CN105232850A - 一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液及其制备方法 - Google Patents
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液及其制备方法，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1~2、槟榔2~4、贯众3~6、苦参1~2、苦楝皮5~8和白头翁5~10。该中草药发酵提取液属于天然药物，无毒副作用，药物中各个营养成分相互协同、互为补充，具有抗微生物、抗病毒、抗寄生虫、抗真菌和提高免疫力的作用，能有效促进鱼类的生长发育。
Description
技术领域
本发明属于水产用中医药技术领域，具体涉及一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液及其制备方法。
背景技术
春夏之交，随着水温的上升，水中微生物活性增强，极易使鱼类感染严重的寄生虫病。通常大多数寄生虫在自然水体中并不对鱼类产生明显的威胁，在稳定的水生态系统中，宿主和寄生虫种群之间常处于平衡状态，然而当环境与生态急剧改变时，就会引起寄生虫大量侵入宿主而导致寄生虫病的暴发，给渔业生产带来损失。鱼类寄生虫按其寄生部位可以分为体内寄生虫和体外寄生虫。体内寄生虫是指寄生在鱼的内部器官、血液、肠道和其他组织中，如各种绦虫、线虫、艾美虫、血吸虫等；体外寄生虫是指寄生在鱼的体表、鳃、鳍等处，如指环虫、锚头鲺等。虽然对鱼类寄生虫病的防治措施比较多，但要使得发病的水产品符合绿色食品的要求，对防治方法及用药等提出了更高的要求。
我国的中草药用于鱼病防治有着悠久的历史。因其具有天然、多功能、无毒副残留、无抗药性、双向调节、促进免疫等诸多优点，解决了鱼病防治中使用化学药物、抗生素等引发的抗药性等问题，做到了生态、健康、高效，所以在全面提倡健康养殖的新形势下，应用中草药防治鱼病将具有更为广阔的前景。在防治寄生虫病方面，常用于防治鱼类寄生虫病的中草药有苦楝、大蒜、百部、槟榔、南瓜子、苦参、大黄和黄芩等。
虽然中草药的疗效是肯定的，但在鱼病大规模暴发时，短期内大量使用往往感到效果不佳，因此，对其进行深加工就显得尤为必要。芽孢杆菌是益生菌的一种，其在水产养殖方面具有以下几个方面的优势：产酶丰富，对水质改良和底泥处理有作用；耗氧能力强，可以抑制好氧的致病菌；产生抑菌素，抑制水中和鱼体内的致病菌。中草药和益生菌在水产养殖中使用，均可以促进养殖对象的生长，增强机体的抗病能力。二者联合使用时，中草药可以促进益生菌的增殖，益生菌可以促进中草药的吸收和利用。故经过益生菌发酵后中草药用于水产养殖时二者的功效将会得到最大限度的发挥。
发明内容
本发明的目的在于提供一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，该中草药发酵提取液属于天然药物，无毒副作用，药物中各个营养成分相互协同、互为补充，具有抗微生物、抗病毒、抗寄生虫、抗真菌和提高免疫力的作用，能有效促进鱼类的生长发育。
为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案：
本发明提供了一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1~2、槟榔2~4、贯众3~6、苦参1~2、苦楝皮5~8和白头翁5~10。
根据上述的防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1~1.5、槟榔2~3、贯众5~6、苦参1.6~2、苦楝皮7~8和白头翁5~8。
根据上述的防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1.5~2、槟榔3~4、贯众3~5、苦参1~1.6、苦楝皮5~7和白头翁8~10。
根据权上述的防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿2、槟榔3、贯众5、苦参1、苦楝皮7和白头翁8。
所述的防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液的制备方法，具体步骤如下：
（1）将中药青蒿、槟榔、贯众、苦参、苦楝皮和白头翁烘干、粉碎为40～80目粉末备用；
（2）按照上述配方取步骤（1）中药粉末加入8～10倍量中药粉末量的水煎煮提取,煎煮1～2小时过滤得滤液；药渣加入8～10倍药渣量的水煎煮提取，煎煮1～2小时过滤得滤液，合并滤液备用；
（3）按重量比取芽孢杆菌菌液加入步骤（2）所得滤液中，芽孢杆菌菌液与中药液的重量比1:（40～60），密闭厌氧发酵，分装，即得防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液。
所述的芽孢杆菌菌液的制备方法如下：取芽孢杆菌菌种进行斜面菌种培养，将斜面培养产生的悬浮液在对应的培养基内厌氧扩大培养，至对数生长期菌落数高于1.0×1010CFU/mL时止，得对应的菌液。
步骤（1）烘干温度为60～80℃。
步骤（3）中发酵温度为30℃～37℃，发酵时间为24～48h。
芽孢杆菌的培养基为营养琼脂培养基。
本发明中各原料功效简述如下：
青蒿：为菊科植物青蒿和黄花蒿的干燥或鲜品全草，本品主要含青蒿酮、侧柏酮、樟脑、青蒿素等。对鱼类的细菌病、蠕虫类寄生虫病、真菌性疾病疗效显著，预防时用量减半。槟榔：为棕桐科植物槟榔的种子，含生物碱，以槟榔碱碱为主，为驱虫的有效成分。槟榔碱对绦虫有较强的麻痹作用，使虫体瘫痪，失去其吸附于肠粘膜的能力；又由于本品的拟胆碱作用，能增强胃肠蠕动，有利于虫体排出。
贯众：为水龙骨科植物粗茎鳞毛蕨，多年生草本，主含绵马素、绵马酸等，所含绵马酸对绦虫有强烈毒性，有驱虫作用。可防治鱼类毛细线虫病、许氏绦虫病等。
苦参：为豆科落叶小灌木，广布房前屋后山坡湿地。根、叶入药，有燥湿、止痒、杀虫之功，能抗原虫，对致病性皮肤真菌有抑制作用。主治疥癣、皮肤病和体内外寄生虫病。
苦楝皮:有杀虫、杀菌作用，用于防治寄生虫，如锚头蚤、车轮虫、隐鞭虫、毛细线虫等。
白头翁：别名奈何草、粉乳草、白头草、老姑草等等。有清热解毒、凉血止痢、燥湿杀虫的功效，具有很高的药用价值。
芽孢杆菌：芽孢杆菌是一类能形成芽孢的异养型革兰氏阳性细菌，具有生长速率快、溶解氧要求浓度低、能忍受酸性环境的优点；可促进水产动物营养物质的吸收，提高其消化机能，减少有毒害物质，优化养殖环境。
与现有技术相比，本发明取得的有益效果：
1.本发明中草药发酵提取液属于天然药物，无毒副作用，药物中各个营养成分相互协同、互为补充，具有抗微生物、抗病毒、抗寄生虫、抗真菌和提高免疫力的作用，能有效促进鱼类的生长发育。
2.本发明通过芽孢杆菌的加入可以与养殖环境中的有害藻类及水产致病菌竞争，形成优势种群，抑制有害藻类及水产致病菌，有利于水产养殖，改善养殖环境，同时对水溶性有机物分解也有重要的作用。
3.本发明采用中药与益生菌的结合有显著的经济效益和社会效益。
用法用量：泼洒法，预防用药，本品每瓶1000ml泼洒范围为1000ml/10m2，连用2~3天。治疗量加倍，连用5~8天。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进一步的描述，但并不限制本发明的内容。
实施例1
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1~2、槟榔2~4、贯众3~6、苦参1~2、苦楝皮5~8和白头翁5~10。
所述的防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液的制备方法，具体步骤如下：
（1）将中药青蒿、槟榔、贯众、苦参、苦楝皮和白头翁烘干、粉碎为40～80目粉末备用；
（2）按照上述配方取步骤（1）中药粉末加入8～10倍量中药粉末量的水煎煮提取,煎煮1～2小时过滤得滤液；药渣加入8～10倍药渣量的水煎煮提取，煎煮1～2小时过滤得滤液，合并滤液备用；
（3）按重量比取芽孢杆菌菌液加入步骤（2）所得滤液中，芽孢杆菌菌液与中药液的重量比1:（40～60），密闭厌氧发酵，分装，即得防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液。
所述芽孢杆菌菌液的制备方法如下：取芽孢杆菌菌种进行斜面菌种培养，将斜面培养产生的悬浮液在对应的营养琼脂培养基内厌氧扩大培养，至对数生长期菌落数高于1.0×1010CFU/mL时止，得对应的菌液。
实施例2
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿2、槟榔3、贯众5、苦参1、苦楝皮7和白头翁8。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例3
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿2、槟榔2、贯众3、苦参1、苦楝皮5和白头翁5。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例4
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1、槟榔4、贯众5、苦参1、苦楝皮8和白头翁10。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例5
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1.2、槟榔3.5、贯众3、苦参1.6、苦楝皮6.8和白头翁7。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例6
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿2、槟榔4、贯众3、苦参1、苦楝皮5和白头翁6。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例7
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1.8、槟榔2.8、贯众4.5、苦参1.5、苦楝皮7.2和白头翁5.6。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例8
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1.6、槟榔3.2、贯众3.1、苦参1.4、苦楝皮5.2和白头翁6.4。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例9
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1.9、槟榔3.8、贯众5.2、苦参1.1、苦楝皮6.2和白头翁9.2。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例10
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1.5、槟榔2.5、贯众3.5、苦参2、苦楝皮6.5和白头翁10。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例11
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1.4、槟榔2.7、贯众5.2、苦参1.7、苦楝皮5.6和白头翁7.6。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例12
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1、槟榔4、贯众6、苦参2、苦楝皮8和白头翁6。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例13
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1.9、槟榔2.9、贯众3.8、苦参1.2、苦楝皮5.1和白头翁8.4。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例14
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1.7、槟榔3.4、贯众4.6、苦参1.9、苦楝皮7.3和白头翁5.9。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例15
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1.3、槟榔2.9、贯众3.5、苦参1.5、苦楝皮7.2和白头翁6.4。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例16
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1.2、槟榔2.7、贯众4.2、苦参1.2、苦楝皮7.3和白头翁8.2。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例17
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿2、槟榔4、贯众3、苦参1、苦楝皮5和白头翁9。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例18
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿2、槟榔4、贯众6、苦参2、苦楝皮7和白头翁6。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例19
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1.1、槟榔2.3、贯众4.4、苦参1.9、苦楝皮6.1和白头翁8.2。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例20
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1.6、槟榔3.4、贯众5.1、苦参1.7、苦楝皮6.8和白头翁8.9。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例21
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1、槟榔4、贯众3.6、苦参1、苦楝皮6.4和白头翁5.8。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例22
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿2、槟榔2.5、贯众5.5、苦参1.5、苦楝皮5.5和白头翁6。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
实施例23
一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1.6、槟榔3.2、贯众4.2、苦参1.6、苦楝皮7.7和白头翁8.9。
本实施例的制备方法与实施例1相同。
下面以具体实验说明本发明的效果：
试验例
试验动物：随机选取400尾外观正常，体质健硕，大小均匀约50g的草鱼。分为置于室内4个池内养殖，每个池内100尾草鱼。
试验组别：预防试验1～3组，分别泼洒实施例2～4组中制备的中草药发酵提取液，治疗组在鱼群发病时给予治疗量给药，对照组不给予任何用药方案。喂饲相同的饵料。
试验方法：4个组，对照组不加任何药物，只喂饲基础日粮。其他三个组，每隔一周按1000ml/10m2的用药量泼洒一次中草药发酵提取液。试验周期为8周。期间早晚各投一次饵料。水温控制为15～20℃。空气压缩机根据情况定期加氧。每天观察并记录鱼的健康情况，试验期间不换水，定期清理残饵和粪便。
下表1。
疗效判断标准：
发病：试验中草鱼出现寄生虫疾病的病症；
死亡：试验结束草鱼发病死亡；
治愈率：试验期间出现症状没死亡草鱼。
结论：统计分析，预防试验组1～3组中草鱼的发病率均显著低于对照组（P＜0.01），且治愈率均高于治疗组和对照组。预防试验组1的治愈率明显高于预防试验组2和3。治疗组经过治疗后治愈率达87%。说明本发明最佳实例为实例2，本发明防治淡水鱼寄生虫病有较好的预防和治疗治作用。
Claims (9)
1.一种防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，其特征在于是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1~2、槟榔2~4、贯众3~6、苦参1~2、苦楝皮5~8和白头翁5~10。
2.根据权利要求1所述的防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，其特征在于是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1~1.5、槟榔2~3、贯众5~6、苦参1.6~2、苦楝皮7~8和白头翁5~8。
3.根据权利要求1所述的防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，其特征在于是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿1.5~2、槟榔3~4、贯众3~5、苦参1~1.6、苦楝皮5~7和白头翁8~10。
4.根据权利要求1所述的防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液，其特征在于是由中药的提取液加入芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由以下重量份的组分组成：青蒿2、槟榔3、贯众5、苦参1、苦楝皮7和白头翁8。
5.一种如权利要求1所述的防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液的制备方法，其特征在于具体步骤如下：
（1）将中药青蒿、槟榔、贯众、苦参、苦楝皮和白头翁烘干、粉碎为40～80目粉末备用；
（2）按照上述配方取步骤（1）中药粉末加入8～10倍量中药粉末量的水煎煮提取,煎煮1～2小时过滤得滤液；药渣加入8～10倍药渣量的水煎煮提取，煎煮1～2小时过滤得滤液，合并滤液备用；
（3）按重量比取芽孢杆菌菌液加入步骤（2）所得滤液中，芽孢杆菌菌液与中药液的重量比1:（40～60），密闭厌氧发酵，分装，即得防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液。
6.根据权利要求5所述的防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液的制备方法，其特征在于芽孢杆菌菌液的制备方法如下：
取芽孢杆菌菌种进行斜面菌种培养，将斜面培养产生的悬浮液在对应的培养基内厌氧扩大培养，至对数生长期菌落数高于1.0×1010CFU/mL时止，得对应的菌液。
7.根据权利要求5所述的防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液的制备方法，其特征在于：步骤（1）烘干温度为60～80℃。
8.根据权利要求5所述的防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液的制备方法，其特征在于：步骤（3）中发酵温度为30℃～37℃，发酵时间为24～48h。
9.根据权利要求6所述的防治淡水鱼寄生虫病的中草药发酵提取液的制备方法，其特征在于：芽孢杆菌的培养基为营养琼脂培养基。
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