CN105308449A - 将样品储存器并联联接在流动相驱动器和分离单元之间的hplc进样 - Google Patents
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Abstract
公开了用于将一个或者多个样品流体的多个部分分别地引入HPLC系统(10)的流动相(210)的流中的进样器(40)。分离系统(10)包括用于将流动相驱动通过色谱柱(30)的泵(20)。进样器(40)包括多个样品储存器(310,320)诸如样品环管,各样品储存器构造成接收和临时存储相应样品流体部分或者其至少一部分。进样器(40)构造为使得在第一状态下,它能够选择性地将样品储存器(310,320)之一联接在泵(20)和柱(30)之间,并且在第二状态下,它能够将至少两个样品储存器(310,320)并联联接在泵(20)和柱(30)之间。
Description
技术领域
本发明涉及进样和样品管理,特别地用在高效液相色谱法应用中,诸如一维或二维HPLC。
背景技术
在高效液相色谱法(HPLC)中,液体通常必需以非常受控的流速(例如,在微升至毫升/分钟的范围内)且以使液体压缩性变得显著的高压(典型地20-100MPa,200-1000bar,并且超过直到当前的200MPa,2000bar)来提供。对于HPLC系统中的液体分离,包括带有要分离化合物的样品流体(例如化学或者生物的混合物)的流动相被驱动通过固定相(诸如,色谱柱组合件),由此分离不同的样品流体化合物,然后识别。如本文使用的,术语化合物将涵盖可能包括一个或者多个不同成分的化合物。
流动相、例如溶剂典型地在高压下被泵送通过包含填料介质(也称为填充料或者固定相)的色谱柱。随着样品被液体流载运通过柱,均具有不同的对填料介质亲合性的不同化合物以不同速度移动通过柱。具有对固定相更大亲合性的那些化合物,与具有较小亲合性的那些相比,较缓慢地移动通过柱,并且该速度差导致化合物在穿过柱时彼此分离。固定相承受特别地由液压泵产生的机械力,液压泵通常将流动相从柱的上游连接泵送到柱的下游连接。由于流动,依赖于固定相和流动相的物理性质,在柱两端形成较高压降。
带有分离化合物的流动相退出柱,并且通过检测器,检测器例如通过分光光度法吸光率测量来记录和/或识别分子。形成的检测器测量-洗脱时间或者体积的二维曲线图称为色谱图,并且根据该色谱图,可以识别化合物。对于各化合物,色谱图显示单独的曲线特征(也称为“波峰”)。通过柱对化合物进行有效分离是有利的,因为它允许测量产生具有明显最大值拐点的清晰波峰和窄基区宽度,从而允许对混合物成份的最佳分辨以及可靠识别和定量化。由不良柱性能导致的宽峰(通常所说的“内部谱带增宽”)或者由不良系统性能导致的宽峰(通常所说的“外部谱带增宽”)是不希望的,因为它们可使得混合物中的微量成分被主要成分掩蔽,变得不可识别。
流体样品的二维分离表示如下的分离技术,其中在第一分离单元中执行第一分离步骤以将流体样品分离成为多个馏分,并且随后在第二分离单元中执行第二分离步骤,以将多个馏分进一步分离成为子馏分。二维液相色谱(2DLC)可组合两个液相色谱分离技术。当执行2DLC测量时,两个泵的操作本身需要配位,且利用另外系统元件的作用来管理样品和馏分输送,例如利用相应地转换的射流阀。样品和馏分通路转换会导致作用于分离单元和其它流体成分分离系统的压力波纹或者下落,由此使得色谱性能、系统可靠性及其部件的耐久性劣化。
在所谓综合2DLC中,来自第一维(例如,经过第一色谱柱中的分离的包含样品成分的整个溶剂流)的所有洗脱液被联接到第二维中,并且在第二维中被进一步分离。这明显增大了对于第二维中处理速率的要求。典型地,溶剂流(包含样品成分)被部分地(也称为“片断”)进给到第二维中。单个片断处理的周期能够是15秒那样快或更低。在4循环/分钟的示例中,24小时的连接处理工作意味着5760次调制或进样,这会接近通常运行状态下的柱使用年限。在若干布置中,第一维或者通常的片断源提供了被包含在溶剂中的样品,这对于下游维(例如,对于第二维)会是过浓的。这会例如在在第一维中使用HILIC而在第二维中使用RP(反相)色谱分离法时发生,因此有利地,在来自收集环路的样品塞(片断)达到柱之前,对样品塞进行稀释。
柱会易于流中断并且例如重连样品环管,样品环管保持的压力比柱本身低(由于柱内容物的反向解压形成的回流)。另外,柱会易于突然(再)连接到高压源,导致作用于柱的压力波和填充料损坏。这些会是柱老化、损耗和破坏的实质性因素。
HPLC系统中的进样例如公开在US3916692A、WO2006083776A2、US8047060B2中。
相同申请人的专利WO2012175111A1公开了二维HPLC系统。
发明内容
本发明目的在于提供一种具体地用于一和二维HPLC应用的改进进样。该目的通过独立权利要求项解决。另外实施方式通过从属权利要求项示出。
根据本发明实施方式,样品分配器构造用于将一个或者多个样品流体的多个部分分别地引入分离系统的流路,并且由此引入分离系统的流动相流。分离系统构造用于分离样品流体化合物,并且包括构造用于将流动相驱动通过分离单元的流动相驱动器,由此分离单元构造用于分离被包含在如被流动相驱动通过分离单元的那些样品流体中的化合物。样品分配器包括多个样品储存器,各样品储存器构造用于分别地接收和临时存储样品流体的相应部分或者其一部分(或成分)。这些样品储存器可以是允许接收和临时存储相应样品流体部分的任何类型容量,诸如容器、样品环管、毛细管、进样针、微流器件、平面射流装置、机壳、包装机壳、捕获柱等等。样品分配器构造用于将多个样品储存器之一选择性地联接在流动相驱动器和分离单元之间。
样品分配器也可以作为和/或称为流分配设备或者进样设备。
样品分配器另外构造用于将多个样品储存器中的至少两个并联联接在流动相驱动器和分离单元之间。本发明实施方式由此允许用流动相稀释相应样品流体部分,并且也可以允许减低以至避免在分离单元发生的压力变动(特别地,当在要联接在流动相驱动器和分离单元之间的多个样品储存器之间转换时)。
在一个实施方式中,样品分配器构造用于在从使得多个样品储存器之一联接在流动相驱动器和分离单元之间变换为进一步使多个样品储存器中的另一个联接在流动相驱动器和分离单元之间的稀释状态期间,将多个样品储存器中的至少两个并联联接在流动相驱动器和分离单元之间。换句话说稀释状态包括从使得样品储存器之一联接在流动相驱动器和分离单元之间变换到使得至少一个另外样品储存器(与已经联接的样品储存器并联地)联接在流动相驱动器和分离单元之间,而并联联接的样品储存器之一至少在所述并联联接的一部分时间间隔上包含样品。这可允许如下情形中的至少一种:
在稀释状态期间,用流动相稀释相应样品流体部分;
将稀释状态至少保持足以将(当前联接在流动相驱动器和分离单元之间的)多个样品储存器的内容物的至少一部分同时地转移到共用的流体导管中的时间间隔;
通过使临时存储在多个样品储存器之一中的相应样品流体部分与从多个样品储存器中至少另一个转移出的内容物在其被转移到共用的导管中时混合,变换该相应样品流体部分的组成;
在相应样品储存器已被联接在流动相驱动器和分离单元之间且随后从流动相驱动器和分离单元脱离之后,并且在被联接以用于接收和临时存储相应样品流体部分或者其至少一部分之前,对该相应样品储存器泄压(也称为解压);
在相应样品储存器被联接在流动相驱动器和分离单元之间之前,并且在被联接以用于接收和临时存储相应的样品流体之后,对相应样品储存器预压缩。将包含样品的样品储存器的第一和第二终端分别联接到流动相驱动器和分离单元可以以限定(时间)顺序/次序布置。这能够统一包含样品的样品储存器中的样品区域的偏移方向,该偏移例如在样品储存器连接到高压管线时,由样品储存器弹性及其内容物压缩性引起。
在稀释状态期间,(并联联接在流动相驱动器和分离单元之间的)样品储存器中的至少一个包含样品流体(并且样品流体部分的相应内容物被输送到共用的流体导管中),而(并联联接在流动相驱动器和分离单元之间的)样品储存器中的至少一个优选地不包含样品流体,可以实现稀释。在包含样品的样品储存器的下游部分包含样品流体时的时刻或时段,优选地非包含样品的样品储存器的至少下游部分优选地包含基本上无样品的流动相。从优选地非包含样品储存器流出的流动相在样品流体部分流出包含样品的样品储存器时对其稀释,并且在所述并联连接的下游接合点处与流动相流接合。可清楚,稀释的程度(或比率)能够例如由通过样品储存器的流量比并且通过稀释状态的时段长度来控制,但是,当然仅仅只要样品流体在稀释状态期间仍至少部分地被包含在相应样品储存器中。
例如在要分离的相应样品流体部分包含会影响分离单元中的分离的溶剂的情况下,稀释能够是特别有利的。这会是例如在2DLC应用中的情况,其中如果各维不充分正交,例如在第一维是HILIC或者正常相位并且第二维是反相(其中第一维的洗脱液对于第二维是较浓或者洗脱性溶剂的情况)的情况下,则第一维的流动相可以影响或者劣化第二维中的分离。同样情况会发生在RP色谱分离法的两维中。特别地,如果第一维以梯度模式(其中至少两个不同溶剂之间的比率随时间变化)操作,这些干扰可在梯度模式过程中变化,例如当从非有机溶剂转到有机溶剂时,或者反之。
清楚的是,如果足够快地经过稀释状态,则稀释效应可能较低或者甚至没有,这可以甚至有意地例如用作中间状态和/或用于降低压力脉动。
在一个实施方式中,样品分配器构造为基本上在操作期间的任何时间点,多个样品储存器中的至少一个单独地或以并联组合联接在流动相驱动器和分离单元之间。这允许从流动相驱动器到分离单元保持基本上连续的压力和流供给,并且由此减少以至避免压力变动(在分离单元处发生)。相应样品储存器允许保持由流动相驱动器施加到分离单元的压力和流,并且可以有助于避免分离单元从流动相驱动器临时断开(例如,在样品储存器之间转换时)。这可以允许减低以至避免在分离单元入口端发生的压力变动(例如,压降或者压力波纹)。这能够是有利的,因为这些压力变动、尤其是突然压力变动,不仅会不利地影响分离以及测量准确性和精度,而且会甚至损伤该分离单元(特别地,如果其中应用有色谱柱)。
如本文使用的,术语“基本上连续”或者“基本上在任何时间点”指在比给定时间间隔更长地,压力和流供给不中断,优选地不长于80毫秒,更优选地不长于20毫秒,并且进一步优选地在整个操作期间不中断。
本发明实施方式允许改进的进样,该改进的进样特别地用于一和二维HPLC应用及在下游维中具有高压分离技术的其它联用技术应用,诸如,例如SPE-LC、连续过程控制LC。
在本发明一个实施方式中,通过样品分配器提供对压力脉冲和稀释两者的抑制,这使得该实施方式对于2DLC应用特别有用,特别是在来自第一维的大致所有洗脱液被联接到第二维且在那里进一步分离的综合模式下。
在一个实施方式中,样品储存器均构造为在其流动限制性上是可交换的或者可调节的,以便能够调节通过各个样品储存器的流之间的流量比(且由此这些并联中的稀释率)。样品储存器的流动限制性的比率确定了在并联连接中形成的流量比。
在一个实施方式中,样品分配器接收一个或者多个样品流体的多个部分,并且构造用于将相应样品流体部分填充或装入到样品储存器中的至少一个中。样品分配器可以操作以交替地装载样品储存器,以便可在至少一个样品储存器的内容物正输送到流动相流中的同时,能够对样品储存器中的至少另一个装载。
通过在装载一个样品储存器和将另一样品储存器的内容物引入到第二维的流动相流中之间的(大致连续)转换,在2DLC应用中应用的实施方式可以允许对从第一维接收的洗脱液的(在第二维中)大致连续处理。
在一个实施方式中,样品分配器包括具有多个端口的开关阀和多个流联接器。各端口构造用于将流体流路联接到开关阀,并且各流联接器构造用于在至少两个端口之间的流体联接。开关阀能够在多个不同状态之间选择性地操作,其中在各不同状态下,至少一个流联接器流体联接不同端口。
流动相驱动器联接到多个端口的第一端口,分离单元联接到多个端口的第二端口,用于接收一个或者多个样品流体的多个部分的流路联接到多个端口的第三端口,第一样品储存器联接到多个端口的第四以及第五端口,并且第二样品储存器联接到多个端口的第六以及第七端口。多个端口的第八端口可以联接到“废料”,例如不用于进一步处理而是简单地相当于废料的输出。
流联接器中的第一个构造用于联接在第二、第五和第六端口之间,并且流联接器中的第二个构造用于联接在第一、第四和第七端口之间,以便多个样品储存器中的至少两个并联联接在流动相驱动器和分离单元之间。
流联接器中的至少一个优选地构造成在样品储存器中的相应一个的另一端联接到第三端口(允许接收样品流体)之前,将第八端口(联接到废料)联接到该相应一个样品储存器。这可允许在相应样品储存器已被联接在流动相驱动器和分离单元之间且随后从流动相驱动器和分离单元脱离之后,并且在被联接以用于接收和临时存储相应样品流体部分或者其至少一部分之前,对该相应样品储存器泄压。
先前实施方式的样品分配器可以优选地设置为使得多个端口中的第一子集沿着内圆布置,多个端口中的第二子集沿着外圆布置,外圆直径大于内圆,多个流联接器中的第一子集构造成联接在多个端口中的第一子集的端口之间,并且多个流联接器中的第二子集构造成联接在多个端口中的第二子集的端口之间。
优选地,多个端口中的第一子集具有四个端口,多个端口中的第二子集具有四个端口,多个流联接器中的第一子集具有两个流联接器,并且多个流联接器中的第二子集具有两个流联接器。
更优选地,端口对称地布置,并且在多个流联接器的第一和第二子集中的各子集中,流联接器之一比在相同子集中的其它流联接器长。
根据本发明另一方面,分离系统被设置用于分离样品流体化合物。分离系统包括第一流动相驱动器、样品提供设备、第一分离单元和根据前述实施方式中任一个的样品分配器。第一流动相驱动器(其可以是泵或者泵送系统)适合于将第一流动相驱动通过分离系统。样品提供设备构造成提供一个或者多个样品流体的多个部分。第一分离单元可以是色谱柱,其适用于分离如通过第一分离单元的那些第一流动相中的样品流体化合物。
样品分配器联接到第一流动相驱动器和样品提供设备,并且构造成将提供的样品流体部分引入到流动相流中。样品分配器进一步构造成将相应样品流体部分装载到一个或者多个样品储存器中的至少一个中(并且优选地串行地且交替地装载到不同样品储存器中)。在该分离系统中,样品分配器从样品提供设备接收样品流体,并且可以交替地填充至少一个样品储存器,现时另一个样品储存器的内容物被输送到第一流动相的流中(其然后可以由第一分离单元分离)。
在一个实施方式中,分离系统的样品提供设备包括第二流动相驱动器,该第二流动相驱动器也可以是泵或者泵送系统并且根据第一流动相驱动器实施,适于将第二流动相驱动通过第二分离系统。第二分离单元根据第一分离单元也可以是色谱柱,被设置为适于分离第二流动相中的样品流体化合物。经过分离的化合物的至少一部分设置为一个或者多个样品流体的多个部分。该实施方式可以在2DLC中是特别有用的,以便样品提供设备可以表示2D-LC系统的第一维的实施方式。
根据本发明的一个实施方式涉及将一个或者多个样品流体的多个部分分别地引入到分离系统的流动相流中的方法。分离系统构造用于分离样品流体化合物,并且包括流动相驱动器和样品分配器。流动相驱动器构造用于将流动相驱动通过用于分离流动相中的样品流体化合物的分离单元。样品分配器包括多个样品储存器,各样品储存器构造用于接收和临时存储相应样品流体部分或者其至少一部分。该方法包括将多个样品储存器之一选择性地联接在流动相驱动器和分离单元之间的步骤,以及将多个样品储存器中的至少两个并联联接在流动相驱动器和分离单元之间的另一步骤。
在一个实施方式中,所述方法进一步包括在稀释状态期间,将多个样品储存器中的至少两个并联联接在流动相驱动器和分离单元之间。稀释状态包括从使得再一包含样品的样品储存器联接在流动相驱动器和分离单元之间变换到使得至少一个另外样品储存器联接(与包含样品的样品储存器并联)在流动相驱动器和分离单元之间。
在样品分配器的稀释状态期间,相应样品流体部分能够用从相应的其它样品储存器提供的流动相稀释。
稀释状态可以至少被保持足以将(当前联接在流动相驱动器和分离单元之间的)多个样品储存器的内容物的至少一部分同时地转移到共用的流体导管中的时间间隔。
通过使临时包含在多个样品储存器之一中的相应样品流体部分与从多个样品储存器中至少另一个转移出的内容物混合,可以提供对该相应样品流体部分的组成的变换。
在相应样品储存器已被联接在流动相驱动器和分离单元之间且随后从两者脱离之后,并且在被联接以用于接收和临时存储相应样品流体部分或者其至少一部分之前,该相应样品储存器可被解压,即该样品储存器中的压力被降低(优选地,降低至大约环境压力)。
在相应样品储存器被联接在流动相驱动器和分离单元之间之前,并且在被联接以用于接收和临时存储相应的样品流体之后,相应样品储存器可被预压缩,即该样品储存器中的压力被增大(优选地,增大至大约由流动相驱动器提供的压力或者当前在分离单元处发生的压力)。将包含样品的样品储存器的第一和第二终端分别联接到流动相驱动器和分离单元可以以限定(时间)顺序/次序布置。这能够统一包含样品的样品储存器中的样品区域的偏移方向,该偏移例如在样品储存器被连接到受流动相驱动器所提供压力作用的高压管线时,由样品储存器弹性及其内容物压缩性导致的附加量的压缩流体的进入而引起。
在一个实施方式中,该方法进一步包括基本上在任何时间点将多个样品储存器中的至少一个单独地或以并联组合联接在流动相驱动器和分离单元之间,优选地用以当在联接在流动相驱动器和分离单元之间的多个样品储存器之间变换时,降低在分离单元处发生的压力变化。
本发明实施方式优选地应用在二维液相色谱中,更优选地应用在综合2DLC中,其中来自第一维的大致所有洗脱液(例如,经过第一色谱柱中的分离的包含样品成分的整个溶剂流)被联接到第二维中,并且在那里被进一步分离,优选地在运行时间或者换句话说在在线模式下进行。
在实施方式中,样品分配器构造成允许用于处理单个部分的样品流体(也称为片断)的周期小于一分钟,并且优选地15秒或者更小。对应地,样品分配器构造成允许样品部分引入的频率大于1次/分钟(即,大于16mHz),并且优选地1次/15秒(即,大于60mHz)以及更高。
本发明实施方式可以基于大多数常规可得到的HPLC系统实现,诸如Agilent1220、1260和1290InfinityLC系列或者Agilent1100HPLC系列(全部由申请人AgilentTechnologies提供—见www.aqilent.com—应通过引用合并入本文)。
HPLC系统的一个实施方式包括泵送设备,其具有在泵工作室中往复的活塞,用以将泵工作室中的液体压缩至使得液体压缩性变得显著的高压。
HPLC系统的一个实施方式包括以串行或并行方式联接的两个泵送设备。在串行方式下,如在EP309596A1中公开的,第一泵送设备的出口联接到第二泵送设备的进口,并且第二泵送设备的出口提供了泵的出口。在并行方式下,第一泵送设备的进口联接到第二泵送设备的进口,并且第一泵送设备的出口联接到第二泵送设备的出口,从而提供泵的出口。在任一情形中,第一泵送设备的液体出口相对于第二泵送设备的液体出口优选地基本上相移180°,以便仅一个泵送设备对系统供给,同时另一泵送设备摄入液体(例如,从供给引入液体),由此允许在输出处提供连续流。但是显然的,两个泵送设备也可以并联操作(即,并行地),至少在一些过渡相期间如此,例如用以提供在泵送设备之间的泵送循环之间的(更)平滑转换。相移可以改变以补偿由于液体压缩性引起的液体流脉动。另外已知使用具有大约120°相移的三个活塞泵。另外已知其它类型的泵,这些泵可结合本发明操作。
分离装置优选地包括提供固定相的色谱柱。柱子可以是玻璃、金属、陶瓷或者复合材料管(例如,具有从5μm至5mm的直径和1cm至1m的长度)或者微流柱(如例如在EP1577012A1中公开的,或者由申请人agilenttechnologies提供的Agilent1200SeriesHPLC-Chip/MSSystem)。各个成分由由固定相不同地保持,并且在它们以不同速度输送过柱子时用洗脱剂彼此分离。在柱子末端,它们至少部分地彼此分隔地洗出。在整个色谱分离法过程期间,洗脱剂也可以一系列馏分被收集。柱色谱法中的固定相或者吸附剂通常是固体材料。最用于柱色谱法的最常见固定相是硅胶,然后是矾士。过去经常使用纤维素粉。另外可能的是离子交换色谱法、反相色谱分离法(RP)、亲和色谱法或者松散床吸附法(EBA)。固定相通常是细磨粉未和/或是微孔性的,用于增大表面,虽然在EBA中使用了流化床,但这能够特别地以化学方式变性。
流动相(或者洗脱剂)能够是纯溶剂或者不同溶剂的混合物。它还可以包含添加剂,即是所述添加剂在溶剂或者溶剂混合物中的溶液。它能够选择为例如调节用以运行色谱分离法的有关化合物固位和/或流动相的量。流动相也可选择为使得不同化合物能够被有效地分离。流动相可包括通常用水稀释的有机溶剂,如例如甲醇或者乙腈。对于梯度操作,水和有机物以单独的容器输送,梯度泵从单独的容器将安排好的混合物输送到系统。其它常用溶剂可以是异丙醇、THF、己烷、酒精和/或它们的任何组合,或者是这些与上述溶剂的任意组合。
样品流体可包括任何类型的过程液体、天然样品(如体液)、体液(如血浆),或者它可以是反应产物,如来自发酵肉汤。
流体优选地是液体,但是也可以是或者包括气体和/或超临界流体(如例如在超临界流体色谱法-SFC中使用的,如例如在US4,982,597A中公开的)。
流动相中的压力可以在2-200MPa(20至2000bar)的范围内,特别地10-150MPa(100到1500bar),更特别地50-120MPa(500到1200bar)。
HPLC系统可进一步包括用于检测分离的样品流体化合物的检测器、用于输出分离的样品流体化合物的分馏单元或者它们的任何组合。HPLC系统的更多细节关于由本申请人AgilentTechnologies提供的AgilentHPLC系列公开,参见应通过引用合并入本文的www.aqilent.com。
本发明实施方式能够部分地或者完全地以一个或者多个合适软件程序实现或支持,这些软件程序可存储在任何种类的数据载体上,或以其它方式由任何种类的数据载体提供,并且可在任何合适数据处理单元中或由任何合适数据处理单元执行。软件程序或者例程能够优选地应用在控制器中或由控制器应用。
在本申请的范围中,术语“流体样品”可以特别地指示要分析的任何液体和/或气态介质,可选地还包括有固体颗粒。这种流体样品可以包括应分离的多个分子或颗粒馏分,例如原生质,诸如蛋白质。由于流体样品分离成为馏分包括某一分离标准(诸如,质量、体积、化学特性等等),根据这些标准来执行分离,每个分离的馏分可通过另一分离标准(诸如,质量、体积、化学特性等等)进一步分离,从而将单独馏分分料或者分离为多个子馏分。
在本申请背景中,术语“馏分”特别地指示流体样品的这样一组分子或者颗粒:其具有共同的某一特性(诸如,质量、体积、化学特性等等),已被执行分离。但是,与一个馏分有关的分子或者颗粒仍会具有一些非均质程度,即能够根据另一分离标准被进一步分离。
在本申请背景下,术语“下游”可以特别地指示与另一流体构件相比位于下游的流体构件将仅在流体样品或者其成分与另一流体构件(因此布置在上游)相互作用之后,与那些流体样品或者其成分相互作用。因此,术语“下游”和“上游”涉及流体样品或者其成分的总体流动方向,并不必然暗示从上游系统部件到下游系统部件的直接不间断流体连接。
在本申请背景下,术语“样品分离设备”可以特别地指示能够通过应用某一分离技术分离流体样品的不同馏分的任何设备。特别地,当该样品分离设备构造用于二维分离时,在该样品分离设备中可设置两个分离单元。这意味着,样品或者其任何部分或子集首先根据第一分离标准分离,接着根据(可能相同或不同的)第二分离标准分离。
术语“分离单元”可特别地指示如下流体构件:流体样品被引导通过该流体构件,并且该流体构件构造为使得在将流体样品传导通过分离单元时,流体样品或者其一些成分将根据某一选择标准被至少部分地分离成为不同分子或颗粒组(分别称为馏分或者子馏分)。关于分离单元的示例是能够选择性地阻滞流体样品的不同馏分的液相色谱柱。
在本申请背景下,术语“流体驱动器”或者“流动相驱动器”可以特别地指示构造用于将流动相和/或流体样品沿着流体路径传导的任何种类的泵或者流体流动源或供给。相应流体供给系统可以构造用于以受控比例计量两个或多个流体,并且构造用于供给形成的混合物作为流动相。可以提供多个溶剂源管线,各溶剂源管线均与包含相应流体的相应储存器流体连接,配量装置介于溶剂源管线和流体驱动的进口之间,配量装置构造用于通过将选择的溶剂源管线与流体驱动的进口顺序联接来调制溶剂成分,其中流体驱动构造用于从选择的溶剂源管线引入流体,并且用于在其出口处供给流体混合物。更具体地,一个流体驱动器能够构造成提供流动相流,以将流体样品驱动或者输送通过相应的分离单元,而另一流体驱动器能够构造成提供另外流动相流,以将由相应分离单元处理后的流体样品或者其部分驱动或者输送通过另外的分离单元。
附图说明
参考以下关于实施方式的更详细说明并结合附图,本发明实施方式的其它目的和许多附加优点将易于清楚并且变得更好理解。大致地或在功能上等同或类似的特征以相同附图标记指代。图中的例示是示意性的。
图1示出了按照本发明实施方式的液体分离系统10,其例如用在高效液相色谱法(HPLC)中。
图2示出了如用在2DLC中的液体分离系统的实施方式。
图3A-3D示意性地示出了样品分配器40的不同操作状态。
图4A-4F示出了作为旋转阀的阀300的实施方式。
图5A-5C例示了旋转阀300的另一实施方式。
图6A-6C例示了旋转阀300的另外实施方式。
图7A-7D示出了具有三个样品储存器210、220和700的实施方式。
具体实施方式
现在更详细地参考附图,图1描绘了液体分离系统10的总体示意图。泵20从溶剂源25典型地经由脱气器27接收流动相,脱气器27对流动相脱气并且由此降低流动相中的溶解气体量。作为流动相驱动器的泵20将流动相驱动通过包括固定相的分离装置30(诸如,色谱柱)。样品分配器40(也称为进样设备)设置在泵20和分离装置30之间,用以将一个或者多个样品流体的部分呈送或添加(经常称为进样)到流动相流(标示为附图标记200,另见图2)中。分离装置30的固定相适于分离样品流体化合物,例如液体。检测器50被提供用于检测分离的样品流体化合物。分馏单元60能够提供用于输出分离的样品流体化合物。
虽然流动相能够由仅一个溶剂组成,它也可以由多个溶剂混合成。这样的混合可以是低压混合且位于泵20上游,以便泵20已经接收混合溶剂并且将混合溶剂泵送为流动相。替代地,泵20可以由多个单独的泵送单元组成,其中多个泵送单元均接收且泵送不同溶剂或者混合物,以便流动相的混合(如分离装置30接收的)在高压下且在泵20下游(或作为其部分)发生。流动相的成分(混合物)可随时间保持恒定,所谓的等浓度模式,或者随时间变化,所谓的梯度模式。
数据处理装置70能够是常规PC或者工作站,其可以联接(如虚线箭头标示的)到液体分离系统10中的一个或多个装置,以接收信息和/或控制操作。例如,数据处理装置70可以控制泵20的操作(例如,设定控制参数)和从泵20接收关于实际工作状态的信息(诸如,在泵出口处的输出压力、流速等等)。数据处理装置70还可以控制溶剂源25的操作(例如,监测可得到溶剂的水平或者量)和/或脱气器27的操作(例如,设定控制参数,诸如真空度),并且可以从中接收关于实际工作状态的信息(诸如,随时间供给的溶剂成分、流速、真空度等等)。数据处理装置70可进一步控制样品分配器40的操作(例如,控制进样或者进样与泵20操作状态的同步)。分离装置30也可由数据处理装置70控制(例如,选择特定的流路或者柱,设定工作温度等等),并作为回复发送信息(例如,操作状态)至数据处理装置70。相应地,检测器50可由数据处理装置70控制(例如,关于光谱或者波长设定,设定时间常量,启/停数据采集),并发送信息(例如,关于检测的样品化合物)至数据处理装置70。数据处理装置70也可控制分馏单元60的操作(例如,结合从检测器50接收的数据),并提供回数据。最后,数据处理装置也可处理从系统或者它的部件接收的数据并对其评估,以便以适当形式呈现这些数据准备用于进一步解释。
图2示意性地示出了根据图1实施方式的液体分离系统10的实施方式,但进一步提供为用在二维色谱分离法(2DLC)中。在2DLC系统中,通常各个分离被单独地操作。这意味着,存在如下一个LC布置,该布置具有用于第一维分离的柱,该布置排出的流体,例如液体(或者其部分)可以被输送到第二维的在第二维柱上游的高压路径中。如果第二维中的分离是周期性过程,则流体应仅周期性地且部分地(而不是连续地)引入到第二维的高压路径中。这会导致一些复杂布置。一方面布置要停驻或者暂时性存储一定量的来自第一维柱的流体,在另一方面,它要将相应流体插塞或者片断(其可能是相对于第一维样品的馏分,并且是相对于第二维的样品)以最小干扰输送到第二维柱。
如根据图2示意图清楚的,这里用于2DLC的液体分离系统10由两个部件构成,其中每个部件均大致表示如图1所示的液体分离系统。第一维15的特征(也称为分离子系统)以'标示,并且在功能上与第二维的相应特征(未以'标示)相同,差异在于取样装置40'。取样装置40'可表示在功能上与样品分配器40类似的样品分配器,或者它可表示取样单元的任何其它实施方式,诸如喷射阀、人工进样器、自动采样器等等。第二分离装置30'的输出200(直接设置,或者具有与之联接的可选择检测器50')被(在低压下)输出,且联接到样品分配器40。第一维的输出200或者其至少一部分由此提供了样品分配器40的输入,并且能够被引入或输送(调制)到第二维中。
显然,第一维可以比图2所示更简单的形式和更少部件来提供。例如,检测器50'可被省略,并且数据处理装置70'可与70相同。
在图1和2中,从泵20到样品分配器40的流路应标示为210,从样品分配器40到分离装置的流路应该标示为220,并且到废料的附加流路应该标示为230。
图3A至3D示意性地示出了样品分配器40的操作的不同顺序状态。完整操作周期可以包括状态3A至3D的顺序,以及随后的倒序3D-3A。状态3B-3C的功能可依赖于随后的先前状态均不同,如将更详细地说明的。
样品分配器40包括阀300(其可以通过任何合适的阀或者阀组合实现,如本领域中已知的)、第一样品储存器310和第二样品储存器320。第一和第二样品储存器310和320均构造用于接收和临时存储来自样品流体管线200的相应样品流体部分。
为更好理解,图3中的阀300在此示意性地示为偏移阀。旋转阀的其它实施方式随后关于图4-7说明。
在下文中,将说明阀300的操作的不同状态且由此样品分配器40的操作的不同模式或者阶段。图3A将表示(开始)状态,其中第一样品储存器310联接在管线210和220之间,即在泵20和柱30之间,以便第一样品储存器310的内容物能够提供(也称为注入或引入)到流路(且由此提供到流动相流)中,并且将向下游移动到柱30用于分离。来自管线210的流动相经由储存器310和管线220提供到分离单元30,以便于分离。第二样品储存器320联接到管线200,并且可由此用新的样品流体部分填充(或装入)。第二样品储存器320的另一侧连接到废料230。
图3B示了了关于样品储存器320的“稀释状态”。在该稀释状态,第一样品储存器310和第二样品储存器320联接在管线210和220之间,即并联联接在泵20和柱30之间,以便从泵20提供的流动相的一部分通过第二样品储存器320,而另一部分通过第一样品储存器310。相应地,第二样品储存器320的内容物(其是例如在图3A状态期间已被填充的样品部分)将被逐渐地转移到管线220中,并且在两个分流(经由第二样品储存器320并且经由第一样品储存器310)接合时,被流过第一样品储存器310的流动相稀释,以便第二样品储存器320的内容物被稀释(例如,相对于图3A的状态)。这在例如图2的2DLC应用中是特别有用的,从而允许针对相应应用来改变和修改溶剂浓度。稀释状态可被至少保持足以将第一和第二样品储存器310、320的内容物的至少部分同时地转移到共用的流体导管220中的时间间隔。暂时性存储在第二样品储存器320中的样品流体部分的成分(例如,如图3A中所示)通过在两个流体进入共同流体线220时与转移出第一样品储存器310的内容物混合而改变。
图3C示出了“中间排出状态”,其例如在图3B所示的状态之后。在该中间状态下,仅仅第二样品储存器320联接在管线210和220之间,即联接在泵20和柱30之间,而第一样品储存器310脱离或仍示联接在例如管线210和230之间(如图3D所示)。但是,虽然样品储存器310仍未(完全地)联接在管线210和230之间,但到管线230的连接已经至少部分地建立。由此,样品储存器310中的任何压缩内容物,在其例如离开图3B所示状态时,能够被解压到管线230(且由此例如废弃),从而释放储存器310中的高压,并防止对于在管线210上游连接的系统部件的有害作用或甚至破坏。
图3D示出了其中大致对称地对应于图3A状态的状态,差异在于在图3D中,第二样品储存器320现在联接在管线210和220之间且由此联接在泵20和柱30之间,而第一样品储存器310联接到管线200并且可由此用样品部分经由管线200填充。
如在图3B中对稀释状态周期的控制允许控制流动相在被输送到管线220中且朝向分离单元30进一步输送到下游流路中时对第二样品储存器内容物的稀释。显然,除非存储在第二样品储存器320中的内容物已被完全地转移出样品储存器320(或者至少只要有存储在第二样品储存器320中的样品流体内容物将从第二样品储存器320移离),则该稀释将发生。
状态3A-3D的顺序可表示转换或者分配周期的如下部分,该部分对应于从填充第二样品储存器320并且将第一样品储存器310内容物输送到管线220中的状态朝向填充第一样品储存器310并且将第二样品储存器320内容物输送管线220的状态的转换。转换周期的另一(也称为“第二”)部分包括从状态3D朝向状态3A的转换,其与关于储存器310、320作用的前述转换周期部分大体上对称。在图3中省略了关于包括在周期的第二部分中且在功能上对称于周期前述部分的图3C状态的状态。图3C状态当在周期的第二部分期间发生时不关联于任何具体功能。
显然,阀300可以操作以连续地在状态3A到3D之间移动,然后通过在状态3D至3A之间移动返回。但是,依据具体应用,任何其它操作序列可相应地应用。
在图3的实施方式中,图3B的稀释状态可以优选地应用仅短的时间,因为在该状态下,流200(例如,来自第一维)被封阻。
在图3的所有状态中,至少一个样品储存器310、320联接在管线210和220之间,即在泵20和柱30之间,以便例如在不同状态之间转换时,能够避免(或至少降低)在管线220至柱30之间发生的压力变动(例如,压降)。换句话说,基本上在操作期间的任意时间点,样品储存器310和320中的至少一个单独地或以并联组合被联接在流动相驱动器20和分离单元30之间。
图4A-4F示出了作为旋转阀的阀300的实施方式。旋转阀在本领域中是已知的,在此不需要详细说明。图4的旋转阀300包括具有多个终端或者端口(用圆指示出)400A-400H的定子元件和包括多个流联接器(在此表现为凹槽410A-410D)的转子元件。凹槽410A-410D在此是圆形段凹槽,是阀300的圆形段(在此以两种不同直径布置)。凹槽410A和410B沿着阀300的内圆布置,用于分别联接位于该内圆中的终端,即终端400A-400D。凹槽410C和410D沿着阀300的外圆布置,用于分别联接位于该外圆中的终端,即终端400E-400H。
在图4A-4F的图中,定子元件示出为处于相同位置,而转子元件在从图4A朝向4F的方向上顺时针旋转。相同类型的图示也分别应用于图5-6,其中定子元件示出为处于相同位置,而转子元件在从相应图…A的方向上顺时针旋转。在图7中,示意性的转子逆时针旋转。
在图4的开关阀300的实施方式中,端口400A-400H对称地布置。在外圆中,凹槽410C比凹槽410D长,并且相应地,内圆中的凹槽410A比凹槽410B长。细长凹槽允许将两个样品储存器310和320并联联接。
图3和图4中的操作的状态大致匹配,从而图3A和4A显示了相同的功能状态,图3B和4C显示了相同的功能状态,图3C和图4E显示了相同的功能状态,并且图3D和4F显示相同的功能状态。关于图3的前述内容相应地加以必要的变更,适用于图4中的相应图,并且不必要重复。另外,相应的流体流在图4中也以箭头指示。
图4B和4D描绘了转子旋转期间经过的过渡状态。在这些状态期间,任一样品储存器310、320暂时性地脱离在两端上的任何流体连接。相应过渡状态在图3中未明确示出,而仅在图4中示出,用于更好例示转子的旋转运动。
图5A-5C示出旋转阀300的另一实施方式。该实施方式具有10个端口510A-510J(以圆指示;并且到样品储存器的那些连接以细长圆指示),和6个凹槽500A-500F(仅以一个半径设置)。
图5表示该调制阀的可能实施方式之一的顺序旋转状态,这些状态在功能上对应于在图3中描述的那些,即图5A在功能上对应于图3A,图5B对应图3D,并且图5C对应于图3D。转换周期中与图5C、5B、5A的状态序列对应的功能对称部分对应于如上以图3为例说明的那些。对应于例如图3C的状态在图5中未明确示出。
图6A-6C示出了旋转阀300的另外实施方式。该实施方式具有8个端口610A-610G(以圆指示)和4个凹槽600A-600D。图6也示出了该调制阀的可能实施方式之一的顺序旋转状态,这些状态在功能上对应于在图3中描述的那些,即图6A在功能上对应于图3A,图6B对应于图3B,图6C对应于图3D。转换周期的功能对应部分对应于如上以图3为例已经描述的那些。
显然,提供样品的管线200可以通常起源于多样源,诸如先前维的分离(例如,LC、CE、离心作用)、工艺液体供给、污水控制管线等等。
储存器310、320可具有附加的叠加功能,例如被实施为捕集柱、SPE筒、化学反应器。
相应样品分配器40实施方式可以包括不仅两个(如图3-6所示)而且三个以至更多的样品储存器,这些样品储存器以如上所述的或者类似的方式操作,其中至少一个样品储存器操作用于样品输送,并且至少一个样品储存器在任何非过渡状态中被填充。上述图3-6中示例已经显示为具有仅仅两个样品储存器310、320,这是为了更好理解。然而,显然加以必要的变更,相同原理应用于三个或更多样品储存器的情况。
图7A-7D示意性地示出了样品分配器40的实施方式,其具有三个样品储存器310、320和700(为更好理解,另外以数字1-3标示)。图7A-图7D的状态如下。
图7A表示第二样品储存器320的工作状态。第一样品储存器310接收样品,第二样品储存器320分析(即,在泵20和分离单元30之间),并且第三样品储存器700静止。
图7B表示过渡状态。第一样品储存器310在转入分析,第二样品储存器320仍处于分析,并且第三样品储存器700在排泄压力。
图7C表示第一样品储存器310的稀释状态。第一样品储存器310和第二样品储存器320在泵20和分离单元30之间并联,而第三样品储存器700在接收样品。
图7C表示第一样品储存器310的工作状态。第三样品储存器700在接收样品,第一样品储存器310分析(即,在泵20和分离单元30之间),并且第二样品储存器320静止。
示意性阀同样品储存器310、320、700分离的进一步旋转又将一个接着一个地顺序经过类似对三个储存器310、320、700所述的状态的顺序。
具有三个以至更多的储存器310、320、700的实施方式允许在稀释状态下使至少两个储存器并联,而相应地第三储存器用样品流体填充。由此,稀释状态的持续时间可以不再受限于样品提供管线200被封阻的情况,如在具有两个储存器310、320的图3-6中实施方式的情况。
显然,在图3-7中所示实施方式中的阀300的连接方案也可以以不同方式应用。例如,通过交换管线210和220,允许在如本领域中已知的所谓共流或者逆流模式下使用样品分配器40。例如为了在通过各个样品储存器时,使得样品区域中的分散最小化,优选地以逆流模式操作,这意味着样品在储存器被填充时经由相同储存器终端移出相应样品储存器。图5和6例示了逆流模式。为在图3、4和7中实现逆流模式,提供并接收流动相流的管线210和220应该交换。
共流模式在图3、4和7中示出。如果因样品部分的分散导致的附加稀释是需要的,则这一模式是有利的。在本示例中,样品流体流在其被填充时的流动方向以及流动相流在其从储存器输送出样品流体时的流动方向构造成关于相应的样品储存器是相同的。由此,迫使样品穿过样品储存器的整个长度,并且从与填充样品的端部不同的相应另一端部离开样品储存器,这会在样品储存器中导致例如附加的样品分散和稀释。
Claims (17)
1.一种样品分配器(40),所述样品分配器(40)构造用于将一个或者多个样品流体(200)的多个部分分别地引入到构造用于分离样品流体化合物的分离系统(10)的流动相(210)的流中,其中分离系统(10)包括流动相驱动器(20),该流动相驱动器(20)构造用于驱动流动相通过构造用于分离流动相中的样品流体化合物的分离单元(30);所述样品分配器(40)包括:
多个样品储存器(310,320),各样品储存器(310,320)构造用于接收且临时存储各个样品流体部分或者其至少一部分,
其中样品分配器(40)构造用于将多个样品储存器(310,320)中的一个选择性地联接在流动相驱动器(20)和分离单元(30)之间,
其特征在于,
样品分配器(40)进一步构造用于将多个样品储存器(310,320)中的至少两个并联联接在流动相驱动器(20)和分离单元(30)之间。
2.根据先前权利要求所述的样品分配器(40),其中
样品分配器(40)构造用于在从使多个样品储存器(310,320)中的一个联接在流动相驱动器(20)和分离单元(30)之间变换为进一步使多个样品储存器(310,320)中的另一个联接在流动相驱动器(20)和分离单元(30)之间的稀释状态期间,将多个样品储存器(310,320)中的至少两个并联联接在流动相驱动器(20)和分离单元(30)之间。
3.根据先前权利要求所述的样品分配器(40),其中样品分配器(40)构造用于如下至少一种:
在稀释状态期间,用流动相稀释各个样品流体部分;
将稀释状态至少保持足以将联接在流动相驱动器(20)和分离单元(30)之间的多个样品储存器(310,320)中的内容物的至少一部分同时地转移到共用的流体导管中的时间间隔;
通过将已经存储在多个样品储存器(310,320)中一个中的相应样品流体部分与被从多个样品储存器(310,320)中另一个转移到共用的导管中的内容物混合,改进该相应样品流体部分的组成;
在相应样品储存器(310,320)已被联接在流动相驱动器(20)和分离单元(30)之间且随后从流动相驱动器(20)和分离单元(30)脱离之后,并且在被联接以用于接收和临时存储相应样品流体部分或者其至少一部分之前,对相应样品储存器(310,320)泄压;
在相应样品储存器(310,320)联接在流动相驱动器(20)和分离单元(30)之间之前,并且在被联接以用于接收和临时存储相应样品流体部分或者其至少一部分之后,对相应样品储存器(310,320)预压缩。
4.根据权利要求1或者先前权利要求中任一项所述的样品分配器(40),其中:
样品分配器(40)构造为基本上在任何时间点,多个样品储存器(310,320)中的至少一个单独地或以并联组合方式联接在流动相驱动器(20)和分离单元(30)之间。
5.根据权利要求1或根据先前权利要求中任一项所述的样品分配器(40),其中
样品分配器(40)接收一个或者多个样品流体的多个部分,并且被构造用于将相应样品流体部分装入多个样品储存器(310,320)中的至少一个中。
6.根据权利要求1或根据先前权利要求中任一项所述的样品分配器(40),包括:
开关阀(300),所述开关阀(300)具有多个端口(400A-400H)和多个流联接器(410A-410D),其中
各端口构造用于将流体流路联接到开关阀,
各流联接器构造用于在所述端口中的至少两个端口之间流体联接,
开关阀能够选择性地在多个不同状态之间操作,
在各不同状态下,至少一个流联接器流体联接到不同端口,
流动相驱动器(20)联接到多个端口中的第一端口,分离单元(30)联接到多个端口中的第二端口,用于接收一个或者多个样品流体(200)的多个部分的流路(200)被联接到多个端口中的第三端口,第一样品储存器(310)联接到多个端口中的第四以及第五端口,并且第二样品储存器(320)联接到多个端口中的第六以及第七端口,并且
流联接器中的第一个构造用于在第二、第五和第六端口之间联接,并且流联接器中的第二个构造用于在第一、第四和第七端口之间联接,以便多个样品储存器(310,320)中的至少两个并联联接在流动相驱动器(20)和分离单元(30)之间。
7.根据先前权利要求所述的样品分配器(40),其中
多个端口中的第一子集沿着内圆布置,
多个端口中的第二子集沿着外圆布置,外圆的直径大于内圆,
多个流联接器中的第一子集构造成在多个端口中的第一子集的端口之间联接,以及
多个流联接器中的第二子集构造成在多个端口中的第二子集的端口之间联接。
8.根据先前权利要求所述的样品分配器(40),其中
多个端口中的第一子集具有四个端口,
多个端口中的第二子集具有四个端口,
多个流联接器中的第一子集具有两个流联接器,以及
多个流联接器中的第二子集具有两个流联接器。
9.根据先前权利要求所述的样品分配器(40),其中
所述多个端口对称地布置,并且
在多个流联接器中的第一和第二子集的各子集中,一个流联接器比相同子集中的其它流联接器长。
10.用于分离样品流体化合物的分离系统(10),所述分离系统(10)包括:
第一流动相驱动器(20),优选地泵送系统,适于将第一流动相驱动通过分离系统(10),
样品提供设备,所述样品提供设备构造成提供一个或者多个样品流体的多个部分,
根据权利要求1或根据先前权利要求中任一项所述的样品分配器(40),该样品分配器(40)联接到第一流动相驱动器并且联接到样品提供设备,并且被构造成将提供的样品流体部分引入到第一流动相的流中,和
第一分离单元(30),优选地色谱柱,适合于分离第一流动相中的样品流体化合物,
其中样品分配器(40)构造成将相应样品流体部分装载到一个或者多个样品储存器(310,320)中的至少一个中。
11.根据先前权利要求所述的分离系统(10),进一步包括如下部件中的至少一个:
检测器(50),所述检测器(50)适于检测分离的样品流体化合物;
收集单元(60),所述收集单元适于收集分离的样品流体化合物;
数据处理单元(70),所述数据处理单元适于处理从分离系统(10)接收的数据;
除气设备(27),所述除气设备(27)用于对流动相除气。
12.根据权利要求10或11所述的分离系统(10),其中所述样品提供设备包括:
第二流动相驱动器(20'),优选地泵送系统,适于将第二流动相驱动通过分离分系统(15);
第二分离单元(30'),优选地色谱柱,适合于分离第二流动相中的样品流体化合物,
其中分离化合物中的至少一部分被提供到样品分配器(40),作为一个或者多个样品流体的多个部分。
13.将一个或者多个样品流体的多个部分分别引入到构造用于分离样品流体化合物的分离系统(10)的流动相的流中的方法,其中分离系统(10)包括:
流动相驱动器(20),所述流动相驱动器(20)构造用于将流动相驱动通过构造用于分离流动相中的样品流体化合物的分离单元(30);和
样品分配器(40),所述样品分配器(40)具有多个样品储存器(310,320),各样品储存器构造用于接收和临时存储相应样品流体部分或者其至少一部分;所述方法包括:
将多个样品储存器(310,320)之一选择性地联接在流动相驱动器(20)和分离单元(30)之间,并且
将多个样品储存器(310,320)中的至少两个并联联接在流动相驱动器(20)和分离单元(30)之间。
14.根据先前权利要求所述的方法,进一步包括:在从使得多个样品储存器(310,320)中的一个联接在流动相驱动器(20)和分离单元(30)之间变换为进一步使多个样品储存器(310,320)中的另一个联接在流动相驱动器(20)和分离单元(30)之间的稀释状态期间,将多个样品储存器(310,320)中的至少两个并联联接在流动相驱动器(20)和分离单元(30)之间。
15.根据先前权利要求所述的方法,进一步包括如下操作中的至少一个:
在稀释状态期间用流动相稀释相应样品流体部分;
将稀释状态至少保持足以将联接在流动相驱动器(20)和分离单元(30)之间的多个样品储存器(310,320)的内容物的至少一部分同时地转移到共用的流体导管中的时间间隔;
通过将接收在多个样品储存器(310,320)中的一个中的相应样品流体部分与从多个样品储存器(310,320)中其它样品储存器转移出的内容物混合,改变该相应样品流体部分的组成;
在相应样品储存器(310,320)联接在流动相驱动器(20)和分离单元(30)之间且随后从流动相驱动器(20)和分离单元(30)脱离之后,并且在被联接以用于接收和临时存储相应样品流体部分或者其至少一部分之前,对该相应样品储存器(310,320)泄压;
在相应样品储存器(310,320)联接在流动相驱动器(20)和分离单元(30)之间之前,并且在被联接以用于接收和临时存储相应样品流体部分或者其至少一部分之后,对相应样品储存器(310,320)预压缩。
16.根据先前权利要求任一项所述的方法,进一步包括:
基本上在任何时间点,将多个样品储存器(310,320)中的至少一个单独地或以并联组合方式联接在流动相驱动器(20)和分离单元(30)之间。
17.用于在诸如计算机的数据处理系统上运行时控制或者执行根据权利要求13或根据先前权利要求中任一项所述的方法的软件程序或者产品,所述软件程序或者产品优选地存储在数据载体上。
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