CN105076748B - 用于缓解蛋鸡钒中毒的饲料、预混料及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种用于缓解蛋鸡钒中毒的饲料，包括以下组分：玉米、大豆油、豆粕、碳酸钙、磷酸氢钙、食盐、氯化胆碱、复合多维、矿添预混料、赖氨酸盐、DL‑蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸、5000单位植酸酶、益生菌、预混料。本发明还公开了一种用于缓解蛋鸡钒中毒的饲料预混料，包括以下组分：维生素C，维生素E，茶多酚，亚硒酸钠，α‑硫辛酸，砻糠。本发明还提供一种用于缓解蛋鸡钒中毒的饲料的制备方法，本发明科学合理搭配，原料优选组合，满足蛋鸡的营养需要，使用天然抗氧化剂，提高抗病力，增强机体抗应激能力，缓解钒中毒引起的蛋品质和蛋重的变化。
Description
技术领域
本发明属于动物饲料技术领域，具体涉及一种用于缓解蛋鸡钒中毒的饲料，本发明还涉及一种用于缓解蛋鸡钒中毒的饲料预混料，本发明还涉及一种用于缓解蛋鸡钒中毒的饲料的制备方法，本发明还涉及一种用于缓解蛋鸡钒中毒的饲料预混料的制备方法。
背景技术
随着现代工业的发展，环境毒物引起的人类和动物疾病日益受到重视。肉，蛋，奶等动物性食品在人类的食物构成中占有重要的位置。饲料安全是影响动物性食品安全的最主要和最直接的因素。钒是自然界分布极广的元素，是动物营养中的必需微量元素之一。钒在极低剂量(0.05-0.5μg/kg日粮)时属于动物机体必需的微量元素，参与蛋白质，核酸，糖及脂类代谢，以及在维持机体的生长发育，刺激骨骼造血体统，抑制胆固醇合成，降低心房收缩力，降糖，影响肾脏机能以及增强机体免疫力等方面具有重要的调节作用(Verma等,1998)。钒主要通过口腔、呼吸道、表皮吸收及胃肠外给药的途径进入动物体内，但摄入过量时，具有一定的毒性。钒是鸡生长发育的必需微量元素，鸡体内各组织器官钒的浓度比其他动物中相对较高。且鸡蛋黄中钒含量为0.002～0.021mg/kg，蛋清中含量低于0.002mg/kg。相对于其他动物而言，鸡对钒的毒性相当敏感，超过一定剂量能影响雏鸡生长，影响蛋鸡生产性能和蛋品质。饲料原料中，特别是磷酸氢钙中钒的含量较高，在10～120mg/kg之间，这容易造成鸡(特别是蛋鸡，其饲粮中磷酸盐的添加量为1.5％左右)饲粮中钒的含量过高。蛋鸡饲粮中钒含量达到10mg/kg以上对蛋鸡体重，采食量，生产性能，蛋品质(特别是卵白高度，储存品质HU,蛋壳颜色)都有严重的影响，并且蛋鸡饲粮中钒水平达到5mg/kg以上3天即可以影响鸡蛋卵白品质，导致鸡蛋卵白高度和哈夫单位(HU)下降。
自然状态下，钒以多种化合价的形式存在(-3，-1，0，+1到+5价)，和磷具有相似的化学结构，参与酶组成，调节酶功能，是Na+-K+ATPase,许多磷酸酶，磷酸化酶的抑制剂。在人和鼠上进行的体内和体外的大量试验证实了钒的毒性可能通过产生过量的活性自由基(Reactive oxygen species，ROS)，影响代谢关键酶从而导致代谢紊乱，诱导肺，小肠上皮细胞，肝脏和肾脏细胞氧化应激和氧化损伤。研究表明添加高剂量(30-60mg/kg)的钒降低肉鸡肝脏和肾脏中SOD，GSH-Px浓度，导致MDA浓度升高，引起肝脏和肾脏氧化应激，以及肝细胞和肾脏细胞的凋亡和坏死。研究还发现高剂量的钒45和60mg/kg的钒能导致肉鸡肝脏和肾脏损伤。机体摄入钒以后，主要在肝脏，肾脏，骨骼中蓄积，但是钒的毒性也在其他组织和器官中体现。研究者也在蛋鸡输卵管膨大发现钒的蓄积。蛋鸡输卵管分为漏斗部，膨大部，峡部，子宫部和阴道部，是鸡蛋(除了蛋黄)形成的主要部位。其中卵白主要由输卵管膨大部管腺细胞(Magnum tubular gland cell-MTGCs)的内质网中合成和储存，并分泌到官腔，包裹在蛋黄外面，形成卵白层。输卵管膨大部的管腺细胞又分为A，B，C型，分布在膨大部黏膜褶皱中，其细胞核外包裹着活动旺盛的高尔基体和内质网，含有大量的分泌颗粒。研究者发现钒可能通过影响输卵管膨大部的形态(褶皱高度)而影响卵白形成过程中的运动，从而导致卵白品质的降低，但并为对其机制进行探讨。而浓厚卵白中卵粘蛋白(Ovomucin,OVW)的含量是决定与卵白品质(卵白高度和HU)的主要因素之一。添加钒能降低鸡蛋浓厚卵白中卵粘蛋白的含量。因此，钒的毒性作用可能通过对卵白形成主要部位的输卵管膨大部，产生氧化应激，导致管腺细胞的凋亡和坏死，损伤蛋鸡输卵管膨大部的形态结构和管腺细胞的结构完整性和功能正常性，从而影响鸡蛋卵白的形成和分泌，降低卵白品质。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于缓解蛋鸡钒中毒的饲料。
本发明还提供一种用于缓解蛋鸡钒中毒的饲料预混料，该预混料提高了商品蛋鸡机体的抗氧化能力，缓解了钒中毒引起的蛋白品质的变差以及蛋壳颜色的变白的问题。
本发明的另一目的是提供一种用于缓解蛋鸡钒中毒的饲料的制备方法。
本发明所采用的第一技术方案是，一种用于缓解蛋鸡钒中毒的饲料，按照质量份包括以下组分：玉米50份-70份、大豆油0.5份-2.5份、豆粕20份-30份、碳酸钙5份-10份、磷酸氢钙1份-2份、食盐0.1份-1份、氯化胆碱0.05份-0.15份、复合多维0.01份-0.05份、矿添预混料0.10份-1份、赖氨酸盐0.002份-0.003份、DL-蛋氨酸0.1份-0.2份、苏氨酸0.005份-0.006份、色氨酸0.02-0.03份、5000单位植酸酶0.01-0.02份、益生菌0.1-0.2份、预混料0.05份-0.15份。
进一步地，按照质量份包括以下组分：玉米60.58份、大豆油1.61份、豆粕27.17份、碳酸钙8.26份、磷酸氢钙1.19份、食盐0.40份、氯化胆碱0.10份、复合多维0.03份、矿添预混料0.50份、赖氨酸盐0.0026份、DL-蛋氨酸0.131份、苏氨酸0.0054份、色氨酸0.021份、5000单位植酸酶0.01份、益生菌0.1份、预混料0.1份。
进一步地，预混料按照质量份包括以下组分：维生素C 5份-10份，维生素E 1份-3份，茶多酚10份-30份，亚硒酸钠0.1份-1份，α-硫辛酸：0.1份-1份，砻糠：60份-75份。
本发明所采用的第二技术方案是，一种用于缓解蛋鸡钒中毒的饲料预混料，所述预混料按照质量份包括以下组分：维生素C 5份-10份，维生素E 1份-3份，茶多酚10份-30份，亚硒酸钠0.1份-1份，α-硫辛酸：0.1份-1份，砻糠：60份-75份。
进一步地，维生素C 10份，维生素E 2份，茶多酚20份，亚硒酸钠0.4份，α-硫辛酸：0.5份，砻糠：67.1份。
本发明所采用的第三技术方案是，一种用于缓解蛋鸡钒中毒的饲料的制备方法，包括以下步骤：
步骤1、制备预混料，称量，按照质量份称量以下组分：茶多酚10份-30份，维生素C5份-10份，维生素E 1份-3份，亚硒酸钠0.1份-1份，α-硫辛酸0.1份-1份，砻糠60份-75份，然后混合均匀，制成预混料；
步骤2、称量，按照质量份称量以下组分：玉米50份-70份、大豆油0.5份-2.5份、豆粕20份-30份、碳酸钙5份-10份、磷酸氢钙1份-2份、食盐0.1份-1份、氯化胆碱0.05份-0.15份、复合多维0.01份-0.05份、矿添预混料0.10份-1份、赖氨酸盐0.002份-0.003份、DL-蛋氨酸0.1份-0.2份、苏氨酸0.005份-0.006份、色氨酸0.02-0.03份、5000单位植酸酶0.01-0.02份、益生菌0.1-0.2份、预混料0.05份-0.15份；
步骤3、将玉米和豆粕粉碎粒度1500μm，再将上述各组分通过逐级混合的方式，混合均匀，制成配合饲料。
本发明的有益效果是：本发明根据营养素的理化特性、营养特性、应激条件下的特异功效等进行合理组合，筛选出能有效降低蛋鸡钒中毒发生的饲料添加剂预混料配方和饲料添加剂配方，本发明通过筛选出维生素C、维生素E、茶多酚、亚硒酸钠、α-硫辛酸的用量，根据其功能互补性、叠加性原理组建成一种预混料产品。该预混料不但可以改善蛋鸡的产蛋性能，提高蛋品质，更能从改善肉鸡血液理化参数、机体抗氧化能力、调节氧化应激相关基因表达等方面来提高蛋鸡健康状况，缓解蛋鸡钒中毒的发生。
附图说明
图1是本发明蛋壳颜色评分标准；
图2是本发明预混料对对照和添加钒处理组蛋鸡输卵管膨大部氧化应激相关基因的相对表达量的影响，其中，每组左侧的柱状图代表Nrf2(NF-E2-related factor,转录因子NF-E2相关因子2)基因不同处理的差异显著，每组右侧的柱状图代表NQO1(Quinoneoxidoreductase,醌氧化还原酶)基因不同处理的差异显著；
图3是本发明预混料对前期添加钒处理组蛋鸡鸡蛋蛋壳颜色L的影响；
图4是本发明预混料对前期添加钒处理组蛋鸡鸡蛋蛋壳颜色a的影响；
图5是本发明预混料对前期添加钒处理组蛋鸡鸡蛋蛋壳颜色b的影响；
图6是本发明预混料对前期添加钒处理组蛋鸡鸡蛋蛋白哈夫单位的影响；
图7是本发明预混料对前期添加钒处理组蛋鸡鸡蛋蛋白高度的影响。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行详细说明。
本发明提供一种用于缓解蛋鸡钒中毒的饲料，按照质量份包括以下组分：玉米50份-70份、大豆油0.5份-2.5份、豆粕20份-30份、碳酸钙5份-10份、磷酸氢钙1份-2份、食盐0.1份-1份、氯化胆碱0.05份-0.15份、复合多维0.01份-0.05份、矿添预混料0.10份-1份、赖氨酸盐0.002份-0.003份、DL-蛋氨酸0.1份-0.2份、苏氨酸0.005份-0.006份、色氨酸0.02-0.03份、5000单位植酸酶0.01-0.02份、益生菌0.1-0.2份、预混料0.05份-0.15份。
本发明还提供一种用于缓解蛋鸡钒中毒的饲料预混料，所述预混料按照质量份包括以下组分：维生素C 5份-10份，维生素E 1份-3份，茶多酚10份-30份，亚硒酸钠0.1份-1份，α-硫辛酸：0.1份-1份，砻糠：60份-75份。
其中，茶多酚10份-30份，维生素C 5份-10份，维生素E 1份-3份，亚硒酸钠0.1份-1份，α-硫辛酸：0.1份-1份，小于其各自限量范围的最小值，会使得该预混料(0.1％添加水平)缓解蛋鸡饲粮中钒引起的蛋品质特别是蛋清品质和蛋壳颜色的影响效果不显著，而高于此限量范围的最大值会导致一定的负面的影响，1)存在健康隐患：茶多酚的添加水平过高，会影响饲粮的饲口性，降低采食量；维生素水平过高由于其本身属性，长期高水平的添加高剂量的维生素C有可能导致动物机体的氧化应激，反而不利于蛋鸡的健康。亚硒酸钠的过量添加则会导致动物中毒，从而影响蛋鸡的健康。2)增加饲养成本。
本发明还提供一种用于缓解蛋鸡钒中毒的饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤：
步骤1、制备预混料，制备预混料，称量，按照质量份称量以下组分：茶多酚10份-30份，维生素C 5份-10份，维生素E 1份-3份，亚硒酸钠0.1份-1份，α-硫辛酸0.1份-1份，砻糠60份-75份，然后混合均匀，制成预混料；
步骤2、称量，按照质量份称量以下组分：玉米50份-70份、大豆油0.5份-2.5份、豆粕20份-30份、碳酸钙5份-10份、磷酸氢钙1份-2份、食盐0.1份-1份、氯化胆碱0.05份-0.15份、复合多维0.01份-0.05份、矿添预混料0.10份-1份、赖氨酸盐0.002份-0.003份、DL-蛋氨酸0.1份-0.2份、苏氨酸0.005份-0.006份、色氨酸0.02-0.03份、5000单位植酸酶0.01-0.02份、益生菌0.1-0.2份、预混料0.05份-0.15份；
步骤3、将玉米和豆粕粉碎粒度1500μm，再将上述各组分通过逐级混合的方式，混合均匀(混合变异系数≤5％)，制成配合饲料。
实施例1
按照质量份称量以下组分：茶多酚20份，维生素C10份，维生素E 2份，亚硒酸钠0.4份，α-硫辛酸0.5份，砻糠67.1份，然后混合均匀，制成预混料；按照质量份称量以下组分：玉米60.47份、大豆油1.61份、豆粕27.17份、碳酸钙8.26份、磷酸氢钙1.19份、食盐0.4份、氯化胆碱0.1份、复合多维0.03份、矿添预混料0.5份、赖氨酸盐0.0026份、DL-蛋氨酸0.131份、苏氨酸0.0054份、色氨酸0.021份、5000单位植酸酶0.01份、益生菌0.1份、预混料0.1份；将玉米和豆粕粉碎粒度1500μm，再将上述各组分通过逐级混合的方式，混合均匀(混合变异系数≤5％)，制成配合饲料。
实施例2
按照质量份称量以下组分：茶多酚10份，维生素C 8份，维生素E 3份，亚硒酸钠0.1份，α-硫辛酸1份，砻糠60份，然后混合均匀，制成预混料；按照质量份称量以下组分：玉米50份、大豆油2.5份、豆粕20份、碳酸钙10份、磷酸氢钙1份、食盐1份、氯化胆碱0.05份、复合多维0.05份、矿添预混料0.10份、赖氨酸盐0.003份、DL-蛋氨酸0.1份、苏氨酸0.006份、色氨酸0.02、5000单位植酸酶0.02份、益生菌0.2份、预混料0.05份；将玉米和豆粕粉碎粒度1500μm，再将上述各组分通过逐级混合的方式，混合均匀，制成配合饲料。
实施例3
按照质量份称量以下组分：茶多酚30份，维生素C 5份，维生素E 1份，亚硒酸钠1份，α-硫辛酸0.1份，砻糠75份，然后混合均匀，制成预混料；按照质量份称量以下组分：玉米70份、大豆油0.5份、豆粕30份、碳酸钙5份、磷酸氢钙2份、食盐0.1份、氯化胆碱0.15份、复合多维0.01份、矿添预混料1份、赖氨酸盐0.002份、DL-蛋氨酸0.2份、苏氨酸0.005份、色氨酸0.03份、5000单位植酸酶0.015份、益生菌0.18份、预混料0.15份；将玉米和豆粕粉碎粒度1500μm，再将上述各组分通过逐级混合的方式，混合均匀，制成配合饲料。
下面结合具体的实验来说明本发明的有益效果：
本发明的目的是合理搭配不同功效的饲料添加剂来提高蛋鸡的健康状况，缓解蛋鸡钒引起的毒性。
本发明开展了系统研究，采用罗曼蛋鸡为试验动物，在不同钒添加水平下(0、5mg/kg)条件下饲喂含0.1％本发明预混料，探明了该预混料在通过改善不同钒水平下蛋鸡产蛋率、蛋品质、机体抗氧化能力、以及与输卵管膨大部抗氧化相关基因的表达等来缓解攻毒期钒的毒性，并验证了饲喂该预混料可以缩短饲喂含钒饲粮后蛋鸡的恢复期，从而实现本发明的目的。
试验1验证该发明预混料对低温诱导肉鸡腹水综合征的预防作用
本试验采用2×2因子试验设计，分为4个处理，处理1：对照组(CON：基础饲粮，不添加钒)；处理2：对照组+0.1％预混料(CON+0.1％premix)；处理3：钒处理组(CON+V，CON+5mg/kg钒；处理4：处理3+0.1％预混料饲粮(CON+V+0.1％premix)。每个处理8个重复，每个重复10只鸡。试验期12周。钒以偏钒酸铵的形式添加，试验基础饲粮为玉米-豆粕型粉料，参照NRC(1994)蛋鸡饲养标准配制，基础饲粮中的营养水平可满足或超过产蛋高峰蛋鸡的营养需要。日粮配方见表1。
表1基础日粮组成和营养价值(风干物基础)
矿添预混料：4.03％FeSO4·H2O,0.64％CuSO4·5H2O,3.80％MnSO4·H2O,4.67％ZnSO4·H2O，0.19％KI，统糠86.06％。
结果如下所示：
表2该发明预混料对对照和添加钒处理组蛋鸡生长性能的影响
同行标有不同小写字母表示差异显著(P<0.05),下表同。
CON：基础饲粮，不添加钒；CON+0.1％premix：对照组+0.1％预混料；CON+V：CON+5mg/kg钒；CON+V+0.1％premix：处理3+0.1％预混料饲粮，下表3同。
由表2可知，给蛋鸡饲喂含5mg/kg钒饲粮可以引起脏蛋和软壳蛋率的增加，而在含钒饲粮中添加0.1％的该预混料可以降低脏蛋和软壳蛋率。
表3该发明预混料对对照组和添加钒处理组蛋鸡蛋品质的影响
L*：蛋壳亮度值，a*蛋壳红色值，b*蛋壳黄色值。
由表3可知，给蛋鸡饲喂含5mg/kg钒饲粮显著降低蛋白高度，哈夫单位，蛋壳红色值和黄色值，加深蛋壳的亮度值，而含钒饲粮中添加0.1％的该预混料可以改善由钒引起的蛋白高度，哈夫单位，蛋壳红色值和黄色值的降低，和亮度值的增加。
表4该发明预混料对对照和添加钒处理组蛋鸡蛋壳颜色评分的影响(％)
蛋壳评分为1-5分，随分数的增加，蛋壳的颜色逐渐加深，具体评分标准参照图1。由表4可知，给蛋鸡饲喂含5mg/kg钒饲粮增加浅色鸡蛋(1、2分)的比例，降低深色鸡蛋(4、5分)的比例，而添加该预混料缓解此效果，提高深色鸡蛋(4分)的比例。
表5该发明预混料对对照和添加钒处理组蛋鸡机体抗氧化水平的影响
其中，GSH-PX(glutathione peroxidase):谷胱甘肽过氧化物酶,GST(glutathione-s-transferase):谷胱甘肽硫转移酶，MDA(malondialdehy de)：丙二醛，T-SOD(total-superoxide dismutase)，总超氧化物歧化酶，CAT(catalase)：过氧化氢酶，T-AOC(total-antioxidant capacity)：总抗氧化能力。
由表5可知，给蛋鸡饲喂含5mg/kg钒饲粮降低抗氧化酶GSH-PX,GST,T-SOD，CAT的活性和总抗氧化能力(T-AOC)，增加丙二醛的含量，引发氧化应激，造成氧化损伤，而添加该预混料后，可以明显提高GST，TSOD的活性和总抗氧化能力。
输卵管膨大部是鸡蛋蛋白形成的主要部位，由图2可知，给蛋鸡饲喂含5mg/kg钒饲粮下调了输卵管膨大部Nrf2和NQO1基因的相对表达量，而该预混料可以在有无钒存在的情况下均能上调Nrf2和NQO1基因的相对表达量，说明该预混料可以通过调节抗氧化应激相关通路关键基因的表达从而缓解氧化应激。
结果表明：该预混料可调节抗氧化应激相关通路关键基因的表达，提高抗氧化酶的活性，提升蛋鸡机体抗氧化能力，从而降低钒诱发的氧化损伤，改善钒引起的鸡蛋蛋白品质和蛋壳颜色的改变。
试验2消除试验：验证该发明预混料缩短饲喂含钒饲粮后蛋鸡的恢复期
本试验采用单因素试验设计，分为3个处理，处理1：对照组(CON：基础饲粮，不添加钒)；处理2：钒处理组(CON+V，CON+5mg/kg钒；处理3：处理2+0.1％预混料饲粮(CON+V+0.1％premix)。每个处理8个重复，每个重复10只鸡。试验期8周，分为两个时期(攻毒期5周，消除期3周)，攻毒期饲喂试验饲粮，消除期所有试验处理均饲喂基础饲粮。钒以偏钒酸铵的形式添加，基础饲粮中的营养水平可满足或超过产蛋高峰蛋鸡的营养需要。日粮配方同试验1。
由图3-图7所示，前期饲喂5周含钒的饲粮，停喂1周后，其蛋白的高度，哈夫单位，蛋壳亮度值和红色值依然受到前期添加钒的影响，且前期钒对黄色值的影响持续到停喂2周以后，而在前期饲喂含钒饲粮同时添加该预混料的处理组的蛋白高度，哈夫单位，蛋壳亮度，红色和黄色值在停喂第一周均与对照组差异不显著，说明该预混料可以缩短饲喂含钒饲粮蛋鸡的恢复期。
本发明涉及的茶多酚、维生素C均属于天然的抗氧化剂，在以往的离体和动物试验研究已经证明日粮中添加一定水平的维生素C和亚硒酸钠等抗氧化剂可以用以缓减由钒引起毒性，减轻蛋鸡生产性能的降低，内在蛋品质的改变，和蛋壳颜色的变化等。维生素C是最重要的天然的抗氧化剂，具有有效清除自由基(O2-，H2O2，OH-，和LOO-)的能力，保护细胞免收由氧化应激导致的DNA损伤，降低炎症反应，在癌症防治，肿瘤的发生，细胞的凋亡过程中起重要的作用。近年来的研究证明添加VC可以通过Nrf2-ARE通路上调NQO1和SOD的表达，缓解乳腺癌小鼠乳腺细胞的氧化应激和DNA损伤。
Claims (3)
1.一种用于缓解蛋鸡钒中毒的饲料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1、制备预混料，称量，按照质量份称量以下组分：茶多酚10份-30份，维生素C 5份-10份，维生素E 1份-3份，亚硒酸钠0.1份-1份，α-硫辛酸0.1份-1份，砻糠60份-75份，然后混合均匀，制成预混料；
步骤2、称量，按照质量份称量以下组分：玉米50份-70份、大豆油0.5份-2.5份、豆粕20份-30份、碳酸钙5份-10份、磷酸氢钙1份-2份、食盐0.1份-1份、氯化胆碱0.05份-0.15份、复合多维0.01份-0.05份、矿添预混料0.10份-1份、赖氨酸盐0.002份-0.003份、DL-蛋氨酸0.1份-0.2份、苏氨酸0.005份-0.006份、色氨酸0.02-0.03份、5000单位植酸酶0.01-0.02份、益生菌0.1-0.2份、预混料0.05份-0.15份；
步骤3、将玉米和豆粕粉碎粒度1500μm，再将上述各组分通过逐级混合的方式，混合均匀，制成配合饲料。
2.一种用于缓解蛋鸡钒中毒的饲料预混料，其特征在于，所述预混料按照质量份由以下组分构成：维生素C 5份-10份，维生素E 1份-3份，茶多酚10份-30份，亚硒酸钠0.1份-1份，α-硫辛酸：0.1份-1份，砻糠：60份-75份。
3.根据权利要求2所述的用于缓解蛋鸡钒中毒的饲料预混料，其特征在于，维生素C 10份，维生素E 2份，茶多酚20份，亚硒酸钠0.4份，α-硫辛酸：0.5份，砻糠：67.1份。
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Citations (1)
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| CN102318781A (zh) * | 2011-10-20 | 2012-01-18 | 辽宁禾丰牧业股份有限公司 | 一种提高商品蛋率的蛋鸡后期专用配合饲料 |
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Patent Citations (1)
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| 重金属-钒在家禽生产中的影响;王建萍等;《饲料与畜牧》;20131231(第2期);第54-56页 |
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| CN105076748A (zh) | 2015-11-25 |
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