CN105274157A - 一种静态乳液法固定化脂肪酶生产生物柴油的方法 - Google Patents
一种静态乳液法固定化脂肪酶生产生物柴油的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105274157A CN105274157A CN201510869806.9A CN201510869806A CN105274157A CN 105274157 A CN105274157 A CN 105274157A CN 201510869806 A CN201510869806 A CN 201510869806A CN 105274157 A CN105274157 A CN 105274157A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- lipase
- emulsion
- immobilized
- immobilized lipase
- static
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 title claims abstract description 130
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 title claims abstract description 130
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 title claims abstract description 130
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 title claims abstract description 130
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 52
- 239000003225 biodiesel Substances 0.000 title claims abstract description 35
- 230000003068 static effect Effects 0.000 title claims abstract description 26
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims abstract description 43
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 33
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 30
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 29
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 29
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 23
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims abstract description 19
- 239000002131 composite material Substances 0.000 claims abstract description 19
- -1 polydimethylsiloxane Polymers 0.000 claims abstract description 18
- 239000004205 dimethyl polysiloxane Substances 0.000 claims abstract description 17
- 229920000435 poly(dimethylsiloxane) Polymers 0.000 claims abstract description 17
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 claims abstract description 15
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 238000010907 mechanical stirring Methods 0.000 claims abstract description 11
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims abstract description 11
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims abstract description 11
- 108010031797 Candida antarctica lipase B Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 5
- 239000002551 biofuel Substances 0.000 claims description 43
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 42
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 40
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 37
- 239000003921 oil Substances 0.000 claims description 36
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 claims description 33
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 claims description 32
- 238000013019 agitation Methods 0.000 claims description 16
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 claims description 14
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 13
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 13
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 claims description 12
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 claims description 12
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 claims description 12
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 claims description 12
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 claims description 12
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 claims description 12
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims description 11
- 239000011806 microball Substances 0.000 claims description 10
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims description 8
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims description 8
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 claims description 8
- 235000002732 Allium cepa var. cepa Nutrition 0.000 claims description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 6
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinyl-2-pyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 241000179532 [Candida] cylindracea Species 0.000 claims description 6
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 claims description 6
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 5
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 4
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 claims description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 4
- 235000020238 sunflower seed Nutrition 0.000 claims description 4
- 240000000432 Pistacia chinensis Species 0.000 claims description 3
- 235000014123 Pistacia chinensis Nutrition 0.000 claims description 3
- 229940069328 povidone Drugs 0.000 claims description 2
- 238000007711 solidification Methods 0.000 claims description 2
- 230000008023 solidification Effects 0.000 claims description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 2
- 244000291564 Allium cepa Species 0.000 claims 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 26
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 4
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 abstract description 2
- 235000019871 vegetable fat Nutrition 0.000 abstract 3
- 241000589513 Burkholderia cepacia Species 0.000 abstract 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 abstract 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 abstract 1
- 238000003760 magnetic stirring Methods 0.000 abstract 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 abstract 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 23
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 description 15
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- ALSTYHKOOCGGFT-KTKRTIGZSA-N (9Z)-octadecen-1-ol Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCO ALSTYHKOOCGGFT-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 7
- 239000000834 fixative Substances 0.000 description 7
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 7
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229940055577 oleyl alcohol Drugs 0.000 description 7
- XMLQWXUVTXCDDL-UHFFFAOYSA-N oleyl alcohol Natural products CCCCCCC=CCCCCCCCCCCO XMLQWXUVTXCDDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- 241000234282 Allium Species 0.000 description 5
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 5
- 239000003610 charcoal Substances 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 3
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 3
- 239000010806 kitchen waste Substances 0.000 description 3
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 description 3
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 3
- 238000005809 transesterification reaction Methods 0.000 description 3
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710098556 Lipase A Proteins 0.000 description 2
- 101710099648 Lysosomal acid lipase/cholesteryl ester hydrolase Proteins 0.000 description 2
- 102100026001 Lysosomal acid lipase/cholesteryl ester hydrolase Human genes 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 239000004519 grease Substances 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- 244000247747 Coptis groenlandica Species 0.000 description 1
- 235000002991 Coptis groenlandica Nutrition 0.000 description 1
- 101710098554 Lipase B Proteins 0.000 description 1
- 239000004113 Sepiolite Substances 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005864 Sulphur Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 238000006136 alcoholysis reaction Methods 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000003889 chemical engineering Methods 0.000 description 1
- 230000002153 concerted effect Effects 0.000 description 1
- 238000005260 corrosion Methods 0.000 description 1
- 230000007797 corrosion Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000446 fuel Substances 0.000 description 1
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 239000005431 greenhouse gas Substances 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000033444 hydroxylation Effects 0.000 description 1
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 235000019626 lipase activity Nutrition 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 229940045641 monobasic sodium phosphate Drugs 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010773 plant oil Substances 0.000 description 1
- 231100000572 poisoning Toxicity 0.000 description 1
- 230000000607 poisoning effect Effects 0.000 description 1
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 238000000197 pyrolysis Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 235000019355 sepiolite Nutrition 0.000 description 1
- 229910052624 sepiolite Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002444 silanisation Methods 0.000 description 1
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 description 1
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 description 1
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000003980 solgel method Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
- Y02E50/00—Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
- Y02E50/10—Biofuels, e.g. bio-diesel
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
Landscapes
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明为一种静态乳液法固定化脂肪酶生产生物柴油的方法，该方法包括以下步骤：（1）向反应器中加入聚二甲基硅氧烷、脂肪酶溶液和铂金催化剂，真空磁力搅拌0.5-2小时后得到乳液，再向乳液中加入分散剂，形成复合乳液，机械搅拌下，固化形成载酶静态乳液硅胶微球，过滤出即得到固定化脂肪酶；（2）将植物油脂与短链醇加入到反应器中，再加入植物油脂体积1-4倍的正己烷、植物油脂质量20%-30%的固定化脂肪酶，恒温20-600C下反应即可得到生物柴油；所述脂肪酶为南极假丝酵母脂肪酶B、柱状假丝酵母脂肪酶或洋葱伯克霍尔菌脂肪酶。本发明的制备工艺简单，反应条件温和，无环境污染，催化剂重复利用率高，有利于生物柴油的生产的工业化应用。
Description
技术领域
本发明属于固定化酶生产生物柴油领域，特别是提供了一种静态乳液法固定化脂肪酶，并将固定化脂肪酶应用于生产生物柴油的方法。
背景技术
生物柴油是利用植物油脂或动物油脂等可再生资源制造出来的可以替代石化柴油的清洁安全的新型燃料，主要成分是一系列的长链脂肪酸酯类化合物的混合物。生物柴油与石化柴油具有相近的性能，且具有可再生、易于生物降解、含硫量低燃烧污染物排放低、温室气体排放低等特点。因此当前对于生物柴油的生产和研究受到了人们的广泛关注。
目前生物柴油的生产主要是有化学法和生物法，化学法是用动植物油脂与甲醇或乙醇等短链醇在酸性或碱性催化剂和高温(230～250℃)下进行转酯化反应，化学法存在以下缺点：工艺复杂，需要加入过量的醇，后续工艺必须有相应的醇回收装置，能耗高；酯化产物难于回收，成本高；生产过程有废碱液排放，污染环境。而生物法反应条件温和，选择性高，副产物少，具有化学法不可比拟的优势，符合环境友好的绿色化工过程的要求。目前报道的生物法生产生物柴油一般是利用商品化的脂肪酶或对粗酶进行纯化、固定化后作为生物催化剂，催化短链醇类和油脂原料进行转酯反应。
固定化酶生产生物柴油方面的专利有：CN104911222A一种离子液体体系下无载体固定化脂肪酶催化制备生物柴油的方法，包括以下两个步骤：(1)制备无载体固定化脂肪酶；(2)在离子液体体系下，使用步骤(1)制得的无载体固定化脂肪酶催化制备生物柴油。发明制得的无载体固定化脂肪酶活性高，无需成本高昂的载体；将离子液体介质用于固定化酶制备生物柴油，可以显著提高酶的稳定性及其对底物的立体选择性，还可防止甲醇、甘油等造成的酶中毒问题，确保了酶的高效催化，使生物柴油得率大大提高。CN104450668A一种用于餐厨废油转化生物柴油的生物炭固定化酶及其制备方法，发明提供一种可用于高酸值餐厨废弃油脂转化生物柴油的壳聚糖修饰生物炭基固定化酶的制备方法。将花生壳等生物质在限氧条件下高温热裂解成多孔结构的生物炭，采用具有良好生物兼容性的壳聚糖进一步修饰生物炭的孔隙结构，通过壳聚糖大分子之间互相交联产生立体网状结构的基质材料，促进脂肪酶分子在基质载体上的固定，改善固定化酶的催化活性与稳定性。采用该方法制备的固定化脂肪酶催化活性得到充分提高，所制备的固定化酶可用于高酸值餐厨废油转化生物柴油的催化体系。CN104313010A磁响应性复合脂肪酶的制备方法及生物柴油合成中的应用，发明涉及一种具有磁响应性复合脂肪酶的制备方法，并将磁响应性复合脂肪酶应用于生物柴油的制备，属于固定化酶应用于生物柴油制备技术领域。利用磁性纳米Fe3O4对具有1，3位置专一性的脂肪酶A进行修饰，采用固定化技术将具有1，3-位置专一性的脂肪酶A与无位置专一性的脂肪酶B制备成复合酶双酶体系，利用复合脂肪酶协同催化的方法，克服了单一脂肪酶的底物专一性，提高了酶法制备生物柴油的转酯效率，可以实现酶的回收和重复使用，减少了反应过程中酶活力的损失。CN104651345A一种固定化脂肪酶的制备方法，发明公开了一种固定化脂肪酶的制备方法，其特征是利用海藻酸钠包埋法对LipaseOF进行固定化。固定化脂肪酶具有较好的热稳定性，在60℃温度下保持7h，其酶活力基本上不变，可以用于生物柴油的制备。CN103146675A以赤石脂为载体的固定化脂肪酶的制备方法，发明公开了一种以赤石脂为载体的固定化脂肪酶的制备方法，首先对赤石脂分别进行羟基化和硅烷化处理，然后将处理好的赤石脂载体加入到脂肪酶溶液中，经摇床振荡吸附固定后，用海藻酸盐凝胶对吸附了脂肪酶的赤石脂进行包埋，最后冷冻干燥得到赤石脂固定化脂肪酶。本方法采用的赤石脂具有原料易得，价格低廉的特点，同时也具有很好的物理吸附性和表面化学活性，经过改性以及包埋处理后，能显著提升载体的稳定性，制得的固定化酶酶活力回收率高，稳定性好，工艺简单，操作成本低，有望推动酶法制备生物柴油的工业化进程。CN102827825A一种用于制备生物柴油的固载脂肪酶催化剂及其用途，发明公开了一种固载在海泡石上的脂肪酶催化剂、其制备方法及利用所述催化剂制备生物柴油的方法，属于生物柴油制备领域。发明提供的固载脂肪酶催化剂用量少，且可重复利用次数高达10次，且制备生物柴油的反应活性高，反应速度快，反应条件相对温和，可以在常压及相对低的温度下进行，能够降低反应能耗，降低成本，同时，生产过程环境友好，操作过程简单，对设备腐蚀小。以上这些专利都是利用采用吸附、交联、包埋等固定化方法，改善游离脂肪酶的活性差、易受外界环境干扰、操作稳定性低等缺点。
脂肪酶是一种典型的界面酶，其催化活性容易在油水界面被“激活”，其立体结构中的氨基酸盖子会打开并使疏水活性位点暴露于油相中参与催化反应，因而脂肪酶在油水界面上具有比主体相中更强的活性和选择性，但是目前专利中采用的固定化方法都属于单相体系固定化酶，不利于发挥脂肪酶的界面活性，所以，研究一种新型的固定化酶的方法，既可以长期保持脂肪酶的天然催化活性，又便于连续性的大规模生产操作，对于生物柴油的工业化生产具有一定的现实意义。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是：提供一种静态乳液法固定化脂肪酶生产生物柴油的方法，它是利用聚二甲基硅氧烷、铂金催化剂和脂肪酶液形成乳液，后向乳液中加入分散剂形成稳定的复合乳液，后进行固化形成载酶静态乳液硅胶微球，即固定化脂肪酶。并将固定化酶用于催化植物油脂制备生物柴油的方法，该方法制备固定化酶工艺简单，可保持脂肪酶较高的催化活性，并用于生产生物柴油的大规模连续操作中。
本发明解决该技术问题所采用的技术方案是：
一种静态乳液法固定化脂肪酶生产生物柴油的方法，包括以下步骤：
(1)固定化脂肪酶：向反应器中加入聚二甲基硅氧烷、脂肪酶溶液和铂金催化剂，真空磁力搅拌0.5-2小时后得到乳液，再向乳液中加入分散剂，磁力搅拌0.5-1小时形成复合乳液，，然后将复合乳液在20-60℃，机械搅拌下，固化1-5小时，形成载酶静态乳液硅胶微球，过滤出即得到固定化脂肪酶；
其中，脂肪酶溶液的浓度为20-50mg/mL，溶剂为pH7.0的磷酸盐缓冲溶液；物料配比为质量比为聚二甲基硅氧烷:脂肪酶溶液＝1～10:1，质量比为聚二甲基硅氧烷:铂金催化剂＝1:0.5～3，体积比为分散剂:聚二甲基硅氧烷＝50～200:1；
(2)固定化脂肪酶催化反应生产生物柴油：
将植物油脂与短链醇加入到反应器中，再加入植物油脂体积1-4倍的正己烷、植物油脂质量20％-30％的固定化脂肪酶，恒温20-60℃下反应6-24小时后，即可得到生物柴油；
其中，摩尔比植物油脂:短链醇＝1:3～12。
所述的反应还包括如下步骤：将过滤得到的固定化酶分别用蒸馏水和正己烷洗涤，即可循环用于后续生物柴油的生产。
所述脂肪酶为南极假丝酵母脂肪酶B、柱状假丝酵母脂肪酶或洋葱伯克霍尔菌脂肪酶。
所述分散剂为聚乙烯醇或聚乙烯吡咯酮。
所述植物油脂为豆油、花生油、麻风树油、葵花籽油、黄连木油等的一种或几种的混合物。
所述短链醇为甲醇或乙醇。
本发明的有益效果是：
1.本发明是利用静态乳液法固定化脂肪酶生产生物柴油，制备的固定化脂肪酶为载酶静态乳液硅胶微球，属于多相体系固定化酶。固定化脂肪酶的内部是大量、独立分布的含脂肪酶的小液滴，这种独特的内部结构既可以使脂肪酶在最适发挥活性的生理环境中实现固定化，又有利于解决传统固定化方法无法使脂肪酶处于油水界面上的缺点，充分发挥脂肪酶的界面活性，提高脂肪酶的催化效率。与传统的溶胶凝胶法和反胶束法相比，该固定化方法制备的载酶静态乳液硅胶微球的优势在于：
(1)脂肪酶固定化后存在于水-油界面上，易于发挥脂肪酶的界面活性，保持较高的催化活性；
(2)载酶静态乳液硅胶微球可以利用过滤的方法，方便的从反应体系中分离出来便于回收再利用；
(3)具有良好的机械稳定性，在长期连续机械搅拌操作过程中保持较高的催化活性；
(4)载酶静态乳液硅胶微球具有良好的溶胀性能，提高了反应体系的传质性能。
2.本发明制备的固定化脂肪酶，浸泡在有机溶剂中载酶静态乳液硅胶微球可以溶胀2倍，溶胀后的载酶静态乳液硅胶微球内部孔道也随之扩张，这样能够提高固定化酶参与反应时的传质性能。
3.制备的固定化脂肪酶具有一定的弹性，在长期的连续性机械搅拌操作环境下的可以保持良好的机械稳定性，在反应结束后通过简单的过滤操作就可以分离出反应体系并用蒸馏水和正己烷清洗可循环应用于生产生物柴油。将固定化酶应用于生产生物柴油，生物柴油的产率最高可达到95.22％，重复使用20次(参与连续循环操作480小时)后仍保持完整的球形结构，生物柴油产率仍可达到75％以上。
4.本发明静态乳液法固定化脂肪酶的工艺简单，反应条件温和，无需高温高压条件，无环境污染，催化剂重复使用率高，有利于在大规模生物柴油生产中的工业化应用。
附图说明
图1为实施例1中的固定化脂肪酶的电镜照片，其中，图1a为固定化脂肪酶整体照片；图1b为固定化脂肪酶横截面电镜照片；
图2为实施例1中的固定化脂肪酶的激光共聚焦照片。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明做进一步地阐释，但实施例涉及的具体物料仅为表达具体的实验，并非仅限于此。
本发明所述的pH7.0的磷酸盐缓冲溶液的配置：
A液：称取71.6g磷酸氢二钠溶于1000ml蒸馏水；
B液：称取31.2g磷酸二氢钠溶于1000ml蒸馏水
取A液与B液体积比61:39,混合然后用pH计标定到pH＝7.0，即为pH7.0的磷酸盐缓冲溶液。
所述的南极假丝酵母脂肪酶B、柱状假丝酵母脂肪酶或洋葱伯克霍尔菌脂肪酶均为公知市售产品，以下实施例涉及的脂肪酶均为sigma公司购买。
所述的铂金催化剂是铂催化剂与乙烯基有机硅聚合物的混合体，液态，市售产品。本发明使用的具体商品型号为道康宁syl-off4000。
实例1：
固定化脂肪酶：将南极假丝酵母脂肪酶B溶于pH7.0的磷酸盐缓冲溶液，配置成20mg/mL的脂肪酶液，将聚二甲基硅氧烷(道康宁DC184，以下实施例同此)2g，(体积1.9mL)，脂肪酶液0.5g，铂金催化剂4g加入到锥形瓶中，抽真空(0.09Mpa)磁力搅拌0.5小时，形成乳液；向锥形瓶中加入分散剂PVA(聚合度1000，醇解度98％；以下实施例同此)溶液200mL，磁力搅拌0.5小时使PVA溶液均匀吸附在油滴表面，形成复合乳液。将含有复合乳液的锥形瓶放置于在恒温水浴器中，30℃机械搅拌，固化3小时，利用水循环式真空泵将固定化酶从体系中抽滤分离，即得到固定化脂肪酶；
固定化脂肪酶的电镜表征：将过滤得到的固定化脂肪酶和其横截面进行电镜(JSM-6700F)表征，由图(1a，b)可知固定化脂肪酶呈球形，固定化脂肪酶的内部有大量的、独立分散的小液滴，固定化酶的外表面较光滑。
固定化脂肪酶的激光共聚焦表征：将固定化脂肪酶进行激光共聚焦表征，利用荧光物质(FITC)标记南极假丝酵母脂肪酶B，图2中固定化脂肪酶的微球内的黑色阴影部分是南极假丝酵母脂肪酶B，说明南极假丝酵母脂肪酶B被成功固定在硅胶微球的内部，且分布均匀。
制备生物柴油：将豆油0.60g(豆油体积为0.65mL，摩尔量约为0.7mmol；)，乙醇0.24g(乙醇体积为0.30mL；摩尔量为5.2mmol)；(油醇摩尔比：1:7.5)，固定化酶0.12g，正己烷1mL，置于具塞三角瓶中混合均匀，在50℃恒温水浴摇床中，反应10小时后，气相色谱内标法检测生物柴油产率为93.17％。
反应结束后，利用水循环式真空泵抽滤将固定化脂肪酶从反应体系中分离，然后分别用10mL正己烷、10mL蒸馏水充分洗涤三次，即可用于后续的生物柴油生产。
实例2：
固定化脂肪酶：将洋葱伯克霍尔菌脂肪酶溶于pH7.0的磷酸盐缓冲溶液，配置成40mg/mL的酶液，将聚二甲基硅氧烷2g(体积1.9mL)，脂肪酶液1g，铂金催化剂1g加入到锥形瓶中，抽真空(0.09Mpa)磁力搅拌搅拌1小时，形成乳液；向锥形瓶中加入分散剂PVP溶液300mL，磁力搅拌0.5小时使PVP(K值30；以下实施例同此)溶液均匀吸附在油滴表面，形成复合乳液。将含有复合乳液的锥形瓶放置于在恒温水浴器中，40℃机械搅拌，固化1小时，利用水循环式真空泵将固定化酶从体系中抽滤分离，即得到固定化脂肪酶；
制备生物柴油：将花生油0.60g(花生油体积为0.63mL，摩尔量为0.67mM)，甲醇0.24g，(甲醇体积为0.30mL；摩尔量为7.5mmol)(油醇摩尔比：1:11)固定化酶0.12g，正己烷1mL，置于具塞三角瓶中混合均匀，在50℃恒温水浴摇床中，反应12小时后，气相色谱内标法检测生物柴油产率为92.17％。
反应结束后，利用水循环式真空泵抽滤将固定化脂肪酶从反应体系中分离，然后分别用10mL正己烷、10mL蒸馏水充分洗涤三次，即可用于后续的生物柴油生产。
实例3：
固定化脂肪酶：将柱状假丝酵母脂肪酶溶于pH7.0的磷酸盐缓冲溶液，配置成50mg/mL的酶液，将聚二甲基硅氧烷2g(体积1.9mL)，脂肪酶液0.2g，铂金催化剂5g加入到锥形瓶中，抽真空(0.09Mpa)磁力搅拌0.5小时，形成乳液；向锥形瓶中加入分散剂PVA溶液300mL，磁力搅拌1小时使PVA溶液均匀吸附在油滴表面，形成复合乳液。将含有复合乳液的锥形瓶放置于在恒温水浴器中，60℃机械搅拌，固化1小时，利用水循环式真空泵将固定化酶从体系中抽滤分离，即得到固定化脂肪酶；
制备生物柴油：将麻风树油0.60g(麻风树油体积为0.6mL，摩尔量为0.66mmol)，甲醇0.24g，(甲醇体积为0.30mL；摩尔量为7.5mmol)(油醇摩尔比：1:11)固定化酶0.12g，正己烷1mL，置于具塞三角瓶中混合均匀，在50℃恒温水浴摇床中，反应10小时后，气相色谱内标法检测生物柴油产率为90.25％。
反应结束后，利用水循环式真空泵抽滤将固定化脂肪酶从反应体系中分离，然后分别用10mL正己烷、10mL蒸馏水充分洗涤三次，即可用于后续的生物柴油生产。
实例4：
固定化脂肪酶：将柱状假丝酵母脂肪酶溶于pH7.0的磷酸盐缓冲溶液，配置成50mg/mL的酶液，将聚二甲基硅氧烷2g(体积1.9mL)，脂肪酶液0.2g，铂金催化剂2g加入到锥形瓶中，抽真空(0.09Mpa)磁力搅拌1小时，形成乳液；向锥形瓶中加入分散剂PVP溶液150mL，磁力搅拌搅拌1小时使PVP溶液均匀吸附在油滴表面，形成复合乳液。将含有复合乳液的锥形瓶放置于在恒温水浴器中，60℃机械搅拌，固化1小时，利用水循环式真空泵将固定化酶从体系中抽滤分离，即得到固定化脂肪酶；
制备生物柴油：将葵花籽油0.60g，(葵花籽油体积为0.63mL，摩尔量为0.6mmol)甲醇0.2g，(甲醇体积为0.25mL；摩尔量为6.25mmol)(油醇摩尔比：1:10)固定化酶0.12g，正己烷1mL，置于具塞三角瓶中混合均匀，在60℃恒温水浴摇床中，反应12小时后，气相色谱内标法检测生物柴油产率为90.63％。
反应结束后，利用水循环式真空泵抽滤将固定化脂肪酶从反应体系中分离，然后分别用10mL正己烷、10mL蒸馏水充分洗涤三次，即可用于后续的生物柴油生产。
实例5：
固定化脂肪酶：将柱状假丝酵母脂肪酶溶于pH7.0的磷酸盐缓冲溶液，配置成50mg/mL的酶液，将聚二甲基硅氧烷2g(体积1.9mL)，脂肪酶液0.2g，铂金催化剂2g加入到锥形瓶中，抽真空(0.09Mpa)磁力搅拌1h小时形成乳液；向锥形瓶中加入分散剂PVA溶液150mL，磁力搅拌1小时使PVA溶液均匀吸附在油滴表面，形成复合乳液。将含有复合乳液的锥形瓶放置于在恒温水浴器中，60℃机械搅拌，固化1小时，利用水循环式真空泵将固定化酶从体系中抽滤分离，即得到固定化脂肪酶；
制备生物柴油：将黄连木油0.60g(黄连木油体积为0.65mL，摩尔量约为0.69mmol)，乙醇0.24g，(乙醇体积为0.30mL；摩尔量为5.2mmol)(油醇摩尔比：1:7.5)固定化酶0.18g，正己烷1mL，置于具塞三角瓶中混合均匀，在60℃恒温水浴摇床中，反应8小时后，气相色谱内标法检测生物柴油产率为91.42％。
反应结束后，利用水循环式真空泵抽滤将固定化脂肪酶从反应体系中分离，然后分别用10mL正己烷、10mL蒸馏水充分洗涤三次，即可用于后续的生物柴油生产。
实例6：
固定化脂肪酶：将洋葱伯克霍尔菌脂肪酶溶于pH7.0的磷酸盐缓冲溶液，配置成50mg/mL的酶液，将聚二甲基硅氧烷2g(体积1.9mL)，脂肪酶液0.2g，铂金催化剂2g加入到锥形瓶中，抽真空(0.09Mpa)磁力搅拌1小时，形成乳液；向锥形瓶中加入分散剂PVA溶液150mL，磁力搅拌1小时使PVA溶液均匀吸附在油滴表面，形成复合乳液。将含有复合乳液的锥形瓶放置于在恒温水浴器中，60℃机械搅拌，固化3小时，利用水循环式真空泵将固定化酶从体系中抽滤分离，即得到固定化脂肪酶；
制备生物柴油：将豆油0.60g(豆油体积为0.65mL，摩尔量约为0.7mmol)，甲醇0.24g(甲醇体积为0.30mL；摩尔量为7.5mmol)(油醇摩尔比：1:10.7)固定化酶0.18g，正己烷3mL，置于具塞三角瓶中混合均匀，在60℃恒温水浴摇床中，反应15小时后，气相色谱内标法检测生物柴油产率为95.22％。
反应结束后，利用水循环式真空泵抽滤将固定化脂肪酶从反应体系中分离，然后分别用10mL正己烷、10mL蒸馏水充分洗涤三次，即可用于后续的生物柴油生产。
实例7：
固定化脂肪酶：将洋葱伯克霍尔菌脂肪酶溶于pH7.0的磷酸盐缓冲溶液，配置成50mg/mL的酶液，将聚二甲基硅氧烷2g(体积1.9mL)，脂肪酶液0.2g，铂金催化剂2g加入到锥形瓶中，抽真空(0.09Mpa)磁力搅拌1小时，向锥形瓶中加入PVA溶液150mL，磁力搅拌0.5小时，使PVA溶液均匀吸附在油滴表面，形成复合乳液。在45℃下机械搅拌固化1小时，整个反应体系抽滤得到固定化脂肪酶；
制备生物柴油：将豆油0.60g(豆油体积为0.65mL，摩尔量约为0.7mmol)，甲醇0.24g，甲醇体积为0.30mL；摩尔量为7.5mmol)(油醇摩尔比：1:10.7)固定化酶0.18g，正己烷3mL，置于具塞三角瓶中混合均匀，在60℃恒温水浴摇床中，反应24小时后，气相色谱内标法检测生物柴油产率为95.22％。
反应结束后，利用水循环式真空泵抽滤将固定化脂肪酶从反应体系中分离，然后分别用10mL正己烷、10mL蒸馏水充分洗涤三次，即可用于后续的生物柴油生产。
实施例8：
固定化脂肪酶的重复使用：利用水循环式真空泵抽滤将固定化脂肪酶从反应体系中分离，过滤出的固定化脂肪酶分别用10mL正己烷、10mL蒸馏水充分洗涤三次，用于下一循环生产生物柴油的反应中，每一循环生产生物柴油的步骤均同实施例1中的“制备生物柴油”步骤，重复循环生产20次，生物柴油产率如下表1。
表1
本发明未尽事宜为公知技术。
Claims (6)
1.一种静态乳液法固定化脂肪酶生产生物柴油的方法，其特征为包括以下步骤：
（1）固定化脂肪酶：向反应器中加入聚二甲基硅氧烷、脂肪酶溶液和铂金催化剂，真空磁力搅拌0.5-2小时后得到乳液，再向乳液中加入分散剂，磁力搅拌0.5-1小时形成复合乳液，然后将复合乳液在20-600C，机械搅拌下，固化1-5小时，形成载酶静态乳液硅胶微球，过滤出即得到固定化脂肪酶；
其中，脂肪酶溶液的浓度为20-50mg/mL，溶剂为pH7.0的磷酸盐缓冲溶液；物料配比为质量比为聚二甲基硅氧烷:脂肪酶溶液＝1～10:1，质量比为聚二甲基硅氧烷:铂金催化剂＝1:0.5～3，体积比为分散剂:聚二甲基硅氧烷＝50～200:1；
（2）固定化脂肪酶催化反应生产生物柴油：
将植物油脂与短链醇加入到反应器中，再加入植物油脂体积1-4倍的正己烷、植物油脂质量20%-30%的固定化脂肪酶，恒温20-600C下反应6-24小时后，即可得到生物柴油；
其中，摩尔比植物油脂:短链醇＝1:3～12。
2.如权利要求所述的静态乳液法固定化脂肪酶生产生物柴油的方法，其特征为所述的反应还包括如下步骤：将过滤得到的固定化酶分别用蒸馏水和正己烷洗涤，即可循环用于后续生物柴油的生产。
3.如权利要求所述的静态乳液法固定化脂肪酶生产生物柴油的方法，其特征为所述脂肪酶为南极假丝酵母脂肪酶B、柱状假丝酵母脂肪酶或洋葱伯克霍尔菌脂肪酶。
4.如权利要求所述的静态乳液法固定化脂肪酶生产生物柴油的方法，其特征为所述分散剂为聚乙烯醇或聚乙烯吡咯酮。
5.如权利要求所述的静态乳液法固定化脂肪酶生产生物柴油的方法，其特征为所述植物油脂为豆油、花生油、麻风树油、葵花籽油、黄连木油等的一种或几种的混合物。
6.如权利要求所述的静态乳液法固定化脂肪酶生产生物柴油的方法，其特征为所述短链醇为甲醇或乙醇。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510869806.9A CN105274157B (zh) | 2015-12-01 | 2015-12-01 | 一种静态乳液法固定化脂肪酶生产生物柴油的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510869806.9A CN105274157B (zh) | 2015-12-01 | 2015-12-01 | 一种静态乳液法固定化脂肪酶生产生物柴油的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN105274157A true CN105274157A (zh) | 2016-01-27 |
| CN105274157B CN105274157B (zh) | 2018-07-20 |
Family
ID=55143987
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201510869806.9A Expired - Fee Related CN105274157B (zh) | 2015-12-01 | 2015-12-01 | 一种静态乳液法固定化脂肪酶生产生物柴油的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN105274157B (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107115889A (zh) * | 2017-04-27 | 2017-09-01 | 河北工业大学 | 一种反应精馏用酶催化填料及其涂布方法和应用 |
| CN110004138A (zh) * | 2019-04-29 | 2019-07-12 | 中国检验检疫科学研究院 | 固定化酶及其制备方法 |
| CN112980828A (zh) * | 2021-03-04 | 2021-06-18 | 扬州大学 | 一种利用二维聚酰胺固定化脂肪酶的生物催化剂及其应用于催化大豆油制备生物柴油的方法 |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6331578B1 (en) * | 1998-11-18 | 2001-12-18 | Josephine Turner | Process for preparing interpenetrating polymer networks of controlled morphology |
| WO2012122404A2 (en) * | 2011-03-08 | 2012-09-13 | Akermin, Inc. | Micellar polysiloxane enzyme immobilization materials |
| CN102827825A (zh) * | 2012-08-28 | 2012-12-19 | 连云港正丰生物能源有限公司 | 一种用于制备生物柴油的固载脂肪酶催化剂及其用途 |
| CN103146675A (zh) * | 2013-03-06 | 2013-06-12 | 昆明理工大学 | 以赤石脂为载体的固定化脂肪酶的制备方法 |
| CN104313010A (zh) * | 2014-11-05 | 2015-01-28 | 太原理工大学 | 磁响应性复合脂肪酶的制备方法及生物柴油合成中的应用 |
| CN104450668A (zh) * | 2014-12-10 | 2015-03-25 | 中国科学院宁波城市环境观测研究站 | 一种用于餐厨废油转化生物柴油的生物炭固定化酶及其制备方法 |
| CN104651345A (zh) * | 2013-11-19 | 2015-05-27 | 金雪 | 一种固定化脂肪酶的制备方法 |
| CN104911222A (zh) * | 2015-06-24 | 2015-09-16 | 中国科学院广州能源研究所 | 一种离子液体体系下无载体固定化脂肪酶催化制备生物柴油的方法 |
-
2015
- 2015-12-01 CN CN201510869806.9A patent/CN105274157B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6331578B1 (en) * | 1998-11-18 | 2001-12-18 | Josephine Turner | Process for preparing interpenetrating polymer networks of controlled morphology |
| WO2012122404A2 (en) * | 2011-03-08 | 2012-09-13 | Akermin, Inc. | Micellar polysiloxane enzyme immobilization materials |
| CN102827825A (zh) * | 2012-08-28 | 2012-12-19 | 连云港正丰生物能源有限公司 | 一种用于制备生物柴油的固载脂肪酶催化剂及其用途 |
| CN103146675A (zh) * | 2013-03-06 | 2013-06-12 | 昆明理工大学 | 以赤石脂为载体的固定化脂肪酶的制备方法 |
| CN104651345A (zh) * | 2013-11-19 | 2015-05-27 | 金雪 | 一种固定化脂肪酶的制备方法 |
| CN104313010A (zh) * | 2014-11-05 | 2015-01-28 | 太原理工大学 | 磁响应性复合脂肪酶的制备方法及生物柴油合成中的应用 |
| CN104450668A (zh) * | 2014-12-10 | 2015-03-25 | 中国科学院宁波城市环境观测研究站 | 一种用于餐厨废油转化生物柴油的生物炭固定化酶及其制备方法 |
| CN104911222A (zh) * | 2015-06-24 | 2015-09-16 | 中国科学院广州能源研究所 | 一种离子液体体系下无载体固定化脂肪酶催化制备生物柴油的方法 |
Non-Patent Citations (12)
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107115889A (zh) * | 2017-04-27 | 2017-09-01 | 河北工业大学 | 一种反应精馏用酶催化填料及其涂布方法和应用 |
| CN110004138A (zh) * | 2019-04-29 | 2019-07-12 | 中国检验检疫科学研究院 | 固定化酶及其制备方法 |
| CN112980828A (zh) * | 2021-03-04 | 2021-06-18 | 扬州大学 | 一种利用二维聚酰胺固定化脂肪酶的生物催化剂及其应用于催化大豆油制备生物柴油的方法 |
| CN112980828B (zh) * | 2021-03-04 | 2023-09-05 | 扬州大学 | 一种制备生物柴油的二维聚酰胺固定化脂肪酶的催化剂 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN105274157B (zh) | 2018-07-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Mandari et al. | Biodiesel production using homogeneous, heterogeneous, and enzyme catalysts via transesterification and esterification reactions: A critical review | |
| Mathew et al. | Recent advances in biodiesel production: Challenges and solutions | |
| Xie et al. | Immobilized lipase on magnetic chitosan microspheres for transesterification of soybean oil | |
| You et al. | Biodiesel production from jatropha oil catalyzed by immobilized Burkholderia cepacia lipase on modified attapulgite | |
| Moreira et al. | Biodiesel synthesis by enzymatic transesterification of palm oil with ethanol using lipases from several sources immobilized on silica–PVA composite | |
| Cao et al. | One-step direct transesterification of wet yeast for biodiesel production catalyzed by magnetic nanoparticle-immobilized lipase | |
| Vasudevan et al. | Environmentally sustainable biofuels: advances in biodiesel research | |
| WO2005075615A1 (fr) | Nouveau procede de production de biodiesel a partir d'huiles et de graisses catalysees par lipase dans un systeme de reaction a milieu organique | |
| KR20090117725A (ko) | 개량되고 안정화된 활성을 갖는 고정된 계면 효소 | |
| CN105274157A (zh) | 一种静态乳液法固定化脂肪酶生产生物柴油的方法 | |
| CN113477260B (zh) | 一种催化剂及利用该催化剂制备生物柴油的方法 | |
| CN102250869A (zh) | 一种用于生产植物甾醇酯的磁性固定化酶的制备方法 | |
| CN103468622A (zh) | 海藻酸钠-微孔淀粉固定抑藻菌dh46的方法 | |
| CN104911222B (zh) | 一种离子液体体系下无载体固定化脂肪酶催化制备生物柴油的方法 | |
| CN101265448B (zh) | 油酯催化分离两相酶-膜生物反应器及其制备和应用 | |
| CN102337310B (zh) | 一种辛烯基琥珀酸淀粉酯的合成方法 | |
| CN100347271C (zh) | 微生物细胞催化脂肪酸及含酸油脂生产生物柴油的方法 | |
| CN101717801A (zh) | 利用玉米芯固定化脂肪酶制备生物柴油的方法 | |
| Ma et al. | Lipase based static emulsions as efficient biocatalysts for biodiesel production | |
| KR101548043B1 (ko) | 미생물을 이용한 건조과정이 없는 바이오디젤 제조방법 | |
| CN1260368C (zh) | 一种用固定化脂肪酶催化合成维生素a脂肪酸酯的方法 | |
| CN104818267B (zh) | 一种高效催化制备生物柴油用新型纤维生物基固定化全细胞催化剂及其制备方法 | |
| CN1724612A (zh) | 生物柴油催化剂及利用该催化剂合成生物柴油的方法 | |
| CN112980828B (zh) | 一种制备生物柴油的二维聚酰胺固定化脂肪酶的催化剂 | |
| CN111607625B (zh) | 一种酶法生产抗坏血酸棕榈酸酯的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20180720 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |