CN105106325A

CN105106325A - 制首乌总游离蒽醌在制备中药抗动脉粥样硬化药物的应用

Info

Publication number: CN105106325A
Application number: CN201510455721.6A
Authority: CN
Inventors: 王和生; 杨长福; 林昶; 鲜义辉; 王永萍; 赖陈岑; 赵建雄; 王通渤
Original assignee: Guiyang College of Traditional Chinese Medicine
Current assignee: Guiyang College of Traditional Chinese Medicine
Priority date: 2015-07-30
Filing date: 2015-07-30
Publication date: 2015-12-02

Abstract

本发明公开了一种制首乌总游离蒽醌在制备中药抗动脉粥样硬化药物的应用。本发明通过各种动物模型及实验证明，制首乌提取物总游离蒽醌对动脉粥样硬化具有确切的疗效，而且证实了制首乌总游离蒽醌在较低剂量（3.75～15mg/kg）时即可具有较好治疗效果，开发了制首乌总游离蒽醌在制备中药抗动脉粥样硬化药物的新应用，为制首乌总游离蒽醌开发成为一种新的中药抗动脉粥样硬化药物提供了新的依据。<u />

Description

制首乌总游离蒽醌在制备中药抗动脉粥样硬化药物的应用

技术领域

本发明涉及一种制首乌总游离蒽醌在制备中药抗动脉粥样硬化药物中的应用，属于医药技术领域。

背景技术

动脉粥样硬化（AS）是一组称为动脉硬化的血管病中最常见、最重要的一种，其特点是动脉管壁增厚变硬、失去弹性和管腔缩小，由于在动脉内膜上积聚的脂质外观呈黄色粥样，因此称为动脉粥样硬化。近年来，动脉粥样硬化的发病率逐年升高，导致以动脉粥样硬化为主要病理基础的多种心血管疾病逐渐成为人类死亡的主要原因之一，因此早期预防和合理治疗动脉粥样硬化将大大降低冠心病等心血管疾病的发病率。目前临床上常用的抗动脉粥样硬化药物主要为他汀类和贝特类调血脂药物，但它们主要用于冠心病的早期治疗，且在联用时易产生较大的副作用，积极开发安全有效的中药抗动脉粥样硬化药物具有重要意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于应用制首乌总游离蒽醌制备抗动脉粥样硬化的中药药物，具有效果明显、有效剂量低的特点。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：

制首乌总游离蒽醌在制备中药抗动脉粥样硬化药物的应用。

上述的应用中，是将制首乌粉碎成粗粉，使用80%乙醇回流提取2次，每次2h，过滤，合并滤液并浓缩成浸膏，加入等量浓度为10%的硫酸酸化，冷却至室温，用二氯甲烷萃取三次，合并萃取液，减压回收二氯甲烷，残渣减压干燥，得制首乌提取物总游离蒽醌。

前述的应用中，制首乌总游离蒽醌的有效剂量为3.75～15mg/kg。

前述的应用中，优选的，制首乌总游离蒽醌的有效剂量为3.75mg/kg、7.5mg/kg或15mg/kg。

前述的应用中，制首乌总游离蒽醌的最佳有效剂量为15mg/kg。

前述的应用中，药物的剂型可以是颗粒、片剂、滴丸、胶囊、软胶囊、糖浆、合剂、丸剂、散剂及其他常规口服制剂，或者是注射剂及其他常规非口服制剂。

本发明的有益效果：本何首乌为蓼科多年生草本植物何首乌(Polygonummultiflo-rumThunb.)的干燥块根，为贵州地道药材，秋后茎叶枯萎时或次年未萌芽前掘取其块根，洗净，切片，晒干或微烘干，称为生首乌；若以黑豆汁拌蒸，晒后变为黑色，称为制首乌。本发明通过各种动物模型及实验证明，制首乌提取物总游离蒽醌对动脉粥样硬化具有确切的疗效，而且证实了制首乌总游离蒽醌在较低剂量（3.75～15mg/kg）时即可具有较好治疗效果，开发了制首乌总游离蒽醌在制备中药抗动脉粥样硬化药物的新应用，为制首乌总游离蒽醌开发成为一种新的中药抗动脉粥样硬化药物提供了新的依据，使作为传统老药的何首乌具有了广阔的应用前景和药用价值。

附图说明

图1是模型组的100倍兔胸主动脉切片HE染色结果图；

图2是正常组的100倍兔胸主动脉切片HE染色结果图；

图3是血脂康400mg/kg组的100倍兔胸主动脉切片HE染色结果图；

图4是制首乌总游离蒽醌15mg/kg组的100倍兔胸主动脉切片HE染色结果图；

图5是制首乌总游离蒽醌7.5mg/kg组的100倍兔胸主动脉切片HE染色结果图；

图6是制首乌总游离蒽醌3.75mg/kg组的100倍兔胸主动脉切片HE染色结果图。

下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步的说明。

具体实施方式

一、制首乌提取物总游离蒽醌的制备：将制首乌粉碎成粗粉，使用80%乙醇回流提取2次，每次2h，过滤，合并滤液并浓缩成浸膏，加入等量浓度为10%的硫酸酸化，冷却至室温，用二氯甲烷萃取三次，合并萃取液，减压回收二氯甲烷，残渣减压干燥，即得制首乌总游离蒽醌。经HPLC检测，其中含有制首乌总游离蒽醌中大黄酸、大黄素、大黄素甲醚的含量分别为0.14%、9.43%、3.63%。所得制首乌总游离蒽醌治疗兔动脉粥样硬化时，在较低剂量（3.75～15mg/kg）时即可产生较好治疗效果。

二、制首乌总游离蒽醌对新西兰大白兔动脉粥样硬化的治疗作用

1、实验药物制备：将制首乌粉碎成粗粉，使用80%乙醇回流提取2h，过滤，重复提取一次，合并滤液并浓缩成浸膏，加入等量浓度为10%硫酸酸化，冷却至室温，用二氯甲烷萃取三次，合并萃取液，减压回收二氯甲烷，残渣减压干燥，得制首乌总游离蒽醌。

2、实验动物模型建立：36只雄性新西兰大白兔随机分为正常组、模型组、制首乌总游离蒽醌15mg/kg组、制首乌总游离蒽醌7.5mg/kg组、制首乌总游离蒽醌3.75mg/kg组、血脂康400mg/kg组，共6组，每组6只。使用高脂饲料喂养结合免疫损伤法进行造模。正常组给予正常饲料喂养，其余各组给予高脂饲料（15%蛋黄、5%猪油、0.5%胆固醇、0.5%胆酸钠、0.5%丙基硫氧嘧啶、0.5%维生素D₃、78%普通饲料）喂养，连续喂养12周。其中，前三周除正常组注射生理盐水外，其余组每周耳缘静脉注射10%牛血清白蛋白（2.5ml/kg）一次，连续注射3周。

3、动物给药实验：使用相应药物及生理盐水对各组家兔进行灌胃给药，每次最大体积不超过20ml。连续给药4周后，取各组动物主动脉弓约2cm处胸主动脉，用4%多聚甲醛溶液固定。常规石蜡包埋后切片，HE染色。在光学显微镜下观察，并经耳缘静脉取空腹血2ml，静置30min，离心后取血清，测定血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平。同时，取兔胸主动脉，采用RT-PCR法检测CRP及ABCA1mRNA水平的变化。

（1）HE染色结果显示：模型组胸主动脉内膜增厚，管腔变窄，管壁见较多泡沫细胞聚集，并纤维组织增生，玻璃样变，伴骨化，及钙盐沉积，可见少量淋巴细胞，中膜破坏变薄（图1）。制首乌总游离蒽醌各剂量组光镜下可见内膜增厚，其内见大量泡沫细胞聚集，并见少量淋巴细胞浸润，未见明显纤维组织增生，处于脂纹、脂斑期（图4-6）。血脂康400mg/kg组内膜增厚，管腔变窄，管壁见较多泡沫细胞聚集，并纤维组织增生，玻璃样变，伴骨化，及钙盐沉积，可见少量淋巴细胞，中膜破坏变薄，未见明显治疗作用（图3）。正常组动脉壁各层结构（内膜、中膜、外膜）清晰，未见泡沫细胞、炎细胞，未见斑块形成（图2）。上述HE染色结果提示制首乌总游离蒽醌能够不同程度的延缓AS进程，其中，剂量为15mg/kg时治疗效果最佳。

（2）血清血脂水平检测结果：见表1。

表1血清血脂水平检测结果(n＝6)：

分组	TG(mmo/L)	TC(mmol/L)	LDL(mmol/L)
				正常组	0.93±0.38**	1.52±0.11**	1.02±0.06**
模型组	2.74±0.66	26.82±0.17	10.22±0.32
				血脂康400mg/kg组	0.79±0.53**	10.84±2.63**	6.02±1.11**
制首乌总游离蒽醌15mg/kg组	1.90±0.45*	12.39±1.10**	6.12±1.54**
				制首乌总游离蒽醌7.5mg/kg组	0.38±0.20**	14.17±2.36**	5.05±1.12**
制首乌总游离蒽醌3.75mg/kg组	0.65±0.20**	7.04±0.89**	7.28±1.27**

与模型组比较，**P＜0.01，*P＜0.05；

血清血脂水平检测结果显示：三种剂量的制首乌总游离蒽醌均可以有效降低血清TG、TC以及LDL水平，且在一定剂量下，制首乌总游离蒽醌降低血清TG、TC及LDL的效果优于血脂康。

(3)胸主动脉RT-PCR结果：见表2。

表2胸主动脉RT-PCR结果

分组	ABCA1(2^-ΔΔCt)	CRP(2^-ΔΔCt)
			正常组	1.0704±0.0907	0.0002±0.0001*
模型组	1.3914±0.1265	0.9512±0.0430
			血脂康400mg/kg组	1.5327±0.0938	1.2224±0.0900*
制首乌总游离蒽醌15mg/kg组	3.9327±0.1279**	0.6102±0.1413*
			制首乌总游离蒽醌7.5mg/kg组	2.2104±0.4597**	0.9186±0.0570
制首乌总游离蒽醌3.75mg/kg组	1.4317±0.3929	1.1109±0.0409*

与模型组比较，**P＜0.01，*P＜0.05；

胸主动脉RT-PCR结果显示：不同剂量的制首乌总游离蒽醌可以升高ABCA1mRNA表达，且能降低CRPmRNA表达，效果优于血脂康。由于ABCA1能够促进胆固醇外流，而CRP是AS作为慢性炎症的重要标志，因此升高ABCA1以及降低CRPmRNA表达可以延缓动脉粥样硬化进程。

三、制首乌总游离蒽醌的药物制剂

本发明的制首乌总游离蒽醌可以根据需要加入适当辅料制成药剂学上常见的口服制剂如颗粒、片剂、滴丸、胶囊、软胶囊、糖浆、合剂、丸剂、散剂或其他常规口服制剂，也可以制成注射剂及其他常规非口服制剂。

颗粒剂：将制首乌总游离蒽醌按照常规制剂工艺加入适量辅料制成颗粒剂1000粒。服用方法：口服，每次服用1粒，每日2次。

片剂：将制首乌总游离蒽醌按照常规制剂工艺加入适量辅料制成片剂1000片。服用方法：口服，每次2片，每日3次。

Claims

1.制首乌总游离蒽醌在制备中药抗动脉粥样硬化药物的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：将制首乌粉碎成粗粉，使用80%乙醇回流提取2次，每次2h，过滤，合并滤液并浓缩成浸膏，加入等量浓度为10%的硫酸酸化，冷却至室温，用二氯甲烷萃取三次，合并萃取液，减压回收二氯甲烷，残渣减压干燥，得制首乌提取物总游离蒽醌。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：制首乌总游离蒽醌的有效剂量为3.75～15mg/kg。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：制首乌总游离蒽醌的有效剂量为3.75mg/kg、7.5mg/kg或15mg/kg。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：制首乌总游离蒽醌的有效剂量为15mg/kg。

6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：药物的剂型为口服制剂或非口服制剂，口服制剂包括颗粒、片剂、滴丸、胶囊、软胶囊、糖浆、合剂、丸剂、散剂及其他常规口服制剂；非口服制剂包括注射剂及其他常规非口服制剂。