CN104837352A - 用于从冷冻的浓缩酵素直接接种的方法和相关装置 - Google Patents

用于从冷冻的浓缩酵素直接接种的方法和相关装置 Download PDF

Info

Publication number
CN104837352A
CN104837352A CN201380063154.9A CN201380063154A CN104837352A CN 104837352 A CN104837352 A CN 104837352A CN 201380063154 A CN201380063154 A CN 201380063154A CN 104837352 A CN104837352 A CN 104837352A
Authority
CN
China
Prior art keywords
ferment
container
thawed
freezing
inoculating
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201380063154.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104837352B (zh
Inventor
J-P·波伊格纳德
P·兰奇奥克斯
M·皮盖
E·郎之万
G·迪德洛
J-M·奥迪诺
M·费弗莱
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Chr Hansen AS
Original Assignee
Chr Hansen AS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Chr Hansen AS filed Critical Chr Hansen AS
Publication of CN104837352A publication Critical patent/CN104837352A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104837352B publication Critical patent/CN104837352B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23CDAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/122Apparatus for preparing or treating fermented milk products
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23CDAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C19/00Cheese; Cheese preparations; Making thereof
    • A23C19/02Making cheese curd
    • A23C19/024Making cheese curd using continuous procedure
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23CDAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23CDAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/123Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N13/00Treatment of microorganisms or enzymes with electrical or wave energy, e.g. magnetism, sonic waves

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
  • Dairy Products (AREA)

Abstract

本发明涉及用于用酵素对食品、特别是奶制品进行连续接种的方法,其中:借助于作用于含有冷冻的浓缩酵素的容器的微波装置或水浴解冻装置将冷冻的浓缩酵素解冻,将所述解冻的浓缩酵素从所述容器连续地注入到待接种的液体流中。

Description

用于从冷冻的浓缩酵素直接接种的方法和相关装置
技术领域
本发明涉及用于从冷冻的浓缩酵素连续接种的装置和方法,所述装置和方法既不需要具有潜在健康风险的孵育、预培养或活化,也不需要在生产期间中断接种过程。
背景技术
食品加工工业并且特别是奶制品工业中的接种对于生产产品来说至关重要。实际上,最终产品的工业和质量性能水平取决于所用酵素的性质和效率以及它们的添加方法。
从文献WO 200170935和EP688864已知获得用于对乳进行接种的预培养物,所述预培养物还被称作起子培养物,即在活化培养物以减少迟滞期前。专利申请WO 99/09838描述了用于制备其中起子培养物可呈冷冻形式的新鲜产品的方法。
这些再活化和/或稀释系统具有使得有必要处置接种阶段上游的浓缩酵素、由此产生污染风险的缺点。
此外,对待用冷冻的浓缩酵素接种的液体培养基的发酵意味着使用它们的制造商对于接种阶段和发酵阶段不得不以分批模式作业。实际上,由于包装的形式和类型通常为袋或罐,因此一定有必要将微生物直接添加到发酵槽中。
使用冷冻的浓缩酵素的其它系统需要存在用于中间解冻酵素的容器,这增加了污染风险。
申请人意外地发现可以通过直接接种引入冷冻的浓缩酵素。这允许在不必中断发酵过程的情况下连续接种,以进行终产品的生产。由此使得有可能大幅增加发酵产物的生产速度。
发明内容
因此,本发明主题是使用冷冻的浓缩酵素连续接种食品、特别是奶制品的方法。
根据一个一般特征,所述方法包括以下步骤:
-借助于对含有冷冻的浓缩酵素的容器进行操作的微波装置或水浴解冻装置将冷冻的浓缩酵素解冻,
-将解冻的浓缩酵素从所述容器连续地注入到待接种的液体流中。
本发明的主题还是用于将酵素连续接种到待接种的液体中的设备,其中所述酵素来源于冷冻的浓缩酵素,该设备包括用于将包含冷冻的浓缩酵素的容器解冻的室,该室包括微波装置或水浴解冻装置;接种室,该接种室提供有用于安装至少两个被解冻酵素的容器的支撑构件以及至少一个能够连续地测定被排空的容器中的剩余体积的称量装置,所述设备进一步包括将所述容器连接到用于连续供应所述待接种的液体的回路的注入回路,所述注入回路包括允许从一个容器转换到另一容器的阀和用于调节呈液体形式的酵素的流速的构件。
在一个实施方案中,含有冷冻的浓缩酵素的容器在其解冻前被储存在-20℃到-70℃的温度。
有利地,一旦被放置在接种室中,就连续地称量含有解冻浓缩酵素的容器以测定在排空期间所称量的容器中液体酵素的剩余体积。
被解冻酵素的注入通过连接到用于连续供应待接种的液体的回路的连接构件实施。这些连接构件可以是可在待接种的液体每次在管线中每次通过后被清洁和灭菌的注入回路管,或提供有例如通过夹子紧固或卡扣紧固(snap-fastening)暂时连接的构件的基本上柔性的管道。
表面的微生物污染通过食物在其转化期间的可能污染对健康构成危险。例如,当生物膜(即彼此附着并且附着到表面的微生物的多细胞群体)中出现细菌孢子时,情况就是这样。实际上,细菌孢子展现出显著的抵抗特征并且污染设备和连接管道的表面。对于工业制造商来说,生物膜的去除在多数情况下需要使用过度的卫生程序以确保被转化食物的良好保存,并且避免食物污染。
因此,可选择地,连接到用于连续供应待接种液体的回路的连接构件是一次性的,以确保完全无菌性和易用性。这些连接构件还可根据所用的酵素而更换。
优选地,将解冻后的容器放置在高于大气压力的压力下的接种室中。
因此,在本发明的一个实施方案中,借助于中性无菌气体对含有解冻的浓缩酵素的接种室加压以尽可能在该室中维持恒定压力,这由此促进浓缩酵素的流动精确性。此外,解冻容器中的超压限制了被外部空气污染的可能性。通常100g/cm2的超压允许更均匀的计量。
在本发明的一个实施方案中,将数个容器呈平行布置放置在接种室中,使得当它们中的一个处于被排空的过程中时,至少另一个含有解冻的浓缩酵素的容器处于备用状态。
优选地,借助于该过程,将计量量的解冻的浓缩酵素连续地引入待接种的液体流中。该被接种液体然后将被放在直接于欲销售的容器中的发酵器、用于生产发酵产品的槽或发酵装置中。在奶制品的情况下,例如,发酵单元可为奶制品锅(pot)。
该连续接种具有改进最终产品的质量的规律性的作用。因此,本发明允许直接在待接种的液体的管线中直接使用来自其容器的冷冻的浓缩酵素,而不涉及有风险的中间阶段。任何中间处置阶段实际上都会不可避免地导致偶然污染的风险,所述风险有害于用于生产发酵产品的全部后续过程。此外,刚好在凝乳前直接接种到液体的管线中使得限制成熟区上的任何噬菌体增殖和生物膜产生成为可能。
优选地,将用于调节呈液体形式的酵素的流速的构件放置在用于连续供应待接种的液体的回路上游。这些构件可为泵。
容器中的这些冷冻的浓缩酵素的解冻时间是可变的,取决于存在于容器中的产品量。
通常,对于微波装置来说,冷冻的浓缩酵素的解冻时间为10分钟到60分钟。
使用水浴解冻装置对冷冻的浓缩酵素的解冻时间为15分钟到300分钟。
为了确保浓缩酵素的快速融化,而不产生将有害于生产过程后续步骤的正确进程的任何大的热冲击,对解冻室中的温度进行调节。
优选地,解冻室的微波装置中环境大气的温度是20℃到30℃并且优选25℃。
优选地,水浴解冻装置中水浴的温度是15℃到45℃。
优选地,在解冻期间搅拌冷冻的浓缩酵素以将它们均质化并且避免不完全融化的凝聚物。
为此目的,在所述设备的一个实施方案中,解冻室可包含用于搅拌所述容器的构件,所述构件能够在解冻期间使热均匀地分布。
一旦被放置在接种室中,将解冻的液体酵素维持在相对较低的温度,所述温度可为2℃到12℃,或与维持酵素的功能性相容的任何其它温度。这使得有可能尽可能限制细菌代谢的恢复并且保证随时间恒定的接种质量。
在所述设备的一个实施方案中,接种室可包括制冷构件和用于维持高于大气压力的压力的构件。
所述设备的接种室可有利地包括将至少一个容器在排空期间均质化的构件。
因此,在排空期间将解冻和融化的浓缩酵素的混合物均质化使得有可能确保构成酵素的细菌培养物的混合物的均匀性。
优选地,均质化步骤包括混合。
冷冻的浓缩酵素可被包装和储存在具有或多或少大的容量的包装中,所述容量在200g到几千克的范围。必须在严格的卫生条件下实施转移以避免有害于全部后续发酵过程的任何污染。
所用的冷冻的浓缩酵素由细菌构成,所述细菌用于生产奶酪,例如,软奶酪、烹制的压制奶酪、未烹制的压制干酪、旋制凝乳酪和发酵乳,所述发酵乳例如搅拌型或凝固型、调味的或天然的酸乳、饮用酸乳、酸奶油和新鲜干酪(fromages frais),并且还用于生产其它发酵产品,例如,酒。
所用的细菌可以是嗜温性微生物,其最佳生长温度是25℃到35℃。在常用的嗜温性微生物中,可特别提到例如乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subsp.lactis)、乳酸乳球菌乳脂亚种(Lactococcus lactissubsp.cremoris)、乳脂明串珠菌(Leuconostoc cremoris)、乳酸乳球菌丁二酮变种(Lactoccus lactis biovar.diacetylactis)、干酪乳杆菌(Lactobacilluscasei)、坚忍链球菌(Streptococcus durans)、粪链球菌(Streptococcusfaecalis)。
还可使用嗜热性微生物,即,生长温度可为35℃到45℃的生物体。可特别提到例如嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、乳酸乳杆菌(Lactobacillus lactis)、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)、德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus)和嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)或任何其它适当的微生物。
同样,可使用双歧杆菌型的严格厌氧微生物,包括两歧双歧杆菌(Bifidus bifidum)和长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)(动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis))。
还可使用丙酸细菌,例如瑞士乳杆菌、费氏丙酸杆菌(Propionibacterium freudenreichii)、费氏丙酸杆菌谢氏亚种(Propionibacterium freudenreichii subsp.shermanii)等。
所用的细菌可为酒细菌,例如酒类酒球菌(Oenococcus oeni)(酒明串珠菌(Leuconostoc oenos))、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)或片球菌(Pedicoccus sp.)。
还可使用酵母科(Saccharomycetaceae)的酵母、或霉菌,例如青霉属(Penicillium)或地霉属(Geotrichum)。
冷冻的浓缩酵素或浓缩的细菌培养物的接种水平根据所考虑的技术和产品而变化。通常,这一比例是基于待接种的培养基的总重量0.005%到0.025%。
通常,在生产后,使用液氮将酵素冷冻,然后将酵素储存在-20℃到-70℃的温度。
取决于酵素的冷冻温度,酵素在使用前可被储存一段时间:储存在-20℃的情况下最长达1个月、储存在-40℃的情况下最长达6个月、以及储存在-45℃的情况下最长达12个月。参照附图,根据本发明实施方案和实施方式的描述,将显现其他的目的、特征和优点,所述实施方案和实施方式仅以非限制性的实例提供。
附图说明
-图1示意性地图解说明根据本发明的一种实施方式的方法的各步骤的流程图,
-图2示意性地图解说明根据本发明的第一实施方案,
-图3示意性地图解说明根据本发明的第二实施方案,
-图4代表了YF-L901培养物在微波炉中解冻后其培养基在43℃的酸化随以冷冻形式储存的温度(-20℃或-40℃)而变化的监测曲线,
-图5代表了CHN-19培养物在微波炉中解冻后其培养基在30℃的酸化随以冷冻形式储存的温度(-20℃或-40℃)而变化的监测曲线,
-图6代表了Flora Tradi 01培养物在微波炉中解冻后其培养基在30℃的酸化随以冷冻形式储存的温度(-20℃或-40℃)而变化的监测曲线,
-图7代表了SCC-100培养物在微波炉中解冻后其培养基在40℃的酸化随以冷冻形式储存的温度(-20℃或-40℃)而变化的监测曲线,
-图8a和8b代表了对FMD-0046培养物在储存在-45℃的冷冻酵素水浴解冻后,其培养基在30℃的酸化的监测曲线(8a)和在30℃的酸化速率(8b)的监测曲线,
-图9a和9b代表了对R604培养物在储存在-45℃的冷冻酵素水浴解冻后,其培养基在30℃的酸化的监测曲线(9a)和在30℃的酸化速率(9b)的监测曲线,
-图10a和10b代表了对ssc1培养物在储存在-45℃的冷冻酵素水浴解冻后,其培养基在40℃的酸化的监测曲线(10a)和在40℃的酸化速率(10b)的监测曲线,
-图11a和11b代表了对YF-L703培养物在储存在-45℃的冷冻酵素水浴解冻后,其培养基在44℃的酸化的监测曲线(11a)和在44℃的酸化速率(11b)的监测曲线。
具体实施方式
图1中示意性地呈现了根据本发明的一个实施方案的接种方法的各步骤的流程图。
在接种前,将浓缩的酵素在容器中冷冻。
为此,在第一步骤E01中,用浓缩的酵素无菌填充容器。容器可为具有或多或少大的容量的包装,所述容量在能够维持由细菌构成的浓缩酵素的200g到几千克的范围,所述细菌用于生产奶酪、发酵乳和其它发酵产品。
然后,在步骤E02中,仍在维持无菌性的同时将容器的孔口密封,以获得填充有浓缩酵素的气密封的容器。
在随后的步骤E03中,将酵素冷冻,然后在步骤E04中,将这些冷冻的酵素在-20℃到-70℃的温度储存数天到数月的相对较长时间。
有可能利用不同的容器重复步骤E01到E04以获得多个包含相同冷冻的浓缩酵素的容器。
对于接种来说,在步骤E05中,将冷冻的酵素在先前保持冷冻的容器之一中原位解冻。通过作用于容器且更特别地作用于包含于容器中的冷冻酵素的微波构件或水浴解冻装置实施该解冻步骤。所述微波构件或水浴解冻构件可包含向其中引入容器的解冻室,所述解冻室被维持在约25℃的环境温度下以确保浓缩酵素的快速融化而不产生大的有害热冲击。在所呈现的实施方案中,在解冻期间搅拌冷冻的浓缩酵素,以将热均匀地分布并且避免不完全融化的凝聚物。
在随后的步骤E06中,将已经历解冻的容器连接到一次性注入回路。
在随后的步骤E07中,将连接到注入回路的容器安装在接种室中并且打开所述容器。
然后在步骤E08中排空解冻的容器。在排空期间,用中性无菌气体对接种室加压以尽可能维持其中的恒定压力,且由此促进浓缩酵素的流动精确性。解冻的液体酵素还被维持在2℃到12℃的温度,以尽可能限制细菌代谢的恢复并且保证随时间恒定的接种质量。
在被排空的同时,在步骤E09中定期称量所述容器,以测定残留于容器中的酵素量。
接下来,在步骤E10中,将前一步骤中测量的重量与对应于空的或几乎空的容器的重量的阈值进行比较。另外,取决于容器的重量,并且因此取决于残留于该容器中的酵素的量,通过经由环路BCL1在步骤E08中继续容器排空操作来继续该操作,或将几乎空的容器与解冻的满的容器在步骤E11中交换。满的容器的解冻可能已在先前容器的排空期间起始,或在该先前容器排空开始前起始,例如在开始使用另一解冻室解冻该先前容器之后起始。
通过环路BCL2来实施排空容器、称量和任选地根据剩余酵素的体积更换容器的这些步骤。
数个容器在接种室中的平行布置和交换待排空的容器的步骤E011使得有可能获得连续接种过程,其中将计量量的解冻的浓缩酵素连续地引入待接种的液体流中,其中然后可将所述接种的液体引入直接于欲销售的容器中的发酵器、用于生产发酵产品的槽或用于发酵的装置中。
该连续接种可改进最终产品的质量的规律性。
图2中示意性地呈现了根据本发明的第一实施方案的接种设备1。
设备1包括解冻室2,所述解冻室2包括能够根据图1中所图解说明的方法的步骤E05将冷冻的浓缩酵素Cfc的容器解冻的微波装置或任何其它高频机。解冻室2包含用于在解冻期间搅拌酵素的构件,所述构件未呈现于图中,用于将酵素均质化。
设备1还包括接种室3。该图中所图解说明的接种室包括两个各自能够支撑解冻的浓缩酵素Cfc1和Cfc2的容器的支撑构件4,例如垂直连接装置或用于抓握所述容器的装置,包含一组用于保持所述容器在适当位置的板和/或钩。某些类型的浓缩酵素一旦被解冻即有可能在接种室3中储存几小时且最长达24小时,但优选4小时到8小时,而对细菌代谢的恢复或对构成浓缩酵素的细菌的活性没有特别作用。
此外,设备1的接种室3包括用于对容器称量以推断排空期间剩余酵素的体积的构件5(步骤E08到E10)。接种室3还包括用于将位于容器中的酵素均质化的均质化构件6。作为非限制性示例,可使用多个板,所述板施用每板随通过时间而变化的不同压力。可根据需要连续地或间歇地实施均质化。
另外,接种室3可包括未呈现于图2中的空调构件。因此,接种室3在整个接种持续时间内可在2℃到12℃的温度被冷却。
接种室3可包括多个用于支撑解冻的浓缩酵素Cfc的容器的构件,所述Cfc容器通过注入回路7连接到用于连续供应进给待接种的液体的回路10。在图2中所图解说明的实施方案中,注入回路7包括阀8,所述阀8通过第一回路部分12连接到第一容器Cfc1,通过第二回路部分13连接到第二容器Cfc2并且通过第三回路部分14连接到供应进给回路10。阀8由此使得有可能更换容器Cfc1或Cfc2而不中断注入过程。
注入回路7还包括安装在第三回路部分14上从而在阀8下游的泵9。泵9用于调节在接种室3中适当位置的容器Cfc1或Cfc2的传入液体浓缩酵素的流速。所用的调节泵(例如泵9)可根据被接种的培养基的主回路的流速定比例;通常在奶品工业中,对于2l/小时到10000l/小时的设备来说,泵流速在0.1l/小时到4l/小时的范围,对于15000l/小时到30000l/小时的设备来说,最高达0.75l/小时到12l/小时的范围。
注入回路7还可包括连接构件15,所述连接构件位于接种室3中的容器Cfc1和Cfc2的水平处以及回路部分14与供应回路10之间的接合处的水平处。
这些连接构件15使得有可能更容易地对注入回路7进行灭菌和清洁。在另一实施方案中,这些连接构件使得有可能在例如改变酵素组成期间更换注入回路7的部分12、13和14以用其它无菌部分替换它们,所述酵素用于对用于供应待接种的液体的管10进行接种。
接种室3还可包括未呈现于图中的用于检查接种室3内部的压力的构件。
设备1还包括发酵单元11,所述发酵单元11连接到用于供应待接种的液体的回路10。该液体的接种借助于供应回路10的管上的分接头实施,使得有可能连接注入回路7的第三回路部分14。
在该情况下,发酵单元11以发酵器的形式再现。当然,还有可能设想,发酵单元11是直接于欲销售的容器(例如奶制品锅)中的用于生产发酵产品的槽或用于发酵的装置。
被解冻酵素的定量是发酵单元接种过程的必需部分。
图3示意性地显示了根据本发明的第二实施方案的接种设备1。与图2中相同的部件分配有相同的附图标记。
在图3中所示的第二实施方案中,设备1包含解冻室20,所述解冻室20包含水浴解冻装置而非微波装置。
无论本发明的实施方案怎样,接种设备均使得有可能从用于接种发酵单元的冷冻的浓缩酵素获得连续且精确的少量浓缩酵素的在线流。因此,本发明允许直接在待接种的液体的管线中直接使用来自其容器的冷冻的浓缩酵素,而不涉及有风险的中间阶段。任何中间处置阶段实际上都会不可避免地导致偶然污染的风险,所述风险有害于用于生产发酵产品的全部后续过程。此外,刚好在凝乳前直接接种到液体的管线中使得有可能限制任何可能的噬菌体增殖。
实施例1:监测使用微波装置解冻后培养基的酸化
将酵素YF-L901(由嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌(Lactobacillusbulgaricus)构成)、CHN-19、Flora Tradi 01(由乳酸乳球菌乳酸亚种、乳酸乳球菌乳脂亚种和乳酸乳球菌丁二酮变种以及乳脂明串珠菌构成的多菌株酵素)和SSC-100(嗜热链球菌)包装在5升的无菌小袋中,即储存在-40℃或-20℃的温度的冷冻颗粒形式的2.5kg酵素。
将小袋放置在设定在600W的微波炉(Sairem,法国)中。
使先前储存在-40℃的酵素经受微波30分钟以实现完全融化。先前储存在-20℃的酵素需要25分钟进行完全融化。
在整个解冻过程中将小袋放置在搅拌器上以确保浓缩酵素的均匀融化。
对以9.5%固体含量从脱脂乳粉复原的在99℃加热30min的乳实施针对培养基酸化的测试。接种剂量对于YF-L901是0.02%(成熟温度为43℃)、对于SSC-100是0.01%(成熟温度为40℃)和对于CHN-19和FloraTradi 01为0.01%(成熟温度为30℃)。
每种测试菌株的酸化活性的监测结果在下文以被接种的培养基的pH随时间而变化的变化曲线给出,所述测试菌株先前已在微波装置中解冻(图4到7)。
具体地说,图4代表了对YF-L901培养物的培养基酸化的监测曲线,图5代表了对CHN-19培养物的培养基酸化的监测曲线,图6代表了对Flora Tradi 01培养物的培养基在30℃酸化的监测曲线,并且图7代表了对SCC-100培养物在微波炉中解冻后,其培养基酸化随以冷冻形式储存的温度而变化的监测曲线。
在每个图中,标记为C1的第一曲线对应于针对没有预先解冻的酵素的培养物的对照,曲线C3和C5代表在解冻前分别储存在-40℃和-20℃的容器在解冻后随即获得的曲线。曲线C2和C4代表在解冻前分别储存在-40℃和-20℃的容器在解冻并随后在4℃储存24h后获得的曲线。
对于多种被测试菌株的酸化监测允许推断,酵素在解冻前的储存温度对酸化活性性能水平没有显著影响。
因此,证实有可能将多种类型的浓缩细菌培养物在-20℃到-40℃的温度储存几天,然后将它们在微波炉中解冻,而对细菌代谢的恢复以及对所考虑的酵素的活性、特别是酸化活性没有特别影响。
实施例2:监测使用水浴解冻后培养基的酸化
使用根据每种细菌调节温度的水浴将多种细菌培养物解冻。
这些细菌如下:
-包含乳酸乳球菌乳酸亚种和乳酸乳球菌乳脂亚种的混合物的FMD-0046
-包含乳酸乳球菌乳酸亚种、乳酸乳球菌乳脂亚种和乳酸乳球菌乳酸亚种丁二酮变种的混合物的R604
-包含嗜热链球菌混合物的SSC-1
-包含嗜热链球菌和德氏乳杆菌保加利亚亚种的混合物的YF-L703。
对于例如FMD-0046和R-604的嗜温性酵素来说,对于45分钟的解冻持续时间来说,水浴温度是30℃。对于例如SSC-1和YF-L703的嗜热性酵素来说,对于30分钟的解冻持续时间来说,水浴温度是40℃。
在整个解冻持续时间内搅拌发酵容器以确保均匀融化并且避免不完全融化的团块。
对以9.5%干固体含量从脱脂乳粉复原的在99℃加热30min的乳实施培养基酸化的测试。接种剂量对于FMD-0046是0.01%(成熟温度为30℃)、对于R-604是0.01%(成熟温度为30℃)、对于SSC-1是0.01%(成熟温度为40℃)和对于YF-L703是0.02%(成熟温度为44℃)。
每种测试菌株的酸化活性的监测结果在下文以被接种的培养基的pH随时间而变化的变化曲线给出,所述测试菌株先前已在-45℃储存后在水浴装置中解冻(图8到11)。
具体地说,图8a和8b代表了对FMD-0046培养物的培养基酸化的监测曲线,图9a和9b代表了对R-604培养物的培养基酸化的监测曲线,图10a和10b代表了对SSC-1培养物的培养基酸化的监测曲线,并且图11a和11b代表了对在冷冻的酵素在水浴中解冻后、YF-L703培养物的培养基在44℃酸化的监测曲线。
对于多种被测试菌株的酸化监测允许推断,在所用的操作条件下,解冻后的酵素的低储存温度的持续时间对酸化活性性能水平没有显著影响。

Claims (18)

1.一种用于用酵素对食品、特别是奶制品进行连续接种的方法,其特征在于以下步骤:
-借助于作用于含有冷冻的浓缩酵素的容器的微波装置或水浴解冻装置将冷冻的浓缩酵素解冻(E05),
-将所述解冻的浓缩酵素从所述容器连续地注入到待接种的液体流中(E07、E08)。
2.根据权利要求1所述的用于用酵素对食品进行连续接种的方法,其中所述含有所述冷冻的浓缩酵素的容器在其解冻前被储存在-20℃到-70℃的温度(E03)。
3.根据权利要求1和2中任一项所述的用于接种的方法,其中连续地称量所述容器以测定在排空期间所称量的容器中的剩余体积(E09、E10)。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的用于接种的方法,其中所述注入经由根据所用的酵素而更换的连接构件实施。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的用于接种的方法,其中将所述容器放置在高于大气压力的压力下的接种室中。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的用于接种的方法,其中将数个容器呈平行布置放置,它们中的一个被排空,同时至少另一个容器处于备用状态。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的用于接种的方法,其中调节以液体形式注入的所述酵素的流速。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的用于接种的方法,其中所述冷冻的浓缩酵素使用所述水浴解冻装置的解冻时间是15分钟到300分钟。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的用于接种的方法,其中所述水浴解冻装置中的水浴温度是15℃到45℃。
10.根据权利要求1-7中任一项所述的用于接种的方法,其中所述冷冻的浓缩酵素使用所述微波装置的解冻时间是10分钟到60分钟。
11.根据权利要求1-10中任一项所述的用于接种的方法,其中在所述解冻期间搅拌所述冷冻的浓缩酵素。
12.根据权利要求1-11中任一项所述的用于接种的方法,其中所述解冻的液体酵素被维持在2℃到12℃的范围的温度。
13.根据权利要求1-12中任一项所述的用于接种的方法,其中所述解冻的液体酵素在排空期间被均质化。
14.根据权利要求1-13中任一项所述的用于接种的方法,其中所述均质化包括混合。
15.一种用于将酵素连续接种到待接种的液体中的设备(1),所述酵素来源于冷冻的浓缩酵素,所述设备包括用于将包含冷冻的浓缩酵素的容器(Cfc)解冻的室(2、20),该室包括微波装置或水浴解冻装置;接种室(3),该接种室(3)提供有用于安装至少两个被解冻酵素的容器(Cfc1和Cfc2)的支撑构件(4)以及至少一个能够连续地测定被排空的容器中的剩余体积的称量装置(5),所述设备(1)还包括将所述容器(Cfc1和Cfc2)连接到用于连续供应所述待接种的液体的回路(10)的注入回路(7),所述注入回路(7)包括使得能够从一个容器(Cfc1)转换到另一容器(Cfc2)的阀(8)和用于调节呈液体形式的酵素的流速的构件(9)。
16.根据权利要求15所述的设备,其中该解冻室(2)包含用于搅拌所述容器(Cfc)的构件,所述构件能够在所述解冻期间使热均匀地分布。
17.根据权利要求15和16中任一项所述的设备,其中该接种室(3)包括制冷构件和用于维持高于大气压力的压力的构件。
18.根据权利要求15-17中任一项所述的设备,其中该接种室(3)包括用于至少一个容器的均质化的构件(6)。
CN201380063154.9A 2012-12-04 2013-11-29 用于从冷冻的浓缩酵素直接接种的方法和相关装置 Active CN104837352B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR1261614 2012-12-04
FR1261614 2012-12-04
PCT/EP2013/075057 WO2014086671A1 (en) 2012-12-04 2013-11-29 Process for direct inoculation from frozen concentrated ferments and associated device

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104837352A true CN104837352A (zh) 2015-08-12
CN104837352B CN104837352B (zh) 2018-05-25

Family

ID=47902128

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201380063154.9A Active CN104837352B (zh) 2012-12-04 2013-11-29 用于从冷冻的浓缩酵素直接接种的方法和相关装置

Country Status (13)

Country Link
US (1) US20150366231A1 (zh)
EP (1) EP2928311B1 (zh)
JP (1) JP6352938B2 (zh)
CN (1) CN104837352B (zh)
AU (1) AU2013354333B2 (zh)
BR (1) BR112015012533B1 (zh)
CA (1) CA2893309C (zh)
DK (1) DK2928311T3 (zh)
EA (1) EA027714B1 (zh)
ES (1) ES2602041T3 (zh)
HK (1) HK1209285A1 (zh)
PL (1) PL2928311T3 (zh)
WO (1) WO2014086671A1 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106455602A (zh) * 2014-06-03 2017-02-22 科.汉森有限公司 用于从浓缩酵素直接接种的方法和相关装置

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017029188A1 (en) * 2015-08-17 2017-02-23 Chr. Hansen A/S Dosage system, coupling device for a small size dosage system and related method
BR112018006390A2 (pt) * 2015-10-21 2018-10-09 Novozymes As método para fermentar um micro-organismo que produz um produto de proteína

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20020054936A1 (en) * 1997-08-25 2002-05-09 Chr. Hansen A/S Dairy starter culture delivery system and use hereof
US20030031755A1 (en) * 2001-08-03 2003-02-13 Erik Hoier Method and apparatus for preparing a dairy product
WO2005104861A1 (en) * 2004-04-28 2005-11-10 Danisco A/S Process for seeding a media with microorganism in form of a tablet
US20080145481A1 (en) * 2004-07-21 2008-06-19 Chr. Hansen A/S Direct Inoculation Method Using Frozen Concentrated Cultures and Associated Device
WO2011134952A1 (en) * 2010-04-27 2011-11-03 Chr. Hansen A/S Method for inoculating yeast into fruit juice

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0688864A1 (fr) 1994-06-21 1995-12-27 Societe Des Produits Nestle S.A. Starter congelé de yogourt
NZ521814A (en) * 2000-03-21 2004-04-30 Chr Method for supply of starter cultures having a consistent quality
US20010049132A1 (en) * 2000-03-21 2001-12-06 Borge Kringelum Method for supply of starter cultures having a consistent quality
BR0315690A (pt) * 2002-11-22 2005-09-20 Lesaffre & Cie Dispositivo e método de dosagem para o creme de fermento
EP1493806A1 (en) * 2003-07-02 2005-01-05 Chr. Hansen A/S Use of compounds involved in biosynthesis of nucleic acids as cryoprotective agents

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20020054936A1 (en) * 1997-08-25 2002-05-09 Chr. Hansen A/S Dairy starter culture delivery system and use hereof
US20030031755A1 (en) * 2001-08-03 2003-02-13 Erik Hoier Method and apparatus for preparing a dairy product
WO2005104861A1 (en) * 2004-04-28 2005-11-10 Danisco A/S Process for seeding a media with microorganism in form of a tablet
US20080145481A1 (en) * 2004-07-21 2008-06-19 Chr. Hansen A/S Direct Inoculation Method Using Frozen Concentrated Cultures and Associated Device
WO2011134952A1 (en) * 2010-04-27 2011-11-03 Chr. Hansen A/S Method for inoculating yeast into fruit juice

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106455602A (zh) * 2014-06-03 2017-02-22 科.汉森有限公司 用于从浓缩酵素直接接种的方法和相关装置
US10893682B2 (en) 2014-06-03 2021-01-19 Chr. Hansen A/S Process for direct inoculation from concentrated ferments and associated device

Also Published As

Publication number Publication date
CA2893309A1 (en) 2014-06-12
US20150366231A1 (en) 2015-12-24
HK1209285A1 (zh) 2016-04-01
ES2602041T3 (es) 2017-02-17
BR112015012533A2 (pt) 2017-07-11
BR112015012533B1 (pt) 2020-12-29
WO2014086671A1 (en) 2014-06-12
JP2016500252A (ja) 2016-01-12
AU2013354333A1 (en) 2015-06-04
JP6352938B2 (ja) 2018-07-04
DK2928311T3 (en) 2016-10-24
EA027714B1 (ru) 2017-08-31
EA201591070A1 (ru) 2015-09-30
EP2928311B1 (en) 2016-08-17
CA2893309C (en) 2020-09-22
AU2013354333B2 (en) 2017-06-15
CN104837352B (zh) 2018-05-25
PL2928311T3 (pl) 2017-02-28
EP2928311A1 (en) 2015-10-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP4880601B2 (ja) 凍結濃縮培養液及び関連装置を用いた直接的植菌方法
EP2082028B1 (en) Microbial liquid cultures having high stability and fermentative activity
CN105377044A (zh) 嗜热链球菌菌株
NZ586023A (en) Method for manufacturing fermented milk
CN104837352A (zh) 用于从冷冻的浓缩酵素直接接种的方法和相关装置
EP3151675B1 (en) Process for direct inoculation from concentrated ferments and associated device
AU2001293916B2 (en) Ferment activator based of lactic acid bacteria and method for preparing a dairy product using same
EP1416804B1 (en) Method and apparatus for preparing a dairy product
CN104814123A (zh) 一种可加热酸奶及其制作方法
AU2004270911B2 (en) Ferment activator based on lactic acid bacteria, and method of preparing a product using said activator
Champagne et al. Fresh-cheesemilk formulation fermented by a combination of freeze-dried citrate-positive cultures and exopolysaccharide-producing lactobacilli with liquid lactococcal starters
Macedo et al. Establishment of bacteriophages in an immobilized cells system used for continuous inoculation of lactococci
OR ARTISAn STRAWBERRy ICE CREAM MADE

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant