CN104710358A

CN104710358A - 喹啉-4-甲酰胺衍生物及其医药用途

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Publication number: CN104710358A
Application number: CN201510050904.XA
Authority: CN
Inventors: 顾建文; 祝辉; 匡永勤; 马原; 杨涛; 张新颜; 李运明
Original assignee: Chengdu Military General Hospital of PLA
Current assignee: Chengdu Military General Hospital of PLA
Priority date: 2015-01-30
Filing date: 2015-01-30
Publication date: 2015-06-17

Abstract

本发明公开了一种喹啉-4-甲酰胺衍生物，其结构通为式Ⅰ所示化合物所示化合物苯环上至少具有一个取代基；所述取代基选自卤素、—CF₃、C₁～C₄的烷基，C₁～C₄的烷氧基，C₁～C₄的烷基取代基；n为1～4的整数。本发明的化合物具有5-羟色胺再摄取抑制和多巴胺D2受体拮抗双重作用的化合物，可以用于预防和治疗PTSD。

Description

喹啉-4-甲酰胺衍生物及其医药用途

技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及到一种喹啉-4-甲酰胺衍生物，以及采用该化合物在治疗创伤后应激障碍疾病药物中的应用。

背景技术

创伤后应激障碍(Posttraumatic Stress Disorder，PTSD)是一种对严重创伤性事件(例如，战斗创伤、交通事故、暴力犯罪、恐怖袭击、重大传染病流行以及自然灾难等)的病态精神反应性病症。据美国精神病协会(American Psychiatry Association，APA)统计，美国PTSD的人群总体患病率为1-14％，平均为8％，个体终生患病危险性达3-58％，女性患病率约是男性的2倍。另据中国科学院心理研究所统计，汶川地震后半年，创伤后应激障碍(PTSD)人群达12.7％－22.1％，给个人、家庭、社会带来沉重的心理、生理和经济负担。

PTSD核心症状主要分为3类，包括再体验、闯入和过度觉醒。创伤性体验反复重现患者以各种形式反复体验创伤性情景，如脑海中常控制不住的反复出现创伤性情景的画面、声音，反复做与创伤性经历有关的噩梦，反复出现创伤性经历行为和感受，触景生情式强烈心理生理反应等。持续的回避患者表现出尽量的回避与创伤有关的人、事、物，对一些重要的日常生活必需的活动失去兴趣，不愿参与，与外部世界疏远，对亲人表现冷淡，难以表达和交流许多细腻情感，让人难以接近。持续的提高警觉性患者可表现为睡眠障碍、易激惹，很难集中注意力，学习、工作效率减退，遭遇类似创伤情景时，会出现明显的自主神经功能紊乱的症状，如心悸、出汗、面色苍白等。另外，PTSD患者可能会对创伤性经历选择性遗忘，以及对未来失去信心等。

研究认为PTSD的发生与体内多种神经递质(多巴胺、5-羟色胺、去甲肾上腺素等)的水平异常、谷氨酸系统失衡、下丘脑-垂体-肾上腺轴应激调节功能、内分泌功能异常以及神经解剖学结构异常改变等密切相关。然而，当前研究并未明确PTSD病理生理机制，相关药物作用机制和药物筛选研究也相对滞后。现有药物主要以缓解症状为目的，临床应用的药物包括5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRI)、三环类抗抑郁药(TCA)、心境稳定剂、肾上腺素抑制剂、抗精神病药和苯二氮卓类药物等。迄今为止只有舍曲林和帕罗西汀被FDA批准用于治疗PTSD。舍曲林和帕罗西汀同为5-羟色胺再摄取抑制剂，该类药物往往具有起效延迟的缺陷，并且仅对PTSD相关抑郁症状有部分疗效，加之PTSD可以共病焦虑、物质依赖等多种精神疾患，也可以共病高血压、支气管哮喘等躯体疾病，现有药物治疗有效率更低。另外，在临床应用中，5-羟色胺再摄取抑制剂类药物易导致部分患者出现胃肠道副反应(恶心、呕吐、稀便)和中枢神经系统副反应(头疼、头晕、失眠)以及阳痿、性感缺失等性功能障碍，因此，有必要研究发现新型PTSD预防和治疗药物。

最近的研究发现，PTSD基因多态性与多巴胺D2受体(D2R)关系密切。此外，解剖学研究表明D2R在杏仁核高度表达，条件性恐惧可使前额皮层D2R水平升高，抑制杏仁核D2R的活动能够破坏动物的惊吓反应，一些以D2R为主要靶点的非典型抗精神病药物(奥氮平、利培酮等)在临床使用中可有效缓解PTSD症状，这类非典型抗精神分裂药物还可应用于PTSD共病精神分裂症的治疗。另有研究报道证实，将非典型抗精神分裂药物与5-羟色胺再摄取抑制剂类抗抑郁联合应用，能全面缓解PTSD多种症状。

由此可见，5-羟色胺再摄取抑制作用和多巴胺D2受体拮抗作用的组合药物对于预防和治疗PTSD具有非常大的价值。现有的5-羟色胺再摄取抑制药物和多巴胺D2受体拮抗剂是两种作用机理不相同的药物，联合用药时其药效、药理和配伍禁忌尚不明确，而且，对于治疗疾病来说，使用单一用药的潜在风险会降低，安全性较高。因此，由于药物联合应用易受到配伍稳定性、体内代谢、用药安全性等的影响，需要研发一种新的药物，可以同时具有5-羟色胺再摄取抑制作用和多巴胺D2受体拮抗作用，可以有效治疗PTSD疾病。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有5-羟色胺再摄取抑制和多巴胺D2受体拮抗双重作用的化合物，可以用于预防和治疗PTSD。

ⅰ)本发明的一个主要实施例提供了结构式为式Ⅰ的化合物，包括其光学异构体；

式Ⅰ中所示化合物苯环上至少具有一个取代基；取代基选自卤素、—CF₃、C₁～C₄的烷基，C₁～C₄的烷氧基，C₁～C₄的烷基取代基；其中n为1～4的整数。

式Ⅰ中所示化合物具有两个苯环，其中一个苯环靠近哌嗪基，简称为苯环B，另一个苯环简称为苯环A。苯环上具有至少一个取代基，优选苯环A和苯环B上分别具有一个取代基。

苯环A上具有4个不同的取代位置，苯环B上具有三个不同的取代位置。当化合物上只具备一个取代基时，优选取代基取代苯环B上的氢原子，此时取代基优选甲基、氯元素或者甲氧基；取代位置优选邻位取代，即取代2号或者6号位。

下文对本发明化合物各种化学组成部分加以定义，除非另有更广或者更窄的明确定义，这些定义适用于本说明书全文以及权利要求书。

术语C1～C4的烷基是指含有1～4个碳原子的饱和直链或者支链烷基，如甲基、乙基、正丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基；

术语C1～C4的烷氧基是指含有1～4个碳原子的饱和直链或者支链烷氧基；如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基。

术语卤素是指氟、氯、溴、碘，优选氯。

术语C1～C4的烷氧基取代基是指将含有1～4个碳原子的饱和直链或者支链烷氧基中的一个氢原子采用其他取代基取代，这些取代基优选卤素，更优选氯元素。如将甲氧基、乙氧基、正丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基中的任意可取代的氢原子使用氯原子取代，形成含有一个氯原子的烷氧基。

术语邻位和间位，是指取代基在苯环上的取代位置。苯环A和苯环B的取代基位置排序，是以苯环上与其直接连接N原子的C原子为1号取代位，苯环A上的取代位置排序以逆时针排序，苯环B上的取代位置排序是以顺时针排序。邻位是指与1号取代位相邻的取代位置，间位是指与苯环上1号取代位间隔的取代位置。当本发明中的取代基R连接在苯环两个碳原子之间可以表示，取代基R的取代位置可以是该苯环上任一可以取代的位置。

术语药学可接受的赋形剂或者载体，是指制药常用的制剂组分，包括但不限于稀释剂与吸收剂，如淀粉、糊精、硫酸钙、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、碳酸钙、白陶土、微晶纤维素、硅酸铝等；湿润剂与粘合剂，如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、紫胶、甲基纤维素、磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解剂，如干燥淀粉、海藻酸盐、琼脂粉、褐藻淀粉、碳酸氢钠与枸橼酸、碳酸钙、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等；崩解抑制剂，如蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氢化油等；吸收促进剂，如季铵盐、十二烷基硫酸钠等；润滑剂，如滑石粉、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸盐、硼酸、液体石蜡、聚乙二醇等。还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片、多层片。为了将给药单元制成丸剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体：例如稀释剂与吸收剂，如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氮化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、高岭土、滑石粉等；粘合剂如阿拉伯胶、黄蓍胶、明胶、乙醇、蜂蜜、液糖、米糊或面糊等；崩解剂，如琼脂粉、干燥淀粉、海藻酸盐、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等。为了将给药单元制成检剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体：例如聚乙二醇、卵磷脂、可可脂、高级醇、高级醇的酯、明胶、半合成甘油酯等。为了将给药单元制成胶囊，将有效成分与上述的各种载体混合，并将由此得到的混合物置于硬的明胶囊或软胶囊中。也可将有效成分姜黄提取物制成微囊剂，混悬于水性介质中形成混悬剂，亦可装入硬胶囊中或制成注射剂应用。为了将给药单元制成注射用制剂，如溶液剂、乳剂、冻干粉针剂和混悬剂，可以使用本领域常用的所有稀释剂，例如水、乙醇、聚乙二醇、1，3-丙二醇、乙氧基化的异硬脂醇、多氧化的异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯等。另外，为了制备等渗注射液，可以向注射用制剂中添加适量的氯化钠、葡萄糖或甘油，此外，还可以添加常规的助溶剂、缓冲剂、pH调节剂等。

ⅱ)作为本发明的优化方案的喹啉-4-甲酰胺衍生物，其苯环上具有一个取代基。

作为本发明ⅱ)的优化方案，提供如结构式Ⅱ的化合物，包括其光学异构体。

该化合物是将式Ⅰ中苯环A上增加一个取代基，苯环B上不具有取代基的化合物，即为苯环上只有一个取代基的方案。在式Ⅱ的化合物中，R1的取代位置可以是2、3、4、5号位中的任一取代位置，取代基可以为卤素、—CF3、C1～C4的烷基，C1～C4的烷氧基，C1～C4的烷基取代基；优选R1的取代位置可以是5号位，其优选取代基为F、甲基或者—CF3。

作为本发明ⅱ)的另一个优化方案，在苯环B上具有一个取代基，提供如结构式Ⅲ的化合物，包括其光学异构体；

该化合物是将式Ⅰ中苯环B上增加一个取代基，苯环A上不具有取代基的化合物。在式Ⅲ的化合物中，R2的取代位置可以是2、3、4、5、6号位中的任一取代位置，取代基可以为卤素、—CF3、C1～C4的烷基，C1～C4的烷氧基， C1～C4的烷基取代基；优选R2的取代位置是2号位或者5号位，即苯环的间位或者邻位取代，优选取代基为氯和甲基，更优选邻位取代基为甲基，间位取代基为氯。

ⅲ)作为本发明的另一个优化方案，提供一种喹啉-4-甲酰胺衍生物，其苯环上具有两个取代基，取代基选自卤素、—CF₃、C₁～C₄的烷基，C₁～C₄的烷氧基或C₁～C₄的烷基取代基。

作为上述ⅲ)的一个优化方案，提供如结构式Ⅳ的化合物，包括其光学异构体；

该化合物是将式Ⅰ中苯环A上增加一个取代基R3，苯环B上具有一个取代基R4的化合物，属于苯环上具有两个取代基的方案。R3选自卤素、—CF₃、C₁～C₄的烷基，C₁～C₄的烷氧基，C₁～C₄的烷基取代基；优选苯环A的取代基R3为卤素、甲氧基或—CF₃，苯环B的取代基R4选自甲基或卤素。

作为上述ⅲ)的另一个优化方案，提供如结构式Ⅴ的化合物，包括其光学异构体；

其中取代基选自甲基或者卤素，取代位置为邻位和间位。优选邻位取代基为卤素，间位取代基为甲基。

ⅳ)作为本发明的另一个优化方案，提供一种喹啉-4-甲酰胺衍生物，其苯环上具有三个取代基，所述取代基选自卤素、—CF₃、C₁～C₄的烷基，C₁～C₄的烷氧基，C₁～C₄的烷基取代基。

作为上述ⅳ)的一个优化方案，提供的喹啉-4-甲酰胺衍生物，苯环A上具有一个取代基，苯环B上具有两个取代基；其结构通式为式Ⅵ所示化合物：

其中取代基选自卤素、—CF₃、C₁～C₄的烷基，C₁～C₄的烷氧基，C₁～C₄的烷基取代基。更优化的，苯环A上的取代基选自卤素或—CF₃；苯环B上的一个取代基选自氯或氟，另一个取代基选自C₁～C₄的烷基、氯、甲氧基，苯环B的取代位置为邻位和间位。

ⅴ)本发明还涉及一种药物组合物，该药物组合物包含了方案ⅰ、ⅱ、ⅲ、ⅳ及四个方案的优化方案所述的化合物，并以这类化合物及其药学可接受的盐为活性成分，以及至少一种药学可接受的载体或者赋形剂。

ⅵ)本发明还涉及使用方案ⅰ、ⅱ、ⅲ、ⅳ及四个方案的优化方案所述的化合物、方案ⅴ)的药物组合物用于制备抑制5-羟色胺再摄取的药物。

ⅶ)本发明还涉及使用方案ⅰ、ⅱ、ⅲ、ⅳ及四个方案的优化方案所述的化合物、方案ⅴ)的药物组合物用于制备多巴胺D2受体拮抗剂。

ⅷ)本发明还涉及使用方案ⅰ、ⅱ、ⅲ、ⅳ及四个方案的优化方案所述的化合物、方案ⅴ)的药物组合物用于制备治疗创伤后应激障碍疾病药物。

附图说明

图1是本发明对动物模型进行实验的效果对照图。

具体实施方式

本发明化合物的通用制备方法

式Ⅰ所示的化合物可以通过以下方法得到：

其中各符号的定义如本发明式Ⅰ化合物所述；其中步骤1的原料式1羧酸化合物制备式2中的酰氯化合物的制备方法和过程可参考本发明人已报道方法(Facile and efficient synthesis of quinoline-4-carboxylic acids under microwave irradiation,Chinese Chemical Letters,2010,2:35–38)。

在步骤2中的胺化物，即含有苯环B结构的式3可以通过式4所示的化合物反应得到，式4化合物的结构式为：

本发明的通用制备方法，可以制得式Ⅰ所示的化合物，为了使式Ⅰ的苯环上具有取代基，可以根据取代基的类型和预定取代位置，分别对式1和式4上具有相应的取代基。

在制备式Ⅱ所示的化合物时，即在苯环A上具有一个取代基。由于苯环A的取代基是由式1所示的化合物决定的，因此当确定式Ⅱ化合物所需要的取代基类型和位置后，选自在式1苯环A相应的位置具有相应取代基即可，其后的化合步骤与通用方法中相同。即可得到制备式Ⅱ所示的化合物过程为：

同理的，式Ⅲ所示的化合物也是在苯环上具有一个取代基，其取代基的位置和类型与式3相关，其制备过程为：

同理的，在制备式Ⅳ、式Ⅴ和式Ⅵ所示的化合物，其反应化合主体均是式1和式3所示化合物。在制备不同化合物时，式1和式3的取代基不相同。

实施例1：

(N-{3-[4-(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基]丙基}-喹啉-4-甲酰胺，化合物1)的制备

(1)喹啉-2，4-二甲酸：称取靛红1.0g(6.75mmol)、丙酮酸0.7g(8.10mmol)混溶于25ml浓度为20％NaOH溶液中，设定微波功率110W，反应10分钟，停止反应，冷却至室温，用1M盐酸溶液酸化至Ph值2左右，析出黄色固体沉淀，抽滤固体，水洗充分，60℃烘干12h得喹啉-2，4-二甲酸粗品，热水溶解、活性炭脱色、过滤、重结晶得喹啉-2，4-甲酸纯品1.30g，产率89.2％。Mp：235-240℃。 ¹H NMR(DMSO－d6):δ＝8.81(d,J＝7.6Hz,1H),8.48(s,1H,),8.26(d,J＝7.8Hz,1H),7.95(m,1H),7.86(m,1H)。

(2)喹啉-4-甲酸：称取(1)制备的喹啉-2，4-二甲酸1.1g(5.1mmol)溶于25ml纯化水中，设定微波功率180W反应5分钟，停止反应，冷却至室温，有淡褐色固体产物析出，抽滤，水洗、晾干得粗品喹啉-4-甲酸，热水溶解、脱色、重结晶得类白色固体喹啉-4-甲酸中间体0.67g，产率76.3％。Mp：255-258℃。¹H NMR(DMSO－d6):δ＝9.12(d,J＝4.5Hz,1H),8.73(d,J＝8.7Hz,1H),8.19(d,J＝8.4Hz,1H),8.0(d,J＝4.5Hz,1H),7.89－7.79(m,2H)。

(3)喹啉-4-甲酰氯：称取(2)制备的喹啉-4-甲酸0.2g(1.2mmol)，混溶于25ml1,2-二氯乙烷，室温滴加0.3g(2.5mmol)氯化亚砜，加毕，加入5滴N-N’-二甲基甲酰胺催化，升温至90℃左右回流搅拌反应3h，减压回收溶剂，转溶于无水丙酮，即用。2-(4-(3-chloro-2-methylphenyl)piperazin-1-yl)ethanamine(4)3－[4－(5－氯－2－甲基苯基)哌嗪基]丙胺：称取N－(3－溴丁基)邻苯二甲酰亚胺7.0g(0.025mol),溶于30mL乙腈，搅拌下溶加4.2g(0.02mol)1－(5－氯－2－甲基苯基)－哌嗪，加毕，滴加5.05g(0.05mol)三乙胺，升温回流反应16小时，待反应完成，减压回收溶剂，水洗，乙酸乙酯萃取3次，合并有机层，无水硫酸钠干燥过夜，回收溶剂，得白色稠状产物，经盐酸乙醚成盐得白色固体产物N－{3－[4－(5－氯－2－甲基苯基)哌嗪基]丙基}邻苯二甲酰亚胺盐酸盐7.55g，产率78.0％,mp:280－282℃。¹H NMR(CDCl₃):δ＝7.84(q,J＝3.37Hz,2H),7.72(q,J＝3.08Hz,2H),7.08(d,J＝7.85Hz,1H),6.95(d,J＝8.12Hz,2H),3.75(t,J＝6.72Hz,2H),2.88－2.96(br－m,2H),2.45－2.60(br－m,4H),2.23(s,3H),1.76(m,2H),1.60(br-s,2H)。

称取N－{3－[4－(5－氯－2－甲基苯基)哌嗪基]丙基}邻苯二甲酰亚胺盐酸盐7.50g(0.015mol)混溶于60mL无水乙醇，滴加1.82g(0.030mol)水合肼溶液(含量85％)，加热至70℃左右回流搅拌反应4h，待反应完全，减压回收乙醇，剩余固体产物，加入15mL 40％氢氧化钾溶液，搅拌溶解，加水30ml稀释，乙酸乙酯萃取萃取3次，合并有机层，无水硫酸钠干燥过夜，回收溶剂得淡黄色油状产物(5):3－[4－(5－氯－2－甲基苯基)哌嗪基]丙胺3.83g，产率88.2％。¹H NMR (CDCl₃):δ＝7.06(d,J＝8.12Hz,1H),6.94(m,2H),2.92(t,J＝4.48Hz,4H),2.76(t,J＝6.72Hz,2H),2.60(br-s,2H),2.24(s,3H),1.56(br－m,4H)。

(5)N-{3-[4-(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基]丙基}-喹啉-4-甲酰胺：称取0.43g(1.60mmol)3－[4－(5－氯－2－甲基－苯基)哌嗪基]丙胺，搅拌下加入到溶加有0.5g(3.8mmol)无水碳酸钾的30mL丙酮溶液中，滴加新制备的喹啉-4-甲酰氯丙酮溶液(按1.0mmol计)，室温搅拌过夜，次日，抽滤，丙酮充分洗涤，收集滤液，减压回收丙酮，水洗，二氯甲烷萃取3次，合并有机层，无水硫酸钠干燥，回收二氯甲烷，经柱层析纯化，盐酸乙醚成盐得白色固体产物0.89g。产率，78.1％，mp：329－331℃。¹H NMR(DMSO－d6):δ＝1.59(br-s,2H),1.77(br-s,2H),2.15(br-m,2H),2.23(s,3H),3.24(br-m,2H),3.39(q,J＝7.00Hz，2H),3.53(d,J＝12.05Hz，2H),7.06(m,2),7.23(d,J＝8.12Hz，1H),7.37(d,J＝8.40Hz，1H),7.58(d,J＝1.68Hz,1H),7.67(dd,J₁＝8.40Hz,J₂＝1.68Hz,1H),8.62(br-s,1H,NH),10.57(br-s,1H)。

实施例2：

N-{3-[4-(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基]丙基}-5-氟喹啉-4-甲酰胺(化合物2)的制备

(1)5-氟-喹啉-4-甲酸：按实施例1的方法，取4-氟代靛红，在碱性条件下与丙酮酸经微波催化Pfitzinger反应制备。产率83.4％，Mp:265-269℃。¹H NMR(DMSO－d6):δ＝9.12(d,J＝4.5Hz,1H),8.73(d,J＝8.7Hz,1H),8.19(d,J＝8.4Hz,1H),8.0(d,J＝4.5Hz,1H),7.89－7.79(m,1H)。

(2)N-{3-[4-(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基]丙基}-5-氟喹啉-4-甲酰胺：按实施例1的方法，取5-氟喹啉-4-甲酸制备5-氟喹啉-4-甲酰氯，然后与3－[4－(5－氯－2－甲基苯基)哌嗪基]丙胺反应，在去酸剂碳酸钠存在下酰化制备。产率：80.1％， Mp：263-265℃。¹H NMR(CDCl₃):δ＝1.64(m,2H),2.23(s,3H),3.10－3.22(m,4H),3.39(m,2H),3.55(m,2H),7.07(t,J＝7.8Hz,2H),7.23(d,J＝8.1Hz,1H),7.73(d,J＝4.2Hz,1H),7.78(m,2H),7.94(dd,J＝2.8,10.0Hz,1H),8.20(dd,J＝2.8,10.0Hz,1H),9.02(s,1H)。

实施例3：

N-{3-[4-(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基]丙基}-5-三氟甲基喹啉-4-甲酰胺(化合物3)的制备

按实施例1的方法，取5-三氟甲基-喹啉-4-甲酸制备5-三氟甲基-喹啉-4-甲酰氯，然后与3－[4－(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基]丙胺反应，在去酸剂碳酸钠存在下酰化制备。产率：82.7％。¹H NMR(DMSO－d6):δ＝1.47(br-s,2H),1.52(br-s,2H),2.36(s,3H),3.38(br-m,4H),3.29(q,J＝5.00Hz，2H),3.35(d,J＝8.05Hz，2H),7.15(m,2),7.26(d,J＝6.80Hz，1H),7.24(d,J＝8.10Hz，1H),7.58(d,J＝1.92Hz,1H),7.73(dd,J₁＝8.22Hz,J₂＝1.62Hz,1H),8.43(br-s,1H,NH),9.85(br-s,1H)。

实施例4：

N-{3-[4-(2，3-二氯苯基)哌嗪基]丙基}-喹啉-4-甲酰胺(化合物4)的制备

按实施例1的方法，取喹啉-4-甲酸制备喹啉-4-甲酰氯，然后与3－[4－(2，3-二氯苯基)哌嗪基]丙胺反应，在去酸剂碳酸钠存在下酰化制备。产率：84.0％。 ¹H NMR(DMSO－d6):δ＝1.42(br-s,2H),1.50(br-s,2H),3.05(br-m,2H),2.41(s,3H),3.18(br-m,2H),3.27(q,J＝5.00Hz，2H),3.43(d,J＝9.05Hz，2H),7.10(m,2),7.16(d,J＝7.80Hz，1H),7.24(d,J＝7.50Hz，1H),7.58(d,J＝1.82Hz,1H),7.67(dd,J₁＝8.40Hz,J₂＝1.62Hz,1H),8.51(br-s,1H,NH),10.01(br-s,1H)。

实施例5：

N-{3-[4-(2-甲氧苯基)哌嗪基]丙基}-喹啉-4-甲酰胺(化合物5)的制备

按实施例1的方法，取喹啉-4-甲酸制备喹啉-4-甲酰氯，然后与3－[4－(2-甲氧苯基)哌嗪基]丙胺反应，在去酸剂碳酸钠存在下酰化制备。产率：86.1％。1H NMR(CDCl3):δ＝1.34(m,2H),1.74(m,2H),1.92(m,2H),2.23(s,3H),3.13(m,2H),3.70(m,2H),4.20(s,3H),7.05(m,3H),7.81(t,J＝7.6Hz,1H),7.88(d,J＝7.9Hz,1H),8.09(t,J＝7.6Hz,1H),8.13(t,J＝7.9Hz,2H),8.31(s,1H),8.53(d,J＝9.9Hz,1H),8.85(d,J＝8.1Hz,1H),9.86(s,1H)。

实施例6：

N-{4-[4-(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基]丁基}-喹啉-4-甲酰胺(化合物6)的制备

4-[4-(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基]丁胺2.65g(0.01mol)溶于50ml二氯甲烷，搅拌下加入1.73g(0.01mol)喹啉-4-甲酸，补加10ml丙酮，再加入1.38g(0.01mol)1-羟基苯并三氮唑和2.25g(0.011mol)N，N’-二环己基碳二亚胺，补加3ml无水甲醇，搅拌反应过夜。次日，滤去固体，二氯甲烷洗涤，合并，补加4ml乙醇，加水分液，干燥，硅胶柱层析，盐酸-乙醚成盐，得目标产物3.20g。产率：83.3％。¹HNMR(CDCl₃):δ＝9.86(s,1H),8.85(d,J＝8.1Hz,1H),8.53(d,J＝9.9Hz,1H),8.31(s,1H),8.21(d,J＝8.1Hz,2H),7.87(t,J＝7.3Hz,1H),7.78(t,J＝7.3Hz,1H),7.11(m,3H),7.03(m,3H),3.70(m,4H),3.13(m,4H),2.23(s,3H),1.92(m,2H),1.74(m,2H),1.34(m,4H).

实施例7：

N-{2-[4-(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基]乙基}-喹啉-4-甲酰胺(化合物7)的制备

按实施例6的方法，取喹啉-4-甲酸与2－[4－(5－氯－2－甲基苯基)哌嗪基]乙胺在缩合剂N，N’-二环己基碳二亚胺存在下制备。产率：80.6％。¹H NMR(CDCl₃):δ＝1.64(m,2H),2.23(s,3H),3.10－3.22(m,2H),3.39(m,2H),3.55(m,2H),7.07(t, J＝7.8Hz,2H),7.23(d,J＝8.1Hz,1H),7.73(d,J＝4.2Hz,1H),7.78(m,2H),7.94(dd,J＝2.8,10.0Hz,1H),8.20(dd,J＝2.8,10.0Hz,1H),9.27(s,1H)。

实施例8：

N-{3-[4-(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基]丙基}-5-氯喹啉-4-甲酰胺(化合物8)的制备

按实施例6的方法，取5-氯喹啉-4-甲酸与3－[4－(5－氯－2－甲基苯基)哌嗪基]丙胺在缩合剂N，N’-二环己基碳二亚胺存在下制备。产率：81.2％。¹H NMR(CDCl₃):δ＝1.34(m,4H),1.74(m,2H),1.92(m,2H),2.23(s,3H),3.13(m,2H),3.70(m,2H),7.78(t,J＝7.3Hz,1H),7.87(t,J＝7.3Hz,1H),8.21(d,J＝8.1Hz,2H),8.31(s,1H),8.53(d,J＝9.9Hz,1H),8.85(d,J＝8.1Hz,1H),9.86(s,1H)。

实施例9：

N-{3-[4-(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基]丙基}-5-甲氧基喹啉-4-甲酰胺(化合物9)的制备

按实施例6的方法，取5-甲氧基喹啉-4-甲酸与3－[4－(5－氯－2－甲基苯基)哌嗪基]丙胺在缩合剂N，N’-二环己基碳二亚胺存在下制备。产率：86.1％。¹H NMR(CDCl₃):δ＝1.25(m,2H),1.58(m,2H),1.81(m,2H),2.30(s,3H),3.06(m,2H),3.62(m,2H),4.08(s,3H),6.75(m,4H),7.34(m,1H),7.65(m,3H),7.92(m,1H),8.62(m,1H),9.10(s,1H)。

实施例10：

N-{3-[4-(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基]丙基}-5-乙氧基喹啉-4-甲酰胺(化合物10)的制备

按实施例6的方法，取5-乙氧基喹啉-4-甲酸与3－[4－(5－氯－2－甲基苯基)哌嗪基]丙胺在缩合剂N，N’-二环己基碳二亚胺存在下制备。产率：79.3％。¹H NMR (DMSO－d6):δ＝1.37(br-s,2H),1.53(br-s,2H),2.22(s,4H),2.90(br-m,4H),3.42(m,2H),3.55(d,J＝7.03Hz，2H),7.25(m,2),7.31(d,J＝7.10Hz，1H),7.39(d,J＝7.60Hz，1H),7.48(d,J＝1.62Hz,1H),7.60(dd,J₁＝7.16Hz,J₂＝1.51Hz,1H),8.62(br-s,1H,NH),9.73(br-s,1H)。

实施例11：

N-{3-[4-(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基]丙基}-6-氟喹啉-4-甲酰胺(化合物11)的制备

按实施例6的方法，取6-氟喹啉-4-甲酸与3－[4－(5－氯－2－甲基苯基)哌嗪基]丙胺在缩合剂N，N’-二环己基碳二亚胺存在下制备。产率：82.6％。1HNMR(CDCl3):δ＝2.23(s,3H),2.68(s,br.,4H),2.94(s,br.,4H),3.21(d,J＝6.7Hz,2H),3.87(s,3H),4.19(t,J＝5.6Hz,2H),5.74(m,2H),6.95(m,3H),7.06(m,2H),8.31(d,J＝9.0Hz,1H),8.77(s,1H)。

生物活性效应、药物药理评价实验

生物效应实验1：化合物对多巴胺D2受体放射性配体结合实验

各自称取合成化合物待细胞融合度达到90％时，消化细胞，4℃、2000rpm离心5min。弃上清，将沉淀于5mM Tris,5mM EDTA.2Na，5mM EGTA裂解液(pH 7.4)中，冰上放置30min。冰浴下过针头(4号针头，0.45×13mm一次性注射器)5-10次，4℃、40000g离心20min。弃上清，沉淀重悬于冰冷50mM Tris-HCl(pH 7.4)缓冲液中，过针头5-10次，4℃、40000g离心20min。考马斯亮蓝G-250法测蛋白浓度。冰水浴中加入反应体系。反应缓冲液为50mM Tris-HCl(pH 7.4)缓冲液，含1.5mM CaCl_2,4mM MgCl_2,1mM EDTA,5mMKCl,120mMNaCl.放射配基³H-Spiperone浓度为0.15-4.8nM，膜蛋白25-30μg/管；非特异结合管还含haloperidol 10μM,其他各种化合物终浓度为1μM或50nM,反应总体积0.2mL,25℃水浴反应60min,抽滤,装闪烁液1ml,隔夜测定cpm。

生物效应实验2：目标化合物对SERT受体放射性配体结合实验

参照Owens等人的方法[Owens M.J.等，J.Pharm.Exp.Ther.，283，1305-1322(1997)]，测定[³H]西酞普兰结合。具体地说，将SERT缓冲液(含有120mM NaCl和5mM KCl的50mM Tris-HCl(pH＝7.4))稀释的50μ1的[³H]西酞普兰(最终浓度：约2nM)、149μ1的h-SERT/CH0膜制品(按蛋白质质量计，40μg/孔)、1μ1将试验药溶解于二甲亚砜中而成的混合溶液，制成总量为200μ1的溶液。将该溶液在室温下反应60分钟，然后使用涂覆有0.05％聚乙烯亚胺水溶液的玻璃纤维滤纸迅速地进行减压抽滤。将玻璃纤维滤纸用250μl的SERT缓冲液洗涤2次，然后转移至装有4ml ACS-Ⅱ的玻璃小瓶中。使用液体闪烁计数器测定滤纸上残留的放射活性。将在1μM氯米帕明存在下的[3H]西酞普兰的结合量用作[³H]西酞普兰非特异性结合量。

数据用OriginPro 7.0软件中Hill公式分析处理，计算出IC50值。按照下述公式计算出h-SERT结合抑制常数(K_i)：

h-SERT结合抑制常数(K_i)＝IC₅₀/(1+S/K_d)

其中，S表示添加的[³H]西酞普兰的浓度；K_d值表示[³H]西酞普兰的解离常数，其中所使用的K_d值是通过另外使用与上述相同的细胞膜进行的饱和结合实验计算出的值。

表1：各个实施例中SERT抑制常数和多巴胺D2R抑制常数

生物效应实验3：实施例1即化合物1对束缚应激致PTSD大鼠条件恐惧反应试验结果。

PTSD动物模型的建立

束缚应激高强度聚乙烯膜将大鼠自头部至尾部完全包裹，并用胶带束缚，鼻部附近留3-5个透气孔，气孔以利大鼠换气，尾部固定，使大鼠不能移动躯体连续束缚2h(期间大鼠头、爪被固定不能移动)。

强迫游泳装置为一直径20cm，高50cm的圆柱形透明缸。水深31cm，水温22±2℃左右。将大鼠置入透明缸中，开始时大鼠拼命游泳力图逃脱，很快就变成漂浮不动状态，仅露出鼻孔保持呼吸,四肢偶尔划动以保持身体不至下沉，20min后立即取出大鼠并用毛巾将其擦干，休息15min。

乙醚麻醉装置为一直径20cm、高50cm玻璃圆柱缸，将大鼠置入玻璃缸内，适量倒入99.5％的乙醚，将缸盖密封。10s后大鼠呼吸急促，站立不稳，逐渐出现意识丧失。然后将大鼠置于通风处至自然苏醒,放回饲养笼自由进食进水不受打扰饲养14天。第15天在OF和EPM中测试两组大鼠的探究行为,恐惧、焦虑反应；第16天在MWM中测量大鼠的空间认知能力,评价应激模型的有效性。

足底电击：电击箱为树脂玻璃制造的方形箱子(470mm×470mm×470mm)，底部为导电的金属细丝用于足底电击。做电击实验时将大鼠放于电击箱中，196s适应后给予使大鼠表现痛苦(跳跃或嘶叫)的强度1mA的电流4s，休息60s后放回饲养笼中。

条件恐惧反应

将大鼠再次放入电击箱中(CS+)测试5min，静音，不通电流，实验结束后迅速放回饲养笼中。大鼠行为由连接显示系统的摄像机同步记录，并分析其静止行为。静止行为是指实验动物除呼吸外观测不到其他动作。

统计分析

统计分析数据用均数±标准差(x±S)表示，采用SPSS15.0统计软件对数据进行方差分析，各组均数采用双因素方差检验。P<0.05表示有统计学意义。

研究发现，与对照组相比，PTSD组僵住时间百分比明显高于空白组，给予药物前后PTSD组僵住时间百分比显著降低。进一步说明化合物1能显著抑制PTSD条件性恐惧反应，降低PTSD大鼠的焦虑水平，其对照效果如图1所示。

安全性评价实验

取实施例3～实施例5三种化合物，采用皮下注射的方式分别注入同一批次的小鼠体内，每组小鼠5只，最低注射浓度为0.5，最高注射浓度为5(mg/kg)，观察注射药物的小鼠与注射生理盐水的对照组的小鼠生长情况和异常反应，低浓度下的小鼠实验组未出现反常行为或者死亡。

Claims

1.一种喹啉-4-甲酰胺衍生物，其结构通为式Ⅰ所示化合物：

式Ⅰ中所示化合物苯环上至少具有一个取代基；所述取代基选自卤素、—CF₃、C₁～C₄的烷基，C₁～C₄的烷氧基，C₁～C₄的烷基取代基；

其中n为1～4的整数。

2.如权利要求1所述的喹啉-4-甲酰胺衍生物，其苯环上具有一个取代基，其结构通式为式Ⅱ或式Ⅲ所示化合物：

所述取代基选自卤素、—CF₃、C₁～C₄的烷基，C₁～C₄的烷氧基，C₁～C₄的烷基取代基。

3.如权利要求2所述的喹啉-4-甲酰胺衍生物，式Ⅱ苯环A上具有一个取代基R1，所述取代基为卤素、甲氧基或—CF₃，式Ⅲ苯环B上具有一个取代基R2，所述取代基为甲基或卤素。

4.如权利要求1所述的喹啉-4-甲酰胺衍生物，苯环A和苯环B上分别具有一个取代基；其结构通式为式Ⅳ；

苯环A的取代基R3为卤素、甲氧基或—CF₃，苯环B的取代基R4选自甲基或卤素。

5.如权利要求1所述的喹啉-4-甲酰胺衍生物，苯环B上具有两个取代基，其结构通式为式Ⅴ：

其中取代基选自甲基或者卤素，取代位置为邻位和间位。

6.如权利要求1所述的喹啉-4-甲酰胺衍生物，苯环A上具有一个取代基，苯环B上具有两个取代基；其结构通式为式Ⅵ所示化合物：

7.如权利要求6所述的喹啉-4-甲酰胺衍生物，苯环A上的取代基选自卤素或—CF₃；苯环B上的一个取代基选自氯或氟，另一个取代基选自C₁～C₄的烷基、氯、甲氧基，苯环B的取代位置为邻位和间位。

8.如权利要求1所述的喹啉-4-甲酰胺衍生物，包括以下化合物：

N-{3-[4-(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基]丙基}-喹啉-4-甲酰胺；

N-{3-[4-(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基]丙基}-5-氟喹啉-4-甲酰胺；

N-{3-[4-(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基]丙基}-5-三氟甲基喹啉-4-甲酰胺；

N-{3-[4-(2，3-二氯苯基)哌嗪基]丙基}-喹啉-4-甲酰胺；

N-{3-[4-(2-甲氧苯基)哌嗪基]丙基}-喹啉-4-甲酰胺；

N-{4-[4-(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基]丁基}-喹啉-4-甲酰胺；

N-{2-[4-(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基]乙基}-喹啉-4-甲酰胺；

N-{3-[4-(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基]丙基}-5-氯喹啉-4-甲酰胺；

N-{3-[4-(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基]丙基}-5-甲氧基喹啉-4-甲酰胺；

N-{3-[4-(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基]丙基}-5-乙氧基喹啉-4-甲酰胺；

N-{3-[4-(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基]丙基}-6-氟喹啉-4-甲酰胺。

9.一种药物组合物，包括以权利要求1～8中所述化合物及其药学可接受的盐为活性成分，以及至少一种药学可接受的载体或者赋形剂。

10.如权利要求1～8所述的化合物或者权利要求9所述的药物组合物在制备抑制5-羟色胺再摄取药物和制备多巴胺D2受体拮抗剂中的应用。

11.如权利要求1～8所述的化合物或者权利要求9所述的药物组合物在制备治疗创伤后应激障碍疾病药物中的用途。