CN104774916B - 一种用于检测转移性结直肠癌化疗疗效和/或预后的生物标志物组合及其应用 - Google Patents

一种用于检测转移性结直肠癌化疗疗效和/或预后的生物标志物组合及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN104774916B
CN104774916B CN201410794712.5A CN201410794712A CN104774916B CN 104774916 B CN104774916 B CN 104774916B CN 201410794712 A CN201410794712 A CN 201410794712A CN 104774916 B CN104774916 B CN 104774916B
Authority
CN
China
Prior art keywords
mirna
metastatic colorectal
taqman probe
colorectal cancer
prognosis
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201410794712.5A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104774916A (zh
Inventor
张辰宇
巴
巴一
曾科
李佳璐
陈熹
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nanjing University
Original Assignee
Nanjing University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nanjing University filed Critical Nanjing University
Priority to CN201410794712.5A priority Critical patent/CN104774916B/zh
Publication of CN104774916A publication Critical patent/CN104774916A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104774916B publication Critical patent/CN104774916B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
    • C12Q1/6886—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material for cancer
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/118—Prognosis of disease development
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/178—Oligonucleotides characterized by their use miRNA, siRNA or ncRNA

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明涉及一种用于检测转移性结直肠癌化疗疗效和/或预后的生物标志物组合及其应用。所述miRNA组合包括：miR‑135b、miR‑208b。所述试剂盒包括上述miRNA的TaqMan探针组合。在本发明中，血清较易获得，无需其它组织，属于无创性检查；血清miRNA反映的是机体整体的病理、生理情况，以其作为化疗疗效和预后标志物可以提高检测的准确性；所述试剂盒简化了TaqMan探针库，减少制作成本和生产时间，增加了针对性和实用性，提高了检测的灵敏度和特异性；所述组合、方法、试剂盒不仅能够用于转移性结直肠癌化疗疗效判断，还能用于转移性结直肠癌化疗的预后判断。

Description

一种用于检测转移性结直肠癌化疗疗效和/或预后的生物标 志物组合及其应用
技术领域
本发明属于生物技术领域，涉及一种用于检测转移性结直肠癌化疗疗效和/或预后的生物标志物组合及其应用。
背景技术
结直肠癌是一种原发于大肠的恶性肿瘤，包括结肠癌和直肠癌。结直肠癌因其发部位不同而表现出不同的临床症状及体征，主要有腹痛、便血、腹部包块、肠梗阻等，伴或不伴贫血、发热和消瘦等全身症状。在我国，结直肠癌作为第三大肿瘤，其发病率及死亡率近年来逐年上升。由于诊断技术的不断提高，使新发结直肠癌病例中非转移性疾病的比例大大增加，对于这部分患者，外科手术及辅助化疗是主要治疗手段。但是目前尚缺乏有效的预后判断及化疗疗效评价指标。目前临床上主要依据基于临床病理指标(如肿瘤大小、淋巴结转移数目、远处转移、组织分级等)的TNM分期作为疾病预后的判断及指导临床治疗，但根据此分期判断患者预后存在较大的异质性，亦不能预测肿瘤患者对化疗的反应。
研究表明Ⅱ、Ⅲ期结直肠癌患者经过标准治疗后仍有20％‐30％出现复发,其中40‐50％复发发生在原发灶切除后一年内，80％复发发生在原发灶切除三年内，复发后5年生存率低于1％。约有50％结直肠癌患者最终会进展为转移性疾病而死亡。转移性结直肠癌患者仅有极少数可以经手术及化疗而得到治愈，全身化疗是这类患者的主要治疗方法，以氟尿嘧啶药物为基础联合奥沙利铂或者伊立替康方案已成为晚期结直肠癌的标准治疗方案。此外，近年来抗血管生成药物(贝伐珠单抗)或表皮生长因子单抗(西妥昔单抗或帕尼单抗)联合标准化疗使有效率进一步提高，但有相当一部分病人在治疗时出现化疗药物耐药甚至开始即出现不敏感最终因疾病进展而死亡。因此，筛选出对化疗敏感的人群在临床实践中显得尤为重要，可使化疗无效人群避免不必要的毒副作用及承担巨大的经济负担，但至今尚没有有效的手段用于化疗药物敏感人群的选择，寻求有效的标志物用于化疗敏感性指标具有极大的应用前景。
微小核糖核酸(microRNA,miRNA)是一类长约19至23个核苷酸的非编码单链小核糖核酸分子,其主要功能是参与基因转录后水平调控。miRNA通过与靶mRNA 3’端非翻译序列完全或部分互补结合,导致靶mRNA降解或转录后翻译抑制从而调控靶基因的表达。miRNA参与1/3人类蛋白编码基因调控，它与多种生理活动有关，如生长发育、细胞增殖、细胞凋亡、细胞分化等；也与许多疾病的发生发展密切相关，如糖尿病、心血管疾病、肿瘤等。最近的研究显示[1-3]，miRNA在肿瘤发生、发展过程中发挥抑癌基因或癌基因样作用。已证实，肿瘤组织和肿瘤细胞中的某些miRNA表达水平发生了变化，相对于正常组织，一些miRNA表达量显著上升或下降。许多癌组织如肺癌、乳腺癌和食管癌等组织都有若干组织特异性miRNA的表达，提示miRNA有肿瘤组织特异性。另外，miRNA的表达也与肿瘤分化程度以及预后有关。最近，大量的研究结果揭示，miRNA在血清中能长期稳定存在，耐RNA酶的降解，一些肿瘤包括非小细胞肺癌、结直肠癌、前列腺癌、卵巢癌和胰腺癌患者血清中miRNA表达谱与正常人有显著差异，均有各自特异的表达谱，同时这种变化还可见于早期癌中。这种稳定存在于血清中的循环miRNA因其用于肿瘤等疾病的早期诊断、预后及疗效判断从而指导个体化治疗显示出潜在的临床应用前景。
目前尚没有利用无创伤性、取材方便的血液标本检测与转移性结直肠癌化疗疗效及预后生物标志物相关的特异性miRNA组合及检测试剂盒。
发明内容
本发明的目的就在于通过对患者接受化疗前的血清样本miRNA进行检测和比对，分析miRNA表达水平与化疗敏感性的关系，联系患者的生存资料及治疗效果，筛选一组与转移性结直肠癌化疗疗效及预后相关的血清miRNA，并利用这些miRNA的TaqMan探针制备出适用于临床诊疗用途的试剂盒，为预测转移性结直肠癌患者化疗敏感性提供特异性的以及迅速的无创伤性检测手段。
以下是对本发明的进一步描述：
一种用于检测转移性结直肠癌化疗疗效和/或预后的miRNA组合，其包括下列miRNA：miR‐135b及miR‐208b。
上述miRNA组合的筛选方法包括以下步骤(见图1)：
(1)分别收集12例对奥沙利铂(FOLFOX)敏感和不敏感患者化疗前混合血清样本，提取总RNA；
(2)采用高灵敏度、高精确性和高重复性的低密度芯片技术(TaqMan low densityArray technology)进行miRNAs检测，筛选在化疗敏感组(PR+SD)及不敏感组(PD)间稳定差异表达的一组miRNA；
(3)用实时荧光定量PCR方法(TaqMan探针法)对一组标本进行逐个检测，从低密度芯片方法初筛出的miRNA中复筛出表达差异显著miRNA；
(4)进一步用定量PCR方法对大批量标本进行逐个验证，筛选出稳定的表达差异显著的一组miRNA。
具体来说，上述筛选方法包括以下步骤：(1)收集接受奥沙利铂(FOLFOX)患者化疗前混合血清或血浆样本，提取总RNA；(2)运用低密度芯片技术对上述RNA进行检测，初筛出在化疗敏感组(PR+SD)及不敏感组(PD)间稳定差异表达的一组miRNA；(3)将抽提的RNA逆转录为cDNA，采用荧光定量PCR(TaqMan探针法)对初筛出的miRNA进行复筛和验证，挑选出稳定、特异表达的一组miRNA。
本发明使用的检测方法可以选自：RT‐PCR方法、低密度芯片技术(TaqMan lowdensity Array technology)、Real‐time PCR方法中的一种或几种。例如，血清中miRNA分子的检测方法包括以下步骤：
(1)使用Trizol试剂(Invitrogen公司)提取血清总RNA；
(2)通过RNA逆转录反应得到cDNA；
(3)利用TaqMan探针法进行PCR反应；
(4)进行PCR产物的琼脂糖凝胶电泳；
(5)EB染色后在紫外灯下观察结果。
本发明还提供了一种用于检测转移性结直肠癌化疗疗效和/或预后的miRNATaqMan探针组合物，包括miR‐135b和miR‐208b的TaqMan探针。
上述TaqMan探针组合物优选包括以下序列所示的TaqMan探针中的一种或多种：
此外，本发明提供了上述miRNA组合或上述TaqMan探针组合在制备预测转移性结直肠癌患者化疗敏感性的试剂或工具中的用途。
本发明提供了上述miRNA组合或上述TaqMan探针组合在制备检测转移性结直肠癌化疗疗效和/或预后的试剂或工具中的应用。
本发明还提供一种用于预测转移性结直肠癌患者化疗敏感性或检测转移性结直肠癌化疗疗效和/或预后的试剂或工具中的应用。的试剂盒：
作为本发明的一种优选实施方式，上述试剂盒包括Taq酶和dNTP,氯化镁、10×PCR缓冲液(不含Mg2+)和包括miR‐135b和miR‐208b中任意一种或多种miRNA的TaqMan探针(ABI公司提供，专用于miRNA荧光定量)。
上述试剂盒可以进一步优选以下TaqMan探针中的一种或多种：
本发明所述转移性结直肠癌患者接受的标准治疗方案包括以氟尿嘧啶药物为基础，联合奥沙利铂(FOLFOX)方案。
本发明所述的miRNA组合及其对应的TaqMan探针组合，以及含有所述TaqMan探针组合的试剂盒可应用于预测转移性结直肠癌患者化疗敏感性。
本发明的有益效果：
首先，血清相对其它组织较易获得，与食管组织活检相比，属于无创性检查，极大地方便了医疗人员的使用，更减轻了患者的痛苦；
其次，血清中的miRNA反映的是机体整体的病理、生理情况，其检测结果具有精确而详细的指导意义；
第三，所筛选出的miRNA组合对预测转移性结直肠癌患者化疗敏感性的特异性和灵敏度显著高于目前临床上使用的肿瘤标志物CEA(癌胚抗原)，大大提高了诊断的准确性。此外，血清miRNA检测能在分子水平上反映疾病发生过程中基因转录后调控状态，并为转移性结直肠癌的治疗提供了潜在靶点。
第四，本发明的试剂盒所包含的TaqMan探针同样是基于低密度芯片技术、定量PCR技术筛选出的在筛选在化疗敏感组及不敏感组间稳定差异表达的一组血清miRNA TaqMan探针，这样可以增加检测的灵敏度和特异性，提高检测水平。
综上所述，本发明提供的特异的miRNA组合表达量定量检测结果作为预测转移性结直肠癌患者化疗敏感性的中间结果，有助于医师结合临床症状、病史或其他检查信息进行转移性结直肠癌患者的诊断。检测血清中的miRNA简单易行且效果优越。基于此制备的用于检测血清miRNA的试剂盒投入实践使用，仅仅需要病人的血清或血浆而不需要任何其它组织通过最精简的TaqMan探针库来检测血清miRNA水平能拓展转移性结直肠癌的检测指标，提高检测的灵敏度，丰富转移性结直肠癌化疗疗效及预后生物标志物，这些血清miRNA有望成为预测转移性结直肠癌患者化疗敏感性重要标志分子，具有极重要的临床应用潜力和价值。
附图说明
图1为本发明的主要流程图。
图2 miR‐135b和miR‐208b在FOLFOX敏感和不敏感组之间的表达差异。
图3 miR‐135b和miR‐208b预测FOLFOX化疗敏感性的ROC曲线分析。
图4 miR-135b和miR-208b作为预测FOLFOX化疗患者预后指标。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明作进一步的阐述。
实施例1标本的收集
我们共收集了69例对FOLFOX化疗敏感和47例对FOLFOX化疗不敏感患者化疗前的血清，具体信息见下：
表1样本信息表
P1:student‐t test；P2:two‐sidedχ2test.
实施例2敏感组和不敏感组化疗前差异表达的miRNA表达谱初筛
最初筛选阶段，通过分别对12例对FOLFOX化疗敏感和12例对FOLFOX化疗不敏感患者化疗前的混合血清进行低密度芯片检测，初筛出一组在对FOLFOX化疗敏感和不敏感患者血清中差异表达的miRNA。结果发现，共有28种miRNA存在表达差异的miRNAs(详见表1)。
表2低密度芯片初筛出的对FOLFOX化疗敏感和不敏感患者化疗前血清中表达差异的miRNAs
实施例3血清中miRNA的实时荧光定量PCR实验(TaqMan探针法)
采用定量PCR方法对批量标本逐个验证，从低密度芯片测序方法初筛出的miRNA中筛选出对FOLFOX化疗敏感和12例对FOLFOX化疗不敏感患者表达差异显著miRNA。
定量PCR(real‐time PCR)的实验原理及实验步骤同RT‐PCR一样。仪器使用的是ABI Prism 7300荧光定量PCR仪。
(1)酚/氯仿法提取血清总RNA
a)取100ul样品加入到300ul水中，充分混匀后加入200ul(PH＝4.7‐5.5)酸性酚，剧烈震荡混匀，室温静置2min后加入200ul氯仿，再次充分震荡，室温静置5min后12000g室温离心15min
b)小心吸取上清液(约400ul)加入到800ul异丙醇中，再加入PH＝5.2的3M醋酸钠40ul,充分混匀后‐20℃静置30min，16000g，4℃离心20min
c)充分弃上清后，加入75％DEPC‐乙醇1ml，轻柔颠倒数次，16000g，4℃离心10min
d)充分弃上清，室温干燥后，加入40ul DEPC水溶解沉淀，得到RNA样品
(2)制备cDNA样品：将上一步得到的RNA样品通过RNA逆转录反应得到cDNA。逆转录的反应体系包括2μl 5×AMV buffer、1μl 10mM each dNTP mixture(Takara公司)、0.5μlAMV(Takara公司)、4ulDEPC水、0.5μl反向引物(ABI公司)以及2ul RNA样品。反应步骤为16℃孵育30min，42℃反应30min，85℃孵育5分钟
(3)qRT‐PCR：用20ul体系进行qRT‐PCR，体系包括14.77ul H2O，2μl 10×PCRbuffer(Takara公司)，1.2μl 25mM MgCl2(Takara公司)，0.4μl 10mM each dNTP mixture(Takara公司)，0.3ul Taq酶(Takara公司)，0.33ul TaqMan探针(ABI公司)，1ul cDNA。所用的仪器是ABI Prism 7300荧光定量PCR仪，PCR的反应条件是：95℃、5分钟进行1个循环→95℃、15秒，60℃、1分钟进行40个循环。
(4)标准曲线的制备：将合成的10nM miR‐16的成熟体RNA(Takara公司)按(2)中相同的逆转录体系逆转录成cDNA。将所得miR‐16的cDNA用水按10倍梯度稀释100倍、1000倍、10000倍、100000倍、1000000倍，得到一组cDNA。将这组cDNA按(3)中相同的qRT‐PCR体系并且与(3)中的cDNA在同一块PCR板上进行荧光定量PCR
(5)数据分析与处理：扩增结束后根据扩增曲线设定统一的阈值，然后根据标准品miR‐16的浓度及每个浓度对应的CT值绘制标准曲线，并根据此标准曲线及待测样本的CT值计算出该样本所需测定的miRNA的绝对含量。
实施例4定量PCR方法对初筛出的血清miRNA进行验证
用定量PCR方法(TaqMan探针法)对一组受试者标本进行逐个检测，从低密度芯片方法初筛出的28种miRNA中筛选出69例对FOLFOX化疗敏感与47例对FOLFOX化疗不敏感患者之间表达差异显著的miRNA(具体步骤参见实施例3)。结果发现，初筛出的28种miRNA中有4种miRNA在2组样本间存在差异(绝对含量表示方法为均值±标准差，p<0.001)，而其中仅有miR‐135b和miR‐208b变化倍数大于1(见表3和图2)。
表3定量PCR方法复筛出的miRNA
实施例5筛选出的miRNA临床价值评估
我们从miRNA的角度通过对患者接受化疗前的血清样本进行比对，分析miRNA表达水平与化疗敏感性的关系。我们发现在接受FOFLOX化疗患者中，化疗前高水平的miR‐135b及miR‐208b预示着患者对随后的化疗不敏感，可有效将FOLFOX耐药人群和敏感人群分开(图2)，诊断准确性远高于CEA(miR‐135b,AUC 0.877；miR‐208b,AUC 0.771；CEA AUC0.493)(图3)，此外高水平血清miR‐135b及miR‐208中位PFS明显低于低水平患者(P<0.0001)。中位总生存期分别为9.9和3.0个月，预后明显较低水平患者差(图4)。
实施例6用于检测血清miRNA的试剂盒
用于检测食管癌的血清miRNA试剂盒的制作工艺和操作流程是基于低密度芯片技术和定量PCR技术所测结果，将下述TaqMan探针组合：SEQ ID NO：1和2分别收集到PCR试剂盒(RT‐PCR或Real‐time PCR)中制备特定TaqMan探针组合的结直肠癌检测试剂盒。
所述试剂盒的具体组成(每份标本)如下：
所制备试剂盒的具体操作流程如下：
(1)收集受试者的血清样本，提取RNA后逆转录制备cDNA样品；
(2)按照上述配方加样；
(3)进行PCR反应，条件为95℃ 5min，95℃ 15s，60℃ 1min，40个循环。
首先通过低密度芯片技术初筛，然后通过定量PCR技术进一步筛选在疾病及正常生理状态下表达量差异程度大的一组血清miRNA，作为检测结直肠癌的TaqMan探针。该试剂盒包括本发明所提供的血清miRNA TaqMan探针，Taq酶以及dNTP等试剂。所述试剂盒的价值在于以特定的TaqMan探针组合检测血清miRNA表达量，不仅可提高结直肠癌检测的特异性、准确性，有助于该病的早期发现，还可以用于结直肠癌生存期和治疗预后的判断。因此，该试剂盒投入实践使用可以把疾病的诊断和治疗推上一个新高度。

Claims (10)

1.一种用于检测转移性结直肠癌化疗疗效和/或预后的miRNA组合，其特征在于该miRNA组合由miRNA：miR-135b和miR-208b组成; 所述的miR-135b序列为:UAUGGCUUUUCAUUCCUAUGUGA; 所述的 miR-208b序列为AAGCUUUUUGCUCGAAUUAUGU。
2.一种用于检测转移性结直肠癌化疗疗效和/或预后的miRNA TaqMan探针组合物，其特征在于该TaqMan探针组合物由权利要求1所述miRNA的TaqMan探针组成。
3.根据权利要求2所述的TaqMan探针组合物，其特征在于所述miRNA的TaqMan探针序列为：SEQ ID NO. 1和SEQ ID NO. 2。
4.权利要求1所述的miRNA组合在制备检测转移性结直肠癌奥沙利铂化疗疗效和/或预后的试剂或工具中的应用。
5.权利要求1所述的miRNA组合在制备预测转移性结直肠癌患者奥沙利铂化疗敏感性的试剂或工具中的应用。
6.权利要求2或3所述的TaqMan探针组合物在制备检测转移性结直肠癌患者奥沙利铂化疗疗效和/或预后的试剂或工具中的应用。
7.权利要求2或3所述的TaqMan探针组合物在制备预测转移性结直肠癌患者奥沙利铂化疗敏感性的试剂或工具中的应用。
8.一种用于检测转移性结直肠癌奥沙利铂化疗疗效和/或预后的试剂盒，其特征在于该试剂盒以权利要求2或3所述的TaqMan探针组合物作为TaqMan探针。
9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于所述试剂盒还可以包括Taq酶、dNTP、氯化镁和不含Mg2+的10×PCR缓冲液PCR缓冲液。
10.一种用于预测转移性结直肠癌患者奥沙利铂化疗敏感性的试剂盒，其特征在于该试剂盒包含权利要求2或3所述的TaqMan探针组合物。
CN201410794712.5A 2014-12-18 2014-12-18 一种用于检测转移性结直肠癌化疗疗效和/或预后的生物标志物组合及其应用 Expired - Fee Related CN104774916B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410794712.5A CN104774916B (zh) 2014-12-18 2014-12-18 一种用于检测转移性结直肠癌化疗疗效和/或预后的生物标志物组合及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410794712.5A CN104774916B (zh) 2014-12-18 2014-12-18 一种用于检测转移性结直肠癌化疗疗效和/或预后的生物标志物组合及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104774916A CN104774916A (zh) 2015-07-15
CN104774916B true CN104774916B (zh) 2017-05-10

Family

ID=53616683

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410794712.5A Expired - Fee Related CN104774916B (zh) 2014-12-18 2014-12-18 一种用于检测转移性结直肠癌化疗疗效和/或预后的生物标志物组合及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104774916B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108486247B (zh) * 2018-02-12 2021-01-15 中山大学 piRNA-54265在结直肠癌的诊治和预后评价方面的应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2354246A1 (en) * 2010-02-05 2011-08-10 febit holding GmbH miRNA in the diagnosis of ovarian cancer
CN102985563A (zh) * 2010-06-23 2013-03-20 香港中文大学 结肠直肠癌的微rna标志物

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2354246A1 (en) * 2010-02-05 2011-08-10 febit holding GmbH miRNA in the diagnosis of ovarian cancer
CN102985563A (zh) * 2010-06-23 2013-03-20 香港中文大学 结肠直肠癌的微rna标志物

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
MicroRNA-135b Promotes Cancer Progression;Nicola Valeri等;《Cancer Cell》;20140414;第25卷(第4期);第469-483页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN104774916A (zh) 2015-07-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Frampton et al. microRNAs with prognostic significance in pancreatic ductal adenocarcinoma: A meta-analysis
CN101851682B (zh) 一种用于检测食管鳞状细胞癌的微小核糖核酸组合及其应用
CN102876676B (zh) 一种与胰腺癌相关的血清/血浆miRNA标志物及其应用
ES2608322T3 (es) Procedimiento para predecir la respuesta a la quimioterapia en un paciente que padece o está en riesgo de desarrollar cáncer de mama recurrente
CN106834462A (zh) 一组胃癌基因的应用
CN106148529B (zh) 与胃癌相关的LncRNA标记物及其专用检测引物、检测方法、试剂盒与应用
CN104140967A (zh) 与结直肠癌肝转移相关的长链非编码rna clmat1及其应用
Yin et al. Peripheral blood circulating microRNA‐4636/− 143 for the prognosis of cervical cancer
Constâncio et al. MiRNA biomarkers in cancers of the male reproductive system: are we approaching clinical application?
CN107881239A (zh) 血浆中与结直肠癌转移相关的miRNA标志物及其应用
CN103074431B (zh) 检测结直肠癌血清miRNA-128的专用引物、试剂盒及方法
Kahng et al. MicroRNA expression in plasma of esophageal squamous cell carcinoma patients
EP3473729A1 (en) Mmp1 gene transcript for use as marker for diagnosis of ovarian cancer prognosis, and test method
CN106119347B (zh) 基于血清exosomal microRNAs的结直肠癌转移检测的引物和试剂盒
CN107574248A (zh) 一种基于galnt2基因的非小细胞肺癌辅助诊断、预后评价试剂盒及其使用方法
CN104774916B (zh) 一种用于检测转移性结直肠癌化疗疗效和/或预后的生物标志物组合及其应用
Huang et al. Poor prognostic impact of FGF4 amplification in patients with esophageal squamous cell carcinoma
CN110257514A (zh) 一种新的食管癌血液miRNA标志物及其应用
CN103773888B (zh) 基因ikzf3在制备肺癌诊断试剂盒中的应用及试剂盒
CN103911436A (zh) 一种非贲门胃癌早期诊断的血清/血浆miRNA标志物及其应用
CN111575374B (zh) 用于早期胰腺肿瘤检测分子标志物、其检测方法及应用
CN108424962A (zh) 系膜增生性肾小球肾炎的miRNA检测标志物及其诊断试剂盒
CN107916291A (zh) lncRNA组合物及制备诊断预示三阴性型乳腺癌骨转移试剂盒的用途
CN104911248A (zh) 一种用于ii、iii期结直肠癌诊断及预后的微小核糖核酸组合及其应用
CN106498062A (zh) 一种诊断前列腺癌的产品及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
EXSB Decision made by sipo to initiate substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20170510

Termination date: 20171218