CN105012322B - 日落黄色素在抗炭疽杆菌中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种日落黄色素在抗炭疽杆菌中的应用。本发明公开了日落黄色素在制备抑制炭疽杆菌生长的产品中的应用。本发明发现日落黄色素可有效抑制炭疽杆菌的生长，从而在治疗炭疽感染方面发挥巨大作用。

Description

日落黄色素在抗炭疽杆菌中的应用
技术领域
本发明涉及日落黄色素（Sunset Yellow,C16H10N2Na2O7S2）在抗炭疽杆菌中的应用。
背景技术
炭疽杆菌是一种全世界范围内流行的人畜共患的病原菌，该病原菌可以感染羊、马等食草动物，2001年使用炭疽进行生物恐怖事件使得对炭疽杆菌的研究迅速升温。炭疽杆菌菌体粗大，两端平截或凹陷，是致病菌中最大的细菌。排列似竹节状，无鞭毛，无动力，革兰氏染色阳性，该菌在氧气充足，温度适宜（25～30℃）的条件下易形成芽胞。炭疽杆菌的荚膜与炭疽毒素是主要的致病物质。荚膜具有抗吞噬作用，有利于细菌在机体组织内繁殖与扩散。炭疽毒素的毒性作用主要是直接损伤微血管的内皮细胞，使血管通透性增加，有效循环血量不足，微循环灌注量明显减少，血液呈高凝状态，易形成感染性休克和弥散性血管内凝血。
人类主要通过工农业生产而感染。机体抵抗力降低时，接触污染物品可发生下列疾病：
1.皮肤炭疽最常见，多发生于屠宰、制革或毛刷工人及饲养员。该菌由体表破损处进入体内，开始在入侵处形成水疖、水疱、脓疱、中央部呈黑色坏死，周围有浸润水肿、如不及时治疗，细菌可进一步侵入局部淋巴结或侵入血流，引起败血症死亡。
2.肠炭疽由食入病兽肉制品所致，以全身中毒症状为主，并有胃肠道溃疡、出血及毒血症，发病后2～3日内死亡。
上述疾病若引起败血症时，可继发“炭疽性脑膜炎”。炭疽杆菌的致病性取决于荚膜和毒素的协同作用。因此在牛羊等家畜的喂养过程中，应该需要有效地抑制炭疽杆菌的药物，该药物的效果是在牛羊等家畜的食料中抑制炭疽杆菌的生长，而不影响牛羊等家畜的健康状况。
日落黄色素，属于人工合成色素，分子式：C16H10N2Na2O7S2化学名1－（4'－磺基－1'－苯偶氮）－2－萘酚－6－磺酸二钠，是一种在食品行业中广泛应用的食品着色剂，水溶性好，化学性质稳定。其安全性高，危害性小。目前尚无日落黄色素抑制炭疽杆菌等病原微生物的报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种日落黄色素在抗炭疽杆菌中的应用。
日落黄色素在制备抑制炭疽杆菌生长的产品中的应用。
日落黄色素在制备抑制炭疽杆菌增殖的产品中的应用也属于本发明的保护范围。
日落黄色素在制备预防和/或治疗由炭疽杆菌感染引起的疾病的产品中的应用也属于本发明的保护范围。
上述任一所述的应用中，所述日落黄色素的工作浓度具体为1mg/ml-5mg/ml。
日落黄色素在制备预防和/或治疗家畜肠道炭疽杆菌感染的产品中的应用也属于本发明的保护范围。
日落黄色素作为家畜饲料添加剂的应用也属于本发明的保护范围。
上述任一所述的应用中，所述家畜为牛或羊。
上述任一所述的应用中，所述日落黄色素分子式为C16H10N2Na2O7S2，化学名为1－（4'－磺基－1'－苯偶氮）－2－萘酚－6－磺酸二钠。
本发明发现日落黄色素，在一定的浓度范围内，可有效抑制炭疽杆菌的生长，从而在治疗炭疽感染方面发挥巨大作用。
附图说明
图1为不同浓度的日落黄色素培养基培养炭疽杆菌。
图2为日落黄色素培养基培养3小时后炭疽杆菌生长OD值测定。
图3为日落黄色素培养基培养6小时后炭疽杆菌生长OD值测定。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
炭疽杆菌为普通（Bacillus anthraci）在文献“Bacillus anthracis,ErlendurHelgason,Ole Andreas Dominique A,et al.Caugant3Bacillus cereus,andBacillus thuringiensis—One Species on the Basis of GeneticEvidence.Appl.Environ.Microbiol.June200066:62627-30.”中公开过，为普通炭疽杆菌致病菌。
公众可从中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所获得。
实施例1、日落黄色素抑制炭疽杆菌实验
一、培养基的制备
每升日落黄色素培养基按照如下方法制备：将胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，NaCl5g，日落黄色素，加水溶解并定容至1L，培养基的pH=7，将该培养基于121℃湿热灭菌半小时，制备而成。
本实施例制备的日落黄色素培养基中，日落黄色素的浓度是0.1g/L、0.5g/L、1g/L或5g/L，分别得到0.1mg/ml、0.5mg/ml、1mg/ml和5mg/ml日落黄色素培养基。
不含日落黄色素的对照培养基按照如下方法制备：将胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，NaCl5g，加水溶解并定容至1L，培养基的pH=7，将该培养基于121℃湿热灭菌半小时，制备而成。
二、微生物染色
炭疽杆菌活化：将炭疽杆菌按照体积百分含量1%的接种量接种于LB培养基，37℃200r/min摇床培养过夜，得培养液。
三、液体培养的抑菌实验观察
采用对照培养基、1mg/ml和5mg/ml日落黄色素培养基对步骤二活化的炭疽杆菌进行培养，接种量均为1%（体积百分含量），37℃200r/min摇床培养过夜。观察并记录炭疽杆菌生长状况，结果如图1所示。
图1A中，0为对照培养基培养得到的菌液；1为1mg/ml日落黄色素培养基培养得到的菌液；5为5mg/ml日落黄色素培养基培养得到的菌液。
培养液的透明度可以直接反应炭疽杆菌菌体密度的大小，图1A为在灯光下炭疽杆菌的培养液，结果表明，日落黄色素浓度越高对炭疽杆菌的增殖抑制程度越高。
同样按照上述方法采用对照培养基、0.1mg/ml、0.5mg/ml、1mg/ml和5mg/ml日落黄色素培养基对步骤二活化的炭疽杆菌进行培养，经8000r/min高速离心获得沉淀，结果如图1B所示。
图1B中，0为对照培养基培养得到的菌液离心后的沉淀；0.1为0.1mg/ml日落黄色素培养基培养得到的菌液离心后的沉淀；0.5为0.5mg/ml日落黄色素培养基培养得到的菌液离心后的沉淀；1为1mg/ml日落黄色素培养基培养得到的菌液离心后的沉淀；5为5mg/ml日落黄色素培养基培养得到的菌液离心后的沉淀。
根据炭疽杆菌菌体沉淀多少可以直观判断菌体生成量，图1B表明，随着日落黄色素浓度的升高，其对炭疽杆菌的增殖抑制程度也随之升高。
四、定量分析日落黄色素抑制炭疽菌体密度实验
采用对照培养基、1mg/ml和5mg/ml日落黄色素培养基对步骤二活化的炭疽杆菌进行培养，接种量体积比为1%，37℃200r/min摇床培养6小时。分别在3小时和6小时取各培养液，利用分光光度计在OD=600nm波长下检测培养液中菌体的密度。
培养3小时后炭疽杆菌生长OD值测定结果如图2所示。
培养6小时后炭疽杆菌生长OD值测定结果如图3所示。
图2和图3表明，与对照组相比，5mg/ml和1mg/ml日落黄色素培养基对炭疽杆菌的生长均有明显的抑制作用。
以上结果表明，日落黄色素对炭疽杆菌的生长有明显抑制作用。

Claims (6)

1.日落黄色素在制备抑制炭疽杆菌生长的产品中的应用。
2.日落黄色素在制备抑制炭疽杆菌增殖的产品中的应用。
3.日落黄色素在制备预防和/或治疗由炭疽杆菌感染引起的疾病的产品中的应用。
4.日落黄色素在制备预防和/或治疗家畜肠道炭疽杆菌感染的产品中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述家畜为牛或羊。
6.根据权利要求1-5任一所述的应用，其特征在于：所述日落黄色素分子式为C16H10N2Na2O7S2 ，化学名为1－（4'－磺基－1'－苯偶氮）－2－萘酚－6 －磺酸二钠。
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