CN105168015B - 一种蛋白质复合物肤氨酸的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种蛋白质复合物肤氨酸的制备方法，其中：所述的蛋白质复合物由如下质量百分比的组分组成：丝胶蛋白30‑68%；丝素蛋白20‑58%；营养添加剂5‑12%；本发明具有皮肤养护及修复功能。本发明皮肤养护组合物不但可以用于进行日常皮肤护理，例如祛除皮肤皱纹、增加皮肤弹性和光泽，可用于敏感性皮肤的养护；同时，还可用于创伤愈合后、微创美容手术后伤口恢复，去除疤痕，美化皮肤等优点。

Description

一种蛋白质复合物肤氨酸的制备方法

技术领域

本发明涉及护肤品领域，特别是一种蛋白质复合物肤氨酸的制备方法。

背景技术

人的衰老，包括皮肤衰老本来是一种不可逆的自然现象。由于紧张的生活工作节奏、环境污染以及不健康的生活习惯等因素的影响，这种衰老( 首先表现为皮肤的衰老)现象常常会提早出现。具体表现为皱纹、肤色不均匀、粗糙、缺乏弹性、肤色灰暗发黄、色斑雀斑、干燥、毛孔粗大等所谓亚健康皮肤。从生物医学角度来说，“亚健康皮肤”是各种因素导致皮肤组织机能低下，是界于健康与病态之间的一类肤质。随着年龄的增长，皮肤基底层可分裂的皮肤干细胞数目逐步减少，皮肤更新的速度减慢；皮肤各层次细胞的代谢活性降低，各种蛋白合成和皮肤色素的代谢能力下降。从外部表象来看，它表现出晦暗无华、伴有色素沉着，皮肤松弛、皱纹加深。衰老无法逆转，但是可以延缓。

而根据现有文献报道，丝胶及丝素蛋白具有优异的抗氧化功能，可有效抑制脂肪过氧化的能力，从而抵御日光、大气污染、化学污染等因素对皮肤的腐蚀，减缓肌肤老化。因而以其为主要添加剂制成的化妆品具有促进胶原蛋白生成，防止细胞老化的作用。

而现有技术中，（1）就丝胶蛋白制备技术方面而言： 现时大部分采用的是酶解法。如公开号CN1477141的中国专利公开了一种水溶性丝胶蛋白粉的制造方法：洗涤后的蚕茧经高温高压脱胶处理后,获得难溶性丝胶溶液,将该溶液的pH值调,再进行第二次高温高压降解处理,通过调节降解处理时的温度或压力、处理时间、脱胶液pH值的范围等工艺条件,控制所要求达到的水溶性丝胶蛋白的分子量,以制备不同用途的易水溶性丝胶蛋白溶液或粉末。通过酶解之后，丝胶蛋白分子量急剧下降，成膜性及可凝胶性大大削弱，且其不具有包覆及缓释功能，与其他化妆品营养剂相容性较低。 （2）就丝素蛋白制备技术方面而言：现时大部分采用的为CaC_l2再生法。如公开号为CN102532253A的中国专利公开了一种蚕丝蛋白的提取方法：将蚕茧置于高温的CaC_l2水溶液中溶解至未溶解部分呈胶状物，得溶解处理液，经透析后得到丝素蛋白粉。又如公开号为CN101381758的中国专利公开了丝素肽的制备方法：蚕茧加入Na₂CO₃溶液中精炼后，滤出蚕丝再将其加入CaC_l2溶液中溶解，溶解后得到的混合液用蛋白酶进行酶水解反应，水解液经超滤和纳滤分离后，得到的料液经喷雾干燥得到丝素肽粉末。在上述方法中，均需要消耗大量时间及购置昂贵设备以用于排除钙离子、氯离子及其他外加离子，提取条件苛刻，生产成本较高，且最终产物为水解丝素肽，分子量小，容易渗透进皮肤角质层下，大大降低了丝素粉末在物理防晒方面（遮盖及消色效果）的功效。 （3）就丝胶及丝素蛋白在化妆品配方中的应用现状而言： 因在保湿、美白祛斑、抗菌消炎以及防晒功能等方面的优越性，丝胶及丝素蛋白在化妆品领域上的应用越来越广泛，随着其研发应用的不断深入，基于丝胶及丝素蛋白的化妆品亦相继问世。但这类型化妆品中，丝胶及丝素蛋白大部分以水溶性蛋白肽的形式加入化妆品配方当中，只能充当营养添加剂。加之，其较差的可凝性，使其不具备基质功能，其功效不能得到充分的发挥。 另，虽然丝胶及丝素蛋白中的氨基酸含量高，但因其作用效果较为单一，因此，需搭配其他营养成分来填补其营养空缺，增加其应用范围及效果。

发明内容

为了克服现有技术的上述缺点，本发明的目的是提供一种具有皮肤养护及修复功能的蛋白质复合物——肤氨酸及其制备方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种蛋白质复合物肤氨酸，其中：所述的蛋白质复合物由如下质量百分比的组分组成：

丝胶蛋白 30-68%； 丝素蛋白 20-58%； 营养添加剂5-12%；

所述的蛋白质复合物中丝胶蛋白的分子量为40000-200000道尔顿，粒径为0.1-10微米；所述的丝素蛋白的分子量为40000-200000道尔顿，粒径为0.1-10微米。

作为本发明的进一步改进：所述的营养添加剂为金花茶提取物、美藤果油提取物、维生素E、牛奶蛋白、丝胶蛋白一种或两种以上混合。

一种蛋白质复合物肤氨酸的制备方法，其中：所述的制备步骤如下：

1）提取丝胶蛋白：首先用纯净水清洗蚕茧3-4次以除杂质，之后将蚕茧浸没于纯净水中，蚕茧与纯净水浸液的浴比为1：20-50；然后以高温高压的方法使蚕茧中的丝胶蛋白析出并溶解于浸液中；在高温高压制备过程中，制备温度为160-300℃，压力为0.2-0.4Mpa，制备时间为120分钟；制备完成后，再将上述含有析出丝胶蛋白的浸液置于温度为零下4-10℃的冰室中冷冻，使溶解的凝胶析出，冷冻时间为48-60小时，冷冻析出完成后解冻即可取出丝胶蛋白，将取出的丝胶蛋白进行烘干及粉碎后备用；析出丝胶蛋白后的蚕茧变成脱胶蚕茧，将所述脱胶蚕茧烘干备用；

2）提取丝素蛋白：将步骤1）中得出的脱胶蚕茧中的纤维切断，所述的纤维切断长度为0.1-1cm，然后将切断后的纤维泡入浓度为10-12mol/L的浓盐酸中浸泡1-5小时，使纤维变性，硬化，洗涤至pH=4-6；洗涤后将纤维磨成丝素蛋白粉末，再进行物理细磨；所述物理细磨为湿式研磨，将丝素蛋白粉末与纯净水以1:15-20的体积比混合，使丝素蛋白粉末悬浮于纯净水溶液，再用5000-10000rpm转速研磨设备研磨，研磨1-2小时后，烘干提取丝素蛋白粉末备用；

3）肤氨酸制备：将上述步骤1）提取的丝胶蛋白及步骤2）提取的丝素蛋白按丝胶蛋白占总质量百分比为30-68%，丝素蛋白占总质量百分比为20-58%的比例溶于纯净水中，液料比为10:1制成溶液；再将溶液放入搅拌机中以500rpm的速度搅拌1小时后，在溶液中加入相当溶液5倍量的乙醇使丝胶蛋白及丝素蛋白混合物析出，将析出的混合物烘干，加入占总质量百分比为5-12%的营养添加剂，搅拌均匀，制备肤氨酸完成。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

1. 从应用效果方面，增益效果如下： “肤氨酸”结合了丝胶蛋白及丝素蛋白中的甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸和酪氨酸，异亮氨酸，亮氨酸（占其全部氨基酸的90%，其余为天门冬氨酸、谷氨酸、乙氨酸等），营养添加剂中营养成分，如不饱和脂肪酸及多种维生素，该蛋白质复合物不仅自身能够有效保持皮肤水分，防晒祛斑，以及抗菌消炎，起到养护及修复皮肤的作用，且该复合物为天然大分子，能包覆其他营养因子及成分，并将其有效成分通过缓释，作用于皮肤上，进一步地促进皮肤对有效成分的吸收效率。因此，“肤氨酸”具有如下功效： 1） 补充胶原蛋白：补充原皮肤真皮中流失的胶原蛋白。 2）保湿：因“肤氨酸”中的氨基酸（甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、天冬氨酸及苏氨酸等）与人体肌肤中的角质层天然保湿因子的氨基酸组成类似，因此“肤氨酸”能补充及保持肌肤水分，滋润皮肤。 3）抑菌消炎：“肤氨酸”中的丝胶蛋白与蛋白质结合，并以蛋白质复合物形式存在于细胞间隙，形成凝胶，将细胞粘合在一起，可维持正常的细胞代谢及组织持水，从而保护细胞免受病原菌的侵害，防止皮肤感染，因此“肤氨酸”具有优异的抗菌消炎功效。 4）防晒：“肤氨酸”含有丰富的酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸等，这些氨基酸均能有效吸收日光中的紫外线，可大幅度减弱紫外线对皮肤的损伤。另外肤氨酸中的乙胺酸能与紫外线进行光化反应，有效阻挡紫外线对人体的伤害。其中，微米级的丝素蛋白粉末可在皮肤上覆盖一层薄膜，起遮盖及消色作用，具有物理防晒效果,优异的抗晒效果。 5）促进皮肤再生：“肤氨酸”中的氨基酸组成与人体的皮肤和头发的角朊极为接近，再加上丝素蛋白本身对皮肤细胞的生长促进功能,使其愈创效果更显突出。 2.从技术制备方面，增益效果如下： 区别于一般市面上售卖的丝胶及丝素蛋白（其绝大部分为蛋白肽或低分子量蛋白），采用本发明方法所制备的丝胶及丝素蛋白分子量约为40,000-200,000道尔顿，分子量大，凝胶性能高，因此以该丝胶蛋白及丝素蛋白为基质的“肤氨酸”，其包覆的营养添加剂不易氧化而失效，有效成分的稳定性得到提高，并让其有效成分通过缓释作用于人体皮肤上，达到提高使用效率的效果。

具体实施方式

一种蛋白质复合物肤氨酸，其中：所述的蛋白质复合物由如下质量百分比的组分组成：

丝胶蛋白 30-68%； 丝素蛋白 20-58%； 营养添加剂5-12%；

所述的蛋白质复合物中丝胶蛋白的分子量为40000-200000道尔顿，粒径为0.1-10微米；所述的丝素蛋白的分子量为40000-200000道尔顿，粒径为0.1-10微米。

所述的营养添加剂为金花茶提取物、美藤果油提取物、维生素E、牛奶蛋白、丝胶蛋白一种或两种以上混合。

一种蛋白质复合物肤氨酸的制备方法，其中：所述的制备步骤如下：

1）提取丝胶蛋白：首先用纯净水清洗蚕茧3-4次以除杂质，之后将蚕茧浸没于纯净水中，蚕茧与纯净水浸液的浴比为1：20-50；然后以高温高压的方法使蚕茧中的丝胶蛋白析出并溶解于浸液中；在高温高压制备过程中，制备温度为160-300℃，压力为0.2-0.4Mpa，制备时间为120分钟；制备完成后，再将上述含有析出丝胶蛋白的浸液置于温度为零下4-10℃的冰室中冷冻，使溶解的凝胶析出，冷冻时间为48-60小时，冷冻析出完成后解冻即可取出丝胶蛋白，将取出的丝胶蛋白进行烘干及粉碎后备用；析出丝胶蛋白后的蚕茧变成脱胶蚕茧，将所述脱胶蚕茧烘干备用；

2）提取丝素蛋白：将步骤1）中得出的脱胶蚕茧中的纤维切断，所述的纤维切断长度为0.1-1cm，然后将切断后的纤维泡入浓度为10-12mol/L的浓盐酸中浸泡1-5小时，使纤维变性，硬化，洗涤至pH=4-6；洗涤后将纤维磨成丝素蛋白粉末，再进行物理细磨；所述物理细磨为湿式研磨，将丝素蛋白粉末与纯净水以1:15-20的体积比混合，使丝素蛋白粉末悬浮于纯净水溶液，再用5000-10000rpm转速研磨设备研磨，研磨1-2小时后，烘干提取丝素蛋白粉末备用；

3）肤氨酸制备：将上述步骤1）提取的丝胶蛋白及步骤2）提取的丝素蛋白按丝胶蛋白占总质量百分比为30-68%，丝素蛋白占总质量百分比为20-58%的比例溶于纯净水中，液料比为10:1制成溶液；再将溶液放入搅拌机中以500rpm的速度搅拌1小时后，在溶液中加入相当溶液5倍量的乙醇使丝胶蛋白及丝素蛋白混合物析出，将析出的混合物烘干，加入占总质量百分比为5-12%的营养添加剂，搅拌均匀，制备肤氨酸完成。

本发明——“肤氨酸”，是一种以丝胶蛋白与丝素蛋白以一定比例复合作为基质，以天然产物提取物（如美藤果油提取物、金花茶提取物、牛奶蛋白等）作为营养添加剂制备而成的护肤活性复合物。“肤氨酸”结合了丝胶蛋白及丝素蛋白中的甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸和酪氨酸（占其全部氨基酸的90%，其余为天门冬氨酸、谷氨酸、乙氨酸等），具有促进细胞新陈代谢、增强皮肤细胞活力的功效，加之其分子链上有许多极性亲水基团如-OH、-COOH、-NH2等亲水基团，从而使丝胶及丝素蛋白具有优异的保湿功效。营养添加剂中营养成分，如不饱和脂肪酸及多种维生素，该蛋白质组复合物不仅自身能够有效保持皮肤水分，防晒祛斑，以及抗菌消炎，起到养护及修复皮肤的作用，且该复合物为天然大分子，能包覆其他营养因子及成分，并将其有效成分通过缓释，作用于皮肤上，进一步地促进皮肤对有效成分的吸收效率。在防晒效果方面，丝胶及丝素蛋白中含有丰富的酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸等，这些氨基酸能够有效地吸收日光中的紫外线，可大幅度减弱紫外线对皮肤的损伤。而就物理防晒而言，微米级的丝素蛋白因其优良的延展性、消色及遮盖能力，将有希望全部或部分代替钛白粉及氧化锌粉体在防晒化妆品中的使用。现结合实施例对本发明所述具有皮肤养护及修复功能的蛋白质复合物——“肤氨酸”作进一步说明：

实施例1：

用纯净水清洗蚕茧3-4次以除杂质，之后将蚕茧浸没于纯净水中，蚕茧与纯净水浴比为1:45，在温度为200℃，压力为0.3Mpa的条件下提取丝胶蛋白，反应时间为150分钟，反应结束后进行过滤，之后将滤液置于温度零下50℃的冰室中冷冻，使溶解的丝胶蛋白凝胶析出，冷冻时间为30小时，解冻后取出，烘干及粉碎后可得到丝胶蛋白粉。

丝胶蛋白凝胶析出后的蚕茧为脱胶蚕茧，将脱胶蚕茧的纤维切碎成1cm长，之后用10mol/L的浓盐酸浸泡1.5小时使其变性，硬化，洗涤后磨成普通丝素蛋白粉末，洗涤至pH=6再进行物理细磨：丝素蛋白粉末与纯净水以1:15的体积比混合，使丝素蛋白粉末悬浮于溶液，用5000rpm转速的研磨机进行研磨，研磨时间为1.5小时，之后将溶液进行喷雾干燥，提取丝素蛋白粉。

将上述的丝胶蛋白及丝素蛋白分别按58%和34%的质量比例溶于纯净水中，总蛋白复合物含量与纯净水比为10:1，以500 rpm的速度搅拌1小时后，加入相对溶液5倍量的乙醇（色谱级）使丝胶蛋白及丝素蛋白混合物析出，烘干之后，依次加入8%的营养添加剂，搅拌均匀即可得到肤氨酸。

实施案例2：

用纯净水清洗蚕茧3-4次以除杂质，之后将蚕茧浸没于纯净水中，蚕茧与纯净水浴比为1:20，在温度为160℃，压力为0.4Mpa的条件下提取丝胶蛋白，反应时间为120分钟，反应结束后进行过滤，之后将滤液置于温度零下4℃的冰室中冷冻，使溶解的丝胶蛋白凝胶析出，冷冻时间为60小时，解冻后取出，烘干及粉碎后可得到丝胶蛋白粉。

丝胶蛋白凝胶析出后的蚕茧为脱胶蚕茧，将脱胶蚕茧的纤维切碎成0.1cm长，之后用12mol/L的浓盐酸浸泡1小时使其变性，硬化，洗涤后磨成普通丝素蛋白粉末，洗涤至pH=4再进行物理细磨：丝素蛋白粉末与纯净水以1:20的体积比混合，使丝素蛋白粉末悬浮于溶液，用10000rpm转速的研磨机进行研磨，研磨时间为2小时，之后将溶液进行喷雾干燥，提取丝素蛋白粉。

将上述的丝胶蛋白及丝素蛋白分别按30%和58%的质量比例溶于纯净水中，总蛋白复合物含量与纯净水比为10:1，以500 rpm的速度搅拌1小时后，加入相对溶液5倍量的乙醇（色谱级）使丝胶蛋白及丝素蛋白混合物析出，烘干之后，依次加入12%的营养添加剂，所述的营养添加剂为金花茶提取物、维生素E及牛奶蛋白混合制成，搅拌均匀即可得到肤氨酸。

实施例3：

用纯净水清洗蚕茧3-4次以除杂质，之后将蚕茧浸没于纯净水中，蚕茧与纯净水浴比为1:50，在温度为300℃，压力为0.2Mpa的条件下提取丝胶蛋白，反应时间为120分钟，反应结束后进行过滤，之后将滤液置于温度零下10℃的冰室中冷冻，使溶解的丝胶蛋白凝胶析出，冷冻时间为48小时，解冻后取出，烘干及粉碎后可得到丝胶蛋白粉。

丝胶蛋白凝胶析出后的蚕茧为脱胶蚕茧，将脱胶蚕茧的纤维切碎成0.5cm长，之后用10mol/L的浓盐酸浸泡5小时使其变性，硬化，洗涤后磨成普通丝素蛋白粉末，洗涤至pH=6再进行物理细磨：丝素蛋白粉末与纯净水以1:20的体积比混合，使丝素蛋白粉末悬浮于溶液，用5000rpm转速的研磨机进行研磨，研磨时间为1小时，之后将溶液进行喷雾干燥，提取丝素蛋白粉。

将上述的丝胶蛋白及丝素蛋白分别按68%和20%的质量比例溶于纯净水中，总蛋白复合物含量与纯净水比为10:1，以500 rpm的速度搅拌1小时后，加入相对溶液5倍量的乙醇（色谱级）使丝胶蛋白及丝素蛋白混合物析出，烘干之后，依次加入12%的营养添加剂，所述的营养添加剂为美藤果油提取物、维生素E及牛奶蛋白混合制成，搅拌均匀即可得到肤氨酸。

综上所述，本领域的普通技术人员阅读本发明文件后，根据本发明的技术方案和技术构思无需创造性脑力劳动而作出其他各种相应的变换方案，均属于本发明所保护的范围。

Claims (1)

1.一种蛋白质复合物肤氨酸的制备方法，其特征在于：所述的制备步骤如下：

1）提取丝胶蛋白：首先用纯净水清洗蚕茧3-4次以除杂质，之后将蚕茧浸没于纯净水中，蚕茧与纯净水浸液的浴比为1：20-50；然后以高温高压的方法使蚕茧中的丝胶蛋白析出并溶解于浸液中；在高温高压制备过程中，制备温度为160-300℃，压力为0.2-0.4Mpa，制备时间为120分钟；制备完成后，再将上述含有析出丝胶蛋白的浸液置于温度为零下4-零下10℃的冰室中冷冻，使溶解的凝胶析出，冷冻时间为48-60小时，冷冻析出完成后解冻即可取出丝胶蛋白，将取出的丝胶蛋白进行烘干及粉碎后备用；析出丝胶蛋白后的蚕茧变成脱胶蚕茧，将所述脱胶蚕茧烘干备用；

2）提取丝素蛋白：将步骤1）中得出的脱胶蚕茧中的纤维切断，所述的纤维切断长度为0.1-1cm，然后将切断后的纤维泡入浓度为10-12mol/L的浓盐酸中浸泡1-5小时，使纤维变性，硬化，洗涤至pH=4-6；洗涤后将纤维磨成丝素蛋白粉末，再进行物理细磨；所述物理细磨为湿式研磨，将丝素蛋白粉末与纯净水以1:15-20的体积比混合，使丝素蛋白粉末悬浮于纯净水溶液，再用5000-10000rpm转速研磨设备研磨，研磨1-2小时后，烘干提取丝素蛋白粉末备用；

3）肤氨酸制备：将上述步骤1）提取的丝胶蛋白及步骤2）提取的丝素蛋白按丝胶蛋白占总质量百分比为30-68%，丝素蛋白占总质量百分比为20-58%的比例溶于纯净水中，液料比为10:1制成溶液；再将溶液放入搅拌机中以500rpm的速度搅拌1小时后，在溶液中加入相当溶液5倍量的乙醇使丝胶蛋白及丝素蛋白混合物析出，将析出的混合物烘干，加入占总质量百分比为5-12%的营养添加剂，搅拌均匀，制备肤氨酸完成。