CN104693071A - 一种n- 羟基-n’- 苯基辛二酰胺制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明目的在于提供一种N-羟基-N’-苯基辛二酰胺制备方法。该方法对各中间体及产物的制备进行了改进，该方法后处理简单，成本较低，不需高温，反应条件温和，收率高，更利于工业化生产。

Description

一种N- 羟基-N’- 苯基辛二酰胺制备方法

技术领域

本发明涉及化学制药领域，具体涉及一种N-羟基-N’-苯基辛二酰胺制备方法。

背景技术

N-羟基-N’-苯基辛二酰胺，即伏立诺他Vorinostat是世界上第一个抑制组蛋白脱乙酰基酶的新型抗癌药，2006年10月6日美国上市，与其它肿瘤药联合用药具有明显的协同作用。伏立诺他对多种实体瘤具有显著的抗肿瘤作用，目前对于多项适应症的临床试验正在进行中。

伏立诺他是一组蛋白脱乙酰酶（HDAC）抑制剂。能通过诱导细胞分化、阻断细胞周期、诱导细胞调控而发挥作用。治疗加重、持续和复发或用两种全身性药物治疗后无效的皮肤T细胞淋巴瘤（CTCL，一种非霍奇金淋巴瘤）。CTCL是一种影响皮肤的白血细胞类型的T细胞癌。

体外研究表明，伏立诺他在纳摩尔级浓度（IC50<86nmol/L）即可抑制HDAC1、HDAC2和HDAC3（Ⅰ型）以及HDAC6（Ⅱ型）酶活性。在某些癌细胞内，抑制过量的HDAC酶可激活正常细胞活性的基因。伏立诺他降低HDAC活性有助于减缓或中止癌细胞生长的基因激活。

化合物专利WO/1993/007148，公开了伏立诺他化合物结构。其化学结构式为：

目前合成方法多用辛二酸在乙酸酐作用下分子内脱水生成辛二酸酐，与苯胺在乙酸乙酯中于0℃开环酰胺化得辛二酸单酰苯胺，再甲醇酯化和盐酸羟胺胺解，可得抗肿瘤药伏立诺他。

伏立诺他的合成路线较多，主要有文献报道的合成路线有三条：其一，Breslow R,Marks PA,Rifkind BA等在Novel potent inducers of terminal differentiation andmethods of use thereof（[P].WO:9307148.1993.04.15）中报道的，辛二酰氯和苯胺、盐酸羟胺和KOH溶液，“一锅法”投料,之后用色谱柱分离得到产品,收率只有15-30%，收率很低,同时成本较高，不适合工业化生产；其二，Stowell JC,Huot RI,van Voast L等在The synthesis of N-hydroxy-N’-phenyloctanediamide and its inhibitory effecton proliferation of AXC rat prostate cancer cells（[J].J Med Chem,1995,38(9):1411-1413.）中报道的，辛二酸先与苯胺在190℃的高温之下反应,然后再用KOH溶液处理,制得辛二酸单酰苯胺,再通过离子交换树脂酯化，得到辛二酸单酰苯胺单甲酯,再与甲醇钠、盐酸羟胺和甲醇反应得到产品，总收率大约有35%,但中间反应接触到高温(190℃)，不是很适合工业化的生产操作；其三，王易.杨建楠.陈林.孙强等在《抗肿瘤药伏立诺他的合成》（来源于杂志药物合成,2011,188-190.）中报道的，用辛二酸和氯甲酸乙酯反应生成混合酸酐,再和苯胺反应生成辛二酸单酰苯胺,再与与氯甲酸异丁酯反应生成混合酸酐,再与盐酸羟胺,三乙胺在四氢呋喃中反应得到伏立诺他,但此法在操作中用到氯甲酸乙酯和氯甲酸异丁酯，有很强的刺激性气味,工业化生产需要做好安全通风措施,否则对操作人员的安全是一个严峻的考验。

综上现有的技术中，伏立诺他的制备方法普遍存在收率低、成本高、气味强、反应高温等不利于工业化大生产等问题。

发明内容

针对现有技术中伏立诺他的制备方法普遍存在收率低、成本高、气味强、反应高温等不利于工业化大生产等问题，本发明第一个目的在于提供一种伏立诺他的制备方法。

该方法具体通过如下技术方案实现：

一种伏立诺他制备方法，包括a.辛二酸酐的制备，b.辛二酸单酰苯胺的制备，c.辛酰苯胺酸甲酯的制备，d.伏立诺他的合成。其中步骤的具体包括如下步骤：

氯化羟胺加至无水甲醇中，室温搅拌溶解后，缓慢加入甲醇钠，搅拌0.5h，过滤，滤液中加入辛酰苯胺酸甲酯，控制温度10℃-40℃搅拌反应，用甲醇钠控制pH至9-13，室温搅拌0.5h，抽滤，滤饼用水或甲醇洗涤后，将滤饼用1mol/L的盐酸调pH4-7，搅拌0.5h后，抽滤，滤饼用水或甲醇洗涤，烘干后重结晶，得白色晶体。

优选地，步骤d中，氯化羟胺：无水甲醇：甲醇钠：辛酰苯胺酸甲酯=31-211g：400-1200mL：25-180g：100g；滤液中加入辛酰苯胺酸甲酯后，控制温度25℃搅拌反应0.5h-26h；烘干后用乙醇、甲醇、乙腈、DMF、二氯甲烷重结晶，更优选用乙醇重结晶，得白色晶体。

进一步优选地，步骤d中，氯化羟胺：无水甲醇：甲醇钠：辛酰苯胺酸甲酯=40-80g：400-1000mL：31-61.5g：100g；滤液中加入辛酰苯胺酸甲酯后，控制温度25℃搅拌16h-26h。

在上述技术方案的基础上，本发明第二个目的在于提供一种伏立诺他中间体Ⅰ辛二酸酐的制备方法，即步骤a辛二酸酐的制备：

辛二酸和醋酐，加热回流反应5h，冷至室温，减压蒸除溶剂，剩余物冷却至0℃，得淡黄色固体，过滤，滤饼重结晶，得白色结晶辛二酸酐。

优选地，步骤a中，辛二酸：醋酐=1：1.2-2.0；加热回流反应时间为5h；重结晶所用溶剂为甲醇、乙腈、THF、正己烷、乙醇或二氯甲烷，更优选为乙腈。

在上述技术方案基础上，本发明第三个目的在于提供一种伏立诺他中间体Ⅱ辛二酸单酰苯胺的制备方法，即步骤b辛二酸单酰苯胺的制备：

将辛二酸酐加至有机溶剂中，在-10℃—-5℃搅拌下滴加苯胺，滴毕，自然升至室温，搅拌0.5h。调pH至碱性，室温搅拌30min，抽滤，滤液调至pH强酸性，抽滤，滤饼用水洗涤后干燥，得白色固体辛二酸单酰苯胺。

优选地，所述有机溶剂为THF或DMF或乙酸乙酯，优选THF。

优选地，步骤b中，所述有机溶剂为THF或DMF或乙酸乙酯，优选THF；辛二酸酐:THF:苯胺=1g:2-20ml:0.65g；调pH碱性所用试剂为10%氢氧化钠溶液，调至ph=8-13，优选10，调ph酸性所用试剂1mol/l盐酸，调值ph=2-5，优选ph=4。

在上述技术方案基础上，本发明第四个目的在于提供一种辛酰苯胺酸甲酯的制备方法，即步骤c.辛酰苯胺酸甲酯的制备方法：

取辛二酸单酰苯胺和对甲苯磺酸，溶于甲醇溶剂中，加热回流反应，冷至室温，减压蒸除溶剂，剩余物中加入水或弱碱性水溶液，用乙酸乙酯或二氯甲烷萃取，干燥，过滤，滤液减压浓缩至干，剩余深黄色油状物中加入析晶溶剂，室温搅拌1h，抽滤，滤饼烘干，得到类白色固体辛酰苯胺酸甲酯。

步骤c所述剩余深黄色油状物中加入的析晶溶剂为石油醚、石油醚与乙酸乙酯的混合物、正己烷、正己烷与乙酸乙酯混合物、正庚烷、正庚烷与乙酸乙酯混合物。

步骤c中，剩余深黄色油状物中加入的析晶溶剂优选为含乙酸乙酯的混合物（即石油醚与乙酸乙酯的混合物、正己烷与乙酸乙酯混合物或正庚烷与乙酸乙酯混合物）时，乙酸乙酯的量为混合物的1/5-1/20。剩余深黄色油状物中加入的析晶溶剂优选为石油醚与乙酸乙酯混合液，其用量为辛二酸单酰苯胺质量的2-8倍。

步骤c中，辛二酸单酰苯胺：对甲苯磺酸：甲醇=1g：0.07g：2-20ml。优选为1g：0.07g：10ml。

步骤c中，加热回流反应时间8h。

步骤c中，减压蒸除溶剂后剩余物中与加入水或碱性水溶液的量为辛二酸单酰苯胺质量的1-4。

步骤c中，萃取所用溶剂为乙酸乙酯或二氯甲烷，优选为乙酸乙酯；

本发明合成方法后处理简单，成本较低，不需高温，反应条件温和，收率高，更利于工业化生产。

具体实施方式

以下通过实施例具体说明本发明及其有益效果，本领域普通技术人员对本发明作的显而易见的改变和修饰也包含在本发明之内。

实施例1伏立诺他制备

1）辛二酸酐（中间体Ⅰ）的制备

在500ml圆底烧瓶中，加入辛二酸100g和醋酐120ml，加热回流反应5h，冷至室温，减压蒸除溶剂，剩余物冷却至0℃，得淡黄色固体，过滤，滤饼用乙腈重结晶，得白色结晶辛二酸酐，收率约88.2%。

2）辛二酸单酰苯胺（中间体Ⅱ）的制备

将辛二酸酐100g加至400ml THF中，-8℃搅拌下滴加苯胺65g，滴毕，自然升至室温，搅拌0.5h。加入10%氢氧化钠溶液，调到pH=12，室温搅拌30min，抽滤，滤液用1mol/L盐酸调至pH=4，抽滤，滤饼用水洗涤后干燥，得白色固体辛二酸单酰苯胺，收率80.2%。

3）辛酰苯胺酸甲酯（中间体Ⅲ）的制备

将辛二酸单酰苯胺100g和对甲苯磺酸7g溶于400ml甲醇中，加热回流8h，冷至室温，减压蒸除溶剂，剩余物中加入水100ml，用乙酸乙酯萃取3次，每次100ml，合并乙酸乙酯层，经水洗、无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩至干，剩余深黄色油状物中加入石油醚与乙酸乙酯混合液600ml，乙酸乙酯的量为石油醚与乙酸乙酯混合液的1/10，室温搅拌1h，抽滤，滤饼烘干，得到类白色固体辛酰苯胺酸甲酯，收率87.6%。

4）伏立诺他的制备

氯化羟胺52.8g加至500mL无水甲醇中，室温搅拌溶解后，缓慢加入甲醇钠51.3g，搅拌0.5h，过滤，滤液中加入辛酰苯胺酸甲酯100g，25℃搅拌16h后，用甲醇钠控制pH=9，室温搅拌0.5h，抽滤，滤饼用水洗涤，将滤饼用1mol/L的盐酸调pH=7，搅拌0.5h后，抽滤，滤饼用水洗涤，烘干后用乙醇重结晶，得白色晶体，收率90.5%。

实施例2伏立诺他制备

1）辛二酸酐（中间体Ⅰ）的制备

在500ml圆底烧瓶中，加入辛二酸100g和醋酐140ml，加热回流反应5h，冷至室温，减压蒸除溶剂，剩余物冷却至0℃，得淡黄色固体，过滤，滤饼用甲醇重结晶，得白色结晶辛二酸酐，收率约90.2%。

2）辛二酸单酰苯胺（中间体Ⅱ）的制备

将辛二酸酐100g加至400ml THF中，-10℃搅拌下滴加苯胺65g，滴毕，自然升至室温，搅拌0.5h。加入10%氢氧化钠溶液，调到pH=10，室温搅拌30min，抽滤，滤液用1mol/L盐酸调至pH=5，抽滤，滤饼用水洗涤后干燥，得白色固体辛二酸单酰苯胺，收率81.5%。

3）辛酰苯胺酸甲酯（中间体Ⅲ）的制备

将辛二酸单酰苯胺100g和对甲苯磺酸7g溶于1000ml甲醇中，加热回流8h，冷至室温，减压蒸除溶剂，剩余物中加入碱性水溶液300ml，用乙酸乙酯萃取3次，每次120ml，合并乙酸乙酯层，经水洗、无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩至干，剩余深黄色油状物中加入正己烷与乙酸乙酯混合物400ml，乙酸乙酯量为正己烷与乙酸乙酯混合物的1/5，其中石油醚与乙酸乙酯混合液中石油醚和乙酸乙酯比例为10:1，室温搅拌1h，抽滤，滤饼烘干，得到类白色固体辛酰苯胺酸甲酯，收率89.6%。

4）伏立诺他的制备

氯化羟胺31g加至400mL无水甲醇中，室温搅拌溶解后，缓慢加入甲醇钠25g，搅拌0.5h，过滤，滤液中加入辛酰苯胺酸甲酯100g，18℃搅拌反应26h后，用甲醇钠控制pH=13，室温搅拌0.5h，抽滤，滤饼用甲醇洗涤，将滤饼用1mol/L的盐酸调pH=4，搅拌0.5h后，抽滤，滤饼用甲醇洗涤，烘干后用乙腈重结晶，得白色晶体，收率92.1%。

实施例3伏立诺他制备

1）辛二酸酐（中间体Ⅰ）的制备

在500ml圆底烧瓶中，加入辛二酸100g和醋酐150ml，加热回流反应5h，冷至室温，减压蒸除溶剂，剩余物冷却至0℃，得淡黄色固体，过滤，滤饼用二氯甲烷重结晶，得白色结晶辛二酸酐，收率约91.4%。

2）辛二酸单酰苯胺（中间体Ⅱ）的制备

将辛二酸酐100g加至200ml乙酸乙酯中，-10℃搅拌下滴加苯胺65g，滴毕，自然升至室温，搅拌0.5h。加入10%氢氧化钠溶液，调到pH13，室温搅拌30min，抽滤，滤液用1mol/L盐酸调至pH=2，抽滤，滤饼用水洗涤后干燥，得白色固体辛二酸单酰苯胺，收率82.3%。

3）辛酰苯胺酸甲酯（中间体Ⅲ）的制备

将辛二酸单酰苯胺100g和对甲苯磺酸7g溶于600ml甲醇中，加热回流8h，冷至室温，减压蒸除溶剂，剩余物中加入碱性水溶液400ml，用二氯甲烷萃取3次，每次40ml，合并有机相，经水洗、无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩至干，剩余深黄色油状物中加入正庚烷与乙酸乙酯混合物800ml，乙酸乙酯的量为正庚烷与乙酸乙酯混合物的1/20，室温搅拌1h，抽滤，滤饼烘干，得到类白色固体辛酰苯胺酸甲酯，收率88.9%。

4）伏立诺他的制备

氯化羟胺80g加至1000mL无水甲醇中，室温搅拌溶解后，缓慢加入甲醇钠61.5g，搅拌0.5h，过滤，滤液中加入辛酰苯胺酸甲酯100g，30℃搅拌14h后，用甲醇钠控制pH=12，室温搅拌0.5h，抽滤，滤饼用水洗涤，将滤饼用1mol/L的盐酸调pH=5，搅拌0.5h后，抽滤，滤饼用甲醇洗涤，烘干后用二氯甲烷重结晶，得白色晶体，收率91.7%。

实施例4伏立诺他制备

1）辛二酸酐（中间体Ⅰ）的制备

在500ml圆底烧瓶中，加入辛二酸100g和醋酐200ml，加热回流反应5h，冷至室温，减压蒸除溶剂，剩余物冷却至0℃，得淡黄色固体，过滤，滤饼用四氢呋喃重结晶，得白色结晶辛二酸酐，收率约91.9%。

2）辛二酸单酰苯胺（中间体Ⅱ）的制备

将辛二酸酐100g加至2000ml DMF中，-5℃搅拌下滴加苯胺65g，滴毕，自然升至室温，搅拌0.5h。加入10%氢氧化钠溶液，调到pH至8，室温搅拌30min，抽滤，滤液用1mol/L盐酸调至pH=4，抽滤，滤饼用水洗涤后干燥，得白色固体辛二酸单酰苯胺，收率84.1%。

3）辛酰苯胺酸甲酯（中间体Ⅲ）的制备

将辛二酸单酰苯胺100g和对甲苯磺酸7g溶于200ml甲醇中，加热回流8h，冷至室温，减压蒸除溶剂，剩余物中加入水400ml，用二氯甲烷萃取3次，每次150ml，合并有机相，经水洗、无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩至干，剩余深黄色油状物中加入正庚烷400ml，室温搅拌1h，抽滤，滤饼烘干，得到类白色固体辛酰苯胺酸甲酯，收率88.5%。

4）伏立诺他的制备

氯化羟胺211g加至1200mL无水甲醇中，室温搅拌溶解后，缓慢加入甲醇钠180g，搅拌0.5h，过滤，滤液中加入辛酰苯胺酸甲酯100g，25℃搅拌反应0.5h后，用甲醇钠控制pH=11，室温搅拌0.5h，抽滤，滤饼用甲醇洗涤，将滤饼用1mol/L的盐酸调pH=6，搅拌0.5h后，抽滤，滤饼用水洗涤，烘干后用甲醇重结晶，得白色晶体，收率91.2%。

实施例5伏立诺他制备

1）辛二酸酐（中间体Ⅰ）的制备

在500ml圆底烧瓶中，加入辛二酸100g和醋酐120ml，加热回流反应5h，冷至室温，减压蒸除溶剂，剩余物冷却至0℃，得淡黄色固体，过滤，滤饼用正己烷重结晶，得白色结晶辛二酸酐，收率约90.6%。

2）辛二酸单酰苯胺（中间体Ⅱ）的制备

将辛二酸酐100g加至200ml乙酸乙酯中，-10℃搅拌下滴加苯胺65g，滴毕，自然升至室温，搅拌0.5h。加入10%氢氧化钠溶液，调到pH10，室温搅拌30min，抽滤，滤液用1mol/L盐酸调至pH=2，抽滤，滤饼用水洗涤后干燥，得白色固体辛二酸单酰苯胺，收率83.5%。

3）辛酰苯胺酸甲酯（中间体Ⅲ）的制备

将辛二酸单酰苯胺100g和对甲苯磺酸7g溶于600ml甲醇中，加热回流8h，冷至室温，减压蒸除溶剂，剩余物中加入水100ml，用二氯甲烷萃取3次，每次40ml，合并有机相，经水洗、无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩至干，剩余深黄色油状物中加入石油醚800ml，室温搅拌1h，抽滤，滤饼烘干，得到类白色固体辛酰苯胺酸甲酯，收率88.9%。

4）伏立诺他的制备

氯化羟胺40g加至400mL无水甲醇中，室温搅拌溶解后，缓慢加入甲醇钠31g，搅拌0.5h，过滤，滤液中加入辛酰苯胺酸甲酯100g，30℃搅拌反应20h后，用甲醇钠控制pH=11，室温搅拌0.5h，抽滤，滤饼用水洗涤，将滤饼用1mol/L的盐酸调pH=7，搅拌0.5h后，抽滤，滤饼用水洗涤，烘干后用二氯甲烷重结晶，得白色晶体，收率92.2%。

Claims (16)

1.一种伏立诺他制备方法，包括a.辛二酸酐的制备，b.辛二酸单酰苯胺的制备，c.辛酰苯胺酸甲酯的制备，d.伏立诺他的合成，其特征在于，步骤d具体包括如下步骤：氯化羟胺加至无水甲醇中，室温搅拌溶解后，缓慢加入甲醇钠，搅拌0.5h，过滤，滤液中加入辛酰苯胺酸甲酯，控制温度10℃-40℃搅拌反应，用甲醇钠控制pH9-13，室温搅拌0.5h，抽滤，滤饼用水或甲醇洗涤后，将滤饼用1mol/L的盐酸调pH4-7，搅拌0.5h后，抽滤，滤饼用水或甲醇洗涤，烘干后重结晶，得白色晶体。

2.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤d中，氯化羟胺：无水甲醇：甲醇钠：辛酰苯胺酸甲酯=31-211g：400-1200mL：25-180g：100g；滤液中加入辛酰苯胺酸甲酯后，控制温度25℃搅拌反应0.5h-26h。

3.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤d中，氯化羟胺：无水甲醇：甲醇钠：辛酰苯胺酸甲酯=40-80g：400-900mL：20.5-61.5g：100g；滤液中加入辛酰苯胺酸甲酯后，控制温度25℃搅拌反应16h-26h。

4.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤d中，烘干后用乙醇、甲醇、乙腈、DMF、二氯甲烷重结晶，更优选用乙醇重结晶。

5.根据权利要求1所述伏立诺他制备方法，其特征在于，步骤a具体包括如下步骤：辛二酸和醋酐，加热回流反应，冷至室温，减压蒸除溶剂，剩余物冷却至0℃，得淡黄色固体，过滤，滤饼重结晶，得白色结晶辛二酸酐。

6.根据权利要求5所述制备方法，其特征在于，步骤a中，辛二酸：醋酐=1：1.2-2.0；重结晶所用溶剂为甲醇、乙腈、THF、正己烷、乙醇或二氯甲烷，优选为乙腈。

7.根据权利要求1所述伏立诺他制备方法，其特征在于，步骤b具体包括如下步骤：将辛二酸酐加至有机溶剂中，在-10℃—-5℃搅拌下滴加苯胺，滴毕，自然升至室温，搅拌0.5h；调pH至碱性，室温搅拌30min，抽滤，滤液调至pH酸性，抽滤，滤饼用水洗涤后干燥，得白色固体辛二酸单酰苯胺。

8.根据权利要求7所述伏立诺他制备方法，其特征在于，步骤b中，所述有机溶剂为THF或DMF或乙酸乙酯，优选THF。

9.根据权利要求7所述制备方法，其特征在于，步骤b中，辛二酸酐:THF:苯胺=1g:2-20ml:0.65g。

10.根据权利要求7所述制备方法，其特征在于，步骤b中，调ph碱性所用试剂为10%氢氧化钠溶液，调至ph=8-13；调ph酸性所用试剂1mol/l盐酸，调值pH=2-5。

11.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤c辛酰苯胺酸甲酯的制备具体包括如下步骤：取辛二酸单酰苯胺和对甲苯磺酸，溶于甲醇溶剂中，加热回流反应，冷至室温，减压蒸除溶剂，剩余物中加入水或弱碱性水溶液，用乙酸乙酯或二氯甲烷萃取，干燥，过滤，滤液减压浓缩至干，剩余深黄色油状物中加入析晶溶剂，室温搅拌1h，抽滤，滤饼烘干，得到类白色固体辛酰苯胺酸甲酯。

12.根据权利要求5所述制备方法，其特征在于，步骤c中，所述析晶溶剂用量为辛二酸单酰苯胺质量的2-8倍，所述析晶溶剂为石油醚、石油醚与乙酸乙酯的混合物、正己烷、正己烷与乙酸乙酯混合物、正庚烷、正庚烷与乙酸乙酯混合物。

13.根据权利要求6所述制备方法，其特征在于，步骤c中，所述析晶溶剂为石油醚与乙酸乙酯的混合物、正己烷与乙酸乙酯混合物、正庚烷与乙酸乙酯混合物时，乙酸乙酯的量为混合物的1/5-1/20。

14.根据权利要求5所述制备方法，其特征在于，步骤c中，辛二酸单酰苯胺：对甲苯磺酸：甲醇=1g：0.07g：2-20ml。

15.根据权利要求5所述制备方法，其特征在于，步骤c中，减压蒸除溶剂后剩余物中加入水或碱性水溶液的量为辛二酸单酰苯胺质量的1-4倍。

16.根据权利要求5所述制备方法，其特征在于，步骤c中，萃取所用溶剂为乙酸乙酯或二氯甲烷。