一种水产饲料添加剂
技术领域
本发明属于水产养殖领域,具体涉及一种水产饲料添加剂,本发明还涉及一种水产饲料。
技术背景
水产养殖在全球范围内以超过30%的速度迅猛发展,成为农业领域增长最快的板块之一,但疾病的频发严重制约其快速发展。近年来,随着养殖密度不断提高,养殖环境污染等原因,造成各种鱼类疾病发病率急剧升高,尤其是抗生素类产品的禁用给水产养殖业带来新的挑战,如果不使用抗生素,水产动物的疾病发生和病死率均难以控制,同时饲料转化率低,水产动物的生长、繁殖也会受到极大地影响。因此迫切需要一种非抗生素类的饲料添加剂来降低水产动物患病的风险,同时提高水产动物的饲料转化率,促进水产动物的生长。
发明内容
本发明的目的是提供一种不含抗生素的水产饲料添加剂,该添加剂既能用于抗水产常见病菌,又能用于提高水产动物的饲料转化率,促进水产动物的生长。
本发明所提供的水产饲料添加剂由以下重量份的成分组成:植物精油3-10份、没食子酸丙酯1-5份、硅藻土10-30份、白炭黑5-20份、玉米芯粉20-40份,其中所述植物精油为止痢草精油、肉豆蔻精油、藿香精油、鼠尾草精油、薄荷精油、百里香精油中的一种或多种。
作为优选方案,所述成分的重量份为:植物精油6份、没食子酸丙酯3份、硅藻土20份、白炭黑12份、玉米芯粉30份,所述植物精油为止痢草精油。
本发明进一步提供一种水产饲料,该饲料含有以上所述的水产饲料添加剂。
作为优选方案,该饲料含有重量百分比为0.01-0.1%所述的水产饲料添加剂。
本发明再进一步提供一种斑点叉尾鮰饲料,按重量百分比计,所述饲料含有0.02-0.05%以上所述的水产饲料添加剂,以及豆粕25~35%、菜粕20~30%、玉米蛋白粉3~8%、鱼粉5~15%、次粉20~25%、菜油1~5%、磷酸二氢钙1~2.5%、多维0.05~0.2%、VC酯0.01~0.1%、氯化胆碱0.1~0.5%、多矿0.1~1%、膨润土1~5%。
本发明的有益效果是:
1)本发明所提供的水产饲料添加剂对多种病菌具有抑制效果,尤其是对温和气单胞菌、嗜水气单胞菌和鳗弧菌等水产动物的常见多发病菌的抑制效果最强,因此可添加在水产饲料中代替抗生素用于降低水产动物患病的风险。
2)本发明能提高水产饲料的转化率,从而促进鱼类的生长性能,能增加鱼类体重和生长速度,提高存活率和肥满度,使鱼内脏与体质量比下降,并提高各种抗氧化酶的活性。
3)本发明能减轻病菌感染造成的鱼类内脏损害,预防和治疗嗜水气单胞菌等细菌性疾病,促进鱼类的健康生长。
4)本发明稳定性好,有效期长达1年以上,在121℃的高温条件下处理15分钟,或者在紫外照射条件下处理80min,抑菌效果不会明显下降。
5)本发明由天然材料组成,不含有毒物质及抗生素,对环境无污染,对鱼类不会产生耐药性,可长期使用。
附图说明
图1是阴性对照组,阳性对照组,试验组罗非鱼肝脏的解剖显微照片。
图2是阴性对照组,阳性对照组,试验组罗非鱼鳃的解剖显微照片。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步地详细说明。
实施例1~6
实施例1~6提供的水产饲料添加剂配方见表1。
表1水产饲料添加剂配方表
制备方法是:将没食子酸丙酯、硅藻土和白炭黑预先混合,然后向其中喷入植物精油混合均匀,最后再与玉米芯粉混合均匀,即得成品。
1)抑菌试验:
挑取适量菌种原液接种于LB液体培养基中,28℃培养18h,用接种的圆环蘸取菌液在琼脂平板上划线培养24h,挑取单个菌落接种于LB培养基中培养18h。取出后用酶标仪测定A600确定菌液浓度,用LB培养基稀释到菌液终浓度为106CFU/mL。吸取1ml稀释后的菌液添加在LB琼脂培养板中,用玻棒涂布均匀直至菌液全部吸收,然后准确添加0.02g本饲料添加剂,及抗生素药敏试纸,比较抑菌圈的大小。
表2本饲料添加剂与抗生素药敏试纸抑菌圈大小的比较
以上结果表明:实施例1~6提供的饲料添加剂能够抑制多种细菌的生长,尤其是对温和气单胞菌、嗜水气单胞菌、鳗弧菌这三种常见的水产病菌具有显著的抑制作用。从结果中还能看出,实施例1的抑菌效果最好。
2)稳定性试验
将实施例1提供的饲料添加剂分别置于80℃、115℃、121℃、室温温度条件下,处理15分钟,然后检测其对供试菌的抑菌效果。同样,也将该饲料添加剂置于紫外照射条件下处理20min、40min、80min,检测其对供试菌的抑菌效果。对照组为等含量的植物精油和没食子酸丙酯,直接与沸石粉、玉米芯粉混合而成。
表3和表4的数据显示,以白炭黑、硅藻土和玉米芯粉作为赋形剂,能有效提高组分的稳定性,以及提高耐高温和紫外光的能力。
表3不同温度处理后饲料添加剂对供试菌抑菌圈比较
表4紫外线照射后饲料添加剂对供试菌抑菌圈比较
实施例7
为了验证本发明的应用效果,在斑点叉尾鮰上进行试验。将斑点叉尾鮰分为对照组:无抗生素和添加剂的饲料,试验组:实施例1的饲料添加剂0.04%。日粮配方见表5。每组8重复,每组30尾鱼,每日饲喂3次。测定增重率(%)、饵料系数、蛋白效率、肥满度、内脏重与体重比、肝胰脏重与体重的比值。结果见表6和表7。
从表6的结果可以看出,试验组的体增重、特定生长率、饵料系数和蛋白效率均比对照组有显著改善。饲料的质量不仅会影响鱼体的生长速度,还会影响鱼体的体型,鱼体的体型不能太臃肿,也不能太瘦长,体形指标可从鱼的肥满度、内脏质量与鱼体质量比及肝胰质量与鱼体质量比来进行初步判断。从表7可见,饲料添加剂使肥满度有显著提高,内脏与体质量比与对照组相比,都有一定幅度下降,而肝胰与体质量比与对照组相比,也有一定幅度下降。表8的结果显示,添加剂组能有效提高各种抗氧化酶的活性。
表5试验组和对照组的日粮配方
原料组成(%) |
对照组 |
试验组 |
豆粕 |
30 |
30 |
菜粕 |
26 |
26 |
玉米蛋白粉 |
5 |
5 |
鱼粉 |
10 |
10 |
次粉 |
22 |
22 |
菜油 |
2 |
2 |
磷酸二氢钙 |
1.6 |
1.6 |
多维 |
0.13 |
0.13 |
VC酯 |
0.04 |
0.04 |
氯化胆碱 |
0.2 |
0.2 |
多矿 |
0.6 |
0.6 |
膨润土 |
2.43 |
2.39 |
实施例1的添加剂 |
0 |
0.04 |
表6添加剂对斑点叉尾鮰生长性能与饲料利用率的影响
生产性能指标 |
对照组 |
试验组 |
体增重 |
102.63±2.22a |
127.53±6.40b |
特定生长率 |
1.95±0.04a |
2.24±0.12b |
饵料系数 |
1.94±0.09a |
1.64±0.04b |
蛋白效率 |
1.49±0.08a |
1.77±0.07b |
成活率 |
95.83±2.89 |
98.33±1.44 |
表7添加剂对斑点叉尾鮰内脏指数、肝胰指数和肥满度的影响
指标 |
对照组 |
试验组 |
肥满度 |
2.31±0.04a |
2.65±0.08b |
肝胰指数 |
3.96±0.3ab |
3.67±0.03b |
内脏指数 |
10.26±0.20a |
10.03±0.07b |
表8添加剂对斑点叉尾鮰机体抗氧化能力的影响
指标 |
对照组 |
试验组 |
溶菌酶 |
50.07±3.12a |
73.57±2.00b |
超氧化物歧化酶SOD |
104.7±6.56a |
138.5±9.23b |
过氧化氢酶CAT |
20.83±2.62a |
30.83±1.71b |
实施例8
为了进一步验证本发明的应用效果,将实施例1的饲料添加剂在鲶鱼上进行试验。将鲶鱼分为对照1组:不含添加剂的饲料;对照2组:恩诺沙星10ppm的饲料;试验组:饲料中加入0.02%和0.05%的添加剂。日粮配方见表9。每组10重复;每组10个鱼尾,每日饲喂两次,测定增重(每个月,共三次)、采食量/饲料报酬(每个月,共三次)、免疫性能测定/细菌学测定成活率/死亡率。
从表10的结果可以看出,添加本饲料添加剂与对照(无抗生素)相比,可提高生产性能,且效果优于对照2组(添加抗生素组)。表11中各组多肠道细菌的结果可以看出,添加组可有效抑制细菌的生长,而对有益菌的影响不大。
表9日粮配方与组成
原料组成(%) |
对照1组 |
对照2组 |
试验1组 |
试验2组 |
鱼粉 |
6 |
6 |
6 |
6 |
豆粕 |
18 |
18 |
18 |
18 |
菜粕 |
26 |
26 |
26 |
26 |
棉籽粕 |
18 |
18 |
18 |
18 |
玉米蛋白粉 |
3 |
3 |
3 |
3 |
次粉 |
20.3 |
20.3 |
20.3 |
20.3 |
大豆油 |
2.5 |
2.5 |
2.5 |
2.5 |
磷酸二氢钙 |
1.5 |
1.5 |
1.5 |
1.5 |
氯化胆碱50% |
0.2 |
0.2 |
0.2 |
0.2 |
膨润土 |
1.0 |
1.0 |
0.98 |
0.95 |
预混料 |
3.5 |
3.5 |
3.5 |
3.5 |
恩诺沙星 |
0 |
0.001 |
0 |
0 |
实施例1的添加剂 |
0 |
0 |
0.02 |
0.05 |
表10添加剂对鲶鱼生产性能的影响
表11添加剂对鲶鱼肠细菌数量的影响
实施例9
试验用罗非鱼,试验开始前停饲24h,选择体重相近(22.0±1.0)g的幼鱼90尾,随机分配于9个养殖缸。试验分为阴性对照组(没有感染),阳性对照组(人工感染嗜水气单胞菌),试验组(人工感染嗜水气单胞菌,饲料中添加本饲料添加剂,日粮配方见表12),每组3个重复,每个重复10尾鱼。各组投喂相应的饲料3周后,以腹腔注射的方式使罗非鱼感染嗜水气单胞菌。注射后168h取阳性对照和试验组病症明显,但未死亡的罗非鱼,及从空白对照组随机取鱼,分离各组织器官固定,每组去3尾。
罗非鱼腹腔注射嗜水气单胞菌后,主要症状为摄食量下降,活力能力减弱。48h后腹部出现增大,腹腔注射部位红肿,口部、各鳍基部、鳃盖及鳃裂后部均有出血症状,眼球外突。部分罗非鱼鳃盖凹陷,鳃丝发白,肛门红肿呈濒死状态。解剖后观察可见胰脏呈土黄色、心脾颜色暗红,肠道少或无食物。各种症状表明,嗜水气单胞菌对罗非鱼肝、肾、脾、心、肠、鳃都造成不同程度的破坏,特别是对肝、肾和鳃的破坏程度较大。
图1是三组罗非鱼肝脏的解剖显微照片,A是正常罗非鱼肝脏(阴性对照组,没有感染),HE,10×6.7;B是罗非鱼肝脏(添加本添加剂),症状明显比感染组减轻,HE,10×6.7;C是患病罗非鱼肝脏(阳性感染组),肝小管上皮增生,核大小不一,有的细胞水肿变性,细胞核固缩、碎裂或崩解,HE,10×6.7。
图2是三组罗非鱼鳃的解剖显微照片,D是正常罗非鱼鳃(阴性对照组),HE,4×6.7;E是罗非鱼鳃(添加饲料添加剂),症状明显比感染组减轻,HE,10×6.7;F是患病罗非鱼鳃(阳性感染组),鳃肌开始变性,而鳃叶上皮细胞及柱细胞广泛变性HE,4×6.7。
结果表明,经嗜水气单胞菌感染后,罗非鱼的鳃和肝脏等实质器官都发生了较严重的病变。但经过3周投喂实施例1提供的饲料添加剂,试验组罗非鱼的鳃和肝脏病变情况有明显缓解。持续数周后,则可恢复到正常。通过本试验,长期在淡水鱼饲料中添加本发明饲料添加剂,可以预防和治疗嗜水气单胞菌等细菌性疾病,促进鱼类的健康生长。
表12罗非鱼试验日粮配方
原料名称 |
原料用量(%) |
营养指标 |
含量(%) |
鱼粉 |
8 |
粗蛋白 |
33.0 |
大豆粕 |
22 |
粗脂肪 |
4.37 |
菜籽粕 |
17 |
无氮浸出物 |
34.16 |
棉籽粕 |
17.5 |
粗纤维 |
6.87 |
米糠 |
10 |
粗灰分 |
7.80 |
小麦麸 |
4 |
钙 |
0.8 |
次粉 |
3 |
总磷 |
1.36 |
面粉 |
3.67 |
|
|
大豆油脂 |
1 |
|
|
磷酸二氢钙 |
1.5 |
|
|
维生素预混料 |
0.1 |
|
|
微量元素预混料 |
0.5 |
|
|
氯化胆碱 |
0.15 |
|
|
实施例1的添加剂 |
0.03 |
|
|