CN104725372A - 四环吲哚生物碱衍生物及其制备和应用 - Google Patents
四环吲哚生物碱衍生物及其制备和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104725372A CN104725372A CN201510043073.3A CN201510043073A CN104725372A CN 104725372 A CN104725372 A CN 104725372A CN 201510043073 A CN201510043073 A CN 201510043073A CN 104725372 A CN104725372 A CN 104725372A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- methyl
- base
- dioxy
- benzyl
- phenanthridines
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明涉及一种四环吲哚生物碱衍生物及其制备方法和应用,结构式如下。本发明首次发现四环吲哚生物碱类衍生物能够很好的抑制α-葡萄糖苷酶,在治疗糖尿病药物的开发与应用方面具有广阔的前景;同时本发明对所合成的化合物针对人肝癌细胞(HepG2)、人白血病细胞(K562)、人结肠癌细胞(HT-29)进行了抗肿瘤活性测试,结果表明这类衍生物的IC50<100μM。与其他抗肿瘤药物相比,本发明首次发现四环吲哚生物碱类衍生物能够杀伤肿瘤细胞,尤其针对人白血病细胞(K562)表现出很好的杀伤能力。
Description
技术领域
本发明属于新化合物制备方法及药物领域,尤其是一种四环吲哚生物碱衍生物的制备及其在制备治疗糖尿病和抗肿瘤药物中的应用。
背景技术
靛红是广泛存在于天然产物中的吲哚醌类化合物,也是存在于哺乳动物组织和体液中的内源性活性成分,其N-烷基取代衍生物除了有抗白血病活性外,在抗病毒和抗菌药物研究领域也有应用。
由于靛红本身具有良好的生物活性,对其研究越来越多,通过研究四环靛红来寻找好的治疗糖尿病和抗肿瘤药物成为现在研究的热点。
发明内容
本发明的目的在于提供一种四环吲哚生物碱衍生物及其制备和应用,具体涉及四环吲哚生物碱衍生物的制备方法及其在制备治疗糖尿病和抗肿瘤药物中的应用,本申请合成出四环吲哚生物碱衍生物,这类衍生物具有较好的α-葡萄糖苷酶抑制活性及抗肿瘤活性,合成和纯化方法简单。
本发明的目的通过以下技术方案实现的:
一种四环吲哚生物碱衍生物,衍生物的结构通式如下:
其中R1为甲基或4-甲氧基苄基或苄基或4-三氟甲基苄基化合物的一种,R2为=O或-OCH2C(CH3)2CH2O-化合物的一种,R3为CH3或H化合物的一种,X为NH或O化合物的一种,R4为H、CH3化合物的一种。
而且,所述衍生物为甲基2-[1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸,甲基2-[1,11-二甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸,甲基2-[1-(4-甲氧基苄基)-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸,2-[1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸,甲基2-[5-乙酰基-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸,甲基2-[5-(4-甲氧基苯甲酰己烷)-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸,甲基2-[5-苯甲酰基-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸,甲基2-[5-(4-氯苯甲酰基)-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸,甲基2-{1',5,5-三甲基-2'-氧-1',2',4',5'-四氢螺[(1,3)二恶烷-2,3'-吡咯-(3,2-i)菲啶]-4-基}乙酸,甲基2-[1-甲基-2,3-二氧-5-(苯磺酰基)-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸,甲基2-{5-[(4-氟苯)磺酰基]-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基}乙酸,甲基2-[1-甲基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸,甲基2-[1,11-二甲基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸,甲基2-[1-(4-甲氧基苄基)-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸,甲基2-[1-苄基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸,甲基2-[1-(4-三氟甲基苄基)-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸,甲基2-[1-苄基-11-甲基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸,2-[1-甲基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸,2-[1-苄基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸,2-[1-(4-三氟甲基苄基)-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸。
一种四环吲哚生物碱衍生物的制备。
其中R1为甲基或4-甲氧基苄基或苄基或4-三氟甲基苄基的一种,R2为=O或-OCH2C(CH3)2CH2O-化合物的一种,R3为CH3或H化合物的一种,X为NH或O化合物的一种,R4为H、CH3化合物的一种。
所述R1为甲基、4-甲氧基苄基、苄基、4-三氟甲基苄基之一。
四环吲哚生物碱衍生物抑制α-葡萄糖苷酶活性的应用。
四环吲哚生物碱衍生物在制备抗肿瘤药物或治疗糖尿病药物中的应用。所述抗肿瘤药物包括抗人肝癌、人白血病、人结肠癌的抗肿瘤药物。
本发明的优点和积极效果:
本发明提供的四环吲哚生物碱衍生物对α-葡萄糖苷酶抑制活性进行评价,结果表明这类化合物能够抑制α-葡萄糖苷酶活性,同时所述化合物对人肝癌细胞(HepG2)、人白血病细胞(K562)、人结肠癌细胞(HT-29)进行了抗肿瘤活性的研究。所述化合物用作制备治疗人糖尿病的药物及人肝癌、人白血病、人结肠癌的抗肿瘤药物。
本申请合成出四环吲哚生物碱衍生物,这类衍生物能够抑制α-葡萄糖苷酶活性;对人肝癌细胞(HepG2)、人白血病细胞(K562)、人结肠癌细胞(HT-29)表现出较好的抗肿瘤活性,本发明开拓了一类新型治疗糖尿病和抗肿瘤药物的研究方向。
本发明所述四环吲哚生物碱衍生物具有α-葡萄糖苷酶抑制活性,可以用于治疗糖尿病,可应用于制备治疗糖尿病的药物;所述四环吲哚生物碱衍生物具有抗肿瘤活性,杀伤人肝癌细胞(HepG2)、人白血病细胞(K562)、人结肠癌细胞(HT-29)有很好的杀伤能力,可应用于制备抗肿瘤药物。
附图说明
图1为甲基2-[1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯的核磁共振氢谱
图2为甲基2-[1,11-二甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯的核磁共振氢谱
图3为2-[1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸的核磁共振氢谱
图4为甲基2-{1',5,5-三甲基-2'-氧-1',2',4',5'-四氢螺[(1,3)二恶烷-2,3'-吡咯-(3,2-i)菲啶]-4-基}乙酸酯的核磁共振氢谱
图5为甲基2-[5-苯甲酰基-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯的核磁共振氢谱
图6为甲基2-[1-甲基-2,3-二氧-5-(苯磺酰基)-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯的核磁共振氢谱
图7为甲基2-[1-甲基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸酯的核磁共振氢谱
图8为甲基2-[1-(4-甲氧基苄基)-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸酯的核磁共振氢谱
图9为甲基2-[1-(4-三氟甲基苄基)-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸酯的核磁共振氢谱
图10为2-[1-(4-三氟甲基苄基)-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸的核磁共振氢谱
图11为糖耐量检测图。
具体实施方式
为了理解本发明,下面结合实施例对本发明作进一步说明;下述实施例是说明性的,不是限定性的,不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。
本发明式(Ⅰ)化合物为治疗糖尿病和抗肿瘤药物,本发明设计以吲哚二酮为母环,通过对4,5位的修饰来提高其生物活性,在4,5位上引入一个二元环来研究α-葡萄糖苷酶抑制活性及抗肿瘤活性,在N-1位上引入烷基和不同取代的苄基来研究N-1位基团的影响。本发明的四环吲哚生物碱衍生物可以与其它治疗糖尿病药物和抗肿瘤药物活性成分组合使用。本发明的式(Ⅰ)化合物优选作为治疗糖尿病和抗肿瘤药物。
本发明基于吲哚酮有很好的生物活性,首次合成出四环吲哚生物碱衍生物,这类衍生物具有较好的α-葡萄糖苷酶抑制活性及抗肿瘤活性,其大部分化合物α-葡萄糖苷酶抑制活性好于阿卡波糖;同时大部分化合物对人肝癌细胞(HepG2)、人白血病细胞(K562)、人结肠癌细胞(HT-29)IC50<50μM。
本发明所涉及的化合物在治疗糖尿病及肿瘤药物中的应用,包括但不限于在治疗人糖尿病、人肝癌、人白血病、人结肠癌药物中的应用。
本发明提供式(Ⅰ)化合物
其中R1为甲基或4-甲氧基苄基或苄基或4-三氟甲基苄基化合物的一种,R2为=O或-OCH2C(CH3)2CH2O-化合物的一种,R3为CH3或H化合物的一种,X为NH或O化合物的一种,R4为H、CH3化合物的一种。
R1优选为甲基、4-甲氧基苄基、苄基、4-三氟甲基苄基之一。
R2优选为=O、-OCH2C(CH3)2CH2O-之一。
R3优选为CH3、H之一。
X优选为NH、O之一。
R4优选为H、CH3之一。
本发明特别包括化合物:
(1)甲基2-[1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯
(2)甲基2-[1,11-二甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯
(3)甲基2-[1-(4-甲氧基苄基)-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯
(4)2-[1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸
(5)甲基2-[5-乙酰基-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯
(6)甲基2-[5-(4-甲氧基苯甲酰己烷)-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯
(7)甲基2-[5-苯甲酰基-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯
(8)甲基2-[5-(4-氯苯甲酰基)-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯
(9)甲基2-{1',5,5-三甲基-2'-氧-1',2',4',5'-四氢螺[(1,3)二恶烷-2,3'-吡咯-(3,2-i)菲啶]-4-基}乙酸酯
(10)甲基2-[1-甲基-2,3-二氧-5-(苯磺酰基)-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯
(11)甲基2-{5-[(4-氟苯)磺酰基]-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基}乙酸酯
(12)甲基2-[1-甲基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸酯
(13)甲基2-[1,11-二甲基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸酯
(14)甲基2-[1-(4-甲氧基苄基)-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸酯
(15)甲基2-[1-苄基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸酯
(16)甲基2-[1-(4-三氟甲基苄基)-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸酯
(17)甲基2-[1-苄基-11-甲基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸酯
(18)2-[1-甲基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸
(19)2-[1-苄基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸
(20)2-[1-(4-三氟甲基苄基)-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸
式(Ⅰ)的合成路线
R1优选为甲基、4-甲氧基苄基、苄基、4-三氟甲基苄基之一。
R2优选为=O、-OCH2C(CH3)2CH2O-之一。
R3优选为CH3、H之一。
X优选为NH、O之一。
R4优选为H、CH3之一。
制备实施例
制备实施例1
甲基2-[1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯的合成
取4-溴吲哚二酮2.0g(8.85mmol)放入25mL圆底烧瓶中,加入5mLN,N-二甲基甲酰胺,搅拌下加入K2CO33.66g(26.5mmol),最后加入碘甲烷(10.6mmol)室温下反应4h。TLC检测反应完全后,向反应溶液中加入15mL水,用二氯甲烷萃取,合并有机相,无水硫酸钠干燥,用展开剂石油醚:乙酸乙酯=5:1,200-300目硅胶柱层析纯化,得1-甲基-4-溴吲哚二酮2.8g,产率67%。
取1-甲基-4-溴吲哚二酮1.0g(4.17mmol),丙烯酸甲酯0.43g(5.00mmol),PdCl2(PPh3)20.15g(0.21mmol),CH3COOK 0.57g(5.84mmol),放入微波反应瓶中,加入5mL DMF,充氩气保护,于微波反应器中150℃反应30min。TLC检测反应完全后,将反应溶液用100mL饱和食盐水洗3次,用二氯甲烷萃取,合并有机相,无水硫酸钠干燥,用展开剂石油醚:乙酸乙酯=5:1,200-300目硅胶柱层析纯化,得1-甲基-4-丙烯酸甲酯吲哚二酮2.8g,产率70%。
取1-甲基-4-丙烯酸甲酯吲哚二酮0.5g(2.04mmol)放入25mL圆底烧瓶中,加入2mL N,N-二甲基甲酰胺,搅拌下加入NBS 0.38g(2.14mmol),室温下反应12h。TLC检测反应完全后,向反应溶液中加入15mL水,用二氯甲烷萃取,合并有机相,无水硫酸钠干燥,用展开剂石油醚:乙酸乙酯=3:1,200-300目硅胶柱层析纯化,得1-甲基-4-丙烯酸甲酯-5-溴吲哚二酮2.8g,产率67%。
取1-甲基-4-丙烯酸甲酯-5-溴吲哚二酮0.1g(0.31mmol),2-氨基苯硼酸0.1g(0.5mmol),PdCl2(dppf)11mg(0.015mmol),CH3COOK 45mg(0.46mmol),放入微波反应瓶中,加入5mL 1,4-二氧六环,充氩气保护,于微波反应器中130℃反应30min。TLC检测反应完全后,将反应溶液用100mL饱和食盐水洗3次,用二氯甲烷萃取,合并有机相,无水硫酸钠干燥,用展开剂石油醚:乙酸乙酯=5:1,200-300目硅胶柱层析纯化,得甲基2-[1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯53mg,产率51%。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.40-2.44(m,1H),2.74-2.81(m,1H),3.27(s,3H),3.70(s,3H),5.64(d,1H,J=10.4Hz),6.84(d,1H,J=8.0Hz),6.89(d,1H,J=8.4Hz),6.94(t,1H,J=14.8Hz),7.18(t,1H,J=14.8Hz),7.59(d,1H,J=8.0Hz),7.94(d,1H,J=8.4Hz).
制备实施例2
甲基2-[1,11-二甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯的合成
取1-甲基-4-丙烯酸甲酯-5-溴-7-甲基吲哚二酮0.2g(0.59mmol),2-氨基苯硼酸频哪醇酯0.21g(0.95mmol),PdCl2(dppf)43mg(0.06mmol),CH3COOK 0.12g(1.18mmol),放入微波反应瓶中,加入5mL 1,4-二氧六环,充氩气保护,于微波反应器中135℃反应15min。TLC检测反应完全后,将反应液倒入30mL的水中,用二氯甲烷萃取,有机相每次用30mL饱和食盐水洗3次,无水硫酸钠干燥,用展开剂石油醚:乙酸乙酯=10:1-1:1,200-300目硅胶柱层析纯化,得甲基2-(1,11-二甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢-1H-吡咯[3,2-i]菲啶-4-基)乙酸酯0.11g,产率55%。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.33-2.38(m,1H),2.58(s,3H),2.69-2.76(m,1H),3.49(s,3H),3.69(s,3H),5.60(m,1H),6.74(d,1H,J=7.2Hz),6.87(t,1H,J=15.2Hz),7.14(t,1H,J=15.2Hz),7.55(d,1H,J=8.0Hz),7.63(s,1H).
制备实施例3
甲基2-[1-(4-甲氧基苄基)-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯的合成
取1-(4-甲氧基苄基)-4-丙烯酸甲酯-5-溴吲哚二酮0.2g(0.47mmol),2-氨基苯硼酸频哪醇酯0.16g(0.74mmol),PdCl2(dppf)34mg(0.05mmol),CH3COOK92mg(0.94mmol),放入微波反应瓶中,加入5mL 1,4-二氧六环,充氩气保护,于微波反应器中135℃反应15min。TLC检测反应完全后,将反应液倒入30mL的水中,用二氯甲烷萃取,有机相每次用30mL饱和食盐水洗3次,无水硫酸钠干燥,用展开剂石油醚:乙酸乙酯=10:1-1:1,200-300目硅胶柱层析纯化,得甲基2-(1-(4-甲氧基苄基)-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢-1H-吡咯[3,2-i]菲啶-4-基)乙酸酯0.12g,产率60%。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.43-2.47(m,1H),2.77-2.81(m,1H),3.70(s,3H),3.85(s,3H),4.98-5.02(m,2H),6.51-6.54(m,1H),6.81(d,1H,J=8.0Hz),6.85(d,1H,J=8.0Hz),6.99(d,1H,J=8.0Hz),7.07(t,1H,J=15.6Hz),7.27(t,1H,J=15.6Hz),7.29(d,2H,J=8.0Hz),7.61(d,2H,J=8.0Hz),7.89(d,1H,J=8.0Hz).
制备实施例4
2-[1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸的合成
取甲基2-[1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸0.05g放入25mL圆底烧瓶中,加入5mL 5%NaOH水溶液,搅拌下加入室温下反应12h。TLC检测反应完全后,用二氯甲烷萃取,收集水相,6M盐酸酸化,过滤收集沉淀,沉淀用展开剂二氯甲烷:甲醇=20:1,200-300目硅胶柱层析纯化,得2-[1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸40mg,产率83%。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ2.24-2.29(m,1H),2.44-2.50(m,1H),3.15(s,3H),5.44-5.48(m,1H),6.02(s,1H),6.70(t,1H,J=13.6Hz),6.80(d,1H,J=8.0Hz),7.04(t,1H,J=13.6Hz),7.09(d,1H,J=8.0Hz),7.68(d,1H,J=8.0Hz),8.05(d,1H,J=8.4Hz).
制备实施例5
甲基2-[5-乙酰基-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯的合成
取甲基2-[1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸0.1g(0.3mmol)放入25mL圆底烧瓶中,加入10mL二氯甲烷中,搅拌下加入三乙胺0.1g(0.9mmol),最后加入酰氯(0.36mmol),室温下反应4h。TLC检测反应完全后,向反应溶液中加入15mL水,用二氯甲烷萃取,合并有机相,无水硫酸钠干燥,用展开剂石油醚:乙酸乙酯=10:1-3:1,200-300目硅胶柱层析纯化,得甲基2-[5-乙酰基-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯73mg,产率65%。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.31(s,3H),2.49-2.53(m,1H),2.74-2.78(m,1H),3.25(s,3H),3.69(s,3H),5.58-5.61(m,1H),6.82(d,1H,J=8.0Hz),6.86(d,1H,J=8.4Hz),7.01-7.04(t,1H,J=15.2Hz),7.16(t,1H,J=15.2Hz),7.56(d,1H,J=8.0Hz),7.99(d,1H,J=8.4Hz).
制备实施例6
甲基2-[5-(4-甲氧基苯甲酰基)-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯的合成
称取甲基2-(1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢-1H-吡咯[3,2-i]菲啶-4-基)乙酸酯0.1g(0.30mmol)放入25mL圆底烧瓶中,加入5mL无水二氯甲烷,然后加入三乙胺90mg(0.90mmol),最后冰浴下加入4-甲氧基苯甲酰氯61mg(0.36mmol),室温下反应2h。TLC检测反应完全,向反应液中加入15mL的水,用二氯甲烷萃取,有机相每次用30mL饱和食盐水洗三次,无水硫酸钠干燥,用洗脱剂石油醚:乙酸乙酯=10:1-1:1,200-300目硅胶柱层析纯化,得甲基2-(5-(4-甲氧基苯甲酰基)-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢-1H-吡咯[3,2-i]菲啶-4-基)乙酸酯88mg,产率63%。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.53-2.64(m,2H),3.30(s,3H),3.55(s,3H),3.78(s,3H),6.73(d,2H,J=8.4Hz),6.79(d,1H,J=8.4Hz),6.84-6.87(m,1H),6.99(d,1H,J=8.4Hz),7.05(t,1H,J=15.2Hz),7.19(d,1H,J=8.4Hz),7.28(d,2H,J=8.4Hz),7.69(d,1H,J=6.0Hz),8.09(d,1H,J=8.4Hz).
制备实施例7
甲基2-[5-苯甲酰基-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯的合成
称取甲基2-(1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢-1H-吡咯[3,2-i]菲啶-4-基)乙酸酯0.1g(0.30mmol)放入25mL圆底烧瓶中,加入5mL无水二氯甲烷,然后加入三乙胺90mg(0.90mmol),最后冰浴下加入苯甲酰氯50mg(0.36mmol),室温下反应2h。TLC检测反应完全,向反应液中加入15mL的水,用二氯甲烷萃取,有机相每次用30mL饱和食盐水洗三次,无水硫酸钠干燥,用洗脱剂石油醚:乙酸乙酯=10:1-1:1,200-300目硅胶柱层析纯化,得甲基2-(5-苯甲酰基-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢-1H-吡咯[3,2-i]菲啶-4-基)乙酸酯89mg,产率68%。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.52-2.62(m,2H),3.31(s,3H),3.57(s,3H),6.69-6.90(m,2H),7.00(d,1H,J=8.0Hz),7.04(t,1H,J=16.0Hz),7.18-7.24(m,2H),7.30(d,2H,J=8.4Hz),7.36(t,1H,J=15.6Hz),7.69(d,1H,J=8.0Hz),8.09(d,1H,J=8.0Hz).
制备实施例8
甲基2-[5-(4-氯苯甲酰基)-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯的合成
称取甲基2-(1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢-1H-吡咯[3,2-i]菲啶-4-基)乙酸酯0.1g(0.30mmol)放入25mL圆底烧瓶中,加入5mL无水二氯甲烷,然后加入三乙胺90mg(0.90mmol),最后冰浴下加入4-氯苯甲酰氯63mg(0.36mmol),室温下反应2h。TLC检测反应完全,向反应液中加入15mL的水,用二氯甲烷萃取,有机相每次用30mL饱和食盐水洗三次,无水硫酸钠干燥,用洗脱剂石油醚:乙酸乙酯=10:1-1:1,200-300目硅胶柱层析纯化,得甲基2-(5-(4-氯苯甲酰基)-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢-1H-吡咯[3,2-i]菲啶-4-基)乙酸酯0.1g,产率75%。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.50-2.64(m,2H),3.31(s,3H),3.57(s,3H),6.77-6.86(m,2H),7.00(d,1H,J=8.0Hz),7.06(t,1H,J=17.2Hz),7.20-7.23(m,5H),7.70(d,1H,J=8.0Hz),8.10(d,1H,J=8.0Hz).
制备实施例9
甲基2-{1',5,5-三甲基-2'-氧-1',2',4',5'-四氢螺[(1,3)二恶烷-2,3'-吡咯-(3,2-i)菲啶]-4-基}乙酸酯的合成
取甲基2-[1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸0.13g(0.4mmol)放入50mL圆底烧瓶中,加入15mL环己烷,搅拌下加入新戊二醇50mg(0.5mmol),再加入对甲基苯磺酸10mg(0.06mmol),95℃下反应6h。TLC检测反应完全后,向反应溶液中加入25mL水,用乙酸乙酯萃取,合并有机相,无水硫酸钠干燥,用展开剂石油醚:乙酸乙酯=10:1-5:1,200-300目硅胶柱层析纯化,得甲基2-{1',5,5-三甲基-2'-氧-1',2',4',5'-四氢螺[(1,3)二恶烷-2,3'-吡咯-(3,2-i)菲啶]-4-基}乙酸酯0.11g,产率67%。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.88(s,3H),1.35(s,3H),2.73-2.85(m,2H),3.13(s,3H),3.44-3.47(m,1H),3.52-3.55(m,1H),3.68(s,3H),4.81-4.86(m,2H),5.55-5.58(m,1H),6.70(d,1H,J=8.0Hz),6.75(d,1H,J=8.0Hz),6.80-6.84(m,1H),7.07-7.11(m,1H),7.60(d,1H,J=8.0Hz),7.70(d,1H,J=8.0Hz).
制备实施例10
甲基2-[1-甲基-2,3-二氧-5-(苯磺酰基)-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯的合成
取甲基2-[1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸0.1g(0.3mmol)放入25mL圆底烧瓶中,加入2mL吡啶中,搅拌下加入苯磺酰氯80mg(0.45mmol),最后加入酰氯(0.36mmol),回流反应2h。TLC检测反应完全后,向反应溶液中加入15mL1M HCl水溶液,用二氯甲烷萃取,合并有机相,无水硫酸钠干燥,用展开剂石油醚:乙酸乙酯=10:1-2:1,200-300目硅胶柱层析纯化,得甲基2-[1-甲基-2,3-二氧-5-(苯磺酰基)-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯90mg,产率64%
1H NMR(400MHz,DMSO)δ2.07-2.13(m,1H),2.56-2.60(m,1H),3.15(s,3H),3.65(s,3H),6.41-6.45(m,1H),6.95(d,1H,J=8.4Hz),7.09-7.13(m,2H),7.32-7.35(m,2H),7.39-7.41(m,1H),7.42-7.47(m,2H),7.54(d,1H,J=8.4Hz),7.71(d,1H,J=8.4Hz),7.74(d,1H,J=8.4Hz).
制备实施例11
甲基2-{5-[(4-氟苯)磺酰基]-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基}乙酸酯的合成
称取甲基2-(1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢-1H-吡咯[3,2-i]菲啶-4-基)乙酸酯0.1g(0.30mmol)放入25mL圆底烧瓶中,加入5mL无水吡啶,然后在冰浴下加入4-氟苯磺酰氯70mg(0.36mmol),室温下反应2h。TLC检测反应完全,向反应液中加入15mL的水,用二氯甲烷萃取,有机相每次用30mL1M盐酸水溶液洗三次,无水硫酸钠干燥,用洗脱剂石油醚:乙酸乙酯=10:1-1:1,200-300目硅胶柱层析纯化,得甲基2-(5-(4-氟苯磺酰基)-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢-1H-吡咯[3,2-i]菲啶-4-基)乙酸酯90mg,产率61%。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.41-2.52(m,2H),3.25(s,3H),3.70(s,3H),6.42-6.46(m,1H),6.69-6.74(m,3H),7.18-7.22(m,2H),7.38-7.47(m,2H),7.56(d,1H,J=8.0Hz),7.64(d,1H,J=8.0Hz),7.78(d,1H,J=8.0Hz).
制备实施例12
甲基2-[1-甲基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸酯的合成
取1-甲基-4-丙烯酸甲酯-5-溴吲哚二酮0.1g(0.31mmol),2-羟基苯硼酸0.50g(0.5mmol),PdCl2(dppf)11mg(0.015mmol),CH3COOK 45mg(0.46mmol),放入微波反应瓶中,加入5mL 1,4-二氧六环,充氩气保护,于微波反应器中130℃反应30min。TLC检测反应完全后,将反应溶液用100mL饱和食盐水洗3次,用二氯甲烷萃取,合并有机相,无水硫酸钠干燥,用展开剂石油醚:乙酸乙酯=5:1,200-300目硅胶柱层析纯化,得甲基2-[1-甲基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸酯74mg,产率71%。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.54-2.59(m,1H),2.78-2.84(m,1H),3.27(s,3H),3.70(s,3H),6.38-6.42(m,1H),6.91(d,1H,J=8.4Hz),6.97(d,1H,J=8.4Hz),7.04-7.08(m,1H),7.23-7.28(m,1H),7.60(d,1H,J=8.0Hz),7.93(d,1H,J=8.0Hz).
制备实施例13
甲基2-[1,11-二甲基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸酯的合成
取1-甲基-4-丙烯酸甲酯-5-溴-7-甲基吲哚二酮0.2g(0.59mmol),2-羟基苯硼酸0.13g(0.95mmol),PdCl2(dppf)43mg(0.06mmol),CH3COOK 0.12g(1.18mmol),放入微波反应瓶中,加入5mL 1,4-二氧六环,充氩气保护,于微波反应器中135℃反应15min。TLC检测反应完全后,将反应液倒入30mL的水中,用二氯甲烷萃取,有机相每次用30mL饱和食盐水洗3次,无水硫酸钠干燥,用展开剂石油醚:乙酸乙酯=10:1-1:1,200-300目硅胶柱层析纯化,得甲基2-(1,11-二甲基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃并[3,4-e]吲哚-4-基)乙酸酯0.13g,产率63%。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.34-2.38(m,1H),2.52(s,3H),2.85-2.91(m,1H),3.57(s,3H),3.76(s,3H),5.98-6.01(m,1H),6.96(d,1H,J=8.0Hz),7.09(t,1H,J=16.0Hz),7.27(t,1H,J=16.0Hz),7.63(d,1H,J=8.0Hz),7.84(s,1H).
制备实施例14
甲基2-[1-(4-甲氧基苄基)-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸酯的合成
取1-(4-甲氧基苄基)-4-丙烯酸甲酯-5-溴吲哚二酮0.2g(0.47mmol),2-羟基苯硼酸0.10g(0.74mmol),PdCl2(dppf)34mg(0.05mmol),CH3COOK 92mg(0.94mmol),放入微波反应瓶中,加入5mL 1,4-二氧六环,充氩气保护,于微波反应器中135℃反应15min。TLC检测反应完全后,将反应液倒入30mL的水中,用二氯甲烷萃取,有机相每次用30mL饱和食盐水洗3次,无水硫酸钠干燥,用展开剂石油醚:乙酸乙酯=10:1-1:1,200-300目硅胶柱层析纯化,得甲基2-(1-(4-甲氧基苄基)-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃并[3,4-e]吲哚-4-基)乙酸酯0.15g,产率74%。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.56-2.61(m,1H),2.79-2.85(m,1H),3.72(s,3H),3.88(s,3H),4.82-4.91(m,2H),6.42-6.45(m,1H),6.82(d,1H,J=8.4Hz),6.87(d,1H,J=8.4Hz),6.97(d,1H,J=8.0Hz),7.04(t,1H,J=16.0Hz),7.27(m,3H),7.55(d,2H,J=8.0Hz),7.83(d,1H,J=8.0Hz).
制备实施例15
甲基2-[1-苄基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸酯的合成
取1-苄基-4-丙烯酸叔丁酯-5-溴吲哚二酮0.2g(0.50mmol),2-羟基苯硼酸0.11g(0.80mmol),PdCl2(dppf)37mg(0.05mmol),CH3COOK 98mg(1.0mmol),放入微波反应瓶中,加入5mL 1,4-二氧六环,充氩气保护,于微波反应器中135℃反应15min。TLC检测反应完全后,将反应液倒入30mL的水中,用二氯甲烷萃取,有机相每次用30mL饱和食盐水洗3次,无水硫酸钠干燥,用展开剂石油醚:乙酸乙酯=10:1-1:1,200-300目硅胶柱层析纯化,得甲基2-(1-苄基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃并[3,4-e]吲哚-4-基)乙酸酯0.12g,产率62%。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.58-2.63(m,1H),2.81-2.87(m,1H),3.74(s,3H),4.93-5.02(m,2H),6.44-6.48(m,1H),6.83(d,1H,J=8.4Hz),6.99(d,1H,J=8.0Hz),7.05(t,1H,J=15.2Hz),7.27(t,1H,J=15.2Hz),7.33-7.41(m,5H),7.56(d,1H,J=8.0Hz),7.83(d,1H,J=8.0Hz).
制备实施例16
甲基2-[1-(4-三氟甲基苄基)-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸酯的合成
取1-(4-三氟甲基苄基)-4-丙烯酸甲酯-5-溴吲哚二酮0.2g(0.43mmol),2-羟基苯硼酸94mg(0.68mmol),PdCl2(dppf)31mg(0.04mmol),CH3COOK 81mg(0.86mmol),放入微波反应瓶中,加入5mL 1,4-二氧六环,充氩气保护,于微波反应器中135℃反应15min。TLC检测反应完全后,将反应液倒入30mL的水中,用二氯甲烷萃取,有机相每次用30mL饱和食盐水洗3次,无水硫酸钠干燥,用展开剂石油醚:乙酸乙酯=10:1-1:1,200-300目硅胶柱层析纯化,得甲基2-(1-(4-三氟甲基苄基)-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃并[3,4-e]吲哚-4-基)乙酸酯0.11g,产率56%。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.48-2.53(m,1H),2.72-2.78(m,1H),3.64(s,3H),4.88-4.99(m,2H),6.34-6.38(m,1H),6.69(d,1H,J=8.4Hz),6.90(d,1H,J=8.0Hz),6.97(t,1H,J=16.0Hz),7.18(t,1H,J=16.0Hz),7.40(d,2H,J=8.4Hz),7.47(d,1H,J=8.0Hz),7.56(d,2H,J=8.4Hz),7.75(d,1H,J=8.4Hz).
制备实施例17
甲基2-(1-苄基-11-甲基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基)乙酸酯的合成
取1-苄基-4-丙烯酸甲酯-5-溴-7-甲基吲哚二酮0.2g(0.48mmol),2-羟基苯硼酸0.11g(0.77mmol),PdCl2(dppf)35mg(0.05mmol),CH3COOK 94mg(0.96mmol),放入微波反应瓶中,加入5mL 1,4-二氧六环,充氩气保护,于微波反应器中135℃反应15min。TLC检测反应完全后,将反应液倒入30mL的水中,用二氯甲烷萃取,有机相每次用30mL饱和食盐水洗3次,无水硫酸钠干燥,用展开剂石油醚:乙酸乙酯=10:1-1:1,200-300目硅胶柱层析纯化,得甲基2-(1-苄基-11-甲基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃并[3,4-e]吲哚-4-基)乙酸酯0.10g,产率52%。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.32(s,3H),2.57-2.62(m,1H),2.78-2.84(m,1H),3.72(s,3H),5.20(s,2H),6.46-6.49(m,1H),6.97(d,1H,J=8.0Hz),7.02(t,1H,J=16.0Hz),7.20-7.24(m,3H),7.30(d,1H,J=8.0Hz),7.34-7.37(m,2H),7.55(d,1H,J=8.0Hz),7.57(s,1H).
制备实施例18
2-(1-甲基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基)乙酸的合成
取甲基2-[1-甲基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸0.1g(0.3mmol)放入到25mL圆底烧瓶中,加入1mL四氢呋喃,搅拌使其充分溶解,然后加入5%氢氧化钠6mL。室温下搅拌,TLC检测原料消失,用二氯甲烷萃取(20mL×3),收集水相,向水相中滴加稀盐酸至不在产生沉淀为止,过滤收集沉淀。得2-[1-甲基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸82mg86%。
1H NMR(400MHz,Acetone-d6)δ2.57-2.62(m,1H),2.70-2.74(m,1H),3.28(s,3H),6.43-6.46(m,1H),6.93(d,1H,J=8.0Hz),7.09(t,1H,J=16.0Hz),7.21(d,1H,J=8.4Hz),7.27(t,1H,J=15.6Hz),7.83(d,1H,J=8.0Hz),8.18(d,1H,J=8.0Hz).
制备实施例19
2-(1-苄基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基)乙酸的合成
称取甲基2-(1-苄基-2,3-二氧代-1,2,3,4-四氢苯并吡喃并[3,4-e]吲哚-4-基)乙酸酯0.1g(0.24mmol)放入25mL圆底烧瓶中,加入1mL四氢呋喃,充分溶解后,然后加入10mL 5%NaOH水溶液,将反应混合物室温下反应6h。TLC检测反应完全,冷却至室温,用二氯甲烷萃取,收集水相,水相用稀盐酸酸化直到不再产生沉淀为止,过滤收集沉淀,粗产品用洗脱剂石油醚:乙酸乙酯=10:1-1:1,200-300目硅胶柱层析纯化,得2-(1-苄基-2,3-二氧代-1,2,3,4-四氢苯并吡喃并[3,4-e]吲哚-4-基)乙酸78mg,产率81%。
1H NMR(400MHz,Acetone-d6)δ2.58-2.62(m,1H),2.70-2.76(m,1H),4.97-5.09(m,2H),6.45-6.48(m,1H),6.92(d,1H,J=8.0Hz),7.07(d,1H,J=8.0Hz),7.23-7.38(m,5H),7.48(d,2H,J=8.4Hz),7.76(d,1H,J=8.0Hz),8.05(d,1H,J=8.0Hz).
制备实施例20
2-(1-(4-三氟甲基苄基)-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基)乙酸的合成
称取甲基2-(1-(4-三氟甲基苄基)-2,3-二氧代-1,2,3,4-四氢苯并吡喃并[3,4-e]吲哚-4-基)乙酸酯0.1g(0.21mmol)放入25mL圆底烧瓶中,加入1mL四氢呋喃,充分溶解后,然后加入10mL 5%NaOH水溶液,将反应混合物室温下反应6h。TLC检测反应完全,冷却至室温,用二氯甲烷萃取,收集水相,水相用稀盐酸酸化直到不再产生沉淀为止,过滤收集沉淀,粗产品用洗脱剂石油醚:乙酸乙酯=10:1-1:1,200-300目硅胶柱层析纯化,得2-(1-(4-三氟甲基苄基)-2,3-二氧代-1,2,3,4-四氢苯并吡喃并[3,4-e]吲哚-4-基)乙酸81mg,产率83%。
1H NMR(400MHz,Acetone-d6)δ2.57-2.62(m,1H),2.70-2.77(m,1H),5.11-5.22(m,2H),6.46-6.49(m,1H),6.93(d,1H,J=8.0Hz),7.05-7.10(m,2H),7.27(t,1H,J=16.8Hz),7.70-7.75(m,3H),7.78(d,2H,J=8.0Hz),8.08(d,1H,J=8.0Hz).
实施例1
对人肝癌细胞(HepG2)、人白血病细胞(K562)、人结肠癌细胞(HT-29)的抗肿瘤活性测试
1.材料与仪器
(1)细胞株
人肝癌细胞(HepG2)、人白血病细胞(K562)、人结肠癌细胞(HT-29)
(2)试剂及仪器
二甲基亚砜(Amresco公司)、MTT干粉(Amresco公司)、胎牛血清(Gibco公司)、胰酶消化液(Hyclone公司)、DMEM(Hyclone公司);二氧化碳培养箱(ThermoHERAcell 150)、洁净工作台(HS-840真田洁净设备有限公司)、电子天平(PB150Z-S岛津国际贸易有限公司)、显微镜(Szx-7Olympus)、酶联免疫测试仪(Thermo MK3)。
(3)溶液配制
DMEM培养液的配制:
在500mL锥形瓶中,加入DMEM溶液50mL,双抗5mL,胎牛血清50mL,1mg/mL青链霉素20mL,充分溶解后定容至500mL,除菌后放置冰箱4℃保存。PBS缓冲液的配制:
在1000mL锥形瓶中,称取氯化钠8g,氯化钾0.2g,十二水合磷酸氢二钠3.15g,磷酸二氢钾0.24g,加入800mL纯净水充分搅拌溶解后定容至1000mL,高压灭菌后放置冰箱4℃保存。
MTT溶液的配制:
称取MTT干粉0.5g,溶于100mL PBS缓冲液中,除菌后放置冰箱4℃保存。
2、方法
细胞培养使用的培养液为含1%的青霉素-链霉素溶液,10%的胎牛血清的DMEM细胞培养液,培养条件为37℃、含5%CO2的恒温培养箱。
用血球计数板对细胞进行计数后,用DMEM培养液将其稀释至5x104个/mL;在96孔板的每个孔里加入100μL细胞悬液,培养箱37℃温育24小时;将所要测试化合物稀释至5种浓度:6mM,2mM,0.2mM,20μM,2μM,按照浓度依次加药0.5μL/孔,培养箱37℃温育48小时;加入浓度为5mg/mL的MTT,培养箱37℃温育4小时;加DMSO将细胞溶解,酶标仪测490nm和630nm下的OD值;处理数据,根据OD值计算IC50值。
表1四环吲哚生物碱类化合物的抗肿瘤活性
实施例2
对α-葡萄糖苷酶抑制活性的测试
从啤酒酵母中提取出的α-葡萄糖苷酶商品(Sigma,G5003)为目标蛋白,以4-硝基苯-α-D吡喃葡萄糖苷(pNGP,Sigma,N1377)为底物。化合物和阿卡波糖溶解在DMSO溶液中。酶和底物溶解在浓度为0.05mol/L pH值为6.8的磷酸钾缓冲液中。[1]酶促反应体系中为α-葡萄糖苷酶20μL(0.06U),底物为1mmol/L30μL,待测化合物10μL,140μL磷酸缓冲液,在37℃温敷30分钟。用酶标仪于波长为405nm处检测酶活性。最终结果是由三个独立重复实验平均而得。
表2四环吲哚生物碱类化合物α-葡萄糖苷酶抑制活性
实施例3
动物实验测试
1材料与仪器
(1)实验小鼠
102只清洁级雄性小鼠,体重20-24g,由中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供,每笼5只,隔日换一次垫料以保持笼内干净。实验室保持安静通风,室温22-24℃,湿度20-50%,光暗周期(12h/12h)。随意取72只小鼠给予高脂饲料(粗蛋白≥20%,粗脂肪≥4.0%,粗纤维≥5.0%,水分≤10.0%,灰分≤8.0%,钙1.0-1.8%,磷0.6-1.2%),其他空白组和急性毒性实验组给予普通食料,所用饲料为中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供,饮用水为自来水。
(2)试剂及仪器
安准型血糖仪及检测试纸条、SF-400C型天平、METTLERE ROLEDO实验室pH计、FA1204B电子天平、链脲佐菌素(STZ)、生理盐水0.9%、0.1mol/L柠檬酸缓冲液pH4.4。
2方法
(1)模型建立
取72只成年健康雄性ICR小鼠(20-24g),对给予高脂食料喂养第21天晚禁食过夜,第22天上午采尾血测定血糖,血糖值无>11.1mmol/L。随意取25只小鼠给予一次性腹腔注射STZ 100mg/kg,另取取20只小鼠腹腔注射STZ80mg/kg,隔48h后再次给予腹腔注射STZ 60mg/kg。剩余小鼠高脂食料继续喂养一周后,禁食6h给予一次性腹腔注STZ 100mg/kg。在七天后取尾血测血糖,以血糖>11.1mmol/L为糖尿病。
(2)溶液的的配制
①柠檬酸-柠檬酸纳缓冲液:准确称取柠檬酸2.10g,用无菌去离子水配制成0.1mol/L的柠檬酸溶液100mL;准确称取柠檬酸钠2.94g,用无菌去离子水配制成0.1mol/L柠檬酸钠溶100mL,分别量取57.0mL柠檬酸溶液和43.0mL柠檬酸钠溶液,混匀,用pH计配成pH4.4的柠檬酸一柠檬酸纳缓冲液,现配现用。
②链脉佐菌素(STZ)溶液:将STZ粉末(-20℃保存)溶于柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液中,配制100mg/mL的STZ溶液,现配现用,冰浴、避光保存。
③化合物20悬浮液:分别准确称取制备的0.040g加入生理盐水至4.0mL溶解(给予小鼠100mg/kg剂量)。
④麦芽糖溶液:准确称取麦芽糖2.4g,加入生理盐水至8.0mL溶解。
⑤阿卡波糖溶液:准确称取阿卡波糖(拜糖平)22mg,加入生理盐水至4.0mL溶解。
(3)糖耐量的测定
末次给药前禁食不禁水6h,测量血糖值和体重,给药1h后按2g/kg的剂量灌服麦芽糖溶液,之后分别于10min、30min、60min、90min、120min尾尖采血,用血糖仪测定血糖。
(4)血糖值的测定
给药前测量血糖值后,连续给药七天并在1,3,5,7天尾尖采血,用血糖仪测定血糖。
表3给药期间药物对小鼠血糖的影响
Claims (10)
1.一种四环吲哚生物碱衍生物其特征在于:所述衍生物的结构通式如下:
其中R1选自甲基或4-甲氧基苄基或苄基或4-三氟甲基苄基,R2选自=O或-OCH2C(CH3)2CH2O-,R3选自CH3或H,X选自NH或O,R4选自H或CH3。
2.如权利要求1所述的四环吲哚生物碱衍生物,其特征在于:所述R1为甲基、4-甲氧基苄基、苄基、4-三氟甲基苄基之一。
3.如权利要求1所述的四环吲哚生物碱衍生物,其特征在于:所述衍生物为甲基2-[1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯,甲基2-[1,11-二甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯,甲基2-[1-(4-甲氧基苄基)-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯,2-[1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸,甲基2-[5-乙酰基-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯,甲基2-[5-(4-甲氧基苯甲酰己烷)-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯,甲基2-[5-苯甲酰基-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯,甲基2-[5-(4-氯苯甲酰基)-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯,甲基2-{1',5,5-三甲基-2'-氧-1',2',4',5'-四氢螺[(1,3)二恶烷-2,3'-吡咯-(3,2-i)菲啶]-4-基}乙酸酯,甲基2-[1-甲基-2,3-二氧-5-(苯磺酰基)-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基]乙酸酯,甲基2-{5-[(4-氟苯)磺酰基]-1-甲基-2,3-二氧-2,3,4,5-四氢吡咯-(3,2-i)菲啶-4-基}乙酸酯,甲基2-[1-甲基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸酯,甲基2-[1,11-二甲基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸酯,甲基2-[1-(4-甲氧基苄基)-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸酯,甲基2-[1-苄基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸,甲基2-[1-(4-三氟甲基苄基)-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸酯,甲基2-[1-苄基-11-甲基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸酯,2-[1-甲基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸,2-[1-苄基-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸,2-[1-(4-三氟甲基苄基)-2,3-二氧-1,2,3,4-四氢苯并吡喃-(3,4-e)吲哚-4-基]乙酸。
4.如权利要求1所述的四环吲哚生物碱衍生物的制备方法,其特征在于制备步骤如下:
其中各基团定义如权利要求1所述。
5.如权利要求4所述的四环吲哚生物碱衍生物的制备方法,其特征在于:所述R1为甲基、4-甲氧基苄基、苄基、4-三氟甲基苄基之一;所述R2为=O、-OCH2C(CH3)2CH2O-之一;所述R3为CH3、H之一;所述X为NH、O之一;所述R4为H、CH3之一。
6.如权利要求1所述的一种四环吲哚生物碱衍生物在制备抗肿瘤和抗癌药物中的应用。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于:所述衍生物能够抑制α-葡萄糖苷酶活性。
8.如权利要求6所述的应用,其特征在于:所述衍生物能够抗人肝癌细胞(HepG2)、人白血病细胞(K562)、人结肠癌细胞(HT-29)。
9.如权利要求6所述的应用,其特征在于:所述癌症选自人肝癌、人白血病、人结肠癌。
10.根据权利要求1所述的一种四环吲哚生物碱衍生物在制备治疗糖尿病药物中的应用。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201510043073.3A CN104725372B (zh) | 2015-01-28 | 2015-01-28 | 四环吲哚生物碱衍生物及其制备和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201510043073.3A CN104725372B (zh) | 2015-01-28 | 2015-01-28 | 四环吲哚生物碱衍生物及其制备和应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN104725372A true CN104725372A (zh) | 2015-06-24 |
CN104725372B CN104725372B (zh) | 2017-02-22 |
Family
ID=53449850
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201510043073.3A Expired - Fee Related CN104725372B (zh) | 2015-01-28 | 2015-01-28 | 四环吲哚生物碱衍生物及其制备和应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN104725372B (zh) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105906645A (zh) * | 2016-05-16 | 2016-08-31 | 苏州毕诺佳医药技术有限公司 | 一种新的吲哚生物碱类化合物及其制备方法和医药用途 |
CN106957320A (zh) * | 2017-03-30 | 2017-07-18 | 毛阿龙 | 具有生物活性的苯并四氢吡咯化合物的制备方法 |
CN115872992A (zh) * | 2022-11-18 | 2023-03-31 | 江苏医药职业学院 | 一种Agrocybenine生物碱类似物及其制备方法和应用 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1999049864A1 (en) * | 1998-03-31 | 1999-10-07 | Neurosearch A/S | Indole-2,3-dione-3-oxime derivatives for therapeutic use |
CN102399221A (zh) * | 2011-09-23 | 2012-04-04 | 江苏省中国科学院植物研究所 | 双吲哚喹唑啉类生物碱在制备抗肿瘤、抗真菌药物中的应用 |
CN104130176A (zh) * | 2014-06-13 | 2014-11-05 | 天津科技大学 | 一种1,5-二取代吲哚酮类衍生物及其应用 |
-
2015
- 2015-01-28 CN CN201510043073.3A patent/CN104725372B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1999049864A1 (en) * | 1998-03-31 | 1999-10-07 | Neurosearch A/S | Indole-2,3-dione-3-oxime derivatives for therapeutic use |
CN102399221A (zh) * | 2011-09-23 | 2012-04-04 | 江苏省中国科学院植物研究所 | 双吲哚喹唑啉类生物碱在制备抗肿瘤、抗真菌药物中的应用 |
CN104130176A (zh) * | 2014-06-13 | 2014-11-05 | 天津科技大学 | 一种1,5-二取代吲哚酮类衍生物及其应用 |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105906645A (zh) * | 2016-05-16 | 2016-08-31 | 苏州毕诺佳医药技术有限公司 | 一种新的吲哚生物碱类化合物及其制备方法和医药用途 |
CN106957320A (zh) * | 2017-03-30 | 2017-07-18 | 毛阿龙 | 具有生物活性的苯并四氢吡咯化合物的制备方法 |
CN106957320B (zh) * | 2017-03-30 | 2018-10-23 | 上海博栋化学科技有限公司 | 具有生物活性的苯并四氢吡咯化合物的制备方法 |
CN115872992A (zh) * | 2022-11-18 | 2023-03-31 | 江苏医药职业学院 | 一种Agrocybenine生物碱类似物及其制备方法和应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN104725372B (zh) | 2017-02-22 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Zhu et al. | Design, synthesis, and evaluation of chalcone analogues incorporate α, β-Unsaturated ketone functionality as anti-lung cancer agents via evoking ROS to induce pyroptosis | |
CN102149703B (zh) | 抗癌药物及将其用于治疗转移性恶性黑色素瘤及其他癌症 | |
CN106905313B (zh) | 一氧化氮供体型原小檗碱类衍生物及其制备方法和用途 | |
Gorki et al. | Synthesis and evaluation of antiplasmodial efficacy of β-carboline derivatives against murine malaria | |
CN108503681B (zh) | 白桦脂酸衍生物及其合成方法和应用 | |
CN104812761B (zh) | 双β-咔啉碱类化合物、其制法和其药物组合物与用途 | |
CN109467549B (zh) | 喹啉取代查尔酮类化合物、其制备方法及用途 | |
CN101434600B (zh) | 姜黄素哌啶酮结构类似物及其用于制备抗肿瘤药物的应用 | |
CN103222970B (zh) | 不对称单羰基姜黄素类似物在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
Zhang et al. | Synthesis and evaluation of novel oleanolic acid derivatives as potential antidiabetic agents | |
CN104926814B (zh) | 苦参碱衍生物及其应用 | |
CN104725372B (zh) | 四环吲哚生物碱衍生物及其制备和应用 | |
Zhu et al. | Design, synthesis and biological evaluation of vinyl selenone derivatives as novel microtubule polymerization inhibitors | |
CN104523664A (zh) | 姜黄素类抗肿瘤药物及其应用 | |
AU2021105895A4 (en) | Lycoline B-aryl acrylate derivatives, preparation method and application thereof | |
Zou et al. | Design, synthesis and anti-cancer evaluation of genistein-1, 3, 5-triazine derivatives | |
CN109942630B (zh) | 基于柳胺酚和紫檀芪的天然活性分子偶联化合物及其用途 | |
CN108558985B (zh) | 白桦脂酸衍生物及其合成方法和应用 | |
CN101332198B (zh) | 6-芳基-3-取代羰基吡啶类化合物的药物用途 | |
CN106188209B (zh) | 一种兼具抗肿瘤和抗肿瘤转移活性的二甲双胍偶联物及其应用 | |
CN107141284B (zh) | 黄连碱类衍生物、其制备方法、药物组合物及抗肿瘤用途 | |
CN110028482A (zh) | 布雷菲德菌素a的4-位拼合美法仑类氮芥衍生物及其制备方法和用途 | |
CN110028477A (zh) | 一类布雷菲德菌素a的4-位拼合氮芥衍生物的制备方法和用途 | |
CN107200731A (zh) | 一种含噻唑环吡啶酮衍生物及其制备方法和应用 | |
CN103467452B (zh) | 一种苯甲酰胺类化合物及其应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
EXSB | Decision made by sipo to initiate substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20170222 Termination date: 20180128 |