CN105030628A - 一种草绿盐角草细胞精华素及其制备方法 - Google Patents
一种草绿盐角草细胞精华素及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
一种草绿盐角草细胞精华素及其制备方法。本发明的护肤品,包括以下原料按照重量份比例混合:干细胞提取物28~32%,草绿盐角草提取物3-5%,甘油3~7%,乳酸0.2~0.8%,海藻糖0.7~1.3%,维生素A醋酸酯0.2~0.5%,维生素E醋酸酯0.1~0.3%,4’,6,7-三羟基异黄酮0.1~0.3%,二氧化钛0.5~0.7%,黄原胶0.01~0.02%,三乙醇胺0.02~0.03%,肉豆蔻酸异丙酯2~4%,丙二醇0.8~1%,透明质酸钠0.02~0.07%,防腐剂0.8~1.2%,其余为去离子水;所述的干细胞提取物为植物干细胞提取物或羊脐带血干细胞提取物;本发明产品,对皮肤的柔软度、肌肤紧致度及其弹性都非常好。
Description
技术领域
本发明涉及一种抗衰老的护肤品,具体为草绿盐角草提取物细胞精华素及其制备方法。属于化妆品技术领域。
背景技术
在皮肤抗衰老的化妆品,有多种方法,比如通过激素、植物提取物等配方对皮肤进行去皱处理,然而这些方法不能从根本上达到抗衰老的作用,激素使用对人体有危害,并且只能取得短期效果,长期使用加剧皮肤老化,而植物提取物的效果不明显,需要长期使用。
随着生活水平的不断提高,人们对健康尤其是皮肤的保养越来越受到重视。皮肤组织是人体最大组织器官,覆盖在人体表面,阻隔自然界一切有害物质对生命机体产生的损害作用。但是,随着年龄的增加,皮肤组织器官的功能逐渐老化,从美学观点看,严重影响人们对生命的热情;从生理学的角度看,影响人体内部器官的有效保护。皮肤老化的主要原因是,在新陈代谢过程中需要的各种营养物质数量和质量不能从饮食中得到生理性满足,从而导致生命细胞核内的生命遗传物质载体DNA的合成原料的数量逐渐减少,最终导致其调空合成的蛋白质种类和数量减少,细胞代谢能力随之下降,寿命相对缩短。皮肤过度衰老现象的表现是:皮肤松弛、皱纹增多加深、毛孔增大、皮肤纹理变粗变乱、皮肤弹性下降等。目前,市面上用于护肤的产品大多保湿,功效有限。
人类脐带间充质干细胞(humanumbilicalmesenchymalstemcells,HUMSC)和胎盘干细胞(placentalstemcell,PSC)来源于妇女分娩时的废弃的脐带和胎盘组织。脐带内含二条脐动脉、一条脐静脉,在动静脉之间含有特殊的胚胎粘液样结缔组织-华尔通氏胶(WhartonpsJelly),从华尔通氏胶分离得到的基质细胞即为人脐带间充质干细胞(humanumbilicalmesenchymalstemcell,HUMSC)。胎盘是胎儿从母体吸取营养的场所,分为羊膜层、绒毛层及脱基底膜层。HUMSC和PSC具有多向分化潜能和可塑性,可分化成三个胚层来源的组织细胞,如成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、胰岛细胞、神经细胞、心肌细胞、生殖细胞(如精原细胞、卵母细胞等),并能分泌丰富的营养因子。这些丰富的营养因子不仅可以延缓皮肤干细胞的衰老,还可以促进表皮干细胞和毛囊干细胞增殖,对保持皮肤弹性和健康具有重要作用。
发明内容
针对上述技术问题,本发明提供一种效果明显、疗效短并且无副作用的抗衰老护肤品,具体技术方案为:
本发明产品的草绿盐角草提取物细胞精华素,包括以下原料按照重量份比例混合:细胞提取物28~32%,草绿盐角草提取物3-5%,甘油3~7%,乳酸0.2~0.8%,海藻糖0.7~1.3%,维生素A醋酸酯0.2~0.5%,维生素E醋酸酯0.1~0.3%,4’,6,7-三羟基异黄酮0.1~0.3%,二氧化钛0.5~0.7%,黄原胶0.01~0.02%,三乙醇胺0.02~0.03%,肉豆蔻酸异丙酯2~4%,丙二醇0.8~1%,透明质酸钠0.02~0.07%,防腐剂0.8~1.2%,其余为去离子水;所述的细胞提取物为干细胞提取物;所述的干细胞提取物提取物为胎盘干细胞提取物或者植物干细胞提取物。
甘油、海藻糖、维生素A醋酸酯、维生素E醋酸酯、4’,6,7-三羟基异黄酮、透明质酸钠、黄原胶、三乙醇胺、肉豆蔻酸异丙酯、丙二醇、透明质酸钠、防腐剂和去离子水混合加热至75~80℃,均质乳化;
降温至室温后,加入乳酸、氧化钛、干细胞提取物,搅拌均匀后真空脱气。
优选方案为:包括以下原料按照重量份比例混合:细胞提取物30%,草绿盐角草提取物4%,甘油5%,乳酸0.5%,海藻糖1%,维生素A醋酸酯0.3%,维生素E醋酸酯0.2%,4’,6,7-三羟基异黄酮0.2%,二氧化钛0.6%,黄原胶0.015%,三乙醇胺0.025%,肉豆蔻酸异丙酯3%,丙二醇1%,透明质酸钠0.05%,防腐剂1%,其余为去离子水。
其中,草绿盐角草(SALICORNIAHERBACEA)提取物的制备方法为:
其中,草绿盐角草提取物制备方法为:按照重量比为1比8-10的重量份比例将草绿盐角草与去离子水混合,保持在0-4℃的温度浸泡2小时到24小时,破碎草绿盐至悬浊液,然后按照0.2-0.4升/千克的比例加入壳聚糖;再加入质量比为3%~6%乙醇,静置2小时;取109AB-8大孔树脂装柱5份,在PH6-7下,提取液浓度在0.1-0.2克每升时取50ml上柱,上样流速为2BV/h,先用去离子水澄清,再用3BV50%乙醇按照2BV/h的流速洗脱得到提取物。其中,提取效果更好的方法是在用去离子水浸泡草绿盐角草的时候加入与草绿盐角草等重量份的冬青油,这个是本发明经过多次试验发现的,经过发明人研究,冬青油是水溶性的,可以将草绿盐角草中的水溶性成份进一步溶出。这是由于冬青油具有皮肤血管扩张、肤色发红等刺激反应的作用,在于草绿盐角草共同作用的时候产生协同作用,可以使得本发明的产品更进一步使得皮肤吸收,迅速改变人体皮肤状态。另外,本发明的发明人惊奇地发现,草绿盐角草提取物单独使用的时候效果并不是十分理想,但是与干细胞提取物混合后的效果却非常好,经过单独干细胞配料、草绿盐角草配料的化妆品与两者混合使用的化妆品的对比发现,在皮肤弹性、皱纹减少和皮肤光嫩方面,具有非常大的进步。
本发明的干细胞提取物优选为植物干细胞提取物;
植物干细胞(Plantstemcell)包含有关于植物发育和生长的所有程式,拥有永恒生命力的细胞(immortalcell),是植物生命力的根源(origin)。植物干细胞存在于被称为分生组织的特殊构造内,具有非常惊人的再生能力。这些使得植物可以在数百年间不断生长,并生成全新的器官。《自然》415,715-754(2002)本发明采用的是商购获得的苹果干细胞、番茄干细胞和葡萄干细胞,但是为了更切合本发明的发明目的,发明人经过多次试验,将苹果干细胞进行了处理和调整,使得本发明的效果更好,具体的方法如下:
按照重量比例1∶1∶1∶2将苹果干细胞、番茄干细胞,葡萄干细胞和维生素C混合;
常规方法体外培养并收集培养物;
收集上清液中分子量相遇5000Da的成份,进行冷冻干燥,其中,冷冻干燥的方法如下:0摄氏度5-10分钟,-10摄氏度10-20分钟,-20摄氏度2-3小时,然后-35摄氏度保存超过5小时,进行冷冻干燥,这是本发明的一个发明点经过了这个方法,可以最大限度保持细胞活性物质,对最终产品的效果具有非常好的促进作用。
干细胞提取物再优选为羊脐带血干细胞提取物。
本发明的取得羊脐带血干细胞提取物的方法如下:
(1)脐带及胎盘的采集。选足月母羊,病毒检测,在无菌条件下取得羊脐带血和胎盘,0摄氏度条件下运至GMP车间,放入液氮罐内进行保存。(2)收集足量的胎盘和羊脐带血后,准备生产和加工。在冰上,用PBS将脐带与胎盘冲洗两次,剪断分开,去除血管和外膜后并剪成0.5-3mm3大小的组织块,用组织匀浆机将脐带和胎盘制成组织匀浆,800-900转/分钟离心2-20分钟后去除组织残块,上清液置于冰箱内。优选地,可以将此上清液按照1∶1的重量比例加入到干细胞提取物中作为一个整体使用于本发明的产品中。
其中,所述的干细胞提取物制备方法为:
1)、羊脐带血干细胞的破碎:将羊脐带血干细胞悬液50毫升,采用超声波破碎法,利用超声波振荡器发射9~10千周声波处理3-9分钟;
2)、向溶液中加入10倍体积生理盐水后,3000转/分钟,离心20分钟;
3)、取上清液,加入20%无水乙醇,混匀,放置15分钟(乙醇沉淀法);
4)、将溶液3000转/分钟,离心20分钟;
5)、弃上清液,取沉淀,加入生理盐水50毫升,轻轻摇匀,将沉淀溶解成透明溶液,即为羊脐带血干细胞活性蛋白粗提液;
本发明提供的干细胞精华素,从细胞的角度,有针对性地补充活性细胞或活化已有细胞的功能。在皮肤众多的细胞中,皮肤干细胞是各种细胞更新换代的“种子细胞”,是可以产生各种类型细胞的原始细胞。干细胞精华素通过表皮吸收后,深入到真皮层和皮下组织,全面激活皮肤内干细胞分化,快速地更新替换衰老的细胞。从而增加胶原分泌,改善皮肤弹性;促进蛋白的合成活性化,增强皮肤柔软度;刺激肌层产生成纤维细胞及肌肤蛋白质,增加肌肤紧致度及其弹性,增强皮肤弹力,令皮肤紧绷。吞噬色素消除色斑;有助抚平细纹、皱纹,重塑脸部轮廓,令肌肤变得紧致、柔嫩、细腻滋润,减少皱纹,使皮肤总体呈现年轻态。
具体实施方式
结合实施例说明本发明的具体实施方式。
实施例1
干细胞精华素,包括以下原料按照重量份比例混合:干细胞提取物30%,草绿盐角草提取物5%,甘油5%,乳酸0.5%,海藻糖1%,维生素A醋酸酯0.3%,维生素E醋酸酯0.2%,4’,6,7-三羟基异黄酮0.2%,二氧化钛0.6%,黄原胶0.015%,三乙醇胺0.025%,肉豆蔻酸异丙酯3%,丙二醇1%,透明质酸钠0.05%,防腐剂1%,其余为去离子水。
所述的干细胞提取物为羊脐带血干细胞;
甘油、海藻糖、透明质酸钠、防腐剂和去离子水混合加热至80℃,均质乳化;
降温至室温后,加入乳酸、干细胞提取物,搅拌均匀后真空脱气。
其中,所述的干细胞提取物制备方法为:采集羊的脐带血加入抗凝剂,保持在4℃的温度,用生理盐水稀释,羊脐带血和生理盐水体积比为1∶1;
将稀释后的羊脐带血加入到胎盘活性抽提液中,稀释的羊脐带血与胎盘活性抽提液的体积比为1∶1,再加入质量比为6%明胶溶液,明胶溶液与胎盘活性抽提液的体积比为0.3∶1.进行梯度离心分离,获取液相交界面细胞悬液;
所述的胎盘活性抽提液的制备方法如下:取新鲜羊胎盘,洗净并去除筋膜,剪碎后称重,进行组织研磨,加入羊胎盘重量1~2倍的生理盐水,进行高速组织匀浆,匀浆后的胎盘为均匀的肉糜状,然后将羊胎盘匀浆在-30℃~-40℃下冷冻48小时后于25℃下溶化,如此反复冻溶2~3次。再经5000~70000r/min冷冻离心25~30分钟,取上清液静止透析24~48小时或真空透析10~12小时即可得到胎盘活性抽提液。
细胞悬液用磷酸盐缓冲液进行洗涤两次得到干细胞;
洗涤后的干细胞放入1640培养基中测定活性,活性大于95%即合格;
合格的干细胞使用流体剪切力对干细胞进行剪切成超小分子活性物质。
实施例2
干细胞精华素,包括以下原料按照重量份比例混合:干细胞提取物28%,草绿盐角草提取物3%,甘油7%,乳酸0.2%,海藻糖0.7%,维生素A醋酸酯0.2%,维生素E醋酸酯0.3%,4’,6,7-三羟基异黄酮0.1%,二氧化钛0.7%,黄原胶0.02%,三乙醇胺0.03%,肉豆蔻酸异丙酯4%,丙二醇0.8%,透明质酸钠0.07%,防腐剂0.8%,其余为去离子水;所述的干细胞提取物为羊脐带血干细胞;
甘油、海藻糖、透明质酸钠、防腐剂和去离子水混合加热至75℃,均质乳化;
降温至室温后,加入乳酸、干细胞提取物,搅拌均匀后真空脱气。
其中,所述的干细胞提取物制备方法为:采集羊的脐带血加入抗凝剂,保持在4℃的温度,用生理盐水稀释,羊脐带血和生理盐水体积比为1∶1;
将稀释后的羊脐带血加入到胎盘活性抽提液中,稀释的羊脐带血与胎盘活性抽提液的体积比为1.2∶1,再加入质量比为3%明胶溶液,明胶溶液与胎盘活性抽提液的体积比为0.5∶1.进行梯度离心分离,获取液相交界面细胞悬液;
细胞悬液用磷酸盐缓冲液进行洗涤两次得到干细胞;
洗涤后的干细胞放入1640培养基中测定活性,活性大于95%即合格;
合格的干细胞使用流体剪切力对干细胞进行剪切成超小分子活性物质。
实施例3
干细胞精华素,包括以下原料按照重量份比例混合:干细胞提取物32%,草绿盐角草提取物4%,甘油3%,乳酸0.8%,海藻糖1.3%,维生素A醋酸酯0.5%,维生素E醋酸酯0.1%,4’,6,7-三羟基异黄酮0.3%,二氧化钛0.5%,黄原胶0.01%,三乙醇胺0.02%,肉豆蔻酸异丙酯2%,丙二醇1%,透明质酸钠0.02%,防腐剂1.2%,其余为去离子水;所述的干细胞提取物为羊脐带血干细胞;
甘油、海藻糖、透明质酸钠、防腐剂和去离子水混合加热至80℃,均质乳化;
降温至室温后,加入乳酸、干细胞提取物,搅拌均匀后真空脱气。
其中,所述的干细胞提取物制备方法为:
其中,所述的干细胞提取物制备方法为:按照重量比例1∶1∶1∶2将苹果干细胞、番茄干细胞,葡萄干细胞和维生素C混合;
常规方法体外培养并收集培养物;
收集上清液中分子量相遇5000Da的成份,进行冷冻干燥,其中,冷冻干燥的方法如下:0摄氏度5-10分钟,-10摄氏度10-20分钟,-20摄氏度2-3小时,然后-35摄氏度保存超过5小时,进行冷冻干燥,这是本发明的一个发明点经过了这个方法,可以最大限度保持细胞活性物质,对最终产品的效果具有非常好的促进作用。
合格的干细胞使用流体剪切力对干细胞进行剪切成超小分子活性物质。
实施例4
干细胞精华素,包括以下原料按照重量份比例混合:干细胞提取物28%,草绿盐角草提取物2%,甘油7%,乳酸0.2%,海藻糖0.7%,维生素A醋酸酯0.2%,维生素E醋酸酯0.3%,4’,6,7-三羟基异黄酮0.1%,二氧化钛0.7%,黄原胶0.02%,三乙醇胺0.03%,肉豆蔻酸异丙酯4%,丙二醇0.8%,透明质酸钠0.07%,防腐剂0.8%,其余为去离子水;所述的干细胞提取物为羊脐带血干细胞;
甘油、海藻糖、透明质酸钠、防腐剂和去离子水混合加热至75℃,均质乳化;
降温至室温后,加入乳酸、干细胞提取物,搅拌均匀后真空脱气。
其中,所述的干细胞提取物制备方法为:采集羊的脐带血加入抗凝剂,保持在4℃的温度,用生理盐水稀释,羊脐带血和生理盐水体积比为1∶1;
将稀释后的羊脐带血加入到胎盘活性抽提液中,稀释的羊脐带血与胎盘活性抽提液的体积比为1.2∶1,再加入质量比为3%明胶溶液,明胶溶液与胎盘活性抽提液的体积比为0.5∶1.进行梯度离心分离,获取液相交界面细胞悬液;
细胞悬液用磷酸盐缓冲液进行洗涤两次得到干细胞;
洗涤后的干细胞放入1640培养基中测定活性,活性大于95%即合格;
合格的干细胞使用流体剪切力对干细胞进行剪切成超小分子活性物质。
实施例5
干细胞精华素,包括以下原料按照重量份比例混合:干细胞提取物32%,草绿盐角草提取物2%,甘油7%,乳酸0.2%,海藻糖0.7%,维生素A醋酸酯0.2%,维生素E醋酸酯0.3%,4’,6,7-三羟基异黄酮0.1%,二氧化钛0.7%,黄原胶0.02%,三乙醇胺0.02%,肉豆蔻酸异丙酯4%,丙二醇0.8%,透明质酸钠0.07%,防腐剂0.8%,其余为去离子水;所述的干细胞提取物为羊脐带血干细胞;
甘油、海藻糖、透明质酸钠、防腐剂和去离子水混合加热至75℃,均质乳化;
降温至室温后,加入乳酸、干细胞提取物,搅拌均匀后真空脱气。
其中,所述的干细胞提取物制备方法为:采集羊的脐带血加入抗凝剂,保持在4℃的温度,用生理盐水稀释,羊脐带血和生理盐水体积比为1∶1;
将稀释后的羊脐带血加入到胎盘活性抽提液中,稀释的羊脐带血与胎盘活性抽提液的体积比为1.2∶1,再加入质量比为3%明胶溶液,明胶溶液与胎盘活性抽提液的体积比为0.5∶1.进行梯度离心分离,获取液相交界面细胞悬液;
细胞悬液用磷酸盐缓冲液进行洗涤两次得到干细胞;
洗涤后的干细胞放入1640培养基中测定活性,活性大于95%即合格;
合格的干细胞使用流体剪切力对干细胞进行剪切成超小分子活性物质。
本发明的另外一个发明点还在于,配置了一种天然植物混合液,在均质乳化之前,将其按照重量份7%的比例加入后,一起与其他原材料进行均质和乳化,其中,所述的天然植物混合液的制备方法为:将生姜、薄荷、老鹳草(HERBAERODII/HERBAGERANII)按重量份1∶1∶1混合后(优选混合前将全部组份干燥到含水量为1-3%),分别用机械绞碎,压榨出汁液,残渣加入到乙醇水溶液中,搅拌2小时后,过滤去残渣,滤液和汁液混合得到提取液;乙醇水溶液为乙醇与水体积比为0.5-0.8∶1混合制的;残渣与乙醇水溶液的重量比为1∶1。因为此天然植物混合成份具有消毒、提味的作用,使得本产品在不加入防腐剂的前提下,也可以拥有更长时间保质期,因为本发明产品的营养异常丰富,所以加入这个组份也是在工业上非常有用的。
实施例6
干细胞精华素,包括以下原料按照重量份比例混合:干细胞提取物32%,草绿盐角草提取物2%,甘油7%,乳酸0.2%,海藻糖0.7%,维生素A醋酸酯0.2%,维生素E醋酸酯0.3%,4’,6,7-三羟基异黄酮0.1%,二氧化钛0.7%,黄原胶0.02%,三乙醇胺0.02%,肉豆蔻酸异丙酯4%,丙二醇0.8%,透明质酸钠0.07%,防腐剂0.8%,其余为去离子水;所述的干细胞提取物为羊脐带血干细胞;
甘油、海藻糖、透明质酸钠、防腐剂和去离子水混合加热至75℃,均质乳化;
降温至室温后,加入乳酸、干细胞提取物,搅拌均匀后真空脱气。
其中,所述的干细胞提取物制备方法为:
其中,所述的干细胞提取物制备方法为:按照重量比例1∶1∶1∶2将苹果干细胞、番茄干细胞,葡萄干细胞和维生素C混合;
常规方法体外培养并收集培养物;
收集上清液中分子量相遇5000Da的成份,进行冷冻干燥,其中,冷冻干燥的方法如下:0摄氏度5-10分钟,-10摄氏度10-20分钟,-20摄氏度2-3小时,然后-35摄氏度保存超过5小时,进行冷冻干燥,这是本发明的一个发明点经过了这个方法,可以最大限度保持细胞活性物质,对最终产品的效果具有非常好的促进作用。
合格的干细胞使用流体剪切力对干细胞进行剪切成超小分子活性物质。
本发明的另外一个发明点还在于,配置了一种天然植物混合液,在均质乳化之前,将其按照重量份3%的比例加入后,一起与其他原材料进行均质和乳化,其中,所述的天然植物混合液的制备方法为:将生姜、薄荷、老鹳草(HERBAERODII/HERBAGERANII)按重量份1∶1∶1混合后(优选混合前将全部组份干燥到含水量为1-3%),分别用机械绞碎,压榨出汁液,残渣加入到乙醇水溶液中,搅拌2小时后,过滤去残渣,滤液和汁液混合得到提取液;乙醇水溶液为乙醇与水体积比为0.5-0.8∶1混合制的;残渣与乙醇水溶液的重量比为1∶1。因为此天然植物混合成份具有消毒、提味的作用,使得本产品在不加入防腐剂的前提下,也可以拥有更长时间保质期,因为本发明产品的营养异常丰富,所以加入这个组份也是在工业上非常有用的。
保持在0-4℃的温度浸泡2小时到24小时,破碎草绿盐至悬浊液,然后按照0.2-0.4升/千克的比例加入壳聚糖;再加入质量比为3%~6%乙醇,静置2小时;取109AB-8大孔树脂装柱5份,在PH6-7下,提取液浓度在0.1-0.2克每升时取50ml上柱,上样流速为2BV/h,先用去离子水澄清,再用3BV50%乙醇按照2BV/h的流速洗脱得到提取物;其中所述的草绿盐角草提取物制备方法为:更优选地,在用去离子水浸泡草绿盐角草的时候加入与草绿盐角草等重量份的冬青油。
实施例7
干细胞精华素,包括以下原料按照重量份比例混合:干细胞提取物32%,草绿盐角草提取物2%,甘油7%,乳酸0.2%,海藻糖0.7%,维生素A醋酸酯0.2%,维生素E醋酸酯0.3%,4’,6,7-三羟基异黄酮0.1%,二氧化钛0.7%,黄原胶0.02%,三乙醇胺0.02%,肉豆蔻酸异丙酯4%,丙二醇0.8%,透明质酸钠0.07%,防腐剂0.8%,其余为去离子水;所述的干细胞提取物为羊脐带血干细胞;
甘油、海藻糖、透明质酸钠、防腐剂和去离子水混合加热至75℃,均质乳化;
降温至室温后,加入乳酸、干细胞提取物,搅拌均匀后真空脱气。
其中,所述的干细胞提取物制备方法为:采集羊的脐带血加入抗凝剂,保持在4℃的温度,用生理盐水稀释,羊脐带血和生理盐水体积比为1∶1;
将稀释后的羊脐带血加入到胎盘活性抽提液中,稀释的羊脐带血与胎盘活性抽提液的体积比为1.2∶1,再加入质量比为3%明胶溶液,明胶溶液与胎盘活性抽提液的体积比为0.5∶1.进行梯度离心分离,获取液相交界面细胞悬液;
细胞悬液用磷酸盐缓冲液进行洗涤两次得到干细胞;
洗涤后的干细胞放入1640培养基中测定活性,活性大于95%即合格;
合格的干细胞使用流体剪切力对干细胞进行剪切成超小分子活性物质。
本发明的另外一个发明点还在于,配置了一种天然植物混合液,在均质乳化之前,将其按照重量份5%的比例加入后,一起与其他原材料进行均质和乳化,其中,所述的天然植物混合液的制备方法为:将生姜、薄荷、老鹳草(HERBAERODII/HERBAGERANII)按重量份1∶1∶1混合后(优选混合前将全部组份干燥到含水量为1-3%),分别用机械绞碎,压榨出汁液,残渣加入到乙醇水溶液中,搅拌2小时后,过滤去残渣,滤液和汁液混合得到提取液;乙醇水溶液为乙醇与水体积比为0.5-0.8∶1混合制的;残渣与乙醇水溶液的重量比为1∶1。因为此天然植物混合成份具有消毒、提味的作用,使得本产品在不加入防腐剂的前提下,也可以拥有更长时间保质期,因为本发明产品的营养异常丰富,所以加入这个组份也是在工业上非常有用的。
保持在0-4℃的温度浸泡2小时到24小时,破碎草绿盐至悬浊液,然后按照0.2-0.4升/千克的比例加入壳聚糖;再加入质量比为3%~6%乙醇,静置2小时;取109AB-8大孔树脂装柱5份,在PH6-7下,提取液浓度在0.1-0.2克每升时取50ml上柱,上样流速为2BV/h,先用去离子水澄清,再用3BV50%乙醇按照2BV/h的流速洗脱得到提取物;其中所述的草绿盐角草提取物制备方法为:更优选地,在用去离子水浸泡草绿盐角草的时候加入与草绿盐角草等重量份的冬青油。
实施例8
干细胞精华素,包括以下原料按照重量份比例混合:干细胞提取物32%,草绿盐角草提取物2%,甘油7%,乳酸0.2%,海藻糖0.7%,维生素A醋酸酯0.2%,维生素E醋酸酯0.3%,4’,6,7-三羟基异黄酮0.1%,二氧化钛0.7%,黄原胶0.02%,三乙醇胺0.02%,肉豆蔻酸异丙酯4%,丙二醇0.8%,透明质酸钠0.07%,防腐剂0.8%,其余为去离子水;所述的干细胞提取物为羊脐带血干细胞;
甘油、海藻糖、透明质酸钠、防腐剂和去离子水混合加热至75℃,均质乳化;
降温至室温后,加入乳酸、干细胞提取物,搅拌均匀后真空脱气。
其中,所述的干细胞提取物制备方法为:
其中,所述的干细胞提取物制备方法为:
其中,所述的干细胞提取物制备方法为:按照重量比例1∶1∶1∶2将苹果干细胞、番茄干细胞,葡萄干细胞和维生素C混合;
常规方法体外培养并收集培养物;
收集上清液中分子量相遇5000Da的成份,进行冷冻干燥,其中,冷冻干燥的方法如下:0摄氏度5-10分钟,-10摄氏度10-20分钟,-20摄氏度2-3小时,然后-35摄氏度保存超过5小时,进行冷冻干燥,这是本发明的一个发明点经过了这个方法,可以最大限度保持细胞活性物质,对最终产品的效果具有非常好的促进作用。
合格的干细胞使用流体剪切力对干细胞进行剪切成超小分子活性物质。
合格的干细胞使用流体剪切力对干细胞进行剪切成超小分子活性物质。
本发明的另外一个发明点还在于,配置了一种天然植物混合液,在均质乳化之前,将其按照重量份7%的比例加入后,一起与其他原材料进行均质和乳化,其中,所述的天然植物混合液的制备方法为:将生姜、薄荷、老鹳草(HERBAERODII/HERBAGERANII)按重量份1∶1∶1混合后(优选混合前将全部组份干燥到含水量为1-3%),分别用机械绞碎,压榨出汁液,残渣加入到乙醇水溶液中,搅拌2小时后,过滤去残渣,滤液和汁液混合得到提取液;乙醇水溶液为乙醇与水体积比为0.5-0.8∶1混合制的;残渣与乙醇水溶液的重量比为1∶1。因为此天然植物混合成份具有消毒、提味的作用,使得本产品在不加入防腐剂的前提下,也可以拥有更长时间保质期,因为本发明产品的营养异常丰富,所以加入这个组份也是在工业上非常有用的。
保持在0-4℃的温度浸泡2小时到24小时,破碎草绿盐至悬浊液,然后按照0.2-0.4升/千克的比例加入壳聚糖;再加入质量比为3%~6%乙醇,静置2小时;取109AB-8大孔树脂装柱5份,在PH6-7下,提取液浓度在0.1-0.2克每升时取50ml上柱,上样流速为2BV/h,先用去离子水澄清,再用3BV50%乙醇按照2BV/h的流速洗脱得到提取物;其中所述的草绿盐角草提取物制备方法为:更优选地,在用去离子水浸泡草绿盐角草的时候加入与草绿盐角草等重量份的冬青油。
效果检测
通过人体试用试验说明本发明通过的植物干细胞精华素抗衰老的效果:选用实施例所制得的干细胞精华素。
试验对象选择:男女各一半,25~65岁每十岁为一年龄段,分为四个年龄段,每个年龄段各男女一名,身体健康,无皮肤病和过敏史。
试验人数:8人。
评价指标:眼角、眼下皮肤弹性,水合度、透皮失水、皱纹、毛孔、皮肤光滑度。
测试区域:面部,包括眼角、眼下、脸颊区域。
测试周期:使用前和使用14天后。
皮肤弹性测试:皮肤弹性也是判断皮肤老化的重要标志之一,测试部位选在眼部。由于眼部皮肤最薄,没有皮脂分泌,而且眼部运动频繁,较面部其它部位易衰老,因此测试眼下。由于眼角也容易产生皱纹,眼角也为主要检测部位。使用MPA580弹性测试仪,在眼角和眼下皮肤处施一恒定负压,通过测试皮肤的回复形变的大小考察使用化妆品后皮肤弹性的变化,评价化妆品的抗衰老功效。
弹性的测定指数为R2,R2=(e(a)-e(a+b)/e(a):即无负压时皮肤的回弹量和有负压时的最大拉伸量之比,比值越接近于1,说明皮肤弹性越好。通过前后测试对比可见,皮肤弹性都具有较明显的改善。
表1皮肤弹性测试表
测试对象编号 | 使用前弹性测定指数 | 使用14天后弹性的测定指数 |
1 | 0.677 | 0.829 |
2 | 0.814 | 0.942 |
3 | 0.637 | 0.878 |
4 | 0.733 | 0.952 |
5 | 0.869 | 0.913 |
6 | 0.743 | 0.897 |
7 | 0.859 | 0.928 |
8 | 0.783 | 0.967 |
水分测试:通过对皮肤水分的测定.不仅可以直接了解皮肤表皮角质层含水分的情况,也可以间接反映皮肤老化的程度。水分测试选在法令纹的三角区,考察施压对象使用干细胞精华素前后水合度的变化,评价化妆品抗衰老的功效。水合度小于50为皮肤较干燥,50~60为干燥,大于60为水分充分。通过前后测试对比可见,皮肤含水都具有较明显的改善,大部分可以达到水分充分的程度。
表2皮肤弹性测试表
测试对象编号 | 使用前水合度 | 使用14天后水合度 |
1 | 53 | 63 |
2 | 46 | 60 |
3 | 55 | 64 |
4 | 50 | 61 |
5 | 61 | 64 |
6 | 37 | 58 |
7 | 47 | 64 |
8 | 56 | 65 |
皱纹目测对比:选取眼下至眼角的整个脸颊为分析区域,考察实验者使用干细胞精华素前后皱纹目视感官,评价化妆品的抗衰老功效。通过目测可见皱纹的消除是有效果的。
表3皮肤皱纹目测表
测试对象编号 | 使用14天后皱纹消除是否明显 |
1 | 明显 |
2 | 较明显 |
3 | 较明显 |
4 | 非常明显 |
5 | 不明显 |
6 | 明显 |
7 | 较明显 |
8 | 较明显 |
皮肤光滑度:通过测定使用干细胞精华素后一定时期皮肤光滑度的变化,以及使用前后面部光滑度对比,直观、量化地评价化妆品的抗衰老功效。光滑度评价是通过计算表皮的峰点/谷点实现的,峰点/谷点比值越接近1说明皮肤越光滑。通过前后测试对比可见,皮肤光滑度都具有较明显的提高。
表4皮肤光滑度测试表
测试对象编号 | 使用前水合度 | 使用14天后水合度 |
1 | 0.83 | 0.95 |
2 | 1.25 | 1.12 |
3 | 0.94 | 0.98 |
4 | 0.78 | 0.95 |
5 | 1.03 | 1.02 |
6 | 1.63 | 1.37 |
7 | 0.64 | 0.95 |
8 | 0.91 | 0.96 |
通过普遍性人体试用,试验说明本发明通过的胎盘干细胞精华素抗衰老的效果:从25-65岁人群中挑选身体健康的男性和女性各150名,总共300人,普遍发送本发明产品的试验用产品,经过试用者的反馈收集如下:
有此可见,本发明的产品在男女大规模试用实验上取得了非常好的效果,对面部皮肤的总有效率达到96.7%。
Claims (8)
1.一种草绿盐角草细胞精华素,其特征在于:包括以下原料按照重量份比例混合:细胞提取物28~32%,草绿盐角草提取物3-5%,甘油3~7%,乳酸0.2~0.8%,海藻糖0.7~1.3%,维生素A醋酸酯0.2~0.5%,维生素E醋酸酯0.1~0.3%,4',6,7-三羟基异黄酮0.1~0.3%,二氧化钛0.5~0.7%,黄原胶0.01~0.02%,三乙醇胺0.02~0.03%,肉豆蔻酸异丙酯2~4%,丙二醇0.8~1%,透明质酸钠0.02~0.07%,防腐剂0.8~1.2%,其余为去离子水;
甘油、海藻糖、维生素A醋酸酯、维生素E醋酸酯、4',6,7-三羟基异黄酮、透明质酸钠、黄原胶、三乙醇胺、肉豆蔻酸异丙酯、丙二醇、透明质酸钠、防腐剂和去离子水混合加热至75~80℃,均质乳化;
降温至室温后,加入乳酸、氧化钛、细胞提取物,搅拌均匀后真空脱气。
2.根据权利要求1所述的精华素,其特征在于:优选地,包括以下原料按照重量份比例混合:细胞提取物30%,草绿盐角草提取物4%,甘油5%,乳酸0.5%,海藻糖1%,维生素A醋酸酯0.3%,维生素E醋酸酯0.2%,4',6,7-三羟基异黄酮0.2%,二氧化钛0.6%,黄原胶0.015%,三乙醇胺0.025%,肉豆蔻酸异丙酯3%,丙二醇1%,透明质酸钠0.05%,防腐剂1%,其余为去离子水。
3.根据权利要求1所述的精华素,其特征在于:所述的细胞提取物为干细胞提取物。
4.根据权利要求3所述的精华素,其特征在于:所述的干细胞提取物提取物为胎盘干细胞提取物或者植物干细胞提取物。
5.根据权利要求4所述的精华素,其特征在于:所述的胎盘干细胞提取物制备方法为:
1)、羊脐带血干细胞的破碎:将羊脐带血干细胞悬液50毫升,采用超声波破碎法,利用超声波振荡器发射9~10千周声波处理3-9分钟;
2)、向溶液中加入10倍体积生理盐水后,3000转/分钟,离心20分钟;
3)、取上清液,加入20%无水乙醇,混匀,放置15分钟(乙醇沉淀法);
4)、将溶液3000转/分钟,离心20分钟;
5)、弃上清液,取沉淀,加入生理盐水50毫升,轻轻摇匀,将沉淀溶解成透明溶液,即为羊脐带血干细胞活性蛋白粗提液。
6.根据权利要求1所述的精华素,其特征在于:所述的草绿盐角草提取物制备方法为:
按照重量比为1比8-10的重量份比例将草绿盐角草与去离子水混合,保持在0-4℃的温度浸泡2小时到24小时,破碎草绿盐至悬浊液,然后按照0.2-0.4升/千克的比例加入壳聚糖;再加入质量比为3%~6%乙醇,静置2小时;取109AB-8大孔树脂装柱5份,在PH6-7下,提取液浓度在0.1-0.2克每升时取50ml上柱,上样流速为2BV/h,先用去离子水澄清,再用3BV50%乙醇按照2BV/h的流速洗脱得到提取物。
7.根据权利要求1所述的精华素,其特征在于:所述的草绿盐角草提取物制备方法为:更优选地,在用去离子水浸泡草绿盐角草的时候加入与草绿盐角草等重量份的冬青油。
8.用如权利要求1-7中任意一项所述方法得到的产品。
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