CN105112426B

CN105112426B - 野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39的应用

Info

Publication number: CN105112426B
Application number: CN201510522216.9A
Authority: CN
Inventors: 王西平; 涂明星
Original assignee: Northwest A&F University
Current assignee: Northwest A&F University
Priority date: 2015-08-24
Filing date: 2015-08-24
Publication date: 2018-05-22
Anticipated expiration: 2035-08-24
Also published as: CN105112426A

Abstract

提供一种野生毛葡萄商‑24抗逆基因VqbZIP39及其应用，首次构建了pCAMBIA2300‑35S‑VqbZIP39过量表达载体，并通过花絮浸染法将其导入模式植物拟南芥中，研究了野生毛葡萄商‑24抗逆基因VqbZIP39过量表达的转基因株系和野生对照在渗透胁迫处理下的生长情况以及分析了胁迫相关的生理指标，并且研究了转基因株系和野生对照在长期干旱和盐胁迫处理下的生长状态，下游胁迫相关基因的表达量。实验结果表明野生毛葡萄商‑24抗逆基因VqbZIP39在拟南芥中的过量表达提高了植株的抗盐胁迫和干旱胁迫的能力。

Description

野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39的应用

技术领域

本发明属植物抗逆基因鉴定及基因工程技术领域，具体涉及一种野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39及其应用。

背景技术

碱性亮氨酸拉链bZIP转录因子是真核生物转录因子中分布最广泛、最保守的一类蛋白，在人、动物、植物、微生物和昆虫中均有发现。目前bZIP转录因子已经在多种植物上相继被发现，例如，拟南芥基因组上有75个，水稻基因组中有89或92个，大豆中发现47个，高粱中发现92个，玉米中发现125个，葡萄基因组中发现47或55个等。根据它们的结构域的相似性和保守性，可以分为10个亚家族，即A,B,C,D,E,F,G,H,I,S；或者13个亚家族，即A,B,C,D,E,F,G,H,I,J,K,L,S等。植物bZIP类转录因子的结构特点是：一是含有与特异DNA序列相结合的由约20个氨基酸组成的碱性结构域，紧靠亮氨酸拉链结构域的N末端；二是参与寡聚化作用的亮氨酸拉链区与碱性区紧密相连，每7个氨基酸的第7位含有一个亮氨酸，亮氨酸拉链形成一个两亲的螺旋结构，该结构参与bZIP蛋白与DNA结合之前的二聚体化；三是转录因子的N末端含有酸性激活区；四是以二聚体形式结合DNA，肽链N末端的碱性区与DNA直接结合。另外，在bZIP结构域以外，还有一些其他的保守结构域如：脯氨酸、谷氨酰胺和酸性氨基酸丰富的结构域，这些结构域的存在表明其可能有转录激活的作用。植物常常暴露在各种非生物胁迫因子下，比如高盐、低温以及干旱等，这种环境因素会严重影响植物的生长发育过程。由于它的不可移动性，植物通过调节生理、生化以及一些胁迫相关基因的转录激活来响应及适应各种环境胁迫。随着耕地的沙漠化和盐碱化程度的加重，发掘和研究植物中的抗旱抗盐基因对提高植物抗旱、抗盐性以及培育抗逆新品种都具有重要的意义。大量的研究表明bZIP转录因子家族具有许多重要的生物学功能，包括种子贮藏基因的表达、植物的生长发育、光信号转导、病害防御、非生物胁迫应答以及ABA的敏感性等各种信号的反应，但关于葡萄bZIP基因的功能研究目前尚未见报端。

发明内容

本发明解决的技术问题：提供一种野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39 及其应用，首次构建了pCAMBIA2300-35S-VqbZIP39过量表达载体，并通过花絮浸染法将其导入模式植物拟南芥，研究了野生毛葡萄商-24抗逆基因 VqbZIP39过量表达的转基因株系和野生对照在渗透胁迫、失水处理、长期干旱以及盐胁迫处理下的生长情况。

本发明采用的技术方案：野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39，该基因的编码区序列如下所述：

本发明还提供关于野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39提高植株的抗盐胁迫能力和干旱胁迫能力的应用。

本发明与现有技术相比野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39能明显提高拟南芥对于渗透胁迫、失水处理、长期干旱以及盐胁迫的耐受力。在胁迫条件下，转基因株系中的丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)的积累明显少于野生对照，而脯氨酸和内源ABA含量以及活性氧清除剂SOD，CAT，POD的酶活性显著高于野生型对照。在含有氯化钠(NaCl)和甘露醇(Mannitol)的培养基上，具有野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39的株系萌发率显著高于野生对照，根长也明显长于对照，上述结果都表明野生毛葡萄商-24抗逆基因 VqbZIP39在拟南芥中的过量表达提高了植株的抗盐胁迫和干旱胁迫的能力。

附图说明

图1a-图1f是氯化钠和甘露醇引起的渗透胁迫对野生对照(WT)和转基因株系VqbZIP39-7(L7),VqbZIP39-27(L27)和VqbZIP39-42(L42)种子萌发以及根系发育的影响。其中，图1a是在MS培养基，图1b是在MS培养基+125mM 的NaCl，图1c是在MS培养基+200mM甘露醇(Mannitol)上的图片，图1d 是野生对照WT、转基因株系L7,L27,L42在MS培养基，含有125mM氯化钠和200mM甘露醇的渗透培养基上的萌发率。*表示与野生对照相比有显著差异，**表示与野生对照相比有极显著差异(*0.01<P<0.05,**P<0.01)。图 1e是将苗龄7天的野生对照WT、VqbZIP39转基因株系L7,L27,L42分别移栽到在MS培养基，含有125mM氯化钠和200mM甘露醇的渗透培养基上生长一周后的根系生长图。图1f是野生型对照和转基因株系在不同培养基上的根长。*表示与野生对照相比有显著差异，**表示与野生对照相比有极显著差异(*0.01<P<0.05,**P<0.01)；

图2a-图2e是氯化钠和甘露醇引起的渗透胁迫对野生对照WT、 VqbZIP39转基因株系L7,L27,L42中生理指标的影响。将苗龄7天的无菌苗从萌发培养基中分别移栽到在MS培养基，含有125mM氯化钠和200mM甘露醇的渗透培养基上生长一周后测定叶片中的叶绿素含量(图2a)，丙二醛 (MDA)含量(图2b)，脯氨酸含量(图2c)，内源ABA含量(图2d)和电导率(图2e )。*表示与野生对照相比有显著差异，**表示与野生对照相比有极显著差异(*0.01<P<0.05,**P<0.01)。

图3a-图3d是野生对照、VqbZIP39转基因株系L7,L27,L42的盆栽苗对盐胁迫和干旱胁迫的反应。图3a为胁迫处理一周后的植株代表图，其中图3a-a 为对照图，图3a-b为200mM氯化钠处理后的植株生长情况，图3a-c为干旱胁迫一周后的植株生长情况，图3a-d为干旱胁迫一周后复水2天后的植株生长情况。图3b是干旱胁迫一周后复水2天后野生对照和转基因株系的存活率。 *表示与野生对照相比有显著差异，**表示与野生对照相比有极显著差异 (*0.01<P<0.05,**P<0.01)；图3c是将正常生长条件下的苗龄4周的野生对照和转基因株系的叶片从植株上采集下来放于自然环境中进行失水处理。每隔1小时称量一次鲜重，失水率通过与初始鲜重之间的差值与初始鲜重之间的比值进行计算；图3d是用台盼兰对盐胁迫和干旱胁迫一周后的野生对照和转基因株系中的死细胞进行染色的情况，图上标尺代表2mm。

图4a-图4g是野生对照、VqbZIP39转基因株系L7,L27,L42盆栽苗对氧化应激的反应以及在非生物胁迫条件下活性氧积累及活性氧清除剂的活性分析。图4a是在MS培养基和MS培养基+6μm的甲基紫精(MV)处理24小时后的代表图。图4b是野生对照WT、转基因株系L7、L27和L42在MS培养基和含有6μm MV的培养基处理24小时后的叶绿素含量。*表示与野生对照相比有显著差异，**表示与野生对照相比有极显著差异(*0.01<P<0.05, **P<0.01)；图4c是用DAB对过氧化氢(H₂O₂)进行染色后的叶片代表图, 图上标尺代表2mm；图4d是用NBT对超氧化物的阴离子(O₂ ^-)进行染色后的叶片代表图,图上标尺代表2mm；图4e是超氧化物歧化酶(SOD)的酶活性，图4f是过氧化氢酶(CAT)的酶活性，图4g是过氧化物酶(POD)的酶活性。*表示与野生对照相比有显著差异，**表示与野生对照相比有极显著差异(*0.01<P<0.05,**P<0.01)；

图5a-图5b是正常生长条件下的野生对照和VqbZIP39转基因株系L7,L27, L42盆栽苗的叶片在不同浓度的外源ABA处理后的气孔开张情况；图5a是外源ABA处理后的气孔张开情况代表图；图5b是外源ABA处理后野生对照和转基因株系叶片上气孔横纵比的平均值。*表示与野生对照相比有显著差异，**表示与野生对照相比有极显著差异(*0.01<P<0.05,**P<0.01)；

图6a-图6f是胁迫相关基因在野生对照、VqbZIP39转基因株系L7,L27, L42中的表达情况；用200mM氯化钠处理或干旱处理苗龄三周的成苗一周，采集叶片提RNA并反转录后利用实时定量PCR技术测定胁迫基因表达量，拟南芥Actin2为内参基因。*表示与野生对照相比有显著差异，**表示与野生对照相比有极显著差异(*0.01<P<0.05,**P<0.01)。

具体实施方式

发明人利用同源克隆技术，根据欧洲葡萄黑比诺基因组序列采用反转录 PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction，RT-PCR)，以野生毛葡萄商-24叶片总RNA反转录合成cDNA第一链为模板，首次扩增了野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39，该基因完整开放阅读框序列全长1344bp，编码447 个氨基酸，分析表明该基因包括一个高度保守的bZIP结构域和一个核定位信号。

为了一步研究野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39在植物抵御干旱胁迫和盐胁迫中的具体功能，发明人构建了pCAMBIA2300-35S-VqbZIP39(酶切位点为XbaI和KpnI)过量表达载体，将其在野生拟南芥植株中过量表达。发现具有野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39的株系在渗透胁迫培养基上的种子萌发率显著高于野生对照，而且经过长期培养后，发现具有野生毛葡萄商-24 抗逆基因VqbZIP39的植株相比野生对照可以在渗透培养基上长出更为强壮的根系。

在研究中，发明人对幼苗转基因植株和野生对照进行了盐和甘露醇渗透胁迫处理，并测定了植株中的叶绿素含量，电导率，丙二醛含量，脯氨酸含量及内源ABA含量。结果表明在渗透胁迫条件下，转基因植株中的叶绿素含量，脯氨酸含量及内源ABA含量均比野生对照中的较高，而丙二醛含量和电导率均比野生对照低。此外，发明人还对成年苗进行了盐胁迫和干旱胁迫处理并利用化学染色的方法分别检测了在盐胁迫和干旱胁迫处理后叶片中过氧化氢(H₂O₂)和超氧阴离子自由基(O₂ ^.-)的水平并分析了其中的活性氧清除剂超氧化物歧化酶(SOD)，过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)的酶活性。结果表明在胁迫处理后，与野生对照相比转基因株系中活性氧积累较少，受的氧化胁迫也较小，同时三种活性氧清除剂的酶活性较高。并且，发明人进一步对成年苗进行了氧化应激处理，结果表明，在除草剂甲基紫精中浸泡24小时后，转基因株系的叶绿素含量较野生对照高，说明野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39的过量表达可能参与了ROS的清除过程从而增强了植株的抗渗透胁迫能力。

以下是野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39的编码区序列以及抗盐胁迫和干旱胁迫功能实验验证的具体步骤。

A、在前期研究分析中，47个bZIP家族基因在不同胁迫处理及激素处理后的表达的基础上，利用同源克隆技术，以野生毛葡萄商-24叶片总RNA反转录合成cDNA第一链为模板，扩增得到了野生毛葡萄商-24抗逆基因 VqbZIP39序列，该野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39的编码区序列如下：

B、将野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39序列的完整开放阅读框插入 CaMV35S启动子下游，构建了植株过量表达载体并将其通过农杆菌介导的花絮浸染法将其导入野生型拟南芥哥伦比亚C0。筛选获得了表现型良好的 VqbZIP39转基因株系(L7,L27,L42)。

C、参见图1-6，发明人鉴定了VqbZIP39转基因株系(L7,L27,L42)能明显提高拟南芥对于渗透胁迫，失水处理，长期干旱以及盐胁迫的耐受力。此外，在胁迫条件下，转基因株系中的丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)的积累明显少于野生对照，而脯氨酸和内源ABA含量以及活性氧清除剂SOD， CAT，POD的酶活性显著高于野生型对照。在MS培养基中添加氯化钠(NaCl) 和甘露醇(Mannitol)，VqbZIP39转基因株系(L7，L27，L42)的萌发率显著高于野生对照，根长也明显长于对照。以上结果都表明野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39在拟南芥中的过量表达提高了植株的抗盐胁迫和干旱胁迫的能力。

以下是发明人给出的具体实施例，以对本发明的技术方案作进一步解释说明。

实施例1：过量表达的转基因株系和野生对照在渗透胁迫情况下的萌发(具体数据如表1所示)

三个转基因株系(L7,L27,L42)和野生对照(WT)在MS培养基上2d 时开始萌发，5d后萌芽率都能达到93％以上(图1a所示)。而在含有氯化钠和甘露醇的培养基上培养5d后，氯化钠培养基上的转基因株系(L7,L27,L42) 的萌发率分别达到了54.31％、58.76％、60.32％，而野生对照(WT)的萌发率只有10.99％，明显低于转基因植株(图1b所示)。在含有甘露醇的培养基上，转基因株系(L7,L27,L42)的萌发率分别达到了58.30％，62.95％，71.86％，而野生对照(WT)的萌发率只有17.92％(图1c所示)，三者之间的发芽率对照如图1d所示。为了进一步测定VqbZIP39转基因株系(L7,L27,L42)的抗渗透胁迫能力，发明人将播种在MS培养基中的7天苗龄的幼苗分别移栽到在MS培养基，含有125mM氯化钠和200mM甘露醇的渗透培养基上观察其根系发育情况。结果表明，一周后观察所有植株的根系生长情况，转基因株系(L7,L27,L42)和野生对照(WT)在MS培养基上根系可以正常生长，但是在盐胁迫和甘露醇胁迫培养基上，野生对照(WT)根系较短，生长矮小，而转基因株系虽然比MS培养基上的苗子生长缓慢，但根系强壮，基本可以正常生长。盐胁迫和甘露醇胁迫条件下，转基因株系的根长比野生型较长(图 1e所示)，三者之间的根长(cm)对照如图1f所示。上述结果表明野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39的过量表达抵消了部分盐胁迫和甘露醇胁迫对植株萌发及根系生长的抑制作用。

表1

株系类型	MS培养基	NaCL培养基	Mannitol培养基
				野生对照(WT)	93％以上	10.99％	17.92％
转基因株系(L7)	93％以上	54.31％	58.30％
				转基因株系(L27)	93％以上	58.76％	62.95％
转基因株系(L42)	93％以上	60.32％	71.86％

实施例2：野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39转基因拟南芥T3代幼苗对渗透胁迫的抗性(具体数据如表2所示)

为了进一步测定VqbZIP39转基因株系(L7,L27,L42)对渗透胁迫的响应，发明人将播种在MS培养基中的7天苗龄的幼苗分别移栽到在MS培养基，含有125mM氯化钠和200mM甘露醇的渗透培养基上进行渗透胁迫处理并测定了处理一周后的叶绿素含量、电导率、丙二醛(MDA)含量、脯氨酸含量和内源ABA含量。结果表明三个转基因株系(L7,L27,L42)在氯化钠胁迫后的叶绿素含量分别为0.28、0.33、0.33mg/g鲜重，而野生对照(WT)的叶绿素含量则为0.10mg/g鲜重。甘露醇处理后，三个转基因株系(L7,L27,L42)的叶绿素含量分别为0.37、0.39、0.35mg/g鲜重，而野生对照(WT)则为0.15mg/g 鲜重(图2a)。氯化钠胁迫后三个转基因株系(L7,L27,L42)中的丙二醛(MDA) 含量分别为14.07、13.73、12.23nmol/g鲜重，而野生对照(WT)中的丙二醛含量则为23.81nmol/g鲜重。甘露醇胁迫后三个转基因株系(L7,L27,L42)中的丙二醛含量分别为10.94、13.24、12.19nmol/g鲜重，而野生对照(WT)中的丙二醛含量则为16.36nmol/g鲜重(图2b)。氯化钠胁迫后三个转基因株系 (L7,L27,L42)中的脯氨酸含量分别为20.74、24.18、22.45μg/g鲜重，而野生对照(WT)中的脯氨酸含量则为14.02μg/g鲜重。甘露醇胁迫后三个转基因株系(L7,L27,L42)中的脯氨酸含量分别为15.36、14.87、14.99μg/g鲜重，而野生对照(WT)中的脯氨酸含量则为12.04μg/g鲜重(图2c)。氯化钠胁迫后三个转基因株系(L7,L27,L42)中的内源ABA含量分别为117.95、104.76、103.80ng/g鲜重，而野生对照(WT)中的内源ABA含量为83.78ng/g鲜重。甘露醇胁迫后三个转基因株系(L7,L27,L42)中的内源ABA含量分别为 107.44、111.28、115.69ng/g鲜重，而野生对照(WT)中的内源ABA含量为 103.33ng/g鲜重(图2d)。氯化钠胁迫后三个转基因株系(L7,L27,L42)的电导率分别为44.06％、46.79％、42.19％,而野生对照(WT)的电导率达到了 77.05％。甘露醇胁迫后三个转基因株系(L7,L27,L42)的电导率分别为48.49％、44.59％、45.06％，而野生对照(WT)的电导率达到了57.25％(图2e)。这些结果表明在盐胁迫和甘露醇胁迫过程中，转基因株系受到的渗透伤害显著低于野生对照(WT)，过量表达的野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39提高了植株对渗透胁迫的耐受力。

上述结果表明野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39在拟南芥中的过量表达明显提高了幼苗对渗透胁迫的抗性。

表2

实施例3：野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39转基因拟南芥T3代植株对盐胁迫和干旱胁迫的抗性。

在前面的研究中已经证明野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39对盐胁迫和甘露醇胁迫处理都有积极的响应，所以发明人着重研究了拟南芥成年植株对各种胁迫的反应。

为了避免外界和人为因素的影响，发明人将转基因植株[VqbZIP39-7(L7),VqbZIP39-27(L27)和VqbZIP39-42(L42)]和野生对照种植于同一穴盘中(如图 3a-a)。对生长三周的成苗植株进行盐胁迫和干旱胁迫处理，结果显示盐胁迫处理一周后，转基因植株(L7,L27,L42)和野生对照(WT)出现了明显不同的性状表现。野生对照植株都出现了较为严重的枯黄和皱缩现象，而转基因株系(L7,L27,L42)虽然也出现了不同程度的黄斑，但生长状态明显好于对照 (图3a-b)。干旱胁迫处理一周后，野生对照(WT)和转基因株系(L7,L27,L42) 均出现叶片萎蔫及失水现象，但是转基因株系的萎蔫症状较轻(图3a-c)，对干旱胁迫一周后的植株进行复水处理，2天后发现三个转基因株系 (L7,L27,L42)的成活率分别为62.5％,66.67％,91.67％，而野生对照(WT) 的成活率仅为6.25％(图3a-d和图3b所示)。此外，发明人还对正常生长条件下的4周苗龄的野生对照(WT)和转基因株系(L7,L27,L42)进行了失水处理。结果显示在整个失水处理过程中，转基因株系失水率都低于野生对照。在10h时，转基因株系(L7,L27,L42)的失水率分别为65.56％、64.63％、67.74％，而野生对照(WT)失水率达到了73.48％，明显髙于转基因植株(图3c)。由于转基因株系(L7,L27,L42)的失水率比野生对照(WT)较低，发明人比较了不同浓度的外源ABA处理后转基因株系(L7,L27,L42)和野生对照(WT) 叶片上气孔的开度。结果表明无论外源ABA浓度为5μM还是10μM时，三个转基因株系(L7,L27,L42)的气孔开度均比野生对照(WT)低(图5a和图 5b所示)。为了进一步验证野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39在提高拟南芥抗非生物胁迫方面的作用，发明人还对盐胁迫和干旱胁迫后的转基因株系 (L7,L27,L42)和野生对照(WT)叶片进行了台盼兰染色，以观察死细胞数量。结果显示在盐胁迫和干旱胁迫处理后，野生对照(WT)中的死细胞数量均明显多于转基因株系(L7,L27,L42)(图3d)。

上述结果表明野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39在拟南芥中的过量表达明显提高了成年植株对盐胁迫和干旱胁迫的抗性。

实施例4：VqbZIP39转基因拟南芥在非生物胁迫下活性氧的产生和活性氧清除剂的活性分析

植物细胞长期处于逆境胁迫时，活性氧就会大量积累造成氧化伤害，导致细胞损伤甚至死亡。为了验证野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39对于氧化胁迫的作用，发明人将野生对照(WT)，3个转基因株系(L7,L27,L42)浸泡于除草剂甲基紫精(MV)中，模拟氧化胁迫，结果显示出在胁迫24h后转基因株系(L7,L27,L42)的叶绿素含量较野生对照高(图4a和图4b所示)。同时利用化学染色的方法分别检测了在盐胁迫和干旱胁迫处理后叶片中过氧化氢(H₂O₂)和超氧阴离子自由基(O₂ ^.-)的水平。由图4c和图4d可以明显的看出在盐胁迫和干旱胁迫处理下，用二氨基联苯胺(DAB)和氯化硝基四氮唑蓝液(NBT)染色后各个转基因株系(L7,L27,L42)都呈现出较浅的颜色，而野生对照染色较重。表明在胁迫处理后，与野生对照相比较转基因株系中活性氧积累比较少，受的氧化胁迫也较小。同时，发明人还分析了盐胁迫和干旱胁迫处理后叶片中活性氧清除剂的活性。结果显示胁迫处理后，转基因株系(L7,L27,L42)中的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性均高于野生对照(WT)，如图4e、图4f和图4g所示。

上述结果表明野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39的过量表达增强了植株的活性氧清除剂的活性，从而减少了活性氧的积累，增强了植株对非生物胁迫的抗性。

实施例5：胁迫相关基因在野生对照和VqbZIP39转基因株系中的表达

干旱，高盐，冷胁迫等都会引起植物缺水使植物处于水分胁迫下。为了进一步了解VqbZIP39基因在植物响应各种胁迫过程中的调控作用，发明人通过实时定量PCR检测了盐胁迫和干旱胁迫后一些已知功能的胁迫相关基因 AtRD29A、AtRD29B、AtRD22、AtNCED3、AtERD1和AtKIN2在野生对照(WT) 及转基因株系(L7,L27,L42)中的表达量(图6a至图6f)。

实时定量结果表明，盐、干旱胁迫后，在拟南芥中过量表达野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39提高了AtRD29A、AtRD29B、AtRD22、AtNCED3和 AtKIN2的表达量。在三个转基因株系(L7,L27,L42)中，AtRD29A基因的表达量达到了野生对照(WT)的3-7倍(图6a)；AtRD29B和AtRD22基因的表达量达到了野生对照(WT)的2-3倍(图6b和图6c)；AtKIN2基因的表达量达到了野生对照(WT)的2-4倍(图6f)；AtNCED3基因的表达量则稍微高于野生对照(WT)(图6d)。而VqbZIP39在拟南芥中的过量表达并不影响不依赖ABA途径的AtERD1的表达(图6e)。

上述实施例，只是本发明的较佳实施例，并非用来限制本发明实施范围，故凡以本发明权利要求所述内容所做的等效变化，均应包括在本发明权利要求范围之内。

Claims

1.野生毛葡萄商-24抗逆基因VqbZIP39的应用，其特征在于提高植株的抗盐胁迫能力和抗干旱胁迫能力的应用，其中抗逆基因VqbZIP39的核苷酸序列如下所述：