CN105193733A - 一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球及其制备方法，该药物缓释纳米微球包含趋磁细菌的磁小体、壳聚糖、药用辅料以及药物成分，制备步骤包括，收集趋磁细菌磁小体，混合物料，喷雾干燥得纳米微球，纳米微球的粒径为100nm～50μm，根据不同的治疗目的，可将纳米微球作为口服缓释剂型，也可以用于制备靶向载药的缓释剂型，可广泛应用到生物医药领域。
Description
技术领域
本发明涉及一种药物缓释纳米微球，具体涉及一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球，属于生物医药领域。
背景技术
目前大多数临床药物存在耐受性差、细胞毒副作用强、口服吸收差、水溶性差、生物半衰期短等缺陷，从而影响药物的临床应用。为达到改善药物性能的目的，国内外发展了择时脉冲释药、药物前体设计、透皮给药和纳米微球等技术。其中，纳米微球缓释技术具有对靶器官有特异趋向性、药物释放持续时间长、提高生物利用度等优势。
纳米微球作为一种药物输送平台，可以提高活性药物成分，如难溶性药物、离子性药物、蛋白质、多肽和小干扰RNA(siRNA)等的功效。纳米微球本身没有药理作用，也不与药物发生化学反应。纳米微球作为药物载体具有以下优点：①提高药物利用率；②提高药物的选择性；③减少药物对正常组织的伤害，降低毒副作用；④将药物靶向输送到病变部位，实现靶向给药。
趋磁细菌(Magnetotacticbacterium)是一类在外磁场的作用下能作定向运动并在体内形成纳米磁性颗粒－磁小体(Magnetosome)的细菌，近年来，趋磁细菌及磁小体已成为新的生物资源被广泛研究于材料学、医学、生物学、物理学、地质学等多个学科领域，并在仿生学、生态学、医学、地质学、工业处理、卫生检验等多个领域得到应用。趋磁细菌不是分类学上的名词，它是对体内含磁性颗粒并表现出趋磁行为的所有细菌的通称。通过对目前已分离纯化的一些趋磁细菌菌株的16SrDNA序列的系统进化分析，发现趋磁细菌只存在于Proteobacteria和Nitrospira这2个门内，多数位于Proteobacteria门的α亚纲和δ亚纲，而Nitrospira门中只有Magnetobacteriumbavaricum一种趋磁细菌的存在。在最新版的伯杰系统细菌学手册中，趋磁细菌被分别归入Magnetospirillum和Magnetobacterium属中。其中对M.magnetotacticumMS-1、Magnetospiri-llumsp.AMB-1及M.gryphiswaldenseMSR-1等菌株的研究较为普遍与深入。
磁细菌体内合成链状排列、具有外膜包被的Fe3O4或Fe3S4磁性颗粒—体。磁小体颗粒为单磁畴晶体，大小均匀、纳米级(20～120nm)、具有较大的比面值，颗粒外有生物膜包被，不产生细胞毒性，具有极好的生物相容性，因此可以作为新一代纳米磁性材料。本发明将磁小体与生物材料混和制备缓释纳米微球，根据不同的治疗目的，可将纳米微球作为口服缓释剂型，也可以用于制备靶向载药的缓释剂型，可以应用到生物医药领域，实现磁固定靶向缓释给药。
发明内容
一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球，由以下成分组成：
所述的药物成分为抗肿瘤药物喜树碱、阿霉素、长春新碱、紫杉醇、秋水仙碱、嘌呤霉素中的一种或几种。
进一步地，由以下成分组成：
所述的趋磁细菌选择Magnetospirillum属或Magnetobacterium属趋磁细菌；尤其选择M.magnetotacticumMS-1、Magnetospiri-llumspAMB-1及M.gryphiswaldenseMSR-1菌株中的一种或几种。
纳米微球的粒径为100nm～50μm；纳米微球为表面光滑的实心球体或颗粒。
壳聚糖的分子量为10KDa～2000KDa，优选300KDa～1000KDa，更优选350KDa。
壳聚糖的脱乙酰度为50％～90％，优选60％～80％，更优选75％。
辅料为甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟乙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟甲基纤维素和羟甲基纤维素钠、乳糖、甘露聚糖、果胶、海藻酸钠、海藻酸钾、琼脂、角叉等胶、刺槐豆胶、爪耳树胶和西黄蓍胶中的一种或几种。
包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球的制备方法，包括以下步骤：
(1)将培养结束的趋磁细菌收集，超声破壁释放磁小体，施加外加磁场吸附分离磁小体；
(2)将磁小体用生理盐水冲洗数次，将壳聚糖、辅料、药物成分混合均匀；
(3)将步骤(2)中混合液通过喷雾干燥来制备纳米微球。
进一步地：
超声条件为：功率100～1000W，优选200～500W，更优选300W。
喷雾干燥条件为：进风温度80～180℃，优选120～160℃，更优选150℃；出风温度70～100℃，优选80～90℃，更优选85℃；收集喷雾干燥粉末，得缓释纳米微球。
上述的纳米微球具有显著的药物缓释功效，可作为口服缓释剂型，也可以用于制备靶向载药的缓释剂型，适宜作为磁性靶向载药新剂型进一步开发利用。
附图说明
下面结合附图及其实施例对本发明进一步详细说明。
图1药物缓释纳米微球示意图
图2包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球结构示意图
1：磁小体；2：包埋的药物成分。
具体实施方式
实施例1一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球
缓释纳米微球的组成为：趋磁细菌的磁小体1份、壳聚糖1份、甲基纤维素1份、喜树碱10份。
包埋趋磁细菌磁小体的缓释纳米微球的制备是通过以下方式实现的：
(1)将培养Magnetospiri-llumsp.AMB-1结束的趋磁细菌收集，500W超声破壁1h，释放磁小体，施加外加磁场吸附回收磁小体。
(2)将磁小体用生理盐水冲洗3次，将分子量为10KDa、脱乙酰度为50％的壳聚糖、甲基纤维素、喜树碱按照上述比例混合均匀，通过喷雾干燥来制备纳米微球；喷雾干燥条件为：进风温度80℃，出口温度70℃，进样速度5mL/min。
(3)收集喷雾干燥粉末，得缓释纳米微球。制备所得的纳米微球的平均粒径为100nm、微球表面光滑的实心球体。
实施例2一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球
缓释纳米微球的组成为：趋磁细菌的磁小体9份、壳聚糖20份、羟丙基纤维素4份、阿霉素10份。
包埋趋磁细菌磁小体的缓释纳米微球的制备是通过以下方式实现的：
(1)将培养M.gryphiswaldenseMSR-1结束的趋磁细菌收集，600W超声破壁0.5h，释放磁小体，施加外加磁场吸附回收磁小体。
(2)将磁小体用生理盐水冲洗5次，将分子量为100KDa、脱乙酰度为80％的壳聚糖、羟丙基纤维素、阿霉素按照上述比例混合均匀，通过喷雾干燥来制备纳米微球；喷雾干燥条件为：进风温度120℃，出口温度90℃，进样速度18mL/min。
(3)收集喷雾干燥粉末，得缓释纳米微球。制备所得的纳米微球的平均粒径为300nm、微球表面光滑的实心球体。
实施例3一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球
缓释纳米微球的组成为：趋磁细菌的磁小体10份、壳聚糖5份、果胶5份、长春新碱10份。
包埋趋磁细菌磁小体的缓释纳米微球的制备是通过以下方式实现的：
(1)将培养M.magnetotacticumMS-1结束的趋磁细菌收集，300W超声破壁2h，释放磁小体，施加外加磁场吸附回收磁小体。
(2)将磁小体用生理盐水冲洗3次，将分子量为2000KDa、脱乙酰度为90％的壳聚糖、果胶、长春新碱按照上述比例混合均匀，通过喷雾干燥来制备纳米微球；喷雾干燥条件为：进风温度180℃，出口温度100℃，进样速度60mL/min。
(3)收集喷雾干燥粉末，得缓释纳米微球。制备所得的纳米微球的平均粒径为50μm、微球表面光滑的实心球体。
实施例4一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球
缓释纳米微球的组成为：趋磁细菌的磁小体3份、壳聚糖6份、爪耳树胶1份、紫杉醇5份。
包埋趋磁细菌磁小体的缓释纳米微球的制备是通过以下方式实现的：
(1)将培养Magnetospiri-llumsp.AMB-1结束的趋磁细菌收集，500W超声破壁1h，释放磁小体，施加外加磁场吸附回收磁小体。
(2)将磁小体用生理盐水冲洗3次，将分子量为10KDa、脱乙酰度为50％的壳聚糖、爪耳树胶、紫杉醇按照上述比例混合均匀，通过喷雾干燥来制备纳米微球；喷雾干燥条件为：进风温度80℃，出口温度70℃，进样速度5mL/min。
(3)收集喷雾干燥粉末，得缓释纳米微球。制备所得的纳米微球的平均粒径为10μm、微球为颗粒。
实施例5一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球
缓释纳米微球的组成为：趋磁细菌的磁小体3份、壳聚糖15份、琼脂6份、喜树碱5份。
包埋趋磁细菌磁小体的缓释纳米微球的制备是通过以下方式实现的：
(1)将培养Magnetospiri-llumsp.AMB-1结束的趋磁细菌收集，550W超声破壁2h，释放磁小体，施加外加磁场吸附回收磁小体。
(2)将磁小体用生理盐水冲洗3次，将分子量为300KDa、脱乙酰度为65％的壳聚糖、琼脂、喜树碱按照上述比例混合均匀，通过喷雾干燥来制备纳米微球；喷雾干燥条件为：进风温度150℃，出口温度95℃，进样速度45mL/min。
(3)收集喷雾干燥粉末，得缓释纳米微球。制备所得的纳米微球的平均粒径为900nm、微球为颗粒。
实施例6一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球
缓释纳米微球的组成为：趋磁细菌的磁小体3份、壳聚糖8份、辅料(羟乙基纤维素：羟乙基甲基纤维素：甲基纤维素＝1:3:1)1份、药物(长春新碱:嘌呤霉素＝1:1)5份。
包埋趋磁细菌磁小体的缓释纳米微球的制备是通过以下方式实现的：
(1)将培养Magnetospiri-llumsp.AMB-1结束的趋磁细菌收集，550W超声破壁2h，释放磁小体，施加外加磁场吸附回收磁小体。
(2)将磁小体用生理盐水冲洗3次，将分子量为300KDa、脱乙酰度为65％的壳聚糖、辅料、药物按照上述比例混合均匀，通过喷雾干燥来制备纳米微球；喷雾干燥条件为：进风温度170℃，出口温度105℃，进样速度50mL/min。
(3)收集喷雾干燥粉末，得缓释纳米微球。制备所得的纳米微球的平均粒径为950nm、微球为颗粒。
实施例7一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球及其制备方法
(1)将培养结束的趋磁细菌M.magnetotacticumMS-1收集，超声破壁释放磁小体，超声功率为300W，施加外加磁场吸附分离磁小体；
(2)将磁小体用生理盐水冲洗数次，将磁小体、壳聚糖、辅料、药物成分按照下列配比混合均匀；
其中，壳聚糖的分子量为350KDa，壳聚糖的脱乙酰度为75％。
(3)将混合液通过喷雾干燥来制备纳米微球，喷雾干燥条件为：进风温度150℃；出风温度85℃。制备所得的纳米微球的平均粒径为200nm、纳米微球为表面光滑的实心球体。
实施例8一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球及其制备方法
(1)将培养结束的趋磁细菌Magnetospiri-llumspAMB-1收集，超声破壁释放磁小体，超声功率为100W，施加外加磁场吸附分离磁小体；
(2)将磁小体用生理盐水冲洗数次，将磁小体、壳聚糖、辅料、药物成分按照下列配比混合均匀；
其中，壳聚糖的分子量为10KDa，壳聚糖的脱乙酰度为50％。
(3)将混合液通过喷雾干燥来制备纳米微球，喷雾干燥条件为：进风温度80℃；出风温度70℃。制备所得的纳米微球的平均粒径为50μm，纳米微球为颗粒。
实施例9一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球及其制备方法
(1)将培养结束的趋磁细菌M.gryphiswaldenseMSR-1收集，超声破壁释放磁小体，超声功率为1000W，施加外加磁场吸附分离磁小体；
(2)将磁小体用生理盐水冲洗数次，将磁小体、壳聚糖、辅料、药物成分按照下列配比混合均匀；
其中，壳聚糖的分子量为2000KDa，壳聚糖的脱乙酰度为90％。
(3)将混合液通过喷雾干燥来制备纳米微球，喷雾干燥条件为：进风温度180℃；出风温度100℃。制备所得的纳米微球的平均粒径为500nm，纳米微球为表面光滑的实心球体。
实施例10一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球及其制备方法
(1)将培养结束的趋磁细菌M.magnetotacticumMS-1收集，超声破壁释放磁小体，超声功率为200W，施加外加磁场吸附分离磁小体；
(2)将磁小体用生理盐水冲洗数次，将磁小体、壳聚糖、辅料、药物成分按照下列配比混合均匀；
其中，壳聚糖的分子量为300KDa，壳聚糖的脱乙酰度为60％。
(3)将混合液通过喷雾干燥来制备纳米微球，喷雾干燥条件为：进风温度120℃；出风温度80℃。制备所得的纳米微球的平均粒径为40μm、纳米微球为颗粒。
实施例11一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球及其制备方法
(1)将培养结束的趋磁细菌Magnetospiri-llumspAMB-1收集，超声破壁释放磁小体，超声功率为500W，施加外加磁场吸附分离磁小体；
(2)将磁小体用生理盐水冲洗数次，将磁小体、壳聚糖、辅料、药物成分按照下列配比混合均匀；
其中，壳聚糖的分子量为1000KDa，壳聚糖的脱乙酰度为80％。
(3)将混合液通过喷雾干燥来制备纳米微球，喷雾干燥条件为：进风温度160℃；出风温度90℃。制备所得的纳米微球的平均粒径为800nm，纳米微球为表面光滑的实心球体。
实施例12一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球及其制备方法
(1)将培养结束的趋磁细菌M.gryphiswaldenseMSR-1收集，超声破壁释放磁小体，超声功率为150W，施加外加磁场吸附分离磁小体；
(2)将磁小体用生理盐水冲洗数次，将磁小体、壳聚糖、辅料、药物成分按照下列配比混合均匀；
其中，壳聚糖的分子量为100KDa，壳聚糖的脱乙酰度为55％。
(3)将混合液通过喷雾干燥来制备纳米微球，喷雾干燥条件为：进风温度100℃；出风温度75℃。制备所得的纳米微球的平均粒径为122nm，纳米微球为表面光滑的实心球体。
实施例13一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球及其制备方法
(1)将培养结束的趋磁细菌M.magnetotacticumMS-1收集，超声破壁释放磁小体，超声功率为400W，施加外加磁场吸附分离磁小体；
(2)将磁小体用生理盐水冲洗数次，将磁小体、壳聚糖、辅料、药物成分按照下列配比混合均匀；
其中，壳聚糖的分子量为450KDa，壳聚糖的脱乙酰度为65％。
(3)将混合液通过喷雾干燥来制备纳米微球，喷雾干燥条件为：进风温度170℃；出风温度95℃。制备所得的纳米微球的平均粒径为800nm，纳米微球为表面光滑的实心球体。
实施例14一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球及其制备方法
(1)将培养结束的趋磁细菌Magnetospiri-llumspAMB-1收集，超声破壁释放磁小体，超声功率为600W，施加外加磁场吸附分离磁小体；
(2)将磁小体用生理盐水冲洗数次，将磁小体、壳聚糖、辅料、药物成分按照下列配比混合均匀；
其中，壳聚糖的分子量为550KDa，壳聚糖的脱乙酰度为55％。
(3)将混合液通过喷雾干燥来制备纳米微球，喷雾干燥条件为：进风温度175℃；出风温度85℃。制备所得的纳米微球的平均粒径为300nm，纳米微球为表面光滑的实心球体。
实施例15一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球及其制备方法
(1)将培养结束的趋磁细菌M.gryphiswaldenseMSR-1收集，超声破壁释放磁小体，超声功率为210W，施加外加磁场吸附分离磁小体；
(2)将磁小体用生理盐水冲洗数次，将磁小体、壳聚糖、辅料、药物成分按照下列配比混合均匀；
其中，壳聚糖的分子量为3000KDa，壳聚糖的脱乙酰度为75％。
(3)将混合液通过喷雾干燥来制备纳米微球，喷雾干燥条件为：进风温度130℃；90℃。制备所得的纳米微球的平均粒径为10μm、纳米微球为表面光滑的实心球体。
实施例16一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球及其制备方法
(1)将培养结束的趋磁细菌Magnetospiri-llumspAMB-1收集，超声破壁释放磁小体，超声功率为600W，施加外加磁场吸附分离磁小体；
(2)将磁小体用生理盐水冲洗数次，将磁小体、壳聚糖、辅料、药物成分按照下列配比混合均匀；
其中，壳聚糖的分子量为350KDa，壳聚糖的脱乙酰度为75％。
(3)将混合液通过喷雾干燥来制备纳米微球，喷雾干燥条件为：进风温度150℃；出风温度85℃。制备所得的纳米微球的平均粒径为150nm，纳米微球为表面光滑的实心球体。
实施例17一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球及其制备方法
(1)将培养结束的趋磁细菌M.gryphiswaldenseMSR-1收集，超声破壁释放磁小体，超声功率为400W，施加外加磁场吸附分离磁小体；
(2)将磁小体用生理盐水冲洗数次，将磁小体、壳聚糖、辅料、药物成分按照下列配比混合均匀；
其中，壳聚糖的分子量为150KDa，壳聚糖的脱乙酰度为65％。
(3)将混合液通过喷雾干燥来制备纳米微球，喷雾干燥条件为：进风温度150℃；出风温度75℃。制备所得的纳米微球的平均粒径为100nm，纳米微球为表面光滑的实心球体。
实施例18一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球及其制备方法
(1)将培养结束的趋磁细菌M.magnetotacticumMS-1收集，超声破壁释放磁小体，超声功率为450W，施加外加磁场吸附分离磁小体；
(2)将磁小体用生理盐水冲洗数次，将磁小体、壳聚糖、辅料、药物成分按照下列配比混合均匀；
其中，辅料为，羟丙基甲基纤维素：羟甲基纤维素和羟甲基纤维素钠：乳糖：甘露聚糖：果胶＝1：1：1：1：1
药物为，喜树碱：长春新碱：秋水仙碱＝1：2：1
壳聚糖的分子量为116KDa，壳聚糖的脱乙酰度为88％。
(3)将混合液通过喷雾干燥来制备纳米微球，喷雾干燥条件为：进风温度166℃；出风温度95℃。制备所得的纳米微球的平均粒径为120nm，纳米微球为表面光滑的实心球体。
实施例19一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球及其制备方法
(1)将培养结束的趋磁细菌M.magnetotacticumMS-1收集，超声破壁释放磁小体，超声功率为300W，施加外加磁场吸附分离磁小体；
(2)将磁小体用生理盐水冲洗数次，将磁小体、壳聚糖、辅料、药物成分按照下列配比混合均匀；
其中，辅料为，海藻酸钾：琼脂：角叉等胶：刺槐豆胶：爪耳树胶：西黄蓍胶＝1:5:1:1:1:1
壳聚糖的分子量为150KDa，壳聚糖的脱乙酰度为65％。
(3)将混合液通过喷雾干燥来制备纳米微球，喷雾干燥条件为：进风温度260℃；出风温度95℃。制备所得的纳米微球的平均粒径为360nm，纳米微球为表面光滑的实心球体。
实施例20一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球及其制备方法
(1)将培养结束的趋磁细菌Magnetospiri-llumspAMB-1收集，超声破壁释放磁小体，超声功率为600W，施加外加磁场吸附分离磁小体；
(2)将磁小体用生理盐水冲洗数次，将磁小体、壳聚糖、辅料、药物成分按照下列配比混合均匀；
其中，壳聚糖的分子量为550KDa，壳聚糖的脱乙酰度为85％。
(3)将混合液通过喷雾干燥来制备纳米微球，喷雾干燥条件为：150℃；出风温度95℃。制备所得的纳米微球的平均粒径为800nm，纳米微球为表面光滑的实心球体。
实施例21一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球及其制备方法
(1)将培养结束的趋磁细菌Magnetospiri-llumspAMB-1收集，超声破壁释放磁小体，超声功率为300W，施加外加磁场吸附分离磁小体；
(2)将磁小体用生理盐水冲洗数次，将磁小体、壳聚糖、辅料、药物成分按照下列配比混合均匀；
其中，壳聚糖的分子量为350KDa，壳聚糖的脱乙酰度为75％。
(3)将混合液通过喷雾干燥来制备纳米微球，喷雾干燥条件为：进风温度150℃；出风温度85℃。制备所得的纳米微球的平均粒径为600nm，纳米微球为表面光滑的实心球体。
实施例22一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球及其制备方法
(1)将培养结束的趋磁细菌M.magnetotacticumMS-1收集，超声破壁释放磁小体，超声功率为300W，施加外加磁场吸附分离磁小体；
(2)将磁小体用生理盐水冲洗数次，将磁小体、壳聚糖、辅料、药物成分按照下列配比混合均匀；
其中，壳聚糖的分子量为650KDa，壳聚糖的脱乙酰度为65％。
(3)将混合液通过喷雾干燥来制备纳米微球，喷雾干燥条件为：进风温度170℃；出风温度95℃。制备所得的纳米微球的平均粒径为50μm、纳米微球为表面光滑的实心球体。
实施例23一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球及其制备方法
(1)将培养结束的趋磁细菌M.gryphiswaldenseMSR-1收集，超声破壁释放磁小体，超声功率为100W，施加外加磁场吸附分离磁小体；
(2)将磁小体用生理盐水冲洗数次，将磁小体、壳聚糖、辅料、药物成分按照下列配比混合均匀；
其中，壳聚糖的分子量为300KDa，壳聚糖的脱乙酰度为65％。
(3)将混合液通过喷雾干燥来制备纳米微球，喷雾干燥条件为：进风温度160℃；出风温度90℃。制备所得的纳米微球的平均粒径为800nm，纳米微球为表面光滑的实心球体。
实施例24包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球的缓释效果
利用实施例1制备的纳米微球，在pH3.0磷酸盐缓冲液、pH7.0磷酸盐缓冲液，pH11.0磷酸盐缓冲，采用HPLC测定喜树碱的三种缓释效果，如表1所示：
表1包埋趋磁细菌磁小体的喜树碱缓释纳米微球的缓释效果
从表1可以看出，缓释纳米微球在碱性溶液中崩解较快，在酸性环境下，具有较好的缓释效果。
实施例25包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球的缓释效果
利用实施例2制备的纳米微球，在pH3.0磷酸盐缓冲液、pH7.0磷酸盐缓冲液，pH11.0磷酸盐缓冲，采用HPLC测定阿霉素的三种缓释效果，如表2所示：
表2包埋趋磁细菌磁小体的阿霉素缓释纳米微球的缓释效果
从表2可以看出，缓释纳米微球在碱性溶液中崩解较快，在酸性环境下，具有较好的缓释效果。
实施例26包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球的缓释效果
利用实施例7制备的纳米微球，在pH3.0磷酸盐缓冲液、pH7.0磷酸盐缓冲液，pH11.0磷酸盐缓冲，采用HPLC测定喜树碱的三种缓释效果，如表3所示：
表3包埋趋磁细菌磁小体的喜树碱缓释纳米微球的缓释效果
从表3可以看出，缓释纳米微球在碱性溶液中崩解较快，在酸性环境下，具有较好的缓释效果。
实施例27包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球的缓释效果
利用实施例8-23制备的纳米微球，在pH3.0磷酸盐缓冲液，测定药物的缓释效果，如表4所示：
表4包埋趋磁细菌磁小体的缓释纳米微球的缓释效果
| 样品 | 到达50％药物浓度时间(h) | 到达峰浓度时间(h) |
| 实施例8 | 89.2 | 135.3 |
| 实施例9 | 68.3 | 109.2 |
| 实施例10 | 102.5 | 144.6 |
| 实施例11 | 66.7 | 108.1 |
| 实施例12 | 70.1 | 112.0 |
| 实施例13 | 82.8 | 121.5 |
| 实施例14 | 53.9 | 98.7 |
| 实施例15 | 49.3 | 87.8 |
| 实施例16 | 85.0 | 123.3 |
| 实施例17 | 88.6 | 122.9 |
| 实施例18 | 93.7 | 131.5 |
| 实施例19 | 48.2 | 76.4 |
| 实施例20 | 97.6 | 132.5 |
| 实施例21 | 68.4 | 106.2 |
| 实施例22 | 66.2 | 105.1 |
| 实施例23 | 71.0 | 113.8 |
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球，其特征在于，由以下成分组成：
所述的药物成分为抗肿瘤药物喜树碱、阿霉素、长春新碱、紫杉醇、秋水仙碱、嘌呤霉素中的一种或几种。
2.如权利要求1所述的包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球，其特征在于，由以下成分组成：
3.如权利要求1所述的包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球，其特征在于：所述的趋磁细菌选择Magnetospirillum属或Magnetobacterium属趋磁细菌；尤其选择M.magnetotacticumMS-1、Magnetospiri-llumspAMB-1及M.gryphiswaldenseMSR-1菌株中的一种或几种。
4.如权利要求1所述的包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球，其特征在于：纳米微球的粒径为100nm～50μm；纳米微球为表面光滑的实心球体或颗粒。
5.如权利要求1所述的包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球，其特征在于：壳聚糖的分子量为10KDa～2000KDa，优选300KDa～1000KDa，更优选350KDa。
6.如权利要求1所述的包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球，其特征在于：壳聚糖的脱乙酰度为50％～90％，优选60％～80％，更优选75％。
7.如权利要求1所述的包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球，其特征在于：辅料为甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟乙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟甲基纤维素和羟甲基纤维素钠、乳糖、甘露聚糖、果胶、海藻酸钠、海藻酸钾、琼脂、角叉等胶、刺槐豆胶、爪耳树胶和西黄蓍胶中的一种或几种。
8.如权利要求1-8任意之一所述的包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将培养结束的趋磁细菌收集，超声破壁释放磁小体，施加外加磁场吸附分离磁小体；
(2)将磁小体用生理盐水冲洗数次，将壳聚糖、辅料、药物成分混合均匀；
(3)将步骤(2)中混合液通过喷雾干燥来制备纳米微球。
9.如权利要求8所述的包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球的制备方法，其特征在于：
步骤(1)中超声条件为，功率100～1000W，优选200～500W，更优选300W。
10.如权利要求8所述的包埋趋磁细菌磁小体的药物缓释纳米微球的制备方法，其特征在于：
步骤(3)中喷雾干燥条件为：进风温度80～180℃，优选120～160℃，更优选150℃；出风温度70～100℃，优选80～90℃，更优选85℃；收集喷雾干燥粉末，得缓释纳米微球。
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