CN104693059A - 二乙酰己二胺诱导分化剂的晶型及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种二乙酰己二胺诱导分化剂的晶型及其制备方法和应用。通过二乙酰己二胺环状多聚体的合成以及分离纯化产物两个步骤制备，二乙酰己二胺分子间以氢键相联呈环状多聚体。它能够使癌细胞诱导分化转化为正常细胞，从而达到治疗目的，毒副作用小，对中，晚期癌症患者均有较好疗效。

Description

二乙酰己二胺诱导分化剂的晶型及其制备方法和应用

技术领域

本发明公开了一种二乙酰己二胺诱导分化剂的结晶形式及其制备方法，以及在治疗肿瘤方面药物中的应用。

背景技术

恶性肿瘤（癌症）是一种细胞分化障碍性疾病，正在成为人类最为致命的“杀手”。化疗和放疗作为传统的恶性肿瘤及白血病的治疗手段，其主要作用机制是通过破坏DNA遗传物录和修饰，抑制和杀伤高增殖状态的细胞。然而，化疗和放疗既可杀伤恶性肿瘤，也可对处于增殖状态的正常细胞（如正常骨髓、消化道、上皮组织等）产生杀伤作用，而且在机体可能承受的条件下，化疗和放疗难以从根本上彻底消除患者体内的肿瘤细胞。因此，在进一步提高化疗和放疗疗效、减少其毒性的同时，开发新的治疗手段是临床上迫切需要解决的问题。

根据肿瘤发病机理，分化障碍或凋亡受阻是某些肿瘤成因之一。上世纪50年代提出的通过诱导肿瘤细胞分化来治愈恶性肿瘤已成为目前肿瘤治疗的重要途径之一。肿瘤细胞的诱导分化是指在分化诱导剂存在下，恶性细胞的形态，生物学，或生物化学方面的诸多方面均向正常细胞的方向演化分化，甚至完全转变成正常细胞。

已发现了一系列对癌细胞有诱导分化作用的物质，又称逆转剂，可使癌细胞转化为正常细胞，如极性平面化合物HMBA（Cancer Res.47,659-666 1987；Proc.Nat.Acad.sci.U.S.A.72,1003-1006,1975），短链脂肪酸（Gann，66577-5801075），嘌呤衍生物（Cell 8,263-269,1976），细胞代谢抑制剂（Cancer Res,36,1809-1813,1976），膜[Na，K]ATP酶抑制剂，乌巴因（Cancer Res，36,1809-1976），维生素D衍生物[Nature(conol)]，274,535-539,1978；Cancer Treat Rep.68,199-205,1984)，视黄酸（维生素A酸）（Cancer Res.47,659-666,1984；CancerTreatRep.68,199-205,1984;Science229,16-22,1981），朊酶（Bristol myers cancer symposia 8,205-222,1981），DNA或RNA合成的抑制剂（In Modem Trends inhuman leukemia IV Haematology and Blood Transfusion 29），甾类激素（Blood 4，709-721，1983）等。

上述这些诱导分化剂从毒性和疗效来看，美国纽约国家癌症中心发表的混杂的极性-非极性平面化合物HMBA（hexamethylene bisacetamide）较好，对多种癌细胞有效，在II期临床中（Blood,Vol 80，No 10，pp 2604-2609，1992）取得良好效果（CR+PR=32%），然而治疗效果受到剂量依赖性毒性限制（Cancer Res。48，7304-7309，1988），这里所指毒性是指血小板降低达4级或出血和中枢神经毒性（个别达4级），主要表现为激动不安，幻觉，震颤，行动失调。HMBA临床试验血药浓度只能用到0.86mM（但体外试验指出要较好的发挥诱导分化作用需2-3mM），不能发挥较好的作用，限制了该药的应用（Blood，80：2604），他们转向研究剂量小的第二代药物SAHA（Suberoylanilide hydroxamic acid），但其疗效却不太高。据报到SAHA治疗MDS的15个病例中仅1例，达CR（Journal of Clinical Oncology, 2004 ASCO Annual Meeting Proceedings(post-meeting Edition).Vol 22，No 14s july 15 Supplement），2004 :3027），2008年的最新临床试验结果，对MDS的41个病例仅有2例达CR，2例为血相数据不完全的CR[CR+PR约10%，（ Blood，111：1060， 2008）]。

固体化学药物的多晶型现象是一种普遍物质存在的自然现象.近年来,受到国内外医学界的普遍关注,晶型的差异造成了药物理化性能的不同,在临床上表现为不同的疗效,直接影响药物的应用和治疗效果。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术中存在的不足，提供一种具有更好诱导分化性能的二乙酰己二胺晶型(代号CAHB)。

本发明的另一个目的是提供一种二乙酰己二胺晶型的制备方法。

本发明的还有一个目的是提供一种二乙酰己二胺晶型在制备治疗肿瘤方面药物中的应用。

HMBA和我们以前获得的肿瘤逆转剂组成物及其制备方法(ZL96105417.4)未报导过它的晶型，我们发现了一种新的晶型具有更好的诱导分化性能，副作用小，疗效好。

一种二乙酰己二胺诱导分化剂的晶型，其特征在于二乙酰己二胺分子间以氢键相联呈环状多聚体，具有如下通式：

单晶属三斜晶系，空间群为PÏ，晶胞参数a=4.960(20)，b=5.463(20)，c=12.434(30)Å，α=94.21(2)，β=99.17(2)，γ=116.61(4)，晶胞体积V=293.4（17）ų；

晶型的X射线粉末衍射数据如下：

一种二乙酰己二胺诱导分化剂的晶型的制备方法，包含二乙酰己二胺环状多聚体的合成以及分离纯化产物两个步骤，其特征在于：

1）在甲苯的存在以及30-120℃下，己二胺与酰化剂反应制备二乙酰己二胺，所述的酰化剂选自乙酰氯、醋酸酐或醋酸酯；

2）将产物加热到100~250℃，除去未反应物及部分杂质，冷却至到60℃以下，加入溶剂，所述的溶剂选自水、甲醇的水溶液、乙醇的水溶液以及丙醇水溶液中的任意一种，再经柱层析，结晶得二乙酰己二胺诱导分化剂的晶型，它为白色片状结晶二乙酰己二胺环状多聚体。

我们把二乙酰己二胺诱导分化剂的晶型，即白色片状结晶二乙酰己二胺环状多聚体简称为CAHB。

一种二乙酰己二胺诱导分化剂的晶型作为治疗癌症即抗恶性肿瘤药物的应用。

本发明的二乙酰己二胺诱导分化剂的晶型，它能够使癌细胞诱导分化转化为正常细胞，从而达到治疗目的，毒副作用小，对中，晚期癌症患者均有较好疗效。可以单独使用，也可以联合使用，可以注射液，胶囊，片剂等剂型使用。

本发明方法制得的二乙酰己二胺诱导分化剂（CAHB）临床血药浓度可以达到2-3mM而毒副作用很小。

本发明的二乙酰己二胺的诱导分化剂在有疗效的浓度范围内副作用较小，血小板降低在0-1级范围内，无中枢神经毒性。其它如心，肝，肾，血压，呼吸，免疫，造血系统等基本无影响，肠胃系统有稍许恶心呕吐，停药或服一般防呕吐药如胃复康后消失。静脉一次给药LD₅₀为3453mg/Kg,腹腔给药LD₅₀为3190.4mg/Kg。药代动力学给出最高血药浓度为2.86mM,临床试验最大耐受量为37.5g/m²/日，正常用药量为16~28g/m²/日，最好为24g/m²/日。

本发明的二乙酰己二胺的诱导分化剂可使肿瘤细胞恢复为正常细胞，临床试验已证实对実体癌(如肺癌，肾癌，淋巴癌，结肠癌，乳腺癌，胃癌等)和MDS有效，并且可用于失去手术机会或不能耐受放疗，化疗的晚期肿瘤的病人。例如一肺鳞癌病人（Y4N3Mo IV）曾打开过胸部，无法手术又缝合，原估计最多可存活1-2月，经用本发明药后，右肺转移消失，左肺原发癌缩小86%，已缓解26个月以上。

本发明的二乙酰己二胺的诱导分化剂在使用时不需要每天24小时连续滴注，而是以12~28g/m²/day剂量，最好是24g/m²/day，每天8~12小时给药。连续10~20天，休息7~28天为一疗程。再进行下一疗程。

本发明的二乙酰己二胺的诱导分化剂可以单独使用，也可以与其它有协同作用的药物联合使用，如5-氟脲嘧啶，长春新碱，维甲酸等。

本发明的二乙酰己二胺的诱导分化剂可以注射液静脉滴注，也可以胶囊，片剂，缓释剂，口服液，纳米制剂等通过口服或鼻饲等途径给药。

本发明的二乙酰己二胺的诱导分化剂不仅本身在治疗中有用，同时还可以用来完善其它治疗技术（如外科手术）或配合其它治疗方法（如放疗，化疗），并且可用来预防癌症。

附图说明

图1是本发明的二乙酰己二胺诱导分化剂(CAHB)的X射线粉末衍射图。

图2是对照品国外样品HMBAX射线粉末衍射图。

图3 是本发明的二乙现己二胺诱导分化剂(CAHB)的热分析图.

图4 是对照品国外样品HMBA的热分析图.

图5是本发明二乙酰己二胺诱导分化剂（CAHB）的高压液体色谱测定图。

图6是对照品国外样品HMBA（二乙酰己二胺单体）高压液体色谱测定图。

其中图1具体数据如下：

图2具体数据如下：

具体实施方式

下面结合具体附图和实施例对本发明作进一步说明。

实施例1：

（一）二乙酰己二胺诱导分化剂的制备方法

包含如下步骤：

1．将重新蒸馏精制的己二胺1M加入反应器中，加入400ml甲苯，在30-120^oC下加入0.5~3M的酰化剂(酰化剂可选乙酰氯、醋酸酐以及醋酸乙酯任一种)，加完后继续搅拌0.5-2小时，除去溶剂得二乙酰己二胺粗产品。

2．将产物即粗产品加热到100~250℃，除去未反应物及部分杂质，冷却至到60℃以下，加入溶剂，所述的溶剂选自水、甲醇的水溶液、乙醇的水溶液以及丙醇水溶液中的任意一种，再经柱层析，结晶得二乙酰己二胺诱导分化剂的晶型，它为白色片状结晶二乙酰己二胺环状多聚体。

该二乙酰己二胺环状多聚体CAHB经X射线单晶衍射测定，呈环状多聚体。X射线粉末衍射图如图1实验条件：RigakuD/max-3D粉末衍射仪，CaKa辐射，石墨单色器，40kV，80mA，扫描速度为8°/min。

背景技术部分国外报导的HMBA，临床用Aldrich公司产品，我们对它同时作了X射线粉末衍射图，如图2，实验条件：RigakuD/max-3D粉末衍射仪，CaKa辐射，石墨单色器，40KV，80mA，扫描速度为8°/min，与图1对比有明显的差异。

该二乙酰己二胺诱导分化剂CAHB做了热分析，如图3

国外样品HNBA同时也做了热分析,如图4与图3对比有明显差异。

本发明二乙酰己二胺诱导分化剂的高压液相色谱测定如图5，纯度>99.8%，三个杂质峰。

背景技术部分国外样品HMBA同时测定了高压液相色谱，如图6，纯度小于99%，有6个杂质峰。

本发明二乙酰己二胺诱导分化剂的其它测定结果如下：M.P=127.3-127.6⁰C，元素分析 C₁₀H₂₀N₂O₂ 计算 C 59.97；H 10.06；N 13.99；实测值 C 60.11；H 9.81；N 14.39，IR（KBr） v_max 3302, 3204(聚合体)， 3067（缔合），2987，2829（v_as C-H）, 2860.6, 2806.6(v_s NH)，1630，1537, 1234(v C-NH)，1471.6，1434.1，1209.1，1178.6，1097.6（-C-CH₂）；MS（EI） m/e 200；MS(CI) m/e 400(M⁺)；MS(FAB) m/e 400; H_NMR(CDCL₃) δ_H 1.2-1.6 (8H，m，(CH₂)₄)，2.0 (6H, s, -C-CH₃), 3.1-3.5(4H, D, -CH₂), 6.0(2H, m, -NH)；UV λ_max 198_nm (水溶液)。

（二）临床前的试验

药物纯度测定主要回答药物和杂质的含量。

体外生物学试验着重回答下述问题：

对体外培养的癌细胞是否有分化诱导作用；对体外培养癌细胞形态的影响；对体外培养癌细胞染色体的影响；对体外培养恶性肿瘤细胞的抑制作用；对体外培养癌细胞表面癌相关抗原丢失的作用；

动物试验着重回答下述问题；

对中枢神经的毒性；测定半致死量；对各器官的作用；对移植癌的影响；对化学致癌物质的阻断作用；

在本试验中用了下述物质和方法：

1、高压液体色谱法测定药物和杂质的含量。

2、癌细胞株。具体包括：lewis肺癌细胞；人胃癌细胞系LAH-GC-1；人早幼粒白血病细胞株HL-60；人胃腺癌细胞SGC-7901；人膀恍移行癌细胞系BIU-87；人宫颈癌细胞；人喉癌细胞鼠神经母细胞。

3、培养条件：

培养基为RPMI-1640（GIBCO，含15%小牛血清，100v/ml青霉素，100µg/ml链霉素，4ml-谷氨酰胺，和非必要氨基酸（GIBCO），在5%CO₂的37℃保温箱中单层贴壁培养。

4、NBT还原能力测定

将药物作用6天的细胞和对照组细胞在4℃下1000rpm离心5分钟，弃上液，每管加入0.1% NBT溶液0.5ml，含TPA100ng，置37℃保温箱内保温1小时，1000rpm离心5分钟，弃上液，取细胞沉淀涂片，Wright-Giemsa染色，油镜下每玻片观察200个细胞，胞浆内有兰黑色甲替颗粒者为NBT阳性细胞，计算阳性百分率。

5、细胞形态学观察

将药物作用6天的细胞和对照组细胞在4℃条件下，1000rpm离心5分钟，弃上液，取细胞沉淀涂片，Wright-Giemsa染色，油镜下观察细胞的形态变化，每片观察200个细胞，按细胞分类法计数，计算分化细胞的百分率。

6、酸性磷酸酶活力测定

用酶水解磷酸对硝基苯法，取药物作用第6天的各组细胞5X10⁵个（苔酚兰排斥法计数活细胞数），离心，弃上液，加入0.1% Triton X-100 20µL，混均，置冰浴内30分钟，加入0.5ml 38mM 柠檬酸缓冲液（pH 4.8，含0.1% Triton X-100和4.2mM磷酸对硝基苯），于37℃水浴保温15分钟，立即加入0.8ml 0.1N NaOH终止反应，室温放置30分钟，用紫外分光光度计在波长410nm处测定光密度值，从对硝基酚吸光度标准线求出对硝基酚的释放量，酶活力单位表示为10⁶个细胞每分钟产生对硝基酚的µmol数。

7、表面癌相关抗原丢失的检测

生长在盖玻片上的LAH-GC-1人胃癌细胞经磷酸盐缓冲液（PBS）漂洗后，置37℃水浴上加0.5%的戊二醛溶液（25%戊二醛用0.072mol/L的二甲砷酸钠和0.72%蔗糖缓冲液稀释，pH 7.5），室温下固定30分钟，PBS漂洗。以抗人胃癌单克隆抗体ID12为1抗，辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG为2抗，加Karnovsky底物液进行免疫过氧化物酶染色。细胞膜着棕色或棕黄色为阳性。显微镜下计数200个细胞，计算阳性百分率及抗原丢失率。抗原丢失率=（对照组阳性率-实验组阳性率）/对照组阳性率。也可用直接免疫荧光法：细胞固定后与异硫氰酸荧光素标记的单抗ID12反应，荧光显微镜观察，细胞膜呈黄绿色者为阳性。

8、CAHB对神经系统的影响

ICR小鼠80只，随机分组，每组20只，雌雄各半，设正常对照组。CAHB按266、400、800mg/Kg(分别相当于1/15 LD50，1/10 LD50，及1/5 LD50)给药3组，尾静脉注射给药后，将动物分批放入自主活动计数仪，观察小鼠自主活动情况，记录活动数并统计比较，另外采用爬杆法，逐只观察动物协调运动表现

9、CAHB对动物移植癌的影响

用2.5mM的 CAHB与胃腺癌细胞系LAH-GC-1细胞一起培养120小时，然后以1.0-1.2X10⁷活细胞接种在裸鼠皮下，观察对照组和CAHB组的长癌情况。

10、CAHB对动物急性毒性试验

上海小鼠40只（雌雄各半），体重18-22g，分别一次尾静脉注射CAHB 5000，4200，3528，2963mg/Kg体重，给药当天持续观察，以后每天观察一次，连续14天，观察呼吸频率，眼球突出，肌肉震颤，抽槒，紫绀，死亡时间，死亡数及存活小鼠体重，计算LD50（一次静脉注射）

取昆明鼠56只，随机分为7组，一次腹腔给药，药剂量按K=0.84等比稀释，最高剂量为600mg/Kg,观察10天，记录中毒症状及病理改变，计算一次腹腔注射LD50。

通过上述实施例得出如下结果：

高压液体色谱测定CAHB含量为99.824%，含有3个<0.05%的杂质峰。国外“Aldrich”HMBA样品含量为98%，有多于6个杂质峰杂质总量>1%。CAHB含量明显高于HMBA。

CAHB能明显诱导HL-60细胞（其它受试细胞也有类似结果）分化，在2mM浓度下，NBT阳性率为81%，形态分化率为89.5%。酸性磷酸酶是嗜中性细胞胞浆的标志酶，当HL-60细胞彼诱导分化时，该酶活性升高，用2mM的CAHB处理 HL-60细胞第6天，细胞内酸性磷酸酶活性明显升高，且呈一定的量效关系。

CAHB对人胃癌细胞系（SGC-7901）的诱导分化结果，对照组可呈明显的增殖和分裂相，倍增时间为48小时，最大增长倍数是6.42倍（120小时）。而实验组生长速度减慢，倍增时间为99.6小时，最大增长倍数为2.41倍。有效浓度为1.5-2.5mMCAHB。说明CAHB能抑制癌细胞增殖，使生长率下降，倍增延长。根据Tubiana的研究，肿瘤倍增时间与肿瘤病人的存活率呈对数正态分布，CAHB处理癌细胞后倍增时间延长，说明有良性逆转性。

CAHB对体外倍养癌细胞的改变：根据CAHB对人胃癌系（SGC-7901）处理后的电镜观察，24小时后即有形态学改变，主要为细胞变长，伸出一个或数个突起，类似成纤维或星状细胞。表面癌相关抗原丢失测定丢失率达70%。连续处理的细胞逐渐衰老退变以至死亡，这是癌细胞逆转后经历了正常细胞而死亡，说明CAHB诱导的不可逆性。CAHB作用后染色体条数降低平均每个细胞染色体减少约9.27条对5种细胞畸变（即双着丝粒，环状，单体断裂，断片和微小体）观察，结果畸变率对照组为21.5%，实验组为6%，实验组明显降低（P<0.01），说明细胞恶性程度降低。同时观察到3H-TdR 4小时参入率降低，抑制DNA合成平皿克隆形成明显降低，细胞上清液中CEA降低，β2-M降低，LDH总活力减少，这些均说明癌细胞增殖受到抑制。

CAHB动物试验结果：

CAHB对神经系统影响：CAHB在低，中，高剂量静脉给药后，小鼠爬杆运动表现与正常对照组比较，无明显异常发现；自主活动计数与对照组比较无明显统计学差异，给药后，连续观察2周，动物无其它异常，无死亡，结果提示，用药后，对小鼠神经系统无明显影响。

CAHB对移植癌的影响：对照组长癌为6/7，实验组长癌为3/9，说明CAHB抑制LAH-GC-1细胞的移植成瘤。

用丁羟基丁基亚硝胺诱发致癌，用CAHB抑制，结果对照组致癌19/20，实验组仅为3/20，说明CAHB可以阻断丁羟基丁基亚硝胺的致癌作用。

对小鼠静脉注射，用Bliss法计算，LD50为3453mg/Kg，其95%可信限为3245-3673mg/Kg，腹腔一次注入LD50为3190mg/Kg，其95%可信限为2968-3412mg/Kg，病理组织学检查，心、肝、肺、脾、胃及小肠均无病理改变。

（三）I期临床试验

主要进行，耐受性试验，毒性试验和药代动力学试验。共48例骨髓增生异常综合症（MDS）患者.均能很好的耐受,未出现中途退出试验者。

耐受性试验：最大耐受量为37.5g/m²/day。耐受性试验分三组：16g/m²•次X6例，22g/m²•次X12例，28g/m²•次X6例，共24例。每次每剂固定滴注（也可口服）时间为8小时，每个患者只接受一个剂量。三个剂量组患者均能很好耐受,未出现不能耐受的不良反应。

毒副作用：根据WHO急性亚急性反应分度标准，对受试者进行即刻、近期和后期反应观察，包括生命体征、体力状况、发烧、寒战、心电图、恶心呕吐、腹泻、便秘等肠胃道反应，皮疹、脱发、周围神经病变、口腔炎、血、尿常规、肝肾功能、骨髓涂片等、一旦出现与药物相关或不能忍受的不良反应立即停药，观察可逆性。凡用药30天内的不良事件均予记录。结果：(1) 消化系统：在22g/m²和28g/m²剂量组各有一例恶心呕吐的消化道反应，不需处理，症状自然消失，各剂量组共有五例患者在用药后出现ALT轻度升高(小于正常值高限的二倍)，无症状，未予以治疗。(2)心血管系统：在28g/m²剂量组，一例用药后1天心电图提示偶发室性早博，偶发室性融合波，无不适主诉，未予以治疗，继续观察，4天后正常。(3) 内分泌系统：各剂量组共观察到26例空腹血糖升高，但均未达到糖尿病的诊断标准。部分患者在继续用药过程中，未经降糖治疗，血糖恢复正常。(4) 造血系统：在各剂量组，用药后，WBC、RBC、Hb、血小班计数均有小量下降、根据毒性作用的分极标准，均在0-1级。（5）神经系统：无一例神经系统毒性。

单次给药药代动力学试验，剂量与耐受性；入选18名受试者，分3组，每组6名，每一名受试者按拉丁方次序接受3个剂量试验。结果K值平均分别为0.366±0.092h^-1：t_1/2平均分别为2.053±0.707h：C_max均值为468.66±169.34（即2.3433±0.8467mM/L）；MRT平均为15.195±1.558；AUC_0-21和AUC_{0- ∞}依次分别平均为893.50±373.48和900.18±375.19，1445.14±541.14和1458.52±544.02，2249.96±1035.54和2275.56±1034.54。尿液中的KeL依次分别为0.171±0.035h^-1，0.184±0.018h^-1，0.177±0.026h^-1，t_1/2依次分别为4.279±1.186h, 3.817±0.473h，4.007±0.703h，累积排泄百分率分别为43.43%±15.32%, 43.72±10.69%和43.70%±11.60%。

多剂量给药的耐受性和药代动力学研究；根据单次给药的耐受性试验结果，确定中等治疗剂量为24g/m²/次的5%CAHB，6名受试者，每一名受试者连续给药十天。首剂给药后，按单剂给药的药代动力学研究采血时间及留尿时间留取血样和尿样，进行PK测定；第2剂给药于首剂静滴结束后24h开始，第3剂起后一剂给药于前剂静滴开始后24h开始，第10剂给药后,再按单剂给药的药动学研究采血时间及留尿时间留取血样和尿样，进行PK测定.实验结果表明，6名受试者给药后的平均药动学参数分别为：第一次给药后，K值0.36±0.06，t_1/2为1.95±0.31h，C_max为519.83±88.71ug/ml（即2.5993±0.4435mM/L），MRT为15.17±1.29h，Css为242.25±59.65ug/ml，波动指数FI为96.06±42.78，曲线下面积AUC_{0-21 ｗ}为1799.55±465.55h·ug/ml，AUC_{0- ∞}为1833.21±489.67h•ug/ml，尿液累积排泄百分率为55.29%±12.08%，K_el为0.158±0.0241，t_1/2为4.492±0.704h^-1。第10次给药后，K值 0.41±0.10，t_1/2为1.84±0.65h，C_max为576.55±78.19ug/ml(即2.8827±0.3909mM/L)，MRT为15.15±1.61h，Css为231.22±36.55ug/ml，波动指数FI为116.37±曲线下面积AUC_0-21为1721.78±312.45h·ug/ml，AUC_{0- ∞}为1735.20±315.37h•ug/ml，尿液累积排泄百分率为49.41%±15.68%，K_el为0.161±0.0164h^-1，t_1/2为4.342±0.429h。多剂量实验结果显示，多剂量给药无蓄积，药动学参数无明显变化。

根据以上结果，CAHB是副作用相对轻微，安全的，对恶性肿瘤细胞具有诱导分化的药物。

（四）二乙酰己二胺诱导分化剂（CAHB）对MDS的疗效

选定8名18-58岁高危MDS病人，以24g/m²/day剂量，每天8小时静脉滴注(也可口服)，10天为一疗程，间隔28天，进行下一疗程，均用二个疗程，结果如表1所示。

表1 高危MDS患者用药前后骨随原始细胞百分比例情况

﹡（1）疗效标准是根据国际工作组最新疗效标准判定即骨髓完全缓解(CR)为用药后原始粒细胞≤5%,且较用药前减少≥50%.

（2）以上结果均为二个疗程的结果，更多疗程的结果正在试验中。

（五）二乙酰己二胺诱导分化剂（CAHB）对实体癌的疗效

39例实体肿瘤病人，以24g/m²/日剂量，每天8小时静脉滴注（也可口服），10天为一疗程，间隔28天，进行下一疗程。这些病人根据TNM分期，属于Ⅲ_b∽Ⅳ期,病程接近终末阶段，就诊时已无法进行手术和不能耐受化疗和/或放疗.39例共接受71个疗程，接受一个疗程者18例，接受2疗程者14例，3个疗程以上者7例。完全缓解(CR)1例，部分缓解( PR)6例，其中肾癌2例，肺癌4例，食管癌1例，大汉腺癌1例，分别经1-6个疗程治疗，荷瘤存活4-28个月。见表2。

表2 CAHB对实体癌疗效的例子

注:表中转移灶只列出最大的，其它小的均未列出。数据来自X光胸片、CT、磁共振、B超等检查。第一个肺癌为完全缓解，其于为部分缓解。

病情改善(MR)和病情稳定(NR)共24例。病情恶化8例，其中4例在住院期间死亡，死亡有血性休克、脑转移、肝昏迷及心肌梗塞，总有效率17.9%.由于诱导分化剂抑制癌细胞生长不是通过毒杀作用，而是通过诱导作用增加转化前体细胞到终末细胞分化速度，要使肿瘤有可测量的减少，就需要相对长的和连续的暴露到药剂中，国外报到一个疗程时间不够。基于这一考虑仅21位患者接受了二个以上疗程以上的治疗可作为此分化剂的疗效评定，故总有效率(CR+PR)约为33%，完全缓解和部分缓解病人的生命质量上有明显的提高，如表3。

表3 CAHB治疗后缓解病人生命质量分级

表3中，在治疗中约80%的病人庝痛消失或减轻，这对晚期癌症病人提高生命质量很有意义。

Claims (3)

1.一种二乙酰己二胺诱导分化剂的晶型，其特征在于二乙酰己二胺分子间以氢键相联呈环状多聚体，具有如下通式：

单晶属三斜晶系，空间群为PÏ，晶胞参数a=4.960(20)，b=5.463(20)，c=12.434(30)Å，α=94.21(2)，β=99.17(2)，γ=116.61(4)，晶胞体积V=293.4（17）ų；

晶型的X射线粉末衍射数据如下：

。

2.如权利要求1所述的一种二乙酰己二胺诱导分化剂的晶型的制备方法，包含二乙酰己二胺环状多聚体的合成以及分离纯化产物两个步骤，其特征在于：

1）在甲苯的存在以及30-120℃下，己二胺与酰化剂反应制备二乙酰己二胺，所述的酰化剂选自乙酰氯、醋酸酐或醋酸酯；

2）将产物加热到100~250℃，除去未反应物及部分杂质，冷却至到60℃以下，加入溶剂，所述的溶剂选自水、甲醇的水溶液、乙醇醇的水溶液以及丙醇水溶液中的任意一种，再经柱层析，结晶得二乙酰己二胺诱导分化剂的晶型，它为白色片状结晶二乙酰己二胺环状多聚体。

3.如权利要求1所述的一种二乙酰己二胺诱导分化剂的晶型作为治疗癌症即抗恶性肿瘤药物的应用。