CN104710653A - 一种壳聚糖水凝胶及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种壳聚糖水凝胶，其所具有的结构单元如下，其中，m取值为400～700中的任意自然数，n的取值为30～100中的任意自然数。本发明还公开了上述壳聚糖水凝胶的制备方法和应用，本发明将聚乙二醇和酪胺分子接枝到壳聚糖分子链中，得到水溶性良好的壳聚糖衍生物，在交联试剂的作用下，得到壳聚糖水凝胶。制备方法工艺简单，制得的壳聚糖水凝胶理化性能和生物性能好、组织相容性好、环保无毒，可安全、有效的应用于伤口组织的修复。
Description
技术领域
本发明涉及到一种壳聚糖水凝胶及其制备方法与应用，属于生物医学材料技术领域。
背景技术
凝胶是溶液中的高分子在一定条件下形成的空间网状结构，溶液作为填充介质分散在其中。水凝胶，顾名思义是以水为介质的凝胶，它物理性质柔软，能吸收大量各种结合形态的水，溶胀后形成的三维网络结构，由于水分含量多还能使高分子材料有部分流体的性质，这一点与人体组织相类似，因此高分子水凝胶有良好的生物组织相容性，同时高分子水凝胶具有组织亲和性。综合上述特性，高分子水凝胶在生物组织工程和组织修复领域得到了广泛的应用。
水凝胶的种类很多，根据其原料来源的不同，可以分为天然/半天然水凝胶和人工合成高分子水凝胶两类。天然和半天然水凝胶以其来源广泛，容易获取并且有一定的生物相容性等原因，在生物医用高分子中较为常见，比如纤维素类，壳聚糖类，海藻酸类以及多糖等。但是天然/半天然水凝胶仍然存在着一些问题，主要表现为分子结构不可控，原料的差异会导致不同批次产品性能的波动。另外，来自动物机体的原料可能有免疫原效应，而且天然材料的机械强度低、降解速率快也限制了其应用的广泛性。人工合成的高分子水凝胶，因为分子结构可以设计控制，性质更加稳定，在人体内存在时间也会更长。但是与天然高分子凝胶相比，其生物相容性不好。为了更好的综合人工合成聚合物和天然高分子的优点，可以将活性分子修饰到人工合成的高分子上，提高其相容性。
甲壳素提取于甲壳类动物的外壳，在自然界中广泛存在，含量仅次于纤维素。其脱乙酰产物壳聚糖是一种具有良好生物组织相容性与血液相容性、能直接被微生物降解、且无毒性的天然高分子材料。由于其具有以上特点被广泛应用于伤口愈合、药物释放体系等方面。
然而，由于壳聚糖力学性能差、脆性较大、水溶性差等缺点成为其应用于外科创伤辅料的主要阻碍因素。PEG是一种生物组织相容性和水溶性良好的生物材料，被广泛应用于蛋白、多肽类生物材料的改性中。酪胺是一种低分子的生物胺，对人体有重要的生理作用。该化合物具有升高血压的药理作用，常被用于作为生化试剂或者制造医药中间体。将PEG和酪胺依次嫁接到壳聚糖上，可以有效提高壳聚糖的水溶性和力学强度。
鉴于水凝胶的重要应用价值，以及综合考虑现有材料以及制备方法的优缺点，本发明将活性小分子接枝到天然高分子材料上，提高其力学性能、水溶性，增强其组织相容性，以此来制造出更好的水凝胶，能够安全、高效的应用于伤口组织的修复。
发明内容
发明目的：本发明的目的在于提供一种理化性能和生物性能好、组织相容性好、环保无毒的水凝胶及其制备方法，以此来制造出更好的水凝胶，能够安全、高效的应用于伤口组织的修复。
技术方案：本发明提供一种壳聚糖水凝胶，其结构单元如下：
其中，m取值为400～700中的任意自然数，n的取值为30～100中的任意自然数。
本发明还提供了一种壳聚糖水凝胶的制备方法，包括以下步骤：
(1)PNC-PEG-PNC(III)的制备：将聚乙二醇(I)溶于有机溶剂中，在氮气保护下加入4-二甲氨基吡啶和三乙醇胺，室温下搅拌10～20min；再滴加溶于有机溶剂中的对硝基苯氯甲酸酯(II)，在氮气保护、室温下反应12～54h；反应结束后，旋蒸浓缩，加入无水乙醚，得固体沉淀，固体沉淀用无水乙醚多次洗涤，真空干燥得固体粉末，即得PNC-PEG-PNC(III)；
(2)PNC-PEG-TA(V)的制备：将步骤(1)得到的PNC-PEG-PNC(III)溶解于有机溶剂中，然后加入溶于有机溶剂中的酪胺(IV)，在氮气保护、室温下，搅拌反应2～12h，旋蒸浓缩得到黄色固体，即得到PNC-PEG-TA(V)；
(3)壳聚糖-聚(乙二醇)-酪胺共轭物(VII)的制备：将步骤(2)得到的PNC-PEG-TA(V) 加入到溶于反应溶剂中的壳聚糖(VI)，在氮气保护、室温下，搅拌反应12～72h后，将反应液加入透析袋中，在去离子水中透析4～7d后，将透析袋中的液体冻干，即得到壳聚糖-聚(乙二醇)-酪胺共轭物(VII)；
(4)壳聚糖水凝胶(VIII)的制备：将聚合物壳聚糖-聚(乙二醇)-酪胺共轭物(VII)溶于缓冲液中，再加入交联试剂，搅拌10～70s使凝胶化，即得壳聚糖水凝胶(VIII)，其中，所述交联试剂为质量比为(1×10-3～4×10-3)：1的辣根过氧化物酶和双氧水混合溶液。
步骤(1)中，聚乙二醇(I)溶于有机溶剂中，使得溶质聚乙二醇(I)的浓度为60～150g/L；对硝基苯氯甲酸酯溶解于有机溶剂中，使得溶质对硝基苯氯甲酸酯的浓度为25～50g/L。
步骤(1)中，聚乙二醇(I)、对硝基苯氯甲酸酯(II)、4-二甲氨基吡啶和三乙醇胺的摩尔比为1∶(3～6)∶(3～6)∶(3～6)。
步骤(1)中，氮气保护、室温条件下优选反应24h。
步骤(2)中，PNC-PEG-PNC(III)溶于有机溶剂中，使得溶质PNC-PEG-PNC的浓度为40～120g/L；酪胺(IV)溶于有机溶剂中，使得溶质酪胺的浓度为2～8g/L。
步骤(2)中，PNC-PEG-PNC(III)与酪胺(IV)的摩尔比为2∶(1～1.5)。
步骤(1)和(2)中，有机溶剂为二氯甲烷或二甲基亚砜或四氢呋喃，优选二氯甲烷。
步骤(2)中，室温、氮气保护下条件下优选反应6h。
步骤(3)中，壳聚糖(VI)溶于反应溶剂中，使得溶质壳聚糖(VI)的浓度为0.33～0.99g/L。
步骤(3)中，聚合物PNC-PEG-TA(V)与壳聚糖(VI)的摩尔比为1∶(300～800)。
步骤(3)中，室温、氮气保护下条件下优选反应24h。
步骤(3)中，优选透析5d。
步骤(3)中，反应溶剂为体积比(80～120)∶1的二甲基亚砜与醋酸混合溶液或者体积比(80～120)∶1的二甲基亚砜与盐酸的混合溶液。
步骤(4)中，聚合物壳聚糖-聚(乙二醇)-酪胺共轭物(VII)和交联试剂的质量比为(0.1～0.15)∶1。
步骤(4)中，所述缓冲溶液为pH 7.2～7.6的磷酸缓冲液，所述交联试剂为质量比为(1×10-3～4×10-3)∶1的辣根过氧化物酶和双氧水混合溶液。
上述方法制备得到的壳聚糖水凝胶也在本发明的保护范围之内。
上述壳聚糖水凝胶可应用于伤口组织修复方面。
有益效果：本发明提供的壳聚糖水凝胶的制备方法工艺简单，制得的壳聚糖水凝胶理化性能和生物性能好、组织相容性好、环保无毒。
具体而言，本发明相对于现有技术，具有以下突出的优势：
(1)该方法通过对壳聚糖进行结构修饰，通过聚乙二醇，将酪胺分子接枝到聚合物主链上，达到提高壳聚糖的溶解性、改善其力学性能和生物活性的目的，解决了天然高分子材料形成凝胶的结构不可控，不同批次品质不同，以及凝胶性质波动等问题；
(2)该方法通过辣根过氧化物酶和双氧水的酶促交联反应，在温和条件下形成凝胶，避免了传统化学交联方法可能引入的具有细胞毒性的交联剂。
附图说明
图1是制备聚合物壳聚糖-聚(乙二醇)-酪胺共轭物(VII)的反应路线图及其分子结构；
图2是壳聚糖水凝胶的电镜图，图中分别是实施例16、17、18制得壳聚糖水凝胶的电镜图；
图3是凝胶血液相容性实验，实验用生理盐水作阴性对照组，溶血率在1.3％左右，蒸馏水组作为阳性对照，血细胞破裂率高，溶血率接近100％，以实施例11所制得的聚合物壳聚糖-聚(乙二醇)-酪胺共轭物(VII)聚合物，用生理盐水配制不同浓度的壳聚糖水凝胶溶液，细胞的溶血率均与对照组接近(1.3％左右)；
图4是壳聚糖水凝胶的粘合力强度实验，以纤维蛋白胶作为对照组，以实施例16、19、20和21为测试组。
具体实施方式
根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的具体物料配比、工艺条件及其结果仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。
以下实施例所用主要试剂来源如下：
聚乙二醇、三乙醇胺、对硝基苯氯甲酸酯、壳聚糖、购自国药集团；4-二甲氨基吡啶购自吉尔生化；酪胺购自百灵威。
以下实施例所用主要仪器设备来源如下：
电子天平：型号YJ6001，上海民桥精密科学仪器有限公司。
紫外分析仪：型号ZF-1，上海宝山顾村电光仪器厂。
低温冷却循环泵：型号DLSB-10/30，上海东玺制冷仪器设备有限公司。
旋转蒸发仪：型号RE-2000E，郑州长城科工贸有限公司。
真空干燥箱：型号DZF-6051，上海静宏科学仪器有限公司。
冷冻干燥机：型号FD-1D-50，北京博医康实验仪器有限公司。
磁力加热搅拌器：型号SZCL-2，上海东玺制冷仪器设备有限公司。
核磁共振仪：型号AVANCE AV-300/500，瑞士BRUKER公司。
流变仪：型号RS600，德国HAAKE公司。
场发射扫描电子显微镜(FE-SEM)：型号S-4800，日本HITACHI公司。
电动搅拌器：型号JJ-1，郑州长城科工贸有限公司。
英斯特朗电子拉力机：型号K-3343，美国MA公司。
实施例1：PNC-PEG-PNC(III)的制备
聚乙二醇(I)(PEG，10.0g，分子量3000，单体分子量62，含羟基摩尔数5mmol)溶于100mL二氯甲烷中。氮气保护下加入溶于20mL二氯甲烷中的4-二甲氨基吡啶(0.916g，7.5mmol)和三乙醇胺(0.759g，7.5mmol)。搅拌15～20min后，向溶液中加入溶于50mL二氯甲烷中的对硝基苯氯甲酸酯(II)(PNC)(1.511g，7.5mmol)。室温、氮气保护下，搅拌反应12h；旋蒸除去大部分二氯甲烷，加入无水乙醚进行沉降，过滤得白色固体。将该固体用无水乙醚洗涤3次，真空干燥得到白色固体粉末，收率为82.1％。
实施例2：PNC-PEG-PNC(III)的制备
聚乙二醇(I)(PEG，10.0g，分子量4000，单体分子量62，含羟基摩尔数5mmol)溶于50mL二氯甲烷中。氮气保护下加入溶于10mL二氯甲烷中的4-二甲氨基吡啶(0.916g，7.5mmol)和三乙醇胺(0.759g，7.5mmol)。搅拌15～20min后，向溶液中加入溶于25mL二氯甲烷中的对硝基苯氯甲酸酯(II)(PNC)(1.511g，7.5mmol)。室温、氮气保护下，搅拌反应24h；旋蒸除去大部分二氯甲烷，加入无水乙醚进行沉降，过滤得白色固体。将该固体用无水乙醚洗涤3次，真空干燥得到白色固体粉末，收率为79.1％。
实施例3：PNC-PEG-PNC(III)的制备
聚乙二醇(I)(PEG，10.0g，分子量5000，单体分子量62，含羟基摩尔数5mmol)溶于150mL二氯甲烷中。氮气保护下加入溶于30mL二氯甲烷中的4-二甲氨基吡啶 (1.221g，10mmol)和三乙醇胺(1.102g，10mmol)。搅拌15～20min后，向溶液中加入溶于30mL二氯甲烷中的对硝基苯氯甲酸酯(II)(PNC)(2.015g，10mmol)。室温、氮气保护下，搅拌反应36h；旋蒸除去大部分二氯甲烷，加入无水乙醚进行沉降，过滤得白色固体。将该固体用无水乙醚洗涤3次，真空干燥得到白色固体粉末，收率为83.2％。
实施例4：PNC-PEG-PNC(III)的制备
与实施例1基本相同，所不同是聚乙二醇(I)、对硝基苯氯甲酸酯(II)、4-二甲氨基吡啶和三乙醇胺的投料摩尔比为1∶3∶3∶4，其过程总收率为81.1％。
实施例5：PNC-PEG-PNC(III)的制备
与实施例1基本相同，所不同是聚乙二醇(I)、对硝基苯氯甲酸酯(II)、4-二甲氨基吡啶和三乙醇胺的投料摩尔比为1∶3∶3∶5，其过程总收率为82.7％。
实施例6：PNC-PEG-TA(V)的制备
PNC-PEG-PNC(III)(4g，2mmol PNC基团)溶于30mL二甲基亚砜中，室温、氮气保护下加入溶于15mL二甲基亚砜中的酪胺(0.137g，1mmol)，搅拌反应4h，旋蒸浓缩，得黄色固体，收率为77.3％。
实施例7：PNC-PEG-TA(V)的制备
PNC-PEG-PNC(III)(4g，2mmol PNC基团)溶于50mL二氯甲烷中，室温、氮气保护下加入溶于25mL二甲基亚砜中的酪胺(0.137g，1mmol)，搅拌反应4h，旋蒸浓缩，得黄色固体，收率为79.6％。
实施例8：PNC-PEG-TA(V)的制备
PNC-PEG-PNC(III)(4g，2mmol PNC基团)溶于60mL二甲基亚砜中，室温、氮气保护下加入溶于25mL二甲基亚砜中的酪胺(0.137g，1mmol)，搅拌反应8h，旋蒸浓缩，得黄色固体，收率为83.5％。
实施例9：PNC-PEG-TA(V)的制备
与实施例6基本相同，所不同是PNC-PEG-PNC(III)与酪胺(IV)的投料摩尔比为2∶1.1，过程总收率为78.4％。
实施例10：PNC-PEG-TA(V)的制备
与实施例6基本相同，所不同是PNC-PEG-PNC(III)与酪胺(IV)的投料摩尔比为2∶1.4，过程总收率为82.4％。
实施例11：壳聚糖-聚(乙二醇)-酪胺共轭物(VII)的制备
壳聚糖(VI)(0.2g，分子量400000，75～85％脱乙酰化)溶于250mL二甲基亚砜与3mL盐酸的混合溶液中，在室温、氮气保护下，加入PNC-PEG-TA(V)0.76g，搅拌反应18h后，将反应液倒入截留分子量为5000的透析袋中，在去离子水中透析除去副产物及未反应物质，每天换6-8次去离子水，透析5天后，冷冻干燥得到白色泡状固体，为壳聚糖-聚(乙二醇)-酪胺共轭物(VII)，收率为66.5％。
实施例12：聚合物壳聚糖-聚(乙二醇)-酪胺共轭物(VII)的制备
壳聚糖(VI)(0.2g，分子量500000，75～85％的脱乙酰化)溶于300mL二甲基亚砜与3mL盐酸溶液混合液中，室温、氮气保护下，加入PNC-PEG-TA(V)0.76g，搅拌反应24h后，将反应液倒入截留分子量5000的透析袋中，在去离子水中透析除去副产物及未反应物质，每天换6-8次去离子水，透析6天后，冷冻干燥得到白色泡状固体，为壳聚糖-聚(乙二醇)-酪胺共轭物(VII)，收率为69.7％。
实施例13：聚合物壳聚糖-聚(乙二醇)-酪胺共轭物(VII)的制备
壳聚糖(VI)(0.2g，分子量600000，75～85％的脱乙酰化)溶于350mL二甲基亚砜与3mL醋酸溶液混合液中，室温、氮气保护下，加入PNC-PEG-TA(V)0.76g，搅拌反应18h后，将反应液倒入截留分子量5000的透析袋中，在去离子水中透析除去副产物及未反应物质，每天换6-8次去离子水，透析7天后，冷冻干燥得到白色泡状固体，为壳聚糖-聚(乙二醇)-酪胺共轭物(VII)，收率为72.8％。
实施例14：聚合物壳聚糖-聚(乙二醇)-酪胺共轭物(VII)的制备。
与实施例11基本相同，所不同是聚合物PNC-PEG-TA(V)与壳聚糖(VI)的投料摩尔比为1∶400，过程总收率为75.9％。
实施例15：聚合物壳聚糖-聚(乙二醇)-酪胺共轭物(VII)的制备。
与实施例11基本相同，所不同是聚合物PNC-PEG-TA(V)与壳聚糖(VI)的投料摩尔比为1∶500，过程总收率为78.4％。
实施例16：壳聚糖水凝胶(VIII)的制备
取壳聚糖-聚(乙二醇)-酪胺共轭物(VII)溶于磷酸盐缓冲液(450μL，0.01M，pH＝7.2)中，室温下配成浓度为5wt％的溶液，然后加入辣根过氧化物酶(0.06mg/mL)和双氧水(0.015wt％)溶液50μL。室温下搅拌，溶液转变为胶状，得到壳聚糖水凝胶，成胶时间10s。
实施例17：壳聚糖水凝胶(VIII)的制备
取聚合物壳聚糖-聚(乙二醇)-酪胺共轭物(VII)溶于磷酸盐缓冲液(450μL，0.01M，pH＝7.4)中，室温下配成浓度为10wt％的溶液，然后加入辣根过氧化物酶(0.06mg/mL)和双氧水(0.015wt％)溶液100μL。室温下搅拌，溶液转变为胶状，得到壳聚糖水凝胶，成胶时间20s。
实施例18：壳聚糖水凝胶(VIII)的制备
取聚合物壳聚糖-聚(乙二醇)-酪胺共轭物(VII)溶于磷酸盐缓冲液(450μL，0.01M，pH＝7.6)中，室温下配成浓度为15wt％的溶液，然后加入辣根过氧化物酶(0.06mg/mL)和双氧水(0.015wt％)溶液150μL。室温下搅拌，溶液转变为胶状，得到壳聚糖水凝胶，成胶时间28s。
实施例19：壳聚糖水凝胶(VIII)的制备
与实施例16基本相同，所不同是加入双氧水溶液浓度为0.030wt％。
实施例20：壳聚糖水凝胶(VIII)的制备
与实施例16基本相同，所不同是加入双氧水溶液浓度为0.045wt％。
实施例21：壳聚糖水凝胶(VIII)的制备
与实施例16基本相同，所不同是加入双氧水溶液浓度为0.060wt％。
实施例22：以实施例16、17和18为例，用电子扫描电镜观察壳聚糖水凝胶的表面交联形态，如图2。
实施例23：以实施例16、19、20和21制得的壳聚糖水凝胶为样品，进行壳聚糖水凝胶的粘合力强度实验，如图4。
壳聚糖水凝胶粘合强度实验的理论依据是美国材料学会制订的标准ASTM F2255-05，这是一种通过拉伸载荷评估组织重叠处的剪切力强度的标准方法，实验在不同浓度H2O2下(表3-5所示)进行。实验中用到的粘连的基板是经过处理的猪皮，将菜市场购得的新鲜猪皮去除脂肪，洗涤干净，切成10mm×20mm长方块状并做好编号。将处理好的壳聚糖水凝胶滴在基板上，迅速用另一块错开覆盖，实验对照组是纤维蛋白胶。实验时，将上下两片猪皮反方向拉伸，随着拉力的增大，原本粘合良好的样本出现松动，直至完全分开。拉伸载荷与水凝胶的机械强度关系密切，水凝胶的机械强度大，拉伸载荷就高，反之拉伸载荷低。可以想象的是水凝胶的体积性质(溶胀比等)和粘合强度相关，而粘合过程需要承载一定程度的外部压力。猪皮肤组织和粘合剂相对的稳定。
实施例24：以实施例11所制得的聚合物壳聚糖-聚(乙二醇)-酪胺共轭物(VII)聚合 物为样品，用生理盐水将其配置成浓度分别为0.01mg/mL，0.1mgm/L，1mg/mL，10mg/mL的溶液，进行凝胶血液相容性实验，如图3。
从大鼠体内取1mL新鲜血液，加入含0.05mmol的乙二胺四乙酸抗凝剂的生理盐水稀释；取出0.2mL的稀释后的大鼠血液，加入含有不同浓度样品的生理盐水溶液中，在体温接近的37℃水浴摇床中动态孵育1h。然后，通过高速离心机分离出血细胞，取上清液测其吸光度。如果红细胞破裂，则其中的血红蛋白会释放出来，上清液会呈现红色。本实验用不含样品的生理盐水作为阴性对照，用蒸馏水作为阳性对照。阳性对照组中，由于渗透压的缘故，红细胞破裂严重，将其破例程度定义为100％，其余样品的吸光度与蒸馏水组对照，得到溶血程度的相对值。实验用生理盐水作阴性对照组，溶血率在1.3％左右，蒸馏水组作为阳性对照，血细胞破裂率高，溶血率接近100％；用生理盐水配制的聚合物壳聚糖-聚(乙二醇)-酪胺共轭物(VII)聚合物材料溶液中，细胞的溶血度均与对照组接近(1.3％左右)。
综合评价：本发明得到的壳聚糖水凝胶，制备方法工艺简单，制得的壳聚糖水凝胶理化性能和生物性能好、组织相容性好、环保无毒，在生物组织修复方面具有良好的应用前景。
Claims (14)
1.一种壳聚糖水凝胶，其结构单元如下：
其中，m取值为400～700中的任意自然数，n的取值为30～100中的任意自然数。
2.一种权利要求1所述的壳聚糖水凝胶的制备方法，其特征在于：它包括以下步骤：
(1)PNC-PEG-PNC(III)的制备：将聚乙二醇(I)溶于有机溶剂中，在氮气保护下加入4-二甲氨基吡啶和三乙醇胺，室温下搅拌10～20min；再滴加溶于有机溶剂中的对硝基苯氯甲酸酯(II)，在氮气保护、室温下反应12～54h；反应结束后，旋蒸浓缩，向浓缩液中加入无水乙醚，得固体沉淀，固体沉淀用无水乙醚多次洗涤，真空干燥得固体粉末，即得PNC-PEG-PNC(III)；
(2)PNC-PEG-TA(V)的制备：将步骤(1)得到的PNC-PEG-PNC(III)溶解于有机溶剂中，然后加入溶于有机溶剂中的酪胺(IV)，在氮气保护、室温下，搅拌反应2～12h，旋蒸浓缩得到黄色固体，即得到PNC-PEG-TA(V)；
(3)壳聚糖-聚(乙二醇)-酪胺共轭物(VII)的制备：将步骤(2)得到的PNC-PEG-TA(V)加入到溶于反应溶剂中的壳聚糖(VI)，在氮气保护、室温下，搅拌反应12～72h后，将反应液加入透析袋中，在去离子水中透析4～7d后，将透析袋中的液体冻干，即得到壳聚糖-聚(乙二醇)-酪胺共轭物(VII)；
(4)壳聚糖水凝胶(VIII)的制备：将聚合物壳聚糖-聚(乙二醇)-酪胺共轭物(VII)溶于缓冲液中，再加入交联试剂，搅拌10～70s使凝胶化，即得壳聚糖水凝胶(VIII)，其中，所述交联试剂为质量比为(1×10-3～4×10-3)：1的辣根过氧化物酶和双氧水混合溶液。
3.根据权利要求2所述的一种壳聚糖水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，聚乙二醇(I)溶于有机溶剂中，使得溶质聚乙二醇(I)的浓度为60～150g/L；对硝基苯氯甲酸酯溶解于有机溶剂中，使得溶质对硝基苯氯甲酸酯的浓度为25～50g/L。
4.根据权利要求2所述的一种壳聚糖水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，聚乙二醇(I)、对硝基苯氯甲酸酯、4-二甲氨基吡啶和三乙醇胺的摩尔比为1∶(3～6)∶(3～6)∶(3～6)。
5.根据权利要求2所述的一种壳聚糖水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，PNC-PEG-PNC(III)溶于有机溶剂中，使得溶质PNC-PEG-PNC(III)的浓度为40～120g/L；酪胺溶于有机溶剂中，使得溶质酪胺的浓度为2～8g/L。
6.根据权利要求2所述的一种壳聚糖水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，PNC-PEG-PNC(III)与酪胺(IV)的摩尔比为2∶(1～1.5)。
7.根据权利要求2所述的一种壳聚糖水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤(1)和(2)中，有机溶剂为二氯甲烷或二甲基亚砜或四氢呋喃。
8.根据权利要求2所述的一种壳聚糖水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，壳聚糖(VI)溶于反应溶剂中，使得溶质壳聚糖(VI)的浓度为0.33～0.99g/L。
9.根据权利要求2所述的一种壳聚糖水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，聚合物PNC-PEG-TA(V)与壳聚糖(VI)的摩尔比为1∶(300～800)。
10.根据权利要求2所述的一种壳聚糖水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，反应溶剂为体积比(80～120)∶1的二甲基亚砜与醋酸混合溶液或者体积比(80～120)∶1的二甲基亚砜与盐酸的混合溶液。
11.根据权利要求2所述的一种壳聚糖水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤(4)中，聚合物壳聚糖-聚(乙二醇)-酪胺共轭物(VII)和交联试剂的质量比为(0.1～0.15)∶1。
12.根据权利要求2所述的一种壳聚糖水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，所述缓冲溶液为pH 7.2～7.6的磷酸缓冲液。
13.根据权利要求2～12任意一项方法制备得到的壳聚糖水凝胶。
14.根据权利要求1或者权利要求13所述的壳聚糖水凝胶在组织创伤修复中的应用。
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|---|---|
| CN (1) | CN104710653A (zh) |
Cited By (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105778475A (zh) * | 2016-04-19 | 2016-07-20 | 滁州环球聚氨酯科技有限公司 | 一种耐水抗菌性聚氨酯复合材料 |
| CN105820551A (zh) * | 2016-04-19 | 2016-08-03 | 滁州环球聚氨酯科技有限公司 | 一种耐老化聚氨酯复合材料 |
| CN106928375A (zh) * | 2017-04-05 | 2017-07-07 | 江南大学 | 一种壳聚糖水凝胶的制备方法 |
| CN108192118A (zh) * | 2018-02-28 | 2018-06-22 | 武汉大学 | 一种高湿强度纯壳聚糖凝胶膜及其制备方法 |
| CN108578785A (zh) * | 2018-04-26 | 2018-09-28 | 福州大学 | 一种磁性自愈性生物玻璃/水凝胶复合材料的制备方法 |
| CN109153734A (zh) * | 2016-03-24 | 2019-01-04 | 斯泰玛特斯，生物技术药物改造有限公司 | 结冷胶水凝胶、制备、方法及其用途 |
| CN109627463A (zh) * | 2016-06-22 | 2019-04-16 | 深圳诺坦药物技术有限公司 | 水凝胶与蛋白质药物 |
| CN111073002A (zh) * | 2019-12-09 | 2020-04-28 | 华南理工大学 | 一种可酸溶解的快速凝胶化自愈合水凝胶及其制备方法与应用 |
| CN111793146A (zh) * | 2020-07-15 | 2020-10-20 | 大连理工大学 | 一种pH敏感型PCA-g-CMCS聚合物及其水凝胶的制备方法 |
| WO2020237414A1 (zh) * | 2019-05-24 | 2020-12-03 | 深圳先进技术研究院 | 改性生物聚合物和其在3d打印中的应用 |
| CN114225098A (zh) * | 2021-11-24 | 2022-03-25 | 中国科学院理化技术研究所 | 一种具有抗菌和促进伤口愈合的医用敷料 |
-
2015
- 2015-01-28 CN CN201510046502.2A patent/CN104710653A/zh active Pending
Cited By (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109153734A (zh) * | 2016-03-24 | 2019-01-04 | 斯泰玛特斯，生物技术药物改造有限公司 | 结冷胶水凝胶、制备、方法及其用途 |
| CN105820551A (zh) * | 2016-04-19 | 2016-08-03 | 滁州环球聚氨酯科技有限公司 | 一种耐老化聚氨酯复合材料 |
| CN105778475A (zh) * | 2016-04-19 | 2016-07-20 | 滁州环球聚氨酯科技有限公司 | 一种耐水抗菌性聚氨酯复合材料 |
| CN109627463A (zh) * | 2016-06-22 | 2019-04-16 | 深圳诺坦药物技术有限公司 | 水凝胶与蛋白质药物 |
| CN109627463B (zh) * | 2016-06-22 | 2022-04-01 | 深圳普洛美康材料有限公司 | 水凝胶与蛋白质药物 |
| CN106928375A (zh) * | 2017-04-05 | 2017-07-07 | 江南大学 | 一种壳聚糖水凝胶的制备方法 |
| CN108192118A (zh) * | 2018-02-28 | 2018-06-22 | 武汉大学 | 一种高湿强度纯壳聚糖凝胶膜及其制备方法 |
| CN108192118B (zh) * | 2018-02-28 | 2021-05-25 | 武汉大学 | 一种高湿强度纯壳聚糖凝胶膜及其制备方法 |
| CN108578785B (zh) * | 2018-04-26 | 2020-11-27 | 福州大学 | 一种磁性自愈性生物玻璃/水凝胶复合材料的制备方法 |
| CN108578785A (zh) * | 2018-04-26 | 2018-09-28 | 福州大学 | 一种磁性自愈性生物玻璃/水凝胶复合材料的制备方法 |
| WO2020237414A1 (zh) * | 2019-05-24 | 2020-12-03 | 深圳先进技术研究院 | 改性生物聚合物和其在3d打印中的应用 |
| CN111073002A (zh) * | 2019-12-09 | 2020-04-28 | 华南理工大学 | 一种可酸溶解的快速凝胶化自愈合水凝胶及其制备方法与应用 |
| CN111793146A (zh) * | 2020-07-15 | 2020-10-20 | 大连理工大学 | 一种pH敏感型PCA-g-CMCS聚合物及其水凝胶的制备方法 |
| CN111793146B (zh) * | 2020-07-15 | 2022-02-11 | 大连理工大学 | 一种pH敏感型PCA-g-CMCS聚合物及其水凝胶的制备方法 |
| CN114225098A (zh) * | 2021-11-24 | 2022-03-25 | 中国科学院理化技术研究所 | 一种具有抗菌和促进伤口愈合的医用敷料 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20150617 |
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| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |