CN104807941A

CN104807941A - 一种食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的检测方法

Info

Publication number: CN104807941A
Application number: CN201510242687.4A
Authority: CN
Inventors: 李宝志; 黄飞; 佟亚楠; 刘金霞; 王超; 臧婉辰; 李河霖
Original assignee: Jilin Tobacco Industrial Co Ltd
Current assignee: Jilin Tobacco Industrial Co Ltd
Priority date: 2015-05-13
Filing date: 2015-05-13
Publication date: 2015-07-29
Anticipated expiration: 2035-05-13
Also published as: CN104807941B

Abstract

本发明涉及食品添加剂检测领域，尤其涉及一种食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的检测方法。本发明提供的食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的检测方法是通过气相色谱-质谱联用的方法法进行的。通过实验证实，本发明提供的方法对目标化合物及内标色谱峰都分离度较好，且均具有较好的线性相关性。本发明提供的方法能够实现对15种萜烯醇酯类化合物的同时定量、定性检测。检出限在1.95mg/kg～4.01mg/kg之间。并且，本发明方法的加标回收率在83.43％～113.84％之间，相对标准偏差(RSD)均小于5％，说明本发明方法的回收率高，重复性好。

Description

一种食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的检测方法

技术领域

本发明涉及食品添加剂检测领域，尤其涉及一种食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的检测方法。

背景技术

现代食品工业为了追求利益最大化，需要添加相应的香精来强化或改善其产品的香味，诱导消费，扩大销售。食用香精是指由食品用香料和(或)食品用热加工香味料与食品用香精辅料组成的用来起香味作用的浓缩调配混合物。食用香精可以起到调香作用，模仿天然瓜果、食品的香和味，强化食品的香气和味觉的仿真性，是食品添加剂的一种，广泛应用在食品中。目前国家食品工业可以使用的食品香料、香精有上千种之多。尽管按照标准规定的用量使用，食用香精一般不会危害人体健康，但近年发现，某些天然香料中含有的黄樟素对健康有害。并且，目前食品行业对产品中所含添加剂进行标注时往往仅简单标注“食用香精”，而不标注具体成分和含量，这不仅客观不能约束生产企业不规范使用食用香精，且给质量检测部门在对产品成分进行检测时造成了困扰。

目前，我国食品领域，包括纯乳制品、大米、蜂蜜等在内的25类商品明令禁止含有香精。而是否添加了香精、添加了哪些种类的香精、添加香精的量是影响食品品质的重要因素。但是，由于食用香精是种混合物，其中既有植物中提取的成分，也有很多化学合成成分，成分越复杂检测起来难度越大。

萜烯类化合物及其衍生物是香精香料的重要成分。例如：香叶醇和橙花醇是无环单萜烯醇类化合物，具有温和而甜的玫瑰花香，留香较长，是玫瑰系香精的主剂，广泛应用于食用香精、日化香精、烟草、药物等领域，入药用于抗菌和驱虫；临床表现为：有治疗慢性支气管炎、改善肺通气功能和降低气道阻力等作用。香叶醇、橙花醇以及衍生物是非常有价值的天然产物，因此其酯类化合物是相关香料的重要成分，具有香柠檬、薰衣草样持久香气,使人心旷神怡、清新舒畅,是制备高级香精不可缺少的香料,在日化、烟草、食品工业中占有十分重要的地位。广泛用于配制食品香精、香水香精、化妆品香精、皂用香精等，其用途非常广泛。随着日用化妆品及其它香精产品需求量的日益递增。其他常见的萜烯类化合物及其衍生物还有异丁酸橙花酯、异丁酸香叶酯、2-甲基丁酸橙花酯、异戊酸橙花酯、2-甲基丁酸香叶酯、异戊酸香叶酯、反-2-己烯酸香叶酯、糠酸橙花酯、糠酸香叶酯、苯甲酸橙花酯、苯甲酸香叶酯、肉桂酸橙花酯、肉桂酸香叶酯、肉豆蔻酸橙花酯、肉豆蔻酸香叶酯等。

但是，由于食用香精香料中的成分比较复杂，目前国内外有关萜烯醇酯尚无检测标准，也缺乏相关研究及检测方法。而由于市场对萜烯醇酯的需求正逐步增加，开发萜烯醇酯的检测方法具有重要的经济价值和社会效益。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的检测方法。该方法检测限低、准确度高，重复性好。能够实现对香精香料中常见的萜烯醇酯类化合物的快速准确检测。

本发明提供的食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的检测方法，包括以下步骤：

步骤1：以二氯甲烷萃取含有内标的食用香精香料，制得样品溶液；以二氯甲烷稀释萜烯醇酯类化合物标准品后与内标混合，制得标准工作液；以二氯甲烷为空白溶液；

步骤2：将所述样品溶液、标准工作液、空白溶液经气相色谱-质谱联用检测，建立标准曲线，获得食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的种类及含量；

所述气相色谱柱为Elite-35MS毛细管色谱柱。

本发明提供的食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的检测方法是通过气相色谱法进行的。利用气相色谱(GC)对小分子溶剂进行定量检测是目前常用的检测方法，在面对需要对食用香精香料中萜烯醇酯类化合物进行定量、定性分析时，采用气相色谱是一种快速有效的方式。但是，现有技术中，关于萜烯醇酯类化合物的检测方法研究较少，尚未有方法能够同时对样品中的多种萜烯醇酯类化合物进行鉴定。而通过实验证实，本发明提供的方法目标化合物及内标色谱峰都分离度较好，且均具有较好的线性相关性，检出限在1.95mg/kg～4.01mg/kg之间。并且，本发明方法的加标回收率在83.43％～113.84％之间，相对标准偏差(RSD)均小于5％，说明本发明方法的回收率高，重复性好。

色谱柱的填料、规格很大程度上的影响检测的效果。增加柱长可使理论塔板数增大，但同时使峰宽加大，分析时间延长。因此，填充柱的柱长要选择适当。一般情况下，柱长选择以使组分能完全分离，分离度达到所期望的值为准。本发明本发明比较了Elite-35MS、Elite-17MS和HP-INNOWAX色谱柱，对香精香料中萜烯醇酯类化合物的分离效果，结果表明，Elite-35MS毛细管色谱柱的峰型和分离效果最好。且本发明实验表明，色谱柱的长度影响样品的分离度，柱子越长分离度越高。信噪比越高。

本发明采用的气相色谱柱为Elite-35MS毛细管色谱柱，固定相成分为35％苯基/65％甲基聚硅氧烷，为中等极性色谱柱，规格为60m×0.25mm×0.25μm。

本发明所述标准曲线的横纵坐标分别为：萜烯醇酯类化合物色谱峰面积与内标色谱峰面积的比值；萜烯醇酯类化合物浓度与内标浓度的比值。

在本发明的实施例中，萜烯醇酯类化合物为异丁酸橙花酯、异丁酸香叶酯、2-甲基丁酸橙花酯、异戊酸橙花酯、2-甲基丁酸香叶酯、异戊酸香叶酯、反-2-己烯酸香叶酯、糠酸橙花酯、糠酸香叶酯、苯甲酸橙花酯、苯甲酸香叶酯、肉桂酸橙花酯、肉桂酸香叶酯、肉豆蔻酸橙花酯或肉豆蔻酸香叶酯中任一种或两者以上的组合。

采用本发明提供的方法能够同时鉴定出样品中的15种萜烯醇酯类化合物。其中各化合物定量和定性选择离子如表1所示：

表1 萜烯醇酯类化合物定量和定性选择离子表

序号	化合物名称	分子式	相对分子质量	保留时间(min)	定量离子	定性离子
							1	异丁酸橙花酯	C₁₄H₂₄O₂	224	22.15	93	136、121、80
2	异丁酸香叶酯	C₁₄H₂₄O₂	224	22.78	93	136、121、80
							3	2-甲基丁酸橙花酯	C₁₅H₂₆O₂	238	24.18	80	136、121、85
4	异戊酸橙花酯	C₁₅H₂₆O₂	238	24.33	85	136、121、80
							5	2-甲基丁酸香叶酯	C₁₅H₂₆O₂	238	24.85	85	136、121、80
6	异戊酸香叶酯	C₁₅H₂₆O₂	238	24.98	85	136、121、80
							7	反-2-己烯酸香叶酯	C₁₆H₂₆O₂	250	30.10	97	136、121、93

8	糠酸橙花酯	C₁₅H₂₀O₃	248	31.16	95	136、121、80
							9	糠酸香叶酯	C₁₅H₂₀O₃	248	31.65	95	136、121、80
10	苯甲酸橙花酯	C₁₇H₂₂O₂	258	33.58	105	136、121、80
							11	苯甲酸香叶酯	C₁₇H₂₂O₂	258	34.08	105	136、121、80
12	肉桂酸橙花酯	C₁₉H₂₄O₂	284	39.72	131	148、136、103
							13	肉桂酸香叶酯	C₁₉H₂₄O₂	284	40.21	131	148、136、103
14	肉豆蔻酸橙花酯	C₂₄H₄₄O₂	364	41.86	93	136、121、80
							15	肉豆蔻酸香叶酯	C₂₄H₄₄O₂	364	42.45	93	136、121、80

升温程序，是指色谱柱的温度按设置的程序连续地随时间线性或非线性逐渐升高，以使低沸点组分和高沸点组分在色谱柱中都有适宜的保留、色谱峰分布均匀且峰形对称。相比恒温来说，程序升温能够使后面出峰的高沸点物质加快出峰，减小扩散，而对于前面组分也会有更大的保留，利于分离。升温程序是影响检测效果的重要因素，但是，不同的升温程序对分离效果和分离时间有很大影响，因此必须针对待测物质调整适宜的升温程序。

在本发明的实施例中，气相色谱-质谱联用，色谱的升温程序为：初始温度60℃，以5℃/min升温至260℃，保持10min。

在气相色谱中，各种气体，如载气、燃气、助燃气等的纯度会直接影响色谱仪的灵敏度、稳定性，甚至色谱柱的寿命，而载气的流速是决定色谱分离的重要原因之一。当流速低时，样品的扩散比较严重，柱效较低；当流速太高时，样品的传质阻力项较大，柱效也较低。

在本发明的实施例中，气相色谱-质谱联用的进样口温度为280℃；不分流进样；流速1.0mL/min。

在本发明的实施例中，气相色谱-质谱联用的载气为氦气，恒流模式。

在本发明的实施例中，气相色谱-质谱联用，质谱采用选择离子扫描模式分段扫描。

在本发明的实施例中，气相色谱-质谱联用，质谱输线温度260℃；离子源温度200℃；溶剂延迟8min。

在本发明的实施例中，气相色谱-质谱联用，质谱电离方式为电子轰击源。

在本发明的实施例中，质谱的电离能量为70eV。

溶剂延迟是为了减少系统的污染，提高样品分析的稳定性。

在本发明的实施例中，内标为3-苯丙酸乙酯。

在本发明的实施例中，标准工作液中内标的浓度为50μg/mL。

在本发明的实施例中，萃取的条件为25℃超声萃取30min。

萃取后，取二氯甲烷层为样品溶液。

在本发明的实施例中，标准工作液中内标的浓度为5μg/mL；萜烯醇酯类化合物的浓度为2μg/mL、4μg/mL、10μg/mL、20μg/mL或40μg/mL。

具体的，内标溶液的配制方法为：以乙醇为溶剂，溶解3-苯丙酸乙酯至浓度为10mg/mL，制得内标溶液。

样品溶液的制备方法为：称取食用香精香料样品，分别加入50μL浓度为10mg/mL的内标溶液和10mL二氯甲烷萃取液后，恒温25℃超声萃取30min，静置、冷却至室温后，取下层清液，经0.22μm尼龙膜过滤，制得样品溶液。

标准工作液的制备方法为：以乙醇为溶液，配制萜烯醇酯类化合物的混合溶液；其中，各萜烯醇酯类化合物的浓度皆为2mg/mL的为混合标准溶液I；

取10mL标准溶液I，以二氯甲烷稀释至100mL，制得浓度为200μg/mL的混合标准溶液II；

分别取0.1mL、0.2mL、0.5mL、1mL、2mL的混合标准溶液II，各加入50μL浓度为10mg/mL的内标溶液，分别用二氯甲烷稀释至10mL，制得浓度为2μg/mL、4μg/mL、10μg/mL、20μg/mL或40μg/mL的标准工作液。

在本发明的实施例中，食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的含量计算公式为：

X = \frac{(C - C_{0}) \times V}{M}

式中：

X为食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的含量；

C为由标准曲线得到的食用香精香料中萜烯醇酯浓度；

C₀为由标准曲线得到的空白溶液中萜烯醇酯浓度；

V为二氯甲烷的体积；

M为试样的质量。

本发明提供的食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的检测方法，包括以下步骤：以二氯甲烷萃取含有内标的食用香精香料，制得样品溶液；以二氯甲烷稀释萜烯醇酯类化合物标准品后与内标混合，制得标准工作液；以二氯甲烷为空白溶液；将所述样品溶液、标准工作液、空白溶液经气相色谱-质谱联用检测，建立标准曲线，获得食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的种类及含量；本发明提供的食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的检测方法是通过气相色谱-质谱联用的方法进行的。通过实验证实，本发明提供的方法对目标化合物及内标色谱峰都分离度较好，且均具有较好的线性相关性。本发明提供的方法能够实现对15种萜烯醇酯类化合物的同时定量、定性检测。检出限在1.95mg/kg～4.01mg/kg之间。并且，本发明方法的加标回收率在83.43％～113.84％之间，相对标准偏差(RSD)均小于5％，说明本发明方法的回收率高，重复性好。

附图说明

图1-a示采用Elite-35MS色谱柱检测的色谱图；

图1-b示采用Elite-17MS色谱柱检测的色谱图；

图1-c示采用HP-INNOWAX色谱柱检测的色谱图；

图2-a示异丁酸橙花酯的色谱图；

图2-b示异丁酸香叶酯的色谱图；

图2-c示2-甲基丁酸橙花酯的色谱图；

图2-d示异戊酸橙花酯的色谱图；

图2-e示2-甲基丁酸香叶酯的色谱图；

图2-f示异戊酸香叶酯的色谱图；

图2-g示反-2-己烯酸香叶酯的色谱图；

图2-h示糠酸橙花酯的色谱图；

图2-i示糠酸香叶酯的色谱图；

图2-j示苯甲酸橙花酯的色谱图；

图2-k示苯甲酸香叶酯的色谱图；

图2-l示肉桂酸橙花酯的色谱图；

图2-m示肉桂酸香叶酯的色谱图；

图2-n示肉豆蔻酸橙花酯的色谱图；

图2-o示肉豆蔻酸香叶酯的色谱图。

具体实施方式

本发明提供了一种食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的检测方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

本发明采用的仪器皆为普通市售品，皆可于市场购得。

下面结合实施例，进一步阐述本发明：

实施例1

以色谱柱：Elite-35MS检测标准工作溶液效果：

(1)配制内标溶液：称取内标物3-苯丙酸乙酯，用乙醇作溶剂定容至100mL的容量瓶中，得到浓度为10mg/mL的内标溶液。

(2)15种萜烯醇酯混合标准溶液Ⅰ：分别称取0.1g(精确至0.1mg)15种萜烯醇酯标准品，用乙醇作溶剂定容至50mL的容量瓶中，配制浓度为2mg/mL的混合标准溶液Ⅰ。混合标准溶液Ⅰ于4℃下保存，有效期3个月。

(3)15种萜烯醇酯混合标准溶液Ⅱ：准确移取10mL混合标准溶液Ⅰ,置于100mL容量瓶中，以二氯甲烷定容至刻度，配制浓度为200μg/mL的混合标准溶液Ⅱ。混合标准溶液Ⅱ于4℃下保存，有效期3个月。

(4)标准工作溶液的配制：准确移取0.1mL、0.2mL、0.5mL、1mL和2mL混合标准溶液Ⅱ，置于10mL容量瓶中，加入50μL内标溶液，用二氯甲烷定容至刻度，制备标准工作溶液，其浓度分别为：2μg/mL、4μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL。

(5)配制样品溶液：准确称取0.3g(精确至0.1mg)食用香精香料样品于50mL具塞三角瓶中，分别加入50μL内标溶液和10mL二氯甲烷萃取液后，恒温25℃超声萃取30min，静置、冷却至室温后，取下层清液,经0.22μm尼龙膜过滤后，得到待测样品溶液；

(6)气相色谱-质谱分析：设定GC-MS分析条件，分别对标准工作溶液、样品溶液和空白溶液进行检测分析，具体分析条件为：色谱柱：Elite-35MS毛细管色谱柱，固定相：35％苯基/65％甲基聚硅氧烷，规格：60m×0.25mm×0.25μm；进样口温度：280℃；进样量：1μL，不分流进样；载气：氦气(纯度≥99.999％)，恒流模式，流速：1.0ml/min；升温程序：初始温度60℃，以5℃/min升温至260℃，保持10min。质谱分析条件：电离方式：电子轰击源(EI)；电离能量：70eV；传输线温度：260℃；离子源温度：200℃；溶剂延迟：8min，选择离子扫描模式(SIM)分段扫描，以特征离子进行定量分析；15种萜烯醇酯定量和定性选择离子见表1，各化合物色谱图见图2-a～图2-o。色谱图如图1-a所示。结果显示，以该方法检测标准工作溶液，萜烯醇酯类化合物及内标色谱峰都分离度较好。

对比例1

以色谱柱：Elite-17MS检测标准工作溶液效果，实验条件与实施例1相同，色谱柱采用Elite-17MS。Elite-17MS色谱柱的填料为50％苯基/50％甲基聚硅氧烷，中等极性色谱柱，规格：30m×0.25mm×0.25μm。色谱图如图1-b所示。结果显示，以该方法检测标准工作溶液，萜烯醇酯类化合物不能很好的分离，出现目标化合物峰的重叠。

对比例2

以色谱柱：HP-INNOWAX检测标准工作溶液效果，实验条件与实施例1相同，色谱柱采用HP-INNOWAX。HP-INNOWAX色谱柱的填料：键合/交联聚乙醇，强极性柱，规格：30m×0.25mm×0.25μm。色谱图如图1-c所示。结果显示，以该方法检测标准工作溶液，萜烯醇酯类化合物不能很好的分离，出现目标化合物峰的重叠，并且，基线出现飘高。

实施例2

分别取标准工作溶液进行分析，分析方法同实施例1。以标准工作溶液中15种萜烯醇酯类化合物和3-苯丙酸乙酯的色谱峰面积比对其相应浓度比进行回归分析，得到标准曲线；取最低浓度工作标准溶液，做10次平行试验，计算标准偏差，3倍标准偏差为检出限，10倍标准偏差为定量限，结果如表2所示。

表2：15种萜烯醇酯类化合物的标准曲线、相关系数和检测限

实施例3

本实例对本发明方法的精密度和加标回收率进行检测。

方法的准确度、精密度分别用回收率和相对标准偏差衡量。对同一样品在相同条件下，取样6次，并根据测定结果的平均值计算15种萜烯醇酯类化合物的相对标准偏差(RSD％)；对食用香精香料样品中，分别添加低、中、高三种水平的标准溶液，标准加入量分别为100μg、200μg、400μg进行加标回收率实验，检测的方法如实施例1，计算含量的方法为：将相同条件下测得的样品溶液中15种萜烯醇酯类化合物和3-苯丙酸乙酯的色谱峰面积比，代入实施例2所绘制的标准曲线，求得样品中萜烯醇酯类化合物的含量，计算公式如下：

X = \frac{(C - C_{0}) \times V}{M}

式中：

X——试样中萜烯醇酯的含量，单位为mg/Kg

C——由标准曲线得到的试样中萜烯醇酯浓度，单位为μg/mL

C₀——由标准曲线得到的空白中萜烯醇酯浓度，单位为μg/mL

V——试样萃取液体积，单位为mL，此处为二氯甲烷的体积10mL

M——试样的质量，单位为g。

结果详见表3。

表3：15种萜烯醇酯类化合物的回收率与相对标准偏差

从表3可知，15种萜烯醇酯的平均加标回收率在83.43％～113.84％范围内，相对标准偏差(RSD)在2.31％～4.11％之间，表明本方法准确性高，重复性好，适合定量。

实施例4

应用所建立的方法，选取5个食用香精香料样品(样品类型包括表香、精油和浸膏等)，测定样品中萜烯醇酯类化合物的含量。

检测方法同实施例1，定量方法同实施例3，检测结果见,4。

表4不同食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的含量(mg/Kg)

样品编号	表香1号	表香2号	精油	浸膏1号	浸膏2号
						异丁酸橙花酯	N.D.	15.93	N.D.	N.D.	N.D.
异丁酸香叶酯	12.78	N.D.	N.D.	14.36	N.D.
						2-甲基丁酸橙花酯	N.D.	N.D.	23.18	N.D.	N.D.
异戊酸橙花酯	20.32	40.81	N.D.	N.D.	N.D.
						2-甲基丁酸香叶酯	N.D.	N.D.	N.D.	7.92	N.D.
异戊酸香叶酯	10.62	N.D.	15.32	N.D.	18.26
						反-2-己烯酸香叶酯	N.D.	9.63	N.D.	N.D.	N.D.
苯甲酸橙花酯	8.67	N.D.	N.D.	N.D.	N.D.
						苯甲酸香叶酯	N.D.	N.D.	N.D.	N.D.	6.75

结果说明，本发明提供的方法能够快速，准确对食用香精香料中萜烯醇酯类化合物进行定量、定性分析。

以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.一种食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

所述气相色谱柱为Elite-35MS毛细管色谱柱；

所述标准曲线的横纵坐标分别为：萜烯醇酯类化合物色谱峰面积与内标色谱峰面积的比值；萜烯醇酯类化合物浓度与内标浓度的比值。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述萜烯醇酯类化合物为异丁酸橙花酯、异丁酸香叶酯、2-甲基丁酸橙花酯、异戊酸橙花酯、2-甲基丁酸香叶酯、异戊酸香叶酯、反-2-己烯酸香叶酯、糠酸橙花酯、糠酸香叶酯、苯甲酸橙花酯、苯甲酸香叶酯、肉桂酸橙花酯、肉桂酸香叶酯、肉豆蔻酸橙花酯或肉豆蔻酸香叶酯中任一种或两者以上的组合。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述气相色谱-质谱联用，色谱的升温程序为：初始温度60℃，以5℃/min升温至260℃，保持10min。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述气相色谱-质谱联用的进样口温度为280℃；不分流进样；流速1.0mL/min。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述气相色谱-质谱联用，质谱采用选择离子扫描模式分段扫描。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述气相色谱-质谱联用，质谱输线温度260℃；离子源温度200℃；溶剂延迟8min。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述内标为3-苯丙酸乙酯。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述萃取的条件为25℃超声萃取30min。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述标准工作液中内标的浓度为50μg/mL；萜烯醇酯类化合物的浓度为2μg/mL、4μg/mL、10μg/mL、20μg/mL或40μg/mL。

10.根据权利要求1～9任一项所述的方法，其特征在于，所述食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的含量计算公式为：

X = \frac{(C - C_{0}) \times V}{M}

式中：

X为食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的含量；

C为由标准曲线得到的食用香精香料中萜烯醇酯浓度；

C₀为由标准曲线得到的空白溶液中萜烯醇酯浓度；

V为二氯甲烷的体积；

M为试样的质量。