CN104813164B - 用于液相色谱的混合器旁路样品注射 - Google Patents

用于液相色谱的混合器旁路样品注射 Download PDF

Info

Publication number
CN104813164B
CN104813164B CN201380062261.XA CN201380062261A CN104813164B CN 104813164 B CN104813164 B CN 104813164B CN 201380062261 A CN201380062261 A CN 201380062261A CN 104813164 B CN104813164 B CN 104813164B
Authority
CN
China
Prior art keywords
sample
solvent
fluid
injection
source
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201380062261.XA
Other languages
English (en)
Other versions
CN104813164A (zh
Inventor
小罗伯特·W·阿尔布雷克特
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Agilent Technologies Inc
Original Assignee
Agilent Technologies Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Agilent Technologies Inc filed Critical Agilent Technologies Inc
Publication of CN104813164A publication Critical patent/CN104813164A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104813164B publication Critical patent/CN104813164B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/16—Injection
    • G01N30/20—Injection using a sampling valve
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/38—Flow patterns
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
    • B01L3/502—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures
    • B01L3/5027—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip
    • B01L3/502769—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip characterised by multiphase flow arrangements
    • B01L3/502784—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip characterised by multiphase flow arrangements specially adapted for droplet or plug flow, e.g. digital microfluidics
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N2030/022—Column chromatography characterised by the kind of separation mechanism
    • G01N2030/027—Liquid chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/16—Injection
    • G01N30/20—Injection using a sampling valve
    • G01N2030/207—Injection using a sampling valve with metering cavity, e.g. sample loop
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
    • G01N2030/347—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient mixers

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Sampling And Sample Adjustment (AREA)
  • Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)

Abstract

在液相色谱系统中，通过使得溶剂混合物沿着溶剂混合物流体路径从混合器流动到柱体，并将样品注射到混合器下游的溶剂混合物流体路径，从而将样品注射到柱体。在另一液相色谱系统中，通过将隔离流体加载到样品回路，将样品加载到样品回路，并且使得所述样品作为塞体在所述隔离流体前面流动到所述柱体中，从而将样品注射到柱体中。

Description

用于液相色谱的混合器旁路样品注射
相关申请的交叉引用
本申请要求2012年11月30日提交的题为MIXER BYPASS SAMPLE INJECTION FORLIQUID CHROMATOGRAPHY的美国专利申请序列号61/731,611的优先权，该申请就其全部通过引用的方式合并于本申请中。
技术领域
本发明总体上涉及包括高性能液相色谱(HPLC)和超临界流体色谱(SFC)的液相色谱，尤其是涉及实现液相色谱的系统中的样品注射。
背景技术
液相色谱(LC)是一种用于将感兴趣的液相样品材料(例如，不同化学化合物的混合物)分析性或制备性地分离到各组成成分的技术。在色谱分离过程期间，样品材料在移动相(典型地，一个或多个溶剂)中传送。样品(样品材料和将其溶解的移动相)受迫经过不与移动相互溶的固定相。典型地，以样品所流动通过的柱体或筒中所支撑的大量颗粒(填料或床层) 的形式提供固定相。通过在防止填料材料脱离柱体的同时允许样品流动通过的熔块或滤器，柱体床层典型地保留在柱体的每一端。选择移动相和固定相的相应组分，使得柱体中的样品材料的不同成分变得分布在移动相与固定相之间，以便改变取决于样品材料的成分的相应化学的程度。固定相强烈保留的成分与移动相一起缓慢行进，而固定相微弱保留的成分更快速地行进。结果，随着移动相流动通过柱体，不同组分的成分变为彼此分离。
在分析性分离中，这些组分经检测和数据获取技术加以分离以方便其分析。分析性分离典型地要求使用少量材料和小内径柱体(例如，小于 1英寸)。在制备性分离中，各成分分离，以从原始材料提纯或隔离一个或多个化学成分，其可以完成供进一步使用(例如反应、合成等)。制备性分离可以是与分析性分离相比小规模地执行的，或可以是远远更大规模地执行的，以提纯大量样品材料，由此可以利用更大内径的柱体(例如1-24英寸)。
典型地，通过首先在柱体上游的点将待分离的样品注射到溶剂流体流中，将所述样品引入到柱体中。溶剂流体流可以是在柱体上游的溶剂混合器中混合弱溶剂与强溶剂(或“改性剂”溶剂)的流体所形成的混合流体流。在此情况下，样品可以注射到混合流体流，即，混合器的下游。典型地，样品在强溶剂仍处于高浓度的情况下注射到柱体中，这可能产生相对于注射有样品的溶剂的量的色谱带加宽，由此产生糟糕的分辨率，尤其是在采用更大量样品的制备性色谱中。相对弱溶剂的添加可以加以进行以减缓强溶剂的效应，但可能使得样品在样品回路或其它管材中结晶并且堵塞系统。
可替代地，在混合器中强溶剂与弱溶剂融合之前，样品可以注射到强溶剂的流体路径中。在此情况下，样品在流入柱体之前流动通过混合器。这是不利的，这是因为样品可能由混合器保留，由此污染混合器并且在柱体上游产生不想要的样品分散。此外，避免混合器的样品保留意味着限制用于构建混合器的材料的选取。另外，在此情况下，强溶剂(通常甲醇或乙腈) 充当用于样品的注射溶剂。然而，很多样品溶解于其它溶剂(例如二甲亚砜(DMSO))，其在特定应用中可制成更好的注射溶剂。此外，DMSO和其它样品溶剂一般与构成混合器的结构的材料不兼容。此外，通过利用强溶剂作为注射溶剂，样品注射到柱体中的速率受到使强溶剂流动所采用的泵浦的实际流率的限制。
高压下样品注射的已知技术的另一问题在于，样品由于泵浦的操作而在样品回路或管材中受到压缩。这种压缩可能产生干扰柱体床层的压力冲击，这可能在床层中产生不期望的空白并且使得固定相材料松弛。
此外，分离样品注射泵浦的使用在没有很多清洗的情况下可能产生移位，这是因为样品将会扩散到样品推送溶剂，并且注射器的壁未充分地由注射溶剂单独清洁。样品注射泵浦的容量将顺应性加入系统中，并且增加当根据高压流体流转换样品注射泵浦时所产生的压力冲击。
因此，需要在使得LC柱体上游的样品分散最小化的同时将样品注射到LC柱体中。还需要旁通溶剂混合器，以防止相对于样品或溶解样品的溶剂的混合器污染。
发明内容
为了全部或部分地解决前述问题和/或本领域技术人员已经观察到的其它问题，本公开提供通过示例方式在以下阐述的实施方案中所描述的方法、处理、系统、装置、仪器和/或设备。
根据一个实施例，一种液相色谱(LC)系统，包括：柱体；第一溶剂源；第二溶剂源；混合器，其经由第一溶剂线路与所述第一溶剂源连通，经由第二溶剂线路与所述第二溶剂源连通，并且经由溶剂混合物线路与所述柱体连通；流控接合点，其在所述溶剂混合物线路中；注射阀，其包括样品回路，并且与所述流控接合点和所述注射溶剂源连通，其中，所述注射阀可调整到样品注射位置，其限定用于注射溶剂通过所述样品回路并进入所述流控接合点的流体路径，使得所述注射溶剂将所述样品回路中的样品携带到所述混合器下游的所述溶剂混合物线路中。
根据另一实施例，一种液相色谱(LC)系统，包括：柱体；样品源；隔离流体源；注射阀，其包括样品回路，并且与所述样品源、所述隔离流体源以及引导到所述柱体的样品注射线路连通，其中，所述注射阀可调整到限定用于隔离流体从所述隔离流体源流动到所述样品回路的流体路径的隔离流体加载位置；流体移动设备，其与所述样品回路连通，并且配置为用于有选择地将流体拉动到所述样品回路中并且将流体从所述样品回路推出。
根据另一实施例，一种用于将样品注射到液相色谱柱体中的方法包括：使得第一溶剂和第二溶剂流动到混合器中，以形成溶剂混合物；使得所述溶剂混合物沿着溶剂混合物流体路径流动到所述柱体中；在使得所述溶剂混合物流动的同时，在所述混合器与所述柱体之间的点将包括注射溶剂中所携带的样品材料的样品注射到所述溶剂混合物流体路径中。
根据另一实施例，一种用于将样品注射到液相色谱柱体中的方法包括：将隔离流体加载到样品回路中；将样品加载到所述样品回路中，所述样品包括注射溶剂中所携带的样品材料；通过使得所述样品作为塞体在所述隔离流体前面流动，将所述样品注射到所述柱体中。
根据另一实施例，一种液相色谱系统配置为用于执行在此公开的任何方法。
一旦研究以下附图和具体实施方式时，本发明的其它设备、装置、系统、方法、特征和优点对于本领域技术人员将会或将变得明显。旨在所有这些另外的系统、方法、特征和优点都包括在此描述内、本发明的范围内并且受所附权利要求保护。
附图说明
通过参照以下附图，可以更好地理解本发明。附图中的组件并不一定成比例，而是重点置于说明本发明的原理。在附图中，相同的附图标记在不同附图中指定对应的部分。
图1是根据一个实施例的液相色谱系统的示例的示意图。
图2是根据另一实施例的液相色谱系统的示例的示意图。
图3是根据另一实施例的液相色谱系统的示例的示意图。
具体实施方式
本公开针对于液相色谱(LC)系统,包括低压和高压LC系统。为了便利，在本公开中，术语“液相”不仅涵盖传统上定义的液体(例如，压力-温度空间的液相区域中)，而且还涵盖超临界和接近超临界流体。如在此所使用的那样，“接近超临界”流体是将流体置于针对该流体的压力-温度相图的超临界区域外但与之接近的压力和/或温度状态下的流体。接近超临界流体例如可以是处于比界定超临界相的临界温度更小的温度的高度压缩液体。术语“低压”和“高压”在此用在相对意义上，以描述液体在LC系统中流动(包括流动通过系统的色谱柱体)的压力。作为非限制性示例，低压流体可以范围介于0bar至20bar，高压流体可以范围始于20bar或更大。在超临界流体色谱(SFC)的情况下，高压流体可以范围始于50bar或更大。
LC系统的非限制性示例描述于以下并且示出在图1至图3中。这些系统在配置为用于高压LC时可以配置为用于高性能液相色谱(HPLC)、超高性能液相色谱(UHPLC)或SFC。在各个实施例中，在此描述的系统可以配置为用于分析性色谱或制备性色谱。在各个实施例中，在此所描述的系统可以配置为用于正相色谱、反相色谱，或包括使得承载样品的流动相流动通过包含支持固定相的填料或床层的柱体的其它类型色谱。在此描述的系统可以进一步配置为用于等度洗脱或梯度洗脱，并且在这两种操作模式之间可以是可切换的。要求液体和超临界流体的低压或高压流体的各种类型的 LC系统以及这些系统中通常使用的单独组件的结构和操作总体上是本领域技术人员理解的，因此将仅按照需要加以简要描述，以理解当前公开的主题。本领域技术人员还理解的是，特定组件的选取可以取决于系统是工作在低压还是高压流体形态下，或取决于所执行的LC的类型。
图1是根据一个实施例的LC系统100的示例的示意图。系统100 可以总体上包括：色谱柱体104；一个或多个溶剂源，其处于柱体104的上游，用作移动相；样品注射系统，用于将样品(样品溶剂中所溶解的样品材料)引入到溶剂流体流(处于柱体104的上游或柱体头处)；收集地点108，其处于柱体104的下游，用于收集柱体104所分离的化合物；系统控制器112。收集地点108可以包括检测器，用于随着化合物从柱体104洗脱时检测这些化合物。检测器可以是对于使得系统控制器112能够获取并且处理色谱峰值数据合适的任何类型。
在本实施例中，溶剂源包括第一溶剂源116和第二溶剂源118。溶剂源116和118可以示意性地分别表示用于提供第一溶剂(或“A”溶剂) 和第二溶剂(或“B”溶剂)的溶剂储存器、溶剂泵浦和相关联的硬件。溶剂泵浦的示例包括但不限于计量、单个或多个活塞、齿轮、蠕动和风箱泵浦。对于SFC，第一溶剂源116适配为用于根据需要控制温度和压力，以将第一溶剂保持在超临界状态或其附近。第一溶剂可以是相对弱的溶剂，第二溶剂可以是相对强的溶剂。在本公开的上下文中，“弱”溶剂是样品成分相比于柱体104中的固定相具有相对更小的亲和性的溶剂，“强”溶剂是样品成分相比于固定相具有相对更大的亲和性的溶剂。因此，弱溶剂中所载的样品成分将强烈地保留在固定相上，使得产生从柱体104洗脱的更长时间。相比之下，强溶剂中所载的样品成分将会微弱地保留(或一点儿也不保留)在固定相上，使得产生从柱体104洗脱的更短时间。第一溶剂和第二溶剂的相应组分总体上取决于处理的样品材料以及实施的色谱的类型。弱溶剂的示例包括但不限于用于反相LC的水和水性缓冲流体、用于正相LC的己烷和庚烷之类的非极性溶剂、超临界或接近超临界流体(典型地，二氧化碳)。强溶剂 (或“改性剂”溶剂)典型地是有机溶剂。强溶剂的示例包括但不限于醇(例如甲醇、乙醇和异丙醇)；或任何极性溶剂，如乙腈；三氯甲烷；四氢呋喃 (THF)；二甲基亚砜(DMSO)和二甲基甲酰胺(DMF)。在SFC的普通(但非限制性)示例中，第一溶剂是超临界或接近超临界二氧化碳，第二溶剂是甲醇或另一极性溶剂。可以在超临界或接近超临界状态下使用的二氧化碳以外的溶剂可能是合适的，一个非限制性示例是丙烷。在其它实施例中，可以提供多于两个的溶剂源。
第一溶剂从第一溶剂源116流动、通过第一溶剂线路120并且进入溶剂混合器122。第二溶剂从第二溶剂源118流动、通过第二溶剂线路124 并且进入混合器122。如贯穿本公开所使用的那样，术语“线路”涵盖任何具有对于LC合适的化学惰性和压力等级的流体导管(或管材)。混合器122 可以是如下这样的任何腔室或柱体：其具有足够长度和容量，以实现将第一溶剂和第二溶剂混合到适合于应用的同质性的级别。混合器122包括至少一个混合器入口和至少一个混合器出口。通过示例，图1示意性描述在混合器 122上游的点合并的第一溶剂线路120和第二溶剂线路124，其中公共线路与单个混合器入口连通。可替代地，第一溶剂线路120和第二溶剂线路124 可以在单独混合器入口与混合器122直接连通。混合器122确立溶剂混合物流体流(或流体路径)，其从混合器出口流动并通过与柱体104的柱体入口连通的溶剂混合物线路130。
样品注射系统可以包括样品注射设备和样品源134。在一些实施例中，样品注射设备是或包括多端口注射阀138。本领域技术人员应理解，注射阀138可以包括具有内部通道的固定部分和具有外部端口的可移动(旋转或线性)部分。可移动部分可以按分度(indexed)方式移动到多个阀位置，并且可以由步进电机供电。典型地，在每个阀位置，各外部端口中的两个置于与各内部通道之一流体连通。因此，选择不同的阀位置使得能够选择不同成对端口用作流体入口和出口，由此选择与各端口流体连通的注射阀138外部的各组件之间的不同流体路径。各端口中的两个与样品回路140连通。取决于设计，样品回路140可以处于阀结构的外部或内部，在任一情况下其均具有足以保持期望容量流体的长度。作为示例，外部回路可以是管材的任何卷曲或非卷曲的部分，内部回路可以是阀结构中形成的内部管子或通道。样品回路140(以及系统100的其它线路或管材)可以衬有硅烷玻璃或氟聚合物(例如PTFE(聚四氟乙烯))。
各端口之一经由样品注射线路146与第一流控接合点144连通(例如T型连接方式)。第一流控接合点144位于混合器122与柱体104之间的溶剂混合物线路130，并且可以位于正好在柱体104的上游。样品注射线路 146可以具有相对于系统100中使用的其他管材更小的内径，以使得样品注射线路146的清扫容量最小化并使得清洁它更容易。注射阀138的另一端口经由注射溶剂线路152与第二流控接合点150连通。第二流控接合点150位于第二溶剂源118与流体限制器154之间的第二溶剂线路124。同样位于第二溶剂线路124中的流体限制器154可以是适合于限制第二溶剂在混合器 122的方向上的流动的任何设备。作为示例，流体限制器154可以包括第二溶剂线路124中的一个或多个小孔板，或可以包括ON与OFF位置之间可切换并且在一些实施例中可切换到ON与OFF位置之间的中间位置的阀。
注射阀138的另一端口与样品源134连通。样品源134可以是包含溶解在适当溶剂(或“样品溶剂”)中的样品材料的注射针体、套管或储存器。在一些实施例中，注射针体、套管或储存器是泵浦(例如图1所示的注射泵)的一部分，或与之连通。注射泵可以包括可手动地启动或用步进电机供电的活塞。注射阀138的另一端口可以与废物容器160连通。
注射阀138可调整(可移动，例如可旋转或可滑动)到多个不同的阀位置，包括样品加载位置、样品注射位置和清洗位置。作为样品加载位置的一个示例，调整注射阀138以建立从样品源134通过样品回路140并且进入废物容器160中的流体路径。然后可以操作注射泵(或其它流体移动设备)以将期望的量的样品推送到样品回路140中，其中在废物容器160收集任何多余样品。在样品注射位置，注射阀138建立经由第二流控接合点150 从第二溶剂源118进入注射溶剂线路152、通过样品回路140和样品注射线路146并且经由第一流控接合点144进入溶剂混合物线路130的流体路径。清洗位置可以对应于所选端口所置于得与导向废物容器160的端口连通的一个或多个位置，目的在于使得清洗溶剂运行通过样品回路140和注射阀138 的一个或多个内部通道。
现在描述用于将样品注射到柱体104中的方法的示例。在此示例中，如以上描述的和图1所示的那样配置系统。例如通过将注射阀138设置到样品注射位置并且操作第二溶剂源118以便用第二溶剂填充或部分地填充注射阀138、样品回路140和样品注射线路146的内部容量，注射阀138和相关联的管道可以首先装填有注射溶剂。注射阀138可以然后切换到样品加载位置，以使得样品(即，样品材料和样品溶剂的基质)如上所述那样流动到样品回路140。初始地提供样品材料的样品溶剂可以与第二溶剂相同或不同。在装填之前、期间或之后，或在样品加载之前、期间或之后，通过如上所述那样操作溶剂源116和118以将第一溶剂和第二溶剂泵激到混合器122，建立溶剂混合物进入柱体104的流动。与第一溶剂源116和第二溶剂源118 关联的泵浦根据需要加以控制，以保持溶剂混合物的期望(即，预定)流率以及溶剂混合物中第一溶剂和第二溶剂的相应浓度。第二溶剂源118的泵浦的操作可以经由第二流控接合点150填充或部分地填充注射溶剂线路152。
在确立溶剂混合物流体后并在样品已经加载在样品回路140中的情况下，注射阀138可以切换到样品注射位置。在该位置，一部分第二溶剂容易地流动通过注射溶剂线路152并且进入样品回路140中。第二流控接合点150的上游的第二溶剂线路124中的流体限制器154确保一部分第二溶剂流体以此方式转向到注射阀138。如上所述，流体限制器154可以或不可以调整。流动的第二溶剂将样品从样品回路140推送通过样品注射线路146，并且经由第一流控接合点144进入溶剂混合物线路130。因此，样品与溶剂混合物一起注射到柱体104中。然后，色谱分离、检测和数据获取(或制备性色谱情况下提纯目标化合物的收集)可以以本领域技术人员理解的方式而发生。
根据以上可以看见，样品注射流体路径旁通溶剂混合器122。以此方式，样品不污染混合器122，并且也不被混合器122分散。旁通混合器 122由此避免由于运行样品通过混合器122而引起的带加宽效应，并且改善了峰值分辨率。此外，旁通混合器122使得可以针对混合器122选择出更宽泛种类的材料，这是因为样品材料和初始地溶解样品材料的样品溶剂都不接触混合器122。例如，包括活性成分或密封物或其它聚合物的混合器材料可以用在上述实施例中。这在经常包括与很多材料不兼容的溶剂(例如DMSO) 中所溶解的样品的制备性色谱的情况下可能是尤其有用的。此外，混合器122 无需完全由溶剂清扫，以避免不同样品的痕量之间的交叉污染。此外，可以与100％改性剂溶剂一起从样品回路140推送样品，以防止注射阀138内部的结晶。改性剂溶剂比与样品经常一起采用的较弱溶剂更好地溶解样品。
继续图1，系统控制器112示意性地描绘为表示一个或多个模块，所述一个或多个模块配置为用于控制、监控和/或计时所述系统100的各个功能方面和组件，例如，诸如溶剂源116和118的操作(包括流速和/或压力的调整、溶剂梯度编程(如果适用))、流体限制器154的调整(如果可调整)、将注射阀138调整到各个位置、注射泵或其它流体移动设备的操作、检测器的操作(如果包括)。系统控制器122也可以配置为用于从检测器接收检测信号并且根据需要而执行与数据获取和信号分析有关的其它任务，以生成表征受分析样品的色谱或其它输出。系统控制器122可以包括计算机可读介质，其包括用于执行所有或部分在此公开的任何方法的指令。为了方便起见，系统控制器112示意性地示出为(在收集地点108)与检测器进行信号通信，但应理解，为了诸如刚提出的之类的目的，系统控制器112可以与系统100 的各个组件进行信号通信。信号通信可以经由有线或无线通信链路而产生。也是出于这些目的，系统控制器112可以包括一种或多种类型的硬件、固件和/或软件以及一个或多个存储器和数据库。系统控制器122典型地包括提供总体控制的主要电子处理器，并且可以包括配置为用于专用控制操作或特定信号处理任务的一个或多个电子处理器。系统控制器122也可以表示一种或多种类型的用户接口设备，例如用户输入设备(例如键区、触摸屏、鼠标等)、用户输出设备(例如显示屏、打印机、视觉指示器或提示器、听觉指示器或提示器等)、受控于软件的图形用户接口(GUI)、用于加载可由电子处理器读取的介质(例如软件中实施的逻辑指令、数据等)的设备。系统控制器122 可以包括用于控制并且管理系统控制器122的各种功能的操作系统(例如 Microsoft软件)。
图2是根据另一实施例的LC系统200的示例的示意图。系统200 的各个组件可以与系统100的组件相同或相似，并且在图2中用相同或相似的附图标记加以指定。于是，系统200可以总体上包括：色谱柱体104；一个或多个溶剂源，其处于柱体104的上游，用作移动相；样品注射系统，其用于将样品引入溶剂流体流中；收集地点108，其处于柱体104的下游，用于收集化合物；系统控制器112。收集地点108可以如上述那样包括检测器。系统控制器112可以配置为用于对系统200的各个功能方面和组件进行控制、监控和/或计时，如上面总体上描述的那样。
在本实施例中，系统200包括第一溶剂源116和第二溶剂源118。第一溶剂可以是相对弱的溶剂，第二溶剂可以是相对强的溶剂。第一和第二溶剂可以是诸如通过示例的方式先前在此公开中给出的溶剂。第一溶剂从第一溶剂源116流动通过第一溶剂线路120并且进入混合器122中。第二溶剂从第二溶剂源118流动通过第二溶剂线路124并且进入混合器122中。混合器122包括至少一个混合器入口和至少一个混合器出口。混合器122建立溶剂混合物流体流(或流体路径)，其从混合器出口流动并且通过与柱体104 的柱体入口连通的溶剂混合物线路130。可以如上所述那样提供多于两个的溶剂源。
样品注射系统可以包括样品注射设备、样品源234和流体移动设备(例如泵浦264)。在一些实施例中，样品注射设备是或包括多端口注射阀 238，其结构和操作总体上如上所述。各端口中的两个可以与外部或内部样品回路240连通。各端口之一经由样品注射线路146与流控接合点144连通。流控接合点144位于混合器122与柱体104之间的溶剂混合物线路130，并且可以位于正好在柱体104的上游。注射阀238的另一端口可以经由注射溶剂线路270与注射溶剂源268连通。在一些实施例中，注射溶剂可以与第二溶剂源118提供的第二溶剂相同，或可以与初始地从样品源234提供样品材料的样品溶剂相同。在注射溶剂与第二溶剂相同的一些实施例中，以与上面结合图1描述的相同或相似的方式，即通过使得来自第二溶剂源118的一部分溶剂流体转向，第二溶剂源118可以将溶剂提供给注射阀238。
注射阀238的另一端口可以经由泵浦线路272与泵浦264连通。泵浦264可以例如是包括手动地启动或用步进电机供电的活塞的注射泵。在一些实施例中，泵浦线路272可以用作样品回路240，在此情况下，样品回路240可以互连在泵浦264与注射阀238的一个端口之间。注射阀238的另一端口可以与样品源234连通。样品源234可以是包含溶解在适当样品溶剂中的样品材料的注射针体、套管或储存器。在一些实施例中，注射针体、套管或储存器是泵浦(例如注射泵)的一部分，或与之连通。注射阀238的另一端口可以与废物容器160连通。
注射阀238可调整到多个不同的位置，包括注射溶剂加载位置、样品加载位置、样品注射位置和清洗位置。注射溶剂加载位置可以按照期望包括一个或多个阀位置，用于填充或部分地填充内部容量、样品注射线路 146、样品回路240、泵浦线路272(在与样品回路240分离的情况下，如所示)和样品源234的针体。作为示例，一个注射溶剂加载位置可以限定使得注射溶剂能够由泵浦264从注射溶剂源268抽吸通过样品回路240并且进入泵浦264的流体路径。另一注射溶剂加载位置(其可以是作为样品注射位置的样品)可以限定使得注射溶剂能够由泵浦264推送通过样品回路240并且进入样品注射线路146中的流体路径。作为样品加载位置的一个示例，调整注射阀238以建立从样品源234进入样品回路240中的流体路径。然后可以操作泵浦264以将期望量的样品抽吸到样品回路240中。在样品注射位置，注射阀238建立从泵浦264通过样品回路240和样品注射线路146并且经由流控接合点144进入溶剂混合物线路130的流体路径。清洗位置可以对应于所选端口所置于的与导向废物容器160的端口连通的一个或多个位置，目的是使得清洗溶剂运行通过样品回路240和注射阀238的一个或多个内部通道。
现在描述用于将样品注射到柱体104中的方法的示例。在此示例中，如以上描述的和图2所示的那样配置系统。例如通过如上所述那样将注射阀238设置到一个或多个注射溶剂加载位置并且操作泵浦264，注射阀238 和关联的管道可以首先装填有注射溶剂。注射阀238可以然后切换到样品加载位置，以使样品流动到样品回路240，如上所述。在装填之前、期间或之后，或在样品加载之前、期间或之后，通过操作溶剂源116和118建立溶剂混合物到柱体104中的流动，由此第一溶剂和第二溶剂泵激到混合器122中并且如上所述那样混合。
在建立溶剂混合物流体之后并且在样品已经加载在样品回路240 中的情况下，注射阀238可以切换到样品注射位置。在该位置，操作泵浦264 以将样品从样品回路240推送通过样品注射线路146并且经由流控接合点 144进入溶剂混合物流体路径中。从而，样品与溶剂混合物一起注射到柱体 104中。然后色谱分离、检测和数据获取(或收集)可以按本领域技术人员理解的方式而发生。
继续图2，在一些实施例中，系统200可以包括用于对样品注射流体流预加压以匹配溶剂混合物流体流中的压力的设备或装置。可以实施这种预加压(即，在样品注射到溶剂混合物流体流中之前加压)以消除由于将低压流体流切换到高压流体流所产生的压力冲击。所述设备或装置可以包括：第一压力传感器276，其适当地定位以用于感测溶剂混合物流体路径中的压力(例如正好在柱体104的上游,如图2所示)；以及第二压力传感器 278，其适当定位以用于感测样品注射流体路径中的压力。图2示出第二压力传感器278的位置的几个非限制性的可替选示例。在一个示例中，第二压力传感器278与泵浦线路272连通，泵浦线路272在一些实施例中可以如上述那样对应于样品回路240。在此情况下，注射阀238可以调整到与泵浦264 连通的端口连通所插入的另一端口的加压(或预加压)位置。在另一示例中，第二压力传感器278直接与阀端口连通，由此还用作塞体(plug)。在任一情况下，在加载样品之后和注射样品之前，通过将注射阀238设置到加压位置并且操作泵浦264以对注射阀238内部中的流体施加力，可以对样品注射流体流加压。加压步骤可以受系统控制器112监控，所述系统控制器112将从第一压力传感器276和第二压力传感器278接收到的测量信号进行比较。系统控制器112可以在一旦确定注射阀238中的压力匹配或几乎匹配溶剂混合物线路130中的压力时停止加压步骤。
在一些实施例中，系统200可以包括与注射阀238的端口连通的隔离流体源280。注射阀238可调整到限定流体路径的隔离流体加载位置，所述流体路径用于泵浦264将隔离流体从隔离流体源280抽取(即拉动、抽吸)到样品回路240，以及在期望的情况下至少部分地进入泵浦264的针体 (或针体和筒二者)。隔离流体可以作为用于推送作为良好限定的塞体的样品通过样品注射路径的流体和作为用于清洗样品注射路径(例如，样品回路 240、注射阀238的内部通道、样品注射线路146)的内壁的溶剂而高效地加以利用。隔离流体可以是适合于溶解在水性或有机溶剂中的各样品之间形成塞体-流体接口的任何流体。也就是说，样品在隔离流体前面作为塞体流动，即没有(或可忽略)进入隔离流体的扩散，使得在样品与隔离流体之间存在良好限定的接口。合适的隔离流体的示例包括但不限于全氟化溶剂和高度氟化溶剂(例如，商业上可从明尼苏达圣保罗的3M公司得到的Fluorinert(全氟三丁胺)流体(例如，3M的FC-72指定的全氟己烷或C6F14))。高度全氟化溶剂包括具有与全氟化化合物(例如，比如C6HF13和C6ClF13)相似性质的氟化化合物。可以在将样品加载到样品回路240前加载隔离流体。
现在描述用于将样品注射到柱体104中的方法的示例，其中利用了预加压和隔离流体。最初，注射阀238移动到注射溶剂加载位置，以填充注射阀238的内部容量并且至少部分地填充样品注射线路146。注射阀238 然后移动到隔离流体加载位置，以用隔离流体填充样品回路240和至少一部分泵浦264。注射阀238然后移动到样品加载位置，以将一定量的样品抽取 (即拉动或抽吸)到样品回路240中。在任何前述步骤之前或期间的某时，如上所述那样建立进入柱体104的溶剂混合物流体。注射阀238然后移动到加压位置，以对样品注射流体路径进行预加压，这可能如上所述那样要求匹配样品注射流体路径中的压力与溶剂混合物线路130中的压力。注射阀238 然后移动到注射位置，并操作泵浦264以便按期望的流率将预加压的样品传递到溶剂混合物线路130中。注射阀238可以然后移动到清洗位置，以将剩余的注射溶剂传送到废物容器160，在此期间，隔离流体填充注射阀238的内部容量，并且少量的隔离流体可以排出到废物容器160。注射阀238可以然后移动回到隔离流体加载位置，以补充损失的隔离流体，即可以操作泵浦 264以从隔离流体源280抽取隔离流体。然后系统准备好在期望的情况下加载和注射另外的样品。
如果不同的样品正注射到柱体104中，则可以实施另外的步骤以清洁流体线路。一般地，这可能要求将注射阀238调整到不同位置，并且要求将注射溶剂和/或隔离流体推送通过待清洁的线路。作为一个示例，注射阀 238移动到注射溶剂加载位置(或隔离流体加载位置)，泵浦264抽取少量(例如几微升)的注射溶剂(或隔离流体)。注射针体或与样品源134关联的其它导管然后移动到废物位置或容器284。注射阀238然后移动到样品加载位置，以对现在处于废物容器284的注射针体开放流体路径。泵浦264然后传送足够的注射溶剂(或隔离流体)，使得以注射溶剂(或隔离流体)清扫整个注射针体，并且小容量的注射溶剂(或隔离流体)排出到废物容器284。泵浦264然后反转方向，以将注射溶剂(或隔离流体)从注射针体之外拉动回来并且进入样品回路240中，使得空气留在注射针体中。注射阀238然后移动到注射溶剂加载位置，并且抽取足够注射溶剂，以填充注射阀238的内部容量，并且至少部分地填充样品注射线路146。在制备下一样品中，注射阀238移动回到样品加载位置，并且排出足够注射溶剂，以将注射溶剂带入到注射针体的尖端。
由此可见，如同图1所示的系统100的情况下，在图2的系统200 中，样品注射流体路径旁通溶剂混合器122，由此避免污染混合器122并且避免限制针对混合器122的材料的选取。此外，可以操作泵浦264以按可控制的流率将样品引入到溶剂混合物流中，所述可控制的流率在期望的情况下可以比标准HPLC泵浦的典型流率更慢。此外，在制备性色谱的情况下，尤其是当提纯手性化合物时，泵浦264使得同一样品的重复传送更容易。此外，可以采用与改性剂溶剂或第二溶剂不同的注射溶剂，以使得样品更好地保持溶解并且避免回路内结晶。例如，可以采用DMSO而非甲醇作为注射溶剂。此外，注射溶剂与泵浦264之间塞体流体接口和填充有隔离流体的泵浦264 的使用消除了样品扩散到泵浦264或泵浦的工作溶剂。隔离流体允许样品回路240对于样品材料和注射溶剂完全地受到清扫，并且极大地减少或甚至消除对于清洗具有大量溶剂的样品回路240的需要。此外，在制备性色谱的情况下，样品恢复通过样品注射系统中隔离流体的使用而得到极大地增强，这是因为样品回路240内壁受隔离流体完全清扫和偏移，使得即使在不相似样品的情况下，接近100％样品恢复也是可能的。此外，预加压样品注射路径以匹配溶剂混合物流的压力消除了可能干扰柱体填料的压力冲击。
图3是根据另一实施例的LC系统300的示例的示意图。系统300 的各个组件可以与系统200的组件相同或相似，并且用图2中的相同或相似附图标记加以指定。于是，系统300可以总体上包括：色谱柱体104；一个或多个溶剂源，其处于柱体104的上游，用作移动相；样品注射系统，其用于将样品引入溶剂流体流中；收集地点108，其处于柱体104的下游，用于收集化合物；系统控制器112。收集地点108可以如上述那样包括检测器。系统控制器112可以配置为用于对系统300的各个功能方面和组件进行控制、监控和/或计时，如上面总体上描述的那样。
在本实施例中，系统300包括第一溶剂源116和第二溶剂源118。如先前在本公开中描述的那样，第一溶剂可以是相对弱的溶剂，第二溶剂可以是相对强的溶剂。第一溶剂从第一溶剂源116流动通过第一溶剂线路120 并且进入混合器122中。第二溶剂从第二溶剂源118流动通过第二溶剂线路 124并且进入混合器122中。混合器122包括至少一个混合器入口和至少一个混合器出口。混合器122建立溶剂混合物流体流(或流体路径)，其从混合器出口流动并且通过与柱体104的柱体入口连通的溶剂混合物线路130。可以如上所述那样提供多于两个的溶剂源。
样品注射系统可以包括通常连接到典型LC系统中存在的自动采样器的标准样品注射器386，并且可以还包括以上描述的用于样品直接注射到混合器122下游的溶剂混合物流的一个或多个特征。样品注射器386典型地包括多端口第一注射阀388，其与第一样品回路390、样品源334、注射溶剂源368和废物容器392连通。在本实施例中，提供第二注射阀338。第二注射阀338的各端口与来自第一注射阀388的输出线路394连通，经由样品注射线路146与溶剂混合物线路130中的流控接合点144连通，与第二样品回路340(或缓冲回路)连通，并与废物容器160连通。第二样品回路340 与诸如泵浦364(例如，注射泵)之类的流体移动设备连通。
除了样品通过泵浦364的操作从第一注射阀388的第一样品回路 390传送到第二注射阀338的第二样品回路340之外，图3所示的配置允许样品注射器386的正常操作。可以操作泵浦364以与LC泵激系统的能力独立地按任何期望流率将样品从第二样品回路340推送进入混合器122下游的溶剂混合物流中。从而，样品注射在旁路混合器122的同时得以完成，这提供了如上所述的优点。此外，在样品从第二样品回路340排出的同时，新样品可以加载到第一样品回路390中。此外，样品引入期间的改性剂浓度可以低得足以控制应用所需的任何程度的样品带汇聚。
在一些实施例中，系统300可以包括用于实现预加压和使用隔离流体的设备或装置，如以上所述并在图2中示出的那样。
应理解，图1至图3是在此公开的系统的高级示意性描述。本领域技术人员应理解，可以根据需要针对实际的实施方案包括其它组件。
应理解，可以在一个或多个电子或数字控制的设备上通过硬件、固件、软件或以上两个或更多个的组合执行在此描述的处理、部分处理和处理步骤中的一个或多个。软件可以驻留于合适的电子处理组件或系统(诸如，例如图1至图3中示意性描述的系统控制器112)中的软件存储器(未示出)。软件存储器可以包括用于实施逻辑功能(即，可以通过数字形式(例如数字电路或源代码)或通过模拟形式(例如，诸如模拟电、声音或视频信号之类的模拟源)实现的“逻辑”)的可执行指令的有序列表。指令可以在处理模块内执行，处理模块例如包括一个或多个微处理器、通用处理器、处理器的组合、数字信号处理器(DSP)或专用集成电路(ASIC)。此外，示意图描述具有不受功能的架构或物理布局所限制的物理(硬件和/或软件)实施方案的功能的逻辑划分。在此描述的系统的示例可以通过各种配置实现并且操作为单个硬件/软件单元或分离硬件/软件单元中的硬件/软件组件。
可执行指令可以实施为其中存储有指令的计算机程序产品，其在由电子系统的处理模块(例如图1至图3中的系统控制器112)运行时引导电子系统执行指令。计算机程序产品可以有选择地实施在供指令执行系统、装置或设备(例如，基于电子计算机的系统、包含处理器的系统或可以有选择地从指令执行系统、装置或设备取得指令并且执行指令的其它系统)使用或与之结合的任何非瞬时计算机可读存储介质中。在本公开的上下文中，计算机可读存储介质是可以存储供指令执行系统、装置或设备使用或与之结合的程序的任何非瞬时部件。非瞬时计算机可读存储介质可以有选择地例如是电子、磁、光、电磁、红外或半导体系统、装置或设备。非瞬时计算机可读介质的更多具体示例的非涵盖性列表包括：具有一个或多个引线的电连接 (电子)；便携式计算机盘(磁)；随机存取存储器(电子)；只读存储器(电子)；可擦除可编程只读存储器，诸如例如闪存(电子)；压缩盘存储器，诸如例如CD-ROM、CD-R、CD-RW(光)；数字多功能盘存储器，即DVD(光)。注意，非瞬时计算机可读存储介质可以甚至是打印程序的纸张或另一合适的介质，因为程序可以经由例如纸张或其它介质的光学扫描而以电子方式得以捕获，然后编译、解释或另外根据需要而以合适的方式受处理，然后存储在计算机存储器或机器存储器中。
还应理解，如在此使用的术语“通过信号通信”表示两个或更多个系统、设备、组件、方法或子模块能够经由在某种类型的信号路径上行进的信号而彼此进行通信。信号可以是通信、功率、数据或能量信号，其可以沿着第一与第二系统、设备、组件、模块或子模块之间的信号路径将信息、功率或能量从第一系统、设备、组件、模块或子模块传送到第二系统、设备、组件、模块或子模块。信号路径可以包括物理、电、磁、电磁、电化学、光、有线或无线连接。信号路径可以在第一与第二系统、设备、组件、模块或子模块之间还包括附加系统、设备、组件、模块或子模块。
更一般地，例如“连通”以及“与……连通”的术语(例如第一组件与第二组件“连通”或“处于连通”)在此用于指示两个或更多个组件或要素之间的结构、功能、机械、电、信号、光、磁、电磁、离子或流控关系。故此，一个组件被称为与第二组件连通的事实并非旨在排除另外的组件可以在第一与第二组件之间出现和/或与之可操作地关联或结合的可能性。
应理解，在不脱离本发明的范围的情况下，可以改变本发明的各个方面或细节。此外，前面的描述目的仅是说明，而并非限制的目的—本发明由权利要求限定。

Claims (37)

1.一种液相色谱(LC)系统，包括：
柱体；
第一溶剂源；
第二溶剂源；
混合器，其经由第一溶剂线路与所述第一溶剂源连通，经由第二溶剂线路与所述第二溶剂源连通，并且经由溶剂混合物线路与所述柱体连通；
流控接合点，其在所述溶剂混合物线路中；以及
注射阀，其包括样品回路，并且与所述流控接合点和注射溶剂源连通，其中，所述注射阀能调整到样品注射位置，其限定用于注射溶剂通过所述样品回路并进入所述流控接合点的流体路径，使得所述注射溶剂将所述样品回路中的样品携带到所述混合器下游的所述溶剂混合物线路中。
2.如权利要求1所述的LC系统，包括：样品源，其与所述注射阀连通，其中，所述注射阀能调整到限定用于样品流动到所述样品回路的流体路径的样品加载位置。
3.如权利要求2所述的LC系统，其中，所述样品源包括注射溶剂源。
4.如权利要求1所述的LC系统，包括：隔离流体源，其与所述注射阀连通，其中，所述注射阀能调整到限定用于隔离流体流动到所述样品回路的流体路径的隔离流体加载位置，并且其中，在所述样品注射位置，所述隔离流体将所述注射溶剂和所述样品推送到所述溶剂混合物线路。
5.如权利要求1所述的LC系统，包括：流体移动设备，其与所述注射阀连通，其中，所述注射阀能调整到所述流体移动设备对所述样品回路加压的加压位置。
6.如权利要求5所述的LC系统，包括：压力传感器，其配置为用于测量所述样品回路中的压力；控制器，其配置为用于基于从所述压力传感器接收到的压力测量信号来控制所述流体移动设备。
7.如权利要求6所述的LC系统，其中，配置为用于测量所述样品回路中的压力的所述压力传感器是第一压力传感器，并且还包括：第二压力传感器，其配置为用于测量所述溶剂混合物线路中的压力，其中，所述控制器配置为用于基于将从所述第一压力传感器与所述第二压力传感器接收到的压力测量信号进行比较来控制所述流体移动设备。
8.如权利要求1所述的LC系统，其中，所述溶剂混合物线路中的所述流控接合点是第一流控接合点，并且还包括：流体限制器，其在所述第二溶剂线路中；第二流控接合点，其在所述第二溶剂源与所述流体限制器之间，并且其中：
所述第二溶剂源包括所述注射溶剂源；并且
所述样品注射位置限定的所述流体路径从所述第二溶剂源运行、通过所述样品回路并且进入所述第二流控接合点，使得所述第二溶剂将所述样品载入所述溶剂混合物线路。
9.如权利要求8所述的LC系统，其中，所述流体限制器包括阀。
10.如权利要求1所述的LC系统，包括：流体移动设备，其与所述样品回路连通，并且配置为用于有选择地将流体拉动到所述样品回路并且将流体从所述样品回路推出；样品源，其与所述注射阀连通，其中，所述注射阀能调整到限定用于样品从所述样品源拉动到所述样品回路的流体路径的样品加载位置。
11.如权利要求10所述的LC系统，其中，所述注射阀能调整到限定用于注射溶剂从所述注射溶剂源拉动到所述样品回路的流体路径的注射溶剂加载位置。
12.如权利要求11所述的LC系统，其中，所述第二溶剂源包括注射溶剂源。
13.如权利要求10所述的LC系统，包括：隔离流体源，其与所述注射阀连通，其中，所述注射阀能调整到限定用于隔离流体从所述隔离流体源拉动到所述样品回路的流体路径的隔离流体加载位置，并且其中，在所述样品注射位置，所述隔离流体将所述注射溶剂和所述样品推送到所述溶剂混合物线路。
14.一种液相色谱(LC)系统，包括：
柱体；
样品源；
隔离流体源；
注射阀，其包括样品回路，并且其与所述样品源、所述隔离流体源和引导到所述柱体的样品注射线路连通，其中，所述注射阀能调整到限定用于隔离流体从所述隔离流体源流动到所述样品回路的流体路径的隔离流体加载位置；以及
流体移动设备，其与所述样品回路连通，并且配置为用于有选择地将流体拉动到所述样品回路并将流体从所述样品回路推出。
15.如权利要求14所述的LC系统，其中，所述隔离流体源包含从包括高度氟化流体中选择出的隔离流体。
16.如权利要求15所述的LC系统，其中，所述高度氟化流体为 流体。
17.如权利要求14所述的LC系统，其中，所述注射阀能调整到限定用于隔离流体和样品从所述样品回路进入所述柱体的流体路径的样品注射位置。
18.一种用于将样品注射到液相色谱柱体中的方法，所述方法包括：
使得第一溶剂和第二溶剂流动到混合器中，以形成溶剂混合物；
使得所述溶剂混合物沿着溶剂混合物流体路径流动到所述柱体中；以及
在使得所述溶剂混合物流动的同时，在所述混合器与所述柱体之间的点将包括注射溶剂中所携带的样品材料的样品注射到所述溶剂混合物流体路径中。
19.如权利要求18所述的方法，其中，所述第一溶剂是弱溶剂，所述第二溶剂是强溶剂。
20.如权利要求18所述的方法，其中，所述第一溶剂选自包括水、水性缓冲流体、以及超临界或接近超临界流体的组，并且所述第二溶剂是有机溶剂。
21.如权利要求20所述的方法，其中，所述第二溶剂包括极性溶剂。
22.如权利要求18所述的方法，其中，所述第一溶剂是超临界或接近超临界流体，所述第二溶剂是极性溶剂。
23.如权利要求18所述的方法，其中，注射包括：使得所述样品作为塞体在隔离流体前面流动。
24.如权利要求23所述的方法，其中，所述隔离流体选自包括高度氟化流体。
25.如权利要求24所述的方法，其中，所述高度氟化流体为流体。
26.如权利要求18所述的方法，包括：在注射前，将所述样品加压到期望的压力。
27.如权利要求26所述的方法，其中，加压包括：将所述样品的压力与所述溶剂混合物流体路径中的压力进行实质上的匹配。
28.如权利要求18所述的方法，其中，所述注射溶剂和所述第二溶剂具有相同组分。
29.如权利要求18所述的方法，包括：将所述第二溶剂的至少一部分从所述混合器上游的点转向并且进入样品回路中，其中，注射包括：与所述样品一起将所述第二溶剂从所述样品回路注射到所述溶剂混合物流体路径。
30.如权利要求18所述的方法，包括：将注射溶剂加载到注射器阀中，并且将样品加载到与所述注射阀连通的样品回路中，其中，注射包括：从所述样品回路推送所述样品。
31.如权利要求30所述的方法，包括：在加载所述注射溶剂和所述样品之前，将隔离流体加载到样品回路中，其中，通过使得所述样品作为塞体在所述隔离流体前面流动来注射所述样品。
32.如权利要求31所述的方法，包括：在注射之前，将所述样品加压到期望的压力。
33.一种液相色谱系统，其配置为用于执行权利要求18所述的方法。
34.一种用于将样品注射到液相色谱柱体中的方法，所述方法包括：
将隔离流体加载到样品回路中；
将样品加载到所述样品回路中，所述样品包括注射溶剂中所携带的样品材料；以及
通过使得所述样品作为塞体在所述隔离流体前面流动，将所述样品注射所述柱体中。
35.如权利要求34所述的方法，其中，所述隔离流体源包含从包括高度氟化流体中选择出的隔离流体。
36.如权利要求35所述的方法，其中，所述高度氟化流体为流体。
37.一种液相色谱系统，其配置为用于执行权利要求34所述的方法。
CN201380062261.XA 2012-11-30 2013-10-28 用于液相色谱的混合器旁路样品注射 Active CN104813164B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261731611P 2012-11-30 2012-11-30
US61/731,611 2012-11-30
PCT/US2013/067112 WO2014085003A2 (en) 2012-11-30 2013-10-28 Mixer bypass sample injection for liquid chromatography

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104813164A CN104813164A (zh) 2015-07-29
CN104813164B true CN104813164B (zh) 2018-05-22

Family

ID=49517790

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201380062261.XA Active CN104813164B (zh) 2012-11-30 2013-10-28 用于液相色谱的混合器旁路样品注射

Country Status (3)

Country Link
US (2) US9945820B2 (zh)
CN (1) CN104813164B (zh)
WO (1) WO2014085003A2 (zh)

Families Citing this family (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6615764B2 (ja) * 2014-01-24 2019-12-04 ディーエイチ テクノロジーズ デベロップメント プライベート リミテッド 液体をイオン源に送達するためのシステムおよび方法
EP3148664B1 (en) 2014-05-29 2019-11-13 Agilent Technologies, Inc. Apparatus and method for introducing a sample into a separation unit of a chromatography system
US9816971B2 (en) 2014-09-08 2017-11-14 Waters Technologies Corporation Controllable injector sample dilution for a liquid chromatography system
CN104535699B (zh) * 2015-01-05 2018-04-03 上海谱宁分析技术有限公司 峰形前延抑制器、使用其的高效液相色谱分析装置及方法
CN108351330B (zh) * 2015-10-20 2021-03-09 沃特世科技公司 用于交叉流进样色谱法的系统、方法和设备
CN108139368B (zh) * 2015-10-20 2021-03-12 沃特世科技公司 用于降低色谱法中溶解度问题的系统、方法和设备
EP3405847A4 (en) * 2016-01-20 2019-10-30 Waters Technologies Corporation SYSTEMS, METHODS AND DEVICES AFFECTING SAMPLE EXTRACTION AND INJECTION PROBLEMS IN CHROMATOGRAPHY
CN108700558B (zh) * 2016-03-07 2022-07-12 沃特世科技公司 用于减少色谱法中带色散的系统、方法和设备
US10487954B2 (en) * 2017-02-03 2019-11-26 Micromeritics Instrument Corporation Blend valve
EP3642613B1 (en) * 2017-06-19 2021-03-31 Waters Technologies Corporation Online dilution for a liquid chromatography system using a sample metering pump
US11185830B2 (en) 2017-09-06 2021-11-30 Waters Technologies Corporation Fluid mixer
EP3692364A1 (en) * 2017-10-04 2020-08-12 Waters Technologies Corporation Systems and methods for chromatographic analysis
DE102017125486A1 (de) * 2017-10-30 2018-01-04 Agilent Technologies, Inc. - A Delaware Corporation - Injektor mit Fluidzuführung und Mobilphasenabführung
US20210055268A1 (en) 2018-04-06 2021-02-25 Agilent Technologies, Inc. Sample handling and dispatching individual sample packages
US11635412B2 (en) 2018-04-06 2023-04-25 Agilent Technologies, Inc Pressure decoupling fluid drive unit from flow path for pressure adjustment of sample accommodation volume
EP3617701A1 (en) * 2018-08-27 2020-03-04 F. Hoffmann-La Roche AG Sample injector with sample loop and buffer loop
US11821879B2 (en) * 2019-03-13 2023-11-21 Shimadzu Corporation Autosampler for chromatograph
US11555805B2 (en) 2019-08-12 2023-01-17 Waters Technologies Corporation Mixer for chromatography system
GB201911687D0 (en) * 2019-08-15 2019-10-02 Fujifilm Diosynth Biotechnologies Uk Ltd Apparatus for purifying a liquid comprising a target substance
US11709154B2 (en) * 2019-10-17 2023-07-25 Aisti Science Co., Ltd. Liquid chromatograph including passage switch valve
US20210156826A1 (en) * 2019-11-25 2021-05-27 Waters Technologies Corporation Sample injection for liquid chromatography using split solvent flow
GB2595519A (en) * 2020-05-29 2021-12-01 Univ Leiden Assemblies and methods
WO2022010666A1 (en) 2020-07-07 2022-01-13 Waters Technologies Corporation Combination mixer arrangement for noise reduction in fluid chromatography
CN116134312A (zh) 2020-07-07 2023-05-16 沃特世科技公司 液相色谱用混合器
US11821882B2 (en) 2020-09-22 2023-11-21 Waters Technologies Corporation Continuous flow mixer

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3940994A (en) 1974-08-01 1976-03-02 Varian Associates High pressure sample injection apparatus and method
EP0686848A1 (en) * 1994-05-09 1995-12-13 Shiseido Company Limited Liquid chromatograph having a micro and semi-micro column
US6576125B2 (en) * 2001-08-17 2003-06-10 Berger Instruments, Inc. Method of sample introduction for chromatographic systems
DE10393201B4 (de) * 2002-09-11 2023-11-16 Waters Technologies Corp. (N.D.Ges.D. Staates Delaware) Hochdruckfluidprobeninjektionsvorrichtung und Verfahren
US20040092033A1 (en) * 2002-10-18 2004-05-13 Nanostream, Inc. Systems and methods for preparing microfluidic devices for operation
US7111501B2 (en) * 2003-10-03 2006-09-26 Agilent Technologies, Inc. Devices and methods for separating constituents
WO2005059512A2 (en) * 2003-12-10 2005-06-30 Northeastern University Method for efficient transport of small liquid volumes to, from or within microfluidic devices
DE112005001674B4 (de) * 2004-07-13 2018-02-08 Waters Technologies Corp. (N.D.Ges.D. Staates Delaware) Fluidmischanordnung und chromatographisches System
WO2006083776A2 (en) 2005-01-31 2006-08-10 Waters Investments Limited Method and apparatus for sample injection in liquid chromatography
US9103814B2 (en) * 2006-03-17 2015-08-11 Waters Technologies Corporation Solvent delivery system for liquid chromatography that maintains fluid integrity and pre-forms gradients
EP1996930B1 (en) * 2006-03-17 2018-01-10 Waters Technologies Corporation Device and methods for reducing pressure and flow perturbations in a chromatographic system
WO2008036586A2 (en) * 2006-09-20 2008-03-27 Waters Investments Limited Apparatus and methods of fluid chromatography
KR100757512B1 (ko) * 2006-11-16 2007-09-11 고려대학교 산학협력단 초고압 이중 온라인 고체상 추출 및 역상 액체크로마토그래피 장치
JP2008139147A (ja) * 2006-12-01 2008-06-19 Hitachi High-Technologies Corp 液体クロマトグラフ装置
ITVE20070072A1 (it) * 2007-10-16 2009-04-17 Dani Instr Spa Dispositivo per la generazione di gradienti di fase mobile a micro- e nanoflussi per cromatografia liquida ad alte prestazioni.
WO2010148339A2 (en) 2009-06-19 2010-12-23 The Regents Of The University Of Michigan Electrospray and nanospray ionization of discrete samples in droplet format
EP2317310B1 (en) * 2009-10-28 2017-04-26 Jasco Corporation Pressure control apparatus for supercritical fluid
US9523662B2 (en) * 2009-11-25 2016-12-20 Waters Technologies Corporation Coordinating injector-valve switching with pump-stroke timing to mitigate effects of pressure pulses
US9645123B2 (en) * 2010-01-11 2017-05-09 Waters Technologies Corporation Manifold for solvent mixing in liquid chromatography systems
US20120205314A1 (en) * 2010-08-13 2012-08-16 Davison Dale A Gradient start up system

Also Published As

Publication number Publication date
US10209229B2 (en) 2019-02-19
WO2014085003A2 (en) 2014-06-05
WO2014085003A3 (en) 2014-07-31
CN104813164A (zh) 2015-07-29
US20180196018A1 (en) 2018-07-12
US9945820B2 (en) 2018-04-17
US20150316516A1 (en) 2015-11-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104813164B (zh) 用于液相色谱的混合器旁路样品注射
CN104285145B (zh) 采用受控压力的二维流体分离
CN103630642B (zh) 用于分析样本和收集样本流份的方法和装置
CN106662556B (zh) 制备型液相色谱装置及制备条件探索方法
US10802001B2 (en) Online dilution for a liquid chromatography system using a sample metering pump
US9335309B2 (en) Fluidic valve with selectively switchable storage paths
CN107449852A (zh) 以对源流路小影响的方式对流体样品分流
JP2014514541A (ja) 多次元液体分析用バルブ及び分割システム
US8156788B2 (en) Supercritical-phase mixed chromatography method and installation for implementing same
US20170010243A1 (en) Multiple column chromatographic system and methods of use
JP6437005B2 (ja) 多次元液体分析システムにおける体積フローの調整
CN109342159A (zh) 一种基于在线检测的亲疏水组分分离及收集装置和方法
US11079360B2 (en) Systems and methods for chromatographic analysis
CN103454365B (zh) 液相色谱装置、液相色谱分析方法、及液相色谱分析程序
CN102317771A (zh) 用于色谱系统的溶剂供给系统及其制造和使用方法
US20210302396A1 (en) Large volume sample injection for liquid chromatography
US11099159B2 (en) Systems, methods and devices for reducing band dispersion in chromatography
CN209215064U (zh) 一种基于在线检测的亲疏水组分分离及收集装置
CN205280673U (zh) 一种高效液相色谱仪
CN116068093A (zh) 一种在线固相萃取-高效液相色谱联用的检测系统及检测方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant