CN1052310A - 人类免疫缺陷病毒相关肽 - Google Patents
人类免疫缺陷病毒相关肽 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1052310A CN1052310A CN90108411A CN90108411A CN1052310A CN 1052310 A CN1052310 A CN 1052310A CN 90108411 A CN90108411 A CN 90108411A CN 90108411 A CN90108411 A CN 90108411A CN 1052310 A CN1052310 A CN 1052310A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- leu
- peptide
- glu
- gly
- ser
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims description 257
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims description 65
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 115
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 claims abstract description 59
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 35
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims abstract description 21
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 claims description 106
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 73
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 45
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 44
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 44
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 claims description 32
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 26
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 claims description 14
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 14
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 14
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 claims description 14
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 claims description 13
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 claims description 13
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 claims description 13
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims description 13
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims description 12
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 claims description 12
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 claims description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 12
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 11
- 239000012876 carrier material Substances 0.000 claims description 11
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 11
- 238000003780 insertion Methods 0.000 claims description 10
- 230000037431 insertion Effects 0.000 claims description 10
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 9
- 238000011161 development Methods 0.000 claims description 9
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 9
- 230000008859 change Effects 0.000 claims description 8
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 claims description 8
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 claims description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 7
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims description 5
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 claims description 5
- 206010058874 Viraemia Diseases 0.000 claims description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 2
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 claims 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 abstract description 19
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 15
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 abstract description 14
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 abstract description 14
- 239000012634 fragment Substances 0.000 abstract description 14
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract description 13
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 abstract 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 75
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 68
- -1 IDS Species 0.000 description 47
- 102100029905 DNA polymerase epsilon subunit 3 Human genes 0.000 description 45
- 101710104359 F protein Proteins 0.000 description 45
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 42
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 42
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 27
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 20
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 17
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 17
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 17
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 17
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 16
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- MDXGYYOJGPFFJL-QMMMGPOBSA-N N(alpha)-t-butoxycarbonyl-L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OC(C)(C)C MDXGYYOJGPFFJL-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 13
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 13
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 13
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 12
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 12
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 11
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 11
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 11
- BQBCIBCLXBKYHW-CSMHCCOUSA-N Thr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]([NH3+])[C@@H](C)O BQBCIBCLXBKYHW-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 11
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 11
- 238000013016 damping Methods 0.000 description 11
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 11
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 11
- 108010091748 peptide A Proteins 0.000 description 11
- DMBKPDOAQVGTST-GFCCVEGCSA-N (2r)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-3-phenylmethoxypropanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@@H](C(O)=O)COCC1=CC=CC=C1 DMBKPDOAQVGTST-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 10
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 10
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 10
- 108010005636 polypeptide C Proteins 0.000 description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 10
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 9
- 101800005149 Peptide B Proteins 0.000 description 9
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 9
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 9
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Substances OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- WBIIPXYJAMICNU-AWEZNQCLSA-N (2s)-5-[amino-[(4-methylphenyl)sulfonylamino]methylidene]azaniumyl-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]pentanoate Chemical compound CC1=CC=C(S(=O)(=O)NC(N)=NCCC[C@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(O)=O)C=C1 WBIIPXYJAMICNU-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 8
- 125000001917 2,4-dinitrophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C(=C1*)[N+]([O-])=O)[N+]([O-])=O 0.000 description 8
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 8
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 8
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 8
- 108090000565 Capsid Proteins Proteins 0.000 description 7
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 7
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 7
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 7
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- CTXPLTPDOISPTE-YPMHNXCESA-N (2s,3r)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-3-phenylmethoxybutanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)[C@@H](C)OCC1=CC=CC=C1 CTXPLTPDOISPTE-YPMHNXCESA-N 0.000 description 6
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 6
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 6
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 6
- 108010069653 peptide E (adrenal medulla) Proteins 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- 238000011160 research Methods 0.000 description 6
- RMVRSNDYEFQCLF-UHFFFAOYSA-N thiophenol Chemical compound SC1=CC=CC=C1 RMVRSNDYEFQCLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QJCNLJWUIOIMMF-YUMQZZPRSA-N (2s,3s)-3-methyl-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]pentanoic acid Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OC(C)(C)C QJCNLJWUIOIMMF-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 5
- PCFGFYKGPMQDBX-FEKONODYSA-N 78355-50-7 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=CC=C1 PCFGFYKGPMQDBX-FEKONODYSA-N 0.000 description 5
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 5
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 description 5
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 5
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 5
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 5
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 5
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 5
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 5
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 5
- 229940042795 hydrazides for tuberculosis treatment Drugs 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- XMBWDFGMSWQBCA-RNFDNDRNSA-M iodine-131(1-) Chemical compound [131I-] XMBWDFGMSWQBCA-RNFDNDRNSA-M 0.000 description 5
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 5
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 5
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 5
- CNBUSIJNWNXLQQ-NSHDSACASA-N (2s)-3-(4-hydroxyphenyl)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 CNBUSIJNWNXLQQ-NSHDSACASA-N 0.000 description 4
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 4
- 241000713340 Human immunodeficiency virus 2 Species 0.000 description 4
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000713311 Simian immunodeficiency virus Species 0.000 description 4
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010034949 Thyroglobulin Proteins 0.000 description 4
- 102000009843 Thyroglobulin Human genes 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 4
- 230000002788 anti-peptide Effects 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 4
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N chloramine T Chemical compound [Na+].CC1=CC=C(S(=O)(=O)[N-]Cl)C=C1 VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 4
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 4
- 229960002175 thyroglobulin Drugs 0.000 description 4
- 229960001479 tosylchloramide sodium Drugs 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 4
- SOHLZANWVLCPHK-LBPRGKRZSA-N (2s)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-4-oxo-4-phenylmethoxybutanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(=O)OCC1=CC=CC=C1 SOHLZANWVLCPHK-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 3
- ZNZYKNKBJPZETN-WELNAUFTSA-N Dialdehyde 11678 Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C2=C1[C@H](C[C@H](/C(=C/O)C(=O)OC)[C@@H](C=C)C=O)NCC2 ZNZYKNKBJPZETN-WELNAUFTSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 3
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 3
- FYYSQDHBALBGHX-YFKPBYRVSA-N N(alpha)-t-butoxycarbonyl-L-asparagine Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O FYYSQDHBALBGHX-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 3
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000006035 Tryptophane Substances 0.000 description 3
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 3
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 3
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 3
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 3
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 3
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 3
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N pyridine Substances C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 3
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 description 3
- AYMLQYFMYHISQO-QMMMGPOBSA-N (2s)-3-(1h-imidazol-3-ium-5-yl)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 AYMLQYFMYHISQO-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- WXYGVKADAIJGHB-ZDUSSCGKSA-N (2s)-3-(1h-indol-2-yl)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoic acid Chemical compound C1=CC=C2NC(C[C@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(O)=O)=CC2=C1 WXYGVKADAIJGHB-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 2
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Chemical compound CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HJBUBXIDMQBSQW-UHFFFAOYSA-N 4-(4-diazoniophenyl)benzenediazonium Chemical compound C1=CC([N+]#N)=CC=C1C1=CC=C([N+]#N)C=C1 HJBUBXIDMQBSQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 2
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 2
- 241000244203 Caenorhabditis elegans Species 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 2
- QMMFVYPAHWMCMS-UHFFFAOYSA-N Dimethyl sulfide Chemical compound CSC QMMFVYPAHWMCMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710177291 Gag polyprotein Proteins 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 2
- 101710175243 Major antigen Proteins 0.000 description 2
- 101710125418 Major capsid protein Proteins 0.000 description 2
- CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N N-methyl-guanidine Natural products CNC(N)=N CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 2
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 2
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 2
- 102000005686 Serum Globulins Human genes 0.000 description 2
- 108010045362 Serum Globulins Proteins 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010015780 Viral Core Proteins Proteins 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 2
- 150000001408 amides Chemical group 0.000 description 2
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 2
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N anhydrous guanidine Natural products NC(N)=N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 2
- 230000036436 anti-hiv Effects 0.000 description 2
- TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N caesium atom Chemical compound [Cs] TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 2
- 125000004218 chloromethyl group Chemical group [H]C([H])(Cl)* 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 2
- 238000006356 dehydrogenation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000006193 diazotization reaction Methods 0.000 description 2
- SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N dimethylaminoamidine Natural products CN(C)C(N)=N SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N diphenyl Chemical compound C1=CC=CC=C1C1=CC=CC=C1 ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N diphenylmethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003983 diphtheria toxoid Drugs 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 2
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 2
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 2
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 2
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 2
- 230000009851 immunogenic response Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- ITMSSZATZARZCA-UHFFFAOYSA-N n-ethyl-n-phenylaniline Chemical compound C=1C=CC=CC=1N(CC)C1=CC=CC=C1 ITMSSZATZARZCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000636 p-nitrophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1*)[N+]([O-])=O 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- WLJVXDMOQOGPHL-UHFFFAOYSA-N phenylacetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC=C1 WLJVXDMOQOGPHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920003053 polystyrene-divinylbenzene Polymers 0.000 description 2
- 239000000941 radioactive substance Substances 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- FHOAKXBXYSJBGX-YFKPBYRVSA-N (2s)-3-hydroxy-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FHOAKXBXYSJBGX-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UFFVWIGGYXLXPC-UHFFFAOYSA-N 1-[2-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)phenyl]pyrrole-2,5-dione Chemical compound O=C1C=CC(=O)N1C1=CC=CC=C1N1C(=O)C=CC1=O UFFVWIGGYXLXPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OEPRBXUJOQLYID-UHFFFAOYSA-N 1-fluoropentane Chemical compound CCCCCF OEPRBXUJOQLYID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003923 2,5-pyrrolediones Chemical class 0.000 description 1
- HKKZXWNIPODMPF-UHFFFAOYSA-N 2-$l^{1}-oxidanyl-2-methylbutane Chemical compound CCC(C)(C)[O] HKKZXWNIPODMPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LXUNZSDDXMPKLP-UHFFFAOYSA-N 2-Methylbenzenethiol Chemical compound CC1=CC=CC=C1S LXUNZSDDXMPKLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YEDUAINPPJYDJZ-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxybenzothiazole Chemical compound C1=CC=C2SC(O)=NC2=C1 YEDUAINPPJYDJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KXGFMDJXCMQABM-UHFFFAOYSA-N 2-methoxy-6-methylphenol Chemical compound [CH]OC1=CC=CC([CH])=C1O KXGFMDJXCMQABM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124718 AIDS vaccine Drugs 0.000 description 1
- 201000008686 ARC syndrome Diseases 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical group CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010042708 Acetylmuramyl-Alanyl-Isoglutamine Proteins 0.000 description 1
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 1
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 1
- 241000024188 Andala Species 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 208000003685 Arthrogryposis-renal dysfunction-cholestasis syndrome Diseases 0.000 description 1
- 244000186140 Asperula odorata Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 101000800130 Bos taurus Thyroglobulin Proteins 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- OOVXCSLPNFRXIB-UHFFFAOYSA-N C(C)N=C=NCCN(C(C)C)C(C)C Chemical compound C(C)N=C=NCCN(C(C)C)C(C)C OOVXCSLPNFRXIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 231100000023 Cell-mediated cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 206010057250 Cell-mediated cytotoxicity Diseases 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010038061 Chymotrypsinogen Proteins 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 235000008526 Galium odoratum Nutrition 0.000 description 1
- 101000800133 Homo sapiens Thyroglobulin Proteins 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 125000000998 L-alanino group Chemical group [H]N([*])[C@](C([H])([H])[H])([H])C(=O)O[H] 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 125000000174 L-prolyl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]1([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 125000000510 L-tryptophano group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2N([H])C([H])=C(C([H])([H])[C@@]([H])(C(O[H])=O)N([H])[*])C2=C1[H] 0.000 description 1
- UGTZHPSKYRIGRJ-YUMQZZPRSA-N Lys-Glu Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O UGTZHPSKYRIGRJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241000872931 Myoporum sandwicense Species 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XUYPXLNMDZIRQH-LURJTMIESA-N N-acetyl-L-methionine Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(C)=O XUYPXLNMDZIRQH-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- DYUGTPXLDJQBRB-UHFFFAOYSA-N N-myristoylglycine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)NCC(O)=O DYUGTPXLDJQBRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100021079 Ornithine decarboxylase Human genes 0.000 description 1
- 108700005126 Ornithine decarboxylases Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000282577 Pan troglodytes Species 0.000 description 1
- 108010020346 Polyglutamic Acid Proteins 0.000 description 1
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100037593 Retinal rod rhodopsin-sensitive cGMP 3',5'-cyclic phosphodiesterase subunit delta Human genes 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- DYAHQFWOVKZOOW-UHFFFAOYSA-N Sarin Chemical compound CC(C)OP(C)(F)=O DYAHQFWOVKZOOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 108010043943 Starch Phosphorylase Proteins 0.000 description 1
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 1
- PCSMJKASWLYICJ-UHFFFAOYSA-N Succinic aldehyde Chemical compound O=CCCC=O PCSMJKASWLYICJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 description 1
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000473945 Theria <moth genus> Species 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- DPDMMXDBJGCCQC-UHFFFAOYSA-N [Na].[Cl] Chemical compound [Na].[Cl] DPDMMXDBJGCCQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 150000008065 acid anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003302 anti-idiotype Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 230000002155 anti-virotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003435 aroyl group Chemical group 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 235000010290 biphenyl Nutrition 0.000 description 1
- 229910021538 borax Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 125000005997 bromomethyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- XZKRXPZXQLARHH-UHFFFAOYSA-N buta-1,3-dienylbenzene Chemical compound C=CC=CC1=CC=CC=C1 XZKRXPZXQLARHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052792 caesium Inorganic materials 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003763 carbonization Methods 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000005890 cell-mediated cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 230000005591 charge neutralization Effects 0.000 description 1
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 1
- 238000005285 chemical preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 229910052593 corundum Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010431 corundum Substances 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N cyanogen bromide Chemical compound BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 150000001989 diazonium salts Chemical class 0.000 description 1
- KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N dihydromaleimide Natural products O=C1CCC(=O)N1 KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- UQGFMSUEHSUPRD-UHFFFAOYSA-N disodium;3,7-dioxido-2,4,6,8,9-pentaoxa-1,3,5,7-tetraborabicyclo[3.3.1]nonane Chemical compound [Na+].[Na+].O1B([O-])OB2OB([O-])OB1O2 UQGFMSUEHSUPRD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006266 etherification reaction Methods 0.000 description 1
- 125000003754 ethoxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC)* 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 1
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 1
- 102000006602 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 108060003552 hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- 230000000652 homosexual effect Effects 0.000 description 1
- 102000047688 human TG Human genes 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000001524 infective effect Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- ICIWUVCWSCSTAQ-UHFFFAOYSA-M iodate Chemical compound [O-]I(=O)=O ICIWUVCWSCSTAQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010045069 keyhole-limpet hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 108010009298 lysylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N methyl phenyl ether Natural products COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N muramyl dipeptide Chemical compound OC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@@H]1NC(C)=O BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 125000001419 myristoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- HOGDNTQCSIKEEV-UHFFFAOYSA-N n'-hydroxybutanediamide Chemical compound NC(=O)CCC(=O)NO HOGDNTQCSIKEEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WKOVRQFUCLHTHB-UHFFFAOYSA-N n-(ethyliminomethylideneamino)-n-methylmethanamine Chemical compound CCN=C=NN(C)C WKOVRQFUCLHTHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZUSSTQCWRDLYJA-UHFFFAOYSA-N n-hydroxy-5-norbornene-2,3-dicarboximide Chemical compound C1=CC2CC1C1C2C(=O)N(O)C1=O ZUSSTQCWRDLYJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- QWVGKYWNOKOFNN-UHFFFAOYSA-N o-cresol Chemical compound CC1=CC=CC=C1O QWVGKYWNOKOFNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002347 octyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229920000620 organic polymer Polymers 0.000 description 1
- 125000001181 organosilyl group Chemical group [SiH3]* 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002923 oximes Chemical class 0.000 description 1
- CFHIDWOYWUOIHU-UHFFFAOYSA-N oxomethyl Chemical compound O=[CH] CFHIDWOYWUOIHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 239000005011 phenolic resin Substances 0.000 description 1
- 229920001568 phenolic resin Polymers 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 229960003424 phenylacetic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000003279 phenylacetic acid Substances 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229920002643 polyglutamic acid Polymers 0.000 description 1
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 239000008057 potassium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 238000007670 refining Methods 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000005185 salting out Methods 0.000 description 1
- 230000011218 segmentation Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000010339 sodium tetraborate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004328 sodium tetraborate Substances 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 1
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004079 stearyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 229940031626 subunit vaccine Drugs 0.000 description 1
- 229960002317 succinimide Drugs 0.000 description 1
- 150000003462 sulfoxides Chemical class 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- QEMXHQIAXOOASZ-UHFFFAOYSA-N tetramethylammonium Chemical compound C[N+](C)(C)C QEMXHQIAXOOASZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 102000035160 transmembrane proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005703 transmembrane proteins Proteins 0.000 description 1
- IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N tributylamine Chemical compound CCCCN(CCCC)CCCC IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-O triethylammonium ion Chemical compound CC[NH+](CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 210000000605 viral structure Anatomy 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/08—Linear peptides containing only normal peptide links having 12 to 20 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
- C12N2740/16211—Human Immunodeficiency Virus, HIV concerning HIV gagpol
- C12N2740/16222—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
长度约为12到40个氨基酸的HIVp17蛋白片
段被用作检测和治疗爱滋病的诊断剂和疫苗。特异
性肽片段从N末端延伸至C末端。经测试对
HIVp17阳性的病人血清中的抗体具免疫反应性。
Description
本发明涉及从人类免疫缺陷病毒（HIV）的p17gag蛋白衍生而来的肽片段，该病毒是获得性免疫缺陷综合征（爱滋病）或前爱滋病（pre-AIDS）（也叫做爱滋病相关综合征或ARC）的病原生物体。这些肽片段可直接用作检测血液中HIV反转录病毒的诊断剂，或可直接用作检测抗HIV反转录病毒蛋白的抗体或激发识别HIV的p17gag蛋白或其片段的抗体的诊断剂。本发明还涉及p17gag蛋白肽的片段或类似物，它们具有其“母本”肽的免疫原性抗原决定簇。进一步说，本发明还涉及这些p17肽片段及类似物的应用，它们作为一种爱滋病疫苗的组分能激发保护性抗体，本发明还涉及所得的爱滋病疫苗的成份。
在过去的几年中，人们已进行了大量的研究，首先是确定爱滋病的病因，正确地鉴定出反转录病毒HTLV-III，ARV及其它病毒，现在统称为HIV，为病原生物体后，人们开始集中精力详尽分析基因组成，分子生物学，感染机制，生物化学，检测和治疗的高敏度方法，治疗和治愈。在这些领域已取得很大进展，但人们还需做更多的工作以有效地与爱滋病的传播作斗争。其中一个重要的与高传染性HIV病毒的传播作斗争的方法是发展诊断血液中是否存在HIV病毒或抗HIV病毒抗体的高敏度性试验。早期检测可使治疗较容易，以与疾病作斗争，或减慢HIV感染向严重的或症状明显的爱滋病发展的进程。通过准确的诊断使受感染的病人知道已感染HIV，能促使他们改变或注意其生活方式，以减少传播病毒的危险。另外，通过识别抗原决定簇而确定的保护性抗体，能提供发病和/或诊断爱滋病或前爱滋病的更有效机制。然后对这类发病的或得到早期诊断的血清阳性个体施用疫苗，以产生治疗血清阳性个体的合适的保护性抗体。
最近，美国专利4，520，113Gallo等人描述了一种检测爱滋病及前爱滋病人血清中抗体的方法，该方法用称为H9/HTLV-III的细胞系的溶胞物作为抗原，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）、Western Blot技术基础上的条状放射免疫测定（RIA），或间接免疫荧光方法。主要免疫活性或特异性是针对p41（分子量41，000），p41是组成HIV衣壳抗原的一种蛋白。其它抗原如p65（分子量65，000），p60（分子量60，000），p55（分子量55，000），及p24（分子量24，000）也用在检测血清中被抗体识别。这个方法没有100%的准确性。
美国专利4，735，896中，C.Y.Wang和J.G.Wang提供了在体液中检测和诊断爱滋病，ARC及前爱滋病情况的方法，这一方法使用具有约21个氨基酸的一段顺序的化学合成肽，该顺序对应于HIV的HTLV-III株的跨膜蛋白p41的一个片段。
但是，HIV的各种病毒株的衣壳蛋白容易发生遗传漂变，即氨基酸顺序的改变，这样，抗一种衣壳蛋白的抗体可能不与只有些微不同的衣壳蛋白的病毒结合。
在公开的同期申请号864，599，申请日为1986年5月19日的申请文本中，A.Goldstein和S.Wang（相应于在1987年11月25日出版的欧洲专利申请0，246，829）提供了诊断和治疗爱滋病，ARC和前爱滋病的不同方法，同时还提供了一种AIDS疫苗，这一方法是在某种程度上基于观察到的并由其它研究者证实，组抗原特异性蛋白p17（也被某些研究者称为p18）包括一个更高度保守的区域。与HIV的替换衣壳或表面蛋白不同，p17（gag）蛋白的所有氨基酸顺序在至今发现的HIV所有病毒株中基本上是一样的。另外，最近的研究发现抗p17蛋白抗体存在于健康的带有HIV的个体中，并且随着向症状明显的爱滋病发展而降低。为形成有效的抗病毒感染细胞的抗体依赖性细胞免疫，需要在人血清中存在p17抗体。参见如J.M.A.Lange等人“对外层病毒核心蛋白p17的抗体活性的降低在人类免疫缺陷病毒感染中是比抗p24抗体的降低更早的疾病发展的血清学标志”，AIDS，Vol.l，No.3，155-159（1987）。在题目中将p17称为“外层病毒核心蛋白”，是根据H.Gelderblom及其它人的最近报告，他们认为，与p24内层核心蛋白不同，p17蛋白位于或靠近病毒结构的表面（H.Gelderblom等人，“人类免疫缺陷病毒（HIV）的微细结构及结构蛋白的免疫定位”，Virology，Vol.156，171-176（1987）。最近这些有关p17蛋白位于外表面，以及随疾病的发展p17抗体降低的研究，给Goldstein和Wang的发展以合成肽为基础的一种爱滋病疫苗和诊断剂的方法提供了证据，该合成肽由HIV的p17gag蛋白的92到109位的共18个氨基酸顺序组成。更确切地说，30-mer[Ser-86]肽，命名为HGP-30，在HIV-1病毒株SF-2的85及1141位点之间，具有式（Ⅰ）的氨基酸顺序：
Tyr-Ser-Val-His-Gln-Arg-Ile-Asp-Val-Lys-Asp-Thr-Lys-Glu-Ala-Leu-Gly-Lys-Ile-Glu-Glu-Glu-Gln-Asn-Lys-Ser-Lys-Lys-Lys-Ala （Ⅰ）
显示出能激发抗体，该类抗体能在体外实验中和各种不同的HIV株，即它是组特异性，而不是株特异性的。实际上，在对兔、猴子和猿所做的成功的安全性和免疫原性实验基础上，已开始进行临床试验，以测试在HGP-30基础上建立的疫苗的体内安全性和有效性。
在本申请文本中，氨基酸号码顺序同先前申请864，599中的号码顺序不同，先前HGP-30对应于氨基酸顺序86及115位点之间，这个不同是根据遗传学家（参见，如人类反转录病毒和爱滋病，1987Ed.，G.Myers等人，由理论生物学和生物物理学集团出版，Los Alamos National Laboratory，Los Alamos，New Mex ico 87545）蛋白化学家所采用的不同的编号系统，特别是N端的1号位编号不同。遗传学家把HIV1的p17gag肽中的蛋氨酸（Met）定为1号位，而本发明中，第一号位点是N端十四烷酰基化甘氨酸（Gly）。
国际PCT申请WO86/01827，巴斯德学院及国家科学研究中心的Alizon等人，于1986年3月27日出版，主要针对这些DNA顺序或其片段，它们能与LAV病毒的基因组RNA杂交，并且包括为每个完整衣壳和核心蛋白编码的DNA片段。虽然没给出特定实施例，但它建议这些DNA的使用包括，用于诊断目的，及生产疫苗的病毒抗原的表达。
欧洲专利申请0，230，222AL，出版于1987年7月29日，针对与HTLV-III的gag蛋白产物免疫学上相当的多肽，它具有如图8或图16给出的氨基酸顺序，或者它是其14kd，16kd或24kd蛋白水解多肽片段，或者是通过氨基酸置换形成的与这些多肽相关的多肽，氨基酸置换是通过在产生多肽的重组细胞中的突变而发生的。这个公开物还涉及基因及重组表达载体，转化细胞，用转化宿主细胞产生多肽的方法，测试人血液的方法，疫苗和试剂盒。实施例表明了gag蛋白片段表达质粒的生产，及含gag表达质粒的酵母培养物的生长及纯化，聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western Blot分析，细胞标记，及对爱滋病的诊断试验的概述。
英国专利申请G.B.2，181，435A，出版于1987年4月23日、Hu等人（Oncogen），包括黑猩猩上的攻击感染的数据，但只与衣壳蛋白产物有关。然而，它暗示由重组牛痘病毒产生的gag相关蛋白是含有真正核心蛋白的主要抗原决定簇的免疫反应性蛋白。但是，没有对主要抗原决定簇下定义。在第12页34-44行，它提出任何限制性内切酶都可用来产生含衣壳或gag顺序的片段，只要这些酶不破坏蛋白基因产物的抗原性，抗原性位点包括约7到14个氨基酸。至于一个疫苗的配制，它提示疫苗包括只含衣壳相关抗原决定簇或与其它抗原决定簇如gag相关抗原决定簇一起配制而成。参考了早期研究结果，即爱滋病人在早期无症状阶段产生抗衣壳和核心蛋白的抗体，但随着疾病的发展及症状的出现，抗gag抗体减少。因此，建议用在HTLV-III的LAV相关疾病的免疫预防或免疫治疗中的疫苗制剂包括gag相关抗原决定簇。不过，没有明确指出gag蛋白，其本身，或它们的抗体将提供有用的疫苗。各种部分与杆状病毒gag重组子，牛痘病毒gag重组子，及gag相关蛋白组织培养细胞的表达有关。它概括说明表达产物对抗p25和p18的单克隆抗体是有免疫反应性的。
上述三个公开专利中没有一个鉴定任何特异性p17（或p15）肽或其肽片段。
最近，几个独立的研究组已能生产出抗HIVp17的中和单克隆抗体，而抗p24，p41和p17不同抗原决定簇的单克隆抗体无效。在各种中和试验中有效的抗p17的单克隆抗体与HGP-30结合。相反，中和抗衣壳抗体不与HGP-30结合。参见如Papsidero，L.D.等人“人体免疫缺陷病毒1型-与p17核心蛋白反应的中和单克隆抗体的定性和抗原决定簇图谱”，J.Virology，Vol.63，No.1，267-272（1989）;Yoshihara，P.等人“用抗核心和抗衣壳蛋白的单克隆抗体进行HIV中和作用研究”，IV.Int.Conf.on AIDS，Abstract ＃3071。以下表1中列出了代表性数据。
表Ⅰ
抗HIVp17的中和单无隆抗体识别HGP-30
来源 中和作用 Western Blot HIV HGP-30
Sarin + p17/p55 1600 1600
Yoshihara + p17/p55 1600 400
Ruscetti + p17/p55 200 800
Ruscetti + p17/p55 100 200
Ruscetti + 9p 160 800 0
Yoshihara - p24/p55 1600 0
Yoshihara - 0 0 0
来源表示对抗体及中和作用数据负责的科学家。效价表示稀释倍数，它至少是ELISA中用全HIV提取物或合成HGP-30肽的对照值的两倍。
不过，只有很少的研究描述大量p17的纯化，而对确定自然感染情况下天然p17上的免疫原性抗原决定簇方面的研究则更少。一些“未发表”的研究表明全p17缺乏中和活性，但是，免疫显性但非中和抗原决定簇的存在可能会使这些观点不能立足。其它一些研究也会因为采用过小的抗原决定簇，如长度上少于10个氨基酸，可能导致不合适的抗原决定簇折叠及递呈而无效。
但是可能不是所有的p17上的抗原决定簇会产生中和抗体，与所得数据一致的结论表明不是所有抗p17单克隆抗体在体外对中和是有效的（cf.Yoshihara等人，ibid）。然而，这样的抗原决定簇将产生保护性抗体，这些抗体将通过不是抑制体外病毒感染的机制起作用。这些机制可能包括抗体依赖性细胞介导的细胞毒性或T细胞介导的细胞毒性。
因此，本发明的一个目的是提供一种肽，它们呈现天然p17gag HIV蛋白的抗原决定簇，并与爱滋病、前爱滋病及ARC的病人的抗体有免疫反应活性。这些肽根据定义将是候选的诊断剂和疫苗。
本发明的另一目的是提供对准确测量p17抗体的存在和水平有效的诊断剂，该抗体能在暴露于HIV的病人的体液中识别特异性的p17抗原决定簇。
本发明的进一步目的是提供诊断方法和试剂盒，它能从血清学上确定含有由肽所定义的p17抗原决定簇的爱滋病病毒颗粒的存在与否。
本发明的另一目的是通过将任何新的肽之间相互连结或与同一个免疫原性载体材料连结而提供新的免疫原，并将这些免疫原用于激发抗p17特异性抗原的抗体，然后，将这些抗体用于免疫检测中，测定培养液或体液中p17或其片段。
本发明的另一目的是提供能激发抗体的免疫原性材料，这些抗体能有效地中和HIV，因此能用作爱滋病疫苗中活性成分。
本发明的又一个目的是提供特异性肽，它仍能去除血清中有害或无用的抗体，或能富集血清中有用的抗体。在免疫预防中用经这种处理的血清以保护感染个体，他们在疫苗接种时不能激发合适的保护性抗体。
图1是说明HIV的p17gag蛋白的假设定向的图解。
图2是HIV-p17（HB10株）的初级氨基酸顺序及HIV-2和SIVp17蛋白的初级氨基酸顺序图表。
图3是描绘p17中的肽的初级氨基酸顺序的另一张图表。
图4是标绘用天然HIVp17免疫的兔中，HIVp17肽的抗体效价的图。
图5是个条线图，说明4个暴露于活HIV的恒河猴血清中抗本发明的p17肽片段的抗体的ELISA分析结果的图。
根据本发明，p17gag蛋白可被分成5个主要部分或片段，每一个都具有潜在的重要免疫原性抗原决定簇，这五个肽从N末端开始命名为肽A（1-32），肽B（32-50），肽C（51-84），肽D（85-114），及肽E（114-131）;其中肽D是HGP-30，它是在同期专利申请第864，599号中公开的30-mer肽，这整个出版物在此结合作为参考。每个肽都具有独特的结构特征，但都有能被对HIVp17血清阳性的各个个体中的抗体识别的抗原决定簇。因此，这些肽中的每一个均可提供诊断个体体液中HIVp17抗体的存在的有用试剂，及对暴露于HIV的个体测量血液中或其它体液中抗p17的抗体以测定感染的发展的试剂。
更特定地说，本发明以上及其它的目的将通过以下详细的叙述和较佳的实施例以及附图变得更清楚，这些目的是这样达到的，从其一方面看，是通过一个或更多合成肽，这些肽具有人体免疫缺陷病毒，HIV，尤其是HIV-1的p17gag蛋白共同的免疫原性抗原决定簇，所述肽是从具有对应于下式（Ⅱ）、（Ⅲ）、（Ⅳ）和（Ⅴ）的部分或全部氨基酸顺序的肽中选出的，包括其类似物，类似物顺序中一个或更多的氨基酸可能被置换，缺失或插入，只要保存了对抗从顺序的三维构型衍生得的HIVp17的抗体的免疫原性反应性，也包括肽或其类似物的结合物：
肽A（位点1-32）
Gly-Ala-Arg-Ala-Ser-Val-Leu-Ser-Gly-Gly-Glu-Leu-Asp-Arg-Trp-Glu-Lys-Ile-Arg-Leu-Arg-Pro-Gly-Gly-Lys-Lys-Lys-Tyr-Lys-Leu-Lys-His （Ⅱ）
肽B（位点33-50）
Ile-Val-Trp-Ala-Ser-Arg-Glu-Leu-Glu-Arg-Phe-Ala-Val-Asn-Pro-Gly-Leu-Leu （Ⅲ）
肽C（位点51-84）
Glu-Thr-Ser-Glu-Gly-Cys-Arg-Gln-Ile-Leu-Gly-Gln-Leu-Gln-Pro-Ser-Leu-Gln-Thr-Gly-Ser-Glu-Glu-Leu-Arg-Ser-Leu-Tyr-Asn-Thr-Val-Ala-
Thr-Leu （Ⅳ）
肽E（位点114-131）
Ala-Gln-Gln-Ala-Ala-Ala-Asp-Thr-Gly-His-Ser-Ser-Gln-Val-Ser-Gln-Asn-Tyr（Ⅴ）
其中具式（Ⅱ）氨基酸顺序的肽含有约26到40个氨基酸，具式（Ⅲ）氨基酸顺序的肽含有约14至27个氨基酸，具式（Ⅳ）氨基酸顺序的肽含有约28至42个氨基酸，具式（Ⅴ）氨基酸顺序的肽含有约12到25个氨基酸。
根据本发明的另一方面，提供了一种组合物，它是具有对抗HIVp17抗体有特异性免疫反应性的一种肽的混合物，这种肽是从含有约10至36个氨基酸的肽的组中选出的，这个顺序对应于（Ⅰ′）的部分或全部顺序（包括肽D）
（位点91-108）
Ile-X1-X2-Lys-Asp-Thr-Lys-Glu-Ala-Leu-X3-Lys-Ile-Glu-Glu-Glu-Gln-Asn （Ⅰ′）
其中X1是Glu或Asp，X2是Ile或Val，X3是Asp或Glu，及其结合物和类似物;
及至少是式（Ⅱ）、（Ⅲ）、（Ⅳ）和（Ⅴ）肽中的一个。
在本发明的又一方面，提供了具有10到14个氨基酸包括下式（Ⅰ″）顺序的肽：
Ile-X1-X2-Lys-Asp-Thr-Lys-Glu-Ala-Leu （Ⅰ″）
其中X1是Glu或Asp，X2是Ile或Val，这个肽对抗HIVp17抗体有特异性免疫反应性。
根据本发明的又一方面，前面所述的任何一种肽与免疫原性载体材料共价结合以形成一个免疫原性抗原。较好的是，当用于一个诊断试剂盒时，通过一个针对抗原的抗体对肽进行标记用于血清学检测抗原。
本发明从其另一方面来说，还提供了用于预防或治疗获得性免疫缺陷综合征（爱滋病）或爱滋病相关综合征（ARC）的疫苗，它包括治疗上有效量的一个或多个上述式（Ⅱ）、（Ⅲ）、（Ⅳ）或（Ⅴ）的肽，或其与式（Ⅰ′）肽的混合物。
本发明还提供了减轻与爱滋病有关的病毒血症的方法，包括给暴露于爱滋病毒的、有得爱滋病危险的或受爱滋病感染的个体服用治疗有效量的，至少一种式（Ⅱ）、（Ⅲ）、（Ⅳ）或（Ⅴ）的抗原性肽或其与式（Ⅰ′）肽的混合物。
本发明的又一方面是一种检测病人体液中爱滋病毒的方法。根据此方法，体液的一个或多个要检测的样品与一个或更多的式（Ⅱ）、（Ⅲ）、（Ⅳ）或（Ⅴ）的肽或其与式（Ⅰ′）肽的混合物接触，然后通过如放射免疫测定，酶联免疫吸附试验，或间接免疫荧光法测定抗原-抗体复合物的形成。当使用肽混合物时，它们可用于单独的一个测定中，在这种情况下测定混合物中每个肽的抗原-抗体复合物的形成，或者它们可用在分开的测定中用于体液的不同样品。在后一种情况下，测定每个样品中抗原-抗体复合物的形成。
作为实现检测爱滋病病毒的上述诊断方法的一种手段，本发明还提供了检测识别人体液中HIVp17蛋白抗原决定簇抗体的诊断试剂盒。此试剂盒包括含多井平板的单元附件，多井平板用本发明的一个或更多的p17肽片段或类似物包被，及酶测定的ELISA材料，包括正常动物抗血清和酶，标记抗-抗体血清及颜色变化指示剂。每个平板上的井可被不同的肽所包被。在另一个实施例中，多井平板上的井被二个或二个以上肽的混合物所包被。
在本发明的另一方面，提供了一种形成抗体富集血清，用于治疗或预防爱滋病的方法。根据这个方法，从一个个体处取得体液，如血的一个样本，该个体经检测对HIV抗-p17抗体呈阳性，但没有表现出爱滋病或ARC的任何症状，测定对一个或多个式（Ⅰ）、（Ⅱ）、（Ⅲ）、（Ⅳ）或（Ⅴ）的免疫显性抗原决定簇的抗体的存在。然后，体液的一个或多个样本进行亲和层析法，去除不对爱滋病的发展起保护作用的抗体，和/或富集血清中对爱滋病的发展起保护作用的抗体。
最近的发现得出这个结论，即HIVp17位于HIV病毒粒子表面的附近，而不是如p24gag蛋白那样位于内部核心处，除此以外还发现p17gag蛋白在其N端是十四烷酰基化的。另外，对位于离p17C端更近的肽D（称为HGP-30）的分析表明，此肽含有一个免疫显性的B细胞抗原决定簇，它能诱导中和抗体，及通过ADCC型机制介导细胞毒作用。另一方面，肽C（也称作HGP-34）在氨基酸51-84位置，具有一段与T细胞抗原决定簇一致的氨基酸顺序，因此能激发T细胞免疫应答。对p17肽B（也称为HGP-18）靠近N端33-50位点的中间区的分析表明，如果有合适的电荷中和膜蛋白存在时，此肽会具有合适的亲水性和疏水性的平衡，以组成跨膜区域肽。
根据以上观察，本发明的发明人假设HIVp17蛋白延伸通过整个HIV病毒粒子或分子的脂质双层膜，十四烷酰基化的N端区域肽A（HGP-32）位于膜的内表面上，并延伸到内表面下，再弯回膜。邻近的区域肽B（HGP-18）延伸跨过及通过膜，即是跨膜区域肽，在膜的外表面，区域肽C（HGP-34），肽D（HGP-30）和肽E（也称作Ala-HGP-17）（在C端）形成一个环。p17的假设定向在图1中已图解说明。但需明白，申请人并不受此假设定向的束缚，也可能有与观察到的数据和氨基酸顺序的一致的其它定向。如p17分子可能整个位于细胞膜内，或整个位于细胞膜外，或者p17分子的一部分是内部的，而剩下的p17分子是外部的。
p17的氨基酸顺序（HIVBH10株）及HIV-2p17蛋白及猿免疫缺陷病毒（SIV）的相应结构在图2中表示。在图2中，“+”号表示所指的蛋白中相应位点上是同样的氨基酸，在边上标明p17HIV氨基酸顺序的各种肽片段的位置，同时，为方便起见，肽A（HGP-32）的氨基酸下划了一条实线;肽B（HGP-18）的氨基酸下没有划线;肽C（HGP-34）的氨基酸下划有一条虚线;肽D（HGP-30）下划了二条实线;肽E（Ala-HGP-17）下划有二条虚线。从图2中可知，在每个HIV-1，HIV-2及SIV中，最保守的区域在十四烷酰基化N端附近，越往C端，同源性越少。但是，在p17肽D（HGP-30）氨基酸91-100位点的区域中，HIV-2和SIV均有一个高度保守的区域（约40%同源性），重要的是，正是在这个区域中存在着免疫显性抗原决定簇，及异源抗血清中抗HGP-30的中和抗体所针对的主要位点，如在兔子上进行了研究所确定的。
图3表示了HIV-1 HB10株的p17的初始氨基酸顺序，包括依次被命名为HGP-32、HGP-18、HGP-34、HGP-30及Ala-HGP-17的肽A、B、C、D及E，命名中的数字表示特定p17片段的长度。为方便起见，在如下所述的固相肽合成中，对天然发生的p17氨基酸在某些片段做了些变动以方便合成，但这些天然p17片段的类似物也在本发明的范围内。当然，可以认为对整个p17的5条肽的命名是有点任意的，但与图1中所示的假设定向是一致。通常，在选择每条肽的N端和C端氨基酸时，是出于合成方便考虑，而不是生物活性，只要保留了免疫显性抗原决定簇。可在氨基酸顺序长度上做变动，也可以作氨基酸置换、插入或缺失。这也在本发明的范围内。
为证明根据上述讨论的如图1、2和3中所示的模型的组成整个HIVp17的5个邻近区域的临床重要性，如以下实例中所述通过固相肽合成制备肽A、B、C和E及肽D′（HGP-（18）2-HIV-1SF-2株的91-108位：Ile-Asp-Val-Lys-Asp-Thr-Lys-Glu-Ala-Leu-Glu-Lys-Ile-Glu-Glu-Glu-Gln-Asn）类似物的小样品。运用这些样品，通过将兔子暴露于合成肽而首先测定能识别这些合成肽的抗体的存在，该兔子先用由高压液相包谱法（HPLC）纯化的天然（完整）HIVp17免疫。图4中列出了结果。这个兔子对肽C（HGP-34）抗体的效价最高。基本上没有肽B（51-Tyr）（HGP-18）的抗体，对肽A（33-Lys）（HGP-32）只有很低的效价。
在另一个试验中，对给予活HIV-1的4只恒河猴的血清也评估了对肽A、B、C、D及E的抗体，在图5中列出了结果。每条肽至少在一个受攻击感染猴中有强抗体应答。也评估了自然暴露于HIV病毒及对p17血清阳性的个体的血清。结果在下面表Ⅱ中表示。
如在处理的猴子中的情况一样再进行一次实验，在每种情况下，用ELISA分析测定，存在着与至少一种合成p17肽类似物具有免疫反应性的抗体。表Ⅱ显示了HIVp17血清阳性个体的ELISA分析的结果。
表Ⅱ
在HIVp17血清阳性个体中存在抗完整、天然p17和p17肽类似物的抗体
注意：＊在标号中的数字对应于所指肽中表示的氨基酸的位点。用ELISA和Western Blot技术测定HIVp17。
++＝大于均数的3 SD
+＝大于均数的2 SD由于至少在3个血清阳性个体中存在抗所有5个肽的抗体，这些肽中的每一个，除了可用作测定暴露于HIV的诊断剂外，也具有用作亚单位疫苗的潜力。
本发明的肽由通式（Ⅱ）-（Ⅴ）表示：
位点1-32
Gly-Ala-Arg-Ala-Ser-Val-Leu-Ser-Gly-Gly-Glu-Leu-Asp-Arg-Trp-Glu
Lys-Ile-Arg-Leu-Arg-Pro-Gly-Gly-Lys-Lys-Lys-Tyr-Leu-Lys-His （Ⅱ）
位点33-50
Ile-Val-Trp-Ala-Ser-Arg-Glu-Leu-
Glu-Arg-Phe-Ala-Val-Asn-Pro-Gly-Leu-Leu（Ⅲ）
位点51-84
Glu-Thr-Ser-Glu-Gly-Cys-Arg-Gln-Ile-Leu-Gly-Gln-Leu-Gln-Pro-Ser-Leu-Gln-Thr-Gly-Ser-Glu-Glu-Leu-Arg-Ser-Leu-Tyr-Asn-Thr-Val-Ala-Thr-Leu（Ⅳ）
位点114-131
Ala-Gln-Gln-Ala-Ala-Ala-Asp-Thr-Gly-His-Ser-Ser-Gln-Val-Ser-Gln-Asn-Tyr（Ⅴ）
包括其类似物，其中顺序中一个或更多的氨基酸可被置换，缺失或插入，只要保存了对抗体的免疫原性，该抗体是抗从顺序的3维构型衍生而来的HIVp17。另外，根据习惯，肽式左端从N端开始，到右边以C端结束。
虽然并不想限制，但期望能互相变换，同时又能维持免疫反应性的“保守”置换类型包括，如非极性脂肪族中性氨基酸之间的置换，包括甘氨酸（Gly，G），丙氨酸（Ala，A），脯氨酸（Pro，P），缬氨酸（Val，V），异亮氨酸（Ile，I）及亮氨酸（Leu，L）;极性脂肪族中性氨基酸之间的置换，包括丝氨酸（Ser，S），苏氨酸（Thr，T），甲硫氨酸（Met，M），半胱氨酸（Cys，C），天冬酰胺（Asn，N）和谷氨酸胺（Gln，G）;在带电荷的酸性氨基酸之间的置换，包括天冬氨酸（Asp，D）和谷氨酸（Glu，E）;在带电荷的碱性氨基酸之间的置换，包括亮氨酸（Lys，K）和精氨酸（Arg，R）;及芳香族氨基酸之间的置换，包括苯丙氨酸（Phe，F），组氨酸（His，H），色氨酸（Trp，W）和酪氨酸（Tyr，Y），其中括号中的三字符和单字母代表传统的各个氨基酸的3字和单一字母编码。
更广泛地说，在前述的组中常能发现可置换的或相互交换的氨基酸，尤其是如下述组中找到：Asp，Glu和His;Asn，Gln，Lys，和Arg;Asp，Glu，Lys，和Arg;Phe，His，Tyr，Trp，Asp，Glu，Ser，和Thr;Lys，Ile，Val，Leu，Pro，和Arg;Ser，Thr，Ala，Pro和Val;及Gly，Ala，Pro，Asp，和Glu。另外，在脂肪族中性非极性氨基酸中，较佳的置换包括Glu和Ala，及Val，Ile和Leu。Ser和Thr也是可互相交换氨基酸的较佳组。
当在式（Ⅱ）到（Ⅴ）的肽或肽D（式Ⅰ）中有氨基酸缺失时，较佳的缺失发生在N端和/或C端的连结氨基酸中，较佳的是对称地或接近对称地在每个N端和C端。当它们有内缺失时，较佳地是限制在5个以内，尤其是小于3个，如1或2个，当有多个内缺失时，它们可发生在邻近氨基酸，或非邻近氨基酸上。
与此相似，当在上述肽中有氨基酸插入时，优先的插入发生在N和/或C端，较佳的是对称地或近似对称地在每个N端和C端。这些插入可同整个p17邻近肽片段的氨基酸相同或不同。不管怎样，内部插入通常也是可以的，但如发生时，较佳地限制在5个以内，尤其是3个或更少，如1或2个，当插入多于1个内部氨基酸时，它仍可以紧接着插入（即在邻近的氨基酸之间）或非紧接地插入（即在不邻近的氨基酸之间）。
在N和/或C端的氨基酸插入或置换或缺失常常是很有用的，因为它们可有各种功能，如作为连接基团，一个修饰基团，一个鉴别基团（如便于放射免疫测定等），等等。这种置换、插入或缺失简化了该肽的合成，如用以下所述的液相或固相肽合成法。
作为置换和插入的特定实例，在式（Ⅱ）肽A（HGP-32）式（Ⅲ）肽B（HGP-18）及式（Ⅳ）肽C（HGP-34）中做以下修饰以形成在上述试验过程中所用的类似物：
肽A：C端插入Lys
肽B：C端插入Tyr
肽C：56位Cys用Ser置换，及C端插入Lys
在肽D（HGP-30）Cys-86用Ser置换，即式（Ⅰ）。
本发明的肽可通过传统的合成肽的方法制备，更特定地说，用Schroder和Lubke所描述的方法，The peptides Vol.1（1986）由Academic Press出版，纽约，美国，或Izumiya等人描述的方法，Synthesis of Peptides（1975），由Maruzen Publishing Co.Ltd出版，如叠氮化物方法、氯化物方法、酸酐方法、混合酐方法、CCC方法、活性酯方法（对硝基苯基方法、N-羟基琥珀酰亚胺酯方法、氰基甲基酯方法等），用Woodward试剂K的方法，碳化二咪唑方法、氧化还原方法、DCC/添加剂（HONB，HOBt，HOSu）方法等。对上述方法均可用固相和液相合成。
本发明的肽可根据以上合成一般多肽的方法制备，一般可以通过称作分段的方法将氨基酸按顺序一个一个缩合到端部氨基酸上，或者将分成几组的片段偶联到端部氨基酸上。更具体地说，如在最好采用固相合成法的情况下，C端氨基酸通过它的羰基与不溶载体连结。这个不溶载体并没有特别的限制，只要它具有与反应性羰基结合的能力，及对分段缩合-去保护反应的试剂和反应条件不敏感。这些不溶性载体的例子包括卤代甲基树脂，如氯代甲基树脂，特别是氯代甲基-聚苯乙烯-二乙烯基苯聚合物，溴代甲基树脂等，羟甲基树脂，苯酚树脂，叔-丁氧基-羰基酰肼化树脂，交联聚-N-烯丙酰-吡啶树脂等。如果在肽的C端氨基酸具有一个酰胺功能基团的情况下，如天冬酰胺（Asn） 
，用二苯甲基胺树脂支持物较方便，这样，酰胺功能基团可直接在树脂支持物上生成。根据特佳的实施例，产生式（Ⅰ）的肽和C端氨基酸包括一酰胺功能基团的其它的肽的固相合成法，是在甲基二苯甲基胺树脂支持物上进行的，如同期Su-SunWang申请849，835，申请日为1986年4月8日中的具体描述，这儿全部结合作为参考。
去除氨基保护性基团后，一个氨基受到保护的氨基酸根据如通式（Ⅰ）至（Ⅴ）所示的所需氨基酸的顺序结合进顺序中，通过其反应性氨基与反应性羧基缩合，按顺序一步步合成。在合成整个顺序后，从不溶性载体上分离肽，产生蛋白，采用如HF、HBr，或其它切割剂。
在以上和以下的描述中，根据标准习惯命名法，缩写具有以下的含义：
Boc，叔丁氧基羰基，Bzl，苄基;DCC：二环己基碳化二亚胺;Z，苄氧基羰基;TFA，三氟乙酸，及Cl Z∶2-氯代苄氧基羰基。
以上描述了特异性保护基团，而采用相应的传统保护性基团也在本技术领域内。操作者可容易地认识到不管合成什么特定的肽，最好选择某个一般的条件，例如已经知道的肽合成中所用的每个氨基酸的α-氨基在偶联反应中必须受到保护，以防止涉及到反应性α-氨基功能的副反应。类似地，对含有反应性侧链功能基团（如巯基，ε-氨基，羟基，羧基）的氨基酸来说，在含有侧链基团的氨基酸开始偶联及随后的氨基酸的偶联中，这些功能性基团必须得到保护。合适的保护基团对本领域的人来说是已知的（参见如“有机化学中的保护性基团”，M.Mc Omie，Editor，Plenum Press，N.Y.，1973）。
在选择特定的保护基团时，必须注意到以下情况：一种α-氨基保护性基团必须：（1）稳定且使α-氨基在偶联反应的条件下呈惰性，及（2）在发生偶联反应后容易被去除，且同时不去除侧链的保护性基团或改变肽片段的结构。一种侧链保护基团必须：（1）稳定且使侧链功能性基团在发生偶联反应的条件下呈惰性，（2）在去除α-氨基保护性基团的条件下稳定，及（3）在所需氨基酸顺序合成之后可被容易地去除，而不改变肽链的结构，或使其含有的手性中心外消旋。合适的α-氨基功能基团的保护基为叔丁氧羰基（BOC），苄氧羰基（Z），二苯基异丙基，叔戊基氧基羰基，异冰片基氧基羰基，1，1-二甲基-2，5-二甲氧苄氧基羰基，0-硝基苯基亚磺酰基，2-氰基-叔丁氧基羰基，9-芴基甲氧基羰基及其类似物，尤其是叔丁氧基羰基（BOC）。
作为羧基保护基团有能形成酯的基团，如形成烷基酯（如甲基，乙基，丙基，丁基，叔丁基等的酯），苄基酯，对硝基苄基酯，对甲氧基苄基酯，对氯苄基酯，二苯甲基酯等，和能形成酰肼的基团得到苄酯基酰肼，叔丁氧羰基酰肼，三苯甲基酰肼等。
作为保护精氨酸的胍基的基团，可以是硝基，甲苯磺酰基（Tos），对甲氧基苯磺酰基，苄酯基，异冰片基氧基羰基，刚玉基氧基羰基（admantyloxycarbonyl）等。也可以与酸形成盐的形式保护胍基（如苯磺酸，甲苯磺酸，盐酸，硫酸等）。
苏氨酸的羟基可通过如已知的酯化或醚化作用保护。对所述酯化作用合适的基团，可以是低级链烷酰基（如乙酰基），芳酰基（如苯甲酰基），及从碳酸衍生的基团，如苄氧基羰基，乙氧基羰基等。作为合适的醚化基团，可以是苄基，四氢吡喃基，叔丁基等。苏氨酸的羟基不一定需要保护。甲硫氨酸可以亚砜的形式保护。其它较佳的对特定氨基酸侧链的保护基包括，对酪氨酸：苄基，0-溴代苄氧基羰基（Br Z），2，6-二氯苄基，异丙基，环己基，环戊基和乙酰;对组氨酸：苄基，苄氧羰基，对甲苯磺酰基，三苯甲基和2，4-二硝基苯基（DNP），对色氨酸：甲酰基。
作为从C末端氨基酸开始，偶联到固相树脂支持物的典型过程，涉及以下步骤。对于二苯甲基胺或甲基二苯甲基胺树脂，通过一个N，N′-二环己基碳化二亚胺（DCC）/1-羟基苯并三唑（HBT）介导的偶联进行2至24小时，较好的是约12小时，在10°与50℃之间反应，较好的是25℃，将Nα-Boc-氨基酸或作类似保护的C端氨基酸连结到（甲基）二苯甲基树脂上，反应在溶剂如二氯甲烷或DMF，较好的是在二氯甲烷中进行。对于氯代甲基聚苯乙烯二乙烯基苯型树脂：是通过与Nα-保护氨基酸反应使其连接到树脂上，尤其是Boc-氨基酸，以它的铯，四甲基铵，三乙基铵，4，5-二氮杂双环[5，4，0]-十一碳-5-烯，或在乙醇，乙腈，N，N-二甲基甲酰胺（DMF）等中的类似的盐，尤其是DMF中的铯盐与氯代甲基树脂反应在升高的温度下，如在40℃到60℃之间，较好的是约50℃，反应约12到48小时，较好的是约为24小时。
Nα-保护基的去除可在某种溶液中进行，如在二氯甲烷中的三氟乙酸溶液，在二氧杂环己烷中的盐酸溶液，乙酸中的盐酸溶液，或其它强酸溶液中进行，较好的是50%在二氯甲烷中的三氟乙酸溶液，在约室温下进行。随后的已保护的氨基酸的偶联可在本领域熟知的自动多肽合成仪中进行。每个已保护的氨基酸最好加入约2.5或更多过量的摩尔数，偶联在二氯甲烷，二氯甲烷/DMF混合物，DMF等溶液中进行，尤其是二氯甲烷中在约室温下进行。也可用其它已知在肽合成的缩合反应中有用的溶剂，如二甲亚砜，吡啶，氯仿，二氧杂环己烷，四氢呋喃，乙酸乙酯，N-甲基吡咯烷等，也可用合适的这些溶剂的混合物。
缩合/偶联反应的温度可以从已知的对肽合成的缩合反应有用的范围内选择。通常在约-40℃到60℃之间，较佳的是在约-20℃至0℃之间。偶联剂一般是在二氯甲烷中的DCC，但也可是N，N′-二异丙基碳化二亚胺或其它碳化二亚胺，它们或者是单独使用，或者是在HBT，N-羟基琥珀酰亚胺，乙基-2-羟基亚氨基-2-氰基乙酸盐，其它N-羟基酰亚胺或肟的存在下。另外，也可用已保护的氨基酸活性酯（如对硝基苯基，戊基氟代苯基等）或对称酐。
偶联，去保护/切割反应和多肽衍生物的制备宜在约-10℃至+50℃之间进行，更好的是在约20℃至25℃之间。任何个别反应的确切温度当然依赖于底物，试剂，溶剂及其它，这些都在操作者的技术范围内。完全去保护的多肽将通过运用任何或所有以下类型的色谱法的顺序纯化：以乙酸盐形式在弱碱性树脂上离子交换;凝胶渗透色谱法，如在Sephadex G-25上;在非衍生的聚苯乙烯-二乙烯基苯（如Amberlite XAD）上疏水性吸收色谱法;硅胶吸收色谱法;离子交换色谱法，如在Sephadex G-25上，或逆流分配法;高效液相色谱法（HPLC），尤其是在辛基-或十八烷基甲硅烷基硅胶键合柱（Silica bonded phase column）上的反相HPLC上装柱。
虽然通过上述的化学制备法，尤其是上面描述的高效率的固相肽合成法可制备本发明的合成肽，但是用本领域所熟知的基因工程技术产生新颖的HIVp17肽片段或其类似物也在本发明的范围内，因此，运用合适的酶及微生物（如细菌诸如大肠杆菌），可将编码所需多肽的DNA顺序整合入微生物的基因组中，使得微生物表达所感兴趣的特定肽。
一旦获得并纯化特定肽后，它可用作半抗原来制备抗原性免疫原，通过抗原可以大量而稳定地获得对HIV和类似病毒的p17gag蛋白有特异性交叉反应性的，及对爱滋病毒有中和能力的抗体。然后，特异性抗体可用作抑制爱滋病毒复制的抗血清。通过将这些抗体与载体结合用在如亲和层析中，可以纯化HIV中的免疫反应性蛋白。特异性抗体也可用作不同株的HIV反转录病毒的各种免疫学测定中的特异性抗体。因此根据本发明的抗体，在具高度特异性的直接诊断血清中爱滋病毒存在方面很有价值。
如上所述，具有HIV中和能力的抗体可通过用本发明的p17肽免疫健康正常的人或动物而得到。但是，在有些情况下，抗特定病毒片段的抗体实际上可能是有害的，如会使结合抗体的病毒容易钻进靶细胞。这种有害的抗体实际上在有关爱滋病病毒的文献中已提到过，尤其是对某些衣壳蛋白的抗体。
因此，本发明的一个重要特征是筛选出抗本发明肽的任何有害的或潜在有害的抗体，同时也富集所需的抗体。可使用亲和色谱法技术去除不需要的肽，和/或纯化或富集所需的肽。在此所用的亲和色谱法包括将抗原（如本发明的肽或类似物）与不溶性基质结合，然后使经免疫患者的血清通过装填了结合抗原的柱。然后，通过合适的洗脱可以去除不需要的抗体并富集所需的抗体。将肽与不溶性基质偶联的技术及随后在亲和色谱法中用的洗脱对本领域来说是熟知的，可以用任何这些适用于肽和蛋白的方法。例如，根据一个较好的将肽偶联到不溶性基质（溴化氰-激活的Sepharose 4B-来自Pharmacia，N.J.）的步骤，用10-3M HCl（1克/200毫升）活化不溶性基质。活化的基质用偶联缓冲液（如0.1M NaHCO3，0.5M NaCl，pH＝8.0）洗涤二次，一凝胶形式的基质的量等分成足够使5毫克肽配有1克胶，并在离心管中离心（如1200r.p.m.）成丸。要偶联的肽溶解于偶联缓冲液中，加入离心管中，在40℃轻轻振摇约8至20个小时。偶联肽的基质（Sepharose）各用酸性（如0.1M乙酸盐，1M Na Cl pH 8.0）和碱性（如0.1M二碳酸盐，1M Na Cl，pH＝8.0）缓冲液洗涤三次。
从患者抗血清中去除不需要的抗体（抗结合的肽）可以如下通过结合肽的Sepharose来进行：将Sepharose肽混合物放入玻璃柱中，将10毫升在缓冲液中的抗血清（如磷酸缓冲液-PBS，pH＝7.4）加入柱中。然后用PBS缓冲液洗脱柱，洗脱液以1毫升等分收集。洗脱液中将含有不与肽结合的抗体。
相反，如果结合肽是激发所需抗体的，目的是要富集结合抗体，那么可以通过如用0.1M甘氨酸，pH＝2做为缓冲液装填柱来去除结合抗体。然后用20毫升PBS缓冲液洗涤柱，洗脱液含不与肽结合的所需抗体。通过每管加入50升1M Tris-HCl，pH9.5以中和洗脱液。
具有p17gag蛋白抗原性的多肽及它们激发产生的抗体可用在诊断方法中，可分别检测爱滋病病毒的抗体或爱滋病病毒其本身。这些多肽与其抗体可以单独或与其它任何或所有的HIV抗原和抗体一起装入诊断盒中。这些方法和诊断盒中，单独或与其它抗原或抗体一起采用了本发明的多肽或抗体，可以快速和简便地确定爱滋病感染性携带者及预测ARC和爱滋病的进程。以下给出检测爱滋病病毒的典型的放射免疫测定和ELISA的简单描述。
用放射免疫测定法检测爱滋病病毒：如上产生的抗体连接于固相物质，例如在试管内，该抗体是抗爱滋病毒的p17gag蛋白的式（Ⅰ）-（Ⅴ）氨基酸顺序的抗原性决定簇，在管中加入病人血清样本，并加入如上产生的具有爱滋病病毒p17gag蛋白抗原性的已知量多肽，该多肽已用诸如放射活性碘的放射性同位素标记。在病人血清中的任何爱滋病病毒（具有相关的gag蛋白）将同具有爱滋病病毒p17gag蛋白抗原性的标记多肽竞争结合连接抗体。去除过量的液体，洗涤试管，并测定放射活性量。试管中的放射活性计数低则表示阳性结果，即病人血清中含有爱滋病病毒。除了上述的固相RIA外，在某些情况下用液相RIA可能更方便。在液相RIA情况下，识别爱滋病病毒的抗体，即抗肽（Ⅰ），抗肽（Ⅱ），抗肽（Ⅲ）等抗体不与固相物质连接，而是在液相中，在-5标记抗原性材料的竞争中同病人血清反应。然后可用任何适宜的方法检测抗体-抗原互相反应复合物。如用对第一抗体有反应活性的第二抗体（如第一个抗体在另一个动物中激发出抗抗体抗体）与不溶性小珠连接，可用来从液相中提取出复合物。
ELISA方法检测爱滋病病毒：用按照本发明制备的具有爱滋病病毒p17gag蛋白的抗原性的肽包被微量滴定板，然后加入病人血清样本。孵育一段时间，以使结合肽与血清中的任何抗爱滋病病毒的p17gag抗体互相反应，然后洗涤板。加入与酶连接的p17肽制剂，该肽可以是全肽，或者是与板上的肽相同的肽片段（例如所谓的“夹心”）。孵育使抗原-抗体反应，然后再次洗涤板。然后，在微量滴定板中加入酶底物，孵育一段时间使酶与底物反应，测量最终反应物的吸收值。吸收值有大的变化表示阳性结果。
以上大致描述的测量抗原的放射免疫测定法和ELISA对本领域的人来说是熟知的。
本发明的肽可以作为标记抗原用于放射免疫测定（RIA）或酶免疫测定法（EIA）中，尤其是酶联免疫吸附试验中，通过加入放射性物质如125Ⅰ、131Ⅰ、3Ⅱ（氚），14C等;各种酶试剂如过氧化物酶（POX），胰凝乳蛋白酶原，羧肽酶原，甘油醛-3-磷酸酯脱氢酶，淀粉酶，磷酸化酶，D-Nase，P-Nase，β-半乳糖苷酶，葡萄糖-6-磷酸酯脱氢酶，鸟氨酸脱羧酶等。可以传统方式加入上述放射性物质。例如，放射性碘125Ⅰ的加入，可以采用氯胺T，通过氧化碘化方法进行（W.M.Hunter and F.C.Greenwood，Nature，194，495（1962），Biochem.J.，89，144（1963）），或通过用Bolten-Hunter试剂（125I-碘化对羟基苯基丙酸-N-羟基-琥珀酰亚胺酯）如Biochem.J.，133，529（1973）中所述。参见美国专利4，264，571中例2等。
更特定地说，这个方法可在合适的溶剂中，如0.2M磷酸盐缓冲液（pH7.4）中在氯胺T存在下在室温进行10到30秒。所用的肽，放射性125Ⅰ和氯胺T有一定的比例，当每个酪氨酸分子介入1个放射性碘原子时，每份含1nM酪氨酸的肽中加入1mCi放射性碘和10至100nM氯胺T，当每个酪氨酸分子介子2个放射性碘原子时，每份含1nM酪氨酸的肽中加入2mCi放射性碘和10至100nM的氯胺T。通过传统的分离技术从反应混合物中分离和纯化所制备的放射性碘标记肽，如用萃取，分配，柱层析，透析等。如需要的话，所得的肽可以冷冻干燥加以保存。
对于氨基酸顺序中有Tyr的式（Ⅱ）或（Ⅴ）的肽，或对加入Tyr或用Tyr置换的式（Ⅲ）或（Ⅳ）的肽的类似物，可以通过用如美国专利4，339，427中例36中所述的方法使125Ⅰ直接掺入Tyr。
酶试剂的加入可通过已知的方法如传统的偶联反应进行，例如，B.F.Erlanger等人的方法（Acta Endocrinol，Suppl.，168，206（1972）），M.H.Karol等人的方法（Prol.Natl.Acad.Sci.U.S.A，57713（1967））等。即肽与酶在pH4到6的缓冲液中反应，如1mM乙酸盐缓冲液（pH4.4），在氧化剂如NaIO4的存在下在室温反应2到5小时，接着用NaBH4或其类似物还原。所用的酶量可为每摩尔肽用1至3摩尔，较佳的氧化剂用量是每摩尔肽约100到300摩尔，还原剂用量是每摩尔氧化剂用约1到2摩尔。所得的酶标记肽可通过类似于放射性碘标记肽那样的方法标记，纯化和保存。
本领域的人知道，多肽，即含少于50个氨基酸的肽，通常不能直接激发相应抗体的产生。由于这个原因，通常人们把多肽抗原作为半抗原，与半抗原载体，这儿及以后称作免疫原性载体物质，偶联或结合，从而激发特异性抗体的产生，并使该抗体有足够高的效价，因此很易重新获得，在本发明中，虽然优先用HIVp17gag肽（包括类似物）作为半抗原，与免疫原性载体物质连接，但是下述情况也在本发明范围内，尤其是对小于约26个氨基酸的肽，将肽直接用作疫苗或用作激发特异性抗体的免疫原性抗原，当然也包括用于本发明的诊断方面。另外，将任何新肽以其多聚体的形式运用也在本发明的范围内，如二聚体，三聚体或寡聚体，即含合成肽氨基酸的重复顺序。因此合成肽可以被多聚化以建立含二个或更多个重复单位的链，这样重复顺序既可用作“载体”又可作为免疫学活性位点。
以下，将详尽描述将本发明肽用作半抗原以生产免疫原性抗原的方法。
以上所述的抗原是通过把本发明的肽用作半抗原，使肽与一个合适的免疫原性载体物质在半抗原-载体结合剂存在下反应而制备的。在这种情况下，通常用于抗原制备中的高分子量天然及合成肽均可用作与半抗原结合的载体，另外，较小的肽或分子，如tufsin（一种四肽），tufsin的类似物，和胞壁酰二肽，及它们的类似物，也可用作“免疫原性载体物质”。
这儿所用的术语“免疫原性载体物质”包括这些材料，它们具有能独立在宿主动物中激发免疫原性应答的性能，并且它们可以通过多肽中的自由羧基，氨基或羟基与免疫原性载体物质上相应的基团之间形成肽键或酯键而直接共价偶联到多肽上，或者通过常规双重功能连结基团成键。这种载体的例子包括动物血清中的白蛋白，如马血清白蛋白，牛血清白蛋白，兔血清白蛋白，人血清白蛋白，羊血清白蛋白等;动物血清球蛋白，如马血清球蛋白，兔血清球蛋白，人血清球蛋白，羊血清球蛋白等;动物的甲状腺球蛋白，如马甲状腺球蛋白，牛甲状腺球蛋白，兔甲状腺球蛋白，人甲状腺球蛋白，羊甲状腺球蛋白等，动物的红蛋白，如马血红蛋白，牛血红蛋白，兔血红蛋白，人血红蛋白，羊血红蛋白等;动物的血蓝蛋白如Keyhole limpet血蓝蛋白（KCH）等;从蛔虫中提取的蛋白质（蛔虫提取物，如日本专利申请（OPI）号16，414/81，J.Immun.，111 260-268（1973），ibid.，122，302-308（1979），ibid.，98，893-900（1967）和Am.J.Physiol.，199，575-578（1960），或其纯化产品）;聚赖氨酸，聚谷氨酸，赖氨酸-谷氨酸共聚体，含赖氨酸或鸟氨酸的共聚体等。最近，用白喉类毒素或破伤风类毒素作为免疫原性载体物质已制备了疫苗（参见Lepow.M.L.等人，J.of Infectious Diseases，150卷，第3号，402-406页（1984）;和Coen Beuvery，E.等人，Infection and Immunity 40，39-45页（1983年4月），这里也可用这些类毒素材料。其它有用的载体在如美国专利4，575，495中公开，包括病毒，如牛痘病毒，有机多聚物等。
作为半抗原-载体结合剂，可广泛使用在抗原制备中常规应用的那些试剂。这些试剂的特定例子包括交联酪氨酸，组氨酸，色氨酸等的重氮化合物，如双重氮化联苯胺（BDB）等;交联氨基与氨基的脂肪族的二醛，如C2-C7链烷醛，诸如乙二醛，丙二醛，琥珀醛，已二醛等，交联硫醇基与硫醇基的二顺丁烯二酰亚胺化合物，如N-N′-0-亚苯基二顺丁烯二酰亚胺，N，N′-间-亚苯基二顺丁烯二酰亚胺等;交联氨基与硫醇基的顺丁烯二酰亚胺羧基-N-羟基-琥珀酰亚胺酯，如间顺丁烯二亚胺苯甲酰基-N-羟基琥珀酰亚胺酯，4-（顺丁烯二亚胺甲基-环己烷-1-羧基-N′-羟基琥珀酰亚胺酯等;用于常规肽键形成反应中的试剂，其中酰胺键是由氨基和羧基形成的，如脱氢和缩合试剂，例如碳化二亚胺：N，N′-二环己基碳化二亚胺，N-乙基-N′-二甲基氨基-碳化二亚胺，1-乙基-3-二异丙基氨基-碳化二亚胺，1-环己基-3-（2-吗啉基-4-乙基）-碳化二亚胺等。作为上述的半抗原-载体结合剂，也可用重氮化芳基羧酸，如对重氮化苯基乙酸等，和常规肽键形成剂如上述的脱氢和缩合剂一起使用。
酸性肽与免疫原性载体物质的共价偶联可以本领域人熟知的方法进行。如用于直接共价偶联，可用碳化二亚胺，最佳的是二环己基碳化二亚胺或1-乙基-3-（3-二甲基-氨基丙基）碳化二亚胺作为偶联剂。在这种直接偶联中，这一步需要用微酸性的介质，如pH在约3至6.5的介质，更佳的是在约4至6.5之间。
用中性或碱性肽的半抗原制备抗原的偶联反应可以相似的方式进行，但在水溶液中，或pH为7至10的常规缓冲液溶液中进行，较佳的是在pH为8至9的缓冲液中，在约0到40℃之间进行，较佳的在约室温下。反应一般进行约1至24个小时，较佳地是3至5小时。可用于上述方法的典型的缓冲液包括：
0.2M氢氧化钠-0.2M硼酸-0.2M氯化钾缓冲液;
0.2M碳酸钠-0.2M硼酸-0.2M氯化钾缓冲液;
0.05M四硼酸钠-0.2M硼酸-0.05M氯化钠缓冲液;
0.1M磷酸二氢钾-0.05M四硼酸钠缓冲液。
在上述方法中，可以适当地确定单抗原，半抗原-载体结合剂和载体的比例，但较佳的是载体用量是半抗原重量的约1到6倍，约1至5倍则更佳，半抗原-载体结合剂用量是半抗原摩尔数的约5至10倍。通过上述反应，载体通过半抗原-载体结合剂与半抗原结合，得到所需的由肽-载体复合物组成的抗原。
反应完成后，所得的抗原可通过盐析法，凝胶过滤方法，分级沉淀法等容易地分离和纯化。
所获得的抗原平均每摩尔蛋白与5至60摩尔肽结合，并使人们随后制备对抗原有高度特异性的抗体，尤其是，与每摩尔肽结合的抗原量以平均为5到20摩尔较佳，尤以8到15摩尔最佳，因为它们具有较高的特异性，能使人们得到具高活性和高敏感性的抗体。
用抗原制备抗体是通过给哺乳动物施用上述抗原，最好采用佐剂进行的，以在体内产生所需抗体，并收集该抗体。通过在一段时期内重复注射抗原来提高效价。
上述提到的佐剂有明矾，弗氏佐剂（完全或不完全），精炼和纯化的油，如Monomide A271或三十碳六烯，细菌抽提物（如RIBI），脂质体，ISCOMS等等。
虽然对用于制备抗体的哺乳动物并没特别限制，但通常优先采用兔或豚鼠，也可用马，山羊，猫，鼠，牛，绵羊等。在生产抗体时，如上所述获得的定量的抗原用生理性盐溶液稀释到一合适的浓度，所得的稀释液与弗氏完全佐剂混合制备悬浮液。给哺乳动物施用该悬浮液。例如，将上述悬浮液皮下注入兔子（每次0.1至5毫克抗原量），然后每两周施用一次悬浮液，时间为2至10月，以4至6月较佳，进行免疫。在最后一次给药后1至2周后，收集免疫动物血样，离心并从血中分离得血清，从而收集抗体。根据这个方法，可以收集到能选择性地和爱滋病病毒的抗原性决定簇，尤其是p17gag蛋白形成复合物的抗体，该抗体可用作一种免疫病人的抗血清，所述病人有得爱滋病的危险（如同性恋者，海地人，静脉注射毒品使用者等等），暴露于爱滋病病毒或具有爱滋病或ARC的症状。或者，采用RIA，ELISA等法，抗体可用来分析实际上任何已知的能引起爱滋病的HIV株，尤其是HIV-1和HIV-2。举例来说，当用于血清学分析时，本发明的抗体可用放射性同位素标记用在RIA中，或者用常规使用的酶或荧光物质标记，用于ELISA，荧光免疫测定（FIA）等。另外，本发明的抗体可以通过与常规不溶剂反应而成为不溶性。
因此本发明提供了抗原性p17gag肽及其混合物，包括其类似物，它们能提供中和爱滋病病毒的强有力疫苗。这样，本发明的疫苗可用来免疫具有得爱滋病危险的，或暴露于爱滋病病毒的病人，或用来治疗患有爱滋病相关综合征或具有明显症状的爱滋病病人。
当用作疫苗时，最常规的是通过肌肉、非肠道的、口服或皮下将疫苗注入宿主。可用任何普通液体或固体载体，但它们须能被宿主接受，对宿主没有有害副作用，对疫苗也没有有害的作用。磷酸缓冲盐（PBS），在生理学pH，如pH6.8到7.2，较佳为pH7，可用作载体，单独用或与一适当的佐剂一起。免疫性抗原的浓度在50至200μg范围内，如每次注射约100μg，抗原在一定体积的溶剂中，一般是约0.25到1毫升，如约0.5毫升。在初次注射后可能需要多次注射，，多次注射时间间隔约2到14天，如约7天。
除了上述对宿主施用免疫性抗原性肽进行主动免疫外，也可直接给宿主施用本发明的抗爱滋病病毒抗体，该抗体常常是在与宿主不同种的体内得到的，虽然也可用与宿主同种的不同个体中得到的抗体。在这种被动免疫抗血清的情况下，一般也可用上述主动免疫方法中同样的使用方法，同型载体相同或更高的剂量。例如，可通过肌内输注慢慢给予（如约6小时）多达1.5克的鼠单克隆抗体。
关于这点，尤其重要的是运用式（Ⅰ）-（Ⅵ）的个体片段或部分或其类似物，分离和去除不需要的、潜在有害的抗体的能力，或分离和富集抗HIV的所需（如中和）抗体的能力，上面所述的片段或部分或类似物保留了HIVp17的免疫显性抗原决定簇。这样，如上所述，用本发明的肽，可以处理感染HIV的健康个体（或正常的，先前已用本发明的肽片段接种，并含有完全HIVp17的免疫显性抗原决定簇的未感染个体）的血清，使血清中存在保护性抗体，用亲和层析法去除任何不需要的肽和/或富集所需的有用抗体。
另有一个实施例是一种疫苗和免疫方法，该方法根据一种抗独特型抗体，该抗体是抗本发明的任何一种肽的单克隆抗体的抗抗体，激发的抗单克隆抗体的抗免疫球蛋白血清定义为“抗独特型”血清，并识别激发抗体的可变区，直接针对结合位点。这种直接针对准结合位点的抗独特型抗体实际上能替代原来的抗原。因此，可以采用这种机制来免疫和激发抗p17gag肽片段及其类似物的抗体，与通过经典免疫方案具有同样的或更高的效率。
下面通过实施例来说明根据本发明合成代表性的肽。
实施例1 肽B（51-Tyr）制备
Ile-Val-Trp-Ala-Ser-Arg-Glu-Leu-Glu-Arg-Phe-Ala-Val-Asn-Pro-Gly-Leu-Leu-Tyr
将Boc-Tyr（Brz）-OCH2-C6H4-树脂（2.0克;0.9毫摩尔）置于100毫升肽合成瓶中，在每一循环中根据以下步骤（每步用20份体积的溶剂或试剂）开始固相合成：
1.用CH2Cl2洗涤三次;
2.用50%TFA（在CH2Cl2中）预洗涤，
3.在50%TFA中搅拌30分钟，
4.用CH2Cl2洗涤三次，
5.用10%三丁胺（Bu3N）在CH2Cl2中）预洗涤，
6.在10%Bu3N中搅拌3分钟，
7.用CH2Cl2洗涤三次，
8.与在CH2Cl2中的各2.7毫摩尔Boc-Leu（0.67克）和DCC（0.556克）搅拌60分钟，
9.用CH2Cl2洗涤一次，
10.用在CH2Cl2中的50%异丙醇（i-Prou）洗涤二次，
11.用CH2Cl2洗涤三次，
12.检查树脂的茚三酮反应;如果阳性则重复步骤8-12;如果阴性则继续下一个循环。
用以下Boc-氨基酸依次重复合成循环，在步骤8中每次用一个：
Boc-Leu，Boc-Gly，Boc-Pro，Boc-Asn，Boc-Val，Boc-Ala，Boc-Phe，Boc-Arg（Tos），Boc-Glu（OBzl），Boc-Leu，Boc-Glu（OBzl），Boc-Arg（Tos），Boc-Ser（Bzl），Boc-Ala，Boc-Trp，Boc-Val，和Boc-Ile.
完成的树脂，Boc-Ile-Val-Trp-Ala-Ser（Bzl）-Arg（Tos）-Glu（OBzl）-Leu-Glu（OBzl）-Arg（Tos）-Phe-Ala-Val-Asn-Pro-Gly-Leu-Leu-Tyr（BrZ）-OCH2-C6H4-树脂
然后用无水HF（0℃，45分钟）处理以去保护，并把肽从树脂上切下来。从1.0克保护树脂上，可得到0.33克粗肽。一部分粗肽（0.16克）在半制型HPLC（Hamilton PRP-12.15×25厘米柱，pH4，磷酸钾缓冲液，23%/28%乙腈）上纯化，得到18毫克所需肽。分析型HPLC显示它是同源的。
氨基酸分析： Asp，1.10;Ser，1.10;Glu，2.04;Pro，0.93;Gly，1.08;Ala，1.85;Val，1.63;Ile，0.86;Leu，3.00;Tyr，0.93;Phe，0.94;Trp，0.64（acld hydrolysls）;Arg，1.94.
实施例2：在位点91-100的肽（Ⅰ′）
Ile-Glu-Ile-Lys-Asp-Thr-Lys-Glu-Ala-Leu
将Boc-Leu-OCH2-C6H4-树脂（1.0克，0.5毫摩尔）放在肽合成瓶中，根据实施例1中所描述的步骤进行固相肽合成，用以下Boc-氨基酸（每个为1.5毫摩尔）依次与树脂上的肽链偶联，每个循环衍生一个氨基酸：
BOC-Ala，Boc-Glu（OBzl），Boc-Lys（Clz），Boc-Thr（Bzl），Boc-Asp（OBzl），Boc-Lys（Clz），Boc-Ile，Boc-Glu（OBzl）和Boc-Ile.
所获得的完成树脂的重量为1.7克，该树脂为：
Boc-Ile-Glu（OBzl）-Ile-Lys（Clz）-Asp（OBzl）-Thr（Bzl）-Lys（Clz）-Glu（OBzl）-Ala-Leu-OCH2-C6H4-树脂
部分此材料（0.88克）然后用无水HF在0℃处理45分钟，最后得0.27克粗肽。HPLC纯化38毫克此粗肽得20毫克所需肽。分析型HPLC显示它是同源的。
氨基酸分析：Asp，1.00;Thr，0.91;Glu，2.08;Ala，0.90;Ile，1.92;Leu，1.08;Lys，2.00.
实施例3：肽E（Ala-HGP-17）的制备
Ala-Gln-Gln-Ala-Ala-Ala-Asp-Thr-Gly-His-Ser-Ser-Gln-Val-Ser-Gln-Asn-Tyr（Ⅴ）
将Boc-Tyr（Brz）-OCH2-C6H4-树脂（1.0克;0.5毫摩尔）放入肽合成瓶中，根据实施例1中所述的方法进行固相肽合成，用以下Boc-氨基酸（每个1.5毫摩尔）依次与不断增长的树脂上的肽链偶联，每个循环衍生一个氨基酸：
Boc-Asn，Boc-Gln，Boc-Ser（Bzl），Boc-Val，Boc-Gln，Boc-Ser（Bzl），Boc-Ser（Bzl），Boc-His（DNP），Boc-Gly，Boc-Thr（Bzl），Boc-Asp（OBzl），Boc-Ala，Boc-Ala，Boc-Ala，Boc-Gln，Boc-Gln和Boc-Ala.
所获得的完成树脂重量为1.95克，该树脂为：
Boc-Ala-Gln-Gln-Ala-Ala-Ala-Asp（OBzl）-Thr（Bzl）-Gly-His（DNP）-Ser（Bzl）-Ser（Bzl）-Gln-Val-Ser（Bzl）-Gln-Asn-Tyr（Brz）-OCH2-C6H4-树脂
保护的肽树脂先用在DMF中的苯硫酚处理1小时以从肽的组氨酸残基上去除DNP基团，然后与无水HF在0℃搅拌45分钟以切割与去保护。反应完成后得360毫克粗肽，在HPLC上纯化部分粗肽，得到的物质在分析型HPLC（用小的慢流动微量污染物上显示大量同源）。
氨基酸分析：Asp，2.10;Thr，1.01;Ser，2.09;Glu，3.91;Gly，1.07;Ala，4.05;Val，1.09;Thr，1.07;His，0.01.
实施例4：肽C（56-Ser，85-Lys）的制备
Glu-Thr-Ser-Glu-Gly-Ser-Arg-Gln-Ile-Leu-Gly-Gln-Leu-Gln-Pro-Ser-Leu-Gln-Thr-Gly-Ser-Glu-Glu-Leu-Arg-Ser-Leu-Tyr-Asn-Thr-Val-Ala-Thr-Leu-Lys
将Boc-Lys（Cl Z）-OCH2-C6H4-树脂（0.7克;0.35毫摩尔）放入肽合成瓶中，根据实施例1中所述的步骤进行固相肽合成循环，用以下Boc-氨基酸（每个1.1毫摩尔）依次与树脂上的肽链偶联，每次一个氨基酸：
Boc-Leu，Boc-Thr（Bzl），Boc-Ala，Boc-Val，Boc-Thr（Bzl），Boc-Asn，Boc-Tyr（Brz），Boc-Leu，Boc-Ser（Bzl），Boc-Arg（Tos），Boc-Leu，Boc-Glu（OBzl），Boc-Glu（OBzl），Boc-Ser（Bzl），Boc-Gly，Boc-Thr（Bzl），Boc-Gln，Boc-Leu，Boc-Ser（Bzl），Boc-Pro，Boc-Gln，Boc-Leu，Boc-Gln，Boc-Gly，Boc-Leu，Boc-Ile，Boc-Gln，Boc-Arg（Tos），Boc-Ser（Bzl;），Boc-Gly，Boc-Glu（OBzl），Boc-Ser（Bzl），Boc-Thr（Bzl）和Boc-Glu（OBzl）.
所得的完成树脂重量为1.28克，它为：
Boc-Glu（OBzl）-Thr（Bzl）-Ser（Bzl）-Glu（OBzl）-Gly-Ser（Bzl）-Arg（Tos）-Gln-Ile-Leu-Gly-Gln-Leu-Gln-Pro-Ser（Bzl）-Leu-Gln-Thr（Bzl）-Gly-Ser（Bzl）-Glu（OBzl）-Glu（OBzl）-Leu-Arg（Tos）-Ser（Bzl）-Leu-Tyr（Brz）-Asn-Thr（Bzl）-Val-Ala-Thr（Bzl）-Leu-Lys（Clz）-OCH2-C6H4-树脂
用HF切割和去保护，得457毫克粗肽。在HPLC上纯化得31毫克所需的肽。通过分析型HPLC，发现此产物是同源性的。
氨基酸分析： Asp，1.00;Thr，4.15;Ser，4.32;Glu，7.00;Pro，0.76;Gly，3.02;Ala，0.90;Val，0.95;Ile，0.85;Leu，5.99;Tyr，0.97;Lys，0.98;Arg，1.95.
实施例5：肽A（33-Lys）的制备
Gly-Ala-Arg-Ala-Ser-Val-Leu-Ser-Gly-Gly-Glu-Leu-Asp-Arg-Trp-Glu-Lys-Ile-Arg-Leu-Arg-Pro-Gly-Gly-Lys-Lys-Lys-Tyr-Lys-Leu-Lys-His-Lys
将Boc-Lys（Cl Z）-PAM-树脂（1.0克，0.32毫摩尔）放在肽合成瓶中，根据实施例1中所述的步骤进行固相肽合成的循环，用以下Boc-氨基酸（每个1.0毫摩尔）依次与树脂上增长的肽链偶联，每次衍生一个氨基酸：
Boc-His（DNP），Boc-Lys（Clz），Boc-Leu，Boc-Lys（Clz），Boc-Tyr（Brz），Boc-Lys（Clz），Boc-Lys（Clz），Boc-Lys（Clz），Boc-Gly，Boc-Gly，Boc-Pro，Boc-Arg（Tos），Boc-Leu，Boc-Arg（Tos），Boc-Ile，Boc-Lys（Clz），Boc-Glu（OBzl），Boc-Trp（For），Boc-Arg（Tos），Boc-Asp（OBzl），Boc-Leu，Boc-Glu（OBzl），Boc-Gly，Boc-Gly，Boc-Ser（Bzl），Boc-Leu，Boc-Val，Boc-Ser（Bzl），Boc-Ala，Boc-Arg（Tos），Boc-Ala和Boc-Gly.
所获的完成树脂的重量为2.23克，它是：
Boc-Gly-Ala-Arg（Tos）-Ala-Ser（Bzl）-Val-Leu-Ser（Bzl）-Gly-Gly-Glu（OBzl）-Leu-Asp（OBzl）-Arg（Tos）-Trp（For）-Glu（OBzl）-Lys（Clz）-Ile-Arg（Tos）-Leu-Arg（Tos）-Pro-Gly-Gly-Lys（Clz）-Lys（Clz）-Lys（Clz）-Tyr（Brz）-Lys（Clz）-Leu-Lys（Clz）-His（DNP）-Lys（Clz）-PAM-树脂
该肽-树脂用在DMF中的苯硫酚处理1小时，以去除肽上组氨酸残基上的DNP保护基，然后在苯甲醚、二甲硫、间甲苯酚和甲苯硫酚存在下用无水HF（0℃，60分钟）处理。去除多余HF和二甲硫后，加入新鲜HF，使混合物在0℃反应45分钟。如通常操作得580毫克粗肽。分析型HPLC表明该材料约纯度为90%。使用此材料不用进一步纯化。
氨基酸分析：
Asp，1.00;Ser，1.45;Glu，1.82;Pro，0.61;Gly，5.11;Ala，1.73;Val，0.85;Ile，0.74;Leu，3.73;Tyr，0.89;Trp，（acld hydr.，not determlned）;Lys，6.22;His，0.50;Arg，3.52.
Claims (26)
1、一种对HIVp17的抗体具有特异性免疫活性的肽及其结合物或类似物，其特征在于它是从下组肽中选出的，该组肽含有约12到25氨基酸，其顺序对应于下列顺序的一部分或全部：
Ala-Gln-Gln-Ala-Ala-Asp-Thr-
Gly-His-Ser-Ser-Gln-Val-Ser-Gln-
Asn-Tyr (Ⅴ)
其类似物，其中顺序中的氨基酸可被置换，缺失或插入，只要保存了从顺序的三维构型来的对HIVp17抗体的免疫活性。
2、根据权利要求1所述的肽，其特征在于它具有式（Ⅴ）中的18个氨基酸顺序。
3、一种对HIVp17的抗体具有特异性免疫反应性的肽及其结合物或类似物，其特征在于它是从下组肽中选出的，该组肽含约28到42个氨基酸，其顺序相应于下列顺序中的一部分或全部：
Glu-Thr-Ser-Glu-Gly-Cys-Arg-Gln-Ile-Leu-Gly-Gln-Leu-Gln-Pro-Ser-Leu-Gln-Thr-Gly-Ser-Glu-Glu-Leu-Arg-Ser-Leu-Tyr-Asn-Thr-Val-Ala-Thr-Leu （Ⅳ）
其类似物，其顺序中的氨基酸可被置换、缺失或插入，只要保存了从顺序三维构型来的对HIVp17的抗体的免疫反应性。
4、根据权利要求3所述的肽，其特征在于它含有式（Ⅳ）的34个氨基酸顺序。
5、根据权利要求4所述的肽，其特征在于它含有下式：
Glu-Thr-Ser-Glu-Gly-Ser-Arg-Gln-Ile-Leu-Gly-Gln-Leu-Gln-Pro-Ser-Leu-Gln-Thr-Gly-Ser-Glu-Glu-Leu-Arg-Ser-Leu-Tyr-Asn-Thr-Val-Ala-Thr-Leu-Lys。
6、一种对HIVp17抗体具有特异性免疫活性的肽及其结合物或类似物，其特征在于该肽是从下列组中选出的，该组肽含有约14到27个氨基酸，其顺序对应于下列顺序的一部分或全部：
Ile-Val-Trp-Ala-Ser-Arg-Glu-Leu-Glu-Arg-Phe-Ala-Val-Asn-Pro-Gly-Leu-Leu（Ⅲ）
其类似物，其中顺序中的氨基酸可被置换，缺失或插入，只要保存了从顺序三维构型来的HIVp17抗体的免疫反应性。
7、根据权利要求6所述的肽，其特征在于它含式（Ⅲ）的18个氨基酸顺序。
8、根据权利要求7所述的肽，其特征在于它含有下式：
Ile-Val-Trp-Ala-Ser-Arg-Glu-Leu-Glu-Arg-Phe-Ala-Val-Asn-Pro-Gly-Leu-Leu-Tyr。
9、一种对HIVp17抗体具有特异性免疫活性的肽，及其结合物或类似物，其特征在于该肽是从下组中选出的，该组肽含有约26到40个氨基酸，其顺序相应于下列顺序的一部分或全部：
Gly-Ala-Arg-Ala-Ser-Val-Leu-Ser-Gly-Gly-Glu-Leu-Asp-Asp-Arg-Trp-Glu-Lys-Ile-Arg-Leu-Arg-Pro-Gly-Gly-Lys-Lys-Tyr-Lys-Leu-Lys-His （Ⅱ）
其类似物，其中顺序中的氨基酸可被置换，缺失或插入，只要保存了从顺序三维构型来的对HIVp17抗体的免疫反应性。
10、根据权利要求9的肽，其特征在于它含有式（Ⅱ）的32个氨基酸顺序。
11、根据权利要求10所述的肽，其特征在于它具有下式：
Gly-Ala-Arg-Ala-Ser-Val-Leu-Ser-Gly-Gly-Glu-Leu-Asp-Asp-Arg-Trp-Gly-Lys-Ile-Arg-Leu-Arg-Pro-Gly-Gly-Lys-Lys-Tyr-Lys-Leu-Lys-His-Lys
12、一种对HIVp17抗体有特异性免疫反应性的肽其，特征在于它有包括下列顺序的10到14个氨基酸：
Ile-X1-X2-Lys-Asp-Thr-Lys-Glu-Ala-Leu
其中X1是Glu或Asp，X2是Ile或Val。
13、根据权利要求12所述的肽，其特征在于它具有下式：
Ile-Asp-Val-Lys-Asp-Thr-Lys-Glu-Ala-Leu.
14、根据权利要求12所述有肽，其特征在于它具有下式：
Ile-Glu-Ile-Lys-Asp-Thr-Lys-Glu-Ala-Leu.
15、一个呈现对HIVp17抗体有特异性免疫活性的两个或更多肽的混合物及其结合物及类似物，其特征在于该肽是从下列组中选出的，该组包括：
（1）含约10到36个氨基酸的肽，其顺序对应于式（Ⅰ′）的一部分或全部顺序：
Ile-X1-X2-Lys-Asp-Thr-Lys-Glu-Ala-Leu-X3-Lys-Ile-Glu-Glu-Glu-Gln-Asn （Ⅰ′）
其中X1是Asp或Glu，X2是Val或Ile，X3是Glu或Asp;
（2）含约26到40个氨基酸的肽，其顺序对应于式（Ⅱ）的一部分或全部顺序：
Gly-Ala-Arg-Ala-Ser-Val-Leu-Ser-Gly-Gly-Glu-Leu-Asp-Asp-Arg-Trp-Glu-Lys-Ile-Arg-Leu-Arg-Pro-Gly-Gly-Lys-Lys-Tyr-Lys-Leu-Lys-His-Ile （Ⅱ）
（3）含约14到27个氨基酸的肽，其顺序对应于式（Ⅲ）的一部分或全部顺序：
Val-Trp-Ala-Ser-Arg-Glu-Leu-Glu-Arg-Phe-Ala-Val-Asn-Pro-Gly-Leu-Leu-Glu-Thr （Ⅲ）
（4）含约28到42个氨基酸的肽，其顺序对应于式（Ⅳ）的部分或全部顺序：
Leu-Glu-Thr-Ser-Gly-Gys-Cys-Arg-Gln-Ile-Leu-Gly-Gln-Leu-Gln-Pro-Ser-Leu-Gln-Thr-Gly-Ser-Glu-Glu-Leu-Arg-Ser-Leu-Tyr-Asn-Thr-Val-Ala-Thr-Leu（Ⅳ）
（5）含约12至25个氨基酸的肽，其顺序对应于式（Ⅴ）的一部分或全部顺序：
Gln-Gln-Ala-Ala-Ala-Asp-Thr-Gly-His-Ser-Ser-Gln-Val-Ser-Gln-Asn-Tyr （Ⅴ）这些肽的类似物，其所述顺序中的氨基酸可被置换、缺失或插入，只要保存从顺序的三维构型来的对HIVp17抗体的免疫反应性。
16、一种免疫原性抗原，其特征在于它包括权利要求1、4、7或10中的任何肽与免疫原性载体物质共价连接。
17、一种根据权利要求16的免疫原性抗原，其特征在于所述的肽被标记，用于血清学检测所述抗原的抗体。
18、用于预防或治疗获得性免疫缺陷综合征或爱滋病相关综合征（ARC）的疫苗，其特征在于它包括将有效治疗量的根据权利要求1、4、7或10的抗原性肽或根据权利要求15的二个或更多抗原性肽的混合物以及药学上有效载体。
19、一种减少与获得性免疫缺陷综合征（AIDS）有关的病毒血症的方法，其特征在于它包括给暴露于爱滋病病毒，有得爱滋病危险或感染爱滋病的个体施用有效治疗量的根据权利要求1、4、7或10的抗原性肽，或根据权利要求15的二个或更多个抗原性肽的混合物。
20、一种检测病人体液中爱滋病病毒的方法，它包括使至少一个体液样品与一个或更多的抗体接触，该抗体抗至少是一个权利要求1、4、7或10的肽或权利要求15的肽的混合物，并通过放射免疫测定，酶联免疫吸附试验或间接荧光试验测定抗原-抗体复合物的形成。
21、根据权利要求20所述的方法，其特征在于它包括使体液样品与根据权利要求15的肽的混合物接触，然后在所述混合物中测定每个肽的抗原-抗体复合物的形式。
22、根据权利要求20所述的方法，其特征在于它包括把病人的多个体液样品中的每个与单个不同抗原性肽接触，然后测定每个样品中抗原-抗体复合物的形成。
23、一种检测能识别人体体液中HIVp17蛋白抗原决定簇的抗体的诊断盒，其特征在于它包括含多井平板的附件，其中多井平板被根据权利要求1、4、7或10的一个或多个肽或根据权利要求15的肽混合物包被，还包括用于酶检测的ELISA材料，它包含正常动物抗血清和酶，标记抗-抗体抗血清及颜色变化指示剂。
24、根据权利要求23的诊断盒，其特征在于它包括许多多井平板，每一个平板上的井被所述的一个不同肽包被。
25、根据权利要求23所述的诊断盒，其特征在于所述多井平板被两个或更多所述肽的混合物所包被。
26、一种形成用于治疗爱滋病的抗体富集血清的方法，其特征在于它包括从抗HIVp17抗体阳性但不显示AIDS或ARC症状的个体上取得体液样品，测定抗一个或更多肽的免疫显性抗原决定簇的抗体的存在，该肽是从下组中选出的，该组包括：
（1）含约10到36个氨基酸的肽，其顺序对应于式（Ⅰ′）的一部分或全部顺序：
Ile-X1-X2-Lys-Asp-Thr-Lys-Glu-Ala-Leu-X3-Lys-Ile-Glu-Glu-Glu-Gln-Asn （Ⅰ′）
其中X1是Asp或Glu，X2是Val或Ile，X3是Glu或Asp;
（2）含约26到40个氨基酸的肽，其顺序对应于式（Ⅱ）的一部分或全部顺序：
Gly-Ala-Arg-Ala-Ser-Val-Leu-Ser-Gly-Gly-Glu-Leu-Asp-Arg-Trp-Glu-Lys-Ile-Arg-Leu-Arg-Pro-Gly-Gly-Lys-Lys-Lys-Tyr-Lys-Leu-Lys-His （Ⅱ）
（3）含约14到27个氨基酸的肽，其顺序对应于式（Ⅲ）的一部分或全部顺序：Ile-Val-Trp-Ala-Ser-Arg-Glu-Leu-Glu-Arg-Phe-Ala-Val-Asn-Pro-Gly-Leu-Leu （Ⅲ）
（4）含约28到42个氨基酸的肽，其顺序对应于式（Ⅳ）的部分或全部顺序：
Glu-Thr-Ser-Glu-Gly-Cys-Arg-Gln-Ile-Leu-Gly-Gln-Leu-Gln-Pro-Ser-Leu-Gln-Thr-Gly-Ser-Glu-Glu-Leu-Arg-Ser-Leu-Tyr-Asn-Thr-Val-Ala-Thr-Leu （Ⅳ）
（5）含约12至25个氨基酸的肽，其顺序对应于式（Ⅴ）的一部分或全部顺序： Ala-Gln--Gln-Ala-Ala-Ala-Asp-Thr-Gly-His-Ser-Ser-Gln-Val-Ser-Gln-Asn-Tyr （Ⅴ）
这些肽的类似物，其所述顺序中的氨基酸可被置换、缺失或加入，只要保存从顺序的三维构型来的对HIVp17抗体的免疫反应性，和所述肽的结合物及其类似物，使至少一个体液样品经过亲和层析以去除对爱滋病发展设有保护作用的抗体，和/或富集血清中对爱滋病的发展起保护作用的抗体。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US42046989A | 1989-10-12 | 1989-10-12 | |
| US420,469 | 1989-10-12 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1052310A true CN1052310A (zh) | 1991-06-19 |
Family
ID=23666609
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN90108411A Pending CN1052310A (zh) | 1989-10-12 | 1990-10-12 | 人类免疫缺陷病毒相关肽 |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (3) | EP0620009A1 (zh) |
| JP (1) | JPH03209398A (zh) |
| KR (1) | KR910007962A (zh) |
| CN (1) | CN1052310A (zh) |
| AT (1) | ATE119166T1 (zh) |
| AU (1) | AU6393990A (zh) |
| CA (1) | CA2027455A1 (zh) |
| DE (1) | DE69017352T2 (zh) |
| DK (1) | DK0426314T3 (zh) |
| ES (1) | ES2071038T3 (zh) |
| GB (1) | GB2236754A (zh) |
| GR (1) | GR3015244T3 (zh) |
| HU (1) | HUT55035A (zh) |
| IE (1) | IE67533B1 (zh) |
| IL (1) | IL95890A0 (zh) |
| NZ (1) | NZ235538A (zh) |
| ZA (1) | ZA907944B (zh) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE4039925A1 (de) * | 1990-12-14 | 1992-06-17 | Behringwerke Ag | Ausgewaehlte peptide des gruppenspezifischen antigens (gag) von humanem immundefizienzvirus (hiv), ihre herstellung und verwendung |
| FR2734281B1 (fr) * | 1995-05-18 | 1997-07-25 | Commissariat Energie Atomique | Fragments d'acide nucleique derives du genome du virus vih-1, peptides correspondants et leurs applications en tant que reactifs d'evaluation du risque de transmission materno-foetale du vih-1 |
| US6103239A (en) * | 1996-08-09 | 2000-08-15 | Cel-Sci Corporation | Modified HGP-30 heteroconjugates, compositions and methods of use |
| NO314588B1 (no) | 2000-09-04 | 2003-04-14 | Bionor Immuno As | HIV-peptider, antigener, vaksinesammensetning, immunoassay- testsett og en fremgangsmåte for å påvise antistoffer indusert av HIV |
| ATE478089T1 (de) * | 2001-08-07 | 2010-09-15 | Medestea Int Spa | Isolierte polypeptide auf der grundlage des neutralisierenden epitops des p17-proteins vom hiv geeignet als impfstoffe und neutralisierende anti-p17-antikörper, die besagtes epitop spezifisch erkennen |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NO870027L (no) * | 1986-01-06 | 1987-07-07 | Hoffmann La Roche | Ekspresjon av htlv-iii gag-gen. |
| NZ220200A (en) * | 1986-05-19 | 1990-08-28 | Viral Technologies Inc | Hiv related peptides, antibodies to the peptides and vaccines therefrom |
| EP0273716B1 (en) * | 1986-12-30 | 1993-08-11 | THE UNITED STATES OF AMERICA as represented by the Secretary United States Department of Commerce | Synthetic peptides which induce cellular immunity to the aids virus and aids viral proteins |
| NO881151L (no) * | 1987-03-27 | 1988-09-28 | Syntello Ab | Syntetisk hiv-1-antigen. |
| DK643188A (da) * | 1987-11-24 | 1989-05-25 | Smithkline Biolog | Ekspression af hiv-proteiner i e.coli og s.cerevisiae |
| EP0330359A3 (en) * | 1988-02-25 | 1991-06-05 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Composition useful in the diagnosis and treating of hiv-1 infection |
-
1990
- 1990-10-02 NZ NZ235538A patent/NZ235538A/en unknown
- 1990-10-03 IL IL95890A patent/IL95890A0/xx unknown
- 1990-10-04 ZA ZA907944A patent/ZA907944B/xx unknown
- 1990-10-09 AT AT90311056T patent/ATE119166T1/de not_active IP Right Cessation
- 1990-10-09 DK DK90311056.7T patent/DK0426314T3/da active
- 1990-10-09 ES ES90311056T patent/ES2071038T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1990-10-09 EP EP94106293A patent/EP0620009A1/en not_active Withdrawn
- 1990-10-09 GB GB9021942A patent/GB2236754A/en not_active Withdrawn
- 1990-10-09 IE IE360490A patent/IE67533B1/en not_active IP Right Cessation
- 1990-10-09 EP EP94106294A patent/EP0620010A1/en not_active Withdrawn
- 1990-10-09 EP EP90311056A patent/EP0426314B1/en not_active Revoked
- 1990-10-09 DE DE69017352T patent/DE69017352T2/de not_active Revoked
- 1990-10-10 AU AU63939/90A patent/AU6393990A/en not_active Abandoned
- 1990-10-11 JP JP2273128A patent/JPH03209398A/ja active Pending
- 1990-10-11 HU HU906421A patent/HUT55035A/hu unknown
- 1990-10-12 CA CA002027455A patent/CA2027455A1/en not_active Abandoned
- 1990-10-12 CN CN90108411A patent/CN1052310A/zh active Pending
- 1990-10-12 KR KR1019900016184A patent/KR910007962A/ko not_active Application Discontinuation
-
1995
- 1995-03-02 GR GR940403828T patent/GR3015244T3/el unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IE67533B1 (en) | 1996-04-03 |
| IL95890A0 (en) | 1991-07-18 |
| CA2027455A1 (en) | 1991-04-13 |
| AU6393990A (en) | 1991-04-18 |
| GB2236754A (en) | 1991-04-17 |
| GR3015244T3 (en) | 1995-06-30 |
| DE69017352D1 (de) | 1995-04-06 |
| GB9021942D0 (en) | 1990-11-21 |
| EP0426314B1 (en) | 1995-03-01 |
| IE903604A1 (en) | 1991-04-24 |
| EP0620010A1 (en) | 1994-10-19 |
| EP0426314A2 (en) | 1991-05-08 |
| ZA907944B (en) | 1991-10-30 |
| ATE119166T1 (de) | 1995-03-15 |
| DK0426314T3 (da) | 1995-03-27 |
| DE69017352T2 (de) | 1995-10-05 |
| HU906421D0 (en) | 1991-04-29 |
| HUT55035A (en) | 1991-04-29 |
| NZ235538A (en) | 1992-06-25 |
| ES2071038T3 (es) | 1995-06-16 |
| KR910007962A (ko) | 1991-05-30 |
| EP0620009A1 (en) | 1994-10-19 |
| JPH03209398A (ja) | 1991-09-12 |
| EP0426314A3 (en) | 1991-07-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN1111540C (zh) | 串联的合成hiv－1肽类 | |
| US5665536A (en) | Diagnastic method and test kit for the serological detection of the AIDS virus | |
| EP0328403B1 (en) | Synthetic peptides related to the HIV-GP120-env-protein, and their use | |
| CN87107837A (zh) | 由重组体棒状病毒感染的昆虫细胞中的人类免疫缺陷病毒的壳膜基因得到的多肽 | |
| JPH06501260A (ja) | ヒト免疫不全ウィルスに対する中和抗体の誘発とワクチン接種に用いられるペプチド | |
| AU606595B2 (en) | HTLV-III/LAV virus related peptides, antibodies to the peptides, vaccines, passive and active immunization against AIDS virus and diagnostic test for the serological detection of the AIDS virus | |
| EP0538283B1 (en) | Synthetic peptides and mixtures thereof for detecting hiv antibodies | |
| EP0814090A1 (en) | Peptides and antibodies derived therefrom for the diagnosis of, therapy for and vaccination against htlv-1 infection | |
| Anderson et al. | Hypervariable epitope constructs as a means of accounting for epitope variability | |
| CN1052310A (zh) | 人类免疫缺陷病毒相关肽 | |
| CN1082053A (zh) | 合成多肽 | |
| CN1070484A (zh) | 用于同时检测hiv-1、hiv-2、htlv-ⅰ和htlv-ⅱ抗体的免疫检测法 | |
| EP0693938B1 (en) | Peptides for use in vaccination and induction of neutralizing antibodies against human immunodeficiency virus | |
| WO2002069691A2 (en) | Immunogenic hiv peptides for use as reagents and vaccines | |
| JP2002511853A (ja) | Ｈｉｖ抗体の検出方法及びそれに使用する抗原 | |
| CN1616485A (zh) | Sars冠状病毒结构蛋白orf3及其应用 | |
| US6218102B1 (en) | Synthetic peptides and mixtures thereof for detecting HIV antibodies | |
| WO1999062945A9 (en) | Peptide antigens for detection of hiv, hcv and other microbial infections | |
| AU2002252166A1 (en) | Immunogenic HIV peptides for use as reagents and vaccines |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C01 | Deemed withdrawal of patent application (patent law 1993) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |