CN105338988B - 黄原胶在制备注射美容产品中的用途 - Google Patents

Abstract

提供了黄原胶在制备填充皱纹、细纹、表皮凹陷和/或瘢痕的注射美容产品中的用途，以及含有黄原胶的用于填充皱纹、细纹、表皮凹陷和/或瘢痕的注射美容产品。

Description

黄原胶在制备注射美容产品中的用途

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及黄原胶在制备注射美容产品中的用途以及含有黄原胶的注射美容产品。

背景技术

随着生物材料科学、临床医学美容的进展，整形美容行业从手术美容不断向微创非手术美容方向发展。注射美容是指运用注射设备根据不同的注射途径将特定的生物填充材料或制剂注射到需要修复与再塑的目标部位以达到呈现年轻美丽自然效果的一种微创医疗美容的方法。注射美容操作简单，损伤小，恢复快。

目前已有皮肤填充剂(dermal filler)作为医疗器械植入产品被美国FDA批准用于填充改善面部皱纹，该类产品可用于注入真皮中部或深部，修复中度或深度皮肤皱纹、皱褶或疤痕，在临床上被广泛应用于消除皱纹、丰唇、隆鼻、隆下巴、隆颖及各种凹陷填充。

填充材料按其来源可分为非生物材料和生物材料。非生物材料的皮肤填充剂不可生物降解，具有永久填充性，主要包括硅胶、聚甲基丙烯酸甲酯、聚丙烯酰胺凝胶及羟基磷灰石等，在体内存留时间长、不能被彻底清除，不良反应发生率较高，较少用于面部皮肤填充。生物材料可生物降解，维持时间较短，有的只有几个月时间，但不良反应发生率较低，相对安全。主要包括胶原蛋白类、透明质酸类、及自体细胞类等产品。胶原蛋白类产品又分人源和非人源的，人源胶原蛋白材料来源有限，价格昂贵，且存在传播乙肝、艾滋病毒的风险；非人源胶原蛋白是人体异种蛋白，易出现排斥反应，造成过敏反应和并发症。自体细胞类产品多取自体皮肤组织细胞，患者痛苦，且细胞增殖速度慢，注射后较长时间才可见效，需多次注射。目前应用较多的是透明质酸类填充剂，透明质酸是人体本身存在的一种物质，组织相容性好，无变态反应，非致热源，不致癌、致畸(Falcone S J,Doerfler A M,Berg RA.Dermal Fillers:Types,Indications,and Complications.Dermatol Surg,2007,33:136–143)。由于天然提取的透明质酸易被体内的酶和自由基降解，在组织中的半衰期只有1-2日，因此作为皮肤填充剂使用的透明质酸类产品大多是由经过交联或修饰的透明质酸制备。目前国际市场有四种不同的交联剂，依据化学材料安全评估报告，这些交联剂对皮肤都存在刺激性甚至毒性，FDA要求在皮肤填充剂中的残留交联剂浓度必须低于危及到人体健康范围的标准之下(陈祥娥,凌沛学.透明质酸皮肤填充剂的研究进展.中国生化药物杂志,2011,32(3):248-251)。

近年来，可注射美容整形外科材料临床应用研究发展较快，新产品的报道日益增加，而寻找黏弹性高、稳定性更好、效果更持久的生物材料作为皮肤填充剂用于注射美容已成为研究热点。

黄原胶(xanthan gum)是由甘蓝黑腐病黄单胞菌(Xanthomonas campestris)发酵生产的一种细胞外杂多糖，相对分子质量为2×10⁶～2×10⁷，其基本结构是由重复的五糖单元组成，此单元由2个D-葡萄糖、2个D-甘露糖和1个D-葡糖醛酸组成。黄原胶分子的一级结构是由β-1,4键连接的D-葡萄糖基主链与三糖单位侧链组成，其侧链由D-甘露糖和D-葡糖醛酸交替连接而成，部分侧链末端的甘露糖4,6位C上连接1个丙酮酸基团，而部分连接主链的甘露糖在C-6位被乙酰化；二级结构是侧链通过氢键反向缠绕主链形成的双螺旋或多螺旋结构；三级结构是二级结构通过非共价键组成的网状结构。

目前黄原胶广泛用于食品、药品、化妆品、石油、纺织和造纸等多个领域(García-Ochoa F,Santos VE,Casas JA,et al.Xanthan gum:production,recovery,andproperties.Biotechnol Adv,2000,18(7):549-579)。但尚未见黄原胶用于制备美容产品的报道。

发明内容

本发明的发明人通过大量实验，令人惊奇地发现黄原胶可用于制备美容产品，特别是可用于制备填充皱纹、细纹、表皮凹陷和/或瘢痕的注射美容产品，由此完成了本发明。

本发明的第一方面涉及黄原胶在制备填充皱纹、细纹、表皮凹陷和/或瘢痕的注射美容产品中的用途。

根据本发明第一方面的用途，其中所述注射美容产品中黄原胶的含量为0.25w/v％～10w/v％，优选地，所述黄原胶的含量为0.5w/v％～8.0w/v％，更优选地，所述黄原胶的含量为0.5w/v％～5w/v％，例如为1w/v％～5w/v％、2w/v％～5w/v％。

根据本发明第一方面的用途，其中所述黄原胶的平均相对分子质量为200～2000万，优选为300～1000万。

根据本发明第一方面的用途，其中所述注射美容产品的黏度为100～2000Pa·s，优选为300～1000Pa·s。可以使用本领域公知的方法测定黏度，在本发明的实施方案中，黏度数据为使用旋转流变仪(Malvern Kinexus,Britain)于0.1s^-1剪切速率时测定。

根据本发明第一方面的用途，其中所述注射美容产品的pH值为5.5～8.5，优选地，pH值为6.0～8.0，更优选地，pH值为7.0～7.4。

根据本发明第一方面的用途，其中所述注射美容产品为液体制剂或凝胶制剂。产品中黄原胶含量较低(<2％)时为流动性良好的液体状态，此时的产品为液体制剂；随着产品中黄原胶浓度的增加，溶液的黏度增加，流动性变差，成为一种黏稠性的凝胶状态，此时的产品可视为凝胶制剂。

根据本发明第一方面的用途，其中所述注射美容产品中还含有生物相容性溶剂，和任选的其他生理上可接受的原辅料成分。

根据本发明第一方面的用途，其中所述生物相容性溶剂为无菌无热源的等渗水溶液，优选地，所述无菌无热源的等渗水溶液选自无菌无热源的生理盐水、等渗葡萄糖溶液、等渗硼酸盐缓冲液、等渗磷酸盐缓冲液、等渗枸橼酸盐缓冲液、等渗酒石酸盐缓冲液、等渗乳酸盐缓冲液、等渗碳酸盐缓冲液和等渗醋酸盐缓冲液中的一种或数种(例如两种、三种)。

在本发明的实施方案中，所述等渗磷酸盐缓冲液是由磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和氯化钠组成的等渗缓冲体系；所述等渗硼酸盐缓冲液是由硼酸、硼砂和氯化钠组成的等渗缓冲体系。

根据本发明第一方面的用途，其中所述原辅料成分选自氨基聚糖、局部麻醉药中的一种或两种；优选地，所述氨基聚糖选自透明质酸、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫酸乙酰肝素、硫酸角质素、肝素中的一种或数种，其中所述氨基聚糖在注射美容产品中的含量为0.125w/v％～10w/v％，优选地，所述氨基聚糖的含量为0.25w/v％～5.0w/v％，更优选地，所述氨基聚糖的含量为0.5w/v％～3.0w/v％、0.5w/v％～1.0w/v％或1w/v％～3w/v％。

所述局部麻醉药选自利多卡因、普鲁卡因、布比卡因、丁卡因、罗哌卡因以及它们的盐中的一种或数种。所述局部麻醉药的用量为本领域的常用剂量，例如浓度为所述注射美容产品的约0.1w/v％至约5.0w/v％。

根据本发明第一方面的用途，所述注射美容产品用于皮内注射或皮下注射。

本发明的第二方面涉及一种用于填充皱纹、细纹、表皮凹陷和/或瘢痕的注射美容产品，其特征在于，所述注射美容产品中含有黄原胶。

根据本发明第二方面的注射美容产品，其中所述注射美容产品中黄原胶的含量为0.25w/v％～10w/v％，优选地，所述黄原胶的含量为0.5w/v％～8.0w/v％，更优选地，所述黄原胶的含量为0.5w/v％～5w/v％，例如为1w/v％～5w/v％、2w/v％～5w/v％。

根据本发明第二方面的注射美容产品，其中所述黄原胶的平均相对分子质量为200～2000万，优选为300～1000万。

根据本发明第二方面的注射美容产品，其中所述注射美容产品的黏度为100～2000Pa·s，优选为300～1000Pa·s。可以使用本领域公知的方法测定黏度，在本发明的实施方案中，黏度数据为使用旋转流变仪(Malvern Kinexus,Britain)于0.1s^-1剪切速率时测定。

根据本发明第二方面的注射美容产品，其中所述注射美容产品的pH值为5.5～8.5，优选地，pH值为6.0～8.0，更优选地，pH值为7.0～7.4。

根据本发明第二方面的注射美容产品，其中所述注射美容产品为液体制剂或凝胶制剂。

根据本发明第二方面的注射美容产品，其中所述注射美容产品中还含有生物相容性溶剂，和任选的其他生理上可接受的原辅料成分。

根据本发明第二方面的注射美容产品，其中所述生物相容性溶剂为无菌无热源的等渗水溶液，优选地，所述无菌无热源的等渗水溶液选自无菌无热源的生理盐水、等渗葡萄糖溶液、等渗硼酸盐缓冲液、等渗磷酸盐缓冲液、等渗枸橼酸盐缓冲液、等渗酒石酸盐缓冲液、等渗乳酸盐缓冲液、等渗碳酸盐缓冲液和等渗醋酸盐缓冲液中的一种或数种。

在本发明的实施方案中，所述等渗磷酸盐缓冲液是由磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和氯化钠组成的等渗缓冲体系；所述等渗硼酸盐缓冲液是由硼酸、硼砂和氯化钠组成的等渗缓冲体系。

根据本发明第二方面的注射美容产品，其中所述原辅料成分选自氨基聚糖、局部麻醉药中的一种或两种；优选地，所述氨基聚糖选自透明质酸、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫酸乙酰肝素、硫酸角质素、肝素中的一种或数种，其中所述氨基聚糖在注射美容产品中的含量为0.125w/v％～10w/v％，优选地，所述氨基聚糖的含量为0.25w/v％～5.0w/v％，更优选地，所述氨基聚糖的含量为0.5w/v％～3.0w/v％、0.5w/v％～1.0w/v％或1w/v％～3w/v％。所述局部麻醉药选自利多卡因、普鲁卡因、布比卡因、丁卡因、罗哌卡因以及它们的盐中的一种或数种。所述局部麻醉药的用量为本领域的常用剂量，例如浓度为所述注射美容产品的约0.1w/v％至约5.0w/v％。

根据本发明第二方面的注射美容产品，所述注射美容产品用于皮内注射或皮下注射。

本发明第三方面涉及本发明第二方面任一项所述的注射美容产品用于制备填充皱纹、细纹、表皮凹陷和/或瘢痕的美容注射剂的用途。

本发明第四方面涉及填充皱纹、细纹、表皮凹陷和/或瘢痕的美容方法，所述方法包括注射含有黄原胶的美容产品的步骤；优选地，所述含有黄原胶的美容产品是指本发明第二方面任一项所述的注射美容产品。

根据本发明第四方面的美容方法，其中所述美容产品中黄原胶的含量为0.25w/v％～10w/v％，优选地，所述黄原胶的含量为0.5w/v％～8.0w/v％，更优选地，所述黄原胶的含量为0.5w/v％～5w/v％，例如为1w/v％～5w/v％、2w/v％～5w/v％。

根据本发明第四方面的美容方法，其中所述黄原胶的平均相对分子质量为200～2000万，优选为300～1000万。

根据本发明第四方面的美容方法，其中所述注射美容产品的黏度为100～2000Pa·s，优选为300～1000Pa·s。可以使用本领域公知的方法测定黏度，在本发明的实施方案中，黏度数据为使用旋转流变仪(MalvernKinexus,Britain)于0.1s^-1剪切速率时测定。

根据本发明第四方面的美容方法，其中所述注射美容产品的pH值为5.5～8.5，优选地，pH值为6.0～8.0，更优选地，pH值为7.0～7.4。

根据本发明第四方面的美容方法，其中所述注射美容产品为液体制剂或凝胶制剂。

根据本发明第四方面的美容方法，其中所述注射美容产品中还含有生物相容性溶剂，和任选的其他生理上可接受的原辅料成分。

根据本发明第四方面的美容方法，其中所述生物相容性溶剂为无菌无热源的等渗水溶液，优选地，所述无菌无热源的等渗水溶液选自无菌无热源的生理盐水、等渗葡萄糖溶液、等渗硼酸盐缓冲液、等渗磷酸盐缓冲液、等渗枸橼酸盐缓冲液、等渗酒石酸盐缓冲液、等渗乳酸盐缓冲液、等渗碳酸盐缓冲液和等渗醋酸盐缓冲液中的一种或数种。

在本发明的实施方案中，所述等渗磷酸盐缓冲液是由磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和氯化钠组成的等渗缓冲体系；所述等渗硼酸盐缓冲液是由硼酸、硼砂和氯化钠组成的等渗缓冲体系。

根据本发明第四方面的美容方法，其中所述原辅料成分选自氨基聚糖、局部麻醉药中的一种或两种；优选地，所述氨基聚糖选自透明质酸、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫酸乙酰肝素、硫酸角质素、肝素中的一种或数种，其中所述氨基聚糖在注射美容产品中的含量为0.125w/v％～10w/v％，优选地，所述氨基聚糖的含量为0.25w/v％～5.0w/v％，更优选地，所述氨基聚糖的含量为0.5w/v％～3.0w/v％、0.5w/v％～1.0w/v％或1w/v％～3w/v％。所述局部麻醉药选自利多卡因、普鲁卡因、布比卡因、丁卡因、罗哌卡因以及它们的盐中的一种或数种。所述局部麻醉药的用量为本领域的常用剂量，例如浓度为所述注射美容产品的约0.1w/v％至约5.0w/v％。

根据本发明第四方面的美容方法，所述注射美容产品用于皮内注射或皮下注射。

在本发明中，所述黄原胶来自于甘蓝黑腐病黄单胞菌发酵生产，黄原胶分子量的测定采用多角度激光散射仪(Wyatt Technology,DAWN EOS)结合凝胶渗透色谱法，在相同条件下，黄原胶溶液的黏度随其分子量的增加而增大。

在本发明中，所述皱纹、细纹、表皮凹陷和瘢痕分别是指：人的皮肤因老化或受到外界环境的影响而形成的凹凸纹路称为皱纹。细纹是皱纹的一种，人体肌肤的生理性老化以及眼部肌肉的长期收缩上呈现的线形纹理称为细纹。表皮凹陷是指由一系列生理或病理因素造成的皮肤真皮层及皮下组织缺损而形成的皮肤表面凹陷或凹陷性疤痕。瘢痕是各种创伤后所引起的正常皮肤组织的外观形态和组织病理学改变的统称，它是人体创伤修复过程中必然的产物。

在本发明中，所述美容产品包括用于美容的药物、制剂等。

在本发明中，所述注射美容产品是指通过注射药品或制剂而达到美容效果的产品；在本发明的实施方案中，所述注射的方式例如为皮内注射或皮下注射。

发明的有益效果

本发明证明了黄原胶在用于制备美容产品时，生物兼容性好，安全，黏弹性高，成胶性好；且其性质稳定，在制备过程中及人体内不易降解，无需交联，若注射于皮肤内，可长时间稳定存在而不发生变化和降解，延长了其作用时间；同时，黄原胶溶液是典型的假塑性流体，在高剪切速率下黏度极低，使其能够通过细针头注射入皮肤，易于注射，而在低剪切速率下具有较高的黏度和弹性，使其注射入皮肤后形成具有一定强调的凝胶，能够长期稳定存在，不迁移或分散。

本发明还表明，黄原胶属于多糖类物质，与硫酸软骨素、透明质酸等多糖类物质性质相近，但黄原胶在体内不易被酶和自由基降解，具有更好的稳定性，填充效果维持时间长，应用于美容填充领域优于现有同类产品。与交联透明质酸产品相比，黄原胶无需交联即可长期稳定存在，避免了交联剂的使用可能对人体造成的损害；与胶原产品相比，黄原胶来源于微生物发酵，减少了胶原存在过敏反应和感染动物或人源性传染病的危险；与自体细胞类产品相比，黄原胶与胶原和交联透明质酸产品具有相同的优点，即具有及时塑形的效果，注射之后马上显示填充效果且在一定时间内维持不变，无须多次注射，更有利于医师满足患者对填充部位塑形的要求。

总之，本发明首次将黄原胶作为主要成分用于制备美容产品，结果表明，黄原胶可以增加组织体积，在一定时间内有效减轻或消除皮肤皱纹、细纹、表皮凹陷和瘢痕，达到美容或者塑形的目的。

附图说明

图1不同浓度黄原胶的黏度随剪切速率变化的比较

图2实施例5、7、8与市售交联透明质酸类皮肤填充剂的流变学参数弹性模量(Elastiic modulus,G')和黏性模量(Viscous modulus,G″)的比较

图3实施例3注射植入大鼠背部皮下的大体观察

图4实施例1注射植入大鼠背部皮下的组织学观察

图5实施例5黄原胶注射植入豚鼠背部皮下的组织学观察

图6实施例8黄原胶注射植入豚鼠背部皮下的组织学观察

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。所述黄原胶来自于甘蓝黑腐病黄单胞菌发酵生产，经纯化精制得到的注射用黄原胶原料药，其制备方法参照文献(Han G,Wang G,Ling P,etal.Preparation of xanthan gum injection and its protective effect onarticular cartilage in the development of osteoarthritis[J].Carbohydr Polym,2012,87(2):1837-1842.)。主要制备步骤包括黄原胶粗品制备、粗品溶解、硅藻土吸附、除菌过滤、酶解、活性炭吸附、除碳过滤、微孔滤膜精滤、醇沉、干燥得精制品。渗透压参照渗透压摩尔浓度测定法(中国药典2010版二部附录ⅨG)测定。

实施例1：一种含有0.5％黄原胶的注射美容产品

组方

实施例2：一种含有2％黄原胶的注射美容产品

组方

实施例3：一种含有3％黄原胶的注射美容产品

组方

实施例4：一种含有4％黄原胶的注射美容产品

组方

实施例5：一种无痛的含有1％黄原胶的注射美容产品

组方

实施例6：一种无痛的含有2％黄原胶的注射美容产品

组方

实施例7：一种无痛的含有3％黄原胶的注射美容产品

组方

实施例8：一种无痛的含有5％黄原胶的注射美容产品

组方

实验例

一、流变学特性测定

1.不同浓度黄原胶溶液的黏度随剪切速率变化的比较

方法：

以实施例3的组方为基础(除黄原胶外其它成分均相同)，配制一系列不同浓度的黄原胶(1％～5％)溶液，使用旋转流变仪(Malvern Kinexus,Britain)，20mm平板，剪切速率0.1s^-1～1000s^-1，比较不同浓度黄原胶溶液的黏度随剪切速率变化的情况(见图1)。

结果：

黄原胶溶液黏度随剪切速率变化的曲线呈现出典型的假塑性流体的特征，黄原胶的浓度越高，溶液黏度越大。黄原胶溶液在高剪切速率下黏度极低，使用细针头推注时的阻力小，易于注射。

2.实施例5、7、8与市售交联透明质酸类皮肤填充剂的流变学参数弹性模量(Elastiic modulus,G')和黏性模量(Viscous modulus,G″)的比较

方法：

采用实施例5、7、8与市售交联透明质酸类皮肤填充剂(Restylane,lot:9137,Q-Med,Uppsala,Sweden)，使用旋转流变仪(Malvern Kinexus,Britain)，20mm平板，频率0.1Hz～10Hz，比较其流变学参数弹性模量(Elastiic modulus,G')和黏性模量(Viscousmodulus,G″)的关系(见图2)。

结果：

本发明实施例的产品具有明显的黏弹性，在实验测定的频率范围内其弹性模量G'始终高于黏性模量G″，可形成具有一定强度的凝胶，在低剪切速率下具有较高的黏度和弹性。实施例5的凝胶强度比交联透明质酸弱，实施例7的凝胶强度与交联透明质酸相近，实施例8的凝胶强度比交联透明质酸强，说明通过改变产品的组方可提供具有不同的黏弹性和凝胶强度的黄原胶注射美容产品，适用范围广泛，可以满足市场对不同种类产品的需求。

二、动物实验

1.短期动物实验：

方法：

雌性SD大鼠32只，体重210±15g，随机分成4组(n＝8)：对照组，注射生理盐水；A组，注射实施例1的产品；B组，注射实施例2的产品；C组，注射实施例3的产品。大鼠麻醉后，备皮，消毒。大鼠背部左右两侧各取一点，行皮下注射，注射剂量均分别为0.5ml和0.25ml；对照组在相同部位注射等量生理盐水。

(1)一般情况观察：大鼠的活动及进食情况，定期观察各注射部位皮肤外观有无红肿、渗液等炎症反应；

(2)检测血液生化指标：在样品植入前5日，每只大鼠尾静脉取血，检测血液生化基线参数；在注射后的第3，7，21和42天，每组随机取2只大鼠，麻醉，心脏穿刺取血检测血液生化指标。血液生化指标包括总胆固醇(TC)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、总胆红素(TBIL)、肌酐(CR)、甘油三酯(TG)、血糖(GLU)、肌酸磷酸激酶(CK)和γ-谷氨酰转移酶(GGT)。

(3)组织学观察：在注射后的第3，7，21和42天，按如上方法所述，将大鼠称重，心脏穿刺处死，解剖，观察植入物的存留情况。

切取植入样品及邻近组织作为标本，苏木精—伊红(hematoxylin-eosin，以下简称HE)染色，光学显微镜(Nikon ECLIPSE E600，Japan)下观察注射部位周围组织的形态变化。

切除心、脑、肝、脾、肺、肾和胸腺，称重并保存于4％的甲醛溶液中，制成切片并在光镜下进行组织学观察。

结果：

(1)大鼠的活动及进食情况，各注射部位无红、肿，无渗液，体重增长正常，与对照组相比无显著差异。

(2)大鼠的血液生化指标与对照组相同，无全身毒性迹象。

(3)42天后观察，所有植入物均存留在注射部位，不迁移、分散(见图3)。黄原胶植入物被一层极薄的包囊所包围(见图4)，无急性炎症反应，无肉芽增生和淋巴细胞聚集，植入物周围组织未出现明显病理改变，大鼠心、脑、肝、脾、肺、肾和胸腺病理切片无明显病理改变。表明植入物具有良好的生物相容性。

2.长期动物实验：

方法：

健康雌性Hartley豚鼠40只，称重，麻醉，常规背部左右两侧备皮，消毒。每只豚鼠背部左右两侧共选取10个植入点，分别画圈标记，其中，黄原胶产品注射6个点(实施例5的产品2个点，实施例7的产品2个点，实施例8的产品2个点)；阳性对照2个点，注射市售的交联透明质酸类皮肤填充剂(润百颜,lot:12021801,华熙福瑞达生物医药有限公司)；阴性对照2个点，注射生理盐水。不同样品的注射位点是随机的，其中，一半豚鼠行皮内注射，每点注射0.05ml，另一半豚鼠行皮下注射，每点注射0.2ml。

观测指标：

(1)一般情况观察：豚鼠的活动及进食情况，各注射部位皮肤外观有无红肿、渗液等炎症反应。

(2)组织学观察：在注射后的第3天，1周，2周，4周，9周，13周，26周和52周，分别随机选取5只豚鼠，称重，麻醉，打开皮肤，观察植入物的存留情况。

切取植入样品及邻近组织作为标本，行HE染色，光学显微镜下观察注射部位周围组织的形态变化。

(3)评估：参照文献(Piacquadio D,Jarcho M,Goltz R.Evaluation of hylan bgel as a soft-tissue augmentation implant material.J Am Acad Dermatol,1997,36:544–549)的方法评估炎症反应程度和植入物的存留程度。炎症反应程度分为0～4级，即，0＝无炎症反应，1＝极少，2＝轻微，3＝中等，4＝严重。植入物存留程度分为0～4级，即，0＝无存留，1＝24％至1％，2＝49％至25％，3＝74％至50％，4＝100％至75％。

结果：

(1)全部豚鼠注入后观察局部无红、肿，无渗液，豚鼠活动及进食正常。

(2)注射后4周内观察，黄原胶植入物与阳性对照比较，直观外形始终良好，无弥散，手感良好，弹性佳，黄原胶植入物与周围组织无粘连、无血管增生，周围组织无明显变化。HE染色显示，注射后1周，黄原胶植入物周围可见一层极薄的包膜，无炎症细胞侵润。2周时，黄原胶植入物周围可见纤维细胞增生及细胞浸润(炎症反应评估为2级)。4周时，黄原胶植入物周围可见炎性反应较2周时略微减轻，包膜略有增厚(见图5和图6)。9周时，黄原胶植入物周围的网状真皮和脂肪组织的炎性浸润仍然存在(炎症反应评估为1级)，与前述表现相似。13周时，黄原胶植入物周围的炎性浸润明显减轻。实施例5的植入物明显减少(临床评估存留程度为1级)，说明黄原胶含量较低时，产品的存留时间较短；实施例7和8的植入物仍然较为完整，轻触可见，无明显降解。

(3)26周时，实施例7和8的植入物周围已经无明显炎性浸润，植入物完整，被纤维增生组织所包围；实施例5的植入物降解消失，植入部位与周围组织无异。第26和52周植入物残留情况如表1。

表1长期植入试验结果

短期及长期动物实验结果说明，黄原胶具有较好的生物相容性，无明显炎症反应，对动物脏器无毒性，是一种安全的注射美容填充材料。黄原胶注射美容产品在皮内及皮下组织可长期稳定存在，皮肤填充效果明显。

尽管本发明的具体实施方式已经得到详细的描述，本领域技术人员将会理解。根据已经公开的所有教导，可以对那些细节进行各种修改和替换，这些改变均在本发明的保护范围之内。本发明的全部范围由所附权利要求及其任何等同物给出。

Claims (16)

1.黄原胶在制备填充皱纹、细纹、表皮凹陷和/或瘢痕的注射美容产品中的用途；其中，所述注射美容产品中黄原胶的含量为2w/v％～8w/v％，所述黄原胶的平均相对分子质量为200～1000万。

2.如下的注射美容产品用于制备填充皱纹、细纹、表皮凹陷和/或瘢痕的美容注射剂的用途；

所述注射美容产品中含有黄原胶；其中，所述注射美容产品中黄原胶的含量为2w/v％～8w/v％，所述黄原胶的平均相对分子质量为200～1000万。

3.权利要求1或2的用途，其中所述注射美容产品中黄原胶的含量为2w/v％～5w/v％。

4.权利要求1或2的用途，其中所述黄原胶的平均相对分子质量为300～1000万。

5.权利要求1或2的用途，其中所述注射美容产品的黏度为100～2000Pa·s。

6.权利要求1或2的用途，其中所述注射美容产品的黏度为300～1000Pa·s。

7.权利要求1或2的用途，其中所述注射美容产品的pH值为5.5～8.5。

8.权利要求1或2的用途，其中所述注射美容产品的pH值为6.0～8.0。

9.权利要求1或2的用途，其中所述注射美容产品的pH值为7.0～7.4。

10.权利要求1或2的用途，其中所述注射美容产品为液体制剂或凝胶制剂。

11.权利要求1或2的用途，其中所述注射美容产品中还含有生物相容性溶剂，和任选的其他生理上可接受的原辅料成分。

12.权利要求11的用途，其中所述生物相容性溶剂为无菌无热源的等渗水溶液。

13.权利要求12的用途，其中所述无菌无热源的等渗水溶液选自无菌无热源的生理盐水、等渗葡萄糖溶液、等渗硼酸盐缓冲液、等渗磷酸盐缓冲液、等渗枸橼酸盐缓冲液、等渗酒石酸盐缓冲液、等渗乳酸盐缓冲液、等渗碳酸盐缓冲液和等渗醋酸盐缓冲液中的一种或数种。

14.权利要求11的用途，其中所述原辅料成分选自氨基聚糖和局部麻醉药中的一种或两种。

15.权利要求14的用途，其中，所述氨基聚糖选自透明质酸、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫酸乙酰肝素、硫酸角质素和肝素中的一种或数种，所述局部麻醉药选自利多卡因、普鲁卡因、布比卡因、丁卡因、罗哌卡因以及它们的盐中的一种或数种。

16.权利要求1或2的用途，所述注射美容产品用于皮内注射或皮下注射。