CN104798728A - 产后抑郁动物模型的建立方法及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种产后抑郁动物模型的建立方法及其应用,该方法包括如下步骤:步骤一,建立孕前应激诱导的产后抑郁动物模型;步骤二,产后抑郁动物模型的鉴定。本发明所涉及孕前应激方法建立产后抑郁模型的方法,更加接近于临床致病诱因,可以最大程度的模拟临床上自然形成的产后抑郁症,也有利于研究产后抑郁的发病机制及治疗药物靶点的设计。并且,孕前应激诱导产后抑郁模型个体之间不存在手术操作或者药物剂量导致的差异,其背景高度一致,可以作为产后抑郁新药筛选的有用工具。本发明建立的动物模型使用方便,极具研究价值和医药用途的前景。
Description
技术领域
本发明涉及一种动物模型的建立方法,具体涉及一种产后抑郁动物模型的建立方法及其应用。
背景技术
产后抑郁症(postpartum depression,PPD)是产褥期精神综合征中最常见的一种类型,以紧张、疑虑、内疚、恐惧,甚至绝望、离家出走,亦或出现伤婴及自杀想法与行为等特征。本病一般在产后一周开始出现症状,产后4~6周逐渐明显,平均持续6~8周,甚则长达数年。近年来PPD发病呈逐年上升趋势,严重影响产妇的身心健康以及家庭与社会的和谐稳定,目前已成为比较突出的社会问题。
PPD患者的发病原因比较复杂,目前的研究认为PPD的发生与遗传、心理因素和环境因素都有关,而其中,最重要的环境因素是应激性事件。产妇在孕前经历过应激性生活事件或者既往罹患过抑郁症或经历过抑郁状态,之后发作PPD的几率非常高。持续的应激能显著增加易感性个体发生情感障碍的可能性。
动物疾病模型在研究人类疾病致病机理和药物筛选中起到了关键作用。在探究人类神经精神疾病、神经退行性疾病及人类认知功能、神经环路等方面具有巨大的优势,可成为研究和药物筛选的重要疾病模型。
目前用来研究产后抑郁动物模型主要有以下几种:1、卵巢去势手术后外源性雌孕激素补充再撤退法2、孕期给予皮质酮法3、孕后行母婴分离法,这些建立产后抑郁模型的方法大多要经过外源性药物或其它方法处理,甚至是通过手术手段,不能完全模拟人类的原发的产后抑郁症,并且操作复杂,成本高,缺乏稳定性和说服力。
发明内容
发明目的:本发明的目的是为了克服现有模型构建技术的缺陷,提供一种建立产后抑郁动物模型的方法及其应用,具体是一种基于孕前应激诱导建立产后抑郁动物模型的方法,并采用本发明构建的产后抑郁动物模型用于产后抑郁治疗药物的筛选应用。
技术方案:为了实现以上目的,本发明采取的技术方案为:
一种产后抑郁动物模型的建立方法,其包括以下步骤:
(1)建立孕前应激诱导的产后抑郁模型;
(2)产后抑郁动物模型的鉴定。
作为优选方案,以上所述的产后抑郁动物模型的建立方法,步骤(1)所述的孕前应激诱导的产后抑郁模型的建立方法包括以下步骤:
(1.1)选取雌性动物,放入束缚装置中,进行孕前每日束缚应激6小时,每日随机联合如下刺激:a摇床1~2小时,b禁食24小时,c禁水24小时,d昼夜颠倒24小时,e潮湿的垫料2~8小时,f足底电刺激10~30分钟。上述孕前慢性应激一共持续2~4周;
(1.2)应激结束后以单笼雌雄交配饲养,直到分娩;
(1.3)产后1~4周检测动物的行为学;
(1.4)对造模动物进行治疗药物筛选。
作为优选方案,以上所述的产后抑郁动物模型的建立方法,步骤(2)产后抑郁动物模型的鉴定包括:
(2.1) 产后1周起,每周对模型组动物的进行蔗糖消耗百分比检测,以评价模型组动物的快感缺乏程度;
(2.2)产后2周对模型组动物进行强迫游泳检测及悬尾测试,评价模型组动物的行为绝望状态;
(2.3)产后2周对模型组动物进行陌生环境摄食检测,评价模型组动物是否伴有焦虑状态;
(2.4) 产后2周对模型组动物及对照组动物子代进行存活率对照;
(2.5)对产后抑郁模型组动物给予抗抑郁药物观察模型组动物对药物的反应。
作为优选方案,以上所述的产后抑郁动物模型的建立方法,所述的束缚装置中为一筒身有气孔的圆筒。
作为优选方案,以上所述的产后抑郁动物模型的建立方法,所述的产后抑郁动物模型的建立方法,其特征在于,所述的动物为雌性小鼠,大鼠,兔子或狗。
作为优选方案,以上所述的产后抑郁动物模型的建立方法,步骤(2.5)所述的抗抑郁药物为氟西汀或氯胺酮。
本发明建立得到的产后抑郁动物模型在筛选抗抑郁药物中的应用。
有益效果:本发明和现有技术相比具有以下优点:
(1)本发明采用孕前应激诱导方法,操作简便、经济,易于操作;
(2) 本发明建立的方法与人产后抑郁症的临床表现高度相似;
(3) 本发明建立得到的产后抑郁动物模型,不仅可以观察母亲表现,还可以观察子代表现;
(4) 本发明获得产后抑郁动物模型的周期短,仅需2个月;
(5)本发明建立得到的产后抑郁动物模型,无物种限制,也可在如大鼠,兔子等动物体进行操作从而获得相应产后抑郁模型;
(6)本发明建立得到的模型动物使用方便,极具研究价值和医药用途的前景。
附图说明
图1为产后2周的小鼠强迫游泳测试。
图2为产后2周的小鼠悬尾测试。
图3为产后2周的小鼠陌生环境摄食测试。
图4为产后2周的小鼠子代存活率。
图5为蔗糖消耗测试、强迫游泳测试及陌生环境摄食测试柱状分析图。
具体实施方式
下面结合具体实施例进一步阐明本发明,应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围,在阅读了本发明之后,本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。
实施例1
一种产后抑郁动物模型的建立方法,其包括以下步骤:
(1)建立孕前应激诱导的产后抑郁模型;
(2)产后抑郁动物模型的鉴定。
以上所述的产后抑郁动物模型的建立方法,步骤(1)所述的孕前应激诱导的产后抑郁模型的建立方法包括以下步骤:
(1.1)选取雌性小鼠,放入束缚装置中:50 ml 离心管所做的束缚管,管身分布有气孔,进行孕前每日束缚应激6小时,每日随机联合如下刺激:a摇床1~2小时,b禁食24小时,c禁水24小时,d昼夜颠倒24小时,e潮湿的垫料2~8小时,f足底电刺激10~30分钟。上述孕前慢性应激一共持续2~4周;
(1.2)应激结束后以单笼雌雄交配饲养,直到分娩;
(1.3)产后4周检测动物的行为学;
(1.4)对造模小鼠进行治疗药物筛选。
以上所述的产后抑郁动物模型的建立方法,步骤(2)产后抑郁动物模型的鉴定包括:
(2.1) 产后1周起,每周对模型组小鼠的进行蔗糖消耗百分比检测,以评价模型小鼠物的快感缺乏程度;
(2.2)产后2周对模型组小鼠进行强迫游泳检测及悬尾测试,评价模型组小鼠的行为绝望状态;如图1和图2所示,与空白对照组,单应激组及单分娩组小鼠相比,产后抑郁模型组即孕前应激诱导的产后小鼠表现出游泳测试和悬尾测试不动时间的显著延长,表明孕前应激诱导的产后小鼠表现出了抑郁症的核心症状:行为绝望。
(2.3)产后2周对模型组小鼠进行陌生环境摄食检测,评价模型组小鼠是否伴有焦虑状态;如图3所示,与空白对照组,单应激组及单分娩组小鼠相比,产后抑郁模型组即孕前应激诱导的产后小鼠表现出陌生环境摄食潜伏时间的显著延长,表明孕前应激诱导的产后小鼠的抑郁样行为是伴有焦虑样改变的。
(2.4) 产后2周对模型组小鼠及对照组小鼠子代进行存活率对照;如图4所示,与单分娩组小鼠相比,产后抑郁模型组即孕前应激诱导的产后小鼠解所生幼鼠的存活率明显下降,表明孕前应激诱导的产后抑郁母鼠改变了对幼鼠的关爱照顾。以上实验结果表明,本发明建立的产后抑郁动物模型可最大程度的模拟临床上自然形成的产后抑郁症所表现的行为,说明本发明建立的产后抑郁动物模型成功。
实施例2
一种产后抑郁动物模型的建立方法,其包括以下步骤:
(1)建立孕前应激诱导的产后抑郁模型;
(2)产后抑郁动物模型的鉴定。
以上所述的产后抑郁动物模型的建立方法,步骤(1)所述的孕前应激诱导的产后抑郁模型的建立方法包括以下步骤:
(1.1)选取雌性大鼠,放入束缚装置中:200 ml 离心管所做的束缚管,管身分布有气孔,进行孕前每日束缚应激4小时,每日随机联合如下刺激:a摇床1~2小时,b禁食24小时,c禁水24小时,d昼夜颠倒24小时,e潮湿的垫料2~8小时,f足底电刺激10~30分钟。上述孕前慢性应激一共持续2~4周;
(1.2)应激结束后以单笼雌雄交配饲养,直到分娩;
(1.3)产后2周检测动物的行为学;
(1.4)对造模大鼠进行治疗药物筛选。
以上所述的产后抑郁动物模型的建立方法,步骤(2)产后抑郁动物模型的鉴定包括:
(2.1) 产后1周起,每周对模型组大鼠的进行蔗糖消耗百分比检测,以评价模型大鼠物的快感缺乏程度;
(2.2)产后2周对模型组大鼠进行强迫游泳检测及悬尾测试,评价模型组大鼠的行为绝望状态;
(2.3)产后2周对模型组大鼠进行陌生环境摄食检测,评价模型组大鼠是否伴有焦虑状态;
(2.4) 产后2周对模型组大鼠及对照组大鼠子代进行存活率对照;
(2.5)对产后抑郁模型组大鼠给予抗抑郁药物观察模型组大鼠对药物的反应。
实施例3 产后抑郁药物检测
通过腹腔注射的方法,分别将药物氟西汀和氯胺酮注射到本发明实施例1建立的产后抑郁模型组小鼠体内,氟西汀以产后第1天起每日给药连续21天,氯胺酮给药组以产后第21天单次给药,24小时候检测小鼠的行为学变化。
如图5所示,慢性氟西汀给药在孕前应激诱导的产后抑郁小鼠的蔗糖消耗测试、强迫游泳测试及陌生环境摄食测试中的抗抑郁效果不明显,而氯胺酮可以显著缓解模型小鼠的抑郁样表现。说明本发明建立的产后抑郁动物模型可以用于筛选抗抑郁药物。
本发明所涉及孕前应激方法建立产后抑郁模型的方法,更加接近于临床致病诱因,可以最大程度的模拟临床上自然形成的产后抑郁症,也有利于研究产后抑郁的发病机制及治疗药物靶点的设计。并且,孕前应激诱导产后抑郁模型个体之间不存在手术操作或者药物剂量导致的差异,其背景高度一致,可以作为产后抑郁新药筛选的有用工具。本发明建立的动物模型使用方便,极具研究价值和医药用途的前景。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (6)
1.一种产后抑郁动物模型的建立方法,其特征在于,它包括以下步骤:
(1)建立孕前应激诱导的产后抑郁模型;
(2)产后抑郁动物模型的鉴定。
2.根据权利要求1所述的产后抑郁动物模型的建立方法,其特征在于,步骤(1)所述的孕前应激诱导的产后抑郁模型的建立方法包括以下步骤:
(1.1)选取雌性动物,放入束缚装置中,进行孕前每日束缚应激2~8小时,每日随机联合如下刺激:a摇床1~2小时,b禁食24小时,c禁水24小时,d昼夜颠倒24小时,e潮湿的垫料2~8小时,f足底电刺激10~30分钟;上述孕前慢性应激一共持续2~4周;
(1.2)应激结束后以单笼雌雄交配饲养,直到分娩;
(1.3)产后1~4周检测动物的行为学;
(1.4)对造模动物进行治疗药物筛选。
3.根据权利要求1所述的产后抑郁动物模型的建立方法,其特征在于,步骤(2)产后抑郁动物模型的鉴定包括:
(2.1) 产后1周起,每周对模型组动物的进行蔗糖消耗百分比检测,以评价模型组动物的快感缺乏程度;
(2.2)产后2周对模型组动物进行强迫游泳检测及悬尾测试,评价模型组动物的行为绝望状态;
(2.3)产后2周对模型组动物进行陌生环境摄食检测,评价模型组动物是否伴有焦虑状态;
(2.4) 产后2周对模型组动物及对照组动物子代进行存活率对照;
(2.5)对产后抑郁模型组动物给予抗抑郁药物观察模型组动物对药物的反应。
4.根据权利要求2或3所述的产后抑郁动物模型的建立方法,其特征在于,所述的动物为雌性小鼠,大鼠,兔子或狗。
5.根据权利要求2所述的产后抑郁动物模型的建立方法,其特征在于,步骤(2.5)所述的抗抑郁药物为氟西汀或氯胺酮。
6.权利要求1至3任一项建立得到的产后抑郁动物模型在筛选抗抑郁药物中的应用。
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