CN105147769A - 一种迷迭香提取物在改善睡眠的药物或保健品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种迷迭香提取物在改善睡眠的药物或保健品中的应用,所述迷迭香提取物的活性成分由总三萜提取物和总酚酸提取物组成;所述的总三萜提取物和总酚酸提取物之间的重量比为80∶20~20∶80。研究结果表明,本发明能有效的促进睡眠,对失眠有较好的治疗作用。
Description
技术领域
本发明属于迷迭香提取物的用途领域,具体公开了一种迷迭香提取物在改善睡眠的药物或保健品中的应用。
背景技术
迷迭香(学名:Rosmarinusofficinalis)是一种原产于地中海地区的唇形科植物,野生或种植于白垩土壤中。茎、叶和花都可提取芳香油。迷迭香叶带有茶香,味辛辣、微苦,常被使用在烹饪上,也可用来泡花草茶喝。常绿灌木,古代认为迷迭香能增强记忆,目前公认的最具备有抗氧化作用的植物,迷迭香中的抗氧化成分主要为鼠尾草酸、鼠尾草酚、迷迭香酚、熊果酸、迷迭香酸等成分。
现有技术中关于迷迭香提取物的制备方法有很多种,得出的不同提取物也有不同的报道,迷迭香广泛用于食物的香料,饮料和化妆品中。在民间,它作为肾疝气和痛经,中止痉挛,调节呼吸失调和刺激毛发生长的药物。近期研究表明,迷迭香提取物和它的多酚化合物的抗氧化和抗菌作用,可以缓解和平滑气管肌和肠肌,并且有促进胆汁分泌、护肝和抗肿瘤的作用。迷迭香提取物表现了高度的自由基清除活性,总重要的成分是咖啡酸和其他衍生物如迷迭香酸。这些化合物有良好的抗氧化的作用。可以肯定的是,迷迭香和其化合物,特别是咖啡酸衍生物例如迷迭香酸在治疗和预防支气管哮喘、痉挛、胃溃疡、炎症、肝中毒、动脉硬化、心肌局部缺血症、白内障、癌症和精子动力弱有一定的治疗潜力。综上所述,迷迭香及其提取物具有良好的抗氧化,抑菌作用,在药物中的应用前景非常宽广,是一种可贵的植物药资源。
失眠,是指无法入睡或无法保持睡眠状态,导致睡眠不足,又称入睡和维持睡眠障碍(DIMS),为各种原因引起入睡困难、睡眠深度或频度过短、早醒及睡眠时间不足或质量差等,是最常见的睡眠障碍。常见导致失眠的原因主要有环境原因、个体因素、躯体原因、精神因素、情绪因素等。而根据传统中医理论,失眠的原因主要为脏腑机能紊乱,尤其是心的温阳功能与肾的滋阴功能不能协调、气血亏虚、阴阳失调等。在国外的大多数流行病学调查结果显示,每年大约有33%的人出现过睡眠障碍,有17%的人为严重失眠,失眠严重影响人们的生活、工作及身心健康。因此,开发有效、安全的抗失眠药物,已成为一项迫切的医疗和社会问题。
现在的治疗失眠的医学手段包括:心理催眠疗法、心理仪器疗法、物理治疗和中医的药(热)熨疗法、食物疗法及药物治疗,但在疗效和治疗质量上不尽如人意,所以现在寻找无副作用的、治疗方法简便、有效的药物已成为一个趋势。
发明内容
针对现有技术的不足,本申请旨在提供一种迷迭香提取物的新用途,该迷迭香提取物可以用于改善睡眠或缓解失眠的药物或保健品中,研究结果表明,本发明能有效的促进睡眠,对失眠有较好的治疗作用。
为解决上述技术问题,本发明所采用的技术方案是:
一种迷迭香提取物在改善睡眠的药物或保健品中的应用,所述迷迭香提取物的活性成分由总三萜提取物和总酚酸提取物组成;所述的总三萜提取物和总酚酸提取物之间的重量比为80∶20~20∶80;所述总三萜提取物中熊果酸含量为20.0-80.0wt%,总三萜化合物含量为50.0-98.0wt%;所述总酚酸提取物中迷迭香酸含量为10.0-50.0wt%,总酚酸化合物含量为50.0-98.0wt%。
述迷迭香提取物优选由以下方法制备得到:
(1)取迷迭香叶,用40%~95%乙醇提取,得提取液;将所述提取液过滤,滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.0-1.10,得浓缩液;
(2)离心所述浓缩液,得到沉淀A与离心液B;
(3)将所述离心液B调节pH至3-4,上样至吸附树脂柱,水洗,弱碱性溶剂洗脱,得到总酚酸提取物;
(4)将所述沉淀A用60%-80%乙醇加热搅拌分散,冷却,离心得离心液和沉淀物,取沉淀物再分散于60%-80%的乙醇中,加活性炭加热回流,趁热过滤,滤液回收乙醇后离心得到总三萜提取物;
(5)将总三萜提取物与总酚酸提取物按重量比为80∶20~20∶80的比例混合。
所述的总三萜提取物和总酚酸提取物之间的重量比优选为80∶20~50∶50,更优选为70∶30。
优选的,上述所得总三萜提取物中含熊果酸为40-80wt%,更优选的为50%-60wt%;上述所得总酚酸提取物中含迷迭香酸为15-40wt%;更优选的为20-30wt%。
优选的,所述吸附树脂柱为AB-8或D101型大孔树脂,更优选的为D101大孔吸附树脂。
优选的,所述弱碱性溶剂为氨水或者碳酸钠溶液,更优选的为氨水。
优选的,上述氨水浓度为0.1-2.0wt%,更优选的为0.25-1.0wt%,最优选的为0.5wt%。
优选的,上述乙醇提取用乙醇为70-95%,更优选的,上述乙醇提取用乙醇为80-95%的乙醇;最优选为90%。
优选的,上述乙醇提取为回流提取。
优选的,离心液B调节pH至3.2。
优选的,上述沉淀A分散用乙醇浓度为75%。
所述迷迭香提取物与常规药物一起用于改善睡眠的药物或保健品中,其中迷迭香提取物人体每日推荐剂量为:100-200mg/6Okg。
本发明制备的迷迭香提取物对戊巴比妥钠诱导小鼠的睡眠时间进行延长,并没有显著性差异;将小鼠的睡眠潜伏期时间减短有显著性差异;将戊巴比妥钠增加诱导小鼠的睡眠发生率有显著差异;且没有直接睡眠作用。结果表明,本发明能有效的促进睡眠,对失眠有较好的治疗作用。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的说明。
实施例1
优选迷迭香提取物改善睡眠功能动物试验
1材料和方法
1.1样品
迷迭香提取物的制备:
(1)取迷迭香叶,用90%乙醇提取,得提取液;将所述提取液过滤,滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.10,得浓缩液;
(2)离心所述浓缩液,得到沉淀A与离心液B;
(3)将所述离心液B调节pH至3.2,上样至吸附树脂柱,水洗,弱碱性溶剂洗脱,得到总酚酸提取物;
(4)将所述沉淀A用75%乙醇加热搅拌分散,冷却,离心得离心液和沉淀物,取沉淀物再分散于75%的乙醇中,加活性炭加热回流,趁热过滤,滤液回收乙醇后离心得到总三萜提取物;
(5)将总三萜提取物与总酚酸提取物按重量比为0∶100~100∶0的比例混合,得到不同的迷迭香提取物(见表8)。其中所述总三萜提取物中含三萜类化合物75%-85%,含熊果酸45%-60%;所述总酚酸提取物中含酚酸类化合物50%-60%,迷迭香酸20-30%。
以上述迷迭香提取物作为实验对象。人体每日推荐量为100-200mg/6Okg,以蒸馏水作溶剂配制受试物。
1.2试验动物
ICR小鼠120只,SPF级,雌雄各半,体重18~22g,购于湖南斯莱克景达实验动物有限公司,实验动物生产许可证号:SCXK(湘)2011-0003;在湖南省药物安全评价研究中心屏障环境饲养,实验动物使用许可证号:SYXK(湘)2010-0008。温度20~25℃,相对湿度为40%~70%。
1.3确定剂量
直接睡眠实验、延长戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验和巴比妥钠睡眠潜伏期实验,均设200、400及600mg/kg三个剂量组。
首先配制受试物溶液,即分别量取2.92g、5.83g、8.75g受试物,依次加蒸馏水至250ml混匀即可,冰箱保存,用完再配。每天给实验对象按20ml/kg.BW经口灌胃一次,连续31天。
1.4主要仪器及试剂
实验使用玻璃槽、石英钟。戊巴比妥钠,批号:P3572;巴比妥钠,批号:F20120311。
1.5试验方法
1.5.1直接睡眠实验
分别给予各组实验对象以不同剂量的受试物,给予对照组体积一样的蒸馏水以后,评判的指标为小鼠翻正反射消失实验,以此来观察其是否睡眠。
1.5.2用延长戊巴比妥钠对小鼠睡眠时间进行诱导的实验在末次给予受试物与溶剂对照在各组动物中,十五分钟,以lOml/kg注射52mg/kg(经预试所得)的戊巴比妥钠,在腹腔进行注射,观察的指标以小鼠翻正反射消失为依据,以此检测受试物是否对延长戊巴比妥钠睡眠时间起到作用。
1.5.3戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验
末次给予受试物及溶剂对照给予各组动物中,之后的十五分钟,以10ml/kg注射最大阈下催眠剂量41.5mg/kg(经预试所得)的戊巴比妥钠,在腹腔注射,之后记下三十分钟内小鼠翻正反射消失达一分钟以上的入睡数。
I.5.4巴比妥钠睡眠潜伏期实验
末次给予受试物和溶剂对照在各组动物中,之后的十五分钟,以10ml/kg.BW注射400mg/kg(经预试所得)的巴比妥钠,在腹腔进行注射,以小鼠的翻正反射消失作为观测指标,以此来检查巴比妥钠睡眠潜伏期是否受受试物的作用。
2结果
2.1上述迷迭香提取物作用于小鼠体重从表1~3可见,各组动物的初始体重经过方差齐性检验,方差齐(P>0.05),并且方差分析结果(P>O.05),由此能够说明实验对象组的初始体重均衡。试验期间各组动物体重发生增长且各剂量组小鼠的中期体重、结束体重和阴性对照组做比较差异无显著性的意义(P>0.05)。
表1迷迭香提取物对延长戊巴比妥钠钠诱导小鼠睡眠时间试验小鼠体重的影响
表2迷迭香提取物对戊巴比妥钠阈下剂量催眠试验小鼠体重的影响
表3迷迭香提取物对睡眠潜伏期试验小鼠体重的影响
2.2迷迭香提取物直接睡眠实验
结果见表4,三个剂量组实验对象保持连续31天经口灌胃不同剂量的受试物后,均没有出现直接睡眠。
表4迷迭香提取物对小鼠直接睡眠时间的影响
2.3迷迭香提取物延长戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间试验
结果见表5,三组实验对象的睡眠时间与阴性对照组比较,各剂量组延长睡眠时间差异无显著性的意义(P>0.05)。
表5迷迭香提取物对戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠时间的影响
2.4迷迭香戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验
结果见表6,三个剂量组进行实验的对象的睡眠发生率与其阴性对照组做比较,其中中剂量组、高剂量组的戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠发生率增加显著(P<0.05),而低剂量组则不显著(P>0.05)。
表6迷迭香提取物对阈下剂量戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠发生率的影响
2.5迷迭香提取物巴比妥钠睡眠潜伏期实验
结果见表7,三个剂量组的实验对象的睡眠潜伏期与阴性对照组比较,其中中剂量组、高剂量组缩短潜伏期时间都有显著性差异(P<0.05),而低剂量组则没有显著性差异(P>0.05)。
表7迷迭香提取物对巴比妥钠诱导小鼠的睡眠潜伏期的影响
3小结
迷迭香提取物连续30天经口灌胃给予实验对象后,可见动物生长良好,体重持续增长。对戊巴比妥钠诱导小鼠的睡眠时间进行延长,并没有显著性差异;将小鼠的睡眠潜伏期时间减短有显著性差异;将戊巴比妥钠增加诱导小鼠的睡眠发生率有显著差异;且没有直接睡眠作用。由此可判定,本发明所述迷迭香提取物对动物具有改善睡眠功能。
实施例2
优选迷迭香提取物对戊巴比妥钠阈下剂量动物催眠试验
1材料和方法
1.1样品
迷迭香提取物,其总三萜提取物部分含熊果酸50%,总酚酸提取物含迷迭香酸20%,分别按表8中进行配比,剂量400mg/kg,以蒸馏水作溶剂配制受试物。
1.2其他试剂、动物以及实验方法同上
结果见表8,不同配比三萜提取物和酚酸提取物制备的迷迭香提取物采用400mg/kg进行延长戊巴比妥钠阈下剂量的睡眠试验,其中以80:20~50:50效果显著(P<0.01),并以70:30的配比效果最佳。
表8不同配比迷迭香提取物对阈下剂量戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠发生率的影响3
实施例3
优选迷迭香提取物缓解人体失眠试食
采用本发明所述迷迭香提取物,所含总三萜提取物重量为60%,其中含三萜类化合物85%,熊果酸50%,总酚酸提取物重量为40%,其中含酚酸类化合物67%,迷迭香酸20%。填充胶囊,含提取物100mg/粒,共用于22例有失眠症状的人服用.
服用方法:所有人首次服用为一次1粒,每天1次,服用3天后如未感觉有明显改善则加服1粒,该试食情况见表9。
表9人体试用后改善失眠情况表
人体试食情况说明,本发明所述迷迭香提取物用于改善人失眠症状的效果明显,人体每日服用100-200mg/6Okg可达到较好的改善睡眠的疗效。
Claims (8)
1.一种迷迭香提取物在改善睡眠的药物或保健品中的应用,所述迷迭香提取物的活性成分由总三萜提取物和总酚酸提取物组成;所述的总三萜提取物和总酚酸提取物之间的重量比为80∶20~20∶80;所述总三萜提取物中熊果酸含量为20.0-80.0wt%,总三萜化合物含量为50.0-98.0wt%;所述总酚酸提取物中迷迭香酸含量为10.0-50.0wt%,总酚酸化合物含量为50.0-98.0wt%。
2.根据权利要求1所述应用,其特征是,所述迷迭香提取物的制备方法为:
(1)取迷迭香叶,用40%~95%乙醇提取,得提取液;将所述提取液过滤,滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.0-1.10,得浓缩液;
(2)离心所述浓缩液,得到沉淀A与离心液B;
(3)将所述离心液B调节pH至3-4,上样至吸附树脂柱,水洗,弱碱性溶剂洗脱,得到总酚酸提取物;
(4)将所述沉淀A用60%-80%乙醇加热搅拌分散,冷却,离心得离心液和沉淀物,取沉淀物再分散于60%-80%的乙醇中,加活性炭加热回流,趁热过滤,滤液回收乙醇后离心得到总三萜提取物;
(5)将总三萜提取物与总酚酸提取物按重量比为80∶20~20∶80的比例混合。
3.根据权利要求1或2所述应用,其特征是,所述的总三萜提取物和总酚酸提取物之间的重量比为80∶20~50∶50。
4.根据权利要求1或2所述应用,其特征是,所述的总三萜提取物和总酚酸提取物之间的重量比为70∶30。
5.根据权利要1或2所述应用,其特征是,所述总三萜提取物中熊果酸含量为40.0-80.0wt%;所述总酚酸提取物中迷迭香酸含量为10.0-40.0wt%。
6.根据权利要求2所述应用,其特征是,所述吸附树脂柱为AB-8或D101型大孔树脂。
7.根据权利要求2所述应用,其特征是,所述弱碱性溶剂为氨水或者碳酸钠溶液。
8.根据权利要求1或2所述应用,其特征是,所述迷迭香提取物与常规药物一起用于改善睡眠的药物或保健品中,其中迷迭香提取物人体每日推荐剂量为:100-200mg/6Okg。
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