CN105158194A - 一种鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法 - Google Patents

Abstract

一种减肥中药是否添加麻黄碱或伪麻黄碱的鉴定方法，采用二维相关红外光谱方法来快速鉴定中药制剂或保健食品中是否添加违禁的麻黄碱或伪麻黄碱成分，包括以下步骤：溴化钾压片的制备；动态光谱的采集获得；获取特征峰；比对判断，对所得的待测样品和麻黄碱标品、伪麻黄碱标品的二维相关图谱进行比对判断，该比对判断是对二维相关功率谱、二维相关同步谱、二维相关异步谱依次对照特征峰和相关峰、交叉峰来确认待测样品中是否含有麻黄碱与/或伪麻黄碱。

Description

一种鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法

技术领域

本发明涉及一种快速鉴定减肥类中药是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，属于医药分析技术领域。

背景技术

近年来，一些中药和保健品厂家为了加快中药疗效，谋求高额利益，在减肥类中药和保健品中添加麻黄碱、伪麻黄碱或二者的混合物(本发明中，麻黄碱实指麻黄碱盐酸盐，即盐酸麻黄碱的习惯说法，伪麻黄碱亦如此，后面仍按照习惯说法法均指盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱)，虽然麻黄碱与伪麻黄碱能增加人体热量消耗，促进脂肪分解，在短期内对肥胖有一定的治疗效果，但是长期服用此类物质会使血压升高，增加循环系统紧张性，这将严重危害健康，诸如导致心脏病和中风，其危险性远远高于减肥的治疗效果。中国食品药品监督管理局已于2006年公布麻黄碱类为减肥类产品中禁止添加的物质。因此，鉴定减肥类中药中是否添加了麻黄碱与/或伪麻黄碱，是药监部门的一项重要工作。

目前，检测减肥类中药是否添加麻黄碱与伪麻黄碱的方法主要有HPLC-MS,GC-MS,CE等等,这些方法在较准确的达到检测目的的同时，需要昂贵的仪器，耗费较多时间，复杂的样品前处理过程，因此难以达到现场快速检测的需求。而光谱法因其简单、快速、成本低，在中药非法掺伪的快速检测中具有独特的优势。当减肥类中药中添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的量大于10％时，在红外光谱上可以检测到多数麻黄碱与/或伪麻黄碱的特征峰，即通过简单红外光谱对比法可以判断减肥类中药是否添加了麻黄碱与/或伪麻黄碱，但是当添加的浓度更低时(<5％)，大多数麻黄碱与/或伪麻黄碱的特征峰被中药基质的峰掩盖，甚至完全包埋，即使有一两个弱峰与麻黄碱或伪麻黄碱的特征峰峰位接近，也难以对减肥类中药是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱进行定性判别。如图1所示，图1A中位于底下的E_P是麻黄碱标准品红外光谱，其上面的三条谱线分别为添加0％，5％，10％麻黄碱的减肥类中药的红外光谱；图1B中位于底下的PS是伪麻黄碱标准品红外光谱，其上面的三条谱线分别为添加0％，5％，10％麻黄碱的减肥类中药的红外光谱，由图可见，在掺加较少量的麻黄碱与/或伪麻黄碱时(例如图1中的不大于5％的量)，中药中其他物质的峰会包裹住麻黄碱或伪麻黄碱的特征峰，从而使得简单的一维红外光谱不能准确的鉴定麻黄碱与/或伪麻黄碱的存在。

二维相关光谱是由IsaoNoda在1989年提出来的，在光谱测量的过程中，对研究体系施加一种特定的外部扰动，它会诱发系统成分状态，结构，或背景环境的变化，从而引起测量光谱的变化，这种由外部扰动诱发的光谱变化称作动态光谱。对获得的一系列动态光谱进行二维相关计算，即可得到二维相关光谱。二维相关红外光谱通过将原有的红外光谱信号扩展到第二维上来提高光谱的分辨率，从而检测到某些在一维谱图中无法得到的光谱信息，并能有效地分离重叠的吸收峰。二维相关光谱分为同步谱和异步谱，同步谱关于对角线对称，可能出现自相关峰和交叉峰两类峰。自相关峰出现在对角线上，是光谱强度变化的自相关函数，强度总为正值，其大小表征了在相关周期中光谱强度涨落的总程度。延同步谱对角线的切片谱称为功率谱。因此，只要光谱强度在外扰的作用下有显著的变化，功率谱相应的位置上就会出现自相关峰。交叉峰位于对角线之外，表征不同变量下光谱信号的相似性变化。两变量下如果出现交叉峰说明它们代表的基团之间有强烈的协同作用或相互作用。在外扰作用下，当两个变量下的信号强度同向变化，即同增或同减，则形成正交叉峰；反之形成负交叉峰。异步谱关于对角线反对称，无自相关峰，只可能出现交叉峰，并且异步交叉峰仅当两变量下光谱强度变化信号的傅里叶频率成分不同相位时才会出现，这种特性在判断多个吸收峰的同源性以及区分由不同组分或不同光谱来源形成的重叠峰时特别有用。

因此，如果要将二维相关红外光谱法用于减肥类中药，就有可能检测到隐藏在中药光谱中的麻黄碱与/或伪麻黄碱的特征峰，从而对减肥类中药是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱进行定性判别。

发明内容

本发明提供一种减肥中药是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的鉴定方法，采用二维相关红外光谱方法来快速鉴定中药制剂或保健食品中是否添加违禁的麻黄碱与/或伪麻黄碱成分，包括以下步骤：

步骤一，溴化钾压片的制备

将减肥类中药或保健品的待测样品同溴化钾混合压片，得到待测样品压片，

另将麻黄碱标品和伪麻黄碱标品分别同溴化钾混合压片，得到对应的麻黄碱标品压片和伪麻黄碱标品压片；

步骤二，动态光谱的采集获得

使用红外光谱仪，在不同的扰动温度下测定待测样品压片、麻黄碱标品压片、伪麻黄碱标品压片的动态红外光谱，对动态红外光谱进行预处理，得到预处理动态红外光谱，预处理包括选取麻黄碱或伪麻黄碱特征谱段、对特征谱段范围内光谱进行Sgolay法平滑，airPLS法基线校正、计算光谱对波数的二阶导数光谱；

步骤三，获取特征峰

对步骤二中得到的预处理动态红外光谱进行运算处理，绘制对应的待测样品和麻黄碱标品、伪麻黄碱标品的二维相关图谱，二维相关图谱包括二维相关同步谱、二维相关异步谱、二维相关功率谱，对得到的麻黄碱与伪麻黄碱二维相关功率谱进行分析，选取对应的自相关峰，将其作为特征峰；

步骤四，根据二维相关图谱对减肥类中药是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱进行判断

对步骤三中所得的所述待测样品和所述麻黄碱标品、所述伪麻黄碱标品的所述二维相关图谱进行比对判断，该比对判断是对所述二维相关功率谱对照所述特征峰来确认所述待测样品中是否含有麻黄碱与/或伪麻黄碱。

本发明提供的鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，其特征在于其中，步骤四中比对判断包括：是否掺有麻黄碱与/或伪麻黄碱判断步骤，将待测样品的二维相关功率谱与麻黄碱标品、伪麻黄碱标品的二维相关功率谱进行比对，判断其谱图中位于麻黄碱标品、伪麻黄碱标品的特征峰的出峰位置正负相差4个波数内是否观察到相关峰：结果否定的话，则判断待测样品中不含有麻黄碱和伪麻黄碱，结果肯定的话，则进一步判断。

本发明提供的鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，其特征在于其中：其中，进一步判断是进一步判断麻黄碱和伪麻黄碱的掺加情况，即在特征峰附近谱段内做二维相关同步谱和二维相关异步谱，判断其谱图中是否出现交叉峰：如果二维相关同步谱中的对应位置出现交叉峰而二维相关异步谱中的对应位置没有出现交叉峰，则判定待测样品中只含有麻黄碱或伪麻黄碱中的一种，否则，当二维相关同步谱中的对应位置出现交叉峰而二维相关异步谱中的对应位置也出现交叉峰时，则判定待测样品中含有混合的麻黄碱和伪麻黄碱。

本发明提供的鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，其特征在于：其中，步骤二中扰动温度是采用控温附件进行控温加热来获取的。

本发明提供的鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，还可以具有这样的特征：其中，步骤二中扰动温度的范围是25-70摄氏度，相邻两个扰动温度间的差值为3-5摄氏度。

本发明提供的鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，还可以具有这样的特征：其中，步骤二中扰动温度的个数为10。

本发明提供的鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，还可以具有这样的特征：其中，步骤一中待测样品同溴化钾混合压片时，待测样品同溴化钾的重量比为2～3：100。

本发明提供的鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，还可以具有这样的特征：其中，特征谱段为400-1800cm^-1。

本发明提供的鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，特征峰的出峰位置为：

麻黄碱：684,701,749,1042,1363,1372,1451,1494cm^-1；

伪麻黄碱：703,767,1037,1309,1336,1375,1428,1455,1492,1590cm^-1。

本发明提供的鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，还可以具有这样的特征：其中，特征峰附近谱段是特征峰出峰位置减去50cm^-1到特征峰出峰位置加上50cm^-1的范围内。

发明作用与效果

根据本发明的一种鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，对待测样品进行温度扰动，获得动态二维红外光谱，将所得的待测样品和麻黄碱标品、伪麻黄碱标品的二维相关图谱进行比对判断，将待检减肥类中药的一维光谱扩展到第二维上，提高了光谱的分辨率，使得结构更准确，降低了对仪器的性能要求和操作因素的干扰。

通过判断待测样品的二维相关谱图中是否含有与麻黄碱或伪麻黄碱标品的特征峰出峰位置相同的峰来判断是否有掺加违禁的药物：该比对判断是对二维相关功率谱、二维相关同步谱、二维相关异步谱依次对照特征峰和相关峰、交叉峰来确认待测样品中是否含有麻黄碱与/或伪麻黄碱。该红外二维相关光谱法与传统的HPLC,GC,LC-MS相比，不需要苛刻的实验条件和样品前处理工作，即可快速的鉴定出待检减肥类中药中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱。

由于红外光谱法具有极强的特征性，因此根据本发明的技术方案所得出的鉴定结果准确可靠，鉴定过程快捷方便，节省时间和金钱，特别适合于食药监部门的工作人员在监管现场使用。

附图说明

图1为添加不同含量的麻黄碱和伪麻黄碱的减肥类中药的红外光谱；

图2为本发明鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法的流程图；

图3为本发明方法中的麻黄碱标品一维动态红外光谱图；

图4为本发明方法中的麻黄碱标品一维动态红外光谱二阶导数光谱图；

图5为本发明方法中的麻黄碱标品的二维相关功率谱；

图6为本发明方法中的伪麻黄碱标品一维动态红外光谱图；

图7为本发明方法中的伪麻黄碱标品一维动态红外光谱二阶导数光谱图；

图8为本发明方法中的伪麻黄碱标品二维相关功率谱；

图9为本发明方法的减肥类中药待测药品1的一维红外光谱图(1D-IR)，二阶导数光谱图(SD-IR)和二维相关功率谱(SD-Autopower)；

图10为本发明方法的减肥类中药待测药品1的特征谱段二维相关同步谱(syn)与异步谱(assyn)；

图11为本发明方法的减肥类中药待测药品2的一维红外光谱图(1D-IR)，二阶导数光谱图(SD-IR)和二维相关功率谱(SD-Autopower)；

图12为本发明方法的减肥类中药待测药品2的特征谱段二维相关同步谱(syn)与异步谱(assyn)；

图13为本发明方法的减肥类中药待测药品3的一维红外光谱图(1D-IR)，二阶导数光谱图(SD-IR)和二维相关功率谱(SD-Autopower)。

具体实施方式

为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，以下实施例结合附图和实施例对本发明的鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法作具体阐述。

图2为本实施例的鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法的流程图

本实施例的方法包括以下步骤：

步骤S-1，溴化钾压片的制备

将减肥类中药或保健品的待测样品同溴化钾混合压片，得到待测样品压片。

另将麻黄碱标品和伪麻黄碱标品分别同溴化钾混合压片，得到对应的麻黄碱标品压片和伪麻黄碱标品压片。在本实施例中，其中待测样品同溴化钾的重量比为2～3：100，这样后续光谱采集效果好。

步骤S-2，动态光谱的采集获得

使用红外光谱仪，本实施例采用ALPHAFTIR光谱仪(Bruker,Germany),DLATGS检测器，采样参数为4cm^-1分辨率，测量范围4000-400cm^-1,扫描16次累加获谱；

在不同的扰动温度:温度从25摄氏度到70摄氏度，每升温5摄氏度，共有十个温度，采集待测样品压片、麻黄碱标品压片、伪麻黄碱标品压片的动态红外光谱；

对动态红外光谱进行预处理，得到预处理动态红外光谱，预处理包括选取麻黄碱与/或伪麻黄碱特征谱段、对特征谱段范围内光谱进行Sgolay法平滑，airPLS法基线矫正、计算光谱对波数的二阶导数光谱；

步骤S-3，获取特征峰

对步骤S-2中得到的预处理动态红外光谱进行运算处理，绘制对应的待测样品和麻黄碱标品、伪麻黄碱标品的二维相关图谱，二维相关图谱包括二维相关同步谱、二维相关异步谱、二维相关功率谱(以下也简称为同步谱，异步谱，功率谱)，对得到的二维相关图谱进行分析，选取对应的自相关峰，将其作为特征峰；

这里对步骤S-2，S-3中的相关过程做一个说明。

假设由温度外扰引起的变量t在T_min和T_max间变化时光谱强度为y(v，t)，变量v为红外波数。系统受温度扰动所诱发的动态光谱可定义为：

其中是系统的参考光谱，参考光谱的选择并不是唯一的，这里设置为平均光谱：

$\stackrel{\&OverBar;}{y}\left(v\right)=\frac{1}{T_{\max }-T_{\min }}{\&Integral;}_{T_{\min }}^{T_{\max }}y(v,t)dt$

二维相关光谱强度X(v₁，v₂)是指外扰变量t在T_min和T_max间变化时，对不同光学变量v₁和v₂下的光谱强度变化y(v，t)进行定量比较。为方便计算，将X(v₁，v₂)表示为复数形式：

X(v₁，v₂)＝Φ(v₁，v₂)+iΨ(v₁，v₂)

组成复数的相互垂直的两个部分(实部和虚部)即为同步和异步二维相关光谱。同步二维相关光谱强度Φ(v₁，v₂)表示随着t在T_min和T_max间变化，两个在不同光学变量v₁和v₂下测得的光谱强度的相似或一致性变化。反之，异步相关光谱强度Ψ(v₁，v₂)表示光谱强度的相异性变化。

广义二维相关光谱函数定义如下：

$\mathrm{\&Phi;}(v_1,v_2)+i\mathrm{\&Psi;}(v_1,v_2)=\frac{1}{\mathrm{\&pi;}(T_{\max }-T_{\min })}{\&Integral;}_0^{\mathrm{\&infin;}}{\tilde{Y}}_1\left(\mathrm{\&omega;}\right)\&CenterDot;{{\tilde{Y}}_2}^{*}\left(\mathrm{\&omega;}\right)d\mathrm{\&omega;}$

其中Y(ω)是光谱强度变化y(v,t)的傅里叶变换：

$\begin{array}{c}{\tilde{Y}}_1\left(\mathrm{\&omega;}\right)={\&Integral;}_{-\mathrm{\&infin;}}^{+\mathrm{\&infin;}}\tilde{y}(v_1,t)e^{-i\mathrm{\&omega;}t}dt\\ {{\tilde{Y}}_2}^{*}\left(\mathrm{\&omega;}\right)={\&Integral;}_{-\mathrm{\&infin;}}^{+\mathrm{\&infin;}}\tilde{y}(v_2,t)e^{+i\mathrm{\&omega;}t}dt\end{array}$

实际测量中的动态光谱数据一般为离散形式。在外扰t变化范围T_min～T_max内等间隔的选取m条动态光谱，第j条动态光谱可表示为：

${\tilde{y}}_j\left(v\right)=\tilde{y}(v,t_j)=y(v,t_j)-\stackrel{\&OverBar;}{y}\left(v\right),j=1,2,\mathrm{...},m$

其中为参考光谱，平均参考光谱可表示为离散形式的二维相关光谱强度可以表示为：

$\begin{array}{c}\mathrm{\&Phi;}(v_1,v_2)=\frac{1}{m-1}\underset{j=1}{\overset{m}{\&Sigma;}}{\tilde{y}}_j\left(v_1\right)\&CenterDot;{\tilde{y}}_j\left(v_2\right)\\ \mathrm{\&Psi;}(v_1,v_2)=\frac{1}{m-1}\underset{j=1}{\overset{m}{\&Sigma;}}{\tilde{y}}_j\left(v_1\right)\&CenterDot;{\tilde{z}}_j\left(v_2\right)\end{array}$

其中异步二维相关光强计算更为复杂，正交光谱可由动态光谱y(v)经过线性变换得到：

${\tilde{z}}_j\left(v_2\right)=\underset{k=1}{\overset{m}{\&Sigma;}}{N}_{jk}\&CenterDot;{\tilde{y}}_k\left(v_2\right)$

其中N_jk为Hilbert-Noda变换矩阵(j,k)位置的元素：

实际应用中常用矩阵来代表离散的数据集，式中的动态光谱可表示为如下列向量形式：

$\tilde{y}\left(v\right)=\left[\begin{array}{c}y(v,t_1)\\ y(v,t_2)\\ ...\\ y(v,t_m)\end{array}\right]$

应用式中动态光谱的向量形式可将二维相关光谱定义为如下内积形式：

$\begin{array}{c}\mathrm{\&Phi;}(v_1,v_2)=\frac{1}{m-1}\tilde{y}{\left(v_1\right)}^T\tilde{y}\left(v_2\right)\\ \mathrm{\&Psi;}(v_1,v_2)=\frac{1}{m-1}\tilde{y}{\left(v_1\right)}^{T}N\tilde{y}\left(v_2\right)\end{array}$

使用matlab软件，根据上述二维相关原理，编写二维相关程序，采用平均谱作为参考谱，设定合适的等高线参数。对温度扰动下测得的麻黄碱标品、伪麻黄碱标品和待测样品的动态光谱的二阶导数光谱进行二维相关分析，画二维相关等高线图，得到二维相关同步谱，二维相关异步谱。提取二维相关同步谱对角线方向的切片图即得二维相关功率谱；

步骤S-4，根据二维相关图谱对减肥类中药是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱进行判断

对步骤S-3中所得的待测样品和麻黄碱标品、伪麻黄碱标品的二维相关图谱进行判断，包括下面的两个小步骤：

S-4-1是否掺有麻黄碱与/或伪麻黄碱判断步骤，将待测样品的二维相关功率谱与麻黄碱标品、伪麻黄碱标品的二维相关功率谱进行比对，判断其谱图中位于麻黄碱标品、伪麻黄碱标品的特征峰的出峰位置正负相差4个波数内是否观察到自相关峰：结果否定的话，则判断待测样品中不含有麻黄碱和伪麻黄碱，结果肯定的话，则进入下一步骤S-4-2；

S-4-2掺加情况判断步骤，在特征峰附近谱段内做二维相关同步谱和二维相关异步谱，判断其谱图中是否出现交叉峰：如果二维相关同步谱中出现麻黄碱与/或伪麻黄碱特征峰之间的交叉峰而二维相关异步谱中的对应位置没有出现交叉峰，则判定待测样品中只含有麻黄碱与/或伪麻黄碱，否则，当二维相关同步谱中出现麻黄碱和伪麻黄碱特征峰之间的交叉峰而二维相关异步谱中的对应位置也出现交叉峰时，则判定待测样品中含有混合的麻黄碱和伪麻黄碱。

为了分析说明对不同掺加情况的分析鉴定，本实施例分别选取了三个待测样品：1号待测样品(只含有麻黄碱)2号待测样品(含有麻黄碱与伪麻黄碱混合物)3号待测样品(不含有麻黄碱与伪麻黄碱)同时使用麻黄碱与伪麻黄碱标品做为对照。下面就使用发明的方法对1，2，3号样品进行鉴定。

图3为本实施例中的麻黄碱标品一维动态红外光谱图；

图4为本实施例中的麻黄碱标品一维动态红外光谱二阶导数光谱图；

图5为本实施例中的麻黄碱标品的二维相关功率谱；

图6为本实施例中的伪麻黄碱标品一维动态红外光谱图；

图7为本实施例中的伪麻黄碱标品一维动态红外光谱二阶导数光谱图；

图8为本实施例中的伪麻黄碱标品二维相关功率谱

图9为本实施例中的减肥类中药待测药品1的一维红外光谱图(1D-IR)，二阶导数光谱图(SD-IR)和二维相关功率谱(SD-Autopower)；

图10为本实施例中的减肥类中药待测药品1的特征谱段二维相关同步谱与异步谱。

1号待测样品

(1)实验采用ALPHAFTIR光谱仪(Bruker,Germany),DLATGS检测器，4cm^-1分辨率，测量范围4000-400cm^-1,扫描16次累加获谱。

(2)盐酸麻黄碱标准品加入溴化钾，压片，制成试样，置于仪器样品槽内，温度从25摄氏度到70摄氏度，每升温5摄氏度，采集红外光谱，连续获取系列谱图—变温动态谱(即不同温度下的红外光谱，下同)，如图3所示。

(3)盐酸伪麻黄碱标准品加入溴化钾，压片，制成试样，置于仪器样品槽内，温度从25摄氏度到70摄氏度，每升温5摄氏度，采集红外光谱，连续获取系列谱图—变温动态谱，如图6所示。

(4)待检减肥类中药1号待测样品加入溴化钾，压片，制成试样，置于仪器样品槽内，温度从25摄氏度到70摄氏度，每升温5摄氏度，采集红外光谱，连续获取系列谱图—变温动态谱，如图9中1D-IR。

(5)分别对盐酸麻黄碱，盐酸伪麻黄碱和待检减肥类中药系列变温动态谱进行平滑，基线校正，二级导数处理，获得系列导数图谱，如图4和图7所示；

(6)利用matlab软件，运用根据二维相关原理编写的二维相关程序，对系列导数图谱进行二维相关分析，获得二维相关红外图谱：二维相关功率谱、二维相关同步谱和二维相关异步谱，如图5和图8所示。

(7)将待检中药功率谱与麻黄碱或伪麻黄碱的功率谱进行对比(见图3)，在待检样品二维相关功率谱中发现了麻黄碱的特征峰(747,1043,1320,1364,1415,1451cm^-1)，选择特征谱段670-770cm^-1,1315-1385cm^-1,1410-1460cm^-1作二维相关同步谱与二维相关异步谱，如图4所示，二维相关同步谱中出现三个交叉峰(684,749)cm^-1,(1320,1364)cm^-1,(1415,1451)cm^-1,而二维相关异步谱的相应位置没有交叉峰，说明这些峰随温度振动变化的一致性，进一步证明了这些峰来自于同一种物质，即麻黄碱。

图11为本实施例中的减肥类中药待测药品2的一维红外光谱图(1D-IR)，二阶导数光谱图(SD-IR)和二维相关功率谱(SD-Autopower)；

图12为本发明方法的减肥类中药待测药品2的特征谱段二维相关同步谱与异步谱；

2号样品

(1)-(6)步骤同1号样品相同，只是在(4)中使用2号样品制样。

(7)将待检样品二维相关功率谱与麻黄碱或伪麻黄碱的二维相关功率谱进行对比(图5)，如图11，12所示，在待检样品二维相关功率谱中发现了麻黄碱的特征峰747,1320,1364,1451,1495cm^-1与伪麻黄碱的特征峰767,1308,1335,1375,1455cm^-1，选择特征谱段680-780cm^-1,1300-1400cm^-1,1440-1500cm^-1作同步谱与异步谱，图6所示，二维相关同步谱中同样出现上述麻黄碱与伪麻黄碱的10个峰的信息，而二维相关异步谱中的四个交叉峰(749,767)cm^-1,(1335,1341)cm^-1,(1372,1375)cm^-1,(1455,1495)cm^-1，说明这些峰随温度振动变化的不一致性，进一步证明了这些峰来源于两种物质，即麻黄碱与伪麻黄碱。

图13为本实施例中的减肥类中药待测药品3的一维红外光谱图(1D-IR)，二阶导数光谱图(SD-IR)和二维相关功率谱(SD-Autopower)

3号样品

(1)-(6)步骤同1号样品相同，只是在(4)中使用3号待测样品制样。

(7)将待检样品二维相关功率谱与麻黄碱或伪麻黄碱的功率谱进行对比(图3)，如图13，在待检中药二维相关功率谱未发现麻黄碱与伪麻黄碱的特征峰因此判断待检中药3没有添加麻黄碱与伪麻黄碱

实施例的作用和有益效果

根据本实施例的一种鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，对待测样品进行温度扰动，获得动态二维红外光谱，将所得的待测样品和麻黄碱标品、伪麻黄碱标品的二维相关图谱进行比对判断，将待检减肥类中药的一维光谱扩展到第二维上，提高了光谱的分辨率，使得结构更准确，降低了对仪器的性能要求和操作因素的干扰；

通过判断待测样品的二维相关谱图中是否含有与麻黄碱与/或伪麻黄碱标品的特征峰出峰位置相同的峰来判断是否有掺加违禁的药物：该比对判断是对二维相关功率谱、二维相关同步谱、二维相关异步谱依次对照特征峰和相关峰、交叉峰来确认待测样品中是否含有麻黄碱与/或伪麻黄碱。该红外二维光谱法与传统的HPLC,GC,LC-MS相比，不需要苛刻的实验条件和样品前处理工作，即可快速的鉴定出待检减肥类中药中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱；

由于红外光谱法具有极强的特征性，因此根据本发明的技术方案所得出的鉴定结果准确可靠，鉴定过程快捷方便，节省时间和金钱，特别适合于食药监部门的工作人员在监管现场使用。

根据本实施例的一种鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，采用装有控温附件的红外光谱仪即可施行，设备和实验环境要求简单，成本低，操作方便，可以实现对减肥中药中是否添加麻黄碱和伪麻黄碱进行快速鉴定。

根据本实施例的一种鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，采用两个小步骤详细的判断比对二维同步谱和异步谱，使得可以进一步区分待测样品中添加麻黄碱的情况：是添加了一种麻黄碱或伪麻黄碱，还是两者都添加了。

根据本实施例的一种鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，使用控温附件对样品进行加热采样获取温度扰动下的红外图谱，方便快捷。

根据本实施例的一种鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，温度扰动范围为25摄氏度到70摄氏度，每升温5摄氏度，共有十个温度这样的选择，使得：

首先，即提供足够温度变化来得到温度扰动图谱，又保证在该范围内待测样品和标品不会因温度过高而变质；

其次，相隔5摄氏度既可以得到足够变化程度的图谱，又可以保证控温的准确性的情况下，降低了控温的难度，减少了对控温精度的要求，方便操作和配备仪器；

再次，10个温度，既满足后续计算的要求，同时又减少了处理操作的时间，节省了鉴定费用和时间。

Claims (10)

1.一种鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，采用二维红外光谱方法来快速鉴定中药制剂或保健食品中是否添加违禁的麻黄碱与/或伪麻黄碱成分，包括以下步骤：

步骤一，溴化钾压片的制备

将减肥类中药或保健品的待测样品同溴化钾混合压片，得到待测样品压片，

另将麻黄碱标品和伪麻黄碱标品分别同溴化钾混合压片，得到对应的麻黄碱标品压片和伪麻黄碱标品压片；

步骤二，动态光谱的采集获得

使用红外光谱仪，在不同的扰动温度下测定所述待测样品压片、所述麻黄碱标品压片、所述伪麻黄碱标品压片的动态红外光谱，对所述动态红外光谱并进行预处理，得到预处理动态红外光谱，所述预处理包括选取麻黄碱或伪麻黄碱特征谱段、对所述特征谱段范围内光谱进行Sgolay法平滑，airPLS法基线校正、计算光谱对波数的二阶导数光谱；

步骤三，获取特征峰

对步骤二中得到的所述预处理动态红外光谱进行运算处理，绘制对应的所述待测样品和所述麻黄碱标品、所述伪麻黄碱标品的二维相关图谱，所述二维相关图谱包括二维相关同步谱、二维相关异步谱、二维相关功率谱，对得到的所述二维相关图谱进行分析，选取对应的自相关峰，将其作为特征峰；

步骤四，根据二维相关图谱对减肥类中药是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱进行判断,

对步骤三中所得的所述待测样品和所述麻黄碱标品、所述伪麻黄碱标品的所述二维相关图谱进行比对判断，该比对判断是对所述二维相关功率谱对照所述特征峰来确认所述待测样品中是否含有麻黄碱与/或伪麻黄碱。

2.根据权利要求1所述的鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，其特征在于其中，步骤四中所述比对判断包括：

是否掺有麻黄碱与/或伪麻黄碱判断步骤，将所述待测样品的所述二维相关功率谱与所述麻黄碱标品、所述伪麻黄碱标品的所述二维相关功率谱进行比对，判断其谱图中位于所述麻黄碱标品、所述伪麻黄碱标品的所述特征峰的出峰位置正负相差4个波数内是否观察到相关峰：结果否定的话，则判断所述待测样品中不含有麻黄碱和伪麻黄碱，结果肯定的话，则进一步判断。

3.根据权利要求2所述的鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，其特征在：

其中，所述进一步判断是进一步判断麻黄碱和伪麻黄碱的掺加情况，即在所述特征峰附近谱段内做所述二维相关同步谱和所述二维相关异步谱，判断其谱图中是否出现交叉峰：如果所述二维相关同步谱中的对应位置出现交叉峰而所述二维相关异步谱中的对应位置没有出现所述交叉峰，则判定所述待测样品中只含有麻黄碱与/或伪麻黄碱中的一种，否则，当所述二维相关同步谱中的对应位置出现所述交叉峰而所述二维相关异步谱中的对应位置也出现所述交叉峰时，则判定所述待测样品中含有混合的麻黄碱和伪麻黄碱。

4.根据权利要求1所述的鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，其特征在于：

其中，步骤二中所述扰动温度是采用控温附件进行控温加热来获取的。

5.根据权利要求1所述的鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，其特征在于：

其中，步骤二中所述扰动温度的范围是25-70摄氏度，相邻两个所述扰动温度间的差值为3-5摄氏度。

6.根据权利要求1所述的鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，其特征在于：

其中，步骤二中所述扰动温度的个数为10。

7.根据权利要求1所述的鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，其特征在于：

其中，步骤一中待测样品同溴化钾混合压片时，所述待测样品同溴化钾的重量比为2～3：100。

8.根据权利要求1所述的鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，其特征在于：

其中，所述特征谱段为400-1800cm^-1。

9.根据权利要求1所述的鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，其特征在于，所述特征峰的出峰位置为：

麻黄碱：684,701,749,1042,1363,1372,1451,1494cm^-1；

伪麻黄碱：703,767,1037,1309,1336,1375,1428,1455,1492,1590cm^-1。

10.根据权利要求1所述的鉴定减肥类中药或保健品中是否添加麻黄碱与/或伪麻黄碱的方法，其特征在于：

其中，所述特征峰附近谱段是所述特征峰出峰位置减去50cm^-1到所述特征峰出峰位置加上50cm^-1的范围内。