CN105338995A - 包含pli-ob变体的局部组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种局部组合物,其包含PLI-OB蛋白的变体,还涉及该组合物的制备方法。
Description
本发明涉及化妆品或治疗用途的局部组合物的制备领域,所述局部组合物含有与感兴趣的靶标相结合的活性成分。
现存一些皮肤病,如湿疹、银屑病、扁平苔藓和自身免疫大疱性皮肤病、或皮肤癌(黑色素瘤)。为治疗这些疾病,可行的是可使用局部组合物,即直接在皮肤病灶(或头皮病灶)处使用、并在其使用部位局部起作用的组合物。
此外,该类局部组合物可满足眼部疾病的治疗,而无论眼部疾病是否与代谢失调(尤其是由年龄所导致)相关或与眼部感染(严重结膜炎、角膜炎和角膜溃疡)相关。
无论何种疾病,一般存在感兴趣的治疗靶标,药物在该靶标发挥作用。此靶标可以是细胞受体,或是微生物的表面蛋白。一般来说,看似可行的是,让组合物能够在作用部位应用活性成分,使活性成分直接作用于感兴趣的治疗靶标,尽可能地避免通过系统性通路的任何途经。然而,抗体不易渗透入皮肤屏障或角膜屏障。
专利申请WO2007/139397描述了对pli-OB蛋白的文库的利用,其中OB结构域通过在蛋白与其天然配体结合的这个结构域中引入突变进行修饰。
专利申请WO2008/068637描述了使用基于Sac7d蛋白的文库来获得对感兴趣的靶标具有亲和性(affinité)的配体。WO2008/068637公开的方法包括组合文库的产生,除了存在某些导致产生野生型蛋白变体的随机突变以外(随机突变在这种野生型pli-OB蛋白结合位点的某些氨基酸上表现出突变),该组合文库包含大量具有相同序列的DNA(法语缩写为ADN)分子。具体而言,在WO2008/068637中,野生型pli-OB蛋白是Sac7d蛋白,为产生变异向Sac7d蛋白中引入突变,尤其是在选自以下的氨基酸之处:K7、Y8、K9、K21、K22、W24、V26、M29、S31、T33、T40、R42、A44和S46,或者在其他氨基酸之处,如V26、G27、K28、M29、S31、R42、A44、S46、E47和K48。这些氨基酸基于SEQIDNo.1所示的Sac7d序列。
专利申请WO2012/150314公开了Sac7d家族中一个蛋白的突变至同家族另一蛋白的可移植性。这一移植意味着从Sac7d家族的一个蛋白的突变体构建所述家族的另一蛋白的突变体,具体地,其已经可以通过实施WO2008/068637的方法实现。
Sac7d家族定义为与Sac7d家族相关的,相当于从嗜极(extrémophiles)细菌分离出的7kDa的DNA结合蛋白家族。WO2008/068637中对这些蛋白和该家族进行了详细描述。因此,在本发明中,当一种蛋白具有与序列SEQIDNo.8相对应的序列时,所述蛋白属于Sac7d家族。具体而言,该家族包含源自嗜酸热硫化叶菌(Sulfolobusacidocaldarius)的Sac7d或Sac7e蛋白、源自硫磺矿硫化叶菌(Sulfolobussolfataricus)的Sso7d蛋白、源自极端嗜热古菌(Sulfolobustokodaii)的DBP7蛋白、源自希氏硫化叶菌(Sulfolobusshibatae)的Ssh7b蛋白、源自希氏硫化叶菌(Sulfolobusshibatae)的Ssh7a蛋白以及源自硫磺矿硫化叶菌(Sulfolobussolfataricus)的p7ss蛋白。
Pli-OB蛋白是现有技术已知的。上述文件以及Arcus(CurrOpinStructBiol.2002Dec;12(6):794-801)中对其进行了详细描述。Pli-OB是具有五个beta(β)折叠的柱状结构。大多数pli-OB蛋白针对其天然配体使用同样的结合界面,该天然配体可能是寡糖、寡核苷酸、蛋白质、金属离子或催化底物。该结合界面主要包含位于β折叠的残基。位于环内的某些残基也可能参与pli-OB蛋白与其天然配体的结合。因此,申请WO2007/139397和WO2008/068637和Arcus文件(2002,如前述)描述了pli-OB-蛋白结构域与其天然配体相结合。从而,WO2008/068637详细描述了如何鉴定pli-OB蛋白的结合结构域。
使用网址WU-Blast2(http://www.ebi.ac.uk/blast2/index.html)(Lopez等人,2003,NucleicAcidsRes31,3795-3798)、T-COFFEE(http://www.ch.embnet.org/software/TCoffee.html)(Notredame等人,2000,JMolBiol302,205-217)和DALIlite(http://www.ebi.ac.uk/DaliLite/)(Holm和Park,2000,Bioinformatics16,566-567),将具有pli-OB结构域的蛋白的几个序列和3D结构叠加,可以鉴定结合结构域的位置,以及尤其是可被修饰的氨基酸的位置。取Sac7d的序列(SEQIDNO:1)作为参照,具有残基V2、K3、K5、K7、Y8、K9、G10、E14、T17、K21、K22、W24、V26、G27、K28、M29、S31、T33、D36、N37、G38、K39、T40、R42、A44、S46、E47、K48、D49、A50和P51。仍以Sac7d的序列作为参照,可缺失的残基是:A59、R60、A61和E64。
可按照WO2008/068637所述的,鉴定其他pli-OB蛋白的结合结构域。该申请表明,使用DALI网址(http://www.ebi.ac.uk/dali/interactive.html)(Holm和Sander,1998,NucleicAcidsRes26,316-319)可以进行pli-OB蛋白或结构域(在该申请中使用了包括Sac7d在内的10个结构域)的3D结构叠加。因此,对任何pli-OB蛋白(或任何pli-OB结构域),很容易鉴定参与结合位点并与上述Sac7d的氨基酸相对应的氨基酸。
WO2008/068637的教导还表明,在pli-OB蛋白尤其是Sac7d家族蛋白的环内可任选插入氨基酸;具体而言,在环3内插入1至15个氨基酸残基(WO2008/068637的附图1b和2中所限定的),例如在Sac7d的残基25至30的区域,优选是残基27和28之间;在环4内插入1至15个氨基酸残基(WO2008/068637的附图1b和2中所限定的),例如在Sac7d的残基35至40的区域,优选残基37和38之间;以及在环1内插入1至20个残基(WO2008/068637的附图1b和2中所限定的),例如在Sac7d的残基7至12的区域,优选是残基9和10之间。
推而广之,在本申请中,术语“pli-OB蛋白”也包含可从更多的复合蛋白质中分离出来的具有pli-OB的结构域。具体地,在申请WO2007/139397和WO2008/068637中对这些pli-OB结构域有更为详细的描述。
WO2008/068637所述的方法的优势在于其可通过筛选组合文库获得pli-OB蛋白的变体,该组合文库包含或表达大量的变体,在所述变体中一定数量的氨基酸被随机化,即被随机氨基酸所取代。对这些文库进行筛选使得能够从所产生的组合文库中鉴定这些蛋白的变体,所述变体通常以较强的亲和性特异性地结合兴趣靶标(申请WO2008/068637实际描述了纳摩尔级的亲和性)而不结合野生型蛋白的天然配体。
本发明人已表明pli-OB蛋白能透过眼部屏障或皮肤屏障,因而可用于局部组合物。优选使用与感兴趣的靶标相结合的pli-OB蛋白的变体,所述感兴趣的靶标参与病理过程,尤其是眼科或皮肤的过程。
因此,本发明涉及一种局部组合物,其包含pli-OB蛋白或野生型pli-OB蛋白的变体,所述变体在所述野生型pli-OB蛋白与其天然配体相结合的界面上具有5至32个突变残基。在一个具体的实施方案中,所述变体特异性结合除所述天然配体以外的感兴趣的靶标。因此,该变体一般通过实施WO2008/068637或WO2007/139397所述方法得以鉴定。实际上,实施上述两专利申请所述的方法可鉴定结合任何感兴趣的靶标的任何pli-OB蛋白的变体。为局部使用,该组合物一般还含有药学或化妆品可接受的赋形剂。
如前所述,所述的野生型pli-OB蛋白还包含pli-OB结构域。优选地,在本申请中所使用的变体包含最多150个氨基酸,更优选是最多100个氨基酸。在一个具体的实施方案中,其包含最多70个氨基酸。
在所述变体(相对于野生型蛋白)中突变残基的数量在5至32个之间。在其他实施方案中,与野生型pli-OB蛋白(或结构域)相比,这些变体优选含有至少5个,更优选至少8个,甚至更优选至少10个,但一般少于32个,更优选少于24个,甚至更优选少于20个或少于15个取代氨基酸。优选地,相对于野生型蛋白,8、9、10、11、12或13个氨基酸是突变的。这些突变氨基酸位于野生型pli-OB蛋白与其天然配体的结合位点。它们一般分布于该结合结构域整体。在给定的该结合结构域的结构中,在β折叠处发现一些突变残基(一般数个,尤其是2或3个)。
在一个具体的实施方案中,这些变体在连接pli-OBβ折叠的环内还包含氨基酸插入。从而,1至15个氨基酸可插入环1和/或环4和/或环3(与WO2008/068637采用相同的方式给环编号)。
在一个具体的实施方案中,所述野生型pli-OB蛋白选自:源自嗜酸热硫化叶菌的Sac7d或Sac7e、源自硫磺矿硫化叶菌的Sso7d、源自极端嗜热古菌的DBP7、源自希氏硫化叶菌的Ssh7b、源自希氏硫化叶菌的Ssh7a和源自硫磺矿硫化叶菌的p7ss。
因此,本发明的局部组合物中所用的变体是与以上蛋白比较。
Sac7d、Sso7d、Sac7e、Ssh7b、Ssh7a、DBP7和Sis7蛋白的各自序列,分别由SEQIDNo.1至SEQIDNo.7所示。
这种Sac7d家族的蛋白的变体被称为Nanofitine。因此,本发明优选在SEQIDNo.1至SEQIDNo.7所示蛋白的变体上实施,尤其是Sac7d的变体。
根据本发明,所述组合物中变体的浓度一般高于10ng/ml并低于600mg/ml。实际上,在眼部应用的情况中,蛋白浓度无需很高。因此,一般小于10mg/ml,优选小于1mg/ml,优选小于500ng/ml,或小于250ng/ml,或者甚至小于100ng/ml。同样地,尽管浓度可以低至10ng/ml,但优选是高于50ng/ml,或者甚至高于100ng/ml。
应用于皮肤(或头皮)的局部使用情况下,产品浓度通常可以较高。因此,浓度一般高于10mg/ml,优选高于50mg/ml,或者优选高于100mg/ml,甚至更优选高于200mg/ml。
根据本发明,组合物中存在的变体特异性结合感兴趣的靶标。实际上,通过WO2008/068637或WO2007/139397所述的方法,已经针对它与所述感兴趣的靶标的特异性结合进行了筛选。此外,这些专利申请所述的方法可以获得微摩尔级(WO2007/139397)或纳摩尔级(WO2008/068637)的亲和性。
根据期望治疗的疾病选择感兴趣的靶标。因此,可以提及任何抗原、抗体、细胞蛋白、循环蛋白、或者肽。也可靶向药物的活性成分,或者特定的核酸。尤其考虑的是,感兴趣的靶标是白介素、细胞因子、细胞因子或白介素受体、癌基因编码的蛋白、微生物表面蛋白或者微生物脂多糖。
在一个具体的实施方案中,旨在将根据本发明所述局部组合物应用于皮肤。
在另一个实施方案中,旨在于眼部水平应用所述局部组合物。
根据本发明所述局部组合物的形式为常规的,并具体取决于施用部位(皮肤或眼部)。
因此,该组合物可以是液体形式(具体为眼部应用的眼洗剂)、糊形式或固体形式。其形式可以是霜剂、软膏剂、油膏剂、粉剂、凝胶剂、乳剂(水包油型或油包水型)或泡沫剂。任选含有机溶剂(如乙醇)的水基性制剂尤其适用于这些组合物。
所述组合物的形式也可以是吸收卫生棉塞(tamponimbibé)、擦剂(lingette)、喷雾剂、气雾剂、洗剂、棒或洗发剂。
根据本发明所述的组合物,其形式也可以是可控制活性成分释放的微球或纳米球的悬液、或脂质或聚合物囊泡的悬液、或聚合物贴片和水凝胶的悬液。这种用于局部使用的组合物可以是无水形式、水性形式或者乳剂的形式。
在一个具体的实施方案中,根据本发明所述的局部组合物是贴剂(透皮系统)。尤其是,所述系统允许控制活性成分的释放。
所述系统通常包含不可渗透感兴趣的物质(在本发明中为pli-OB蛋白的变体)的保护片(支撑层)、包含感兴趣的物质的储集层(réservior)、控制感兴趣的物质递送至皮肤的元件,该元件通过(压敏)粘接层使得该装置可固定于皮肤上、以及可以在使用于皮肤前分离的保护层。可以通过同一元件完成数个功能(如储集层、控制释放与粘接)。这种装置在现有技术中是已知的。
根据本发明所述组合物所使用的pli-OB蛋白的变体,可以通过固相化学合成或基因重组制备。例如,可以采用AppliedBiosystems自动肽合成仪mod.433A.、或者通过利用芴甲氧羰基团对氨基酸的α-氨基功能暂时性保护的Fmoc化学法进行化学合成。
然而,优选通过基因工程方法,具体是通过在表达载体中整合编码所述多肽的核酸序列以制备用于本发明的变体。随后将该表达载体引入宿主细胞(细菌,例如大肠杆菌尤其适合),宿主细胞在允许合成多肽的培养条件下培养(尤其使用表达载体中多肽上游的诱导型启动子)。随后回收已合成的多肽。然后,在多肽的N或C端位置可连接任何类型的分子。
本领域技术人员知晓用于制备多肽的方法,其详细描述于Sambrook,Fritsch和Maniatis编著的《MOLECULARCLONING,ALABORATORYMANUAL》第二版。
根据本发明所述的组合物可仅包含pli-OB蛋白的变体,或还包含其他活性成分。因而,该组合物还可包含选自以下的至少一种试剂:抗菌剂、抗寄生虫剂、抗真菌剂、抗炎剂、止痒剂、麻醉剂、抗病毒剂、角质分离剂、自由基清除剂、抗皮脂溢剂、去屑剂和抗痤疮剂,以及调节皮肤的分化和/或增殖和/或色素沉着的试剂。
这种组合物还可含有pH调节剂,尤其是使pH调节在pH=7左右。
Pli-OB蛋白的变体也能够和活性蛋白相融合,尤其是为了延长其半衰期。
根据本发明所述的组合物也可在体内诊断方法中使用。因而,在一个具体的实施方案中,pli-OB蛋白的变体与检测剂或造影剂偶联。具体而言,这使得能够跟踪这种造影剂,并确定pli-OB蛋白的变体所结合的器官(进而表明感兴趣的靶标的存在)。
本发明还涉及一种制备局部组合物的方法,其包括为局部使用,将野生型pli-OB蛋白的变体与药学或化妆品可接受的赋形剂混合的步骤。
在一个具体的实施方案中,所述组合物旨在应用于皮肤。因此,赋形剂优选允许组合物的制剂能够涂布于皮肤,如软膏剂油膏剂或洗剂。
在另一个实施方案中,所述组合物旨在应用于眼部,并相应地选择其赋形剂。因此,尤其制备眼洗剂和滴眼剂。
根据本发明,本发明还涉及一种作为药物的局部组合物,其包含野生型pli-OB蛋白的变体,所述变体在所述野生型pli-OB蛋白与其天然配体相结合的界面具有5至32个突变残基。在这个具体的情况中,所述变体特异性结合感兴趣的靶标,该靶标为治疗性靶标。
本发明还涉及一种根据本发明用于治疗皮肤的或眼科的失调或疾病的局部组合物。在本实施方案中,所使用的pli-OB蛋白的变体靶向于(结合于)目标疾病的致病因子或该疾病相关的治疗靶标。
因此,在本实施方案中,pli-OB蛋白的变体具体通过WO2008/068637所述筛选方法选择,所述变体结合参与期望治疗的疾病或失调的治疗靶标(致病效应物或因子),并且该变体制成局部使用的组合物。
本发明还涉及一种化妆品组合物,其包含根据本发明所述的局部组合物,还涉及根据本发明所述的局部组合物的化妆品用途。
本发明还涉及一种治疗皮肤的或眼科失调或疾病的方法,其特征在于,局部使用(根据需要应用在皮肤上或在眼部水平)根据本发明所述的局部组合物,所述局部组合物包含优选靶向于所述疾病或所述失调的特征性致病因子或治疗靶标的pli-OB蛋白。
实施例
在所有实施例中,使用的是如前定义的nanofitine,即Sac7d的变体,其是根据与WO2008/068637中所描述方法相似的方法,通过针对感兴趣的靶标筛选组合文库而获得的。由于这些实施例的目的在于证明pli-OB蛋白具体地是nanofitine能够透过皮肤屏障或渗透入眼,而不依赖于蛋白的序列,因此nanofitine的序列和感兴趣的靶标并非特定的。
实施例1:nanofitine透过人类皮肤模型的测试
使用的测试是Franz池扩散测试。
使用Franz池离体确定外源性物质的皮肤渗透性,并实际测量沉积在皮肤表面的构成活性成分的分子通过皮肤屏障各层的速率。
将含待研究的分子的溶液放置于装置的“供给”单元。该分子随后扩散通过一层膜(在皮肤的情况下),并收集于“接收”单元。
在实践中,去除皮下组织(脂肪组织)后,皮肤块放置于扩散池,称之为Franz池。深至真皮层的面(lafaceprofondeduderme)与预期用来替换皮肤间质液的接收溶液接触。含待研究的分子的溶液置于皮肤上部。为检测已透过脱脂皮肤的分子,以固定的时间间隔对接收溶液进行采样,并用新的溶液更换所述接收溶液。
对采集的接受相中存在的物质进行检测,使得能够确定已透过皮肤的分子的量,或者流速(以纳克/cm2/小时计)。
对Sac7d变体的文库筛选出对参与皮肤或眼部疾病的三种不同感兴趣的靶标具有亲和性的nanofitine进行检测。在细菌系统中制备这些nanofitine,并因而结合不同的配体。
使用源自同一供体的六块解冻后的人类皮肤块(厚度1mm)。
接收单元装有PBS(磷酸盐缓冲液,pH7.4,5.8ml)。膜放置于接收介质上。
含有5mg/mlnanofitine的每种制剂100μl加于膜上。交换表面积为2cm2.
根据人类皮肤32℃的表面温度,在整体实验过程中,将接收侧温度维持在35℃。
在以下每一采样时间:0h和24h,在接收侧取500μl液体,并替代为PBS。
在t=24h时,在供给侧,使用5mlPBS冲洗皮肤。
取样期结束时,将2cm2的皮肤从Franz池装置中取出,置于1mlPBS中超声波浴。
使用可测量两蛋白间相互作用的BioLayer干涉测量技术,测量采集的每一样本中nanofitine的浓度。在这种情况下,通过识别预先与所述nanofitine偶联的多聚组氨酸标签,测量nanofitine的含量。
结果如下:
关于nanofitine,在接收侧检测到的nanofitine的百分比分布于8%至17%之间。以咖啡因作为皮肤渗透标准,在本实验中其具有10%量级的渗透。
这些结果表明,nanofitine确可透过人类皮肤,并且该结果与构建nanofitine及其结合所针对的靶标无关。
实施例2:Nanofitine透过兔角膜的测试
使用三只雄性兔子(勃艮第兔(FauvedeBourgogne))。
原理与皮肤渗透相同。
使用两个反应室进行每种制剂(NF1、NF2和NF3)的渗透率研究。
含有每种nanofitine的3ml制剂置于反应室的供给侧,接收侧放置3mlPBS。新鲜采集的角膜组织置于两半个室之间。
整个研究过程中维持温度在37℃,并通过持续灌流卡波金(carbogène)(95%O2,5%CO2)提供氧处理。交换表面积为0.5cm2。
在以下每一采样时间:0h、2h和4h,在接收侧取500μl液体,并替代为PBS。
·在供给侧取100μl液体,不替代。
取样期结束时,将0.5cm2角膜从反应室中取出,并用手术刀刮擦。向均质化的样本中添加1mlPBS。
使用能够测量两个蛋白之间相互作用的BioLayer干涉测量技术,在每个取得的样本上测量nanofitine的浓度。在这种情况下,通过识别预先与所述nanofitine偶联的多聚组氨酸标签,测量nanofitine的含量。
结果如下:
关于nanofitine,在接收侧检测到的nanofitine的量使得能够计算出介于5x10-6至2x10-6间的表观渗透率(cm/s)。与该类型实验方案所使用的标准品相比较,所检测的nanofitine表现出与诺氟沙星(在本实验模型中为1.1x10-5)具有可比性的渗透率,诺氟沙星是对角膜表现出良好渗透性的分子,其在眼科中用在眼洗剂中用于由诺氟沙星敏感的微生物引起的严重眼部感染的局部抗菌治疗。
这些结果证明nanofitine确可透过角膜,并且该结果与筛选nanofitine所针对的靶标无关。
实施例3:体内评估nanofitine的皮肤渗透性
目的:
使用银屑病型炎症模型,在局部皮肤直接施用抗炎nanofitine后测量炎症的减轻(PASI评分),以证明nanofitine的皮肤渗透性,以及其功能的保留,尤其是中和受体-配体关系的功能。
这些nanofitine靶向于参与银屑病型炎症但具有从真皮的基底层至表皮的不同定位的两种不同的细胞因子(Nestle等人,NatureReviewsImmunology9,679-691,2009)。待测的nanofitine中和靶细胞因子与其受体的结合。为抑制这些细胞因子在银屑病型炎症中的功能,无论是系统性地进行(像治疗性抗体那样),还是通过皮肤局部地进行,均需要达到细胞因子所在的层。测量局部施用nanofitine的抗炎效果,从而证明了nanofitine透过皮肤,并具有相关疗效。
方法:
在小鼠的耳部内侧面,局部使用咪喹莫特(Aldara),引起与银屑病相类似的皮肤炎症(VanderFits等人,JImmunol.2009May1;182(9):5836-45,Flutter等人,EurJImmunol.2013Dec;43(12):3138-46)。在6-8周龄的Balb/c小鼠双耳实施以上方案。
使用四组小鼠
-对照组:在其中小鼠未接受咪喹莫特(阴性对照)。
-三组实验组:在其中小鼠双耳接受咪喹莫特,并对右耳进行治疗,这三组实验组为:
·Nanofitine有效性测试组:该组中每一实验亚组的小鼠右耳(n=4)使用四种不同的nanofitine。Nanofitine配置于PBS中,可选地,含20%的乙醇。
·对照组,该组中小鼠在接受治疗的耳部单独接受nanofitine的载体(PBS,20%EtOH)。
·对照组,该组中小鼠局部接受对照治疗(氯倍他索)作为阳性治疗对照。
按以下方案进行:
-连续七日,每日施用咪喹莫特,每日早晨施用一次。
-从第三日到第七日施用nanofitine或其他对照,每日晚上施用一次。
-从第四日至第七日,在早上施用咪喹莫特前,观察并确定PASI评分。
-在第八日确定PASI评分后处死。
对疗效的测量包括两名操作者独立地且采用盲法方式对各耳PASI评分参数的观察,参数为:以0(最低)至4(最高)等级的厚度、脱皮、发红。通过将每个动物每只耳朵的各评分相加获得总分。
如前述体外所证实(BioLayer干涉测量),四种nanofitine靶向于参与由咪喹莫特引起的炎症表型的细胞因子,阻止所述细胞因子与各自受体结合。其溶解于PBS/20%乙醇溶液或无乙醇的PBS溶液中,以10mg/kg(除第二种为20mg/kg以外)施用。
结果:
对于所有使用的nanofitine,与未治疗的耳部相比,治疗的耳部可发现炎症非常显著的减轻(图1)。除接受氯倍他索的组以外,所有组中,未治疗的耳部炎症维持。
仅在氯倍他索以霜剂施用的组中小鼠一直舔它们的耳朵。在该组中,也观察到未治疗的左耳的炎症降低。吸收后系统性作用,因此十分可能作用于双耳。
结论:
局部施用抗炎nanofitine使得能够在治疗五天后,诱导超过30%、并可能超过80%的炎症表现减轻。
这些评分证明体内使用nanofitine十分显著的有效性,并证明了其在中性制剂中天然透过细胞屏障的能力,与此同时保持了其中和活性。因此,nanofitine可作为治疗物,其既可靶向又可局部用于靶标或效应物位于皮肤下的病理过程的治疗。
Claims (10)
1.一种局部组合物,其包含野生型pli-OB蛋白的变体,所述变体在所述野生型pli-OB蛋白与其天然配体相结合的界面上具有5至32个突变残基。
2.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于所述野生型pli-OB蛋白选自源自嗜酸热硫化叶菌(Sulfolobusacidocaldarius)的Sac7d或Sac7e、源自硫磺矿硫化叶菌(Sulfolobussolfataricus)的Sso7d、源自极端嗜热古菌(Sulfolobustokodaii)的DBP7、源自希氏硫化叶菌(Sulfolobusshibatae)的Ssh7b、源自希氏硫化叶菌(Sulfolobusshibatae)的Ssh7a和源自硫磺矿硫化叶菌(Sulfolobussolfataricus)的p7ss。
3.根据权利要求1或2所述的组合物,其特征在于其包含10ng/ml至600mg/ml的所述变体。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的组合物,其特征在于所述变体结合感兴趣的靶标,所述靶标选自:抗原、抗体、细胞蛋白、循环蛋白、肽、药物的活性成分、核酸,尤其是白介素、细胞因子、细胞因子或白介素受体、癌基因编码的蛋白、微生物表面蛋白和微生物脂多糖。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的组合物,其特征在于所述组合物旨在应用于皮肤。
6.根据权利要求1至4中任一项所述的组合物,其特征在于所述组合物旨在眼的水平应用。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的组合物,其特征在于其是以下形式:水性溶液、油性溶液或水-醇溶液、乳剂、微型乳剂、水性凝胶剂、无水凝胶剂、血清制剂、囊泡分散剂、洗剂、凝胶剂、霜剂、泡沫制剂、气雾制剂或喷雾制剂。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的组合物,其特征在于其还包含至少一种选自以下的试剂:抗菌剂、抗寄生虫剂、抗真菌剂、抗炎剂、止痒剂、麻醉剂、抗病毒剂、角质分离剂、自由基清除剂、抗皮脂溢剂、去屑剂和抗痤疮剂,以及调节皮肤的分化和/或增殖和/或色素沉着的试剂。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的局部组合物用于治疗皮肤的或眼部的失调或疾病的用途。
10.一种制备权利要求1至9中任一项所述的局部组合物的方法,包括将野生型pli-OB蛋白的变体与药学或化妆品可接受的载体混合的步骤,所述变体在所述野生型pli-OB蛋白与其天然配体相结合的界面上具有5至32个突变残基。
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
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---|---|---|---|---|
EP3483180A1 (en) * | 2017-11-14 | 2019-05-15 | Affilogic | Multi specific molecules |
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CN117106745A (zh) * | 2022-06-01 | 2023-11-24 | 北京擎科生物科技股份有限公司 | 逆转录突变体及其应用 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101506227A (zh) * | 2006-05-26 | 2009-08-12 | 怀卡托灵科有限公司 | Ob折叠结构域 |
CN101652386A (zh) * | 2006-12-04 | 2010-02-17 | 巴斯德研究院 | Ob-fold作为支架用于工程化新的特异性结合物 |
CN102272148A (zh) * | 2008-11-03 | 2011-12-07 | 分子组合公司 | 抑制vegf-a受体相互作用的结合蛋白 |
WO2012085861A1 (en) * | 2010-12-21 | 2012-06-28 | Institut Pasteur | Reagentless fluorescent biosensors from nanofitins, rational design methods to create reagentless fluorescent biosensors and methods of their use |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20030228616A1 (en) * | 1999-10-29 | 2003-12-11 | Stratagene | DNA polymerase mutants with reverse transcriptase activity |
US20110098216A1 (en) * | 2009-10-22 | 2011-04-28 | Regen Therapeutics Plc | Therapeutic uses of colostrinin |
FR2974816A1 (fr) * | 2011-05-04 | 2012-11-09 | Centre Nat Rech Scient | Methode de generation de proteines |
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FR3027521B1 (fr) * | 2014-10-24 | 2016-12-16 | Affilogic | Compositions pour administration par voie orale |
PL412787A1 (pl) * | 2015-06-22 | 2017-01-02 | Magdalena Król | Oparty na makrofagach celowany system dostarczania związków związanych z ferrytyną |
WO2018048941A2 (en) * | 2016-09-08 | 2018-03-15 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Use of high affinity monoclonal antibody product binders to increase the duration of action of therapeutic monoclonal antibody products in a biologic tissue |
EP3483180A1 (en) * | 2017-11-14 | 2019-05-15 | Affilogic | Multi specific molecules |
EP3632924A1 (en) * | 2018-10-07 | 2020-04-08 | Affilogic | Binders for inhibiting formation of multimeric proteins |
EP3878858A1 (en) * | 2020-03-11 | 2021-09-15 | Affilogic | Variants of sac7d and their use in cancer therapy |
EP4059949A1 (en) * | 2021-03-18 | 2022-09-21 | Affilogic | Anti-factor c3 sac7d variants and their medical use for treating complement-mediated disorders |
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Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101506227A (zh) * | 2006-05-26 | 2009-08-12 | 怀卡托灵科有限公司 | Ob折叠结构域 |
CN101652386A (zh) * | 2006-12-04 | 2010-02-17 | 巴斯德研究院 | Ob-fold作为支架用于工程化新的特异性结合物 |
CN102272148A (zh) * | 2008-11-03 | 2011-12-07 | 分子组合公司 | 抑制vegf-a受体相互作用的结合蛋白 |
WO2012085861A1 (en) * | 2010-12-21 | 2012-06-28 | Institut Pasteur | Reagentless fluorescent biosensors from nanofitins, rational design methods to create reagentless fluorescent biosensors and methods of their use |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
周建平 主编: "《药剂学进展》", 30 June 2008, 凤凰出版传媒集团 江苏科学技术出版社 * |
梅兴国 主编: "《生物技术药物制剂--基础与应用》", 31 October 2004, 化学工业出版社 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111467477A (zh) * | 2013-04-22 | 2020-07-31 | 艾菲洛吉克公司 | 包含pli-ob变体的局部组合物 |
CN106999544A (zh) * | 2014-10-24 | 2017-08-01 | 艾菲洛之克公司 | 包含pli‑ob蛋白质变体的口服施用的组合物 |
Also Published As
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