CN104782687A - 一种水稻稻瘟病的生物防治方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种水稻稻瘟病的生物防治方法，在水稻稻瘟病的发病初期，喷施一次质量分数为0.1%-5%的水葫芦根提取物浸膏的清水稀释液，6-8天后再喷施一次即可。本发明通过对水葫芦的不同器官提取物浸膏的清水稀释液对水稻稻瘟病病原菌分生孢子的抑孢实验，找到了防治水稻稻瘟病的生物防治方法；该方法通过水葫芦根提取物浸膏的清水稀释液抑制水稻稻瘟病病原菌分生孢子，进而抑制水稻稻瘟病病原菌的繁殖，降低了水稻稻瘟病病原菌侵染基数，达到防治病害的目的；本发明更加天然环保，而且原料来源广泛，制作方法简单、成本低。

Description

一种水稻稻瘟病的生物防治方法

技术领域

    本发明植物病害防治领域，具体是一种水稻稻瘟病的生物防治方法。

背景技术

水葫芦（Water Hyacinth）学名：凤眼莲，属雨久花科、凤眼莲属。水葫芦茎叶悬垂于水上，蘖枝匍匐于水面。花为多棱喇叭状，花色艳丽美观。叶色翠绿偏深。叶全缘，光滑有质感。须根发达，分蘖繁殖快，管理粗放，是美化环境、净化水质的良好植物。在生长适宜区，水葫芦繁殖速度极快，常由于过度繁殖，生长时会消耗大量溶解氧，窒息鱼类，几乎成了“污染”的代名词。

吴三洪、高翔等，在2012年第8期的江西农业学报上公开了一篇论文“水葫芦堆制的营养土对培育机插水稻秧苗的影响”，文中指出：将水葫芦堆制的营养土与细土按不同的体积比例混匀后作为床土进行水稻育苗试验,从秧苗株高、根长、根数、床土温度、床土重量等方面研究了营养土对培育机插水稻秧苗的影响。试验结果表明：营养土体积比例为80%的床土的育苗效果最好,其培育出的水稻苗根系发达、根系盘结、苗壮，符合机插水稻秧苗的要求,且其床土重量明显比纯细土的床土要轻。

殷利利等，于2008年在西南大学发表了硕士论文“水葫芦叶枯病诊断及其病原菌的生物学和病理学特性”，文中指出：用从水葫芦获得病菌菌丝悬浮液喷施处理6个科的16种作物(小麦、玉米、水稻、辣椒、番茄、甘蓝、萝卜、白菜、油菜、黄瓜、黑豆、豌豆、大豆、绿豆、花生、棉花)盆栽植株,20d后观察没有见到植株发病。同时,用链格孢的培养滤液处理供试作物种子和作物植株后观察,种子的萌发率以作物植株的生长与清水对照没有显著差异。这表明,链格孢及其产生的毒素对这些作物都没有致病毒性。

水稻是我国的主要粮食作物之一，其种植面积约占全国耕地面积的1/4，年产量约占全国粮食总产的1/2，但是每年由于水稻病害的发生危害，减产达20%-40%。其中稻瘟病发生面积大，流行性强，危害严重，是水稻上的重要病害。稻瘟病又称稻热病，是水稻上为害最重的病害之一，以日照少、雾露持续时间长的山区和气候温和的沿江、沿海地区为重。病菌以菌丝体和分生孢子在稻草和稻谷上越冬，根据发病部位不同可分为苗叶瘟、叶瘟、节瘟、叶枕瘟、穗颈瘟、枝梗瘟、谷粒瘟。以4叶期至分蘖盛期和抽穗期最易感病。

病菌主要以分生孢子和菌丝体在稻草和稻谷上越冬。翌年产生分生孢子借风雨传播到稻株上，萌发侵人寄主向邻近细胞扩展发病，形成中心病株。病部形成的分生孢子，借风雨传播，进行再侵染。播种带菌种子可引起苗瘟。菌丝生长温限8—37℃，最适温度26—28℃。孢子形成温限10—35℃，以25—28℃最适，相对湿度90%以上。孢子萌发需有水存在并持续6—8小时。适温高湿，有雨、雾、露存在条件下有利于发病。适宜温度才能形成附着胞并产生侵入丝，穿透稻株表皮，在细胞间蔓延摄取养分。阴雨连绵，日照不足或时晴时雨，或早晚有云雾或结露条件，病情扩展迅速。同—品种在不同生育期抗性表现也不同，秧苗4叶期、分蘖期和抽穗期易感病，圆秆期发病轻，同—器官或组织在组织幼嫩期发病重。穗期以始穗时抗病性弱。放水早或长期深灌根系发育差，抗病力弱发病重。光照不足，田间湿度大，有利分生孢子的形成、萌发和侵入。山区雾大露重，光照不足，稻瘟病的发生为害比平原严重。偏施迟施氮肥，不合理的稻田灌溉，均降低水稻抗病能力。

防治方法：

（1）因地制宜选用2-3个适合当地抗病品种，如早稻有：早58、湘早籼3号；中稻有：七袋占1号，七秀占3号，水稻旱种时可选用临稻3号、临稻5号、京31119、中国91等抗穗颈瘟品种。水稻进行旱直播时可选用郑州早粳、中花8号等抗病品种。

（2）无病田留种，处理病稻草，消灭菌源。使用土壤消毒剂处理。

（3）加强肥、水管理 科学管理肥、水，既可改善环境条件，控制病菌的繁殖和侵染，又可促使水稻健壮生长，提高抗病性，从而获得高产稳产。注意氮、磷、钾配合施用，基肥、有机肥和化肥配合使用，适当施用含硅酸的肥料（如草木灰、矿渣、窑灰钾肥等），做到施足钾肥，早施追肥，中期看苗、看田、看天巧用施肥技术。硅、镁肥混施，可促进硅酸的吸收，能较大幅度地降低发病率。绿肥埋青量要适当，适量施用石灰可促进其腐烂，中和酸性。冷浸田应注意增施磷肥。

（4）生物防治：预防：在稻瘟病常发期，将奥-力-克(稻瘟康) 按300倍液稀释进行喷雾，重点喷药的部位是植株的上部。发病前期：将稻瘟康按300倍液稀释，并添加适量渗透剂如有机硅等，进行喷雾，重点喷药的部位是植株的上部，3天用药2次。发病中后期：按奥力克稻瘟康75ml+大蒜油15ml，兑水30斤稀释喷雾，3天一次，连用2到3次。

（5）咪鲜胺防治叶温时期在7月上、中旬，叶瘟发生初期用药，每公顷用高科25%氟硅唑咪鲜胺0.75-0.9升对水喷雾或45%咪鲜胺0.42-0.5升对水喷雾，一般隔一周再喷一次。要预防穗颈瘟在水稻始穗期、齐穗期各喷一次预防效果明显。

但是由于常规药剂的长期使用，水稻稻瘟病病原菌已经产生了抗药性，且抗性不断增强，防治效果逐渐下降。目前，国内外还没有将水葫芦提取物用于水稻稻瘟病防治的先例。

发明内容

本发明的目的在于提供一种成本低且不会增加病菌抗药性的水稻稻瘟病的生物防治方法。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种水稻稻瘟病的生物防治方法，在水稻稻瘟病的发病初期，喷施一次质量分数为0.1%-5%的水葫芦根提取物浸膏的清水稀释液，6-8天后再喷施一次即可。

作为本发明进一步的方案：所述水葫芦根提取物浸膏的制备方法，具体步骤如下：

第一步：将水葫芦根置于40℃-60℃的烘箱中干燥5-12小时，并用植物粉碎机粉碎；

第二步：将水葫芦根的粉碎物用有机溶剂浸泡，所述浸泡分3-5进行，每次浸泡时间为5-8小时，浸泡温度为40℃-60℃；过滤除渣，得到质量浓度为0.05-0.10g/mL的提取液；

第三步：将过滤后的提取液在40℃-60℃的温度下减压浓缩，即得到水葫芦根提取物浸膏。

作为本发明进一步的方案：所述有机溶剂为正己烷、石油醚、二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯、二甲苯、丙酮、甲醇、乙醇一种或两种以上的混合溶剂。

作为本发明进一步的方案：第一步中将水葫芦根置于45℃-55℃的烘箱中干燥8-10小时。

作为本发明进一步的方案：第二步中每次浸泡时间为6-7小时，浸泡温度为45℃-55℃。

作为本发明进一步的方案：第三步中所述温度为45℃-55℃。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

本发明通过对水葫芦的不同器官提取物浸膏的清水稀释液对水稻稻瘟病病原菌分生孢子的抑孢实验，找到了防治水稻稻瘟病的生物防治方法；该方法通过水葫芦根提取物浸膏的清水稀释液抑制水稻稻瘟病病原菌分生孢子，进而抑制水稻稻瘟病病原菌的繁殖，降低了水稻稻瘟病病原菌侵染基数，达到防治病害的目的；本发明更加天然环保，而且原料来源广泛，制作方法简单、成本低。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本专利的技术方案作进一步详细地说明。

实施例1

一种水葫芦各组织提取物浸膏的制备方法，具体步骤如下：

第一步：将水葫芦分解成根、茎、叶、花和种子，置于40℃的烘箱中干燥5小时，并分别用植物粉碎机粉碎；

第二步：将水葫芦的根、茎、叶、花和种子的粉碎物分别用有机溶剂浸泡，所述有机溶剂为正己烷；所述浸泡分3进行，每次浸泡时间为5小时，浸泡温度为40℃；过滤除渣，得到质量浓度为0.05g/mL的提取液；

第三步：将过滤后的提取液在40℃的温度下减压浓缩，分别得到水葫芦根提取物浸膏、水葫芦茎提取物浸膏、水葫芦叶提取物浸膏、水葫芦花提取物浸膏和水葫芦种子提取物浸膏。

实施例2

一种水葫芦各组织提取物浸膏的制备方法，具体步骤如下：

第一步：将水葫芦分解成根、茎、叶、花和种子，置于60℃的烘箱中干燥12小时，并分别用植物粉碎机粉碎；

第二步：将水葫芦的根、茎、叶、花和种子的粉碎物分别用有机溶剂浸泡，所述有机溶剂为乙酸乙酯；所述浸泡分5进行，每次浸泡时间为8小时，浸泡温度为60℃；过滤除渣，得到质量浓度为0.10g/mL的提取液；

第三步：将过滤后的提取液在60℃的温度下减压浓缩，分别得到水葫芦根提取物浸膏、水葫芦茎提取物浸膏、水葫芦叶提取物浸膏、水葫芦花提取物浸膏和水葫芦种子提取物浸膏。

实施例3

一种水葫芦各组织提取物浸膏的制备方法，具体步骤如下：

第一步：将水葫芦分解成根、茎、叶、花和种子，置于50℃的烘箱中干燥8小时，并分别用植物粉碎机粉碎；

第二步：将水葫芦的根、茎、叶、花和种子的粉碎物分别用有机溶剂浸泡，所述有机溶剂为乙醇；所述浸泡分4进行，每次浸泡时间为7小时，浸泡温度为50℃；过滤除渣，得到质量浓度为0.08g/mL的提取液；

第三步：将过滤后的提取液在50℃的温度下减压浓缩，分别得到水葫芦根提取物浸膏、水葫芦茎提取物浸膏、水葫芦叶提取物浸膏、水葫芦花提取物浸膏和水葫芦种子提取物浸膏。

实施例4

水葫芦各组织提取物浸膏的清水稀释液对水稻稻瘟病病原菌（Pyricularia oryzae）分生孢子的室内生物测定实验。

1.实验材料：

（1）将实施例3制备的水葫芦根提取物浸膏用清水分别稀释成质量分数为0.05%、0.1%、0.5%、1%、5%的水葫芦根提取物的清水稀释液；

（2）将实施例3制备的水葫芦茎提取物浸膏用清水分别稀释成质量分数为0.05%、0.1%、0.5%、1%、5%的水葫芦茎提取物的清水稀释液；

（3）将实施例3制备的水葫芦叶提取物浸膏用清水分别稀释成质量分数为0.05%、0.1%、0.5%、1%、5%的水葫芦叶提取物的清水稀释液；

（4）将实施例3制备的水葫芦花提取物浸膏用清水分别稀释成质量分数为0.05%、0.1%、0.5%、1%、5%的水葫芦花提取物的清水稀释液；

（5）将实施例3制备的水葫芦种子提取物浸膏用清水分别稀释成质量分数为0.05%、0.1%、0.5%、1%、5%的水葫芦种子提取物的清水稀释液；

2.实验方法：分别将实验材料（1）-（5）倒入直径为75mm的PDA培养基中，用三角玻棒将涂布均匀，再用直径为12mm打孔器制取已活化的水稻稻瘟病病原菌分生孢子 (采自田间，并经分离纯化得到)，菌丝面朝下接种于表面涂布有实验材料（1）-（5）的PDA培养基中央，PDA培养基相对湿度控制在90%以上，并置于25℃恒温培养箱内黑暗培养7天。

3.实验结果：

（1）质量分数为0.05%的水葫芦根提取物的清水稀释液对水稻稻瘟病病原菌分生孢子有一定的抑制效果，但效果不明显，抑制率50%左右；质量分数为0.1%、0.5%、1%、5%的水葫芦根提取物的清水稀释液对水稻稻瘟病病原菌分生孢子具有明显的抑制效果，抑制率均达95%以上；

（2）质量分数为0.05%的水葫芦茎提取物的清水稀释液对水稻稻瘟病病原菌分生孢子基本无抑制效果；质量分数为0.1%、0.5%、1%、5%的水葫芦茎提取物的清水稀释液对水稻稻瘟病病原菌分生孢子有一定抑制效果，但效果不明显，抑制率均在50%以下；

（3）质量分数为0.05%、0.1%的水葫芦叶提取物的清水稀释液对水稻稻瘟病病原菌分生孢子基本无抑制效果；质量分数为0.5%、1%、5%的水葫芦叶提取物的清水稀释液对水稻稻瘟病病原菌分生孢子有一定抑制效果，但效果不明显，抑制率均在30%以下；

（4）质量分数为0.05%、0.1%的水葫芦花提取物的清水稀释液对水稻稻瘟病病原菌分生孢子基本无抑制效果；质量分数为0.1%、0.5%、1%、5%的水葫芦花提取物的清水稀释液对水稻稻瘟病病原菌分生孢子有一定抑制效果，但效果不明显，抑制率均在10%以下；

（5）质量分数为0.05%、0.1%的水葫芦种子提取物的清水稀释液对水稻稻瘟病病原菌分生孢子基本无抑制效果；质量分数为0.5%、1%、5%的水葫芦种子提取物的清水稀释液对水稻稻瘟病病原菌分生孢子有一定抑制效果，但效果不明显，抑制率均在10%以下。

实验结果表明：只有质量分数0.1%-5%的水葫芦根提取物的清水稀释液对水稻稻瘟病病原菌分生孢子具有明显的抑制效果，抑制率均达95%以上；水葫芦其他组织提取物浸膏的清水稀释液对水稻稻瘟病病原菌分生孢子的抑制效果很弱或者基本没有。

实施例5

田间药效试验（采用平行试验的方法来验证实施例4中水葫芦根提取物的清水稀释液对水稻稻瘟病的防治效果。

（1）试验方法：在发病初期，立即进行第一次喷雾，7天后进行第二次施药，每个处理5个小区，每个小区50平米。于药前和第二次药后10天调查统计发病情况，每个小区5点随机取样，每点调查5株水稻，调查整株水稻上每叶片或叶鞘的病斑面积占叶片面积的百分率并分级，计算病情指数和防治效果。所述病情指数=∑（各级叶片发病率×该级代表值）/（调查总叶片数×最高级代表值）×100；所述防治效果（%）=（1-（药前对照病情指数×药后处理病情指数）/（药后对照病情指数×药前处理病情指数））×100。

（2）分级标准：

0级：无病斑；

1级：叶片病斑1-5个，病斑长度小于1cm；

2级：叶片病斑6-10个，部分病斑长度大于1cm；

3级：叶片病斑11-25个，部分病斑连成片，病斑面积占叶面积的10-25%；

4级：叶片病斑26个以上，病斑连成片，病斑面积占叶面积的26-50%；

5级：病斑连成片，病斑面积占叶面积的50%以上。

（3）水葫芦根提取物的清水稀释液对水稻稻瘟病的田间药效试验

表1 水葫芦根提取物的清水稀释液对水稻稻瘟病的田间药效试验结果

注：表1中，S代表水葫芦根提取物的清水稀释液。

由表1可知，质量分数0.1%-5%的水葫芦根提取物的清水稀释液对水稻稻瘟病病原菌的田间药效达90%以上，药效显著；且药效明显高于25%氟硅唑咪鲜胺和45%咪鲜胺。

上面对本专利的较佳实施方式作了详细说明，但是本专利并不限于上述实施方式，在本领域的普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本专利宗旨的前提下做出各种变化。

Claims (6)

1.一种水稻稻瘟病的生物防治方法，其特征在于，在水稻稻瘟病的发病初期，喷施一次质量分数为0.1%-5%的水葫芦根提取物浸膏的清水稀释液，6-8天后再喷施一次即可。

2.根据权利要求1所述的水稻稻瘟病的生物防治方法，其特征在于，所述水葫芦根提取物浸膏的制备方法，具体步骤如下：

第一步：将水葫芦根置于40℃-60℃的烘箱中干燥5-12小时，并用植物粉碎机粉碎；

第二步：将水葫芦根的粉碎物用有机溶剂浸泡，所述浸泡分3-5进行，每次浸泡时间为5-8小时，浸泡温度为40℃-60℃；过滤除渣，得到质量浓度为0.05-0.10g/mL的提取液；

第三步：将过滤后的提取液在40℃-60℃的温度下减压浓缩，即得到水葫芦根提取物浸膏。

3.根据权利要求2所述的水稻稻瘟病的生物防治方法，其特征在于，所述有机溶剂为正己烷、石油醚、二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯、二甲苯、丙酮、甲醇、乙醇一种或两种以上的混合溶剂。

4.根据权利要求2或3所述的水稻稻瘟病的生物防治方法，其特征在于，第一步中将水葫芦根置于45℃-55℃的烘箱中干燥8-10小时。

5.根据权利要求2或3所述的水稻稻瘟病的生物防治方法，其特征在于，第二步中每次浸泡时间为6-7小时，浸泡温度为45℃-55℃。

6.根据权利要求2或3所述的水稻稻瘟病的生物防治方法，其特征在于，第三步中所述温度为45℃-55℃。