CN104705289B - 一种离体牙齿保存液 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种离体牙齿保存液,用于储存牙齿离体后保证牙齿细胞的活性,其具体组成为,每1L保存液中各组分的含量如下:青霉素0.3‑0.6g、链霉素0.5‑1g、甲硝唑0.02‑0.04g、两性霉素B0.015‑0.025g、羟甲基纤维素5‑10g、胰岛素50‑100ug、余量为MEM。该保存液可以提供牙齿离体后所需营养物质和低菌环境,有效保持细胞活性,用于离体牙齿的长期保存。

Description

一种离体牙齿保存液
技术领域
本发明涉及一种用于离体组织的保存液,尤其涉及一种离体牙齿保存液。
背景技术
由于各种原因导致的牙体缺损和牙齿缺失已成为危害口腔乃至人体健康的主要疾病。目前主要是借助于各种牙科材料充填来应对牙齿缺损疾病,虽然在一定程度上能阻止病变的继续发展,但不能解决根本问题。对于牙齿缺失尽管解决途径很多,但最有效和最根本的办法还是牙齿生物性再生。
随着组织再生医学的快速发展,为牙体缺损和牙齿缺失的有效治疗带来了希望。目前已有许多研究利用牙源性上皮和牙源性间充质的相互作用再生出牙齿组织。常用的牙源性间充质包括牙乳头细胞和牙髓细胞。由于牙乳头细胞在临床难以获得,因此,目前用于牙体及牙齿再生的种子细胞首选是牙髓来源的细胞,其中最重要的是牙髓干细胞。
2000年首次发现了牙髓干细胞,Gronthos等发现在离体的乳牙和智齿中都存在牙髓干细胞。这是一类具有高增殖能力、高度自我更新能力、多项分化能力的细胞。已有研究利用该细胞成功地构建牙髓、牙本质以及牙齿组织。
成功从离体的牙齿中提取出足够量符合标准的牙髓干细胞,首先遇到的问题就是离体牙齿保存的问题。口腔环境较其他组织环境不同,口腔内的细菌数量很多,种类相当繁杂,离体牙齿保存不当极易发生染菌,且牙齿内细胞量较少,离体牙齿保存不当也极易发生牙髓干细胞提取失败的情况。
发明内容
本发明提供了一种离体牙齿保存液,实验表明这种保存液可以有效的保存离体牙齿,保持细胞活性且避免污染的发生。
本发明提供的一种离体牙齿保存液,其特征在于,每1L保存液中由以下重量配比成分组成:
青霉素 0.3-0.6g
链霉素 0.5-1g
甲硝唑 0.02-0.04g
两性霉素B 0.015-0.025g
羟甲基纤维素 5-10g,
胰岛素 50-100ug
MEM 余量。
本发明所述离体牙齿保存液所含成分中,青霉素可以有效的抑制及杀灭革兰氏阳性菌;链霉素可以有效的抑制及杀灭革兰氏阴性菌;甲硝唑可以有效的抑制及杀灭厌氧菌;两性霉素B可以有效的抑制及杀灭真菌;羟甲基纤维素为惰性物质,能够降低细胞的代谢活动,降低不良因素对细胞活性的影响,保持细胞活性;胰岛素能显著提高细胞利用葡萄糖的效率,维持细胞的营养供应。常用于细胞培养的MEM作为保存液的基础成分,MEM中的磷酸盐及碳酸盐缓冲体系可以有效的保持细胞环境的稳定,且MEM中富含细胞代谢必需的无机盐离子,氨基酸,糖分,维生素等重要成分,可以有效的保持细胞的活性。
另外本发明所述离体牙齿保存液中可以加入普朗尼克F68和葡聚糖硫酸酯,来增加保存液粘稠度,可以减少离体牙齿在运输过程中因震动或摇晃引起的液体对组织和细胞的损伤。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合附图及实施例,对本发明进行进一步详细说明。
实施例1:
配制1L离体牙齿保存液,在无菌条件下,取0.5L的MEM溶液,加入青霉素 0.5g、链霉素0.8g、甲硝唑0.03g、两性霉素B 0.02g、羟甲基纤维素8g、胰岛素80ug,搅拌溶解,加入MEM至1L定容,搅拌均匀,将制得的溶液无菌分装至已灭菌的采集瓶内,每瓶25ml。
实施例2:
配制1L离体牙齿保存液,在无菌条件下,取0.5L的MEM溶液,加入青霉素 0.5g、链霉素0.8g、甲硝唑0.03g、两性霉素B 0.02g 、普朗尼克F68 40g、葡聚糖硫酸酯7g、羟甲基纤维素8g、胰岛素80ug、搅拌溶解,加入MEM至1L定容,搅拌均匀,将制得的溶液无菌分装至已灭菌的采集瓶内,每瓶25ml。
使用效果实例:
将20离体健康牙齿分别放于保存液中,2-8度保存120小时后取出,无菌操作下提取牙髓干细胞,实验结果发现20颗牙齿皆可以成功提取出牙髓干细胞。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (2)

1.一种离体牙齿保存液,其特征在于,每1L保存液中由以下重量配比成分组成:
青霉素 0.3-0.6g
链霉素 0.5-1g
甲硝唑 0.02-0.04g
两性霉素B 0.015-0.025g
羟甲基纤维素 5-10g,
胰岛素 50-100ug
MEM 余量。
2.根据权利要求1所述的牙齿保存液,其特征在于,所述保存液还可以加入普朗尼克F68 30-50g和葡聚糖硫酸酯5-10g。
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