CN104946529A - 一种防液滴挂口的培养瓶的处理方法 - Google Patents

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余志洋
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Abstract

本发明提供了一种防液滴挂口或沿壁流至瓶身的培养瓶的处理方法，根据培养瓶本体材质的疏水性和亲水性不同，灵活将改性处理和表面疏水化处理的方法与保护处理结合起来应用于培养瓶的处理，使得采用本发明方法处理的培养瓶，其瓶口表面呈疏水性，既达到该培养瓶既能满足细胞培养的要求，又能在使用过程中防止因转移瓶内培养基而使液滴挂于瓶口处或沿壁流至瓶身，避免污染瓶内物质，从而实现提高细胞培养效率的目的。

Description

一种防液滴挂口的培养瓶的处理方法
技术领域
本发明涉及一种细胞培养瓶的处理方法，通过该方法处理的细胞培养瓶，在倒出瓶内培养基时，能够防止培养基液滴挂于瓶口处或沿壁流至瓶身，属于生物技术领域。 
背景技术
细胞的体外培养是生物技术必不可少内容。在细胞培养过程中，均需要用到培养瓶。该类用于提供细胞体外培养环境的培养瓶除了具有良好的透明度、无毒、无菌外，还需经表面改性处理使之能够贴壁、分裂和生长。现有技术使用的培养瓶，一般是先经过整体的处理，使瓶体内外壁均具有亲水性。
然而在细胞培养过程中，当实验者将培养基直接从培养瓶中倒出，由于培养瓶外壁和内壁均具有亲水性，培养基会沿着培养瓶瓶口壁流至瓶身或在瓶口挂滴，如不及时清理会引起细菌在瓶口大量繁殖，进而污染瓶内细胞。因此需要开发一种防液滴挂口或防止液体沿瓶壁流至瓶身的培养瓶的处理方法，使得经过该方法处理的培养瓶在使用过程中可以减少液滴挂口或沿壁流至瓶身带来的瓶内污染，从而提高细胞培养效率。
发明内容
本发明的目的是为了解决上述技术问题，所提供的一种细胞培养瓶的处理方法，通过该方法处理的细胞培养瓶，在倒出瓶内培养基时，能够防止培养基液滴挂于瓶口处。为了达到上述目的，本发明提供如下技术方案：
培养瓶为亲水性材质，采用下述两种方法中的其中一种进行处理：
方法一：将由亲水性材质制成的瓶体进行等离子体、电晕或高能射线辐照的表面疏水化处理，使得瓶体形成疏水性表面，然后将疏水性瓶口进行保护处理，对瓶身内壁的细胞培养面进行组织细胞培养表面改性处理；方法二：首先对由亲水性材质一体制成的瓶身内壁进行组织细胞培养表面改性处理得到细胞培养表面，然后将瓶身内壁的细胞培养面进行保护处理，使细胞培养面不暴露于等离子体、电晕或高能射线辐照的表面疏水化处理条件中，最后对瓶口进行等离子体、电晕或高能射线辐照的表面疏水化处理，使得瓶口处形成疏水性表面。
培养瓶为疏水性材质，采用下述步骤进行处理：首先将瓶口内壁进行保护处理，使瓶口内壁不暴露于等离子体、电晕或高能射线辐照的亲水化处理条件中，然后对瓶身的细胞培养面进行组织细胞培养表面改性处理。
本发明进一步地，所述保护处理是包括两个步骤，首先提供一覆盖物，其次将所述覆盖物覆盖在需要保护的区域并将需要保护的区域密封。 
本发明进一步地，所述覆盖物包括开口处两侧均带有软性材料的弹性圆弧状夹子、密封瓶盖、贴膜、快干胶或\和不干胶。
本发明进一步地，所述等离子体表面疏水化处理的方法是采用烷烃气体或含氟气体作为工作气体进行等离子体处理，其中，处理功率为0～3000W、处理时间为30S～60min、气体流量300～3000sccm、处理温度10～75℃。
本发明进一步地，所述含氟气体包括四氟化碳。
本发明进一步地，所述电晕表面疏水化处理的方法是采用常压下的气体等离子体，在被处理表面形成疏水性基团从而使被处理表面具有疏水性，其中，以含氟气体作为工作气体，处理功率0～3000W、处理时间30S～60min、气体流量300～3000sccm、处理温度10～75℃。
本发明进一步地，所述高能射线辐照表面疏水化处理的方法是通过等离子体方法处理后进行氧化，在被处理表面形成过氧化层，然后将氧化后的被处理表面放入氟化烯烃的气体中常温下辐照2h～14h。
本发明进一步地，所述亲水性材质是指由该亲水性材质形成的表面，其与水接触角小于90°，包括聚甲基丙烯酸甲酯或聚碳酸酯。
本发明进一步地，所述疏水性材质是指由该亲水性材质形成的表面，其与水接触角大于90°，包括聚聚苯乙烯、聚丙烯或聚乙烯。
本发明的应用和实施具有下述有益效果：采用本发明方法处理的培养瓶，培养瓶瓶口表面呈疏水性，培养瓶内壁呈亲水性，适合细胞的培养和生长，使得培养瓶既能满足细胞培养的要求，又能在使用过程中防止因转移瓶内培养基而使液滴挂于瓶口处或沿壁流至瓶身，避免污染瓶内物质，从而提高细胞培养效率。
具体实施方式
图1是本发明优选实施例中密封瓶盖实用状态示意图；
图2是图1中A的局部放大图；
图3是本发明优选实施例中弹性圆弧夹子的结构示意图；
图4是本发明优选实施例中弹性圆弧夹子的另一角度的结构示意图。
具体实施方式
下面结合附图将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明防液体挂口或沿壁流至瓶身的培养瓶的处理方法，根据培养瓶所采用的材质不同，所采用方法的不经相同。当培养瓶为亲水性材质时，包括如下步骤：首先将瓶体进行等离子体、电晕或高能射线辐照的疏水化处理。其中，等离子体处理是采用烷烃气体或含氟气体进行处理，所用的含氟气体优选为四氟化碳。然后保护疏水性瓶口，对瓶身内壁的细胞培养面进行组织细胞培养表面改性处理，使处理过后的表面适宜细胞的生长，该方法可采用本领域技术人员公知的任意技术，具体地，该组织细胞培养表面改性处理可以是指采用等离子体、电晕或高能射线辐照的方法进行表面处理。该保护处理是包括两个步骤，首先提供一覆盖物，其次将所述覆盖物覆盖在需要保护的区域并将需要保护的区域密封，覆盖物可采用具有粘合性的胶带，即快干胶或/和不干胶，带有软性材料的弹性圆弧状夹子2等方法进行保护。然后对由亲水性材质制成的瓶口采用等离子体、电晕或高能射线辐照的方法对其进行组织细胞培养表面改性处理，使得瓶身表面适宜细胞的生长。
另外当培养瓶为亲水性材质，还可采用下述方法：首先对由亲水性材质一体制成的瓶身内壁进行组织细胞培养表面改性处理得到细胞培养表面，然后将瓶身内壁的细胞培养面进行保护处理，使细胞培养面不暴露于等离子体、电晕或高能射线辐照的表面疏水化处理条件中，该保护处理同样包括两个步骤，先提供一覆盖物，其次将所述覆盖物覆盖在需要保护的区域并将需要保护的区域密封，覆盖物可采用贴膜、快干胶或\和不干胶的方法进行保护。然后，对瓶口进行表面疏水化处理，该步骤的表面疏水化处理同样包括等离子体处理、电晕或高能射线处理，等离子体处理是采用烷烃气体或含氟气体进行等离子体处理，所用的含氟气体优选为四氟化碳。
若培养瓶为疏水性材质，只需如同前述方法首先将瓶口内壁保护处理，该保护处理提供的覆盖物包括弹性圆弧状夹子2、密封瓶盖1、贴膜、快干胶或\和不干胶，如图1至图4所示，瓶口的保护优选为弹性圆弧状夹子2和密封瓶盖1，弹性圆弧状夹子2上设置有软性材料3，使瓶口内壁不暴露于表面改性处理氛围中，然后对瓶身的细胞培养面进行组织细胞培养表面改性处理，得到适宜细胞生长的表面。
具体地，等离子体表面疏水化处理的方法是采用烷烃气体或含氟气体作为工作气体进行等离子体处理，其中，处理功率为0～3000W、处理时间为30S～60min、气体流量300～3000sccm、处理温度10～75℃。电晕表面疏水化处理的方法是常压下的气体等离子体，在被处理表面形成疏水性基团从而使被处理表面具有疏水性，其中，以含氟气体作为工作气体，处理功率0～3000W、处理时间30S～60min、气体流量300～3000sccm、处理温度10～75℃。高能射线辐照表面疏水化处理的方法是通过等离子体方法处理后进行氧化，在被处理表面形成过氧化层，然后将氧化后的被处理表面放入氟化烯烃的气体中常温下辐照2h～14h。
本发明一的具体实施例，所述亲水性材质是指由该亲水性材质形成的表面与水接触角小于90°，包括但不限于聚甲基丙烯酸甲酯或聚碳酸酯。所述疏水性材质是指由该亲水性材质形成的表面与水接触角大于90°，包括但不限于聚聚苯乙烯、聚丙烯或聚乙烯。
因此，采用本发明方法处理的培养瓶，培养瓶瓶口表面是疏水性的，培养瓶内壁呈亲水性，适合细胞的培养和生长，使得培养瓶既能满足细胞培养的要求，又能在使用过程中防止因转移瓶内培养基而使液滴挂于瓶口处或沿瓶壁流至瓶身，避免培养瓶内的污染瓶，从而提高细胞培养效率。
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (9)

1.一种防液滴挂口的培养瓶的处理方法，其特征在于：
培养瓶为亲水性材质，采用下述两种方法中的其中一种进行处理：
方法一：将由亲水性材质制成的瓶体进行等离子体、电晕或高能射线辐照的表面疏水化处理，使得瓶体形成疏水性表面，然后将疏水性瓶口进行保护处理，对瓶身内壁的细胞培养面进行组织细胞培养表面改性处理；
方法二：首先对由亲水性材质一体制成的瓶身内壁进行组织细胞培养表面改性处理得到细胞培养表面，然后将瓶身内壁的细胞培养面进行保护处理，使细胞培养面不暴露于等离子体、电晕或高能射线辐照的表面疏水化处理条件中，最后对瓶口进行等离子体、电晕或高能射线辐照的表面疏水化处理，使得瓶口处形成疏水性表面；
培养瓶为疏水性材质，采用下述步骤进行处理：首先将瓶口内壁进行保护处理，使瓶口内壁不暴露于等离子体、电晕或高能射线辐照的亲水化处理条件中，然后对瓶身的细胞培养面进行组织细胞培养表面改性处理。
2.根据权利要求1所述的一种防液滴挂口的培养瓶的处理方法，其特征在于：所述保护处理是包括两个步骤，首先提供一覆盖物，其次将所述覆盖物覆盖在需要保护的区域并将需要保护的区域密封。
3.根据权利要求2所述的一种防液滴挂口的培养瓶的处理方法，其特征在于：所述覆盖物包括开口处两侧均带有软性材料的弹性圆弧状夹子（2）、密封瓶盖（1）、贴膜、快干胶或\和不干胶。
4.根据权利要求1所述的一种防液滴挂口的培养瓶的处理方法，其特征在于：所述等离子体表面疏水化处理的方法是采用烷烃气体或含氟气体作为工作气体进行等离子体处理，其中，处理功率为0～3000W、处理时间为30S～60min、气体流量300～3000sccm、处理温度10～75℃。
5.根据权利要求4所述的一种防液滴挂口的培养瓶的处理方法，其特征在于：所述含氟气体包括四氟化碳。
6.根据权利要求1所述的一种防液滴挂口的培养瓶的处理方法，其特征在于：所述电晕表面疏水化处理的方法是采用常压下的气体等离子体，在被处理表面形成疏水性基团从而使被处理表面具有疏水性，其中，以含氟气体作为工作气体，处理功率0～3000W、处理时间30S～60min、气体流量300～3000sccm、处理温度10～75℃。
7.根据权利要求1所述的一种防液滴挂口的培养瓶的处理方法，其特征在于：所述高能射线辐照表面疏水化处理的方法是通过等离子体方法处理后进行氧化，在被处理表面形成过氧化层，然后将氧化后的被处理表面放入氟化烯烃的气体中常温下辐照2h～14h。
8.根据权利要求1所述的一种防液滴挂口的培养瓶的处理方法，其特征在于：所述亲水性材质是指由该亲水性材质形成的表面，其与水接触角小于90°，包括聚甲基丙烯酸甲酯或聚碳酸酯。
9.根据权利要求1所述的一种防液滴挂口的培养瓶的处理方法，其特征在于：所述疏水性材质是指由该亲水性材质形成的表面，其与水接触角大于90°，包括聚聚苯乙烯、聚丙烯或聚乙烯。
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