋酶，包括但不限于活细胞空胞、合成的聚合物微胶囊以及由胆固醇、卵磷脂和磷脂酸构成的脂类小泡(脂质体)等。用受体本身的红细胞递送活性酶可以避免由潜在的在合成载体(如脂质体和微胶囊)中应用酶所引起的免疫和生理问题。将聚乙二醇(PEG)共价连接于酶可以使这些蛋白质无免疫原性，延长它们的循环半衰期，从而逃避天然酶抑制剂的抑制作用，而且可以在减少自体溶解的情况下提高酶活性。PEG与蛋白质的连接可以采用本领域公知的方法来实现，此外通过超滤纯化可以得到均匀的反应产物。

另一方面，提供了用本发明的组合物治疗前列腺癌的方法，该方法包括给予患病个体治疗有效量的抗癌活性成分。优选地，所述抗癌活性成分为胶原酶Ⅱ、MMP-12或其组合。更优选地，所述抗癌活性成分为胶原酶Ⅱ。

在优选的实施方案中，本发明的抗癌有效成分、优选为胶原酶Ⅱ的给药剂量为每千克个体体重给予0.01到5,000,000U，优选为10到500,000U，更优选为10-50,000U，例如为10-1,000U。

在实际应用中，为了保证给药的精确性，即组合物是否能施予前列腺细胞或肿瘤的附近或进入它们，泌尿科医生通常可以通过如成像得到前列腺图像(可以在诊断过程和前列腺活体检查过程中得到)。

在优选实施方案中，局部给予治疗有效量的组合物来治疗前列腺癌。优选地，该量足以降解前列腺肿瘤、肿瘤间质、间质内血管、肿瘤细胞及各种细胞因子，治愈或减轻前列腺癌。

如上所述，可以选择经前列腺内注射药物。前列腺内注射可以经腹膜或经直肠路径，所应用的组合物的给药体积为0.001ml到80ml，浓度为0.5-250,000U/ml，优选为25-25,000U/ml，更优选为50-25,000U/ml，最优选为300-10,000U/ml。

为了使注射的组合物发挥最佳效应，可以用充气囊扩张前列腺尿道。通过膀胱镜插入的囊，抑制注射入的酶溶液通过多孔管道系统(流注入尿道)的立即溢出。这种注射方法的优点是此方法能直接用膀胱镜观察病损的瘤状区域。在前列腺直接注射的过程中，患者所经受的痛苦和不适最小。可以选用的注射途经在其他文献已有描述。

本发明抗癌组合物中的有效成分较单一，疗效易于控制和确认；伴随的毒副作用小。而且，在一些实施方案中，抗癌有效成分以相当低的剂量就能够取得明显的抗癌功效，例如给药剂量为10U-900U/kg个体体重的胶原酶Ⅱ能够显著抑制肿瘤的生长。

本申请所述的“个体”，是指哺乳动物，包括但不限于灵长类动物、牛、马、猪、绵羊、山羊、狗、猫以及诸如大鼠和小鼠的啮齿类动物。

本文中，有效成分、活性成分以及活性组分可以交替使用，除非另有所指。MMP-8与胶原酶Ⅱ可以交替使用。

本说明书和权利要求书中，词语“包括”、“包含”和“含有”意指“包括但不限于”，且并非意图排除其他部分、添加物、组分、或步骤。

应该理解，在本发明的特定方面、实施方案或实施例中描述的特征、特性、组分或步骤，可适用于本文所描述的任何其他的方面、实施方案或实施例，除非与之矛盾。

上述公开内容总体上描述了本发明，通过下面的实施例进一步示例本发明。描述这些实施例仅为说明本发明，而不是限制本发明的范围。尽管本文中使用了特殊的术语和值，这些术语和值同样被理解为示例性的，并不限定本发明的范围。除非特别指明，本说明书中的实验方法和技术为本领域技术人员所公知的方法和技术。

实施例

以下实施例中使用的实验动物为体重20-26g的雄性昆明小鼠，购自山东鲁抗医药集团中心实验动物室。注射的前列腺癌瘤细胞由山东省医学科学院提供。实验中使用的胶原酶Ⅱ、MMP-12以及MMP-7购自Life Technologies公司。

肿瘤体积的测量方法：用游标卡尺分别测量肿瘤的长径和短径，肿瘤体积的计算公式为：V＝(长径*短径²)/2。

统计学方法：结果以均值±标准误表示。两组数据间采用t-检验分析，多组结果比较采用单因素方差分析Tukey检验(One-way ANOVA Tukey's test)进行分析，P<0.05为差异有显著性。

实施例1不同剂量的MMPs体内抑瘤效果比较

将2x10⁵个前列腺癌瘤细胞经皮下注射于小白鼠的季肋部，待肿瘤生长7天后将其分为以下10组(每组6只，见表1)。第1组为对照组，第2-4组为MMP-8治疗组，第5-7组为MMP-12治疗组，第8-10组为MMP-7治疗组。药物经瘤内注射，剂量按公斤体重(mg/kg)计算(具体剂量见表1)，每毫升注射剂含2毫克MMP。每天给药一次，共3次。治疗后第15天测量肿瘤体积大小，比较各组的治疗效果(参见表1)。所用胶原酶Ⅱ(MMP-8)的活力为342U/mg，MMP-12的活力为180U/mg，MMP-7的活力为186U/mg。其他实施例中所使用的MMP-8的活力也均为342U/mg。

表1

试验组(n＝6)	接受的治疗	肿瘤体积(mm<sup>3</sup>)	P值
				1	对照	1860±255
2	MMP-8,0.03mg/kg	1305±145	<0.05
				3	MMP-8,0.07mg/kg	1059±81.5	<0.01
4	MMP-8,0.14mg/kg	815±63.7	<0.001
				5	MMP-12,0.10mg/kg	1733±250	>0.05
6	MMP-12,0.30mg/kg	1529±201	>0.05
				7	MMP-12,0.60mg/kg	1223±161	<0.05
8	MMP-7,0.20mg/kg	1835±326	>0.05
				9	MMP-7,0.40mg/kg	1784±306	>0.05
10	MMP-7,0.80mg/kg	1733±364	>0.05

如表1的结果所示，不同的MMP单独应用时对肿瘤生长的抑制作用差别很大。例如，胶原酶Ⅱ(MMP-8)在仅为0.03mg/kg时，就能够显著抑制肿瘤生长；而MMP-7在高达0.80mg/kg时仍无明显的抑瘤作用。MMP-12在0.10mg/kg和0.30mg/kg时不能有效地抑制肿瘤生长，当增加到0.60mg/kg时，对肿瘤产生了显著的抑制作用(P<0.05)，但仍明显低于0.14mg/kgMMP-8的抑瘤效果(P<0.001)。

胶原酶Ⅱ，即MMP-8能够显著抑制肿瘤生长，其作用表现出明显的量效关系。例如，0.03mg/kg胶原酶Ⅱ治疗组的肿瘤体积为1305±145mm³(P<0.05，相比于对照组的肿瘤体积1860±255mm³)；用0.07mg/kg胶原酶Ⅱ治疗时，肿瘤体积降到了1059±81.5mm³(P<0.01)；0.14mg/kg胶原酶Ⅱ治疗组的肿瘤体积则进一步降至815±63.7mm³(P<0.001)。

这些数据表明，胶原酶Ⅱ在剂量远远低于其他MMP时就能够产生显著的抑制肿瘤作用。而且，胶原酶Ⅱ对抗肿瘤的生长呈现剂量依赖性。

实施例2MMP-8经不同途径给药时体内抑瘤效果比较

将8x10⁵个前列腺癌瘤细胞经皮下注射于小白鼠季肋部，待肿瘤生长7天后将其分为以下10组(每组6只，见表2)，通过不同途径注射MMP-8。药物剂量按公斤体重(mg/kg)计算，每毫升注射剂含2毫克MMP-8。给药方式分别为尾静脉注射(IV)、瘤内注射(IT)和腹腔注射(IP)。每天给药一次，共3次。治疗后第15天测量肿瘤体积大小，比较各组的治疗效果(见表2)。

表2

组别(n＝6)	接受治疗	肿瘤体积(mm<sup>3</sup>)	P值
				1	对照	2879±403
2	0.10mg/kg，IT	1275±144	<0.05
				3	0.30mg/kg，IT	823±169	<0.01
4	0.90mg/kg，IT	411±206	<0.001
				5	0.10mg/kg，IV	2797±304	>0.05
6	0.30mg/kg，IV	2509±461	>0.05
				7	0.90mg/kg，IV	1974±350	<0.05
8	0.10mg/kg，IP	3085±526	>0.05
				9	0.30mg/kg，IP	2756±399	>0.05
10	0.90mg/kg，IP	2139±424	<0.05

如表2的结果所示，MMP-8的给药途径不同，对肿瘤生长的抑制程度有显著差异。瘤内注射MMP-8(组2-4)抑制肿瘤生长的作用最强，比静脉注射组(组5-7)和腹腔注射组(组8-10)的抑制作用至少强数倍。

实施例3MMP-8经不同途径给药时对肿瘤的抑制效果比较

将5x10⁵个前列腺癌瘤细胞皮下注射于小白鼠的季肋部，待肿瘤生长7天后将其分为以下10组(每组6只，见表3)，通过不同途径注射胶原酶Ⅱ。第1组为对照，第2-4组为MMP-8瘤内注射(IT)治疗组，第5-7组为MMP-8瘤周注射(PT)治疗组，第8-10组为MMP-8皮下注射(SC，距离肿瘤边缘1-2厘米)治疗组。药物的给药剂量按公斤体重(U/kg)计算，每毫升注射剂含1000U MMP-8。每天给药一次，共3次。治疗后第15天测量肿瘤体积大小，比较各组的治疗效果(见表3)。

表3

试验组(n＝6)	接受的治疗	肿瘤体积(mm<sup>3</sup>)	P值
				1	对照	2473±513
2	IT，100U/kg	960±166	<0.05
				3	IT，300U/kg	627±144	<0.01
4	IT，900U/kg	406±88.6	<0.001
				5	PT，100U/kg	1476±343	<0.05
6	PT，300U/kg	1181±388	<0.05
				7	PT，900U/kg	738±247	<0.05
8	SC，100U/kg	2362±487	>0.05
				9	SC，300U/kg	1919±402	>0.05
10	SC，900U/kg	1661±185	<0.05

如表3的结果所示，MMP-8的给药途径不同，对肿瘤生长的抑制程度有明显差异。瘤内注射组(组2-4)和瘤周注射组(组5-7)在几个不同的剂量(100U/kg,300U/kg和900U/kg)均能显著抑制肿瘤生长，其中瘤内注射组的抑瘤作用最为明显并且呈现剂量依赖性。相比之下，皮下注射组(组8-10)在给药剂量为900U/kg才产生有统计学意义的抑瘤作用。瘤内注射组的抑瘤作用比瘤周注射和皮下注射组的抑瘤作用至少强数倍。

实施例4MMP-8对不同体积肿瘤的抑制作用比较

将相同性别、相近体重的小白鼠分为3组，分别将不同数量的前列腺癌瘤细胞经皮下注射于小白鼠季肋部，其中第1组皮下注射2x10⁵个瘤细胞，第2组皮下注射5x10⁵个瘤细胞，第3组皮下注射2x10⁶个瘤细胞。待肿瘤生长14天后测量瘤体大小，然后每组再随机分成两小组，其中一个小组接受MMP-8瘤内注射，经瘤内一次注射0.1ml，每毫升注射剂含6000U胶原酶MMP-8；另一小组注射0.1ml生理盐水。治疗后第10天再次测量肿瘤体积大小，比较肿瘤生长抑制率(见表4)。

表4

表4的数据表明，应用等量的MMP-8对不同体积的肿瘤抑制程度不同。肿瘤体积越大，实现相同的抑制效果需要的药物剂量越大。

可以理解，尽管本发明以某种形式被说明，但本发明并不局限于本说明书中所显示和描述的内容。对本领域的技术人员显而易见的是，在不偏离本发明的范围的前提下还可做出各种变化。这些变化都在本发明要求保护的范围内。

Claims (6)

1.组合物在制备用于治疗前列腺癌的药物中的用途，所述组合物包含抗癌有效成分以及药学上可接受的载体，其中所述抗癌有效成分选自胶原酶Ⅱ、MMP-12或其组合。

2.如权利要求1所述的用途，其中所述抗癌有效成分为胶原酶Ⅱ。

3.如权利要求1或2所述的用途，其中所述组合物被配制成药学上可接受的剂型。

4.如权利要求1或2所述的用途，其中所述组合物被配制为注射剂、植入剂或灌注剂。

5.如权利要求1或2所述的用途，其中所述药物被配制为经局部给药的剂型。

6.如权利要求5所述的用途，其中所述局部为前列腺癌内或癌周、或前列腺癌手术后的瘤腔内。