CN105148293B - 一种碘‑131纤维蛋白及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种碘‑131纤维蛋白原及其制备方法，以及该碘‑131纤维蛋白原作为制备实体肿瘤定点放疗药物的应用，其中所述实体肿瘤定点放疗药物为手术切除肿瘤后用于涂布创面以清除残留的癌组织的药物，和/或通过介入手段从体外注入瘤体进行放疗的药物。本发明的碘‑131纤维蛋白原制备方法简单，标记率高，对实体肿瘤进行定点、持续性放射治疗，具有更好的治疗效果，而且使用简单，费用更低。

Description

一种碘-131纤维蛋白及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及一种碘-131纤维蛋白及其制备方法与应用。

背景技术

目前临床上常用的定点放疗技术是碘-125粒子植入术。碘-125粒子植入治疗是在CT和超声引导下，将发出低能量伽马射线的碘-125粒子直接植入肿瘤组织内，对肿瘤组织进行持续性的照射。碘-125粒子是用钛管封闭一定量的碘-125，在术中或通过介入手段在瘤体内植入碘-125粒子，并使粒子永久留在植入处，利用碘-125的伽马(γ)射线对周围瘤体进行长时间放疗。与常规的放射治疗相比，碘-125粒子植入治疗具有放射剂量小、作用时间更长、治疗定位更准确等优势。但碘-125粒子植入治疗同样也还存在一些不足，如治疗成本高，并且由于碘-125粒子为永久植入，碘-125的辐射穿透力较强，植入处周围正常组织也会受到长期照射，虽然剂量较低，但辐射危害与辐射剂量遵循线性无域的规律，长期的照射是应该尽量避免的。

与碘-125相比，碘-131衰变产生的电离辐射为高能贝塔(β)及伽马(γ)射线，其辐射效应要大大强于碘-125的低能γ射线，因此具有更好及更快的治疗效果。目前碘-131主要用于甲状腺亢进及甲癌的治疗，但对于实体肿瘤的定点放疗尚未见有报道。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种碘-131纤维蛋白原。

本发明的目的之二是提供碘-131纤维蛋白原的制备方法，通过亲电取代反应，将碘-131结合到纤维蛋白原上。

本发明的目的之三是提供碘-131纤维蛋白原用于制备实体肿瘤定点放疗药物的应用。所述用于实体肿瘤定点放疗的药物可以是手术切除肿瘤后涂敷于创面的药物，和/或通过介入手段从体外注入瘤体的药物。

为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：

一种碘-131纤维蛋白原，是在纤维蛋白原分子的络氨酸或组氨酸残基上通过亲电取代反应引入碘-131。

碘-131纤维蛋白原的制备方法，步骤如下：

以Iodogen为氧化剂，制备Iodogen涂管，向涂管中加入浓度为5-10mg/ml的纤维蛋白原水溶液及所需放射量的碘-131(Na¹³¹I水溶液)，室温反应一段时间如12-17min，取样，测定标记率，即得。

所述Na¹³¹I水溶液的浓度约为100mci/ml(市售商品的浓度)，或按需稀释到所需浓度。

所述纤维蛋白水溶液浓度在一定范围如5-10mg/ml，纤维蛋白水溶液的浓度过低会影响标记速率，过高则纤维蛋白原易自聚。本申请所采用的纤维蛋白水溶液的浓度是经过多次试验筛选得到的，采用该浓度的纤维蛋白水溶液，标记速率快，而且不容易发生自聚现象。

纤维蛋白原溶液和碘-131溶液为相同溶剂，加样时对体积比无特定要求；

在该标记反应中，相对于碘-131，纤维蛋白原和Iodogen都是过量的。所以可按需加入碘-131。

优选的，室温反应的时间为15min；反应的时间过短会影响标记率，反应的时间过长则导致纤维蛋白原失活。

标记率的测定方法为纸层析法，展开剂为0.1N HCl溶液，经展开剂展开后，标记的蛋白原留在原点，游离的碘-131在前沿。不同的展开剂会影响色谱分离的效果，直接影响到标记率的测定结果。本发明尝试了多种展开剂的组合，大多难以将标记蛋白和游离的碘分开，分离效果不理想，而采用0.1N HCl溶液作为展开剂，能够较好的将标记蛋白和游离的碘分离开来。

制备的碘-131纤维蛋白原需尽快使用，以避免标记物的活性降低和自发凝聚。

Iodogen涂管的制备方法为现有技术常规的方法，如将Iodogen溶于二氯甲烷溶液，配制成浓度为1mg/ml的二氯甲烷溶液，然后将溶液定量的加入到玻璃或塑料试管中，用氮气将二氯甲烷吹干，即制得Iodogen涂管。制备好的Iodogen涂管于4℃冰箱中保存。

由于游离的碘-131在服用卢戈氏液的生物体内基本不被吸收，所以，本发明制备的碘-131纤维蛋白原标记液可直接用于服用卢戈氏液后的病人而不用纯化，未标记的游离碘会很快排除体外，不会对机体产生明显的副作用。

本发明的碘-131纤维蛋白原可以用于制备手术切除肿瘤后用于创面涂敷以清除残留癌组织的药物；还可以用于制备通过介入手段从体外注入瘤体进行放疗的药物。

上述药物即为碘-131纤维蛋白胶，是由碘-131纤维蛋白原与辅助试剂凝血酶、抑肽酶及钙离子混合，并在目标处形成的胶状聚合物。

碘-131纤维蛋白胶的具体成胶条件可参照市售生物蛋白胶的要求。实际使用时可将所需量的标记的碘-131纤维蛋白原掺入生物蛋白胶试剂盒的纤维蛋白原溶液，按试剂盒的使用要求操作即可。

碘-131纤维蛋白胶的作用原理：

碘-131纤维蛋白原与辅助试剂凝血酶、抑肽酶及钙离子混合并在目标处形成胶状聚合物。纤维蛋白聚合物具有良好的粘合性及生物兼容性，在临床上已用于止血及封闭微小腔体。由于纤维蛋白聚合物在体内降解缓慢，在施用区有几周的留滞时间。碘-131可随纤维蛋白聚合物留滞在目标区，对目标区实施持续的放疗，最终会完全降解而排出体外。

本发明的有益效果：

(1)本发明的碘-131纤维蛋白原制备方法简单，标记率高，能够对实体肿瘤进行定点、持续性放射治疗，具有更好更快的治疗效果，而且使用简单，费用更低。

(2)本发明标记后的碘-131纤维蛋白原标记液可直接使用，而无需进一步的纯化，未标记的游离碘会很快排除体外，不会对机体产生明显的副作用。

(3)本发明的碘-131纤维蛋白原主要以碘-131纤维蛋白胶的形式发挥作用。使碘-131纤维蛋白原在目标区形成纤维蛋白胶，碘-131即可随纤维蛋白胶留滞在目标区，对目标区实施持续的放疗。

具体实施方式

下面通过具体实例对本发明进行进一步的阐述，应该说明的是，下述说明仅是为了解释本发明，并不对其内容进行限定。

实施例1：碘-131纤维蛋白原的制备

以50ug Iodogen制备涂管。在涂管中加入100ul纤维蛋白原水溶液(5mg/ml)，再加入10ul Na¹³¹I水溶液(8.1mci/ml)，室温反应15分钟。取样，以纸层析法测定标记率，所用滤纸为新华1号滤纸，展开剂为0.1N HCl溶液；标记的蛋白原在原点，游离的碘-131在前沿，经计算得标记率为89.8％。

实施例2：碘-131在施用处的留滞效果

取上述标记夜50ul，加入501ul纤维蛋白原水溶液(20mg/ml)，再加入5ul凝血酶水溶液(1000U/ml),混匀后立即对小鼠大腿肌肉处进行注射，实际注入约20uci。72小时后处死小鼠，利用伽马计数仪测定碘-131在各组织的分布。

表1肌肉组织注射碘-131纤维蛋白原72h后的组织分布

血	肌	心	肺	肝	肾	颈部组织	注射处
								4	2	2	9	3	6	5	1700

注：单位为cpm/mg；颈部组织含甲状腺。

由表1可以看出，施用纤维蛋白原标记溶液后，游离及纤维蛋白胶降解后产生的碘-131会迅速排出体外，所以体内的碘-131都集中在施用处,对施用处进行定点、持续性放射治疗。

Claims (6)

1.一种碘-131纤维蛋白胶，其特征在于，是由碘-131纤维蛋白原与凝血酶、抑肽酶及钙离子混合，并在目标处形成的胶状聚合物；其中，所述碘-131纤维蛋白原是在纤维蛋白原分子的酪氨酸或组氨酸残基上通过亲电取代反应引入碘-131，它是通过以下方法制备得到的：

以Iodogen为氧化剂，制备Iodogen涂管，向Iodogen涂管中加入浓度为5-10mg/ml的纤维蛋白原水溶液及碘-131，室温反应12-17min，取样，测定标记率，即得。

2.如权利要求1所述的碘-131纤维蛋白胶，其特征在于，碘-131以Na¹³¹I水溶液的形式加入。

3. 如权利要求1所述的碘-131纤维蛋白胶，其特征在于，室温反应的时间为15 min。

4. 如权利要求1所述的碘-131纤维蛋白胶，其特征在于，标记率的测定方法为纸层析法，展开剂为0.1N HCl溶液。

5.权利要求1~4中任一项所述的碘-131纤维蛋白胶在制备实体肿瘤定点放疗药物的应用。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述实体肿瘤定点放疗药物为手术切除肿瘤后涂敷于创面上的药物，和/或通过介入手段从体外注入瘤体进行放疗的药物。