CN104726547A - MicroRNA-199a-3p在制备胃癌诊断试剂盒中的应用 - Google Patents

MicroRNA-199a-3p在制备胃癌诊断试剂盒中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开MicroRNA-199a-3p在制备胃癌诊断试剂盒中的应用。本发明的优点在于：（1）提供的血清生物标志物具有高特异性和高敏感性的特点；（2）利用本发明制作的商品化试剂盒灵敏、安全、可靠、易操作，定量测定人血浆中Mir-199a-3p表达水平，有助于辅助胃癌诊断与早期诊断，和胃癌患者肿瘤负荷的判断。

Description

MicroRNA-199a-3p在制备胃癌诊断试剂盒中的应用
技术领域
本发明涉及生物科学领域，更具体地说，涉及微小RNA-199a-3p在制备胃癌诊断试剂盒中的应用。
背景技术
胃癌是危害人类健康的常见恶性肿瘤，根据世界卫生组织（WHO）2008 年的统计（世界卫生组织年度统计，2008），在全世界范围，胃癌病人的死亡率高居第二。在2006 年WHO 的统计中显示有接近950,000 个新发病例，同时有约700,000 人死于这一种疾病。在我国，每年胃癌新发患者数超过30 万，死于胃癌的人数约16 万，病死率居恶性肿瘤之首，严重威胁人民生命健康( 陈竺, 全国第三次死因回顾抽样调查报告,2008)。为降低死亡率，提高胃癌的疗效，关键是胃癌的“三早”工作，即早期发现、早期诊断及早期治疗。然而，由于绝大多数胃癌患者缺乏特异性的临床症状，故早期胃癌诊断率很低，手术率不足10%（吴云林：外科理论与实践，2005，10:401）；术后病人的生存期也较短。目前，我国胃癌总体5年生存率为43．4％，术后病理分期(pathological TNM，pTNM)I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者的术后5 年生存率分别为75．65％、58．73％、28．Ol％和8．42％（刘炳亚: 中华胃肠外科杂志,2010,13:163）。因此，提高胃癌的早期诊断率非常重要。而一般体检和影像学检查作用有限，待能够发现和明确诊断时，往往已到了中、晚期，缺少预警价值。因此，从长远角度看，应致力于发现敏感性和特异性均较好的肿瘤标志物。此外，胃癌异质性大，预后及对治疗的反应性差别较大，对于临床评估预后以及对治疗反应性的预测与评价，均需良好的肿瘤标志物。
理想的肿瘤标志物应符合以下条件：（1）敏感性高；（2）特异性高；（3）肿瘤标志物浓度和肿瘤大小、转移、恶性程度有关，能协助肿瘤分期和判断预后；（4）半衰期短，有效治疗后浓度很快下降，能较快反映体内肿瘤的实际情况；（5）存在于体液，特别是血液中,易于检测( 刘炳亚: 中华胃肠外科杂志,2010,13:163)。
肿瘤血清标志物的研究一直是本领域的研究重点。现已有多种胃癌肿瘤标识物：如癌胚抗原（CEA），存在于胃癌及其它腺癌患者的血清中，但对早期胃癌的诊断意义较小，主要用于胃癌治疗前后的动态观察(Lipkin M:Cancer Research,1988,48:235 ；Lipkin:JBCSupplymental,1992,16:1) ；CA125、CA19-9、CA50、CA724 以及CA242 等部分糖抗原在部分胃癌患者中可升高，但其敏感性仅20 ～ 40％（Kodera Y:The American journal of gastroenterology,1996,91:49 ；Chou M:Di sease Markers,2000,16:105 ；Lai IR etal:Hepato-gastroenterology,2002,49:115 ；Edip U et al:Advances in Theray,2008,25:1075）；还有研究发现肿瘤相关糖蛋白抗原-72（TAG-72）对胃癌的敏感性为69%，特异性为84％（刘军等：实用医学杂志，1999，15:4）；糖蛋白抗原MG7-Ag 在血清中有40％ -60％的阳性检出率，在胃癌组织中有80％ -94％的阳性检出率（Ren J:Cancer，2000，88 ：280）；核小体组蛋白类抗原(IPO—38) 作为胃癌诊断的敏感性为57.4%，特异性超过90%（Hao Y etal:JProteome Res,2008，7:3668）以上这些指标均有利于早期胃癌的诊断。某些肿瘤基因，如DDC、c-myc、c-erb-2、p53 以及nm23 等对胃癌的发生、转移也有一定意义，但广泛应用于临床仍受限制（刘倩等，人民卫生出版社，2004）。
由于现有的胃癌生物标识物在灵敏度和特异性上的缺陷，虽然在疗效监测、提示复发、判断预后和高危人群的普查中具有一定的价值，但目前仍不能用于胃癌的确诊。为了实现对胃癌的早期高灵敏性，高特异性的诊断，急需在分子水平上寻找到更敏感、更特异的胃癌生物标志物。
本发明前期采用miRNA芯片和定量RT-PCR的方法，分析了180例胃癌病人和80例健康对照的血浆标本，给出了候选血清生物标志物，以期早期诊断和有效治疗胃癌。microRNA（miRNA，或miR）是一类进化上保守的非编码小分子RNA，长度约为20-24nt，由DNA转录生成，但并不翻译成蛋白质。成熟的miRNA与Argonaute蛋白组成RNA诱导的沉默复合体（RNA-induced silencing complex, RISC），能与靶基因的mRNA 3’端非翻译区（3’UTR）序列发生特异性结合，通过诱导靶基因mRNA降解或抑制其翻译导致靶基因沉默。占人类基因组1％的miRNA基因通过抑制它的靶基因，调控着成千上万个编码基因的mRNA，使各种蛋白的表达处在一个合适的水平。miRNA的调控作用于生命体发生、生长、发育、分化和死亡的各个过程。
近年来, miRNA-199家族与肿瘤的关系引起了许多学者的高度重视。Garzon等对急性髓细胞样白血病血液样本进行研究, 发现miRNA-199a的高表达与不良预后相关（Garzon R, Volinia S, Liu CG, et al.MicroRNA signatures associated with cyto -genetics and prognosis in acute myeloid leukemia. Blood 2008; 111(6): 3183-3189.）。但也有研究发现miRNA-199a在大鼠口腔癌模型组织和人肝癌组织中表达下调在胃癌的研究中（Yu T, Wang XY, Gong RG, et al. The expression profile of microRNAs in a model of 7,12-dimethyl-benz anthrance-induced oral carcinogenesis in Syrian hamster. J Exp Clin），Song等发现miRNA-199a在胃癌细胞系和组织中显著上调，通过MAP3K11基因促进胃癌细胞的增殖和转移，并与预后相关。（Song G, Zeng HZ, Li J,et al. miR-199a Regulates the Tumor Suppressor Mitogen-Activated Protein Kinase Kinase Kinase 11 in Gastric Cancer. Biol Pharm Bull 2010; 33(11): 1822-1827）。
发明内容
本发明的目的在于提供MicroRNA-199a-3p在制备胃癌诊断试剂盒中的应用。
为实现以上目的，本发明公开以下技术方案：MicroRNA-199a-3p在制备胃癌诊断试剂盒中的应用。 
本发明的优点在于：（1）提供的血清生物标志物具有高特异性和高敏感性的特点；（2）利用本发明制作的商品化试剂盒灵敏、安全、可靠、易操作，定量测定人血浆中Mir-199a-3p表达水平，有助于辅助早期诊断胃癌。
附图说明
图1为胃癌病人术前和术后血浆中miRNA-199a-3p表达量的比较。 
图2为胃癌病人术前和术后血浆中miRNA-151-5p表达量的比较。
图3为血浆中miRNA-199a-3p、miRNA-151-5p表达和联合肿瘤指标对胃癌判断的ROC曲线比较。 
图4血浆中miRNA-199a-3p、miRNA-151-5p表达和联合肿瘤指标对早期胃癌判断的ROC曲线比较。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，例如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册(New York：Cold Spring Harbor Laboratory Press，1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。
实施例1. 血清miRNA-199a-3p作为胃癌分子标志物的研究
为研究miRNA作为血清标志物，首先收集经手术治疗的20例胃癌病人术前和20例健康对照者的血浆标本。抽提血浆中的总RNA，采用miRNA芯片，检测胃癌病人和健康对照者血浆中miRNA的表达谱，比较并筛选出具有显著差异的miRNAs。在miRNA芯片筛选的959个人类miRNAs中，通过比较胃癌病人和健康对照者的miRNA表达谱，发现44个miRNAs有显著差异，其中37个miRNAs显著上调，7个miRNAs显著下调。利用这44个差异miRNAs进行聚类分析，能将胃癌病人和健康对照者较好的区分开。设定2倍差异表达为cut-off值，差异最显著的5个上调miRNAs（miRNA-199a-3p、miRNA-26b、miRNA-151-5p、let-7f和let-7a）和2个下调miRNAs（miRNA-198和miRNA-720）进入下一步的实时荧光定量RT-PCR筛选。
收集接受手术治疗的30例胃癌病人术前、术后7天和30例健康对照者的血浆标本，通过实时荧光定量RT-PCR的方法，检测血浆中由第一部分miRNA芯片筛选出的差异miRNAs的表达。筛选胃癌病人术前与健康对照者、胃癌病人术前与术后均有显著差异的miRNAs进入大样本的验证。在由miRNA芯片筛选出的5个上调的miRNAs中，与健康对照组比较，胃癌病人血浆中miRNA-199a-3p (46.2±6.3 vs. 9.4±1.2，P=0.002)和miRNA-151-5p (10.7±3.7 vs. 2.9±0.4，P=0.002)的表达量显著升高。行胃癌切除术后血浆中miRNA-199a-3p和miRNA-151-5p的表达均较手术前有显著下降（P<0.05）。而miRNA-26b (P＝0.615)、let-7f (P＝0.692)、let-7a (P＝0.429)和下调的miRNA-198 (P=0.725)及miRNA-720 (P=0.661)的表达量在胃癌病人和健康对照组间无显著差异。因此，筛选出miRNA-199a-3p和miRNA-151-5p进入下一步的大样本验证。图1为胃癌病人术前和术后血浆中miRNA-199a-3p表达量的比较，图2为胃癌病人术前和术后血浆中miRNA-151-5p表达量的比较。
收集经手术治疗的胃癌病人180例、胃癌前病变病人20例、结直肠癌病人20例和健康对照志愿者80例的血浆并抽提总RNA，同样应用实时荧光定量RT-PCR方法，检测由第二部分筛选出的差异miRNAs在胃癌病人、胃癌前病变病人、结直肠癌病人和健康对照者血浆中的表达，分析胃癌病人血浆中miRNAs表达与胃癌临床病理特点的相关性，利用ROC曲线比较它们对胃癌诊断地AUCs，并与传统的肿瘤指标比较它们对胃癌判断的敏感性、特异性和准确性。从而最终验证出血浆中胃癌相关的miRNA肿瘤标志物。大样本的验证中，180例胃癌病人血浆中miRNA-199a-3p的表达量为57.2±7.3，分别较健康对照者的13.9±2.7 (P<0.001)，胃癌前病变者的19.2±2.5 (P＝0.004)和结直肠癌病人的21.1±2.5 (P＝0.004)均显著升高。胃癌病人血浆中miRNA-199a-3p的高表达与肿瘤浆膜侵犯 (P<0.001)、N2-3淋巴结转移 (P=0.014)和Stage III和IV (P=0.003)显著相关；而与性别、年龄、肿瘤大小、位置和病理分化类型无显著相关 (P>0.05)。并且，随着胃癌TNM分期的进展，血浆中miRNA-199a-3p的表达也相应逐步升高。虽然胃癌病人血浆中miRNA-151-5p的表达 (9.1±1.4)也分别较健康对照者 (P＝0.001)，胃癌前病变者 (P＝0.014)和结直肠癌病人 (P＝0.019)显著升高。但其表达与性别、年龄、肿瘤大小、位置、肿瘤浆膜侵犯、淋巴结转移、TNM 分期和病理分化类型均无显著相关。
血浆中miRNA-199a-3p表达对胃癌判断的ROC曲线下面积 (AUC)为0.837，显著高于miRNA-151-5p的0.625 (P<0.001)和联合血清CEA、CA72-4、CA19-9和CA12-5四个肿瘤指标检测的0.681 (P＝0.001)。而miRNA-151-5p与联合肿瘤指标检测的AUC间无显著差异 (P＝0.158)。当血浆miRNA-199a-3p表达的cut-off值为12.15时，其对胃癌判断的敏感性为80％，特异性为75％，准确性为78％。当血浆miRNA-151-5p表达的cut-off值为2.65时，其对胃癌判断的敏感性为61％，特异性为57％，准确性为58％。而联合肿瘤指标检测对胃癌判断的敏感性为40％，特异性为76％，准确性为51％。
180例胃癌病人中有早期胃癌病人35例，其血浆中miRNA-199a-3p的表达为38.6±12.0，显著高于健康对照者。而胃癌前病变者和健康对照者间血浆miRNA-199a-3p的表达无显著差异。血浆中miRNA-199a-3p表达对早期胃癌判断的AUC为0.808，显著高于miRNA-151-5p的0.593 (P<0.001)和联合肿瘤指标检测的0.549 (P<0.001)。当血浆miRNA-199a-3p表达的cut-off值为13.06时，其对早期胃癌判断的敏感性为76％，特异性为74％，准确性为75％。图3为血浆中miRNA-199a-3p、miRNA-151-5p表达和联合肿瘤指标对胃癌判断的ROC曲线比较，图4血浆中miRNA-199a-3p、miRNA-151-5p表达和联合肿瘤指标对早期胃癌判断的ROC曲线比较。
实施例2. Mir-199a-3p在制备胃癌诊断试剂盒中的应用
一种制备诊断胃癌疾病的诊断试剂盒，该试剂盒采用现在临床广泛使用的qRT-PCR技术，应用直接定量检测人血浆中微小核酸片段Mir-199a-3p。具体是：用特定的Total RNA提取液提取处理过的人血浆，获得血浆中所有RNA片段，其中包含Mir-199a-3p；将获得的total Rna与特异性Mir-199a-3p引物探针及逆转录试剂混匀形成Mir-199a-3p逆转录体系，进行逆转录从而获得Mir-199a-3p特异性cDNA。再以Mir-199a-3p特异性cDNA作为模板，与Mir-199a-3p特异性引物及聚合酶链式反应试剂混匀形成聚合酶链式反应体系。对该体系进行相关扩增，进而对扩增数据进行整理分析，通过对数据分析定量确定人血清中Mir-199a-3p表达水平。同时以RNU6作为阳性对照，同样方法行逆转录及聚合酶链式反应，对获得内参扩增数据整理分析，使RNU6扩增数据与Mir-199a-3p扩增数据形成对照，进一步确定Mir-199a-3p表达水平。
所述RNA提取液为mirVanaTM PARISTM Kit (Ambion, USA, AM1556)；
所述经处理人血样为用EDTA真空采血管收集，4摄氏度1000rpm10分钟后将上清转移到EDTA离心管再行4摄氏度15000rpm10分钟；
所述特异性逆转录及聚合酶链式反应Mir-199a-3p引物为TaqMan MicroRNA；
Primer (Applied Biosystems, USA)；
所述逆转录试剂为TaqMan  MicroRNA Reserve Transcription Kit；
所述聚合酶链式反应试剂为TapManMicroRNA Assays, TaqMan 2*Universal PCR Master Mix and No AmpErase UNG (Applied Biosystems, USA)。
包括以下步骤：
1.血浆样本的准备
全血标本于室温放置2 小时或4℃过夜后于1000g 离心20 分钟左右，取上清即可；
立即检测；或进行分装，并将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。解冻后的样品应再次离心，然后检测。
2.血清Total RNA提取
取400uL血清与2倍体积的溶解液（2* Denaturing Solution）混匀，加入与血浆同体积的酸酚氯仿（Acid–Phenol Chloroform），剧烈混匀60S。混合液15000rpm离心5min使水相与有机相分离，转移水相并加入相当于水相1.25倍体积无数乙醇混匀离心30S，使之通过滤过柱。取700uL微小RNA冲洗液I（miRNA Wash Solution 1）及1000uL微小RNA冲洗液2/3（Wash Solution 2/3）分别冲洗滤过柱。待滤过柱液体在自然重力下不在流出，是滤芯与收集管匹配，离心去除滤芯残余液体。再将滤芯安装到新的收集管，并加入100uL预热到95摄氏度的溶解液（Elution Solution）并离心30S。最终收集到的液体为最终获得血清中Total RNA,可直接使用或-20摄氏度储存，但应避免反复动溶。
3.RT-PCR
配制逆转录混合液：每15uL为一反应体系依次加入：
0.15uL 100mM dNTPs (with dTTP)
1.00uL MultiScribe? Reverse Transcriptase,50 U/μL
1.50uL 10? Reverse Transcription Buffer
0.19uL RNase Inhibitor, 20U/μL
4.16uL Nuclease-free water 
获得7uL混合液/反应体系，分别取3uL Mir-199a-3p primer及5uL（2）中所述total RNA与7uL混合液混匀，离心，冰上孵育5min，进行逆转录。
配制PCR混合液：每20uL为一反应体系一次加入：
10.00uL TaqMan 2? Universal PCR Master Mix, No AmpErase UNG
7.67uL  Nuclease-free water
1.0 μL of 20? TaqMan MicroRNA Assay mix
获得18.67uL混合液/反应体系，再取1.33uL（3）中cDNA与18.67混合液混匀，混匀，离心，进行聚合酶链式反应。
以同样方法操作内参RNU6B，行RT-PCR。
4.结果判定：
Real-Time PCR结果以Ct值表示，C表示Cycle，t表示threshold，Ct代表每个反应管内荧光信号达到所设阈值所经历的循环数。ΔCt为同一样本目的与内参基因Ct值之差，即：ΔCt=Ct(miR-199a-3p)-Ct(RNU6B)，某一样本miR-199a-3p的表达水平用2-ΔCt表示。
以2-ΔCt表示Mir-199a-3p表达水平，cutoff指为12.5。若2-ΔCt>12.5表明人血浆中Mir-199a-3p表达量处于高水平有患胃癌危险或已经或胃癌；2-ΔCt<12.5表明人血浆中Mir-199a-3p表达量处于低水平提示患胃癌几率小或未患胃癌。 
检验结果解释：对130例健康人血浆、230例胃癌患者血清ROC 分析确立了以上参考值。
本发明所提供的辅助早期诊断胃癌的特异性为74%，敏感性为80%，准确性为78%均大大高于现有技术中胃癌诊断的指标。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

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1.MicroRNA-199a-3p在制备胃癌诊断试剂盒中的应用。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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BARUCH BRENNER ET AL.: "MicroRNAs as a potential prognostic factor in gastric cancer", 《WORLD J GASTROENTEROL》 *
CHEN LI ET AL.: "MiRNA-199a-3p: A Potential Circulating Diagnostic Biomarker for Early Gastric Cancer", 《JOURNAL OF SURGICAL ONCOLOGY》 *
TETSUYA UEDA ET AL.: "Relation between microRNA expression and progression and prognosis of gastric cancer: a microRNA expression analysis", 《LANCET ONCOL》 *

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