CN104997880B - 一种组合物在制备预防尿结石药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种组合物在制备预防尿结石药物中的应用，包括西梅干，其重量占组合物总重量的1％以上。所述组合物作为一种保健食品，或作为一种保健药物使用，还包括药学上或食品学上可接受的载体形成的物质。所述组合物含有的有效组分为西梅干中的组分，包括：新绿原酸(Neochlorogenic Acid)、绿原酸(Chlorogenic Acid)、咖啡酰奎宁酸、原花青素低聚物、黄酮类化合物、芦丁、美拉德反应物。本申请发明人通过具体实验，确定了西梅干对肾草酸钙结石的预防效果，为草酸钙肾结石病愈者、亚健康、健康人群提供了一种来源简便、价格低廉、安全有效的预防良品。

Description

一种组合物在制备预防尿结石药物中的应用

技术领域

本发明涉及预防保健的医药食品领域，具体涉及一种组合物在制备预防尿结石药物中的应用。

背景技术

泌尿系结石是一个全球性疾病，也是我国最常见的泌尿外科疾病之一。全球不同地区的结石发病率在3％-14％之间，尤其是我国南方，泌尿系结石的发病率很高，是世界三个主要的泌尿系结石流行区之一。目前来看，随着体外冲击波碎石技术和腔内碎石技术的发展，泌尿系结石的诊断和治疗己经取得了很大的突破。但是存在治疗后易复发的问题，其中，10年复发率就高达50％，尤其是上尿路结石的发病仍有继续升高的趋势，而且，每年新增的患者也仍在不断地增加。尿石症发生率和复发率居高不下，其根本原因在于结石的病因和形成机制至今尚未完全阐明，缺乏有效的结石预防方法。因此，如何有效地预防其发生和降低其复发率，探索尿路结石的发病机制成为当前研究的重点内容。

草酸钙结石，作为泌尿系结石中最常见的情况，大约占到70％左右。草酸钙结石的形成机制复杂。尿液中草酸钙浓度的过饱和有助于晶体的成核和生长过程。但是，单个草酸钙晶体形成以后，只有粘附于肾小管上皮细胞的表面或者迅速地聚集形成较大的结晶以堵塞肾小管，否则，将被尿液迅速冲走，肾结石亦不会发生。由于正常人和草酸钙患者尿液中的成分对于草酸钙的形成都是处于过饱和状态的，因此，尿液过饱和只是形成结石的条件之一，而肾上皮细胞的损伤对于促进结石形成的作用十分重要。

已有研究发现，暴露于高浓度草酸或草酸钙晶体的肾脏上皮细胞会产生大量的自由基。正常情况下，自由基的生成和清除应保持动态平衡，体内存在酶和非酶两个系统清除自由基，抑制自由基反应体系，防止过度的脂质过氧化。超氧化物歧化酶(SOD)是清除自由基的重要酶，谷胱甘肽过氧物酶(GSH-Px)可以直接清除过氧化氢和脂质过氧化物，在自由基产生过多，脂质过氧化加重时，清除自由基的酶会过多的消耗，脂质过氧化终产物丙二醛(MDA)随之增高。由于自由基性质活泼，有极强的氧化反应能力，在病理状态下，机体内的自由基和脂质过氧化作用使多种大分子成分，如核酸、蛋白质产生氧化变性，DNA交联和断裂，导致细胞结构改变和功能破坏，而降低机体的抵抗力，引起多种疾病的发生。可见，细胞损伤的原因与自由基的大量形成有关，因此，使用抗氧化剂来抑制肾结石的复发将会有好处。

西梅是蔷薇目李属野生欧洲李(Prunus domestica L.)的法国栽培水果，后被引种到美国加州，我国近年来才引种。西梅含有大量的酚类抗氧化剂，包括新绿原酸、绿原酸、黄酮类、咖啡酸、香豆酸、芸香苷、原花青素，含量高于蓝莓、葡萄等，是果蔬中抗氧化能力最强，其总酚类化合物含量129.93-625.93mg/100g之间。

西梅除了作为鲜果食用外，市场上最多见的是西梅汁饮料和西梅干(Driedplums，Prune)。西梅干进入我国较早，是众多时尚人士所钟爱的零食。西梅富含纤维素、维生素A、维生素C、钾、铁、叶酸、钙等，有明显的润肠通便作用。近年来研究发现，西梅干能够预防绝经期妇女骨质疏松症、恢复骨密度、预防骨质疏松症患者的骨质流失、减少动脉粥样硬化的病变区域、有效减轻认知障碍、抑制高胆固醇血症、改善肝功能。但是，关于西梅干对大鼠生成草酸钙肾结石的干预效果尚未见文献报道，而进一步用于保健以预防尿结石的发生更没有任何研究。尿路结石是一个多发病，复发率也很高，目前尚无一劳永逸的预防方法。因此，尿结石的预防是一项终身性的任务，寻找一种来源简便、价格低廉、患者依从性好的有效预防方法有着重要的现实意义。

发明内容

针对上述情况，本申请发明人通过具体实验，确定了西梅干对肾草酸钙结石的预防效果，为草酸钙肾结石病愈者、亚健康、健康人群提供了一种来源简便、价格低廉、安全有效的预防良品。

本发明的主题是一种组合物在制备预防尿结石药物中的应用，其特征在于，包括西梅干，其重量占组合物总重量的1％以上。

所述组合物可以作为一种保健食品，也可以作为保健药物使用，具体地，是指本发明提供的组合物还包括药学上或食品学上可接受的载体形成的物质。其中，作为保健药物，所述组合物可以是药学上常规的制剂形式，例如但不限于，颗粒剂、胶囊、片剂、粉末剂、口服液、混悬液、或乳剂；作为保健食品，所述组合物可以是一种饮食补充剂。

在本发明的一个优选实施例中，所述组合物包括：西梅干和水，其重量配比为3:1，进一步地，通过料理机研磨得到西梅干匀浆组合物。

在一个实施例中，所述组合物包括：西梅干、琼脂和水，其重量配比为1:1:40，进一步地，所述组合物为西梅干果冻组合物。

在另一个是实施例中，所述组合物包括：西梅干和酸奶，其重量配比为1:20，进一步地，所组合物为西梅干酸奶。

优选地，所述组合物包括西梅干，其重量占组合物总重量的1-99％。更优选为20-75％，最优选为50-75％。

所述组合物含有的有效组分为西梅干中的组分，优选地，包括：新绿原酸(NeochlorogenicAcid)、绿原酸(ChlorogenicAcid)、咖啡酰奎宁酸、原花青素低聚物、黄酮类化合物、芦丁、美拉德反应物。

其中，所述美拉德反应物包括羟甲基糠和蛋白黑素。

尿结石，作为一种多发且复发率很高的疾病，目前尚无一劳永逸的预防方法，而且尿结石的预防是一项终身性的任务，因此，寻找一种来源简便、价格低廉、依从性好的有效预防方法有着重要的现实意义。本申请发明人发现，相对于新鲜的西梅，西梅干经加热脱水制备得到后，具有抗氧化作用的酚类含量损失过半(其中新绿原酸含量不变，绿原酸轻度减少)，但抗氧化能力却反而大大增强，且增幅与加热温度成正比。研究发现，在西梅干的热加工过程中，糖与有机酸之间发生的非酶促褐变(美拉德反应)，会产生一些具有较强抗氧化能力的美拉德反应物(MRPs)，其中，羟甲基糠(hydroxymethylfural，HMF)含量与西梅干的抗氧化活力具有较好的相关性。蛋白黑素也是一种MRPs，具有抗氧化能力、降压能力和金属结合能力。Posadino等研究表明，西梅干的蛋白黑素可以保护血管内皮细胞免受氧化应激损伤。

附图说明

图1为实施例中各组大鼠肾组织中草酸钙结晶生成的情况(HE*200)。

具体实施方式

发明人经过广泛而深入的研究，发现西梅干组合物，可以有效预防尿结石的发生。在此基础上，完成了本发明。

如本文所用，术语“含有”或“包括”包括了“包含”、“基本上由……构成”、和“由……构成”。

如本文所用，术语“基本上由……构成”指在组合物中，除了含有必要成分或必要组份之外，还可含有少量的且不影响有效成分的次要成分和/或杂质。例如，可以含有甜味剂以改善口味以及其他本领域常用的添加剂。

如本文所用，术语“有效量”是指可对人和/或动物产生功能或活性的且可被人和/或动物所接受的量。

如本文所用，“重量份”或“重量份数”可互换使用，所述的重量份可以是任何一个固定的以毫克、克数或千克数表示重量(如1mg、1g、2g、5g、或1kg等)。例如，一个由1重量份组分a和9重量份组分b构成的组合物，可以是1克组分a+9克组分b，也可以是10克组分a+90克组分b等构成的组合物。在所述组合物，某一组分的百分比含量＝(该组分的重量份数/所有组分的重量份数之和)×100％。因此，由1重量份组分a和9重量份组分b构成的组合物中，组分a的含量为10％，组分b为90％。

组合物

本发明提供了一种用于预防尿结石的组合物，包括西梅干，其重量占组合物总重量的1％以上。

所述组合物可以作为一种保健食品，也可以作为保健药物使用，具体地，是指本发明提供的组合物还包括药学上或食品学上可接受的载体形成的物质。其中，作为保健药物，所述组合物可以是药学上常规的制剂形式，例如但不限于，颗粒剂、胶囊、片剂、粉末剂、口服液、混悬液、或乳剂；作为保健食品，所述组合物可以是一种饮食补充剂。

其中，如本文所用，术语“药学上可接受的”或“食品学上可接受的”的成分是适用于人和/或动物而无过度不良副反应(如毒性、刺激和变态反应)的，即有合理的效益/风险比的物质。

如本文所用，术语“药学上可接受的载体”指用于治疗剂给药的载体，包括各种赋形剂和稀释剂。该术语指这样一些药剂载体：它们本身并不是必要的活性成分，且施用后没有过分的毒性。合适的载体是本领域普通技术人员所熟知的。在Remington'sPharmaceutical Sciences(Mack Pub.Co.，N.J.1991中可找到关于药学上可接受的赋形剂的充分讨论。在组合物中药学上可接受的载体可含有液体，如水、盐水、甘油和乙醇。另外，这些载体中还可能存在辅助性的物质，如填充剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、泡腾剂、润湿剂或乳化剂、矫味剂、pH缓冲物质等。

所述的“药学上可接受的载体”或“食品学上可接受的载体”还包括具有预防肾结石的成分，例如但不限于，酸奶、豆奶、豆奶粉、豆浆、黄豆粉、富氢水、富氢饮料、乳酸菌饮料、枸杞饮料等。

在本发明的一个优选实施例中，所述组合物包括：西梅干和水，其重量配比为3:1，进一步地，通过料理机研磨得到西梅干匀浆组合物。

在一个实施例中，所述组合物包括：西梅干、琼脂和水，其重量配比为1:1:40，进一步地，所述组合物为西梅干果冻组合物。

在另一个是实施例中，所述组合物包括：西梅干和酸奶，其重量配比为1:20，进一步地，所组合物为西梅干酸奶。

优选地，所述组合物包括西梅干，其重量占组合物总重量的1-99％。更优选为20-75％，最优选为50-75％。

所述组合物含有的有效组分为西梅干中的组分，优选地，包括：新绿原酸(NeochlorogenicAcid)、绿原酸(ChlorogenicAcid)、咖啡酰奎宁酸、原花青素低聚物、黄酮类化合物、芦丁、美拉德反应物。

其中，所述美拉德反应物包括羟甲基糠和蛋白黑素。

用途

本发明提供的组合物可以用于预防结石，尤其是预防草酸钙结石。可以给予哺乳动物有效量的本发明提供的组合物以预防结石的发生。所述的哺乳动物包括小鼠、大鼠、猪、牛、羊、猫、狗、猴和人。

本发明组合物的使用剂量和使用方法取决于诸多因素，包括患者的年龄、体重、性别、自然健康状况、营养状况、活性成分强度、服用、代谢速率、病症的严重程度以及诊治医师的主观判断。

本发明提到的上述特征，或实施例提到的特征可以任意组合。本说明书所揭示的所有特征可与任何组合物形式并用，说明书中所揭示的各个特征，可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明，所揭示的特征仅为均等或相似特征的一般性例子。

有益效果

本发明的组合物可减少诱石模型大鼠草酸钙结石的形成，其效果呈剂量依赖型。本发明的组合物可减少尿草酸排泄量，拮抗高尿草酸的细胞毒性，减少肾上皮细胞的凋亡，增加尿枸橼酸盐浓度，从而阻断了草酸钙结石形成链中的关键环节。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例、或份数按重量计。

本发明中的重量体积百分比中的单位是本领域技术人员所熟知的，例如是指在100毫升的溶液中溶质的重量。

除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。

实施例

1、准备

上海斯莱克实验动物有限责任公司(SLAC)提供的健康清洁级成年雄性Wistar大鼠40只(体重180-220g)；1％乙二醇去离子水；西梅干匀浆组合物(将西梅干和去离子水，按3:1的重量比，放入料理机，16000转/分研磨5分钟，制成西梅干匀浆组合物)。

2、研究方法

将准备好的40只大鼠随机分为5组，每组8只，在同一环境下适应性喂养1周，随后按下列方法处理4周：

A组(空白对照组)：饮去离子水；

B组(单纯诱石组)：以1％乙二醇溶液为唯一饮用水源；

C组－E组(诱石+组合物干预组)：以1％乙二醇溶液为唯一饮用水源，同时分别给予2ml/kg/d、4ml/kg/d、8ml/kg/d的西梅干匀浆组合物。

3、检测指标

分别检测大鼠尿钙、镁、草酸及枸橼酸浓度；血钙、镁肌酐浓度；肾脏组织丙二醛(MDA)含量及总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性；偏光显微镜观察HE染色肾脏组织草酸钙结晶形成情况；TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡。

1)实验结束前1天用代谢笼收集24小时尿液并计量，计量后，均分为三份：一份用生化仪测定钙、钠、钾浓度；一份测草酸浓度(加浓盐酸防腐)；一份测尿枸橼酸盐浓度(加麝香草酚防腐)。4℃保存。用4％戊巴比妥钠麻醉后脱臼处死大鼠，切取肾脏。

2)尿草酸浓度的测定采用铬酸钾氧化甲基红催化光度法(麻全生,杨文初.铬酸钾氧化甲基红催化光度法测定微量草酸[J].理化检验：化学分册,1998,34(7):309-310)

尿枸橼酸浓度的测定采用五溴丙酮硫脲比色法(曹履诚、章绍舜主编.尿石症基础与临床研究[M].济南:山东科学技术出版社,1990:60-86)

3)取出双肾，纵向剖开左肾，用4％多聚甲醛固定，石蜡切片HE染色，200倍光镜下观察肾组织草酸钙微结石情况，按文献标准(Thamilselvan S,Menon M.Vitamin Etherapy prevents hyperoxaluria-induced calcium oxalate crystal deposition inthe kidney by improving renal tissue antioxidant status[J].BJU Int,2005,96(1):117-26)分级：

0级：无任何结晶亮点；

Ⅰ级：细小的结晶亮点广泛但不成堆；

Ⅱ级：结晶变粗大、成堆，但散在不连接；

Ⅲ级：成堆结晶局部互相连接；

Ⅳ级：广泛成堆结晶连接成片。

4)采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)对肾组织切片进行免疫组化染色，200倍光镜下观察肾小管，蓝棕色核为凋亡细胞。用图像分析软件Imagine-Pro Phs 5.0计数凋亡细胞，计算凋亡指数(每个视野计数100个细胞中凋亡的细胞数)

4、实验结果

与空白对照组比较.单纯诱石组大鼠尿草酸、肾小管上皮细胞凋亡指数、肾脏组织MDA含量和血清肌酐水平明显升高，尿镁离子浓度、尿枸橼酸盐含量和肾脏组织T-SOD活性明显降低，肾脏组织草酸钙结晶评分高达31分。与单纯诱石组比较.诱石+西梅干干预组大鼠的尿草酸、肾小管上皮细胞凋亡指数、肾脏组织MDA含量、血清肌酐水平的升幅和尿构橼酸盐含量、肾脏组织T-SOD活性的降幅均明显减少；尿镁离子浓度明显升高；肾脏组织草酸钙结晶评分明显下降，三个剂量干预组的肾结晶评分分别降低了41.94％、58.06％、67.74％。差异均有统计学意义(P<0.05)。

1)尿生化指标

表1各组大鼠尿促石、抑石成分的检测结果(x±s，mmol/L，n＝8)

组别	尿离子钙	尿离子镁	尿草酸	尿枸橼酸
					空白对照	3.06±0.25	9.48±0.33	1.39±0.10	10.26±0.06
单纯诱石	4.98±0.05①	6.94±0.12①	3.64±0.52①	8.60±0.16①
					2ml干预	4.58±0.10①②	40.24±0.74①②	3.11±0.23①②	9.61±0.39①②
4ml干预	4.01±0.11①②	45.16±0.75①②	2.24±0.05①②	9.96±0.12①②
					8ml干预	3.94±0.09①	49.61±0.65①②	1.61±0.13①②	9.99±0.09①②

注：①：与空白对照组比较，P<0.05；②:单纯诱石组比较，P<0.05

2)血生化指标

表2各组大鼠血相关指标的检测结果(x±s，mmol/L，n＝8)

注：①：与空白对照组比较，P<0.05；②:单纯诱石组比较，P<0.05

3)大鼠肾脏组织学草酸钙结晶形成情况

200倍偏光显微镜观察HE染色切片发现(图1)：在空白对照组，在光镜下可见肾小管结构正常，并未见明显的草酸钙肾结晶；在单纯诱石组，大鼠肾脏组织中草酸钙结晶呈片状连接，在肾皮质、髓质及乳头均可见到，结晶总评分达31分。三个剂量的西梅干干预组，大鼠肾脏组织结晶评分分别为18分、13分、10分，比单纯诱石组的结晶评分分别降低了41.94％、58.06％、67.74％，与单纯诱石组的差异有显著统计学意义(p<0.05)。详见图1.

4)各组大鼠肾脏组织中MDA含量和T-SOD活性

表3各组大鼠MDA水平和T-SOD活性(x±s，n＝8)

组别	MDA	T-SOD
			空白对照	2.58±0.08	250.99±2.66
单纯诱石	6.70±0.19①	107.56±4.09①
			2ml干预	5.36±0.45①②	186.14±6.16①
4ml干预	4.63±0.46①②	174.35±9.17①②
			8ml干预	3.75±0.47①②	126.02±12.46①②

注：①：与空白对照组比较，P<0.05；②:单纯诱石组比较，P<0.05

5)讨论

国内外对泌尿系结石的形成进行了大量的临床及动物研究，对其基本机制的了解日益深入。目前已知，肾脏病理改变，特别是肾小管上皮细胞的损害，是尿石形成的最早期基础病变，多种因素引起的肾小管上皮细胞损伤的主要机制是自由基的介导。

自由基广泛存在于自然界，存在于生物体内的是氧自由基，又称活性氧(reactiveoxygen species，ROS)，主要包括过氧化氢、超氧化物以及羟基阴离子。正常情况下的ROS的产生是受到严密调控的，只有在被需要时才增加。ROS的过量生成或体内抗氧化剂水平的降低，将导致氧化应激(OS)、炎症和损伤，并参与了结石的生成。

研究发现，肾小管上皮细胞在损伤因素的作用下，细胞内会产生大量的ROS，而ROS可导致肾近端小管上皮细胞功能损伤。Lee等发现草酸在一定程度上可以通过ROS损伤肾脏上皮细胞。Lupescu等用抗氧化剂N-乙酰L-半胱氨酸(NAG)可抑制甲基多巴所致的红细胞氧化应激反应，并抑制甲基多巴引起的红细胞膜磷脂酰丝氨酸(PS)外翻过程。Xu等研究发现细胞内活性氧水平升高可以引起细胞内钙离子水平的升高，而添加抗氧化剂可降低钙离子浓度。Grases等体外模拟肾脏条件，证明了自由基可引起肾脏上皮细胞损伤，并形成一个有利于结晶形成的环境；应用抗氧化剂可抑制草酸钙结晶的生成。国内外学者通过对草酸钙结石患者的临床研究，也证实了ROS在肾结石的形成中发挥着重要的作用。张越等[10]检测了30例健康无结石志愿者和40例肾结石患者，发现肾结石患者尿酶NAG、β2-MG和r-GT显著升高，表明尿路结石伴有肾小管功能损伤；而其血清TNF-α、血浆MDA值升高，血浆SOD活性降低，表明炎症反应和自由基参与了肾结石患者的肾小管损伤过程，并且很可能是肾结石复发的重要原因。Tungsanga等发现尿MDA及尿蛋白水平与NAG活性呈显著负相关，支持肾小管上皮细胞的损伤是由氧化应激引起的。

草酸钙结石是泌尿系结石中最常见的，大约占到70％左右。目前制作大鼠草酸钙模型常用1％乙二醇联合氯化铵或者单独应用1％乙二醇加入饮用水中给大鼠自由饮用，其原理主要基于尿草酸对肾脏的氧化应激损伤，以及增加尿草酸的过饱和浓度。乙二醇经肠道吸收后，在体内经过一系列代谢反应转化成草酸并随尿液排出体外，过饱和的尿草酸与尿钙结合形成草酸钙结晶，同时，高浓度的尿草酸诱导肾脏组织产生ROS，造成肾小管上皮细胞膜过氧化，使细胞凋亡、脱落，基膜暴露，致使草酸钙结晶黏附其表面。乙二醇还可减少尿液中镁离子和枸橼酸盐的排泄量，使这两种抑制结晶聚集的重要天然物质含量不足，促进在肾小管中的滞留结晶迅速成长。本实验给予大鼠，连续自由饮用1％乙二醇4周，发现大鼠肾脏肿胀明显，上皮细胞破坏明显，肾结晶评分较高，造模良好。

西梅富含抗氧化物质，含量高于蓝莓、葡萄等，是果蔬中抗氧化能力最强的。其主要抗氧化成分为酚类的新绿原酸(Neochlorogenic Acid)和绿原酸(ChlorogenicAcid)，这两种物质在体外具有超强的抗氧化作用，但人体肠道对其吸收很少。西梅中还含有咖啡酰奎宁酸及原花青素低聚物，后者的抗氧化能力强于绿原酸。西梅的抗氧化物质中还含有少量的黄酮类化合物和芦丁，前者被证实具有抗炎作用。杨艳等发现，摄入适量的西梅汁，可以通过显著升高小鼠血清SOD、抑制GSH-Px活性，有效增强老龄小鼠体内的抗氧化能力。

西梅经加热脱水制成西梅干后，具有抗氧化作用的酚类含量损失过半(其中新绿原酸含量不变，绿原酸轻度减少)，但抗氧化能力却反而大大增强，且增幅与加热温度成正比。研究发现，在西梅干的热加工过程中，糖与有机酸之间发生的非酶促褐变(美拉德反应)，会产生一些具有较强抗氧化能力的美拉德反应物(MRPs)，其中，羟甲基糠(hydroxymethylfural，HMF)含量与西梅干的抗氧化活力具有较好的相关性。蛋白黑素也是一种(MRPs)，具有抗氧化能力、降压能力和金属结合能力。Posadino等研究表明，西梅干的蛋白黑素可以保护血管内皮细胞免受氧化应激损伤。

镁是一种抗氧化剂，具有抗脂质氧化和稳定、保护生物膜的作用，是肾结石生成的抑制因子之一。其作用机制包括参与DNA修复的酶多为镁依赖性、与DNA结合后降低局部负电荷的密度，开启DNA免受自由基损害的保护模式、抑制磷脂酶、作为钙的拮抗剂，减少由于细胞内钙超载而导致的氧化自由基的产生。

镁能明显拮抗过氧化氢诱导的DNA氧化断裂损伤，减少DNA复制错误以及刺激DNA修复。吕晓华等研究镁对人脐静脉内皮细胞中氧化还原相关基因表达的影响，发现镁能抑制H2O2诱导的c-jun、c-fos、ref-1和p52等氧化还原相关基因的表达，从转录水平揭示了镁的抗氧化作用机制。张莹等发现，葡萄糖酸镁对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤有保护作用，其作用机制与减轻钙超载、抗脂质过氧化和增加NO浓度有关。

本实验发现，西梅干能够大幅度增加尿镁浓度，其原因并非西梅富含镁元素，因为本实验所用的西梅干的镁含量并不高，仅为45mg/100g。鉴于其血镁水平低于空白对照组，故推测其增加尿镁排泄量的机制可能为减少了尿镁的重吸收。

尿枸橼酸是肾结石生成的抑制因子之一。本实验发现，西梅干能够明显抑制乙二 醇诱导的大鼠尿枸橼酸浓度降低，其机理不明。

正常情况下，经尿液排泄的草酸大部分来自于体内甘氨酸经乙醛酸途径以及维生素C经2,3二酮古洛糖酸途径代谢产成的内源性草酸，小部分来自于食物草酸经肠道吸收的肠源性草酸。内源性草酸的生成量是比较恒定，尿草酸排泄量的变化主要是因为肠源性草酸量的变化。

结石造模剂乙二醇被肠道吸收后，能够迅速分布于血液及组织液中，在肝脏经乙醇脱氢酶代谢成为乙二醇醛，再经乙醛脱氢酶代谢成为乙醇酸，乙醇酸经乙醇酸氧化酶氧化成为乙醛酸，乙醛酸经乙二酸氧化酶形成草酸；也有部分形成为甲酸和马尿酸。草酸在体内属于最终代谢产物。乙醛酸也可由氨基酸-乙醛酸转氨酶形成甘氨酸排泄。

由于乙二醇的水溶性较强，西梅对其吸收不会有明显影响，因此，西梅干能明显抑 制乙二醇诱导的大鼠高草酸尿症，其机理可能为抑制了内源性草酸的生成或抑制了乙二醇 转化成草酸。

本实验结果显示，单纯诱石组大鼠的SCr、BUN浓度比空白对照组明显增高，而西梅干能明显降低这些增幅，说明西梅干具有一定的保护大鼠肾功能的作用。

与单纯造模组相比，各西梅干干预组24小时尿草酸及尿钙排泄量明显减少，肾脏水肿较轻，草酸钙结晶少，肾上皮细胞凋亡指数减少，说明西梅干能减少尿草酸及尿钙排 出，从而抑制草酸钙结晶的形成。干预组肾组织MDA含量明显低于诱石组，SOD活力明显高于诱石组，表明西梅干能够清除氧自由基，保护肾小管上皮细胞，从而减少草酸钙结晶的沉 积，预防肾结石生成。

以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只是作为范例，本发明并不限制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行的等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。因此，在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和修改，都应涵盖在本发明的范围内。

Claims (10)

1.一种组合物在制备预防尿结石药物中的应用，其特征在于，包括西梅干，其重量占组合物总重量的1％以上，所述组合物含有的有效组分为西梅干中的抗氧化物质，所述抗氧化物质包括新绿原酸(Neochlorogenic Acid)、绿原酸(ChlorogenicAcid)、咖啡酰奎宁酸、原花青素低聚物、黄酮类化合物、芦丁、美拉德反应物。

2.根据权利要求1所述组合物在制备预防尿结石药物中的应用，其特征在于，所述组合物还包括药学上或食品学上可接受的载体形成的物质。

3.根据权利要求1所述组合物在制备预防尿结石药物中的应用，其特征在于，所述组合物包括：西梅干和水，其重量配比为3:1，进一步地，通过料理机研磨得到西梅干匀浆组合物。

4.根据权利要求1所述组合物在制备预防尿结石药物中的应用，其特征在于，所述组合物包括：西梅干、琼脂和水，其重量配比为1:1:40，进一步地，所述组合物为西梅干果冻组合物。

5.根据权利要求1所述组合物在制备预防尿结石药物中的应用，其特征在于，所述组合物包括：西梅干和酸奶，其重量配比为1:20，进一步地，所组合物为西梅干酸奶。

6.根据权利要求1所述组合物在制备预防尿结石药物中的应用，其特征在于，所述组合物包括西梅干，其重量占组合物总重量的1-99％。

7.根据权利要求1所述组合物在制备预防尿结石药物中的应用，其特征在于，所述美拉德反应物包括羟甲基糠和蛋白黑素。

8.一种组合物在制备预防尿结石保健药物中的应用，其特征在于，包括西梅干，其重量占组合物总重量的1％以上，所述组合物含有的有效组分为西梅干中的抗氧化物质，所述抗氧化物质包括新绿原酸(Neochlorogenic Acid)、绿原酸(ChlorogenicAcid)、咖啡酰奎宁酸、原花青素低聚物、黄酮类化合物、芦丁、美拉德反应物。

9.根据权利要求8所述的组合物在制备预防尿结石保健药物中的应用，其特征在于，所述组合物作为保健药物，是药学上常规的制剂形式，包括但不限于，颗粒剂、片剂、粉末剂、口服液、悬浮液、或乳剂。

10.一种组合物在制备预防尿结石保健食品中的应用，其特征在于，包括西梅干，其重量占组合物总重量的1％以上，所述组合物含有的有效组分为西梅干中的抗氧化物质，所述抗氧化物质包括新绿原酸(Neochlorogenic Acid)、绿原酸(ChlorogenicAcid)、咖啡酰奎宁酸、原花青素低聚物、黄酮类化合物、芦丁、美拉德反应物。