CN104857174A - 一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法 - Google Patents

Abstract

一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法,其是按以下步骤制备:取杜仲、三颗针、白头翁、连翘、猪去氧胆酸、紫花地丁、芙蓉花、木瓜、茯苓、冬瓜皮、黄芪、党参、甘草；除猪去氧胆酸，其余各中药超微粉碎加乙醇溶液武火煮沸，文火保温，冷却过滤，浓缩滤液，加入白糖煮沸，冷却降至常温后接种乳酸杆菌、红茶菌及酵母菌，经96~118h发酵至长出白色菌块；三、将白色菌块和菌液，按1:50~80稀释，二次发酵18~24h后,即得微生态口服液。本发明中药微生态口服剂具有增加肠道内有益菌群数量，提高免疫功能，增强鸡体抗病力,本发明的有益效果降低鸡蛋中胆固醇的含量和提高必需氨基酸的含量，预防效果好,治愈率达到95%,且制备方法简单，活菌含量高，使用方便，绿色无残留。

Description

一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法

技术领域

本发明属于微生态饲料添加剂技术领域，具体说是涉及一种防治鸡葡萄球菌病的绿色天然环保禽用中药微生态口服剂的制备方法。

背景技术

鸡葡萄球菌病是由金黄色葡萄球菌引起的一种急性或慢性环境性传染病。其广泛分布在自然界的土壤、空气、水、饲料、物体表面以及鸡的羽毛、皮肤、黏膜、肠道和粪便中。平养和笼养都有发生但以笼养居多。其主要特征是肉鸡呈急性败血症脐炎、中雏发生皮肤病，呈皮下出血性炎症，皮肤出血和坏死；成年鸡呈现关节炎、腱鞘炎、关节滑膜炎、爪垫脓疡等。主要危害40-60日龄中雏，死亡率达10%-50%。随着规模养鸡业的不断发展，葡萄球菌病已经成为一些养鸡场的常见病之一，给养鸡业造成很大危害。

鸡葡萄球菌病的主要传染途径是皮肤和黏膜的创伤，也可因直接接触或空气传播，雏鸡通过脐带感染也较常见。在生产中造成鸡外伤的原因很多，如网上育雏时网片陈旧、铁丝脱焊、或者捆扎时两端处理失当，出现“毛刺”，鸡在网上行走或飞翔时被刺伤或扎伤；有的网眼过大，连接处缝隙过宽，常夹住鸡脚而致伤；有时鸡进入料槽流水线内吃食，由于其运转 ，也常被扎伤或夹伤。日常管理中，接种疫苗时消毒不严，可造成感染；给鸡带翅号、断喙或转群过程中，操作粗暴也可造成外伤。有的鸡场鸡群密度过大，通风不良，光照过强，某种营养成分缺乏，出现鸡相互啄羽、啄肛的现象，从而产生啄伤。这些情况都可造成葡萄球菌的感染。

鸡葡萄球菌病临床表现，患鸡精神萎顿、发热、闭目嗜睡、头及两翼下垂、羽毛松乱、食欲减退或废绝；病重者全身皮肤呈紫红色，缩颈，呆立，双肢无力，两翼卷缩，不能站立甚至瘫痪，大部分患鸡排黄白色稀便。剖检病理变化，皮下各脏器，浆膜下肌肉多呈紫红色，血液较稀薄，心包大量积聚淡黄色的液体；肾、肝脏肿大充血， 部分病例的肾脏有化脓灶， 肠道呈出血性炎症，肠内容物呈水样，肿大的关节腔内有浆液性、黏液性、脓性物或干酪样物。 幼雏多以脐炎变化为主，脐部有暗红色或黄红色液体，肝脏有出血点，卵黄吸收不良，呈黄红色或暗灰色，结膜炎或失明病例往往在眼内有脓性或干酪样物。

现有技术中公开的用于防治鸡葡萄球菌病的药物主要包括菌苗、西药和中药三大类，虽然三者均具有一定的防治效果，但也存在这样或那样的技术问题。如应用葡萄球菌灭活菌苗免疫接种，有一定预防效果，但因其免疫保护率不高，至今未能在生产实践中推广应用，市售的西药如庆大霉素、卡那霉素、氯霉素、土霉素、链霉素及磺胺类等药物对防治本病在开始应用时均具有良好的防治效果，但目前这些药物不一定都适用于所有的鸡场，因近些年普遍、持续应用抗生素，致使某些鸡场有葡萄球菌耐药菌株形成，再用这些抗菌药物去防治，疗效极差甚至没有防治效果。此外，西药的药残性已对蛋、肉等食品的安全性构成威胁，有些西药如氯霉素已被国家农业部明令禁用；市售中兽药虽无上述西药之弊端，但在配方构成和应用方法上也存在某些技术缺陷，要么因配方不严谨而疗效欠佳，要么在应用方法上常将药物散剂直接拌料喂服，延缓了病鸡对药物有效成份的吸收速率，防治效果也不尽人意。

中药是中华民族几千年来在生产斗争中认识自然、改造自然的智慧结晶，是我们民族繁衍兴旺的保障。它是天然药物，在进化过程中获得了适应环境和抵御各种损害的相应的各种成分与能力，建立起自身的调节系统(BRM)，而中药所含有的BRM物质又能加强或保护动物固有的抗药能力，且它药性温和，毒副作用小甚至无毒副作用，这些都是化学药物所不能比拟的。中兽医辩证论治理论认为该病是由疫毒内侵、肺胃热盛、血淤气滞引起,中药治疗时宜以清热解毒、凉血止痢、祛湿药物为主。许多中药都具有抗菌消炎的作用，同时使用中药治疗疾病不易产生耐药性、无毒或低毒、无残留或低残留，一些中药还兼有调节机体功能和补充营养的功效。因此选用中药来治疗鸡葡萄球菌病必将是养殖业防病治病的发展趋势。

因此，研发一种治疗家禽葡萄球菌病且无毒副作用、无药物残留的药物是该领域科研技术人员急待解决的新课题，而将中药和微生物在一起发酵制备成防治鸡葡萄球菌病的微生态口服剂，现有技术中未见报道。

发明内容

本发明的目的在于针对以上技术的不足，解决目前葡萄球菌病的耐药性和抗生素残留的问题，提供一种具有防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法，该制备方法简单、使用方便、安全环保、纯生态、无残留、活菌含量高。

为达到上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法，其特征在于：它是按以下步骤制备：1、秤取以下重量份的中药：杜仲100~120、三颗针100~120、白头翁100~120、猪去氧胆酸100~120、连翘80~100、紫花地丁80~100、芙蓉花80~100、木瓜60~80、茯苓60~80、冬瓜皮60~80、黄芪40~60、党参40~60、甘草30~40；2、除猪去氧胆酸，其余各中药超微粉碎加乙醇溶液武火煮沸，文火保温，冷却过滤，浓缩滤液，加入白糖煮沸，冷却降至常温后接种乳酸杆菌、红茶菌及酵母菌，经96~118h发酵至长出白色菌块；3、将白色菌块和菌液，按1:50~80稀释，二次发酵18~24h后，即得微生态口服液。

所述的一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法，其特征在于：秤取重量份的中药，超微粉碎，加入中药总重量6～8倍量的60%～70%的乙醇溶液，浸泡30～60min，武火煮沸，文火保温30～60min，冷却十二层纱布过滤；滤渣再加4～6倍量的40%～50%的乙醇溶液，武火煮沸，文火保温30～60min，冷却，十二层纱布过滤，合并两次滤液，浓缩回收乙醇，用乙醇检测仪检测浓缩液中无乙醇时停止浓缩，向浓缩液中加水使每毫升水含1g生药。

所述的一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法，其特征在于：以100 Kg浓缩液为单位添加白糖15～20Kg，并煮沸3～5min，冷却至常温，接种乳酸杆菌、红茶菌、酵母菌（市售）制剂20～25Kg，设定发酵温度35～38℃，静置发酵培养96～118h，至pH6.5～7.0长出白色菌块为止。

所述的一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法，其特征在于：将出白色菌块和菌液，按1:50～80兑入5%～10%冷糖开水稀释，发酵温度33～37℃，二次发酵18～24h后，即得微生态口服液。

所述的一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法，其特征在于：步骤二是在无菌发酵室内进行的。

本发明中药微生态口服剂具有增加肠道内有益菌群数量、提高免疫功能、增强鸡体抗病力等功效，且制备方法简单、使用方便、无残留。本发明的有益效果在于降低了鸡蛋中胆固醇，提高了必需氨基酸含量，经国家农业部家禽品质监督检验测试中心检测结果见表1：从表1中可以看出胆固醇含量382mg/100g，比普通鸡蛋585mg/100g，降低了34.70%，天冬氨酸、谷氨酸、亮氨酸占总氨基酸总量的百分比分别为11.77%、12.34%、10.71%，比普通鸡蛋中上述三种氨基酸提高了2-3倍。

表1 检验结果报告书

本发明中药微生态口服剂的最小抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）的测定以及药敏试验，分别测定第一次发酵液和二次发酵液，本试验所用菌株为金黄色葡萄球菌(ATCC13565 ) 购自中国兽医药品监察所。采用试管二倍稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)，具体操作如下：取加塞无菌小试管9支, 每管中加入制好的普通肉汤培养基1mL，在1管加中药1mL,用微量移液器混匀，吸取1mL至第2管混匀，依次到第7管，从第7管吸出1mL混合液并弃之，第8管做阳性对照（加菌液不加中药），第9管做阴性对照（加中药不加菌液），此时1到7号管内药液的浓度分别相当于500mg/mL、250mg/mL、125mg/mL、62.5mg/mL、31.25mg/mL、15.63mg/mL、7.81mg/mL生药浓度；向1-8管加稀释好的菌液0.1mL，第9管不加菌液，但加0.1mL LB肉汤培养基；将各组试管置于37℃条件下培养20h，观察并记录结果；与对照组比较,有絮状沉淀的管则为有细菌生长，无絮状沉淀的管为细菌生长受抑制管，以肉眼观察无絮状沉淀管的最低药物浓度作为该药的最小抑菌浓度（MIC）；由于中草药对细菌的MIC国内目前尚无统一的标准，本试验参照同类试验的标准作为判断标准（当MIC≤15.63mg/mL生药浓度时为高度敏感；当MIC在15.63～62.5mg/mL生药浓度时为中度敏感；当MIC为62.5～250.00 mg/mL生药浓度时为较敏感；当MIC>250.00 mg/mL生药浓度时为不敏感）测出MIC后，再依次从未见细菌生长的各试管培养物中取一接种环，接种于不含药的普通琼脂平板上，轻轻摊开菌液，37 ℃培养24 h，观察有无细菌生长，普通琼脂平板中，生长的菌落数小于5个菌落的药液最低浓度，即为MBC；药敏试验采用纸片扩散法，测定抑菌圈直径，参照标准药敏试验结果，判定药物的敏感性。测得结果见表2。

表2 MIC、MBC和药敏试验结果

	MIC (mg/mL)	MBC (mg/mL)	抑菌圈直径(mm)	敏感性
					1次发酵液	15.63	31.25	18.3	高敏感
2次发酵液	31.25	62.5	12.7	中敏感

从表2可以看出，第一次发酵液的MIC15.63 mg/mL、第二次发酵液的MIC31.25mg/mL按照同类试验标准为高敏感和中敏感这与标准药敏试验结果相一致，说明本发明的中药微生态口服剂的抑菌效果很好，解决了抗生素的耐药性严重的问题。

本发明对中药微生态口服剂对金黄色葡萄球菌的抑菌机制进行了初步的探究，通过研究细菌体内的琥珀酸脱氢酶的活力和扫描电镜观察细菌结构的变化，判断其抑菌机制。

1．中药微生态口服剂对细菌体内琥珀酸脱氢酶的影响

1.1细菌培养与收集：将标准株金黄色葡萄球菌接入LB培养基（设为对照组）和含MBC二次发酵液的LB培养基中，振荡培养24 h，将培养液于4000 r/min下离心10 min，收集菌体，并用pH=7.2的PBS缓冲液洗涤菌体三次，每组5个平行样。

1.2 酶的分离：加入与湿菌体等体积的2 mg/mL溶菌酶溶液，搅匀后在37 ℃水浴中保温10～20 min，当菌体开始发粘时取出，倒入50 mL烧杯中，立即将烧杯放入冰浴中冷冻。按照1 mL湿菌体加6 mL PBS缓冲液，低温离心10 min，转速为10000 r/min，取出上清液备用。

1.3 琥珀酸脱氢酶的测定方法：按试剂盒试剂及说明书方法进行，在600nm处进行比色，蒸馏水调零后，将待测上清液样本0.1 mL加入洗干净的比色皿的底部，将5 mL已预温好的试剂一次性快速冲入比色皿中，同步按下秒表，于反应5 s时读吸光度OD ₁值，比色皿不要拿出，过1min，即65s时读取吸光度OD ₂值。记录△OD值=OD ₁值﹣OD ₂值以备计算。

酶的活性（U/mgprot）=

结果显示：对照组即LB培养基中金黄色葡萄球菌的SDH比活性为28.906±4.25 U/mgprot，二次发酵组组细菌体内SDH比活性为11.855±2.56 U/mgprot与对照组相比，细菌体内SDH比活性极显著降低（P<0.01）。结果详见表3。

表3 二次发酵组对细菌体内SDH的影响

组 别	样本数	△OD 600	蛋白质含量（mg/ml）	平均比活性（U/mgprot）
					对照组	5	0.0068±0.0005	0.2076±0.006	28.906±4.25
二次发酵组	5	0.0035±0.0002	0.2531±0.003	11.855±2.56**

2．扫描电镜观察：将标准株金黄色葡萄球菌接入营养肉汤和含MBC二次发酵液的营养肉汤中，振荡培养12 h后，4000 r/min下离心20 min，弃去上清液。菌体沉淀用低温磷酸缓冲液（pH=7.2）洗涤3次，再用2.5%戊二醛固定，PBS清洗3次，四氧化锇固定1 h，PBS清洗3次，50%、70%、80%、90%、100%、100%乙醇脱水各20 min，叔丁醇干燥2次，离子溅射仪镀膜，SEM3400N型扫描电镜观察，拍照。

扫描电镜结果可见，正常培养的金黄色葡萄球菌呈球形，表面光滑、饱满，而经二次发酵组处理后的金黄色葡萄球菌菌体，球形结构破坏严重，表面变得粗糙，且可见有些菌体裂解呈絮状、发生塌陷、细菌融合成团、呈现肿胀模糊等变化。

本发明的有益效果对鸡葡萄球菌病的预防和治疗效果很好治愈率达到95%，活菌含量高经测定含量在8.2×10⁸cfu/g。

本发明的中药微生态口服剂对人工感染鸡葡萄球菌病的治疗试验：金黄色葡萄球菌种接入普通营养肉汤，37 ℃活化24 h后。采用麦氏比浊法稀释菌液至0.5个麦氏比浊管（1.5×10⁸ CFU/mL）备用；实验鸡为皖北麻鸡300只饲养到42日龄，检查体况无异常现象后进行称重，将其随机分组，分为阴性对照组（不攻毒不给药）,阳性对照组（攻毒不给药），抗生素对照组(左旋咪唑)，1次发酵组，2次发酵组，每组各60只鸡，试验期为10天；除阴性对照组外，其余各组所有的鸡,于试验开始时每羽腹腔注射1ml菌液。感染24h后，1次发酵组、2次发酵组发酵液让其自由饮用，抗生素对照组用氯霉素可溶性粉水溶液浓度为0.2g/ml让其自由饮用，阴性和阳性对照组各自由饮用冷开水，连用7天，连续观察7天，试验期间各组饲养管理条件均相同，观察各组鸡的临床症状，采食、饮水、精神、粪便等情况，疗效判定标准为：精神、饮食、排粪恢复正常，症状完全消失判为治愈；精神、饮食、排粪有好转，症状明显减轻，判为有效；症状无好转甚至死亡，剖检病理变化，皮下各脏器，浆膜下肌肉多呈紫红色，血液较稀薄，心包大量积聚淡黄色的液体；肾、肝脏肿大充血， 部分病例的肾脏有化脓灶， 肠道呈出血性炎症，肠内容物呈水样，肿大的关节腔内有浆液性、黏液性、脓性物或干酪样物。判为无效。根据死亡鸡数计算死亡率，结果见表4。

表4中药微生态口服液对鸡人工感染葡萄球菌病治疗效果

组别	数量(只)	死亡数(只）	死亡率（%）	存活数(只)	治愈率（%）
						1次发酵组	60	2	3.3	58	96.6
2次发酵组	60	3	5	56	95.0
						抗生素对照组	60	12	20	48	80.0
阳性对照组	60	46	76.7	14	23.3
						阴性对照组	60	0	0	60	100

从表4中可以看出：1次发酵组和2次发酵的口服液防治鸡葡萄球菌其治愈率与攻毒对照组比差异极显著(P<0.01)，与药物对照组差异不显著(P>0.05)，2次发酵组的与药物对照组差异显著(P<0.05)。说明该中药口服液对鸡葡萄球菌具有较好的防治作用，其中以2次发酵的为最佳治疗量，即经济又科学。

本发明中药组方具有抑菌杀菌、凉血止痢、祛湿等功能，现代药理表明：方中杜仲、三颗针、白头翁、猪去氧胆酸等具有显著的抗菌杀菌作用，对下痢又有较好的治疗作用，连翘、紫花地丁、木瓜、冬瓜皮具有抗菌消炎之功效，可治疗细菌感染所致的组织损伤，并具有显著的保肝利胆祛湿，增加胆汁分泌的药理作用，黄芪、党参具有增强机体免疫力，提高鸡体的抗病能力，甘草是使药，使诸药归经的作用。诸药合用不仅能促进葡萄球菌及其毒素从体内排出，而且又抑制细菌在体内的生长繁殖，因此对鸡葡萄球菌病具有标本兼治的作用。

附图说明

图1胆固醇标准品图谱。

图2本发明鸡蛋中胆固醇图谱。

图3市售鸡蛋中胆固醇图谱。

图4正常金黄色葡萄球菌图谱。

图5二次发酵组处理后的金黄色葡萄球菌图谱。

具体实施方式

实施例1

一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法，包括以下步骤：

秤取以下重量份（kg）的中药：杜仲100、三颗针100、白头翁100、猪去氧胆酸100、连翘80、紫花地丁80、芙蓉花80、木瓜60、茯苓60、冬瓜皮60、黄芪40、党参40、甘草30；除猪去氧胆酸，其余各中药超微粉碎，加入中药总重量6倍量的60%的乙醇溶液，浸泡30min，武火煮沸，文火保温30min，冷却，十二层纱布过滤；滤渣再加4倍量的40%的乙醇溶液，武火煮沸，文火保温30min，冷却，十二层纱布过滤，合并两次滤液，浓缩回收乙醇，用乙醇检测仪检测浓缩液中无乙醇时停止浓缩，向浓缩液中加水使每毫升水含1g生药。

微生态口服剂的制备：以100 Kg浓缩液为单位添加白糖15Kg，并煮沸3min，冷却至常温，接种乳酸杆菌、红茶菌、酵母菌（市售）制剂20Kg，设定发酵温度35℃，静置发酵培养96h，至pH6.5长出白色菌块为止；将出白色菌块和菌液，按1:50兑入5%冷糖开水稀释，发酵温度33℃，二次发酵18h后，即得微生态口服液。

2014年7月份，淮北某鸡场黑爪肉鸡10000只，按常规免疫程序对鸡群进行新城疫、法氏囊等疫病免疫。鸡群采取地面平养，自配饲料，鸡群密度较大，通风不良，饲养至6周龄时由于连续多天天气闷热加上垫料没有及时更换，患鸡精神萎顿、发热、闭目嗜睡、头及两翼下垂、羽毛松乱、食欲减退或废绝；病重者全身皮肤呈紫红色，缩颈，呆立，双肢无力，两翼卷缩，不能站立甚至瘫痪，大部分患鸡排黄白色稀便。发病后，饲养员用庆大霉素原粉拌料均无明显效果，仍有不断死亡，共计死亡100只，剖检病理变化剖检病理变化，皮下各脏器，浆膜下肌肉多呈紫红色，血液较稀薄，心包大量积聚淡黄色的液体；肾、肝脏肿大充血， 部分病例的肾脏有化脓灶， 肠道呈出血性炎症，肠内容物呈水样，肿大的关节腔内有浆液性、黏液性、脓性物或干酪样物，初步怀疑是鸡葡萄球菌病感染。

用本发明的微生态口服液，让鸡自由饮用，联用7天，观察鸡群状况，凡在用药期间，鸡经饮用给药后，不出现拉稀等症状，其精神状态、食欲、呼吸等到逐步恢复正常者均属治愈，计算治愈率，经过一个疗程用药后死亡495只，存活9405只，治愈率为95%。

实施例2

一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法，包括以下步骤：

秤取以下重量份（kg）的中药：杜仲100、三颗针100、白头翁100、猪去氧胆酸100、连翘80、紫花地丁80、芙蓉花80、木瓜60、茯苓60、冬瓜皮60、黄芪40、党参40、甘草30；除猪去氧胆酸，其余各中药超微粉碎，加入中药总重量6倍量的70%的乙醇溶液，浸泡30min，武火煮沸，文火保温30min，冷却,十二层纱布过滤；滤渣再加4倍量的50%的乙醇溶液，武火煮沸，文火保温60min，冷却,十二层纱布过滤，合并两次滤液，浓缩回收乙醇，用乙醇检测仪检测浓缩液中无乙醇时停止浓缩，向浓缩液中加水使每毫升水含1g生药。

微生态口服剂的制备：以100 Kg浓缩液为单位添加白糖15Kg，并煮沸5min，冷却至常温，接种乳酸杆菌、红茶菌、酵母菌（市售）制剂20Kg，设定发酵温度36℃，静置发酵培养96h，至pH6.5长出白色菌块为止；将出白色菌块和菌液，按1:50兑入5%冷糖开水稀释，发酵温度34℃，二次发酵18h后，即得微生态口服液。

2014年7月份，濉溪某鸡场土鸡5000只，按常规免疫程序对鸡群进行新城疫、法氏囊、禽流感、鸡痘、减蛋综合征等疫病免疫。鸡群采取地面平养，自配饲料，鸡群密度较大，通风不良，饲养至6周龄时由于连续多天天气闷热加上垫料没有及时更换，患鸡精神萎顿、发热、闭目嗜睡、头及两翼下垂、羽毛松乱、食欲减退或废绝；病重者全身皮肤呈紫红色，缩颈，呆立，双肢无力，两翼卷缩，不能站立甚至瘫痪，大部分患鸡排黄白色稀便。发病后，饲养员用氯霉素原粉拌料均无明显效果，仍有不断死亡，共计死亡120只，剖检病理变化剖检病理变化，皮下各脏器，浆膜下肌肉多呈紫红色，血液较稀薄，心包大量积聚淡黄色的液体；肾、肝脏肿大充血， 部分病例的肾脏有化脓灶， 肠道呈出血性炎症，肠内容物呈水样，肿大的关节腔内有浆液性、黏液性、脓性物或干酪样物，初步怀疑是鸡葡萄球菌病感染。

用本发明的微生态口服液，让鸡自由饮用，联用7天，观察鸡群状况，凡在用药期间，鸡经饮用给药后，不出现拉稀等症状，其精神状态、食欲、呼吸等到逐步恢复正常者均属治愈，计算治愈率，经过一个疗程用药后死亡244只，存活4636只，治愈率为95%。

实施例3

一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法，包括以下步骤：

秤取以下重量份（kg）的中药：杜仲100、三颗针100、白头翁100、猪去氧胆酸100、连翘80、紫花地丁80、芙蓉花80、木瓜60、茯苓60、冬瓜皮600、黄芪40、党参40、甘草30；除猪去氧胆酸，其余各中药超微粉碎，加入中药总重量8倍量的60%的乙醇溶液，浸泡30min，武火煮沸，文火保温30min，冷却，十二层纱布过滤；滤渣再加6倍量的40%的乙醇溶液，武火煮沸，文火保温60min，冷却，十二层纱布过滤，合并两次滤液，浓缩回收乙醇，用乙醇检测仪检测浓缩液中无乙醇时停止浓缩，向浓缩液中加水使每毫升水含1g生药。

微生态口服剂的制备：以100 Kg浓缩液为单位添加白糖20Kg，并煮沸3min，冷却至常温，接种乳酸杆菌、红茶菌、酵母菌（市售）制剂25Kg，设定发酵温度37℃，静置发酵培养108h，至pH7.0长出白色菌块为止；将出白色菌块和菌液，按1: 80兑入10%冷糖开水稀释，发酵温度35℃，二次发酵18h后，即得微生态口服液。

2014年7月份，烈山某鸡场肉鸡5000只，按常规免疫程序对鸡群进行新城疫、法氏囊、禽流感等疫病免疫。鸡群采取地面平养，自配饲料，鸡群密度较大，通风不良，饲养至7周龄时由于连续多天天气闷热加上垫料没有及时更换，患鸡精神萎顿、发热、闭目嗜睡、头及两翼下垂、羽毛松乱、食欲减退或废绝；病重者全身皮肤呈紫红色，缩颈，呆立，双肢无力，两翼卷缩，不能站立甚至瘫痪，大部分患鸡排黄白色稀便。发病后，饲养员用卡那霉素原粉拌料均无明显效果，仍有不断死亡，共计死亡210只，剖检病理变化剖检病理变化，皮下各脏器，浆膜下肌肉多呈紫红色，血液较稀薄，心包大量积聚淡黄色的液体；肾、肝脏肿大充血， 部分病例的肾脏有化脓灶， 肠道呈出血性炎症，肠内容物呈水样，肿大的关节腔内有浆液性、黏液性、脓性物或干酪样物，初步怀疑是鸡葡萄球菌病感染。

用本发明的微生态口服液，让鸡自由饮用，联用7天，观察鸡群状况，凡在用药期间，鸡经饮用给药后，不出现拉稀等症状，其精神状态、食欲、呼吸等到逐步恢复正常者均属治愈，计算治愈率，经过一个疗程用药后死亡239只，存活4551只，治愈率为95%。

实施例4

一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法，包括以下步骤：

秤取以下重量份（kg）的中药：杜仲100、三颗针100、白头翁100、猪去氧胆酸100、连翘80、紫花地丁80、芙蓉花80、木瓜60、茯苓60、冬瓜皮60、黄芪40、党参40、甘草30；除猪去氧胆酸，其余各中药超微粉碎，加入中药总重量8倍量的70%的乙醇溶液，浸泡60min，武火煮沸，文火保温60min，冷却，十二层纱布过滤；滤渣再加6倍量的50%的乙醇溶液，武火煮沸，文火保温60min，冷却，十二层纱布过滤，合并两次滤液，浓缩回收乙醇，用乙醇检测仪检测浓缩液中无乙醇时停止浓缩，向浓缩液中加水使每毫升水含1g生药。

微生态口服剂的制备：以100 Kg浓缩液为单位添加白糖20Kg，并煮沸5min，冷却至常温，接种乳酸杆菌、红茶菌、酵母菌（市售）制剂25Kg，设定发酵温度38℃，静置发酵培养118h，至pH7.0长出白色菌块为止；将出白色菌块和菌液，按1: 80兑入10%冷糖开水稀释，发酵温度37℃，二次发酵24h后，即得微生态口服液。

2014年7月份，宿州某鸡场蛋鸡8000只，按常规免疫程序对鸡群进行新城疫、法氏囊、禽流感、鸡痘、减蛋综合征等疫病免疫。鸡群采取地面平养，自配饲料，鸡群密度较大，通风不良，饲养至8周龄时由于连续多天天气闷热加上垫料没有及时更换，患鸡精神萎顿、发热、闭目嗜睡、头及两翼下垂、羽毛松乱、食欲减退或废绝；病重者全身皮肤呈紫红色，缩颈，呆立，双肢无力，两翼卷缩，不能站立甚至瘫痪，大部分患鸡排黄白色稀便。发病后，饲养员用土霉素原粉拌料均无明显效果，仍有不断死亡，共计死亡310只，剖检病理变化剖检病理变化，皮下各脏器，浆膜下肌肉多呈紫红色，血液较稀薄，心包大量积聚淡黄色的液体；肾、肝脏肿大充血， 部分病例的肾脏有化脓灶， 肠道呈出血性炎症，肠内容物呈水样，肿大的关节腔内有浆液性、黏液性、脓性物或干酪样物，初步怀疑是鸡葡萄球菌病感染。

用本发明的微生态口服液，让鸡自由饮用，联用7天，观察鸡群状况，凡在用药期间，鸡经饮用给药后，不出现拉稀等症状，其精神状态、食欲、呼吸等到逐步恢复正常者均属治愈，计算治愈率，经过一个疗程用药后死亡384只，存活7306只，治愈率为95%。

实施例5

一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法，包括以下步骤：

秤取以下重量份（kg）的中药：杜仲110、三颗针110、白头翁110、猪去氧胆酸110、连翘90、紫花地丁90、芙蓉花90、木瓜70、茯苓70、冬瓜皮70、黄芪70、党参50、甘草35；除猪去氧胆酸，其余各中药超微粉碎，加入中药总重量6倍量的60%的乙醇溶液，浸泡30min，武火煮沸，文火保温30min，冷却，十二层纱布过滤；滤渣再加4倍量的40%的乙醇溶液，武火煮沸，文火保温30min，冷却，十二层纱布过滤，合并两次滤液，浓缩回收乙醇，用乙醇检测仪检测浓缩液中无乙醇时停止浓缩，向浓缩液中加水使每毫升水含1g生药。

微生态口服剂的制备：以100 Kg浓缩液为单位添加白糖15Kg，并煮沸3min，冷却至常温，接种乳酸杆菌、红茶菌、酵母菌（市售）制剂20Kg，设定发酵温度35℃，静置发酵培养96h，至pH6.5长出白色菌块为止；将出白色菌块和菌液，按1:50兑入5%冷糖开水稀释，发酵温度37℃，二次发酵22h后，即得微生态口服液。

2014年8月份，相山某鸡场土鸡2000只，按常规免疫程序对鸡群进行新城疫、法氏囊、等疫病免疫。鸡群采取地面散养，自配饲料，鸡群密度较大，通风不良，饲养至10周龄时由于连续多天天气闷热加上垫料没有及时更换，患鸡精神萎顿、发热、闭目嗜睡、头及两翼下垂、羽毛松乱、食欲减退或废绝；病重者全身皮肤呈紫红色，缩颈，呆立，双肢无力，两翼卷缩，不能站立甚至瘫痪，大部分患鸡排黄白色稀便。发病后，饲养员用磺胺嘧啶原粉拌料均无明显效果，仍有不断死亡，共计死亡100只，剖检病理变化剖检病理变化，皮下各脏器，浆膜下肌肉多呈紫红色，血液较稀薄，心包大量积聚淡黄色的液体；肾、肝脏肿大充血， 部分病例的肾脏有化脓灶， 肠道呈出血性炎症，肠内容物呈水样，肿大的关节腔内有浆液性、黏液性、脓性物或干酪样物，初步怀疑是鸡葡萄球菌病感染。

用本发明的微生态口服液，让鸡自由饮用，联用7天，观察鸡群状况，凡在用药期间，鸡经饮用给药后，不出现拉稀等症状，其精神状态、食欲、呼吸等到逐步恢复正常者均属治愈，计算治愈率，经过一个疗程用药后死亡95只，存活1805只，治愈率为95%。

实施例6

一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法，包括以下步骤：

秤取以下重量份（kg）的中药：杜仲110、三颗针110、白头翁110、猪去氧胆酸110、连翘90、紫花地丁90、芙蓉花90、木瓜70、茯苓70、冬瓜皮70、黄芪70、党参50、甘草35；除猪去氧胆酸，其余各中药超微粉碎，加入中药总重量6倍量的70%的乙醇溶液，浸泡60min，武火煮沸，文火保温30min，冷却，十二层纱布过滤；滤渣再加4倍量的50%的乙醇溶液，武火煮沸，文火保温60min，冷却十二层纱布过滤，合并两次滤液，浓缩回收乙醇，用乙醇检测仪检测浓缩液中无乙醇时停止浓缩，向浓缩液中加水使每毫升水含1g生药。

微生态口服剂的制备：以100 Kg浓缩液为单位添加白糖15Kg，并煮沸5min，冷却至常温，接种乳酸杆菌、红茶菌、酵母菌（市售）制剂20Kg，设定发酵温度36℃，静置发酵培养108h，至pH6.5长出白色菌块为止；将出白色菌块和菌液，按1:50兑入5%%冷糖开水稀释，发酵温度33℃，二次发酵18h后，即得微生态口服液。

2014年8月份，栏杆某鸡场青年土鸡5000只，按常规免疫程序对鸡群进行新城疫、法氏囊、禽流感、鸡痘等疫病免疫。鸡群采取地面平养，自配饲料，鸡群密度较大，通风不良，饲养至8周龄时由于连续多天天气闷热加上垫料没有及时更换，患鸡精神萎顿、发热、闭目嗜睡、头及两翼下垂、羽毛松乱、食欲减退或废绝；病重者全身皮肤呈紫红色，缩颈，呆立，双肢无力，两翼卷缩，不能站立甚至瘫痪，大部分患鸡排黄白色稀便。发病后，饲养员用庆大霉素原粉拌料均无明显效果，仍有不断死亡，共计死亡500只，剖检病理变化剖检病理变化，皮下各脏器，浆膜下肌肉多呈紫红色，血液较稀薄，心包大量积聚淡黄色的液体；肾、肝脏肿大充血， 部分病例的肾脏有化脓灶， 肠道呈出血性炎症，肠内容物呈水样，肿大的关节腔内有浆液性、黏液性、脓性物或干酪样物，初步怀疑是鸡葡萄球菌病感染。

用本发明的微生态口服液，让鸡自由饮用，联用7天，观察鸡群状况，凡在用药期间，鸡经饮用给药后，不出现拉稀等症状，其精神状态、食欲、呼吸等到逐步恢复正常者均属治愈，计算治愈率，经过一个疗程用药后死亡225只，存活4275只，治愈率为95%。

实施例7

一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法，包括以下步骤：

秤取以下重量份（kg）的中药：杜仲110、三颗针110、白头翁110、猪去氧胆酸110、连翘90、紫花地丁90、芙蓉花90、木瓜70、茯苓700、冬瓜皮700、黄芪70、党参50、甘草35；除猪去氧胆酸，其余各中药超微粉碎，加入中药总重量8倍量的60%的乙醇溶液，浸泡60min，武火煮沸，文火保温60min，冷却，十二层纱布过滤；滤渣再加6倍量的40%的乙醇溶液，武火煮沸，文火保温60min，冷却，十二层纱布过滤，合并两次滤液，浓缩回收乙醇，用乙醇检测仪检测浓缩液中无乙醇时停止浓缩，向浓缩液中加水使每毫升水含1g生药。

微生态口服剂的制备：以100 Kg浓缩液为单位添加白糖20Kg，并煮沸5min，冷却至常温，接种乳酸杆菌、红茶菌、酵母菌（市售）制剂25Kg，设定发酵温度37℃，静置发酵培养118h，至pH7.0长出白色菌块为止；将出白色菌块和菌液，按1:50兑入10%冷糖开水稀释，发酵温度34℃，二次发酵24h后，即得微生态口服液。

2014年8月份，濉溪某鸡场肉鸡10000只，按常规免疫程序对鸡群进行新城疫、法氏囊等疫病免疫。鸡群采取地面平养，自配饲料，鸡群密度较大，通风不良，饲养至7周龄时由于连续多天天气闷热加上垫料没有及时更换，患鸡精神萎顿、发热、闭目嗜睡、头及两翼下垂、羽毛松乱、食欲减退或废绝；病重者全身皮肤呈紫红色，缩颈，呆立，双肢无力，两翼卷缩，不能站立甚至瘫痪，大部分患鸡排黄白色稀便。发病后，饲养员用磺胺二甲嘧啶原粉拌料均无明显效果，仍有不断死亡，共计死亡200只，剖检病理变化剖检病理变化，皮下各脏器，浆膜下肌肉多呈紫红色，血液较稀薄，心包大量积聚淡黄色的液体；肾、肝脏肿大充血， 部分病例的肾脏有化脓灶， 肠道呈出血性炎症，肠内容物呈水样，肿大的关节腔内有浆液性、黏液性、脓性物或干酪样物，初步怀疑是鸡葡萄球菌病感染。

用本发明的微生态口服液，让鸡自由饮用，联用7天，观察鸡群状况，凡在用药期间，鸡经饮用给药后，不出现拉稀等症状，其精神状态、食欲、呼吸等到逐步恢复正常者均属治愈，计算治愈率，经过一个疗程用药后死亡490只，存活9310只，治愈率为95%。

实施例8

一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法，包括以下步骤：

秤取以下重量份（kg）的中药：杜仲110、三颗针110、白头翁110、猪去氧胆酸110、连翘90、紫花地丁90、芙蓉花90、木瓜70、茯苓700、冬瓜皮700、黄芪70、党参50、甘草35；除猪去氧胆酸，其余各中药超微粉碎，加入中药总重量8倍量的70%的乙醇溶液，浸泡60min，武火煮沸，文火保温60min，冷却，十二层纱布过滤；滤渣再加6倍量的50%的乙醇溶液，武火煮沸，文火保温60min，冷却，十二层纱布过滤，合并两次滤液，浓缩回收乙醇，用乙醇检测仪检测浓缩液中无乙醇时停止浓缩，向浓缩液中加水使每毫升水含1g生药。

微生态口服剂的制备：以100 Kg浓缩液为单位添加白糖20Kg，并煮沸5min，冷却至常温，接种乳酸杆菌、红茶菌、酵母菌（市售）制剂25Kg，设定发酵温度38℃，静置发酵培养118h，至pH7.0长出白色菌块为止；将出白色菌块和菌液，按1: 80兑入10%冷糖开水稀释，发酵温度35℃，二次发酵24h后，即得微生态口服液。

2014年7月份，濉溪某鸡场土鸡8000只，按常规免疫程序对鸡群进行新城疫法氏囊、禽流感、鸡痘等疫病免疫。鸡群采取地面平养和散养结合，自配饲料，鸡群密度较大，通风不良，饲养至7周龄时由于连续多天天气闷热加上垫料没有及时更换，患鸡精神萎顿、发热、闭目嗜睡、头及两翼下垂、羽毛松乱、食欲减退或废绝；病重者全身皮肤呈紫红色，缩颈，呆立，双肢无力，两翼卷缩，不能站立甚至瘫痪，大部分患鸡排黄白色稀便。发病后，饲养员用土霉素原粉拌料均无明显效果，仍有不断死亡，共计死亡280只，剖检病理变化剖检病理变化，皮下各脏器，浆膜下肌肉多呈紫红色，血液较稀薄，心包大量积聚淡黄色的液体；肾、肝脏肿大充血， 部分病例的肾脏有化脓灶， 肠道呈出血性炎症，肠内容物呈水样，肿大的关节腔内有浆液性、黏液性、脓性物或干酪样物，初步怀疑是鸡葡萄球菌病感染。

用本发明的微生态口服液，让鸡自由饮用，联用7天，观察鸡群状况，凡在用药期间，鸡经饮用给药后，不出现拉稀等症状，其精神状态、食欲、呼吸等到逐步恢复正常者均属治愈，计算治愈率，经过一个疗程用药后死亡386只，存活7334只，治愈率为95%。

实施例9

一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法，包括以下步骤：

秤取以下重量份（kg）的中药：杜仲120、三颗针120、白头翁120、猪去氧胆酸120、连翘100、紫花地丁100、芙蓉花100、木瓜80、茯苓80、冬瓜皮80、黄芪60、党参60、甘草40；除猪去氧胆酸，其余各中药超微粉碎，加入中药总重量6倍量的60%的乙醇溶液，浸泡30min，武火煮沸，文火保温30min，冷却，十二层纱布过滤；滤渣再加4倍量的40%的乙醇溶液，武火煮沸，文火保温60min，冷却，十二层纱布过滤，合并两次滤液，浓缩回收乙醇，用乙醇检测仪检测浓缩液中无乙醇时停止浓缩，向浓缩液中加水使每毫升水含1g生药。

微生态口服剂的制备：以100 Kg浓缩液为单位添加白糖15Kg，并煮沸5min，冷却至常温，接种乳酸杆菌、红茶菌、酵母菌（市售）制剂20Kg，设定发酵温度35℃，静置发酵培养96h，至pH6.5长出白色菌块为止；将出白色菌块和菌液，按1:50兑入5%%冷糖开水稀释，发酵温度36℃，二次发酵18h后，即得微生态口服液。

2014年9月份，袁庄某鸡场土鸡6000只，按常规免疫程序对鸡群进行新城疫、法氏囊、禽流感、鸡痘等疫病免疫。鸡群采取地面平养，自配饲料，鸡群密度较大，通风不良，饲养至7周龄时由于连续多天天气闷热加上垫料没有及时更换，患鸡精神萎顿、发热、闭目嗜睡、头及两翼下垂、羽毛松乱、食欲减退或废绝；病重者全身皮肤呈紫红色，缩颈，呆立，双肢无力，两翼卷缩，不能站立甚至瘫痪，大部分患鸡排黄白色稀便。发病后，饲养员用卡那霉素原粉拌料均无明显效果，仍有不断死亡，共计死亡420只，剖检病理变化剖检病理变化，皮下各脏器，浆膜下肌肉多呈紫红色，血液较稀薄，心包大量积聚淡黄色的液体；肾、肝脏肿大充血， 部分病例的肾脏有化脓灶， 肠道呈出血性炎症，肠内容物呈水样，肿大的关节腔内有浆液性、黏液性、脓性物或干酪样物，初步怀疑是鸡葡萄球菌病感染。

用本发明的微生态口服液，让鸡自由饮用，联用7天，观察鸡群状况，凡在用药期间，鸡经饮用给药后，不出现拉稀等症状，其精神状态、食欲、呼吸等到逐步恢复正常者均属治愈，计算治愈率，经过一个疗程用药后死亡279只，存活5301只，治愈率为95%。

实施例10

一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法，包括以下步骤：

秤取以下重量份（kg）的中药：杜仲120、三颗针120、白头翁120、猪去氧胆酸120、连翘100、紫花地丁100、芙蓉花100、木瓜80、茯苓80、冬瓜皮80、黄芪60、党参60、甘草40；除猪去氧胆酸，其余各中药超微粉碎，加入中药总重量6倍量的70%的乙醇溶液，浸泡60min，武火煮沸，文火保温60min，冷却十二层纱布过滤；滤渣再加4倍量的50%的乙醇溶液，武火煮沸，文火保温60min，冷却十二层纱布过滤，合并两次滤液，浓缩回收乙醇，用乙醇检测仪检测浓缩液中无乙醇时停止浓缩，向浓缩液中加水使每毫升水含1g生药。

微生态口服剂的制备：以100 Kg浓缩液为单位添加白糖20Kg，并煮沸5min，冷却至常温，接种乳酸杆菌、红茶菌、酵母菌（市售）制剂25Kg，设定发酵温度36℃，静置发酵培养118h，至pH7.0长出白色菌块为止；将出白色菌块和菌液，按1:50兑入10%冷糖开水稀释，发酵温度37℃，二次发酵24h后，即得微生态口服液。

2014年8月份，吴山口某鸡场肉鸡5000只，按常规免疫程序对鸡群进行新城疫、法氏囊等疫病免疫。鸡群采取地面平养，自配饲料，鸡群密度较大，通风不良，饲养至6周龄时由于连续多天天气闷热加上垫料没有及时更换，患鸡精神萎顿、发热、闭目嗜睡、头及两翼下垂、羽毛松乱、食欲减退或废绝；病重者全身皮肤呈紫红色，缩颈，呆立，双肢无力，两翼卷缩，不能站立甚至瘫痪，大部分患鸡排黄白色稀便。发病后，饲养员用庆大霉素原粉拌料均无明显效果，仍有不断死亡，共计死亡320只，剖检病理变化剖检病理变化，皮下各脏器，浆膜下肌肉多呈紫红色，血液较稀薄，心包大量积聚淡黄色的液体；肾、肝脏肿大充血， 部分病例的肾脏有化脓灶， 肠道呈出血性炎症，肠内容物呈水样，肿大的关节腔内有浆液性、黏液性、脓性物或干酪样物，初步怀疑是鸡葡萄球菌病感染。

用本发明的微生态口服液，让鸡自由饮用，联用7天，观察鸡群状况，凡在用药期间，鸡经饮用给药后，不出现拉稀等症状，其精神状态、食欲、呼吸等到逐步恢复正常者均属治愈，计算治愈率，经过一个疗程用药后死亡234只，存活4446只，治愈率为95%。

实施例11

一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法，包括以下步骤：

秤取以下重量份（kg）的中药：杜仲120、三颗针120、白头翁120、猪去氧胆酸120、连翘100、紫花地丁100、芙蓉花100、木瓜80、茯苓80、冬瓜皮80、黄芪60、党参60、甘草40；除猪去氧胆酸，其余各中药超微粉碎，加入中药总重量8倍量的60%的乙醇溶液，浸泡60min，武火煮沸，文火保温60min，冷却，十二层纱布过滤；滤渣再加6倍量的40%的乙醇溶液，武火煮沸，文火保温60min，冷却，十二层纱布过滤，合并两次滤液，浓缩回收乙醇，用乙醇检测仪检测浓缩液中无乙醇时停止浓缩，向浓缩液中加水使每毫升水含1g生药。

微生态口服剂的制备：以100 Kg浓缩液为单位添加白糖20Kg，并煮沸5min，冷却至常温，接种乳酸杆菌、红茶菌、酵母菌（市售）制剂25Kg，设定发酵温度37℃，静置发酵培养96h，至pH6.5长出白色菌块为止；将出白色菌块和菌液，按1:50兑入5%冷糖开水稀释，发酵温度35℃，二次发酵22h后，即得微生态口服液。

2014年8月份，马场某鸡场土鸡3000只，按常规免疫程序对鸡群进行新城疫、法氏囊、禽流感等疫病免疫。鸡群采取地面平养，自配饲料，鸡群密度较大，通风不良，饲养至7周龄时由于连续多天天气闷热加上垫料没有及时更换，患鸡精神萎顿、发热、闭目嗜睡、头及两翼下垂、羽毛松乱、食欲减退或废绝；病重者全身皮肤呈紫红色，缩颈，呆立，双肢无力，两翼卷缩，不能站立甚至瘫痪，大部分患鸡排黄白色稀便。发病后，饲养员用磺胺嘧啶原粉拌料均无明显效果，仍有不断死亡，共计死亡160只，剖检病理变化剖检病理变化，皮下各脏器，浆膜下肌肉多呈紫红色，血液较稀薄，心包大量积聚淡黄色的液体；肾、肝脏肿大充血， 部分病例的肾脏有化脓灶， 肠道呈出血性炎症，肠内容物呈水样，肿大的关节腔内有浆液性、黏液性、脓性物或干酪样物，初步怀疑是鸡葡萄球菌病感染。

用本发明的微生态口服液，让鸡自由饮用，联用7天，观察鸡群状况，凡在用药期间，鸡经饮用给药后，不出现拉稀等症状，其精神状态、食欲、呼吸等到逐步恢复正常者均属治愈，计算治愈率，经过一个疗程用药后死亡142只，存活2698只，治愈率为95%。

实施例12

一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法，包括以下步骤：

秤取以下重量份（kg）的中药：杜仲120、三颗针120、白头翁120、猪去氧胆酸120、连翘100、紫花地丁100、芙蓉花100、木瓜80、茯苓80、冬瓜皮80、黄芪60、党参60、甘草40；除猪去氧胆酸，其余各中药超微粉碎，加入中药总重量8倍量的70%的乙醇溶液，浸泡60min，武火煮沸，文火保温60min，冷却，十二层纱布过滤；滤渣再加6倍量的50%的乙醇溶液，武火煮沸，文火保温60min，冷却，十二层纱布过滤，合并两次滤液，浓缩回收乙醇，用乙醇检测仪检测浓缩液中无乙醇时停止浓缩，向浓缩液中加水使每毫升水含1g生药。

微生态口服剂的制备：以100 Kg浓缩液为单位添加白糖20Kg，并煮沸5min，冷却至常温，接种乳酸杆菌、红茶菌、酵母菌（市售）制剂25Kg，设定发酵温度38℃，静置发酵培养118h，至pH7.0长出白色菌块为止；将出白色菌块和菌液，按1: 80兑入10%冷糖开水稀释，发酵温度36℃，二次发酵24h后，即得微生态口服液。

2014年7月份，土楼某鸡场青年鸡3000只，按常规免疫程序对鸡群进行新城疫、法氏囊、鸡痘、禽流感等疫病免疫。鸡群采取地面平养，自配饲料，鸡群密度较大，通风不良，饲养至7周龄时由于连续多天天气闷热加上垫料没有及时更换，患鸡精神萎顿、发热、闭目嗜睡、头及两翼下垂、羽毛松乱、食欲减退或废绝；病重者全身皮肤呈紫红色，缩颈，呆立，双肢无力，两翼卷缩，不能站立甚至瘫痪，大部分患鸡排黄白色稀便。发病后，饲养员用土霉素原粉拌料均无明显效果，仍有不断死亡，共计死亡100只，剖检病理变化剖检病理变化，皮下各脏器，浆膜下肌肉多呈紫红色，血液较稀薄，心包大量积聚淡黄色的液体；肾、肝脏肿大充血， 部分病例的肾脏有化脓灶， 肠道呈出血性炎症，肠内容物呈水样，肿大的关节腔内有浆液性、黏液性、脓性物或干酪样物，初步怀疑是鸡葡萄球菌病感染。

用本发明的微生态口服液，让鸡自由饮用，联用7天，观察鸡群状况，凡在用药期间，鸡经饮用给药后，不出现拉稀等症状，其精神状态、食欲、呼吸等到逐步恢复正常者均属治愈，计算治愈率，经过一个疗程用药后死亡145只，存活2755只，治愈率为95%。

以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法，其特征在于：它是按以下步骤制备：一、秤取以下重量份的中药：杜仲100~120、三颗针100~120、白头翁100~120、猪去氧胆酸100~120、连翘80~100、紫花地丁80~100、芙蓉花80~100、木瓜60~80、茯苓60~80、冬瓜皮60~80、黄芪40~60、党参40~60、甘草30~40；二、除猪去氧胆酸，其余各中药超微粉碎加乙醇溶液武火煮沸，文火保温，冷却,过滤，浓缩滤液，加入白糖煮沸，冷却降至常温后接种乳酸杆菌、红茶菌及酵母菌，经96~118h发酵至长出白色菌块；三、将白色菌块和菌液，按1:50~80稀释，二次发酵18~24h后，即得微生态口服液。

2.根据权利要求1所述的一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法，其特征在于：秤取重量份的中药，除猪去氧胆酸，其余各中药超微粉碎，加入中药总重量6～8倍量的60%～70%的乙醇溶液，浸泡30～60min，武火煮沸，文火保温30～60min，冷却,十二层纱布过滤；滤渣再加4～6倍量的40%～50%的乙醇溶液，武火煮沸，文火保温30～60min，冷却,十二层纱布过滤，合并两次滤液，浓缩回收乙醇，用乙醇检测仪检测浓缩液中无乙醇时停止浓缩，向浓缩液中加水使每毫升水含1g生药。

3.根据权利要求1所述的一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法，其特征在于：以100 Kg浓缩液为单位添加白糖15～20Kg，并煮沸3～5min，冷却至常温，接种乳酸杆菌、红茶菌、酵母菌（市售）制剂20～25Kg，设定发酵温度35～38℃，静置发酵培养96～118h，至pH6.5～7.0长出白色菌块为止。

4.根据权利要求1所述的一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法，其特征在于：将出白色菌块和菌液，按1:50～80兑入5%～10%冷糖开水稀释，发酵温度33～37℃，二次发酵18～24h后，即得微生态口服液。

5.根据权利要求1所述的一种防治鸡葡萄球菌病中药微生态口服剂的制备方法，其特征在于：步骤二是在无菌发酵室内进行的。