CN104887541A - 含蚯蚓活性蛋白的化妆品 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种含蚯蚓活性蛋白的化妆品，包括主料和辅料，所述主料由甘油、透明质酸、芦芭胶、海藻糖、水溶性维生素E、杰马、蚯蚓活性蛋白、人参提取液和纯化水组成，所述辅料为香精、乳化剂、水溶性霍霍巴油、葡萄籽油、卡波姆、三乙醇胺尿囊素的一种或两种以上的组合物；根据所选辅料的不同，含蚯蚓活性蛋白的化妆品可以制成化妆水、祛皱精华、乳液、面霜、面膜；本发明含蚯蚓活性蛋白的化妆品，具有使皮肤柔滑、补水保湿及延缓衰老的作用，可作为护肤品，直接用于皮肤。

Description

含蚯蚓活性蛋白的化妆品

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别是涉及一种含蚯蚓活性蛋白的化妆品。

背景技术

随着药妆品工业的持续发展, 研究和开发策略将更多地转向医药类型的产品, 利用先进医学技术的药妆品已经得到了快速发展, 而且这一趋势还将会更加强劲。目前, 美容手术包括微晶磨皮术和化学磨皮术、肉毒素护理和激光更新皮肤等, 这些方法都能消除不平滑的皮肤表面、老年斑和细小的皱纹, 然而，大部分消费者更加青睐于使用乳霜、乳液、凝胶、油脂和面膜等化妆品来美化肌肤。

本研究所使用的蚯蚓品种为赤子爱胜蚓，本品种在分类学上属于正蚓科爱胜属。赤子爱胜蚓繁殖率高、适应性强，很适合人工养殖，是目前世界上养殖最为普遍的一个品种，其体内的药用成分也十分丰富，所以临床上的制剂多以赤子爱胜蚓为原料。随着生物技术的发展，赤子爱胜蚓的药用价值越来越多的被人们研究和关注。

蚯蚓的药用价值与其体内的活性物质关系密切；实验室前期的研究中发现蚯蚓活性蛋白提取物在动物水平上能够促进烫伤创面的愈合，在细胞水平上能够促进纤维细胞的增殖和迁移；但是，还未见从蚯蚓中提取抗皱成分的资料，现有技术中蚯蚓提取物提取工艺还不是很完善，提取的往往是包含小分子成分的混合物；本发明的研究的主要任务是科学提取出赤子爱胜蚓中促进成纤维细胞增殖的活性蛋白，并以其为原料研制出具有抗皱活性的优质化妆品。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有使皮肤柔滑、补水保湿及延缓衰老的作用的含蚯蚓活性蛋白的化妆品。

为了实现上述目的，本发明的含蚯蚓活性蛋白的化妆品，包括主料和辅料，所述主料由甘油、透明质酸、芦芭胶、海藻糖、水溶性维生素E、杰马、 蚯蚓活性蛋白、人参提取液和纯化水组成，所述辅料为香精、乳化剂、水溶性霍霍巴油、葡萄籽油、卡波姆、三乙醇胺尿囊素的一种或两种以上的组合物。

根据所选辅料的不同，这种面部化妆品可以制成化妆水、祛皱精华、乳液、面霜、面膜。

当辅料为香精时，可以制备化妆水，每100g化妆水中含有1~1.5g甘油、8~10g 1%的透明质酸、0.8~1g芦芭胶、1~2g海藻糖、0.1~0.2g水溶性维生素E、0.3~0.5g杰马、4~6g蚯蚓活性蛋白、4~6g人参提取液、0.01~0.02g香精，余量为纯化水。

所选辅料为香精和水溶性霍霍巴油的组成物时，可以制备成祛皱精华，每100g祛皱精华中含有2~3g甘油、20~30g1%透明质酸、1~2g芦芭胶、2~4g海藻糖、0.1~0.2g水溶性维生素E、0.3~0.5g杰马、10~20g蚯蚓活性蛋白、10~20g人参提取液、0.01-0.02g香精和2~3g水溶性霍霍巴油，余量为纯化水。

所选辅料为葡萄籽油、香精、乳化剂和水溶性霍霍巴油的组合物时，可以制备成乳液；每100g乳液中含有2~4g甘油、15~20g1%透明质酸、2~3g芦芭胶、3~4g海藻糖、4~5g葡萄籽油、1~2g水溶性霍霍巴油、0.4~0.5g水溶性维生素E、0.3~0.5g杰马、10~20g蚯蚓活性蛋白、10~20g人参提取液、1.3~1.5g乳化剂和0.01-0.02g香精，余量为纯化水。

所选辅料为葡萄籽油、香精、乳化剂和水溶性霍霍巴油的组合物时，根据各组分的配比不同还可以制备成面霜；每100g面霜中含有2~4g甘油、15~20g1%透明质酸、2~3g芦芭胶、3~4g海藻糖、0.4~0.5g水溶性维生素E、0.3~0.5g杰马、10~20g蚯蚓活性蛋白、10~20g人参提取液、2~3g乳化剂、0.01-0.02g香精、4~5g葡萄籽油和1~2g水溶性霍霍巴油，余量为纯化水。

所选辅料为卡波姆、香精、三乙醇胺和尿囊素的组合物时，可以制备成面膜；其中每100g面膜中含有2~4g甘油、4~6 g1%透明质酸、2~3g芦芭胶、2~3g海藻糖、0.4~0.6g水溶性维生素E、0.3~0.5g杰马、8~10g蚯蚓活性蛋白、10~20g人参提取液、0.01-0.02g香精、0.2~0.3g卡波姆、0.2~3g三乙醇胺和0.2~0.3g尿囊素，余量为纯化水。

优选的，所述透明质酸为分子量25～100万的透明质酸粉末。

进一步，所述的蚯蚓活性蛋白采用如下步骤提取而成：

a、取清洗干净的鲜蚯蚓，加入20mmol/L、pH为6.8~7.2的磷酸盐缓冲液，冰浴条件下高速匀浆，得到蚯蚓匀浆液，并在4℃下静置2~3h，使蛋白充分溶出；

b、将蚯蚓匀浆液分装于离心管中，在4℃下，高速离心20~30min，取上清液；在室温条件下，加研细的硫酸铵进行盐析，达到50%饱和度，使杂蛋白沉淀析出，得盐析液；

c、将盐析液分装于离心管中，在4℃下，高速离心20~30min，取上清液过0.45μm的膜，取滤液；

d、盐析所述滤液采用0.2μm的中空纤维膜组件超滤的方式除去大分子物质，然后用截留分子量为20k-50k中空纤维膜组件超滤的方式脱盐，最后冷冻干燥即得所述化妆品用蚯蚓活性蛋白。

本发明的有益效果是：本方法以新鲜的赤子爱胜蚓为原料，采用匀浆、离心、盐析、微滤、超滤、冷冻干燥等技术对其中的活性蛋白进行分离纯化、采用NIH3T3纤维细胞进行活性跟踪，获得了具有较高增殖活性的蚯蚓活性蛋白；将本发明方法制备的蚯蚓活性蛋白应用于化妆品，具有使皮肤柔滑、补水保湿及延缓衰老的作用，可作为护肤品，直接用于皮肤。

具体实施方式

实施例1：化妆水的制备

配方为：

甘油：1g

1%透明质酸：10g

芦芭胶：1g

海藻糖：2g

水溶性维生素E：0.2g

杰马：0.4g

蚯蚓活性蛋白：5g

人参提取液：5g

香精：0.01g

纯化水：75.39g

方法为：按照以上配方精确称量甘油，1%透明质酸溶液，海藻糖，水溶性维生素E及杰马置烧杯中，玻璃棒搅匀后，加入5g人参提取液及5g蚯蚓活性蛋白提取液；继续搅拌至均匀后加纯化水75.39g，全部溶解后加入0.01g香精对化妆品的香型进行调节，即制得100 g化妆水。

实施例2：祛皱精华的制备

配方为：

甘油：3g

1%透明质酸：25g

芦芭胶：1.5g

水溶性霍霍巴油：2g

海藻糖：3g

水溶性维生素E：0.2g

杰马：0.4g

蚯蚓活性蛋白：15g

人参提取液：15 g

香精： 0.02g

纯化水：34.88g

方法为：按照以上配方精确称量甘油，1%透明质酸溶液，芦芭胶，水溶性霍霍巴油，海藻糖，水溶性维生素E及杰马置烧杯中，玻璃棒搅匀后，加入15g人参提取液及15g蚯蚓活性蛋白提取液，继续搅拌至均匀后，加纯化水34.88g，全部溶解后，加入0.02g香精对化妆品的香型进行调节，即制得100 g祛皱精华。

实施例3：乳液的制备

配方为：

甘油：3g

1%透明质酸：20g

芦芭胶：2g

海藻糖：3g

葡萄籽油：5g

霍霍巴油；1g

杰马：0.4g

水溶性维生素E：0.5g

蚯蚓活性蛋白：15g

人参提取液：15g

乳化剂：1.5g

香精：0.02g

纯化水：33.58g

方法为：按照以上配方精确称量甘油，1%透明质酸溶液，芦芭胶，海藻糖，蚯蚓活性蛋白提取液及人参提取液置烧杯中，玻璃棒搅拌均匀。再按照配方加入葡萄籽油，霍霍巴油，杰马，水溶性维E和香精，并加入纯化水33.58g，搅拌均匀后，加入乳化剂大力搅拌至形成初乳，最后用匀浆机乳化，即制得100 g乳液。

实施例4：面霜的制备

配方为：

甘油：3g

1%透明质酸：20g

芦芭胶：2g

海藻糖：3g

葡萄籽油：5g

霍霍巴油：1g

杰马：0.4g

水溶性维生素E ：0.5g

蚯蚓活性蛋白：15g

人参提取液：15g

乳化剂：2.5g

香精：0.02g

纯化水：32.58g

方法为：按照以上配方精确称量甘油，1%透明质酸溶液，芦芭胶，海藻糖，蚯蚓活性蛋白提取液及人参提取液置烧杯中，玻璃棒搅拌均匀。再按照配方加入葡萄籽油，霍霍巴油，杰马，水溶性维E和香精，并加入纯化水32.58g，搅拌均匀后加入乳化剂大力搅拌，即制得100 g面霜。

实施例5：面膜的制备

配方为：

甘油：3g

1%透明质酸：5g

芦芭胶：2g

卡波姆：0.2g

三乙醇胺：0.2g

海藻糖：2g

水溶性维生素E：0.5g

尿囊素：0.2g

杰马：0.4g

蚯蚓活性蛋白：10g

人参提取液：15g

香精：0.01g

纯化水：61.49g       

方法为：按照以上配方精确称量甘油，1%透明质酸溶液，芦芭胶，海藻糖，三乙醇胺，卡波姆，水溶性维生素E，尿囊素及杰马置烧杯中，玻璃棒搅匀后，加入15g人参提取液及10g蚯蚓活性蛋白提取液。继续搅拌至均匀后加纯化水61.49g，磁力搅拌器搅拌至完全溶解，然后加入0.01g香精对化妆品的香型进行调节，即制得100 g面膜。

本发明实施例1-5中的蚯蚓活性蛋白均采用如下步骤提取而成：

取清洗干净的鲜蚯蚓500g，加入1000ml 20mmol/L、pH7.2的磷酸盐缓冲液，用高速匀浆机以22000rpm，冰浴条件下匀浆5min；将蚯蚓匀浆液4℃静置2h，使蛋白充分溶出。

将匀浆液分装于离心管中，在4℃下，以15000 rpm高速离心25min，取上清液。在室温条件下，加研细的硫酸铵进行盐析，达到50%饱和度，使杂蛋白沉淀析出，此过程中要不断搅拌；硫酸铵须在30min内加完，加完后继续搅拌30min使硫酸铵充分溶解，4℃静置1h，使杂蛋白充分沉淀。

将盐析液分装于离心管中，在4℃下，以16500 rpm离心28min，取上清液过0.45μm的膜，取滤液。

盐析上清液采用0.2μm的中空纤维膜组件超滤的方式除去大分子物质，然后用截留分子量为20k-50k中空纤维膜组件超滤的方式脱盐，最后冷冻干燥即得本发明的化妆品用蚯蚓活性蛋白。

本发明化妆水的理化性质检测结果

如表1所示：经检测，化妆水的pH为6.8，在非阳光直射条件下观察化妆水的色泽，呈均匀透明的浅黄色，无杂质；将化妆水擦于皮肤上，在室内及非阳光直射条件下观察，结构细腻，亲和性较好；嗅觉辨别化妆水的香型，味道符合规定香型。在耐热实验中，40℃保持24h后，恢复室温后与试验前无明显的性状差异。在耐寒实验中，4℃保持24h后，恢复室温后与试验前无明显性状差异。

本发明祛皱精华的理化性质检测结果

如表2所示：经检测，祛皱精华的pH为7.0。在非阳光直射条件下观察祛皱精华的色泽，呈均匀透明的浅棕色，无杂质。将化妆水擦于皮肤上，在室内及非阳光直射条件下观察，结构细腻，亲和性较好。嗅觉辨别祛皱精华的香型，味道符合规定香型。在耐热实验中，40℃保持24h后，恢复室温后与试验前无明显的性状差异。在耐寒实验中，4℃保持24h后，恢复室温后与试验前无明显性状差异。

本发明乳液的理化性质测结果

如表3所示：经检测，乳液的pH为6.8。在非阳光直射条件下观察乳液的色泽，呈均匀的乳白色，无杂质。将乳液擦于皮肤上，在室内及非阳光直射条件下观察，结构细腻，易涂匀，亲和性较好。嗅觉辨别乳液的香型，味道符合规定香型。在耐热实验中，40℃保持24h后，恢复室温后与试验前无明显的性状差异。在耐寒实验中，-20℃保持24h后，恢复室温后与试验前无明显性状差异。38℃保温5min后，2000rpm离心30min，未产生油水分离现象。

本发明面霜的理化性质检测结果

如表4所示：经检测，面霜的pH为7.0。在非阳光直射条件下观察面霜的色泽，呈均匀的乳白色，无杂质。将面霜擦于皮肤上，在室内及非阳光直射条件下观察，结构细腻，易涂匀，亲和性较好。嗅觉辨别面霜的香型，味道符合规定香型。在耐热实验中，40℃保持24h后，恢复室温后与试验前无明显的性状差异。在耐寒实验中，-20℃保持24h后，恢复室温后与试验前无明显性状差异。

 本发明面膜的理化性质检测结果

如表5所示：经检测，面膜的pH为6.5。在非阳光直射条件下观察面膜的色泽，呈均匀透明的浅棕色，无杂质。将面膜擦于皮肤上，在室内及非阳光直射条件下观察，结构细腻，亲和性较好。嗅觉辨别面膜的香型，味道符合规定香型。在耐热实验中，40℃保持24h后，恢复室温后与试验前无明显的性状差异。在耐寒实验中，-20℃保持24h后，恢复室温后与试验前无明的性状差异。

表5 面膜理化性质的检测结果。

Claims (9)

1.含蚯蚓活性蛋白的化妆品，包括主料和辅料，其特征在于：所述主料由甘油、透明质酸、芦芭胶、海藻糖、水溶性维生素E、杰马、 蚯蚓活性蛋白、人参提取液和纯化水组成，所述辅料为香精、乳化剂、水溶性霍霍巴油、葡萄籽油、卡波姆、三乙醇胺尿囊素的一种或两种以上的组合物。

2.根据权利要求1所述的含蚯蚓活性蛋白的化妆品，其特征在于：含蚯蚓活性蛋白的化妆品制成化妆水、祛皱精华、乳液、面霜、面膜。

3.根据权利要求2所述的含蚯蚓活性蛋白的化妆品，其特征在于：所述的化妆水其辅料为香精，每100g化妆水中含有1~1.5g甘油、8~10g 1%的透明质酸、0.8~1g芦芭胶、1~2g海藻糖、0.1~0.2g水溶性维生素E、0.3~0.5g杰马、4~6g蚯蚓活性蛋白、4~6g人参提取液、0.01~0.02g香精，余量为纯化水。

4.根据权利要求2所述的含蚯蚓活性蛋白的化妆品，其特征在于：所述祛皱精华其辅料为香精和水溶性霍霍巴油的组成物，每100g祛皱精华中含有2~3g甘油、20~30g1%透明质酸、1~2g芦芭胶、2~4g海藻糖、0.1~0.2g水溶性维生素E、0.3~0.5g杰马、10~20g蚯蚓活性蛋白、10~20g人参提取液、0.01-0.02g香精和2~3g水溶性霍霍巴油，余量为纯化水。

5.根据权利要求2所述的含蚯蚓活性蛋白的化妆品，其特征在于：所述乳液其辅料为葡萄籽油、香精、乳化剂和水溶性霍霍巴油的组合物；每100g乳液中含有2~4g甘油、15~20g1%透明质酸、2~3g芦芭胶、3~4g海藻糖、4~5g葡萄籽油、1~2g水溶性霍霍巴油、0.4~0.5g水溶性维生素E、0.3~0.5g杰马、10~20g蚯蚓活性蛋白、10~20g人参提取液、1.3~1.5g乳化剂和0.01-0.02g香精，余量为纯化水。

6.根据权利要求2所述的含蚯蚓活性蛋白的化妆品，其特征在于：所述面霜其辅料为葡萄籽油、香精、乳化剂和水溶性霍霍巴油的组合物；每100g面霜中含有2~4g甘油、15~20g1%透明质酸、2~3g芦芭胶、3~4g海藻糖、0.4~0.5g水溶性维生素E、0.3~0.5g杰马、10~20g蚯蚓活性蛋白、10~20g人参提取液、2~3g乳化剂、0.01-0.02g香精、4~5g葡萄籽油和1~2g水溶性霍霍巴油，余量为纯化水。

7.根据权利要求2所述的含蚯蚓活性蛋白的化妆品，其特征在于：所述面膜其辅料为卡波姆、香精、三乙醇胺和尿囊素的组合物；其中每100g面膜中含有2~4g甘油、4~6 g1%透明质酸、2~3g芦芭胶、2~3g海藻糖、0.4~0.6g水溶性维生素E、0.3~0.5g杰马、8~10g蚯蚓活性蛋白、10~20g人参提取液、0.01-0.02g香精、0.2~0.3g卡波姆、0.2~3g三乙醇胺和0.2~0.3g尿囊素，余量为纯化水。

8.根据权利要求1-7任一项所述的含蚯蚓活性蛋白的化妆品，其特征在于：所述透明质酸为分子量25～100万的透明质酸粉末。

9.根据权利要求1所述的含蚯蚓活性蛋白的化妆品，其特征在于：所述的蚯蚓活性蛋白采用如下步骤制备而成：

a、取清洗干净的鲜蚯蚓，加入20mmol/L、pH为6.8~7.2的磷酸盐缓冲液，冰浴条件下高速匀浆，得到蚯蚓匀浆液，并在4℃下静置2~3h，使蛋白充分溶出；

b、将蚯蚓匀浆液分装于离心管中，在4℃下，高速离心20~30min，取上清液；在室温条件下，加研细的硫酸铵进行盐析，达到50%饱和度，使杂蛋白沉淀析出，得盐析液；     

c、将盐析液分装于离心管中，在4℃下，高速离心20~30min，取上清液过0.45μm的膜，取滤液；

d、盐析所述滤液采用0.2μm的中空纤维膜组件超滤的方式除去大分子物质，然后用截留分子量为20k-50k中空纤维膜组件超滤的方式脱盐，最后冷冻干燥即得所述化妆品用蚯蚓活性蛋白。