CN105092468B - 使用可压缩微流体装置以光学方式检测液体样品中的多个分析物的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种微流体装置，包括：在其间限定出通道的第一基体和第二基体，所述通道包括间隔开的测试区，其中，所述的测试区沿着通道的主轴以距离D7被间隔开，每个测试区包括探针化合物，该探针化合物配置成参与对于靶分析物的分析，所述基体的至少一个是柔性的，从而在所述第一基体的内表面和第二基体的内表面之间的距离D6在对应于所述数量为N个测试区的部位被顺序性地减小，其中N≤3。

Description

使用可压缩微流体装置以光学方式检测液体样品中的多个分 析物的方法

优先权要求

本申请要求2006年11月22日提交的美国申请No.60/867,019的优先权，该申请通过参考全部并入这里。

技术领域

本发明涉及分析法(例如，样品中多种分析物的分析)。

相关申请

本申请涉及2006年9月22日提交的美国临时申请60/826,678，并且涉及2005年5月6日提交的指定美国的国际专利申请PCT/EP2005/004923的美国继续申请，并且该申请要求2004年5月6日提交的德国专利申请DE 10 2004 022 263的优先权，该美国继续申请具有系列号11/593,021并且在2006年11月6日被提交。前述申请的每一个通过参考全部并入这里。

背景技术

可执行分析以确定一种或多种分析物存在于样品中。阵列可用于对样品执行多种分析(例如，对于多种不同分析物的每一种)。典型的阵列包括具有多个间隔开的测试区的基体，每个测试区具有不同的探针化合物，诸如多核苷酸，抗体，或蛋白质。在使用中，用样品接触所述阵列，随后，该样品与阵列的位点相互作用。对于每个位点，所述相互作用可包括例如相应的分析物与该位点的探针化合物结合和/或相应的分析物与探针化合物之间的化学反应。该反应产生可检测的产物(例如，沉淀物)。相互作用的存在和程度取决于相应的分析物是否存在于样品中。

典型地，该相互作用被光学检测(例如，通过荧光)。例如，可使用成像检测器(例如，CCD)执行光学检测，该成像检测器具有在至少一个(例如，两个)维度上彼此间隔开的多个光敏元件(例如，象素)。每个光敏元件布置成从基体的不同空间位置接收光。这样，同时由多个光敏元件检测到的光可组合以在基体的至少一个(例如，两个)维度中形成图像数据。可评估该图像数据以确定在阵列的多个位点处的相互作用的存在和/或程度。

发明内容

本发明涉及分析法(例如，样品中多种分析物的分析)。

附图说明

图1是微流体装置。

图2是图1微流体装置的侧视图。

图3a示出图1微流体装置的两个测试区的顶视图。

图3b到3g示出形成图3a的测试区的方法。

图4和5是构造成操作图1微流体装置的系统的侧视图；

图5仅是局部侧视图。

图6将荧光强度数据示出为沿图1微流体装置通道的位置的函数。

图7是微流体装置。

图8a和8b是图7微流体装置两个测试区每一个的顶视图。

具体实施方式

一种用来分析样品以确定多种分析物的存在(例如，定性/或定量)的方法，包括将样品引入微流体装置的通道。该通道被限定在该装置的第一和第二基体的相对内表面之间。与第一基体相比，第二基体相对柔性。多个测试区沿该通道间隔开。每个测试区域包括配置成参与分析对应分析物的不可移动的探针化合物。典型地，每个分析包括探针化合物与对应分析物或者与包括该分析物和试剂(例如，光学标签) 的对应复合物的相互作用。

为确定每个测试区的分析结果，第二基体的外表面经受局部压缩力。该压缩力引起分开第一和第二基体的内表面的距离局部减小。局部距离减小的部位与在通道内限定的光学检测区重叠。在检测区域处，随着该距离减小，可移动材料(例如，样品，未结合的光学探针，和/或试剂)从基体之间移开。微流体装置被平移使得测试区顺序通过检测区。对于每个测试区而言，在测试区通过检测区时以光学方式确定(例如，通过荧光)分析结果。基于分析结果确定(例如，定量和/或定性)每种分析物的存在。

另外，从检测区移开的材料将为背景光学信号(例如，背景荧光)作贡献。因此，移开这种材料可改善信噪比以确定分析结果。分析结果的确定通常不需要在样品接触测试区后先用清洗液接触测试区。可按照需要选择待测分析物。例如，分析物可涉及医学(例如，诊断学)，研究(例如，药物研发)，工业(例如，水或食品质量监测)，或取证学。待测的示例性分析物包括诸如疾病的生理状况标志物(例如，诊断标志物或预测标志物)。这样的标志物包括心脏标志物(例如，钠尿肽和肌钙蛋白家族成员)，癌症标志物(例如，核基质蛋白)，遗传标志物(例如，多核苷酸)，败血症标志物，神经学标志物，和指示发病状况的标志物。分析物可以指示病原体(例如，细菌，病毒或真菌)的存在。

可以基于待测分析物按需选择测试区的探针化合物。示例性探针化合物包括多核苷酸，抗体和蛋白质。

可基于待测分析物按需选择样品液体。示例性样品包括水，水溶液，有机溶液，无机溶液，人和其它动物的体液，诸如尿，痰，唾液，脑脊液，诸如血浆和血清的全血和血源性材料。

参考图1和2，微流体装置100可用于分析样品以确定多种分析物的存在(例如，定性和/或定量)。微流体装置100包括限定微流体网络107的第一和第二基体102，104，该微流体网络107包括入口106和与其连通的通道110和贮液池108。多个间隔开的测试区112i被设置在通道110中。每个测试区112i包括配置成参与分析物分析的一种或多种试剂(例如，探针化合物)。通道110也包括参考区117。装置100还包括参考样式(reference pattern)114，包括多个标记116j。参考样式114提供关于测试区112i的空间性质的信息。

参考图4，操作系统500包括外壳502，检测器504，参考样式读取器506，和与检测器504和样式读取器508通信的处理器。检测器504是检测样品和测试区112i之间的相互作用的光学荧光检测器。检测器504包括光源550(例如，发光二极管或激光二极管)和零级光敏检测器552(例如，光电倍增管或光电二极管，诸如雪崩光电二极管)。参考样式读取器506在系统500操作期间读取装置100的参考样式114。

我们现在更详细论述微流体装置100和系统500。

就用于激发和检测荧光标签的荧光的光波长而言，第一基体102典型是光学可透射的(例如，透明的)。例如，第一基体102可透过至少大约75％(例如，至少大约85％，至少大约90％)的在大约350nm和大约800nm之间至少一个波长范围内的入射光。第一基体102可由例如聚合物，玻璃或二氧化硅形成。第二基体104典型地由易弯曲的或柔性的材料(例如，弹性体聚合物)形成。第一基体102的柔性可以小于第二基体104。例如，第一基体102可以为大体上刚性的(例如，足够刚性以便于装置100的搬运)。

通道110是毛细通道。施加到入口106的样品113通过毛细力沿着通道110迁移。通道110沿着主轴线a1取向。贮液池108包括通气口111以防止气体在样品前面聚集。每个测试区112i典型地包括试剂 (例如，探针化合物)，该试剂配置成在存在分析物的情况下提供可检测的相互作用。所述相互作用可包括，例如，相应分析物与测试位点的探针化合物结合和/或相应分析物和探针化合物之间的化学反应。该反应导致可检测的产物(例如，沉淀物，荧光材料，或其它可检测的产物)。示例性探针化合物包括蛋白质，抗体和多核苷酸。在2006年9月22日提交的美国临时申请60/826,678的附录A中，描述了用来确定分析物存在的合适的探针化合物。

同样参考图3a，每个测试区112i是细长的，其主轴线a2的取向通常垂直于通道110的主轴线a1。典型地，沿主轴线a2的长度对沿测试区112的垂直维度的宽度w的比率为至少2.5(例如，至少5)。沿轴线a2的长度典型地为至少大约200μm(例如，至少大约350微米)并且典型是大约2000μm或更小(例如，大约1000μm或更小，大约750μm或更小)。宽度w典型地为至少大约25μm(例如，至少大约50微米)并且典型为大约500μm或更小(例如，大约250μm或更小，大约150μm或更小)。在示例性实施例中，测试区112为大约500μm长且大约100μm宽。

如图2中可见，测试区112i与邻近的测试区沿通道110间隔开距离d7。在下面有关检测器504的检测区中，进一步论述测试区112i之间的距离d7。

测试区112i可按需形成。通常，试剂与第一基体接触。然后，试剂和基体相对侧向平移以形成细长的测试区。

参考图3b-3g，用来形成测试区域112i的方法包括将试剂从毛细点样仪(spotter)400分配到第一基体102上。在图3b中，包含一种或更多探针化合物的一定量(例如，在大约2和8nl之间，在大约3和5nl之间)的试剂溶液402被引到毛细点样仪的毛细管远侧末端404。远侧末端404典型地具有大约80和120μm之间(例如大约100μm)的 直径。试剂溶液402和基体102最初分开(例如，不接触)距离d1。典型地，d1至少为大约250μm(例如，大约500μm)。

在图3c中，使末端404和基体102分开较小的间距d2，使得试剂溶液402接触基体102的位置。在较小的间距d2下，远侧末端404邻近基体102的所述部位(例如接触，使得d2为零)。在邻近(例如接触)位置中，远侧末端404和基体102维持在间距d2一定时间(例如，大约1秒或更少，大约0.5秒或更少，大约0.25秒或更少)。在一些实施例中，远侧末端402维持在邻近(例如，接触)位置的时间近似为零。

在图3d中，远侧末端404和基体102移动到中等间距d3，其中远侧末端404和基体保持由远侧末端404的试剂溶液402连接。典型地，中等间距d3至少为大约5μm(例如，至少大约10μm)，并且大约30μm或更小，大约25μm或更小。在示例性实施例中，中等间距d3为大约20μm。

在图3e中，远侧末端404和基体102维持在中等间距d3，持续一段孵育时间，使得在远侧末端处的试剂溶液402的至少一部分(例如，至少大约10％，至少大约25％，至少大约40％)蒸发，从而仅留下试剂溶液402的剩余部分402’。典型地，试剂溶液402的仅仅大约75％或更少(例如，大约50％或更少)蒸发而留下剩余溶液402’。孵育时间取决于溶液402的性质(例如，探针化合物浓度和溶剂汽压)和远侧末端404的环境(例如，相对湿度和温度)。典型的孵育时间长于末端和基体处于邻近位置d2的时间段(例如，至少5倍长，至少10倍长，至少20倍长，至少大约35倍长)。示例性孵育时间至少为大约5秒(例如，至少大约10秒，至少大约20秒，至少大约25秒)。

在图3f中，在中等间距d3下的孵育时间之后，远侧末端404和基体102的至少一个相对于另一个侧向移动以沿着主轴线a2分配试剂 溶液402’。在图3g中，在侧向移动完成后，远侧末端402和基体102分开，使得它们不再由试剂溶液连接。例如，远侧末端404和基体102可返回到初始间距d1。可重复该方法(例如，使用不同的试剂溶液)以在基体多个部位的每一个处分配细长测试区。

通常，通过相对于基体移动远侧末端来改变远侧末端和基体的垂直间距。通常，通过相对于远侧末端平移基体来进行远侧末端和基体的侧向平移。在2006年9月22日提交的美国临时申请60/826678的附录A中，描述了示例性试剂溶液，探针化合物，和分配装置。

如图3a中可见，并且也参考图8a和8b，用来产生细长测试区112i的方法与省略侧向移动远侧末端和基体步骤的分配方法相比，提供了更加均匀的探针化合物分布。测试区112i包括第一部分119和第二部分121。探针化合物在第一部分119中的分布比在第二部分121中或在测试区域312i中更加均匀，该第二部分121和测试区域312i是在没有侧向移动步骤的情况下制备的。

返回到图1，参考区117产生可由检测器504检测的响应，而与样品中的任何分析物的存在无关。参考区117典型地包括荧光介质(例如，聚合物或不可移动的荧光分子)。下面就系统500的操作进一步论述参考区117。

参考样式114的标记116j配置成由系统500的参考样式读取器506读取。标记116j由磁性材料(例如，磁性墨水)组成。样式读取器506可检测标记116j的存在。下面就系统500的操作进一步论述参考样式114。

返回到图4，操作系统500的外壳502包括开口510以接收装置100，压缩系统包括压缩辊516和支撑辊518，520，并且平移致动器512包括阻尼弹簧514。当装置100容纳在外壳500中时，检测器504 在通道110中限定光学检测区524。在使用中，装置100相对于检测区524平移。测试区112i顺序进入和离开检测区。检测器504顺序检测样品和接连的测试区112i之间的相互作用。检测器504也感应参考区117。

参考图6，检测器504输出信号600作为装置100平移的距离(相对或绝对)的函数。信号600包括指示参考区117的峰617和指示每个区112i处的相互作用的峰612i。同时，样式读取器506输出指示标记116i的信号602，作为装置100平移的距离的函数。因为标记116i在空间上与测试区112i相关，因此处理器508可确定检测区524何时与特定测试区重合，即使那个测试区没有展示出信号(例如，对于展示出近似为零的信号612a的测试区112a)。参考区117和相应的信号617可以替代地或与信号602结合地用于确定信号600的哪个区对应于特定测试区。

我们接下来论述压缩系统。在使用中，压缩系统压缩装置100以减小通道110内的基体102，104之间的距离。当装置100容纳在外壳502中时，第一基体102的外表面132向着支撑辊518，520取向，并且第二基体104的外表面134向着压缩辊516取向。支撑辊518，520和压缩辊516之间的距离d4小于装置100的厚度t1(图5)。因为第二基体104与第一基体102相比相对柔性，因此压缩辊516压缩第二基体104引起第二基体104的内表面103和第一基体102的内表面105之间的距离d6局部减小。

在放松的状态(例如，未压缩状态)(图2)下，距离d6典型地至少大约25μm(例如，至少大约50μm，至少大约75μm)。在未压缩状态下，距离d6典型地为大约500μm或更小(例如，大约250μm或更小)。在局部减小距离的状态(例如，局部压缩状态)(图4中的测试区112e)下，距离d6典型地为大约15μm或更小(例如，大约10μm或更小，大约5μm或更小，例如，大约2.5μm或更小)。国际专利申 请PCT/EP2005/004923的美国继续申请，美国申请号11/593,021，附录B中描述了以减小的距离状态分开的表面之间执行的荧光检测的例子。

如在图4和5中看到的，通道110内的压缩系统减小的距离d8仅仅在通道110长度的一部分上。典型地，距离d8为分开测试区112i的距离d7的大约5倍长或更小(例如，大约3倍长或更小，大约2倍长或更小，大约相等)。

典型地，距离d7足够大，使得由检测器504限定的光学检测区524包含少于通道110内的所有测试区112i(例如，5个或更少，3个或更少，2个或更少)。在示例性实施例中，d7足够大，使得检测区524沿通道110的主轴线a1的宽度不会同时接触多于3个(例如，不多于2个，不多于1个)测试区112i。垂直于通道110的主轴线a1的检测区524的宽度典型地为大约等于或小于测试区112i沿其轴线a2的长度(例如，不超过该长度的75％，不超过该长度的50％，不超过该长度的30％)。

在使用中，样品液体被施加到入口106。毛细力将样品沿着通道110拉向贮液池108。样品液体沿着通道110接触测试区112i。样品中的分析物与测试区的探针化合物相互作用。在合适的孵育时间之后，装置100插入外壳500中以压缩平移致动器512的弹簧514。在装置100的插入期间，压缩辊516和支撑辊520间隔开使得装置100不被压缩。一旦装置100完全插入，检测区524就布置成近似重叠参考区117。压缩辊516局部压缩通道110(图5)。

当准备确定样品的分析物和测试区112i之间的相互作用时(例如，在孵育期之后)，平移致动器512相对于检测器504的检测区524平移装置100(图4)。测试区112i顺序通过检测区524并且用光源的光照射。压缩辊516安排成使得距离d6的局部减小在空间上对应于检测区524。因此，光检测器在每个测试区112i处于局部减小的距离状态 (例如，局部压缩状态)时，顺序检测来自测试区112i的光(图4中的测试区112e)。从每个测试区产生的荧光由透镜收集并且由光检测器检测。距离d6的顺序局部减小和光学确定继续进行，直到每个测试区已经平移通过检测区524。

除了每个测试区的探针化合物和分析物外，其它材料也存在于第二基体104的内表面103和第一基体102的内表面105之间的通道110中。这种材料的例子包括样品伴随物和试剂(例如，未结合的或未反应的光学探针)。这些材料典型地产生与样品和测试区112i的相互作用不相关的背景发射(例如，荧光或散射光)。背景发射的强度通常与在对应于检测区524的部位处留在内表面之间的这种材料的量成比例。然而，指示每个测试区处的相互作用的光学信号的强度在空间上位于那个测试区附近。光检测器接收并检测指示相互作用的荧光和背景发射。然而，因为在局部减小的距离的状态(例如，局部压缩状态)(图4中的测试区112e)下液体从内表面之间的位移，指示相互作用的荧光相对于背景荧光的信噪比高于在放松状态(例如，未减小的距离或未压缩状态)(图2)下的信噪比。

已经描述了用来进行分析的方法和装置。接下去论述其它实施例的例子。

虽然入口106已经被描述为不堵塞的开口，但其它构造是可能的。例如，入口可构造成具有注射器配件(例如，气密配件)以容纳注射器。替代地，入口可构造为衬垫，样品可通过该衬垫由针头引入。作为另一个替代方案，入口可装配有单向阀，该单向阀允许样品被引入而不允许离开。

虽然已经描述了通过毛细作用进行填充的微流体装置，但可以使用其它实施例。例如，系统500可设计成在向入口施加样品之前减小微流体网的内体积。当施加样品时，内体积增加，因而将样品吸入。 这种体积减小可用例如压缩辊516来实现。例如，微流体装置可容纳在外壳500中使得平移致动器512的阻尼弹簧514处于压缩状态。在对应于贮液池108的部位布置压缩辊516以压缩装置100。这种压缩减小了贮液池108的内体积。所述体积减小与要被容纳在装置100中的样品体积大约一样大(例如，至少大约大25％，至少大50％)。在贮液池108处于压缩状态下，一定体积的样品被施加到装置100的入口106。压缩辊516离开入口106向着装置100的相反端137缩回。在辊516离开贮液池108时，贮液池解除压缩，因而增加微流体网络的内体积。该体积增加产生将样品吸入所述装置的真空。

虽然已经描述了具有开放的毛细通道的微流体装置，但其它实施例也可以使用。例如，该通道可包括介质，该介质沿该通道长度的至少一部分占据通道的至少一部分(例如，大部分或全部)横截面。典型地，该介质是如下的一种介质：多个探针化合物可固定到这种介质上以限定相应间隔开的测试区(例如，俘获体积)，每个测试区具有以三维方式布置的俘获位点。该介质中的孔或隙允许液体沿通道渗透(例如，通过毛细作用)。沿通道的液体移动可由例如如上所述在通道中产生真空来辅助或引起。典型地，探针化合物相对于多孔介质不可移动，以沿通道限定间隔开的测试区。对于装置100的测试区112i，分析物与测试区的探针化合物的相互作用可以如所述的那样被顺序确定。因为每个测试区以三维方式布置，因此减小通道的相对内表面之间的距离减小了由测试区不可移动的探针化合物占据的俘获体积。在测试区处于减小的体积(例如，减小的距离)的状态下，执行光学检测。

虽然测试区112i已经示出是细长的，但其它构造也是可能的。例如，参考图7，微流体装置300包括多个测试区312i，每个测试区具有一般为圆形的构造。除了形状不同外，测试区312i可以与装置100的测试区112i相同。除了测试区不同外，装置100和300可以相同。

虽然用来形成测试区112i的方法已经被描述为在远侧末端404和基体102的初始侧向移动(图3f)之前，将远侧末端404和基体102从初始间距d1(图3b)移动到邻近间距d2(图3c)并且移动到中等间距d3(图3d)，但可以执行其它实施例。例如，远侧末端404和基体102可在末端404和基体102处于邻近间距d2下侧向移动。在这个实施例中，间距d2典型地大于零。

虽然用来形成测试区112i的方法已经被描述为包括将远侧末端404和基体102维持在中等间距d3并持续孵育时间直到仅仅留下试剂溶液402的剩余部分402’的步骤，但可以执行其它实施例。例如，远侧末端404和基体102的侧向移动可以在远侧末端404和基体102从邻近间距d2(图3c)移动到间距d3(图3d)时立即开始。换句话说，孵育时间可以近似为零。作为另一个例子，在孵育期间，蒸发的试剂溶液可由被引到毛细管末端的另外的试剂溶液代替。因此，在孵育期间，在毛细管末端处的试剂的总量增加。

虽然用来形成测试区112i的方法已经被描述为包括在远侧末端404和基体102被维持在间距d3的情况下的孵育时间，但可以执行其它实施例。例如，间距d3在孵育时间期间可以变化。例如，在孵育时间期间，末端404可相对于基体102侧向和/或竖直摆动。替代地或组合地，在侧向移动期间，末端404可相对于基体102侧向和/或竖直摆动。在孵育或侧向运动期间，这种摆动可提高探针物分子输送到第一基体。

虽然用来形成测试区112i的方法已经被描述为使用毛细管分配器，但可以使用其它分配器。例如，可从固体分配器(例如，固体杆)分配材料。

虽然用来形成测试区112i的方法已经被描述为将一定量的试剂溶液引到毛细点样仪(图3b)的毛细管的远侧末端，并且使该末端和基 体到达较小的间距d2，使得试剂溶液402接触基体102的位置，但可以执行其它实施例。例如，仅在使得远侧末端和基体达到较小的间距之后(例如，在远侧末端与基体接触之后)，试剂溶液可被引到远侧末端。

虽然已经描述了用来顺序减小通道的内表面之间的距离的方法和微流体装置读取器，但其它构造是可能的。例如，微流体装置读取器可以构造成同时减小沿通道的大部分(例如，大体上全部或全部)内表面之间的距离。随后，读取器沿通道平移检测器的检测区，使得不同测试区被顺序读取。

虽然已经描述了具有第一相对刚性的基体和第二相对柔性的基体的微流体装置，但可以使用其它实施例。例如，限定通道的两个相对的内表面的基体可以是柔性的。在这种实施例中，光学检测器的一部分可形成压缩系统的一部分。例如，微流体装置可在压缩辊和检测器的镜片之间平移。

虽然参考样式已经被描述为提供关于微流体装置的测试区的空间性质的信息，但参考样式可提供另外的或替代的信息。例如，参考样式可提供关于微流体装置测试区的生理化学性质的信息。这种性质包括构造测试区进行分析的分析物。其它性质包括存储在装置上的试剂的身份和性质以及该装置的日期信息(例如，失效日期)。

虽然已经描述了包括磁性标记的参考样式，但可以使用其它标记。例如，该标记可由与周围材料相比具有不同光密度或反射率的区域形成。参考样式读取器是典型地构造成通过透射率或反射率读取所述标记的光学读取器。

Claims (15)

1.一种微流体装置，包括：

在其间限定出通道的第一基体和第二基体，所述通道包括间隔开的测试区，其中，所述的测试区沿着通道的主轴以距离D7被间隔开，每个测试区包括探针化合物，该探针化合物配置成参与对于靶分析物的分析，所述基体的至少一个是柔性的，从而在所述第一基体的内表面和第二基体的内表面之间的距离D6在对应于数量为N个测试区的部位被顺序性地减小，其中N≤3。

2.根据权利要求1所述的装置，其中，所述的距离D6能够沿着通道D8的长度上顺序性的减少，其中，D8可以是间隔开测试区的D7的长度距离的5倍，或者，D8可以是间隔开测试区的D7的长度距离的3倍，或，D8可以是间隔开测试区的D7的长度距离的2倍，或者，D8与间隔开测试区的D7的长度距离相等。

3.根据权利要求1或2所述的装置，其中，D7足够大，使得测试区沿通道的主轴线a1的宽度同时接触多个测试区。

4.根据权利要求1或2所述的装置，其中N≤2或N＝1。

5.根据权利要求3所述的装置，所述的主轴线a1的测试区的宽度大于测试区沿其轴线a2的长度。

6.根据权利要求5所述的装置，沿着主轴线a1的测试区的长度是200微米，35微米，2000微米，1000微米或者750微米；或者，测试区的宽度W为25微米，50微米，最多500微米，250微米或者150微米。

7.根据权利要求5所述的装置，其中测试区域的长度为500微米和宽度为100微米。

8.根据权利要求1所述的装置，其中，通道包括参考区域和参考区域包括荧光介质。

9.根据权利要求1所述的装置，其中，该装置进一步包括提供关于测试区的空间性质的信息参考样式。

10.一种检测样品中靶分析物的分析方法，包括：

测试区域与流体样本接触，所述的测试区沿着通道的主轴以距离D7被间隔开，其中，通道被微流体装置的第一基体的内表 面和第二基体的内表面所限定，所述基体的至少一个是柔性的，其中，每个测试区包括探针化合物，该探针化合物配置成参与对于靶分析物的分析，和基体的至少一个是柔性的从而在所述第一基体的内表面和第二基体的内表面之间的距离D6在对应于数量为N个测试区的部位被顺序性地减小，其中N≤3；

在对应于所述测试区的部位减小所述第一基体的内表面和第二基体的内表面之间的距离；和

在所述对应的部位处的所述内表面之间的距离减小的多个测试区的每一个处，以光学方式确定相互作用的存在，在每个测试区处的所述相互作用指示所述样品中靶分析物的存在。

11.根据权利要求10所述的分析方法，还包括：对于所述第一和第二基体的所述内表面之间的距离减小的多个部位的每一个，在所述测试区的以光学方式确定步骤之后，随后增加所述内表面之间的距离。

12.据权利要求10所述的分析方法，其中所述减小距离的步骤包括在对应于所述多个测试区的多个部位处顺序地减小所述第一和第二基体的内表面之间的距离，并且所述以光学方式确定步骤包括随后检测对应部位处的内表面之间距离减小的多个测试区的每一个处的相互作用；其中，所述检测包括同时检测来自不超过N个测试区的光，其中N≤3。

13.据权利要求10所述的分析方法，其中，光学检测包括把微流体转移到光学测试仪器的光学测试区域来执行所述的光学检测。

14.据权利要求10所述的分析方法，其中，减少距离包括把微粒体转移到一个膜上，该膜可以施加压力给分析装置。

15.据权利要求10所述的分析方法，其中，所述的微流体装置为权利要求1-9所述的装置。