CN105002098B - 一株烟曲霉菌株Bfum-5及其用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一株烟曲霉菌株Bfum‑5及其用途，属于微生物生态领域。所述烟曲霉菌株Bfum‑5的保藏号为CGMCC No.10929。本发明还提供了以所述烟曲霉菌株Bfum‑5为活性成分的用于降解纤维素的制品和菌剂，以及基于该菌株Bfum‑5的用于降解纤维素的方法，同时提供了该菌株Bfum‑5在制备用于降解纤维素的制品中的用途。经CMC‑Na水解圈测定、滤纸降解实验及纤维素分解酶活测定，证实了本发明所提供的这株烟曲霉菌株Bfum‑5具有很强的降解纤维素的能力。
Description
技术领域
本发明属于微生物生态领域，具体涉及一株烟曲霉(Aspergillusfumigatus)菌株Bfum-5及其用途。
背景技术
纤维素(Celullose)是自然界中储备量最大、分布最广的天然有机物。它是棉花、木材等高等植物成熟细胞壁的主要组成物质，被认为是“细胞的基本物质”，每年由光和作用产生数十亿吨。纤维素在禾本科植物如芦苇、竹子、稻草的干茎中约占40-45％，在木材中约占40-50％，棉花中的含量最高，达到95-99％。纤维素的应用可一直追述至两千年前造纸术的发明。随着能源危机的愈演愈烈，生物能源的开发利用已经逐渐被人们重视起来，而纤维素作为一种地球上最廉价、最丰富的可再生能源，其巨大的应用潜力正在成为研究的热点。
纤维素是D-葡萄糖苷以β-1，4-糖苷键连接而成的链状高分子化合物，含碳、氢、氧三种元素，其中碳含量为44.44％，氢含量为6.17％，氧含量为49.39％，其分子式用(C6H10O5)n表示(n为聚合度)，纤维二糖是其基本组成单元，一般认为纤维素分子约由8000-12000个葡萄糖残基构成。常温下不溶于水、不溶于稀酸和稀碱。纤维素聚集体内的氢键分布不均匀，有的基本上全是氢键，排列定向有序，结构稳定，这样的区域称为结晶区，其他区域则称为无定型区。所谓结晶度，即指结晶区占纤维素整体的百分率。纤维素纤维的结晶度增高，则硬度、密度等随之增加，而柔软性和化学反应性等均降低，因此微生物对它的利用越困难。无定形区结构比较疏松，易被微生物利用。
纤维素的结构复杂，很难被降解。一般的降解方式主要有机械降解、水解、热降解、氧化降解、光化学降解及酶(生物)降解等。但前几种方法有成本高、降解条件繁琐及易造成环境污染等缺点，而生物降解方法主要是应用纤维素酶来催化降解纤维素，因其高度的专一性和低成本成为了目前主要关注的一种手段。
生物降解方法包括直接采用纤维素酶进行降解，或采用产纤维素酶的细菌或真菌进行发酵降解等。直接采用纤维素酶对纤维素进行降解需要对纤维素酶进行分离提纯，工艺繁琐，成本较高，因此采用具有产纤维素酶功能的细菌和真菌对纤维素进行发酵降解是较为经济有效的途径。产纤维素酶的细菌或真菌通常从自然界中分离纯化而来或经人工诱变获得。
目前从自然界分离纯化获得的产纤维素酶的细菌或真菌有很多种，其中就包括2010年王丽等从秸秆、植木等植物附近的土壤中分离纯化到10株产纤维素酶的菌株，其中两株：一株 为烟曲霉菌，另一株为尖孢镰刀菌的FPA酶和CMC酶的活性较高。同样在2010年，张涛等从石油勘探中1000米以下油井中的深层土壤筛选出9株纤维素降解真菌，并通过复筛确定了两株纤维素降解效果最好的菌株，经分子鉴定为紫青霉菌和烟曲霉菌。发明专利申请201410131073.4也公开了一种降解纤维素的复合菌剂，该菌剂主要由宛氏拟青霉MM2菌株、烟曲霉MM6菌株、皱落假丝酵母MJ4菌株、地衣芽孢杆菌MX8菌株组成。
由此可见，本领域有待进一步地发掘出更多的新菌株应用于纤维素降解。
发明内容
基于现有技术中对纤维素降解菌株的新需求，本发明从堆肥混合物中分离纯化出一株菌株Bfum-5，经18S rDNA测定，Bfum-5是一株新的、具有纤维素降解能力的烟曲霉菌(Aspergillusfumigatus)。
本发明的技术方案如下：
一株烟曲霉菌(Aspergillusfumigatus)菌株Bfum-5，其保藏号为CGMCCNo.10929。
用于降解纤维素的制品，其特征在于，所述制品的活性成分包括所述的烟曲霉菌菌株Bfum-5。
用于降解纤维素的制品，其特征在于，所述制品的活性成分是所述的烟曲霉菌菌株Bfum-5。
所述制品还包括用于降解纤维素的常规成分和/或用于培养所述的烟曲霉菌菌株Bfum-5的培养基成分。
一种降解纤维素的制品的制备方法，其特征在于，采用所述的烟曲霉菌菌株Bfum-5作为制备所述制品的活性成分或活性成分之一。
一种用于降解纤维素的方法，其特征在于，在降解纤维素的过程中添加和/或使用任一所述的制品。
一种用于降解纤维素的菌剂，其特征在于，所述菌剂的活性成分包括所述的烟曲霉菌菌株Bfum-5。
一种用于降解纤维素的菌剂，其特征在于，所述菌剂的活性成分是所述的烟曲霉菌菌株Bfum-5。
所述菌剂还包括用于制备菌剂的常规成分。
本发明提供了一株分离自堆肥混合物的新菌株Bfum-5，经18S rDNA分子鉴定、序列比对及系统发育树分析，所述Bfum-5菌株为一株全新的烟曲霉菌(Aspergillusfumigatus)菌株。
本发明对Bfum-5菌株在降解纤维素方面的效果进行了验证。通过CMC-Na水解圈测定 法证实，在从堆肥混合物中共同筛选出的33种不同的菌株中，Bfum-5菌株在羧甲基纤维素钠培养基上的Dp值最高，生长过程中形成的水解圈也最为明显，从而直接证明了本发明所述的Bfum-5菌株具有较强的降解纤维素的能力。
同时，在滤纸降解实验中，除了现有已知的具有很强的纤维素降解能力的商购菌株30414表现出较强的滤纸分解能力外，本发明的Bfum-5菌株同样也表现出较强的滤纸降解能力，相比其它对照菌株效果更为明显。
此外，纤维素分解酶活测定也证实，本发明的Bfum-5菌株在纤维素降解酶活方面的表现同样显著优于其它对照菌株。
由此可见，本发明提供的烟曲霉菌菌株Bfum-5具有很强的降解纤维素的效果。
所述烟曲霉菌(Aspergillusfumigatus)菌株Bfum-5已送保藏，其保藏信息如下：
菌种保藏名称：Bfum-5
保藏号：CGMCC No.10929
分类命名：烟曲霉
拉丁名：Aspergillusfumigatus
保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心
保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号
保藏日期：2015年6月3日
附图说明
图1为单菌种透明圈测定结果；
图2为单菌种典型透明圈结果；
图3为CZ5-5(Bfum-5)、30414和MN1三种菌的全酶活曲线比较图谱；
图4为CZ5-5(Bfum-5)、30414和MN1三种菌的外切酶活曲线比较图谱；
图5为CZ5-5(Bfum-5)、30414和MN1三种菌的内切酶活曲线比较图谱；
图6为CZ5-5(Bfum-5)、30414和MN1三种菌的β-葡萄糖苷酶活曲线比较图谱；
图7为Bfum-5菌株18s rDNA特征序列；
图8为纤维素分解酶活测定中的葡萄糖标准曲线；
图9为Bfum-5菌株的系统发育树。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的详细说明，下述实施例只是说明性的，并不限制本发明保护范围。下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法；所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
试剂与耗材
赫奇逊滤纸培养基：KH2PO41g/L，NaCl 0.1g/L，MgSO40.3g/L，NaNO32.5g/L，FeCl30.01g/L，CaCl2·6H2O 0.1g/L，琼脂20g。
PDA培养基：蔗糖20g/L，琼脂18g/L，20％马铃薯浸出液(200g去皮马铃薯切块，加水1000mL，煮沸半小时，至马铃薯能被玻璃棒捣碎为止，用双层纱布过滤取汁，补足原来的水量)。
CMC-Na培养基：PDA培养基，CMC-Na 10g/L，pH7.2左右。
滤纸培养基：去淀粉滤纸条1*3cm数张(每瓶一张)，(NH4)2SO42g/L,KH2PO41g/L，MgSO4·gS2O 0.5g/L，NaCl 0.5g/L，NaNO31g/L，FeCl30.01g/L，CaCl2·aC2O 0.2g/L，蛋白胨0.5g/L，酵母膏0.5g/L，pH7.2左右。
产酶培养基：蛋白胨10g/L，酵母膏10g/L，NaCl 5g/L，CMC-Na 5g/L，pH7.0-7.2。
Ex Taq DNA Polymerase等扩增所用试剂均购自TaKaRa公司,PCR PurificationKit购自Promega,引物由上海生工合成。
乙酸、碳酸氢钠、蔗糖、KH2PO4、NaCl、MgSO4、NaNO3、FeCl3、CaCl2·6H2O、琼脂、(NH4)2SO4、CaCl2·2H2O、MgSO4·7H2O、CMC-Na、蛋白胨、酵母膏、CTAB、Tris-HCl、EDTA、蛋白酶K、SDS、氯仿、异丙醇、乙醇均为国产分析纯。
淀粉滤纸、马铃薯、离心管、枪头、培养皿、纱布、玻璃棒均可商购获得。
仪器设备
PCR仪使用Biometra公司生产的Tgradient，凝胶成像分析仪为Bio-Rad公司的Gel-Doc2000。
本发明的实现所依赖的遗传材料的来源及出处记载
实施例1、本发明烟曲霉菌株Bfum-5的筛选过程
材料与方法
1纤维素分解菌的提取方法
1.1材料
袖珍菇渣和鸭粪的高温堆肥混合物(用U表示)、杏鲍菇渣和鸭粪的高温堆肥混合物(用N表示)。
1.2方法
稀释平板法
1.2.1培养基
赫奇逊滤纸培养基：KH2PO41g/L，NaCl 0.1g/L，MgSO40.3g/L，NaNO32.5g/L，FeCl30.01g/L，CaCl2·6H2O 0.1g/L，琼脂20g，去淀粉滤纸数张(每个板一张)。
1.2.2主要步骤
a、制取去淀粉滤纸：滤纸用1％乙酸浸泡一昼夜，用碘液检查确定无淀粉后，再用2％碳酸氢钠溶液冲洗至中性，晾干待用。
b、取10g样品浸泡在装有90g无菌水的500ml三角瓶中，置于震荡箱内，以150r/min的速度震荡10min，然后取出静置数分钟，取一定量样品菌悬液置于试管中，再取1mL该液体置于含有9mL的无菌水试管中，依次分别制成取得10-1、10-2、10-3的浓度梯度，并把试管标记好。以上方法称为稀释平板法。
c、提前准备好赫奇逊培养基，倒在准备好的培养皿中，每个平板大约17mL左右，在每个板表面铺一张去淀粉滤纸，用移液枪分别吸取10-1、10-2、10-3浓度的菌悬液0.2mL于平板上，用涂布器涂抹均匀，封装好，待存。或者先吸取菌悬液于平板上，用涂布器涂抹均匀后再铺去淀粉滤纸，封装好，待存。
d、将制备好的培养皿平板按标号等数量放置在中温(M)35℃和高温(H)50℃培养箱中培养。后期观察菌落在滤纸上的生长情况，以上方法称为滤纸条孔洞法。
由于赫奇逊滤纸培养基的配方中只有去淀粉滤纸为营养来源，所以能在上边长出的菌种 都能够分解纤维素。培养上以后每天观察，一周后发现两种环境下的培养基滤纸上有多种菌落长出，只是35℃环境下的菌落长出的更多；50℃环境下的平板每天需要补无菌水5mL，保证培养基不干，并保证菌落成活。观察在培养基滤纸上生长良好，并且滤纸出现降解孔洞的菌落，并准备进行下一步操作。
2纤维素分解菌的纯化方法
在众多菌种中挑选生长良好的菌种纯化到PDA培养基上，多次纯化，取生长稳定的单菌种。
2.1培养基
PDA培养基：蔗糖20g/L,琼脂18g/L，20％马铃薯浸出液(200g去皮马铃薯切块，加水1000mL，煮沸半小时，至马铃薯能被玻璃棒捣碎为止，用双层纱布过滤取汁，补足原来的水量)。
2.2主要步骤
a、找出生长良好的菌落在培养皿背面画圈标记，接菌时均匀点4个点在PDA培养基上，按照原来的高温中温环境分别保存，直到菌落已经被分离成单菌种。
b、把菌种按照培养环境和材料分为4个编号类型，分别为HU(袖珍菇高温菌)、HN(杏鲍菇高温菌)、MU(袖珍菇中温菌)、MN(杏鲍菇中温菌)。
c、把分离纯化好的菌种按类型进行编号，并做菌种描述。放在4℃冰箱中保存，待用。
3纤维素分解菌的筛选方法
3.1CMC-Na水解圈测定法
对步骤2中选出的单菌种，进行CMC-Na水解圈测定。
3.1.1培养基
CMC-Na培养基：PDA培养基(蔗糖20g/L,琼脂18g/L，20％马铃薯浸出液(200g去皮马铃薯切块，加水1000ml，煮沸半小时，至马铃薯能被玻璃棒捣碎为止，用双层纱布过滤取汁，补足原来的水量)，CMC-Na 10g/L，pH7.2左右。
3.1.2主要步骤
a、将菌种分别接至CMC-Na培养基上，培养3-5天。并且注意不要污染初筛单菌种，保存好以后待用。
b、CMC-Na平板的菌落长好以后，打开盖子平面摊开摆在桌面上，用移液枪吸取5mL0.1％刚果红溶液至每个平板上，静置染色30min，倒掉多余液体；再用移液枪吸取5mL1mol/L NaCl溶液至每个平板上，静置脱色1h，倒掉多余液体。观察透明圈与菌种的大小对比情况。
结果与分析
1菌种分离纯化结果
在袖珍菇渣和鸭粪的高温堆肥混合物、杏鲍菇渣和鸭粪的高温堆肥混合物中筛选出33种可以分解纤维素的单菌种。其中袖珍菇高温菌2种，杏鲍菇高温菌8种，袖珍菇中温菌15种，杏鲍菇中温菌8种。细菌23种，放线菌8种，真菌2种。
2纤维素分解菌的筛选结果
在众多能分解纤维素的菌落中筛选出分解能力较强的菌落，并通过多种实验来进一步说明其分解能力强弱。
2.1CMC-Na水解圈测定法筛选结果与分析
羧甲基纤维素钠培养基为菌种提供了营养来源，菌种对其周围的营养物质进行取食，被取食掉的部分会变成透明圈，所以Dp值(透明圈大小D与菌种大小d的比值的平方)越大，菌种分解纤维素能力越强。得出的结果如图1所示。
通过柱状图和具有代表性的照片对比综合分析，观察图1得知，菌株CZ5-5的Dp值最大，达到了50，其次A24、A22、A16等的Dp值相对也比较大，在30-40之间；HB7、B16、B19等的Dp值在2以内，甚至为0；再通过观察图2、更容易看出水解圈大小，CZ5-5由于生长过快，导致水解圈已充满整个培养基，需要进一步进行试验以说明结果。通过照片可以看出这种真菌的实际表现力。
实施例2纤维素分解菌CZ5-5的分子鉴定
材料与方法
1.菌种DNA提取
(1)灭菌条件下，超净工作台中用灭菌枪头挑取适量孢子置于2mL无菌离心管中，加入0.8mL抽提缓冲液(1％CTAB；100mMTris-HCl pH 8.0；20mMEDTA pH 8.0；700mMNaCl8.0)和20μL蛋白酶K，充分混匀。37℃，30min，每隔10min混匀一次。
(2)加入160μL 10％SDS，充分混匀。65℃水浴1h，每隔15min混匀一次。
(3)加入等体积氯仿，充分混匀，4度，11000rpm离心10min。
(4)取700微升上清到2mL离心管中；
(5)重复步骤3和4；
(6)加入0.6倍体积的异丙醇混匀使其沉淀，离心。
(7)加入75％的乙醇700ul,混匀在11000转下离心10min,弃上清；
(8)重复步骤7；将沉淀风干，30ulTE缓冲液溶解DNA沉淀；
(9)切胶试剂盒纯化DNA
(10)琼脂糖电泳检测。
将DNA浓度调至70ng/μL左右,备做PCR模板。
2.PCR扩增
引物为真菌18s rDNA通用引物NS1组合，引物序列见表1，如SEQ ID NO.2和SEQ IDNO.3所示。
表1使用的引物组合
PCR扩增体系:DNA(70ng/μL)模板2μL；dNTPMixture(2.5mM)2.5μL；FR1(20μM)1.5μL；NS1(20μM)1.5μL；10×Ex Taq Buffer(Mg2+plus)5μL；Ex Taq酶(5U/μL)0.2μL；补足ddH2O到50μL。
Ex Taq DNA Polymerase等扩增所用试剂均购自TaKaRa公司,PCR PurificationKit购自Promega,引物由上海生工合成。PCR仪使用Biometra公司生产的Tgradient,凝胶成像分析仪为Bio-Rad公司的Gel-Doc2000。
结果与分析
1.纤维素分解菌CZ5-5分子鉴定结果
通过1％琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物。将扩增出的18S rDNA片段进行测序，将所得序列与GenBank数据库中已经登录鉴定的序列进行Blast比对，选取亲缘关系最近的9个序列的18S rDNA，利用DNAMAN软件进行比对，并通过MEGA 5软件构建系统发育树，如图9所示。
CZ5-5菌株的18s rDNA的特征序列的PCR产物电泳检测结果如图7所示。PCR扩增产物经PromegaPCR Purification Kit纯化后，测序。CZ5-5菌株烟曲霉菌(Aspergillusfumigatus)菌株Bfum-5的18s rDNA的特征序列如SEQ ID NO.1所示。
序列比对结果如下：
NCBI比对：
由上可知，CZ5-5被鉴定为烟曲霉菌的一个新菌株，定名为Bfum-5，同时将该Bfum-5菌株送保藏，并作为本发明请求保护的菌株，其保藏号为CGMCC No.10929。
实施例3、验证所选单菌种的降解纤维素效果
一、滤纸降解实验法
经过筛选得出的所有单菌种，CMC-Na水解圈测定实验得出的分解纤维素能力较强的部分菌种采用滤纸降解实验法进一步筛选。
1培养基
滤纸培养基：去淀粉滤纸条1*3cm数张(每瓶一张)，(NH4)2SO42g/L,KH2PO41g/L，MgSO4·7H2O 0.5g/L，NaCl 0.5g/L，NaNO31g/L，FeCl30.01g/L，CaCl2·2H2O 0.2g/L，蛋白胨0.5g/L，酵母膏0.5g/L，pH7.2左右。
2主要步骤
a、选定菌种，每个菌种做3个重复，包括1个无菌水对照组和2个滤纸培养基实验组。在35℃150r/min的震荡箱中培养10天。
b、从第四天开始，每隔一天观察一次，看看滤纸浑浊情况。
3滤纸降解实验结果与分析
根据CMC-Na水解圈测定法结果，经过分析之后，挑取表现突出的菌种又进行了滤纸降解试验。菌种分解纤维素能力越强，同一时间段内，分解滤纸越多，越接近半清状，可对比出各菌种的能力强弱。得出结果如表2所示。
表2菌种滤纸降解情况表
表2中的符号释义列示如下：
可以看出，所选菌种中，大部分都具有较强的纤维素分解能力，尤其CZ5-5(Bfum-5)最为突出。30414是外购的黄孢平革菌，有很强的纤维素分解能力，在本次实验中作为对照。观察表2得知，黄孢平革菌30414的滤纸降解效果已达到了“++++”，除此之外，CZ5-5(Bfum-5)的滤纸降解效果最明显，为“+++”，很快达到不定形状态。说明，CZ5-5(Bfum-5)可作为一株优良的纤维素降解菌株。
二、纤维素分解酶活测定方法
1材料和方法
黄孢平革菌(30414)、CZ5-5(Bfum-5)和MN1。采用纤维素四种酶活测定法，包括全酶活、外切酶活、内切酶活、β-葡萄糖苷酶活。
1.1培养基
PDA培养基：蔗糖20g/L,琼脂18g/L，20％马铃薯浸出液(200g去皮马铃薯切块，加水1000mL，煮沸半小时，至马铃薯能被玻璃棒捣碎为止，用双层纱布过滤取汁，补足原来的水量。
产酶培养基：蛋白胨10g/L，酵母膏10g/L，NaCl 5g/L，CMC-Na 5g/L，pH7.0-7.2。
1.2主要步骤：
a、葡萄糖标准溶液和标准曲线的制作和DNS法测定
反应的总体系为3.5mL，1mg/mL葡萄糖溶液和去离子水共2mL，DNS试剂1.5mL。取10支试管编号分别为1～10。分别吸取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8mL葡萄糖溶液至1～10号试管中；然后分别吸取2.0、1.8、1.6、1.4、1.2、1.0、0.8、0.6、0.4、0.2mL去离子水至相应的1～10号试管中。向1～10号试管中分别加入1.5mLDNS试剂。将上述试管一同沸水浴5min，冷却后稀释至10mL，在540nm下用分光光度计测吸光值，绘制葡萄糖标准曲线，见图8。
b、纤维素粗酶液的制备：用接种环挑取新鲜菌丝于新配置好的液体PDA培养基中，在35℃，150r/min的震荡箱中培养48h，用血球计数板在显微镜下观察孢子数目，按1％比例(108个孢子量)的接种量到300mL产酶培养基中，在同样的条件下培养，每隔24h取样测定酶活力，将培养好的液体发酵产酶培养基先用两层纱布过滤，取样完成后，再将滤液于4℃，10000r/min离心10min，上清液即为粗酶液。
c、全酶活(FPase)的测定：取适当稀释后的酶液0.5mL，加入到含有50mg去淀粉滤纸和1.5mL0.05mol/L pH4.6柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液的具塞刻度试管，50℃水浴中保温1h，立即按DNS法测定还原糖含量。
d、外切酶活(exo-1，4-β-D-glucanase，CBH/Cex)的测定：取适当稀释后的酶液0.5mL，加入到含有50mg脱脂棉和1.5mL0.05mol/L pH4.6柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液的具塞刻度试管，50℃水浴中保温1h，立即按DNS法测定还原糖含量。
e、内切酶活(endo-1，4-β-D-glucanase，EG/Cen)活力的测定：取适当稀释后的酶液0.5mL，加入到含有1％CMC的1.5mL0.05mol/L pH4.6柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液的具塞刻度试管，50℃水浴中保温30min，立即按DNS法测定还原糖含量。
f、β-葡萄糖苷酶(β-1，4-glucosidase，β-Gase)活力的测定：取适当稀释后的酶液0.5mL，加入到含有1％水杨苷的1.5mL0.05mol/L pH4.6醋酸-醋酸钠缓冲液的具塞刻度试管，50℃水浴中保温30min，立即按DNS法测定还原糖含量。
以上酶活力单位(U/mL)定义为:每mL酶液在上述反应条件下在1min内使底物降解生成1mg葡萄糖所需的酶量。酶活力的转换公式如下:
2纤维素分解菌酶活测定结果与分析
纤维素酶活测定结果见图3、图4、图5和图6以及表3。
表3纤维素酶活力测定结果
观察图3得知，三种菌都在培养72小时后达到全酶活活性最高值，然后有所下降，CZ5-5(Bfum-5)的酶活性最高值接近黄孢平革菌。观察图4可知，对于外切酶活，CZ5-5(Bfum-5)和黄孢平革菌在72h后达到最高值，且CZ5-5(Bfum-5)比黄孢平革菌高，为20U/ml。通过图5可以看出，内切酶活性方面，CZ5-5(Bfum-5)和在48h后达到最高值，且CZ5-5(Bfum-5)高于黄孢平革菌。通过图6可以看出，β-葡萄糖苷酶活性方面，CZ5-5(Bfum-5)都呈上升趋势，120h后达到30U/ml以上，明显优于黄孢平革菌。MN1为本课题组分离筛选的另一种纤维素分解菌，虽然实验数据列在本文中，但是却不是实现本发明的必须内容或者材料，因此在本文中不做描述。
Claims (9)
1.一株烟曲霉菌（Aspergillusfumigatus）菌株Bfum-5，其保藏号为CGMCC No.10929；所述烟曲霉菌（Aspergillusfumigatus）菌株Bfum-5的纤维素酶全酶活在培养72h时可达最高18U/ml。
2.用于降解纤维素的制品，其特征在于，所述制品的活性成分包括权利要求1所述的烟曲霉菌菌株Bfum-5。
3.用于降解纤维素的制品，其特征在于，所述制品的活性成分是权利要求1所述的烟曲霉菌菌株Bfum-5。
4.根据权利要求2或3所述的制品，其特征在于，所述制品还包括用于降解纤维素的常规成分和／或用于培养所述的烟曲霉菌菌株Bfum-5的培养基成分。
5.一种降解纤维素的制品的制备方法，其特征在于，采用权利要求1所述的烟曲霉菌菌株Bfum-5作为制备所述制品的活性成分或活性成分之一。
6.一种用于降解纤维素的方法，其特征在于，在降解纤维素的过程中添加和/或使用权利要求2-4任一所述的制品。
7.一种用于降解纤维素的菌剂，其特征在于，所述菌剂的活性成分包括权利要求1所述的烟曲霉菌菌株Bfum-5。
8.一种用于降解纤维素的菌剂，其特征在于，所述菌剂的活性成分是权利要求1所述的烟曲霉菌菌株Bfum-5。
9.根据权利要求7或8所述的菌剂，其特征在于，还包括用于制备菌剂的常规成分。
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