CN105300971A - 一种用于尿蛋白检测试纸的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种用于尿蛋白检测试纸的制备方法，其特征在于，本发明尿蛋白检测试纸是由浸渍了水溶性聚噻吩、四水氯金酸、磷酸二氢钠、氢氧化钠、巯基蛋白酶、聚乙烯醇和滤纸构成，在每平方厘米滤纸中含水溶性聚噻吩0.2~1.0mg，四水氯金酸0.4~2.0mg，磷酸二氢钠0.2~2.0mg，氢氧化钠0.04~1.0mg，巯基蛋白酶0.01~0.05mg，聚乙烯醇0.5~3.0？mg。所用的滤纸可以是定量滤纸。尿蛋白检测试纸，具有携带方便，操作简便、快速，检测直观，选择性好，准确度和灵敏度较高检测。制备尿蛋白检测试纸的过程要求的条件容易控制，能耗低，操作简单，属于清洁生产工艺。
Description
技术领域
本发明涉及一种尿液检测领域，特别涉及一种用于尿蛋白检测试纸的制备方法及其应用。属于分析化学领域。
背景技术
许多人类疾病除非到了很晚的时期，否则不容易被诊断出，因为其生理症状不明显。体液组分的轻微变化可意味着体内出现问题，因此，检测体液成份是尤其重要。尿通常被用作诊断学和临床研究中的生物标志，因为其是可以从非侵害性方式容易地获得的体液。尿液中的蛋白质和肽的复杂混合物可反映血清组成和肾功能。尿液中出现过量的蛋白质警示出现了慢性病，例如糖尿病、高血压和肾脏炎症相关的问题等。
尿内出现蛋白称为蛋白尿，也即尿蛋白。正常尿液中含少量小分子蛋白，普通尿常规检查测不出，当尿中蛋白增加，尿常规检查可以测出即为蛋白尿。
可以导致蛋白尿的原因很多，它们包括：功能性蛋白尿、体位性蛋白尿或病理性蛋白尿。常见有：剧烈运动后，发热的极期，进食高蛋白饮食；胡桃夹现象；各种肾脏病和肾血管病等。不同病因引起的腰疼临床表现也不相同，例如：
1.功能性蛋白尿
功能性蛋白尿是一种轻度（24小时尿蛋白定量一般不超过0.5～1克）、暂时性蛋白尿，原因去除后蛋白尿迅速消失。
2.病理性蛋白尿
蛋白尿持续存在，尿中蛋白含量较多，尿常规检查常合并有血尿、白细胞尿和管型尿。并可伴有其他肾脏病表现，如高血压、水肿等。病理性蛋白尿主要见于各种肾小球、肾小管间质疾病、遗传性肾病、肾血管疾病和其他肾脏病。常见的如：
（1）原发性肾小球疾病24小时尿蛋白定量大于或等于3.5克，蛋白尿为肾脏损害的表现；（2）继发性肾小球疾病24小时尿蛋白定量一般不超过1.5～2克；（3）肾小管间质疾病，24小时尿蛋白定量多＜2克；（4）遗传性肾病尿蛋白阳性，定量＞400毫克/24小时。
因此，我们要提倡广大群众能学会一种简单、方便的、灵敏的在家庭中就能自我定期跟踪检测，带有体温的新鲜尿液中蛋白质检测技术。推广普及后可从健康人群中，筛查出患有肾疾病倾向群体。随着人们对健康意识的不断提高，对人体生理或病理状况的动态跟踪监控，实现预警信号提示、提高慢性病或隐性病的早期检出率，并通过积极的早期治疗提高康复率意义重大。
因此，制备一种检测尿蛋白的试纸使人们能简单、方便的在家自我检测尿液中蛋白的变化情况，对低浓度的尿蛋白进行定性和定量检测具有十分重要的价值。
发明内容
本发明的目是提供一种用于尿蛋白检测试纸的制备方法，且使用简单、灵敏度高、选择性较好的检测尿液中蛋白质试纸的制备方法，该方法不仅可以定性地检测尿液中蛋白质，而且可以定量地检测尿液中蛋白质，也就是测定出蛋白质的含量范围，本发明的目的通过以下技术方案实现。
本发明尿蛋白检测试纸是由浸渍了水溶性聚噻吩、四水氯金酸、磷酸二氢钠、氢氧化钠、巯基蛋白酶、聚乙烯醇和滤纸构成，在每平方厘米滤纸中含水溶性聚噻吩0.2~1.0mg，四水氯金酸0.4~2.0mg，磷酸二氢钠0.2~2.0mg，氢氧化钠0.04~1.0mg，巯基蛋白酶0.01~0.05mg，聚乙烯醇0.5~3.0mg。所用的滤纸可以是定量滤纸。
一种用于尿蛋白检测试纸的制备方法，其特征在于，该方法具有以下工艺步骤：
（1）配制溶液A：在反应器中，配制含各组分摩尔浓度为，水溶性聚噻吩：1.0×10-3~4.0×10-3mol/L，四水氯金酸：1.0×10-3~4.0×10-3mol/L，磷酸二氢钠：0.2~0.3mol/L，氢氧化钠：0.1~0.2mol/L，水溶液，搅拌均匀，得到溶液A；
（2）配制溶液B：在反应器中，按如下组成质量百分比加入，去离子水：95~97%，聚乙烯醇：2~5%，加热溶解，冷却至室温，再加入巯基蛋白酶：0.1~1.0%，各组分之和为百分之百，搅拌溶解，得到溶液B；
（3）尿蛋白检测试纸浸渍：将溶液A与溶液B按体积比为2：1混合均匀，将滤纸定量滤纸全部浸入溶液A和溶液B混合溶液中60~120s；
（4）尿蛋白检测试纸成型：取出浸吸溶液的滤纸，在室温下晾干，或在低于50℃的温度下烘干，将此铵试纸裁成0.2cm×5cm长方形小块，塑封备用，得到浅黄色的尿蛋白检测试纸。
所述的水溶性聚噻吩的结构式：
所述的水溶性聚噻吩与四水氯金酸的摩尔比为1：1；
所述的巯基蛋白酶为巯基蛋白酶EC3.4.22
标准色卡的制作：准确称取牛血清蛋白溶于蒸馏水中，配制一系列准确浓度的含牛血清蛋白的溶液，牛血清蛋白的浓度从0到2.0mg/mL。将尿蛋白检测试纸分别浸入各种浓度的溶液中，6~8s后取出，平放6min后用光谱光度计或光电积分测色仪测得色度。按次值调制油墨、涂于铜版纸，即制得标准色卡。蛋白质的每一浓度对应于标准色卡上一种颜色。
使用方法：将尿蛋白检测试纸浸入新鲜尿液中，6~8s后取出，平放6min后。将该试纸上所显的颜色与标准色卡相比较，即可判断出被测尿液中蛋白质的浓度，试纸上显出的颜色随着蛋白质浓度的增加而加深，所显颜色从浅粉色到红色。
本发明的优点：
（1）本发明获得的尿蛋白检测试纸，具有携带方便，操作简便、快速，检测直观，选择性好，准确度和灵敏度较高检测；
（2）通过目视比较显色后的尿蛋白检测试纸与标准色卡的颜色便可判断尿液中蛋白的含量，非专业人员就可以进行测试，是居家自测的理想选择；
（3）本发明制备尿蛋白检测试纸，所使用的试剂都是普通的化学试剂无毒、安全可靠，试纸应用范围广；
（4）制备尿蛋白检测试纸的过程要求的条件容易控制，能耗低，操作简单，属于清洁生产工艺，易于大量生产。
具体实施方式
实施例1
（1）配制溶液A：在烧杯中，分别准确称取水溶性聚噻吩：0.5g，四水氯金酸：0.8g，磷酸二氢钠：30g，氢氧化钠：6g，加去离子水1000mL，搅拌溶解，得到溶液A；
（2）配制溶液B：在烧杯中，按如下组成质量百分比加入，去离子水：960mL，聚乙烯醇：25g，加热溶解，冷却至室温，再加入巯基蛋白酶：6g，搅拌溶解，得到溶液B；
（3）尿蛋白检测试纸浸渍：取溶液A200mL，取溶液B100mL混合均匀，将滤纸定量滤纸全部浸入混合溶液中60~120s；
（4）尿蛋白检测试纸成型：取出浸吸溶液的滤纸，在室温下晾干，将此铵试纸裁成0.2cm×5cm长方形小块，塑封备用，得到浅黄色的尿蛋白检测试纸。
实施例2
（1）配制溶液A：在烧杯中，分别准确称取水溶性聚噻吩：0.25g，四水氯金酸：0.4g，磷酸二氢钠：24g，氢氧化钠：8g，加去离子水至1000mL，搅拌溶解，得到溶液A；
（2）配制溶液B：在烧杯中，按如下组成质量百分比加入，去离子水：970mL，聚乙烯醇：20g，加热溶解，冷却至室温，再加入巯基蛋白酶：1.0g，搅拌溶解，得到溶液B；
（3）尿蛋白检测试纸浸渍：取溶液A200mL，取溶液B100mL混合均匀，将滤纸定量滤纸全部浸入混合溶液中60~120s；
（4）尿蛋白检测试纸成型：取出浸吸溶液的滤纸，在室温下晾干，将此铵试纸裁成0.2cm×5cm长方形小块，塑封备用，得到浅黄色的尿蛋白检测试纸。
实施例3
（1）配制溶液A：在烧杯中，分别准确称取水溶性聚噻吩：0.7g，四水氯金酸：1.20g，磷酸二氢钠：30g，氢氧化钠：10g，加去离子水至1000mL，搅拌溶解，得到溶液A；
（2）配制溶液B：在烧杯中，按如下组成质量百分比加入，去离子水：1000mL，聚乙烯醇：40g，加热溶解，冷却至室温，再加入巯基蛋白酶：8.0g，搅拌溶解，得到溶液B；
（3）尿蛋白检测试纸浸渍：取溶液A200mL，取溶液B100mL混合均匀，将滤纸定量滤纸全部浸入混合溶液中60~120s；
（4）尿蛋白检测试纸成型：取出浸吸溶液的滤纸，在室温下晾干，将此铵试纸裁成0.2cm×5cm长方形小块，塑封备用，得到浅黄色的尿蛋白检测试纸。
实施例4
（1）配制溶液A：在烧杯中，分别准确称取水溶性聚噻吩：0.2g，四水氯金酸：0.3.2g，磷酸二氢钠：15g，氢氧化钠：4g，加去离子水至600mL，搅拌溶解，得到溶液A；
（2）配制溶液B：在烧杯中，按如下组成质量百分比加入，去离子水：300mL，聚乙烯醇：12g，加热溶解，冷却至室温，再加入巯基蛋白酶：1.5g，搅拌溶解，得到溶液B；
（3）尿蛋白检测试纸浸渍：取溶液A600mL，取溶液B300mL混合均匀，将滤纸定量滤纸全部浸入混合溶液中60~120s；
（4）尿蛋白检测试纸成型：取出浸吸溶液的滤纸，在室温下晾干，将此铵试纸裁成0.2cm×5cm长方形小块，塑封备用，得到浅黄色的尿蛋白检测试纸。
实施例5
将尿蛋白检测试纸浸入新鲜的尿样中，6~8s后取出，平放6min后，将该试纸上所显的颜色与标准色卡相比较，即可判断出被测样品种蛋白的浓度，用该试纸测得的结果与标准法测得的结果比较与标准结果相符，在快速测定的要求范围。
Claims (5)
1.一种用于尿蛋白检测试纸的制备方法，其特征在于，本发明尿蛋白检测试纸是由浸渍了水溶性聚噻吩、四水氯金酸、磷酸二氢钠、氢氧化钠、巯基蛋白酶、聚乙烯醇和滤纸构成，在每平方厘米滤纸中含水溶性聚噻吩0.2~1.0mg，四水氯金酸0.4~2.0mg，磷酸二氢钠0.2~2.0mg，氢氧化钠0.04~1.0mg，巯基蛋白酶0.01~0.05mg，聚乙烯醇0.5~3.0mg，所用的滤纸可以是定量滤纸。
2.一种用于尿蛋白检测试纸的制备方法，其特征在于，该方法具有以下工艺步骤：
（1）配制溶液A：在反应器中，配制含各组分摩尔浓度为，水溶性聚噻吩：1.0×10-3~4.0×10-3mol/L，四水氯金酸：1.0×10-3~4.0×10-3mol/L，磷酸二氢钠：0.2~0.3mol/L，氢氧化钠：0.1~0.2mol/L，水溶液，搅拌均匀，得到溶液A；
（2）配制溶液B：在反应器中，按如下组成质量百分比加入，去离子水：95~97%，聚乙烯醇：2~5%，加热溶解，冷却至室温，再加入巯基蛋白酶：0.1~1.0%，各组分之和为百分之百，搅拌溶解，得到溶液B；
（3）尿蛋白检测试纸浸渍：将溶液A与溶液B按体积比为2：1混合均匀，将滤纸定量滤纸全部浸入溶液A和溶液B混合溶液中60~120s；
（4）尿蛋白检测试纸成型：取出浸吸溶液的滤纸，在室温下晾干，或在低于50℃的温度下烘干，将此铵试纸裁成0.2cm×5cm长方形小块，塑封备用，得到浅黄色的尿蛋白检测试纸。
3.根据权利要求2中所述的一种用于尿蛋白检测试纸的制备方法，其特征在于，所述的水溶性聚噻吩与四水氯金酸的摩尔比为1：1。
4.根据权利要求2中所述的一种用于尿蛋白检测试纸的制备方法，其特征在于，所述的巯基蛋白酶为巯基蛋白酶EC3.4.22。
5.根据权利要求2中所述的一种用于尿蛋白检测试纸的制备方法所制备的尿蛋白检测试纸，其特征在于，尿蛋白检测试纸应用到尿液中蛋白质的检测时尿液要新鲜。
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