CN105457611B - 嗜硫色谱整体材料及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种嗜硫色谱整体材料及其制备方法和应用，该制备方法为：将如式(I)所示结构的TEPIC与SAA(对氨基苯磺酸)于致孔剂中进行开环共聚反应一步制得共聚物poly(TEPIC‑co‑SAA)，通过该方法制得的嗜硫色谱整体材料具有3D骨架结构，并且表面具有高密度的酚硫醚基团；同时该方法为“一步法”，进一步提高了产率且简化了操作过程；此外，该嗜硫色谱整体材料对于二硫化合物的富集与分离具有优异的效果，

Description

嗜硫色谱整体材料及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及嗜硫材料，具体地，涉及一种嗜硫色谱整体材料及其制备方法和应用。

背景技术

嗜硫色谱又称亲硫色谱，它是一种简便、经济的蛋白质纯化技术，尤其对抗体纯化方法的发展具有重要意义。嗜硫色谱在高盐环境下对抗体及其他某些蛋白质产生特异性吸附，再在低盐浓度下洗脱，从而可获得高纯度及高回收率的蛋白质产品，是一种新型蛋白质纯化技术。

环氧化物由于分子结构中含有活泼的环氧基团，使它们可与多种类型的材料发生反应形成具有网状结构的高聚合物。其中，环氧树脂分子结构致密，其固化体系中含有的基团活性大，对极性物质的附着力强。因此，在整体材料的制备中得到了广泛的应用，具体可参见下述内容。

Hosoya等[参见Anal.Chem.,2006,78,5729-5735.]采用环氧树脂TEPIC分别于顺反-1,2-二氨基环己烷(CHD)和4,4'-二氨基二环己基甲烷(BMCM)经缩聚反应制得一种新型有机整体柱材料，并成功的应用于对核苷酸和脱氧核苷酸的分离。2012年，Li等[参见Chem.Commun.,2012,48,4115-4117.]制备了含有环氧官能团的毛细管整体柱，并采用后修饰方法进行环氧开环反应，将苯硼酸官能团修饰到整体柱上，得到了硼亲和毛细管整体柱，并用于对顺式二羟基化合物的特异性富集与分离。Lin等[参见J.Chromatogr.A.,2013,1301,131-138.]用含有环氧基团的POSS-epoxy和聚亚胺(PEI)经开环缩聚反应制得poly(POSS-co-PEI)杂化整体柱。该整体柱材料可应用于对中性、酸性等极性化合物和小分子多肽类进行分离。此外，Lin等[参见Anal.Chem.,2015,87，3476-3483.]通过用1,1,2,2-四(p-(2,3-环氧丙基苯基))乙烷作为环氧树脂类的单体，四苯丙酸季戊四醇作为硫醇单体，在三重致孔剂中制得具有3D骨架结构的整体柱材料，应用于酸性、碱性和中性小分子的分离。

目前，制备的用于富集和分离二硫化合物的嗜硫色谱材料主要通过在软基质(如纤维和琼脂糖)或磁珠上[参见J.Chromatogr.B,2004,808,51–56.；Chromatogr.,2010,72,205-213.；Biotech.Progr.,2009,25,376-383.]后修饰一定的功能化集团而得，但这些材料械强度低，成本高，易发生功能化基团流失，或无法多次重复使用。

发明内容

本发明的目的是提供一种嗜硫色谱整体材料及其制备方法和应用，通过该方法制得的嗜硫色谱整体材料具有3D骨架结构，并且表面具有高密度的酚硫醚基团；同时该方法为“一步法”，进一步提高了产率且简化了操作过程；此外，该嗜硫色谱整体材料对于二硫化合物的富集与分离具有优异的效果。

为了实现上述目的，本发明提供了本发明提供了一种嗜硫色谱整体材料的制备方法，该制备方法为：将如式(I)所示结构的TEPIC与SAA(对氨基苯磺酸)于致孔剂中进行开环共聚反应一步制得共聚物poly(TEPIC-co-SAA)，

本发明还提供了种嗜硫色谱整体材料，该嗜硫色谱整体材料通过上述的方法制备而得。

本发明进一步提供了一种根据上述的嗜硫色谱整体材料在对二硫化合物进行特异性的富集与分离中的应用。

通过上述技术方案，如图1所示，本发明通过在致孔剂的存在下，将TEPIC(交联剂)和SAA(功能单体)进行环氧开环/共聚反应制得了富含含砜硫醚基团的嗜硫色谱整体材料。该嗜硫色谱整体材料具有3D骨架结构，表面呈现交联的网状结构，机械强度大且稳定性好。在高浓度盐的存在下，该嗜硫色谱整体材料能够对二硫化合物发生特异性吸附，在低浓度盐的存在下，二硫化合物又能够从嗜硫色谱整体材料上洗脱出来，从而有效地实现了对二硫化合物富集与分离。

本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。

附图说明

附图是用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具体实施方式一起用于解释本发明，但并不构成对本发明的限制。在附图中：

图1为此嗜硫色谱整体材料制备的流程图。

图2是检测例1中的嗜硫色谱整体材料A1的傅里叶-红外吸收光谱图；

图3是检测例2中嗜硫色谱整体材料A2的放大1300倍的扫描电镜图；

图4是检测例2中嗜硫色谱整体材料A2的放大6000倍的扫描电镜图；

图5是检测例2中嗜硫色谱整体材料A2的放大1.1万倍的扫描电镜图；

图6是检测例2中嗜硫色谱整体材料A2的放大4万倍下的扫描电镜图；

图7是应用例1中对2S-OH和2-OH混合样品的CE图；

图8是应用例2中对2S-OH标样的TOF LC/MS图；

图9是应用例2中对2-OH标样的TOF LC/MS图；

图10是应用例2中对2S-OH和2-OH混合溶液的TOF LC/MS图；

图11是应用例2中对未被固载组分的TOF LC/MS图；

图12是应用例2中对混合样品被洗脱液洗脱下来的组份的TOF LC/MS图；

图13是应用例3中嗜硫色谱整体材料A2对IgY洗脱液的CE图。

具体实施方式

以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。

本发明提供了一种嗜硫色谱整体材料的制备方法，该制备方法为：将如式(I)所示结构的TEPIC与SAA(对氨基苯磺酸)于致孔剂中进行开环共聚反应一步制得共聚物poly(TEPIC-co-SAA)，

在本发明中，致孔剂的具体种类可以在宽的范围内选择，但是为了提高开环共聚反应的产率以及便于控制制得的嗜硫色谱整体材料的结构，优选地，致孔剂选自二甲亚砜、十二醇、丙酮、PEG-200(牌号为PEG-200的聚乙二醇)、PEG-300(牌号为PEG-300的聚乙二醇)、PEG-400(牌号为PEG-400的聚乙二醇)和PEG-600(牌号为PEG-600的聚乙二醇)中的一种或多种。

在本发明的制备方法中，各原料的具体用量可以在宽的范围内选择，但是为了提高开环共聚反应的速率和产率，优选地，相对于1重量份的TEPIC，SAA的用量为0.4-0.8重量份，致孔剂的用量为2.5-3.2重量份。

在本发明的制备方法中，开环共聚反应的具体反应条件可以在宽的范围内选择，但是为了提高开环共聚反应的速率和产率，优选地，开环共聚反应至少满足以下条件：反应温度为80-150℃，反应时间为2-24h。

在本发明中，为了除去共聚物poly(TEPIC-co-SAA)上附着的未反应的小分子物质，从而提高开环反应制得共聚物poly(TEPIC-co-SAA)的纯度。优选地，该方法还包括：将第一有机溶剂对共聚物poly(TEPIC-co-SAA)进行萃取或者淋洗。其中，萃取可以通过索氏提取器进行，而淋洗可以通过柱层析的方式进行。

在上述萃取或者淋洗的步骤中，第一有机溶剂是本领域中常规的有机溶剂，可以在宽的范围内选择，但是为了提高小分子物质的去除效果，优选地，第一有机溶剂选自甲醇、乙腈和乙醇中的一种或多种。

在本发明中，开环共聚反应的反应容器可以是本领域中常规的玻璃容器，如烧瓶、试管和色谱柱，但是为了得到特定形状的嗜硫色谱整体材料，优选地，开环共聚反应在敞口的玻璃容器或者密封的毛细管中进行。这样在敞口的玻璃容器中的嗜硫色谱整体材料为块状，然后通过研磨成粉状的嗜硫色谱整体材料，该粉状嗜硫色谱整体材料可以灌注至色谱柱中，从而应用于对混合样品的富集与分离。当然除了块状的嗜硫色谱整体材料，通过在密封的毛细管中进行开环共聚反应，这样制得的嗜硫色谱整体材料便固定于毛细管中，这样的嗜硫色谱整体材料可以在毛细管中可以进行重复使用。

在上述实施方式中，为了使制得的嗜硫色谱整体材料能够更稳定地固定于毛细管中，优选地，该方法还包括：将毛细管进行清洗，然后将清洗后的毛细管在第二有机溶剂的存在下与3-氨基丙基三甲氧基硅烷(ATMS)进行接触反应。这样ATMS的硅烷基团便可以与毛细管内表面的氧化硅上的羟基进行反应，接着ATMS的氨基可以与共聚物poly(TEPIC-co-SAA)上的环氧基团进行反应，进而使得共聚物poly(TEPIC-co-SAA)紧密地固定于毛细管内。

在本发明中，第二有机溶解可以是本领域中任何一种，但是为了使得共聚物poly(TEPIC-co-SAA)能够更稳定地位于毛细管内，优选地，第二有机溶剂选自乙腈、丙酮、四氢呋喃(THF)和乙醇中的一种或多种。

在对毛细管进行处理时，各物质的用量可以在宽的范围内选择，但是为了提高共聚物poly(TEPIC-co-SAA)的稳定性，优选地，相对于1份重量的ATMS，第二有机溶剂的用量为0.5-5份重量。

在本发明中接触反应的具体条件可以在宽的范围内选择，但是为了使得ATMS能够尽可能多地与毛细管的内表面的氧化硅上的羟基进行反应，接触反应满足以下条件：反应温度为50-90℃，反应时间为10-15h。

本发明还提供了种嗜硫色谱整体材料，该嗜硫色谱整体材料通过上述的方法制备而得。

本发明进一步提供了一种根据上述的嗜硫色谱整体材料在对二硫化合物进行特异性的富集与分离中的应用。

以下将通过实施例对本发明进行详细描述。以下实施例中，红外图谱参数通过傅里叶-红外光谱仪(IR-21，日本岛津公司)测得，扫描电镜图谱参数和X射线能谱参数均通过场发射扫描电镜(S-4800，日本日立公司Hitachi)测得，质谱参数通过液相色谱/飞行时间质谱联用仪(6200Accurate-Mass TOF LC/MS，美国安捷伦公司)测得，电泳参数通过毛细管电泳仪(P/ACEtm MDQ，美国贝克曼公司)测得。

ATMS、SAA和TEPIC均购买于阿拉丁且均为上海晶纯生化科技有限公司的市售品。

针对嗜硫色谱整体材料的对混合样品的富集和分离的能力的检测，下列检测例中依次对二硫化合物双(4-羟基苯基)二硫醚(2S-OH)和双(4-羟基苯基)甲烷(2-OH)的混合样品以及卵黄免疫球蛋白(IgY)等蛋白质大分子进行检测。

实施例1

1)将0.950g的TEPIC溶解于2.600g的PEG-300中，再加入0.550g的SAA置于10mL离心管中，经涡旋震荡、超声脱气，混合均匀，得到均一澄清的溶液后，在120℃的烘箱中恒温共聚开环反应12h得到块状材料M1；

2)取3.000g块状材料M1切成小块，放入索氏提取器中，加入50mL甲醇，在100℃下提取24h，冲洗出去残留的致孔剂以及未反应物，得到块状材料M2。

3)将块状材料M2置于真空干燥箱中，在100℃下干燥12h，即可得到嗜硫色谱整体材料A1，即共聚物poly(TEPIC-co-SAA)。

实施例2

1)将毛细管依次用NaOH(0.1M)、水、HCl(0.1M)、水和甲醇冲洗30min；接着将冲洗后的毛细管的内壁用氮气流吹10h干燥；然后在50℃下，将干燥后的毛细管置于ATMS和THF的混合溶液(ATMS/THF为v/v 1:1)中接触反应12h，反应结束后用甲醇冲洗毛细管，氮气吹干，得到内壁衍生氨基的毛细管。

2)将0.095g的TEPIC完全溶解于0.260g的PEG-300，再加入0.055g的SAA置于1.5mL离心管中，涡旋、超声，得到均一澄清的溶液。接着将该溶液迅速注入到上述衍生氨基的毛细管内，用硅橡胶将毛细管两端封口，在120℃的烘箱中恒温共聚开环反应12h。

3)取出上述毛细管，接在高压液相色谱泵上，以甲醇为流动相冲洗毛细管制得嗜硫色谱整体材料A2。

实施例3

按照实施例1的方法进行制得嗜硫色谱整体材料A3，所不同的是，将PEG-300换为PEG-200。

实施例4

按照实施例1的方法进行制得嗜硫色谱整体材料A4，所不同的是，将PEG-300换为PEG-400。

实施例5

按照实施例1的方法进行制得嗜硫色谱整体材料A5，所不同的是，将SAA的用量改为0.4g。

实施例6

按照实施例1的方法进行制得嗜硫色谱整体材料A6，所不同的是，将SAA的用量改为0.7g。

实施例7

按照实施例1的方法进行制得嗜硫色谱整体材料A7，所不同的是，将TEPIC的用量改为0.85g。

实施例8

按照实施例1的方法进行制得嗜硫色谱整体材料A8，所不同的是，将TEPIC的用量改为1.05g。

实施例9

按照实施例1的方法进行制得嗜硫色谱整体材料A9，所不同的是，将PEG-300的用量改为2.40g。

实施例10

按照实施例1的方法进行制得嗜硫色谱整体材料A10，所不同的是，将PEG-300的用量改为3.00g。

实施例11

按照实施例1的方法进行制得嗜硫色谱整体材料A11，所不同的是，将步骤2)中的反应温度改为110℃。

实施例12

按照实施例1的方法进行制得嗜硫色谱整体材料A12，所不同的是，将步骤2)中的反应温度改为130℃。

检测例1

对嗜硫色谱整体材料A1进行红外光谱检测，结果见图2，结合该图以及相关常识，具体分析如下：TEPIC具有羰基(1463、1690cm^-1)、环氧基(946cm^-1)这两个特征吸收峰，SAA具有砜基(1142cm^-1)、氨基(3262、3385、3488cm^-1)等特征基团的吸收峰。TEPIC与SAA通过氨基环氧开环后，得到的共聚物poly(TEPIC-co-SAA)中氨基的伸缩振动峰(3262、3385、3488cm^-1)和环氧基团的吸收峰(946cm^-1)消失了，但有砜基(1142cm^-1)和羰基(1463、1690cm^-1)的吸收峰，从而得出嗜硫色谱整体材料A1上已成功修饰上了砜-硫醚基团。

同样地，对嗜硫色谱整体材料A2-A11的红外光谱的检测与A1的红外光谱的检测保持一致。

检测例2

对嗜硫色谱整体材料A2进行扫描电镜检测，结果见图3-6，由该图可知，A2具有均匀连续的3D骨架结构，且与毛细管内壁牢牢的结合在一起。

同样地，对嗜硫色谱整体材料A1、A3-A11的扫描电镜检测，也可得知嗜硫色谱整体材料具有均匀连续的3D骨架结构。

制备例1

0.1mg/mL的2S-OH标准溶液的制备：在25℃下，将1mg的2S-OH溶解于10mL的0.5M硫酸钠水溶液(含5％的乙腈)中制得0.1mg/mL的2S-OH标准溶液。

制备例2

0.1mg/mL的2OH标准溶液的制备：在25℃下，将1mg的双(4-羟基苯基)甲烷溶解于10mL的0.5M硫酸钠水溶液(含5％的乙腈)中制得0.1mg/mL的2OH标准溶液。

制备例3

0.1mg/mL的2S-OH和2OH混合溶液的制备：在25℃下，将1mg 2S-OH和2OH分别溶解于10mL的0.5M硫酸钠水溶液(含5％的乙腈)中制得0.1mg/mL的2S-OH和2OH混合溶液。

制备例4

上样液(CPB)的制备：在25℃下，将0.716g磷酸氢二钠和3.551g硫酸钠溶于45mL的蒸馏水中，接着用1M的柠檬酸水溶液调节至pH为6.2，然后定容至50mL得到上样液。

制备例5

洗脱液(PB)的制备：在25℃下，将0.716g磷酸氢二钠45mL的蒸馏水中，接着用1M的柠檬酸水溶液调节至pH为6.2，然后定容至50mL得到洗脱液。

制备例6

电泳分离缓冲液的制备：在25℃下，将0.240g磷酸二氢钠240mL的蒸馏水中，接着用1M的NaOH水溶液调节至pH为8.5，然后定容至250mL得到pH为8.5的20mM的磷酸缓冲溶液。

制备例7

TOF LC/MS基体溶液的制备：在25℃下，将3mL乙腈和7mL的无水甲醇混合后制备而得。

制备例8

1mg/mL的IgY标准溶液的制备：在25℃下，将2mg的IgY溶解于2mL的0.5M硫酸钠水溶液中制得1mg/mL的IgY标准溶液。

制备例9

电泳分离缓冲溶液的制备：将1.950g的磷酸氢二钠、0.731g氯化钠、7.210g十二烷基硫酸钠溶解在240mL蒸馏水中，用1M的NaOH水溶液调节溶液至pH为6.5，定容至250mL制得电泳分离缓冲溶液。

应用例1

用嗜硫色谱整体材料对二硫化合物的特异性富集与分离，并进行CE检测。

1)将1mL的上样液注入嗜硫色谱整体材料A2中平衡60min，接着注入50μL的0.1mg/mL的2S-OH和2OH混合溶液固载30min；

2)混合溶液中的2S-OH被固载后，用20μL的上样液注入嗜硫色谱整体材料A2中进行冲洗，收集最后5μL的样品，得到混合样品中未被富集的组份；

3)经嗜硫色谱整体材料富集后，将洗脱液注入嗜硫色谱整体材料A2中洗脱被富集的混合溶液，收集最先的5μL用于检测；

4)通过毛细管电泳仪(P/ACE^tm MDQ，美国贝克曼公司)对混合样品的洗脱液进行电泳检测，具体的检测条件为：在内径为75μm的熔融石英毛细管(总长度为56.5cm，有效长度为50cm)中进行；红外检测波长为214nm，进样量为5s×0.5psi。

电泳检测结果见图7，该图中a曲线为0.1mg/mL的2S-OH标准溶液的CE图，b曲线为0.1mg/mL的2OH标准溶液的CE图，c曲线为0.1mg/mL的2S-OH和2OH混合溶液CE图，d曲线为混合溶液富集后未被为被固载组份的CE图，e曲线为经嗜硫色谱整体材料富集后，混合样品被洗脱液洗脱下来的组份的CE图。由上图可知，嗜硫色谱整体材料A2能够在高浓度盐的存在下对2S-OH进行有效的富集，在低浓度盐的存在下，2S-OH又被洗脱下来。

通过上述方法对A1、A3-A11进行同样的检测，也可得知，嗜硫色谱整体材料能够在高浓度盐的存在下对2S-OH进行有效的富集，在低浓度盐的存在下，2S-OH又被洗脱下来。

应用例2

用嗜硫色谱整体材料对二硫化合物的特异性富集与分离并进行TOF LC/MS检测。

1)将1mL的上样液注入嗜硫色谱整体材料A2中平衡60min，接着注入50μL的0.1mg/ml的2S-OH和2OH混合溶液固载30min；

2)混合溶液中的2S-OH被固载后，用20μL的上样液注入嗜硫色谱整体材料A2中进行冲洗，收集最后5μL的样品，得到混合样品中未被富集的组份；

3)经嗜硫色谱整体材料富集后，将洗脱液注入嗜硫色谱整体材料A2中洗脱被富集的混合溶液，收集最先的5μL用于检测；

4)将1μL的2S-OH洗脱液溶于1mL甲醇配置用于TOF LC/MS进行质谱表征。

表征结果见图8-12，其中，图8为0.1mg/mL的2S-OH标准溶液的质谱图，图9为0.1mg/mL的2OH标准溶液的质谱图，图10为0.1mg/mL的2S-OH和2OH混合溶液质谱图，图11为混合溶液富集后未被为被固载组份的质谱图，图12为经嗜硫色谱整体材料富集后，混合样品被洗脱液洗脱下来的组份。由上图可知，嗜硫色谱整体材料A2能够在高浓度盐的存在下对混合溶液中的2S-OH进行有效的富集，在低浓度盐的存在下2S-OH又被洗脱下来。

通过上述方法对A1、A3-A11进行同样的检测，也可得知，嗜硫色谱整体材料能够在高浓度盐的存在下对2S-OH进行有效的富集，在低浓度盐的存在下，2S-OH又被洗脱下来。

应用例3

用嗜硫色谱整体材料对IgY的富集并进行CE检测。

1)将1mL的上样液注入嗜硫色谱材料A2中平衡60min，接着注入50μL的1mg/mL的IgY标准溶液固载30min；

2)将20μL的上样液注入嗜硫色谱材料A2将未被固载的IgY冲洗除去，用离心管收集最后5μL冲洗液即制得IgY上样液；

3)将6μL的洗脱液注入嗜硫色谱材料A2将IgY洗脱下来制得IgY洗脱液；

4)通过毛细管电泳仪(P/ACE^tm MDQ，美国贝克曼公司)对IgY洗脱液进行电泳检测，具体的检测条件为：在内径为75μm的熔融石英毛细管(总长度为56.5cm，有效长度为50cm)中进行；红外检测波长为214nm，进样量为5s×0.5psi。

电泳检测结果见图13，该图中a曲线为空白对照组(0.5M的Na₂SO₄溶液)的CE图，b曲线为1mg/mL的IgY标准溶液的CE图，c曲线为IgY上样液的CE图，d曲线为IgY洗脱液的CE图，具有明显的吸收峰，且与标液的出峰时间相同。由上图可知，嗜硫色谱材料A2能够在高浓度盐的存在下对IgY进行有效的富集，在低浓度盐的存在下对IgY进行有效的洗脱。

通过上述方法对A1、A3-A11进行同样的检测，也可得知，嗜硫色谱整体材料能够在高浓度盐的存在下对IgY进行有效的富集，在低浓度盐的存在下，IgY又被洗脱下来。

以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。

另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。

此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。

Claims (12)

1.一种嗜硫色谱整体材料的制备方法，其特征在于，所述制备方法为：将如式(I)所示结构的TEPIC与对氨基苯磺酸SAA于致孔剂中进行开环共聚反应一步制得共聚物poly(TEPIC-co-SAA)，

其中，相对于1重量份的TEPIC，SAA的用量为0.4-0.8重量份，致孔剂的用量为2.5-3.2重量份。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其中，所述致孔剂选自二甲亚砜、十二醇、丙酮、PEG-200、PEG-300和PEG-400中的一种或多种。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其中，所述开环共聚反应至少满足以下条件：反应温度为80-150℃，反应时间为2-24h。

4.根据权利要求1-3中任意一项所述的制备方法，其中，所述方法还包括：将第一有机溶剂对所述共聚物poly(TEPIC-co-SAA)进行萃取或者淋洗。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其中，所述第一有机溶剂选自甲醇、乙腈和乙醇中的一种或多种。

6.根据权利要求1-3、5中任意一项的所述的制备方法，其中，所述开环共聚反应在敞口的玻璃容器或者密封的毛细管中进行。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其中，所述方法还包括：将毛细管进行清洗，然后将清洗后的毛细管在第二有机溶剂的存在下与3-氨基丙基三甲氧基硅烷ATMS进行接触反应。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其中，所述第二有机溶剂选自乙腈、丙酮、四氢呋喃THF和乙醇中的一种或多种。

9.根据权利要求7所述的制备方法，其中，相对于1份重量的ATMS，所述第二有机溶剂的用量为0.5-5份重量。

10.根据权利要求7所述的制备方法，其中，接触反应满足以下条件：反应温度为50-90℃，反应时间为10-15h。

11.一种嗜硫色谱整体材料，其特征在于，所述嗜硫色谱整体材料通过权利要求1-10中任意一项所述的方法制备而得。

12.一种根据权利要求11所述的嗜硫色谱整体材料在对二硫化合物进行特异性的富集与分离中的应用。