CN105381228A - 一种用于调节人体免疫功能的中药保健制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种用于调节人体免疫功能的中药保健制剂,属于中药保健领域。本发明以川芎、制大黄、黑豆、甘草、黄芪、山药、黄精为原料药进行配伍,使各药物的功效产生协同,共凑通达上下内外、行气活血、祛风解毒、养肺健脾益肾、益气养阴固表、全力调节免疫之功能,进而达到全面调节免疫、康体养生的作用。动物实验表明,本发明的中药制剂药物具有增强免疫功能的作用。临床试验证明,本发明的药物对因免疫力异常所致的各种亚健康和疾病均具有很好的调养作用。另外,本发明的药物原料均为可用于保健食品的中草药与药食同源的中草药,无毒无副作用,是一种很好的保健产品。
Description
技术领域
本发明属于中药保健领域,涉及一种用于调节人体免疫功能的中药保健制剂。
技术背景
免疫力是人体自身的防御能力,首先是人体识别和消灭外来入侵的任何异物(病毒、细菌等),其二是处理人体已经衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞,其三是识别和处理体内突变细胞和病毒感染细胞的能力,是人体识别和排除“异己”的正常生理反应,其过高过低都属于异常,人体内执行这一正常生理反应的就是免疫系统。免疫低下则易于被感染或患癌症或患心脑血管疾病;免疫力超常也会产生对身体有害的结果,如引发过敏反应、自身免疫疾病等。
人体免疫力异常是一个极其复杂的问题,其形成因素和机理也多种多样。各种原因使免疫系统不能正常发挥保护作用,极易招致细菌、病毒、真菌等感染,因此免疫力低下最直接的表现就是容易患病。因经常患病则会加重机体的消耗,所以一般有体质虚弱、营养不良、精神萎靡、疲乏无力、食欲降低、睡眠障碍、血液循环不畅等表现。
目前人们调节免疫的方法很多,但各有优势又各有不足,所以研究开发以我国中药材资源优势和祖国医学理论优势为背景的、无毒无副作用的、质优价廉的产品有其巨大社会价值和经济价值。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于调节人体免疫功能的中药保健制剂。
经过我们长期的研究认为,免疫异常的主流问题在于人体上下内外的不畅通、内毒、气阴两虚所致。因此本发明的中药制剂选用川芎、制大黄、黑豆、甘草、黄芪、山药、黄精为原料进行配伍,使各药物的功效产生协同,共凑通达上下内外、行气活血、祛风解毒、养肺健脾益肾、益气养阴固表、全力调节免疫之功能,进而达到全面调节免疫、康体养生的作用。川芎,辛,温。归肝、胆、心包经。功能:活血行气,祛风止痛。本发明以川芎为君药,活血行气、祛风止痛,力求从根本上顺畅通达。制大黄,苦,寒。归脾、胃、大肠、肝、心包经。具有泻热通便功效。本发明以制大黄为臣药,力主上中下三焦,兼顾机体内外,通肠以泻其腑热、凉血以解其脏毒、逐瘀以通其诸经,同时特别使用制大黄避免因为生大黄过于寒凉而伤害脏腑,协助君药通过疏通上下、沟通内外来全面让整个人体功能正常运转起来,从而让免疫力得以调整。黑豆,味甘,性微寒,性平、入脾、肾经。功用:补肾益阴,健脾利湿,除热解毒。现代医学研究证明,黑豆营养丰富,含有蛋白质、脂肪、维生素、微量元素等多种营养成分,同时又具有多种生物活性物质,如黑豆色素、黑豆多糖和异黄酮等。甘草,甘,平。归心、肺、脾、胃经。功能:补脾益气,清热解毒,祛痰止咳,缓急止痛,调和诸药。本发明以黑豆、甘草为佐药,祛风解毒、活血利水以达疏通目的,补脾益气扶正助力疏通。黄芪,甘,温。归肺、脾经。功能:补气固表,利尿托毒,排脓,敛疮生肌。山药,甘、平、无毒。归脾、肺、肾经。具有滋养强壮,助消化,敛虚汗,止泻之功效。黄精,甘、平,归脾、肺、肾经,功效:补气养阴,健脾,润肺,益肾。本发明以黄芪、山药、黄精共为使药,补气养阴固表、益肺健脾补肾,扶正立足于上中下三焦,使全组方结构更加完善。全方合力,通达上下内外、行气活血、祛风解毒、养肺健脾益肾、益气养阴固表、全面调节免疫之功能。
本发明中药制剂的各原料药按以下重量份配比:川芎28-35份,制大黄20-26份,黑豆12-18份,甘草12-18份,山药3-9份,黄芪3-9份,黄精3-9份。
优选配比:川芎29-32份,制大黄20-23份,黑豆14-17份,甘草12-16份,山药5-7份,黄芪5-7份,黄精5-7份。
最佳配比:川芎30份,制大黄22份,黑豆15份,甘草15份,山药6份,黄芪6份,黄精6份。
本发明的药物可以按中药药剂学的常规工艺和辅料制备成各种内服制剂。如胶囊剂、软胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、丸剂(包括水丸、蜜丸、糖衣丸、胶丸、肠溶丸或滴丸)或口服液。
下面通过动物试验报告说明发明药物增强免疫功能的效果。
1材料与方法
1.1样品来源及处理
本发明片剂药物(从生品片),人群推荐日摄入量为2.4 g /60kg BW(即0.04 g/kg BW)。
样品配制:准确量取受试样品4g、8g、12g,分别用蒸馏水定容至200mL,供低、中、高剂量组小鼠灌胃用。
1.2实验动物及环境
SPF级昆明种雌性小鼠,18-22g,200只,由湖北省实验动物研究中心提供。实验动物生产许可证号:SCXK(鄂)2008-0005;实验动物使用许可证号:SYXK(鄂)2008-0014。动物饲养室温度为20-25℃,湿度为40-70%。
1.3剂量分组
按人群推荐日摄入量2.
4g/60kg BW扩大10、20、30倍设置低、中、高三个剂量组,即设计0.4 g、0.8g、1.2g/kg BW,共分五个实验组,每实验组包括阴性对照组、低、中、高剂量组,各剂量组实验动物数为10只。免疫实验一组进行迟发型变态反应实验;免疫实验二组进行淋巴器官/体重比值测定和碳廓清实验;免疫实验三组进行ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验和NK细胞活性测定;免疫实验四组进行血清溶血素的测定和抗体生成细胞检测;免疫实验五组进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验。小鼠连续灌胃30天后开始试验。各实验组均按0.20ml/10g BW容量经口灌胃给予。
1.4试验方法
1.4. 1 ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验
方法:无菌取脾,置于盛有适量无菌Hank’s 液平皿中,用镊子轻轻将脾磨碎,制成单个细胞悬液。经200目筛网过滤,用Hank’s液洗2次,每次离心10min(1000r/min)。然后将细胞悬浮于lmL的完全培养液中,用台酚兰染色计数活细胞数(应在95%以上),调整细胞浓度为3×10s个/mL。将每一份脾细胞悬液分两孔加入24孔培养板中,每孔lmL, —孔加75µLConA液(相当于7.5µg/mL),另一孔作为对照,置5%C02
, 37 °C C02孵箱中培养72h。培养结束前4h,每孔轻轻吸去上清液0.7mL,加入0.7mL不含小牛血清的 RPMI1640培养液,同时加入MTT (5mg/mL) 50µL/孔,继续培养4h。培养结束后,每孔加入lmL酸性异丙醇,吹打混匀,使紫色结晶完全溶解。然后分装到96孔培养板中,每个孔作3个平行孔(100µL/孔),用酶标仪以570nm波长测定光密度值。
1. 4.
2二硝基氟苯(DNFB)诱导迟发型变态反应(DTH)
方法:耳肿胀法。用1%DNFB(以1:1的丙酮麻油溶液配制)致敏小鼠后,第5天再用DNFB 攻击右耳,24h后处死动物剪下左右耳壳用打孔器取下直径8mm的耳片,称重,以左右耳的重量之差来表示DTH的程度。
1.4.3血清溶血素的测定
方法:血凝法。取羊血,用生理盐水洗涤3次,每次离心(2000r/min) lOmin。将压积 SRBC用生理盐水配成2% (v/v)的细胞悬液,每只鼠腹腔注射0.2mL进行免疫。4天后,摘除眼球取血于离心管内,放置约lh,将凝固血与管壁剥离,使血清充分析出,2000r/min 离心l0min,收集血清。
凝集反应:用生理盐水将血清倍比稀释,将不同稀释度的血清分别置于微量血凝实验板内,每孔100µL,再加入100µL 0.5% (v/v) SRBC悬液,混匀,放入湿润的平盘内并加盖,于37℃温箱孵育3h,观察血球凝集程度。根据血清凝聚程度的级别计算出抗体积数。
1.4.4腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验
方法:半体内法。制备20%的鸡红细胞悬液;每只鼠腹腔注射lmL该悬液,30min后处死动物,将其仰位固定于鼠板上,开腹,经腹腔注入生理盐水2mL,转动鼠板lmin,然后吸出腹腔洗液lmL,平均分滴于2片载玻片上,37℃温育30min;育毕用生理盐水漂洗,晾干,以体积比1:1的丙酮甲醇溶液固定,4%Giemsa-磷酸缓冲液染色3min,再用蒸馏水漂洗晾干。油镜下计数100个巨噬细胞,按下式计算吞噬率和吞噬指数:
吞噬率(%)=吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/计数的巨噬细胞数×100%
吞噬指数=被吞噬的鸡红细胞总数/计数的巨噬细胞数。
1.4.5小鼠碳廓清试验
方法:按体重从小鼠尾静脉注入稀释的印度墨汁(10mL/kg),待墨汁注入,立即计时注入墨汁后2、l0min,分别从内眦静脉丛取血20µL,并立即将其加到 2mL0.1% Na2CO3溶液中。各吸0.lmL于96孔酶标板中,用酶标仪在600nm波长处测光密度值(OD),以Na2CO3溶液作阴性对照。
将小鼠处死,取肝脏和脾脏,用滤纸吸干脏器表面血污,分别称重。以吞噬指数表示小鼠碳廓清的能力。按下式计算吞噬指数a。受试样品组的吞噬指数显著高于对照组,可判定该项实验结果阳性。
K=LgOD1-
lgOD2 /t2-t1
吞噬指数a =体重/(肝重+脾重)×K1 /3
1.4. 6抗体生成细胞检测
取脱纤维的羊血,用生理盐水洗涤3次,每次离心(2000r/min) 10min,
每只鼠经腹腔注射2%(v/v)SRBC 0.2mL。将SRBC免疫4天后的小鼠颈椎脱臼处死,取出脾脏,放在盛装有Hank’ s液的小平皿内,轻轻磨碎脾脏,制成细胞悬液,经200目筛网过滤,离心 (1000/min) lOmin,用Hank’ s液洗2遍,最后将细胞悬浮在5mLRPMI1640培养液中,计数细胞,并将细胞浓度调整为5×106个/mL。
空斑的测定:将表层培养基(lg琼脂糖加双蒸水至100mL)加热溶解后,放入45-50℃水浴保温,与等量pH=7.2~7.4,2倍浓度的Hank’s液混合,分装小试管,每管0.5mL,再向管内加50µL
10%SRBC(v/v,用SA缓冲液配制),20µL脾细胞悬液(5×106个/mL),迅速混匀,倾倒于己刷琼脂糖薄层的玻片上,做平行片,待琼脂凝固后,将玻片水平扣放在片架上,放入二氧化碳培养箱中孵育1.5h,然后用SA缓冲液稀释的补体(1:8)加入玻片架凹槽内,继续温育1.5h后,计数溶血空斑数。
1.4.7
NK细胞活性测定
方法:乳酸脱氢酶(LDH)测定法。
靶细胞的传代(YAC-1细胞):实验前24h将靶细胞进行传代培养。用前以Hank’ s液洗3次,用RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为4×105个/mL。
脾细胞悬液的制备(效应细胞):无菌取脾,置于盛有适量无菌Hank’ s液的小平皿中,用镊子轻轻将脾磨碎,制成单细胞悬液。经200目筛网过滤,用Hank’s液洗2次,每次离心10min
(1000r/min)。弃上清将细胞浆弹起,加入0.5mL灭菌水20秒,裂解红细胞后再加入0.5mL2倍Hank’ s液及 8mLHanks液,1000r/min,10min离心,用lmL含10%小牛血清的RPMI1640完全培养液重悬,用1%冰醋酸稀释后计数(活细胞数应在95%以上),用台酚兰染色计数活细胞数(应在95%以上),最后用RPM11640完全培养液调整细胞浓度为2×107个/mL。
NK细胞活性检测:取靶细胞和效应细胞各100µL(效靶比50:1),加入U型96孔培养板中:靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液各100µL,靶细胞最大释放孔加靶细胞和1%NP40各100µL;上述各项均设三个平行孔,于37℃、5%CO2培养箱中培养4h,然后将96孔培养板以1500r/min离心5min,每孔吸取上清100µL置平底96孔培养板中,同时加入LDH基质液100µL,根据室温不同反应3〜10min,每孔加入lmol/L的HCL30µL,在酶标仪490nm处测定光密度值(OD)。
按下式计算NK细胞活性,受试样品组的NK细胞活性显著高于对照组的NK细胞活性,即可判定该项实验结果阳性。
NK细胞活性(%)= (反应孔OD-自然释放孔OD)/
(最大释放孔OD-自然释放孔OD)×100
%
2结果
2.1从生品片对小鼠体重的影响:从生品片对小鼠体重无明显影响,各剂量组与阴性对照组比较P>0.05,见表1、表2、表3、表4、表5。
2.2从生品片对动物淋巴器官/体重比值的影响:见表6。从生品片对小鼠胸腺/体重比值和脾脏/体重比值无明显影响,各剂量组与阴性对照组比较均为P>0.
05。
2.3从生品片脾淋巴细胞转化实验结果:从生品片高剂量组能显著性增强ConA诱导的脾淋巴细胞增殖能力,与阴性对照组比较P<0.05,见表7。
2.4从生品片对小鼠迟发型变态反应的影响:从生品片高剂量组能显著性增强小鼠对DNFB诱发的DTH反应,与阴性对照组比较p<0.05,见表7。
2.5从生品片对小鼠血清溶血素滴度水平的影响:双馨堂牌乐胶囊高剂量组能显著性升高血清溶血素含量,与阴性对照组比较P<0.05。见表8。
从生品片腹腔巨噬细胞吞嗤鸡红细胞实验结果:从生品片高剂量
组能明显提高吞噬率、吞噬指数,与阴性对照组比较均P<0.05,见表9。
2.8从生品片抗体生成细胞检测实验结果:从生品片高剂量组能明显提高抗体生成细胞数量,与阴性对照组比较P<0.05,见表11。
2.9从生品片NK细胞活性实验结果:从生品片各剂量组均不能明显增强小鼠NK细胞活性,与阴性对照组比较P>0.05,见表12。
3结论
根据送检单位提供的人群推荐日摄入量2.4g/60kg
BW扩大10、20、30倍设置低、中、高三个剂量组,即0.4 g、0.8g、1.2g/kg BW,另设阴性对照组。采用SPF级昆明种小鼠,连续灌胃给予,30天后开始检测有关指标。实验结果以P<0.05判断为差异有显著性,结果显示:与阴性对照组比较,1)各剂量组小鼠体重、淋巴器官/体重比值差异均无显著性;2)高剂量组能明显增强ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力;3)高剂量组能明显增强二硝基氟苯诱导的小鼠迟发型变态反应;4)高剂量组能明显升高小鼠血清溶血素含量;5)高剂量组能明显增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能;6)高剂量组能明显增强小鼠碳廓清能力;7)高剂量组能明显增强抗体生成细胞能力;8)各剂量组均不能显著性增强小鼠NK细胞活性。按照增强免疫力功能作用评价程序规定,该受试物具有增强免疫力功能作用。
临床试验证明,本发明的药物对因免疫力异常所致的各种亚健康和疾病均具有很好的调养作用。另外,本发明的药物原料均为可用于保健食品的中草药与药食同源的中草药,无毒无副作用,同时是一种很好的保健产品。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明药物的原料配比、制备及用法方作进一步说明。
实施例1、颗粒剂药物的制备
原料配比:川芎30份,制大黄22份,黑豆15份,甘草15份,山药6份,黄芪6份,黄精6份。
制备工艺:按药剂学制备颗粒剂的常规工艺和辅料制备而成。规格:5g/袋,20袋/盒。
用法用量:一日2次,一次1袋。疗程:3月1周期,一般观察3周期。
实施例2、胶囊剂药物的制备
原料配比:川芎29份,制大黄20份,黑豆14份,甘草12份,山药5份,黄芪5份,黄精5份。
制备工艺:按药剂学制备胶囊剂的常规工艺和辅料制备而成。每粒0.3g。
使用方法:一日2次,一次服3粒。疗程:3月1周期,一般观察3周期。
实施例3、片剂药物的制备
原料配比:川芎32份,制大黄23份,黑豆17份,甘草16份,山药7份,黄芪7份,黄精7份。
制备工艺:按药剂学制备片剂的常规工艺和辅料制备而成。0.6g/片。
使用用法:每天两次,每次2片。疗程:3月1周期,一般观察3周期。
实施例4、丸剂药物的制备
原料配比:川芎28份,制大黄20份,黑豆12份,甘草12份,山药3份,黄芪3份,黄精3份。。
制备工艺:按药剂学制备丸剂的常规工艺和辅料制备而成。每粒0.1g。
使用方法:每天两次,每次4粒。疗程:3月1周期,一般观察3周期。
实施例5、软胶囊剂的制备:
原料配比:川芎35份,制大黄26份,黑豆18份,甘草18份,山药9份,黄芪9份,黄精9份。
制备工艺:按药剂学制备丸剂的常规工艺和辅料制备而成。每粒0.05g。
使用方法:每天两次,每次8粒。疗程:3月1周期,一般观察3周期。
上述各实施例中,各原料配比均以重量份计。
Claims (4)
1.一种用于调节人体免疫功能的中药保健制剂,是以川芎、制大黄、黑豆、甘草、黄芪、山药、黄精为原料药,按药剂学的常规工艺和辅料制备成的内服制剂。
2.如权利要求1所述一种用于调节人体免疫功能的中药保健制剂,其特征在于:所述各原料药按以下重量份进行配比:川芎28-35份,制大黄20-26份,黑豆12-18份,甘草12-18份,山药3-9份,黄芪3-9份,黄精3-9份。
3.如权利要求1所述一种用于调节人体免疫功能的中药保健制剂,其特征在于:所述各原料药按以下重量份进行配比:川芎29-32份,制大黄20-23份,黑豆14-17份,甘草12-16份,山药5-7份,黄芪5-7份,黄精5-7份。
4.如权利要求1所述一种用于调节人体免疫功能的中药保健制剂,其特征在于:所述各原料药按以下重量份进行配比:
川芎30份,制大黄22份,黑豆15份,甘草15份,山药6份,黄芪6份,黄精6份。
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CN201510983816.5A Pending CN105381228A (zh) | 2015-12-24 | 2015-12-24 | 一种用于调节人体免疫功能的中药保健制剂 |
Country Status (1)
Country | Link |
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CN (1) | CN105381228A (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105725016A (zh) * | 2016-04-18 | 2016-07-06 | 杜润生 | 一种黑豆甘草保健饮品及其制备方法 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1476854A (zh) * | 2002-08-19 | 2004-02-25 | 郭彦君 | 治疗糖尿病的药茶 |
CN104208348A (zh) * | 2014-08-08 | 2014-12-17 | 兰州古驰生物科技有限公司 | 一种具有调节免疫功能的中药制剂 |
CN104524184A (zh) * | 2014-12-15 | 2015-04-22 | 新乡医学院第一附属医院 | 一种抗hpv和提高免疫机能的中药冲剂及其制备方法 |
-
2015
- 2015-12-24 CN CN201510983816.5A patent/CN105381228A/zh active Pending
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
刘若缨 等: "中药治疗复发性生殖器疱疹及其免疫调节作用的研究", 《中医药学刊》 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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CN105725016A (zh) * | 2016-04-18 | 2016-07-06 | 杜润生 | 一种黑豆甘草保健饮品及其制备方法 |
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