CN104857552A - 一种止血贴及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种止血贴及其制备方法。所述止血贴包括上下两层,上层是止血复合材料,下层是高粘合性生物材料,其中上层的面积小于下层的面积,上层位于下层中部。高粘合性生物材料能紧密贴合血管周围生物结缔组织,将出血封闭在局限的组织腔内。本发明的止血贴质地柔软,敷贴性强,免疫原性低,生物相容性强,可生物降解,止血所需时间短,具有优异的止血效果。
Description
技术领域
本发明涉及止血产品领域,具体地,涉及一种自粘生物封闭吸收性的止血贴及其制备方法。
背景技术
现有技术中通常采用止血贴对伤口进行护理,希望达到封闭、止血、吸收渗液、防止伤口感染、维持伤口的湿润环境并促进伤口愈合的效果。随着人们对止血理论和伤口愈合理论的研究的逐步深入,对止血贴的要求越来越高:①止血、止痛、消炎,②无毒、无害、无刺激,③抑菌和能够阻挡细菌,形成一个适合组织生长的良好环境,④具有气体和水蒸气的合适透过能力。⑤能够保持伤口接触面的温度和湿度,⑥能够提供热的隔离和传导,⑦促进血管、组织修复,⑧具有良好的机械性能,柔软性与人体皮肤相当,湿润时也能保持一定的形态和强度。
传统的止血材料主要包括急救包、止血带、纱布等。这些辅料只对创面起物理保护作用,功能和效果单一,止血效果欠佳,且容易黏连创面。目前市场上出售的创可贴,都是在医用底托胶带上粘附一块医用消毒的棉制或纱布制的吸水垫,在吸水垫上覆一层PE网膜作隔离膜,由于吸水垫一般都是采用医用纱布,这种创可贴的纱布直接与伤口接触后,伤口渗出的体液浸在纱布上,体液凝固以后,往往将伤口与纱布粘连在一起,形成硬块,造成创可贴难以取下,甚至引起伤口的疼痛或再次流血,P网膜虽然在一定程度上避免棉垫和伤口直接接触而粘在伤口上,但此种创可贴不具备抗菌、消炎的作用,止血也是通过底托胶带挤压使伤口来实现,不能解决迅速使伤口止血及时愈合的问题。随着技术的发展,目前应用较普遍的止血敷料有传统的藻酸盐、明胶海绵/粉末、胶原海绵/粉末/纤维/薄片、氧化纤维素、凝血酶,以及新近出现的胶原复合物,包括结合有抑肽酶、凝血酶、纤维蛋白封闭剂等止血剂的胶原,还有结合抑肽酶的明胶、纤维蛋白胶、壳聚糖和沸石等。这些现有技术中使用的对于创口护理的止血贴功能过于单一,一般只能满足上述一种或少数几种要求。
因此,研发一种经济的、止血时间短、具有优异的伤口愈合效果的止血贴,具有重要的现实意义。
发明内容
本发明的目的是为了克服现有技术中止血贴功能过于单一的缺陷,提供一种经济的、止血时间短、具有优异的伤口愈合效果的自粘生物封闭吸收性的止血贴及其制备方法,利用该止血贴进行伤口护理,所需止血时间较短,伤口愈合快。
因此,为了实现上述目的,第一方面,本发明提供一种止血贴。
第二方面,本发明提供一种止血贴的制备方法。
以下对发明进行详述:
现有技术中的止血产品种类多样,发明人对以下材料进行了深入研究:
壳聚糖是由自然界广泛存在的加壳质经过脱乙酰作用所得,是自然界中可再生的阳离子多糖,可通过吸附和聚集带负电荷的红细胞达到止血目的,并且由于其具有低过敏原性和天然杀菌性能,可用作止血敷料。壳聚糖本身除止血以外,其他的效果如抗炎抑菌、促进组织修复很不明显,目前壳聚糖止血材料的制备主要采用壳聚糖与与其他成分如消炎镇痛药的简单混合,不能充分发挥壳聚糖的止血功能。
提取自贻贝的贻贝粘蛋白作为一类广谱性生物粘合剂近年来也受到广泛关注,具有高强度、高韧性和防水性的特点。贻贝粘蛋白强度极高的粘附性与其特殊的分子结构、分子内多巴(DOPA)介导的链间交联和与基底之间的相互作用方式有关。DOPA分子中的酚基的氧化以及由此所介导的DOPA分子与外界固体表面之间形成的共价/非共价键合耦联,这些作用力使得贻贝粘蛋白能够很好的粘附在创口上。贻贝粘附蛋白是一系列碱性蛋白质,在生理pH条件下带有大量正电荷。当带有正电荷的贻贝粘蛋白与带有负电荷的血液细胞接触,即会因静电作用促进血液细胞的团聚,起到一定的止血效果。同时因相同的作用机理能够促进创口表皮细胞的爬行生长,加快创口结痂愈合的速度。并且,贻贝粘蛋白还具有很好的生物相容性和可降解性,防水且无毒性,是一类极具优势和潜力的生物胶黏剂,在软组织粘接、人造骨骼、断骨接合、口腔修复、外科手术止血等领域具有广泛的应用前景。然而,在利用贻贝粘蛋白对创口进行止血时,其经济成本高,且所需时间较长,其止血效果还有待进一步提高。
医用即溶止血纱布采用天然纤维素为主要原料,采用创新的技术工艺和专用设备,使纱布纤维中的羟基被羟乙基基团取代,使生成的羟乙基改性纱布具有良好的水溶性、盐溶性和载药性,能有效防止手术过程中的出血现象,保护创面、防止粘连,并能快速溶解,最终能够被人体完全吸收;该产品可用于各种手术创面的弥漫性渗血和小静脉出血,对凝血机制障碍者止血效果尤为显著。
血管内皮生长因子(英文:vascular endothelial growth factor,简称:VEGF),早期亦称作血管通透因子(英文:vascular permeability factor,简称:VPF),是血管内皮细胞特异性的肝素结合生长因子(heparin-bindinggrowth factor),可在体内诱导血管新生(induce angiogenesis in vivo)。
各种凝血因子能促进凝血,在多种止血产品中有广泛的运用,凝血酶、氯化钙在促进凝血方面的作用显著,中药白芨能收敛止血消肿生肌,三七能止血定痛,自古就是伤科金疮药。
发明人在研究中发现,将贻贝粘蛋白以适当的比例掺入壳聚糖,不仅能显著降低单独使用贻贝粘蛋白止血的成本,而且,能发挥壳聚糖和贻贝粘蛋白的双重功效,且透气、保湿、柔软。但是由此而形成的壳聚糖-贻贝粘蛋白凝胶在吸收伤口分泌物以及止血、止痛、消炎、促进组织修复方面的效果有待进一步提高。而在吸收伤口分泌物方面,传统的医用即溶止血纱有着特别的优势,加上其优异的载药性,为其附带各种药物奠定了良好的基础。
基于上述发现,发明人作出了下列发明:
一种止血贴,包括上、下两层,其特征在于,上层是一种止血复合材料,下层是高粘合性生物材料,其中上层的面积小于下层的面积,上层位于下层中部,其中,所述高粘合性生物材料是以壳聚糖为基质的贻贝粘蛋白胶,所述止血复合材料是氧化纤维素、凝血因子、血管内皮生长因子的复合体。
其中,所述以壳聚糖为基质的贻贝粘蛋白胶中壳聚糖与贻贝粘蛋白的质量比为10-500∶1优选为10-20∶1。
其中,所述氧化纤维素是医用即溶止血纱。
其中,所述凝血因子为凝血酶、氯化钙、白芨、三七中的一种或几种。
一种止血贴的制备方法,包含以下步骤:
(1)止血复合材料的制备,
(2)高粘合性生物材料的制备,
(3)止血复合材料与高粘合性生物材料的结合。
其中,步骤(1)具体为通过将凝血因子和血管表皮生长因子通过浸泡的方法渗入氧化纤维束中的方法制备止血复合材料。
其中,步骤(2)具体为:
a制备壳聚糖溶液:取一定质量的高黏度壳聚糖,加入2%乙酸溶液中,在室温下缓慢搅拌至完全溶解,配制成2%的壳聚糖溶液,静置脱泡,后过滤得澄清壳聚糖溶液;
b在壳聚糖溶液中加入贻贝粘蛋白,缓慢搅拌至均匀;
c制备以壳聚糖为基质的贻贝粘蛋白胶:将步骤b中取得的壳聚糖-贻贝粘蛋白溶液在70℃下烘干1h,然后注入平底敞口模具中,并放入沉析液至完全沉析形成壳聚糖-贻贝粘蛋白凝胶,用去离子水冲洗至中性;
d将制备的制备壳聚糖-贻贝粘蛋白凝胶真空冷冻干燥即得高粘合性生物材料。
其中,高黏度壳聚糖脱乙酰度为80~90%,黏度为600~2000mPa·s,黏均分子量高于3×106。
其中,沉析液为丙三醇浓度5%、NaOH浓度0.05%的无水乙醇溶液。
其中,步骤(3)具体为:将止血复合材料与高粘合性生物材料直接贴合。
附图说明
图1是止血贴结构示意图以及贴敷伤口示意图。
图2是壳聚糖-贻贝粘蛋白凝胶贴敷手背的照片。
图3是壳聚糖-贻贝粘蛋白凝胶扫描电镜图。
其中,1代表高粘合性生物材料,2代表复合止血材料,3代表皮肤,4代表皮肤损伤处
具体实施方式
以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是,此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明,并不用于限制本发明。
实施例
以下的实施例将对本发明作进一步的说明,但并不因此限制本发明。
以下实施例、对比例和试验例中:
贻贝粘蛋白购自BD Biosciences公司,货号为354242。
壳聚糖、血管内皮生长因子、止血纱、凝血酶、氯化钙、白芨、三七、茶树精油、乙酸、丙三醇、无水乙醇均为市售产品。
扫描电镜的型号为SU-8020,购自日立公司。
试验用成年大鼠购自北京大学医学部实验动物部,身体健康,各大鼠间的体征状况均表现一致。
实施例1
本实施例用于说明本发明的止血贴及其制备方法。
取4g壳聚糖,脱乙酰度80%,黏度2000mPa·s,黏均分子量3.8×106(壳聚糖脱乙酰度为80~90%,黏度为600~2000mPa·s,黏均分子量高于3×106的范围内制备的壳聚糖-贻贝粘蛋白凝胶在质地、止血效果上差别不大,因此,用脱乙酰度80%,黏度2000mPa·s,黏均分子量3.8×106的壳聚糖作为代表,上述范围内的其余壳聚糖的实施例在此省略),加入2%乙酸溶液200mL,室温(20~25℃)搅拌至完全溶解,静置脱泡,后过滤得澄清壳聚糖溶液;在壳聚糖溶液中加入贻贝粘蛋白,缓慢搅拌至均匀使得壳聚糖与贻贝粘蛋白的质量比为500∶1;制备以壳聚糖为基质的贻贝粘蛋白胶:将壳聚糖-贻贝粘蛋白溶液在70℃下烘干1h,然后注入平底敞口模具中,并放入沉析液至完全沉析形成壳聚糖-贻贝粘蛋白凝胶,用去离子水冲洗至中性;剪成1.5cm×1.5cm的方形(厚度和大小由伤口的大小和深度决定)。
将适量血管表皮生长因子加入0.5%质量浓度氯化钙和凝血酶的酶活为4000IU/mL的溶液中,通过浸泡的方法渗入医用即溶止血纱(线装订好的两层,1cm×1cm)(厚度和大小由伤口的大小和深度决定)的氧化纤维束中,20min后取出,10℃下风干1h,制备得止血复合材料。
将止血复合材料直接贴合在制备的壳聚糖-贻贝粘蛋白凝胶即得止血贴。
本实施例制备得到的止血复合材料的扫描电镜图如图2所示,由图2可知,该止血复合材料为多孔结构。
实施例2
除了壳聚糖与贻贝粘蛋白的质量比为250∶1,其余方法和实施例1相同。
实施例3
除了壳聚糖与贻贝粘蛋白的质量比为20∶1,其余方法和实施例1相同。
实施例4
除了壳聚糖与贻贝粘蛋白的质量比为10∶1,其余方法和实施例1相同。
实施例5
除了医用即溶止血纱所浸泡的溶液只含有血管表皮生长因子和0.5%质量浓度氯化钙,其余方法和实施例3相同。
实施例6
除了医用即溶止血纱所浸泡的溶液是血管表皮生长因子和凝血酶的酶活为5000IU/mL的溶液,其余方法和实施例4相同。
实施例7
除了医用即溶止血纱所浸泡的溶液是血管表皮生长因子和凝血酶的酶活为5000IU/mL的溶液,其余方法和实施例1相同。
实施例8
除了医用即溶止血纱所浸泡的溶液是血管表皮生长因子和三七的溶液,其余方法和实施例3相同。
实施例9
除了医用即溶止血纱所浸泡的溶液是血管表皮生长因子和白芨的溶液,其余方法和实施例4相同。
实施例10
除了医用即溶止血纱所浸泡的溶液是血管表皮生长因子、白芨、三七和凝血酶的酶活为3000IU/mL的溶液,其余方法和实施例4相同。
试验例说明:创口停止出血的标准为:取下止血贴后,不见有血渗出。
试验例1-10
将试验用麻醉后的成年大鼠固定,分别在其颈静脉上切出0.5mm大的创口。创口出血后分别将实施例1-10制备得到的止血贴敷于创口上。
试验例11
按照试验例1的方法,不同的是,止血贴为壳聚糖凝胶,制备方法如下:取4g壳聚糖,脱乙酰度80%,黏度2000mPa·s,黏均分子量3.8×106,加入2%乙酸溶液200mL,室温(20~25℃)搅拌至完全溶解,静置脱泡,后过滤得澄清壳聚糖溶液;将壳聚糖溶液在70℃下烘干1h,然后注入平底敝口模具中,并放入沉析液至完全沉析形成壳聚糖凝胶,用去离子水冲洗至中性;剪成1.5cm×1.5cm的方形。
试验例12
按照试验例1的方法,不同的是,止血贴为5层医用即溶纱布。
试验例13
按照试验例1的方法,不同的是,止血贴制备方法为:将适量血管表皮生长因子加入0.5%质量浓度氯化钙和凝血酶的酶活为4000IU/mL的溶液中,通过浸泡的方法渗入医用即溶止血纱(线装订好的3层,1cm×1cm)的氧化纤维束中,20min后取出,10℃下风干1h,制备得止血复合材料。
上述每个试验例平行做5个,创口停止出血的平均时间见表1。
试验例 | 创口停止出血时间(s) |
1 | 37 |
2 | 37 |
3 | 35 |
4 | 32 |
5 | 36 |
6 | 32 |
7 | 34 |
8 | 38 |
9 | 38 |
10 | 30 |
11 | 120 |
12 | 300 |
13 | 55 |
表1
比较表1中试验例1-10和试验例11-13的数据可知,与单独的医用即溶止血纱、携带一些止血因子的止血纱、单独的壳聚糖凝胶相比,利用本发明的止血贴进行止血时所需时间明显较短,从而具有明显优异的止血效果。
比较表1中试验例1-10的数据可知,贻贝粘蛋白含量的提高有利于止血时间的减少,凝血因子的多样化也有利于止血时间的减少。更重要的是,在快速止血的同时,贻贝粘蛋白含量较高的止血贴在伤口愈合后伤疤的减小和淡化上有显著的效果,含有中药止血因子的止血贴在消炎、止痛、促进伤口愈合方面表现优异。
不含有血管内皮生长因子的止血贴实施例并没有在此记录,因为是否含有血管内皮生长因子对于止血效果几乎没有影响,但是在后续伤口愈合上有显著的促进作用。
因此,本发明集合壳聚糖、贻贝粘蛋白、医用即溶止血纱、血管内皮生长因子、凝血因子后,其效果不是简单的叠加,而是质的飞越。外圈为高粘合性生物材料(壳聚糖-贻贝蛋白凝胶),能紧密贴合生物结缔组织,将出血封闭在局限的组织腔内,遇到血水不影响粘合力,在粘合过程中不产热,且质地柔软、透气保湿。内环为止血生物材料,包含氧化纤维素、凝血因子、血管表皮生长因子。能促进血管破损处血小板凝集,形成血痂,封闭出血部位。同时止血材料所含血管表皮生长因子能促进血管壁再生,血管愈合、止痛、消炎、促进伤口愈合。
以上详细描述了本发明的优选实施方式,但是,本发明并不限于上述实施方式中的具体细节,在本发明的技术构思范围内,可以对本发明的技术方案进行多种简单变型,这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是,在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征,在不矛盾的情况下,可以通过任何合适的方式进行组合,为了避免不必要的重复,本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
此外,本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合,只要其不违背本发明的思想,其同样应当视为本发明所公开的内容。
Claims (10)
1.一种止血贴,包括上、下两层,其特征在于,上层是一种止血复合材料,下层是高粘合性生物材料,其中上层的面积小于下层的面积,上层位于下层中部,其中,所述高粘合性生物材料是以壳聚糖为基质的贻贝粘蛋白胶,所述止血复合材料是氧化纤维素、凝血因子、血管内皮生长因子的复合体。
2.根据权利要求1所述的止血贴,其中,所述以壳聚糖为基质的贻贝粘蛋白胶中壳聚糖与贻贝粘蛋白的质量比为10-500∶1。
3.根据权利要求1所述的止血贴,其中,所述以壳聚糖为基质的贻贝粘蛋白胶中壳聚糖与贻贝粘蛋白的质量比为10-20∶1。
4.根据权利要求1所述的止血贴,其中,所述氧化纤维素是医用即溶止血纱。
5.根据权利要求1所述的止血贴,其中,所述凝血因子为凝血酶、氯化钙、白芨、三七中的一种或几种。
6.一种权利要求1-5中任意一项止血贴的制备方法,其特征在于包含以下步骤:
(1)止血复合材料的制备,
(2)高粘合性生物材料的制备,
(3)止血复合材料与高粘合性生物材料的结合。
7.如权利要求6所述制备方法,其中,步骤(1)具体为通过将凝血因子和血管表皮生长因子通过浸泡的方法渗入氧化纤维束中的方法制备止血复合材料。
8.如权利要求6所述制备方法,其中,步骤(2)具体为:
a制备壳聚糖溶液:取一定质量的高黏度壳聚糖,加入2%乙酸溶液中,在室温下缓慢搅拌至完全溶解,配制成2%的壳聚糖溶液,静置脱泡,后过滤得澄清壳聚糖溶液;
b在壳聚糖溶液中加入贻贝粘蛋白,缓慢搅拌至均匀;
c制备以壳聚糖为基质的贻贝粘蛋白胶:将步骤b中取得的壳聚糖-贻贝粘蛋白溶液在70℃下烘干1h,然后注入平底敞口模具中,并放入沉析液至完全沉析形成壳聚糖-贻贝粘蛋白凝胶,用去离子水冲洗至中性;
d将制备的制备壳聚糖-贻贝粘蛋白凝胶真空冷冻干燥即得高粘合性生物材料。
9.如权利要求7所述制备方法,其中,高黏度壳聚糖脱乙酰度为80~90%,黏度为600~2000mPa·s,黏均分子量高于3×106。
10.如权利要求7所述制备方法,其中,沉析液为丙三醇浓度5%、NaOH浓度0.05%的无水乙醇溶液。
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