CN104892152A - 一种黄芩种植用的生物肥的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开一种黄芩种植用的生物肥的制备方法,属于生物肥技术领域。步骤:收集蘑菇种植废料,清洗,晾干,破碎成细粉;取细粉,加入水,再加入蛋白酶和纤维素酶,加热,酶解,然后灭酶,放冷;将酶解液投入到发酵装置中,加入棉籽饼、腐殖酸、麦麸、米糠、豆粕、家蝇蝇蛆粉、光合细菌菌液、放线菌菌液,混合均匀,调节pH;将发酵装置密封,发酵完成后,即可。本发明制备得到的生物肥中采用了多种发酵菌种,配合发酵底物进行发酵后,制备得到的肥料有利于黄芩生长和提高有效成分含量的作用。

Description

一种黄芩种植用的生物肥的制备方法
技术领域
    本发明公开一种黄芩种植用的生物肥的制备方法,属于生物肥技术领域。
背景技术
黄芩为唇形科植物黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的干燥根。主产于河北、山西、内蒙古、辽宁等省区。以山西产量较大,河北承德质量较好。野生为主,已开始栽培。春秋二季采挖,除去泥沙和须根,晒后除去粗皮,晒干。苦、寒,归肺、心、肝、胆、大肠经。清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎。黄芩的化学成分主要有黄酮类、挥发油、苯乙醇糖苷类,黄酮类化合物主要指以2—苯基色原酮为基核的化合物,主要有黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇、异黄酮、花色素、查尔酮等以及它们的衍生物。
生物肥料是通过微生物生命活动得到的使农作物得到特定的肥料效应的制品,也被称之为接种剂或菌肥。含有大量有益微生物,施入土壤后,或能固定空气中的氮素,或能活化土壤中的养分,改善植物的营养环境,或在微生物的生命活动过程中,产生活性物质,刺激植物生长。
目前市面上针对黄芩种植的有机生物肥料较少。
发明内容
本发明的目的是:提供一种生物肥,该生物肥具有利于黄芩生长和提高有效成分含量的作用。
技术方案如下:
一种黄芩种植用的生物肥的制备方法,包括如下步骤:
第1步、收集蘑菇种植废料,清洗,晾干,破碎成细粉;
第2步、按重量份计,取细粉50~80份,加入6~12倍重量的水,再加入蛋白酶2份和纤维素酶2份,加热到40~55℃,酶解6~8小时,然后灭酶,放冷;
第3步、将酶解液投入到发酵装置中,加入棉籽饼10~20份、腐殖酸3~5份、麦麸15~25份、米糠10~20份、豆粕15~25份、家蝇蝇蛆粉5~8份、光合细菌菌液3~5份、放线菌菌液3~5份,混合均匀,调节pH;
第4步、将发酵装置密封,控制发酵温度在30~40℃,发酵完成后,即可。
所述的第3步中,pH调节的范围在6.5~7.5。
其中所述光合细菌为沼泽红假单孢菌(Rhodopseudomonaspalustris);所述放线菌为泾阳链霉菌(Streptomyces jingyangesis)。
所述的第3步中,各种菌液中单位有效活菌数不低于5亿/毫升。
所述的第4步中,发酵时间是在10~30天。
所述的家蝇蝇蛆粉是将家蝇蝇蛆干燥、粉碎后制得。
有益效果
    本发明制备得到的生物肥中采用了多种发酵菌种,配合发酵底物进行发酵后,制备得到的肥料有利于黄芩生长和提高有效成分含量的作用。
具体实施方式
以下实施例,其中所述光合细菌为沼泽红假单孢菌(Rhodopseudomonaspalustris);所述放线菌为泾阳链霉菌(Streptomyces jingyangesis)。所述的家蝇蝇蛆粉是将家蝇蝇蛆干燥、粉碎后制得。
以下实施例中采用菌液的培养基如下:
沼泽红假单孢菌的一级培养基为:MgSO4·7H2O 0.2g、(NH4)2SO41.0g、NaHCO3 5.0g、K2HPO4 0.5g、NaCl 0.2g、蛋白胨1.5g;将各成分溶于400ml蒸馏水中,用H3PO4和Na2CO3调pH 7.1,再加入蒸馏水至1000ml,115℃灭菌10分钟;二级培养基为:Na2CO3 3g、NaCl 0.1g、(NH4)2SO4 0.3g、MgSO4 0.2g、KH2PO3 0.5g、K2HPO3 0.3g、柠檬酸铁铵7ml、蛋白胨1.2g、用蒸馏水定容至1000ml,用H3PO4和Na2CO3调pH为7.2。
泾阳链霉菌的一级培养基为:KNO3 1g,可溶性淀粉20g,K2HPO40.5g,MgSO4 0.5g,NaCl 0.5g,FeSO4 0.01g,琼脂20g,用蒸馏水定容至1000ml,pH7.2;二级培养基为KNO3 0.8g,可溶性淀粉8g,葡萄糖5g,酵母汁5g,K2HPO4 0.3g,MgSO4 0.2g,NaCl 0.4g,FeSO40.05g,用蒸馏水定容至1000ml,pH7.2。
沼泽红假单孢菌为间歇式通气培养;泾阳链霉菌为通气培养。
实施例1
第1步、收集蘑菇种植废料,清洗,晾干,破碎成细粉;
第2步、取细粉50Kg,加入6倍重量的水,再加入蛋白酶2Kg和纤维素酶2Kg,加热到40℃,酶解6小时,然后灭酶,放冷;
第3步、将酶解液投入到发酵装置中,加入棉籽饼10Kg、腐殖酸3Kg、麦麸15Kg、米糠10Kg、豆粕15Kg、家蝇蝇蛆粉5Kg、光合细菌菌液3Kg、放线菌菌液3Kg,混合均匀,调节pH为6.5,各种菌液中单位有效活菌数不低于5亿/毫升;
第4步、将发酵装置密封,控制发酵温度在30℃,发酵时间是在10天,发酵完成后,即可。
实施例2
第1步、收集蘑菇种植废料,清洗,晾干,破碎成细粉;
第2步、取细粉80Kg,加入12倍重量的水,再加入蛋白酶2Kg和纤维素酶2Kg,加热到55℃,酶解8小时,然后灭酶,放冷;
第3步、将酶解液投入到发酵装置中,加入棉籽饼20Kg、腐殖酸5Kg、麦麸25Kg、米糠20Kg、豆粕25Kg、家蝇蝇蛆粉8Kg、光合细菌菌液5Kg、放线菌菌液5Kg,混合均匀,调节pH为7.5,各种菌液中单位有效活菌数不低于5亿/毫升;
第4步、将发酵装置密封,控制发酵温度在40℃,发酵时间是在30天,发酵完成后,即可。
实施例3
第1步、收集蘑菇种植废料,清洗,晾干,破碎成细粉;
第2步、取细粉70Kg,加入7倍重量的水,再加入蛋白酶2Kg和纤维素酶2Kg,加热到46℃,酶解7小时,然后灭酶,放冷;
第3步、将酶解液投入到发酵装置中,加入棉籽饼15Kg、腐殖酸4Kg、麦麸18Kg、米糠16Kg、豆粕19Kg、家蝇蝇蛆粉7Kg、光合细菌菌液4Kg、放线菌菌液4Kg,混合均匀,调节pH为7.5,各种菌液中单位有效活菌数不低于5亿/毫升;
第4步、将发酵装置密封,控制发酵温度在35℃,发酵时间是在20天,发酵完成后,即可。
对照例1
与实施例3的区别在于:未加入放线菌菌液。
第1步、收集蘑菇种植废料,清洗,晾干,破碎成细粉;
第2步、取细粉70Kg,加入7倍重量的水,再加入蛋白酶2Kg和纤维素酶2Kg,加热到46℃,酶解7小时,然后灭酶,放冷;
第3步、将酶解液投入到发酵装置中,加入棉籽饼15Kg、腐殖酸4Kg、麦麸18Kg、米糠16Kg、豆粕19Kg、家蝇蝇蛆粉7Kg、光合细菌菌液4Kg,混合均匀,调节pH为7.5,各种菌液中单位有效活菌数不低于5亿/毫升;
第4步、将发酵装置密封,控制发酵温度在35℃,发酵时间是在20天,发酵完成后,即可。
对照例2
与实施例3的区别在于:未加入家蝇蝇蛆粉。
第1步、收集蘑菇种植废料,清洗,晾干,破碎成细粉;
第2步、取细粉70Kg,加入7倍重量的水,再加入蛋白酶2Kg和纤维素酶2Kg,加热到46℃,酶解7小时,然后灭酶,放冷;
第3步、将酶解液投入到发酵装置中,加入棉籽饼15Kg、腐殖酸4Kg、麦麸18Kg、米糠16Kg、豆粕19Kg、光合细菌菌液4Kg、放线菌菌液4Kg,混合均匀,调节pH为7.5,各种菌液中单位有效活菌数不低于5亿/毫升;
第4步、将发酵装置密封,控制发酵温度在35℃,发酵时间是在20天,发酵完成后,即可。
性能试验
在河南某地进行黄芩种植试验,大棚种植,每个试验组面积30m2,株距20~30cm,每m2施肥1.5Kg,从当年5月插苗时进行施肥,至当年10月下旬成苗,考察整个育苗过程中的成活率、单株产量、黄芩苷含量。
其中,黄芩苷含量的检测方法采用HPLC色谱法测定。
色谱条件:Agilent 1100高效液相色谱仪;色谱柱:C18;流动相:甲醇-水-磷酸(47: 53:0.2);检测波长:280 nm;流速:1.0 ml/min;柱温:25℃。
对照品溶液制备:真空干燥器干燥的黄芩苷配成1ml含60 μg的溶液即得。
供试品溶液制备:取四倍体黄芩粉末(过80目筛)约0. 3g,精密称定加70%乙醇40ml加热回流3h,放冷,滤过,滤液置l00ml容量瓶,用少量70%乙醇分次洗涤容器和残渣,洗液滤人同一容量瓶中,加70%乙醇定容至刻度,精密吸取0.5ml.加入5ml容量瓶中,加甲醇定容至刻度,摇匀即得。
精密吸取供试品、对照品溶液各10μ1,注入高效液相色谱仪,记录峰面积,按外标法计算,得干燥品中黄芩苷的百分含量。
表1
  平均单株产量g 黄芩苷含量%
实施例1 20.3 10.09
实施例2 20.1 10.01
实施例3 21.6 10.34
对照例1 17.8 9.78
对照例2 17.5 9.68
从表中可以看出,本发明提供的有机肥可以有效地使黄芩种植增产,其中,实施例3与对照例1对比,可以看出,通过引入放线菌菌液对基料进行发酵,得到的有机肥可以提高黄芩的单株产量,实施例3与对照例2对比,可以看出通过引入家蝇蝇蛆粉作为发酵底物,得到的有机肥可以提高黄芩苷的含量。

Claims (6)

1.一种黄芩种植用的生物肥的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
第1步、收集蘑菇种植废料,清洗,晾干,破碎成细粉;
第2步、按重量份计,取细粉50~80份,加入6~12倍重量的水,再加入蛋白酶2份和纤维素酶2份,加热到40~55℃,酶解6~8小时,然后灭酶,放冷;
第3步、将酶解液投入到发酵装置中,加入棉籽饼10~20份、腐殖酸3~5份、麦麸15~25份、米糠10~20份、豆粕15~25份、家蝇蝇蛆粉5~8份、光合细菌菌液3~5份、放线菌菌液3~5份,混合均匀,调节pH;
第4步、将发酵装置密封,控制发酵温度在30~40℃,发酵完成后,即可。
2.根据权利要求1所述的黄芩种植用的生物肥的制备方法,其特征在于:所述的第3步中,pH调节的范围在6.5~7.5。
3.根据权利要求1所述的黄芩种植用的生物肥的制备方法,其特征在于:其中所述光合细菌为沼泽红假单孢菌(Rhodopseudomonaspalustris);所述放线菌为泾阳链霉菌(Streptomyces jingyangesis)。
4.根据权利要求1所述的黄芩种植用的生物肥的制备方法,其特征在于:所述的第3步中,各种菌液中单位有效活菌数不低于5亿/毫升。
5.根据权利要求1所述的黄芩种植用的生物肥的制备方法,其特征在于:所述的第4步中,发酵时间是在10~30天。
6.根据权利要求1所述的黄芩种植用的生物肥的制备方法,其特征在于:所述的家蝇蝇蛆粉是将家蝇蝇蛆干燥、粉碎后制得。
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