CN104885950A - 脱毒马铃薯试管苗运前预处理方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及脱毒马铃薯试管苗技术领域，是一种脱毒马铃薯试管苗运前预处理方法；按下述步骤进行：第一步，用镊子将脱毒马铃薯试管苗从培养瓶中连同培养基取出后水平放置在医用盘上，距培养基上端面0.8厘米至1.2厘米处用剪刀水平剪去脱毒马铃薯试管苗基底部以下部分，保留脱毒马铃薯试管苗基底部以上部分为除根脱毒马铃薯试管苗。本发明脱毒马铃薯试管苗运前预处理后的除根脱毒马铃薯试管苗较常规瓶装运输脱毒马铃薯试管苗的体积、重量和运输成本都有大幅度的降低，同时本发明大大降低了在运输过程中的烂苗死苗现象，保证了较高的成活率。
Description
技术领域
本发明涉及脱毒马铃薯试管苗技术领域，是一种脱毒马铃薯试管苗运前预处理方法。
背景技术
近年来南疆地区因马铃薯种植面积逐年扩大，对脱毒马铃薯试管苗需求量增加，由于南疆地区脱毒技术人员缺乏，因此脱毒马铃薯试管苗需向其它地方进行长途运输；现有脱毒马铃薯试管苗在运输前期一直采用将脱毒马铃薯试管苗整瓶装箱运输，因运输路途远而箱内容易相互碰撞摩擦生热，内部温度不易控制，在运输过程中脱毒马铃薯试管苗常常出现大批烂苗死苗现象；同时瓶装脱毒马铃薯试管苗体积和质量大导致运输成本高。
发明内容
本发明提供了一种脱毒马铃薯试管苗运前预处理方法，克服了上述现有技术之不足，其能有效解决现有脱毒马铃薯试管苗在运输过程中常常出现大批烂苗死苗现象和运输成本高的问题。
本发明的技术方案是通过以下措施来实现的：一种脱毒马铃薯试管苗运前预处理方法，按下述步骤进行：第一步，用镊子将脱毒马铃薯试管苗从培养瓶中连同培养基取出后水平放置在医用盘上，距培养基上端面0.8厘米至1.2厘米处用剪刀水平剪去脱毒马铃薯试管苗基底部以下部分，保留脱毒马铃薯试管苗基底部以上部分为除根脱毒马铃薯试管苗；第二步，将除根脱毒马铃薯试管苗装入密封袋中，然后密封袋在温度为4℃至6℃下进行预保存，预保存的时间小于等于12h；第三步，把预保存的密封袋放置在苯板泡沫箱中并密封苯板泡沫箱，使苯板泡沫箱内的温度控制在4℃至8℃，然后将密封后的苯板泡沫箱装车运输到指定的地方。
下面是对上述发明技术方案的进一步优化或/和改进：
上述第二步中，按规格为25cm乘30cm的密封袋中装入4500株至5000株除根脱毒马铃薯试管苗。
上述第三步中，把预保存的密封袋放置在苯板泡沫箱中，在预保存的密封袋的外侧放上冰袋，然后在预保存的密封袋和冰袋之间放上隔离材料，使苯板泡沫箱内的温度控制在4℃至8℃，或/和，密封袋是在冰箱中进行预保存。
上述脱毒马铃薯试管苗按下述方法得到：第一步，取材，选择健壮的马铃薯，将选好的马铃薯放置在温度为35℃至37℃的培养箱内进行催芽处理，培养箱内每天光照时间为14h至16h，光照强度为2000LX至3000LX，待马铃薯的顶芽长到0.8厘米至2厘米，剪下马铃薯顶芽，剥除马铃薯顶芽外面2层至4层叶片得到马铃薯待剥茎尖；
第二步，消毒，用软毛刷轻轻逐个刷洗马铃薯待剥茎尖后放于烧杯中，用纱布封口，在自来水下冲洗20分钟至30分钟，将冲洗后的马铃薯待剥茎尖用体积百分比为75%的酒精水溶液浸10秒至15秒，用无菌水冲洗2次至3次，再用质量百分比为5%的次氯酸钠水溶液浸泡15分钟至20分钟，最后用无菌水冲洗4次至5次，无菌水每次冲洗的时间为3分钟至5分钟，得到消毒马铃薯待剥茎尖；
第三步，剥离茎尖和接种，将消毒马铃薯待剥茎尖置于40X的解剖镜下，一手用镊子将消毒马铃薯待剥茎尖按住，一手用无菌解剖针将消毒马铃薯待剥茎尖的叶片一层一层剥掉，直至露出圆亮的生长点，用无菌解剖针切取0.1毫米至0.2毫米以下的带1个至2个叶原基的马铃薯茎尖，将马铃薯茎尖接种于装有培养基的三角瓶中；
第四步，培养，将接种有马铃薯茎尖的三角瓶放置在温度为20℃至25℃、每天光照时间为14h至16h、光照强度为2000LX至3000LX的培养室中进行培养，培养100天至120天后发育成3片至4片叶的脱毒马铃薯小苗，将脱毒马铃薯小苗进行单节切段并接种于装有培养基的三角瓶中，在温度为20℃至25℃、每天光照时间为14h至16h、光照强度为2000LX至3000LX的培养室中继续进行培养，培养20天至25天后再将脱毒马铃薯小苗进行单节切段并接种于装有培养基的三角瓶中进行培养，培养4代至6代并使苗长到6厘米至10厘米后，得到脱毒马铃薯试管苗。
上述镊子、剪刀、密封袋和三角瓶在使用前先用酸性氧化电位水冲洗20秒至30秒进行消毒；操作人员在操作前先用硫磺皂彻底清洁双手，再用氧化电位水冲洗消毒20秒至30秒。
本发明脱毒马铃薯试管苗运前预处理后的除根脱毒马铃薯试管苗较常规瓶装运输脱毒马铃薯试管苗的体积、重量和运输成本都有大幅度的降低，同时本发明大大降低了在运输过程中的烂苗死苗现象，保证了较高的成活率。
具体实施方式
本发明不受下述实施例的限制，可根据本发明的技术方案与实际情况来确定具体的实施方式。
实施例1，该脱毒马铃薯试管苗运前预处理方法，按下述步骤进行：第一步，用镊子将脱毒马铃薯试管苗从培养瓶中连同培养基取出后水平放置在医用盘上，距培养基上端面0.8厘米至1.2厘米处用剪刀水平剪去脱毒马铃薯试管苗基底部以下部分，保留脱毒马铃薯试管苗基底部以上部分为除根脱毒马铃薯试管苗；第二步，将除根脱毒马铃薯试管苗装入密封袋中，然后密封袋在温度为4℃至6℃下进行预保存，预保存的时间小于等于12h；第三步，把预保存的密封袋放置在苯板泡沫箱中并密封苯板泡沫箱，使苯板泡沫箱内的温度控制在4℃至8℃，然后将密封后的苯板泡沫箱装车运输到指定的地方。培养基为现有公知公用的培养基。
实施例2，该脱毒马铃薯试管苗运前预处理方法，按下述步骤进行：第一步，用镊子将脱毒马铃薯试管苗从培养瓶中连同培养基取出后水平放置在医用盘上，距培养基上端面0.8厘米或1.2厘米处用剪刀水平剪去脱毒马铃薯试管苗基底部以下部分，保留脱毒马铃薯试管苗基底部以上部分为除根脱毒马铃薯试管苗；第二步，将除根脱毒马铃薯试管苗装入密封袋中，然后把密封袋放置在温度为4℃或6℃下进行预保存，预保存的时间小于等于12h；第三步，把预保存的密封袋放置在苯板泡沫箱中并密封苯板泡沫箱，使苯板泡沫箱内的温度控制在4℃或8℃，然后将密封后的苯板泡沫箱装车运输到指定的地方。
实施例3，作为上述实施例的优化，第二步中，按规格为25cm乘30cm的密封袋中装入4500株至5000株除根脱毒马铃薯试管苗。
实施例4，作为上述实施例的优化，第三步中，把预保存的密封袋放置在苯板泡沫箱中，在预保存的密封袋的外侧放上冰袋，然后在预保存的密封袋和冰袋之间放上隔离材料，使苯板泡沫箱内的温度控制在4℃至8℃。隔离材料可为报纸或纸板泡沫板；装入冰袋后苯板泡沫箱内的湿度平均为80%，或/和，密封袋是在冰箱中进行预保存。
实施例5，作为上述实施例的优化，脱毒马铃薯试管苗按下述方法得到：第一步，取材，选择健壮的马铃薯，将选好的马铃薯放置在温度为35℃至37℃的培养箱内进行催芽处理，培养箱内每天光照时间为14h至16h，光照强度为2000LX至3000LX，待马铃薯的顶芽长到0.8厘米至2厘米，剪下马铃薯顶芽，剥除马铃薯顶芽外面2层至4层叶片得到马铃薯待剥茎尖；
第二步，消毒，用软毛刷轻轻逐个刷洗马铃薯待剥茎尖后放于烧杯中，用纱布封口，在自来水下冲洗20分钟至30分钟，将冲洗后的马铃薯待剥茎尖用体积百分比为75%的酒精水溶液浸10秒至15秒，用无菌水冲洗2次至3次，再用质量百分比为5%的次氯酸钠水溶液浸泡15分钟至20分钟，最后用无菌水冲洗4次至5次，无菌水每次冲洗的时间为3分钟至5分钟，得到消毒马铃薯待剥茎尖；
第三步，剥离茎尖和接种，将消毒马铃薯待剥茎尖置于40X的解剖镜下，一手用镊子将消毒马铃薯待剥茎尖按住，一手用无菌解剖针将消毒马铃薯待剥茎尖的叶片一层一层剥掉，直至露出圆亮的生长点，用无菌解剖针切取0.1毫米至0.2毫米以下的带1个至2个叶原基的马铃薯茎尖，将马铃薯茎尖接种于装有培养基的三角瓶中；镊子可为眼科镊子；
第四步，培养，将接种有马铃薯茎尖的三角瓶放置在温度为20℃至25℃、每天光照时间为14h至16h、光照强度为2000LX至3000LX的培养室中进行培养，培养100天至120天后发育成3片至4片叶的脱毒马铃薯小苗，将脱毒马铃薯小苗进行单节切段并接种于装有培养基的三角瓶中，在温度为20℃至25℃、每天光照时间为14h至16h、光照强度为2000LX至3000LX的培养室中继续进行培养，培养20天至25天后再将脱毒马铃薯小苗进行单节切段并接种于装有培养基的三角瓶中进行培养，培养4代至6代并使苗长到6厘米至10厘米后，得到脱毒马铃薯试管苗。
实施例6，作为上述实施例的优化，镊子、剪刀、密封袋和三角瓶在使用前先用酸性氧化电位水冲洗20秒至30秒进行消毒；操作人员在操作前先用硫磺皂彻底清洁双手，再用氧化电位水冲洗消毒20秒至30秒。
本发明的有益效果：按25000株脱毒马铃薯试管苗计算，常规瓶装运输脱毒马铃薯试管苗和本发明脱毒马铃薯试管苗运前预处理后的平均对比数据见表1所示，从表1可以看出，常规瓶装运输脱毒马铃薯试管苗的体积、重量、温度、湿度、运输费用和成活率分别为158.4M3、330Kg、25℃至30℃、50%、1500元和85%；本发明脱毒马铃薯试管苗运前预处理后的除根脱毒马铃薯试管苗的体积、重量、温度、湿度、运输费用和成活率分别为4.8M3、3Kg、4℃至8℃、80%、50元和96%；说明本发明脱毒马铃薯试管苗运前预处理后的除根脱毒马铃薯试管苗较常规瓶装运输脱毒马铃薯试管苗的体积、重量和运输成本都有大幅度的降低，同时本发明大大降低了在运输过程中的烂苗死苗现象，保证了较高的成活率。
以上技术特征构成了本发明的实施例，其具有较强的适应性和实施效果，可根据实际需要增减非必要的技术特征，来满足不同情况的需求。
表1
| 方法 | 体积（M3） | 重量（Kg） | 温度（℃） | 湿度（%） | 运输费用（元） | 成活率（%） |
| 常规瓶装运输 | 158.4 | 330 | 25至30 | 50 | 1500 | 85 |
| 本发明 | 4.8 | 3 | 4至8 | 80 | 50 | 96 |
Claims (9)
1.一种脱毒马铃薯试管苗运前预处理方法，其特征在于按下述步骤进行：第一步，用镊子将脱毒马铃薯试管苗从培养瓶中连同培养基取出后水平放置在医用盘上，距培养基上端面0.8厘米至1.2厘米处用剪刀水平剪去脱毒马铃薯试管苗基底部以下部分，保留脱毒马铃薯试管苗基底部以上部分为除根脱毒马铃薯试管苗；第二步，将除根脱毒马铃薯试管苗装入密封袋中，然后密封袋在温度为4℃至6℃下进行预保存，预保存的时间小于等于12h；第三步，把预保存的密封袋放置在苯板泡沫箱中并密封苯板泡沫箱，使苯板泡沫箱内的温度控制在4℃至8℃，然后将密封后的苯板泡沫箱装车运输到指定的地方。
2.根据权利要求1所述的脱毒马铃薯试管苗运前预处理方法，其特征在于第二步中，按规格为25cm乘30cm的密封袋中装入4500株至5000株除根脱毒马铃薯试管苗。
3.根据权利要求1或2所述的脱毒马铃薯试管苗运前预处理方法，其特征在于第三步中，把预保存的密封袋放置在苯板泡沫箱中，在预保存的密封袋的外侧放上冰袋，然后在预保存的密封袋和冰袋之间放上隔离材料，使苯板泡沫箱内的温度控制在4℃至8℃，或/和，密封袋是在冰箱中进行预保存。
4.根据权利要求1或2所述的脱毒马铃薯试管苗运前预处理方法，其特征在于脱毒马铃薯试管苗按下述方法得到：第一步，取材，选择健壮的马铃薯，将选好的马铃薯放置在温度为35℃至37℃的培养箱内进行催芽处理，培养箱内每天光照时间为14h至16h，光照强度为2000LX至3000LX，待马铃薯的顶芽长到0.8厘米至2厘米，剪下马铃薯顶芽，剥除马铃薯顶芽外面2层至4层叶片得到马铃薯待剥茎尖；
第二步，消毒，用软毛刷轻轻逐个刷洗马铃薯待剥茎尖后放于烧杯中，用纱布封口，在自来水下冲洗20分钟至30分钟，将冲洗后的马铃薯待剥茎尖用体积百分比为75%的酒精水溶液浸10秒至15秒，用无菌水冲洗2次至3次，再用质量百分比为5%的次氯酸钠水溶液浸泡15分钟至20分钟，最后用无菌水冲洗4次至5次，无菌水每次冲洗的时间为3分钟至5分钟，得到消毒马铃薯待剥茎尖；
第三步，剥离茎尖和接种，将消毒马铃薯待剥茎尖置于40X的解剖镜下，一手用镊子将消毒马铃薯待剥茎尖按住，一手用无菌解剖针将消毒马铃薯待剥茎尖的叶片一层一层剥掉，直至露出圆亮的生长点，用无菌解剖针切取0.1毫米至0.2毫米以下的带1个至2个叶原基的马铃薯茎尖，将马铃薯茎尖接种于装有培养基的三角瓶中；
第四步，培养，将接种有马铃薯茎尖的三角瓶放置在温度为20℃至25℃、每天光照时间为14h至16h、光照强度为2000LX至3000LX的培养室中进行培养，培养100天至120天后发育成3片至4片叶的脱毒马铃薯小苗，将脱毒马铃薯小苗进行单节切段并接种于装有培养基的三角瓶中，在温度为20℃至25℃、每天光照时间为14h至16h、光照强度为2000LX至3000LX的培养室中继续进行培养，培养20天至25天后再将脱毒马铃薯小苗进行单节切段并接种于装有培养基的三角瓶中进行培养，培养4代至6代并使苗长到6厘米至10厘米后，得到脱毒马铃薯试管苗。
5.根据权利要求3所述的脱毒马铃薯试管苗运前预处理方法，其特征在于脱毒马铃薯试管苗按下述方法得到：第一步，取材，选择健壮的马铃薯，将选好的马铃薯放置在温度为35℃至37℃的培养箱内进行催芽处理，培养箱内每天光照时间为14h至16h，光照强度为2000LX至3000LX，待马铃薯的顶芽长到0.8厘米至2厘米，剪下马铃薯顶芽，剥除马铃薯顶芽外面2层至4层叶片得到马铃薯待剥茎尖；
第二步，消毒，用软毛刷轻轻逐个刷洗马铃薯待剥茎尖后放于烧杯中，用纱布封口，在自来水下冲洗20分钟至30分钟，将冲洗后的马铃薯待剥茎尖用体积百分比为75%的酒精水溶液浸10秒至15秒，用无菌水冲洗2次至3次，再用质量百分比为5%的次氯酸钠水溶液浸泡15分钟至20分钟，最后用无菌水冲洗4次至5次，无菌水每次冲洗的时间为3分钟至5分钟，得到消毒马铃薯待剥茎尖；
第三步，剥离茎尖和接种，将消毒马铃薯待剥茎尖置于40X的解剖镜下，一手用镊子将消毒马铃薯待剥茎尖按住，一手用无菌解剖针将消毒马铃薯待剥茎尖的叶片一层一层剥掉，直至露出圆亮的生长点，用无菌解剖针切取0.1毫米至0.2毫米以下的带1个至2个叶原基的马铃薯茎尖，将马铃薯茎尖接种于装有培养基的三角瓶中；
第四步，培养，将接种有马铃薯茎尖的三角瓶放置在温度为20℃至25℃、每天光照时间为14h至16h、光照强度为2000LX至3000LX的培养室中进行培养，培养100天至120天后发育成3片至4片叶的脱毒马铃薯小苗，将脱毒马铃薯小苗进行单节切段并接种于装有培养基的三角瓶中，在温度为20℃至25℃、每天光照时间为14h至16h、光照强度为2000LX至3000LX的培养室中继续进行培养，培养20天至25天后再将脱毒马铃薯小苗进行单节切段并接种于装有培养基的三角瓶中进行培养，培养4代至6代并使苗长到6厘米至10厘米后，得到脱毒马铃薯试管苗。
6.根据权利要求1或2所述的脱毒马铃薯试管苗运前预处理方法，其特征在于镊子、剪刀、密封袋和三角瓶在使用前先用酸性氧化电位水冲洗20秒至30秒进行消毒；操作人员在操作前先用硫磺皂彻底清洁双手，再用氧化电位水冲洗消毒20秒至30秒。
7.根据权利要求3所述的脱毒马铃薯试管苗运前预处理方法，其特征在于镊子、剪刀、密封袋和三角瓶在使用前先用酸性氧化电位水冲洗20秒至30秒进行消毒；操作人员在操作前先用硫磺皂彻底清洁双手，再用氧化电位水冲洗消毒20秒至30秒。
8.根据权利要求4所述的脱毒马铃薯试管苗运前预处理方法，其特征在于镊子、剪刀、密封袋和三角瓶在使用前先用酸性氧化电位水冲洗20秒至30秒进行消毒；操作人员在操作前先用硫磺皂彻底清洁双手，再用氧化电位水冲洗消毒20秒至30秒。
9.根据权利要求5所述的脱毒马铃薯试管苗运前预处理方法，其特征在于镊子、剪刀、密封袋和三角瓶在使用前先用酸性氧化电位水冲洗20秒至30秒进行消毒；操作人员在操作前先用硫磺皂彻底清洁双手，再用氧化电位水冲洗消毒20秒至30秒。
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