CN104673724B - 应用于污水处理中的复合光合细菌制剂及其制备方法 - Google Patents

应用于污水处理中的复合光合细菌制剂及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN104673724B
CN104673724B CN201510095918.3A CN201510095918A CN104673724B CN 104673724 B CN104673724 B CN 104673724B CN 201510095918 A CN201510095918 A CN 201510095918A CN 104673724 B CN104673724 B CN 104673724B
Authority
CN
China
Prior art keywords
seed
bacterium
culture
rhodopseudomonas palustris
sodium
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201510095918.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104673724A (zh
Inventor
蒋常德
朱达
田培根
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Beijing Juyichengguang Technology Co., Ltd.
Original Assignee
Beijing Juyichengguang Technology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Beijing Juyichengguang Technology Co ltd filed Critical Beijing Juyichengguang Technology Co ltd
Priority to CN201510095918.3A priority Critical patent/CN104673724B/zh
Publication of CN104673724A publication Critical patent/CN104673724A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104673724B publication Critical patent/CN104673724B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
    • C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2101/00—Nature of the contaminant
    • C02F2101/30—Organic compounds
    • C02F2101/38—Organic compounds containing nitrogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2101/00—Nature of the contaminant
    • C02F2101/30—Organic compounds
    • C02F2101/40—Organic compounds containing sulfur

Abstract

本发明提供了一种应用于污水处理中能快速降解硫化氢，氨态氮与COD的复合光合细菌制剂及其制备方法。采用紫硫光合细菌中的桃红荚硫菌菌种与紫色非硫光合细菌中的沼泽红假单胞菌菌种经种子活化培养，种子培养，厌氧发酵罐光照培养等培养步骤，得到桃红荚硫菌与沼泽红假单胞菌的高浓度复合光合细菌制剂，该复合光合细菌制剂可以在污水处理中快速高效降解水体中硫化氢，氨态氮与COD。本发明提供了一种桃红荚硫菌与沼泽红假单胞菌两种菌混合培养，生长速度快，菌体含量高，培养时间短，能快速降解污水中硫化氢，氨态氮与COD的复合光合细菌制剂的制备方法。

Description

应用于污水处理中的复合光合细菌制剂及其制备方法
技术领域
本发明属于污水处理技术范围，具体的说是涉及到一种应用于污水处理中能快速降解硫化氢，氨态氮与COD的复合光合细菌制剂及其制备方法。
背景技术
随着城市化进程的不断发展，污水处理厂、污水提升栗站、垃圾中转站、垃圾填埋场等市政处理设施距离人们的生活区越来越近，这些设施在运行过程中产生的恶臭废气已成为影响人们正常生活的一个重要因素。恶臭废气主要包括含硫化合物(硫化氢、甲硫醇、甲基硫醚等)、含氮化合物(氨等)和碳、氢或碳、氧、氧组成的化合物(脂肪酸等)，这类污染物具有含量低、噴觉阈值低等特点。
随着经济的发展和人们生活水平的提高，人们对生活环境的要求也逐步提高，恶臭作为环境公害之一也越来越受到关注。许多国家相继制定了有关臭气排放的法律法规，其中我国出台的《恶臭污染物排放标准》(GB 14554-93)和《城镇污水处理厂污染物排放标准》(GB 18918—2002)都明确规定了废气排放标准。国内外治理臭气所釆用的方法主要有吸附法、吸收法、焚烧、化学氧化和催化燃烧等，然而这些传统的物理化学法存在设备复杂、工艺过程繁琐、能耗高、二次污染后再生困难、不能节能环保等问题。生物法具有处理效率高、环境友好、能耗低、运行费用低廉等优点，已经广泛应用于恶臭污染问题的解决。
城市污水处理厂主要的臭气源是进水和污泥处理部分，即进水格栅、曝气沉砂池、生化池、污泥浓缩池以及最终泥池等工序。污水处理过程中，污水中溶解氧很少或为零时，污水中的细菌会将硫酸盐或硝酸盐作为它们的氧源，然后将硫酸盐还原成亚硫酸盐和硫化物，最后产生硫化氢气体，并伴随着一定的硫醇和含气态化合物。从宏观上可以将恶臭治理分为两类:一类是源头控制，指的是将生产工艺进行改良和完善，主要通过添加恶臭抑制剂或添加一些硫氧化细菌来抑制硫酸盐还原菌的生长控制硫化氢的产生，但还没有添加桃红荚硫菌来抑制污水中硫化氢的技术方案公开。
另外一类是末端净化，指的是将臭气收集并釆用物理法、化学法、生物法及等离子法进行处理。生物除臭技术是指在适宜的环境条件下，利用微生物的生理代谢降解恶臭物质，达到去除臭味的方法。对于硫类恶臭组分，在好氧条件下会被氧化分解为元素硫或者硫酸根离子。胺类恶臭组分，经氨化作用放出NH3，NH3被亚硝化细菌氧化为亚硝酸根，再进一步被硝化细菌氧化为硝酸根。而有机恶臭组分，生物脱臭的最终产物为二氧化碳和水。与传统的物理化学除臭技术相比，具有处理效率高、费用低廉、无二次污染等优点。因此，生物除臭法在城市污水处理厂中得到广泛的应用。
自然界中硫元素的转化主要是在微生物直接或间接参与下完成的。能够氧化硫化物的微生物种类有很多。研究比较多的是光合硫氧化菌和化能无机营养硫氧化菌。它们以无机硫为营养、二氧化碳为碳源，在有氧或无氧的条件下，可以将H2S转化为硫单质或者硫酸盐。
硫酸盐的厌氧还原过程和硫化物的生物氧化过程是生物硫循环中重要的两个反应过程。Kobayashi等人通过在填料柱中接种光合细菌处理厌氧废水来研究硫化物的去除效果，在水力停留时间24h、S2-负荷为107mg/d的情况下，可以达到95%的去除效果。Sublette和Sylvester为探索脱氮硫杆菌的硫氧化能力进行了小试研究，其中进气负荷为4-5mmolH2S/(h g)biomass，搅动速率为300rpm，pH为7.0。结果在出气中没有检测到H2S，反应器中不存在单质硫，填料上有硫酸盐积累，这说明进气中的H2S得以去除。Huang等将养殖废水中分离出来的自养菌ThiobaciUus sp.CHll和异养菌Pseudomonas putida CHll分别固定培养在去除H2S的生物滤池中。通入浓度为60ppm的H2S，流速保持在18-93 L/h之间(相应停留时间为145s和28s)。在这两组滤池中，H2S的去除率都达到95%以上。然而，在任何流速情况下，异养菌的去除效率都低于自养菌。同时还测定了不同浓度 (0-200ppm)对于生物滤池去除能力的影响，温度在28-30℃之间，流速为150 L/h。当H2S浓度为l00ppm，固定有异养菌的生物滤池可以达到最高的去除效率25 g S/(m3.h)= H2S浓度增加到150ppm时，去除效率突然下降。当进气浓度增加到200ppm时，固定有自养菌的生物滤池可以达到更高的去除效率。Duan等将固定有嗜酸氧化硫硫杆菌的活性炭作为水平生物滴滤池的填料，研究其在25-30℃温度条件下对H2S的去除效果。当进气速率为113 gH2S/( m3.h)时该滴滤池可以达到最大的H2S去除效率96%。进入反应器的循环液初始pH值为4.5，而流出时降为1.0-2.0之间。通过研究H2S的去除机制，Duan认为在去除H2S的过程中起作用的主要是H2S的吸附作用和生物氧化作用，而硫酸盐是主要的最终产物。尽管有人利用光合硫氧化菌来处理生物滴滤池中的硫化氢，但也没有相关桃红荚硫菌处理生物滴滤池中硫化氢，氨态氮的技术方案的公开。
桃红荚硫菌：细胞球形，直径1.2-3微米，一般为1.5微米，单个细胞通常被一层粘的荚膜包住，常见有双球形聚合体，四联体和不规则的堆，它们通常被粘液层所包围。厌氧的光能自养菌：有果糖、甘油或有机酸时所有菌株都能在微好氧到好氧的黑暗条件下生长。光合电子供体：硫化物，硫代硫酸盐，硫和分子氢。可光合同化醋酸盐、果糖、延胡索酸盐、甘油、苹果酸盐、丙酮酸和琥珀酸盐。大多数菌株具有同化型硫酸盐还原作用。桃红荚硫菌生活在光线能及的滞水和污泥中，尤其是在含硫化物丰富的环境中。25-30℃、1000-3000lux或更强的光照，PH值7.0-7.5的厌氧环境最适合该菌的生长和氧化作用，在偏离最适条件下，桃红荚硫菌也有较大的适应范围，10-40℃、500-6000lux和PH5-9，均能适应生长，在微好氧黑暗状态下也能生存，条件不适时，该菌的生长处于抑制状态，一旦条件允许，又能继续生长。四川大学的冯甦对紫硫细菌中的桃红荚硫菌进行了研究，认为桃红荚硫菌适于应用到处理含硫污染物方面。但要投入实际运用，还需注意以下几点：第一，桃红荚硫菌的生长速度缓慢，一般要培养两周以后才会有明显的生长趋势，较长的生长周期不利于大规模的应用；第二，桃红荚硫菌在纯培养情况下生长不如与其它菌株混合培养好。当培养物中同时存在其它种类的光合细菌，如紫色非硫细菌、绿硫细菌或其它菌种时，桃红荚硫菌生长要快得多，所以在生产上使用时，可考虑多种菌类混合培养与处理。而到目前为止，还未见有关桃红荚硫菌制备方法技术方案公开。而且从现有文献上来看，大部份复合光合细菌只是对紫色非硫细菌内的菌种进行混合培养，还未有报道紫硫细菌与紫色非硫光合细菌的菌之间进行混合培养。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明提供一种紫硫光合细菌中的桃红荚硫菌与紫色非硫光合细菌中的沼泽红假单胞菌混合培养，生长速度快，菌体含量高，培养时间短，应用于污水处理中能快速降解硫化氢，氨态氮与COD的复合光合细菌制剂及其制备方法。。
为了达到以上效果，本发明所采用的技术方案是：采用紫硫光合细菌中的桃红荚硫菌菌种与紫色非硫光合细菌中的沼泽红假单胞菌按以下步骤进行培养：
、桃红荚硫菌半固体种子活化培养：将桃红荚硫菌种穿刺在半固体桃红荚硫菌培养基中，25-30℃光照培养7-10天，待穿刺的菌线变红并长出菌苔，即可为活化的桃红荚硫菌种；
、沼泽红假单胞菌平板活化：将沼泽红假单胞菌菌种在平板上划线活化，温度25-35℃活化培养3-5天，挑取大个菌落作为活化种子；
、桃红荚硫菌种子培养：将活化的菌种接种至桃红荚硫菌种子液体培养基中，温度25-35℃，光照强度为：1000-3000lux，光照厌氧培养7-10天，检测种子的OD650≥1.2，活菌数≥6亿cfu/ml即为种子培养液；
、沼泽红假单胞菌种子培养：将挑取大个沼泽红假单胞菌菌落作为活化种子接种到种子培养基中，温度25-35℃，光照强度为：1000-3000lux，光照静置培养3-5天，检测种子的OD660≥1.2，活菌数≥10亿cfu/ml即为种子培养液；
、发酵培养：将桃红荚硫菌种子培养液与发酵培养基以1：3-1：5的接种量接种，同时将沼泽红假单胞菌种子培养液与发酵培养基按1：10-1：20的接种量接入，在光照培养罐中厌氧培养4-6天，培养温度25-35℃，光照强度为：1000-4000lux，搅拌速度为120转/分钟，待检测其OD650≥7，活菌数≥60亿cfu/ml，桃红荚硫菌的菌浓度不低于25亿cfu/ml，沼泽红假单胞菌菌浓度不低于30亿cfu/ml，即可放罐，灌装，包装成品；
其中，所述的半固体桃红荚硫菌培养基为：氯化铵0.4-1.2g/L，磷酸二氢钾0.5-1g/L，二水氯化钙0.05-0.2g/L，氯化镁0.1-0.5g/L，醋酸钠2-10 g/L，苹果酸钠0.5-1.5g/L，九水硫化钠0.1-1g/L，琼脂8-10g/L，氯化钠0.5-4g/L， 121℃灭菌15分钟，用醋酸调PH至7.0-7.2，其中九水硫化钠先配制成0.1g/mL单独灭菌；
其中，所述的桃红荚硫菌种子液体培养基为：氯化铵0.4-1.2g/L，磷酸二氢钾0.5-1g/L，二水氯化钙0.05-0.2g/L，氯化镁0.1-0.5g/L，醋酸钠2-10 g/L，九水硫化钠0.1-1g/L，氯化钠0.5-4g/L，121℃灭菌15分钟，用醋酸调PH至7.0-7.2，其中九水硫化钠先配制成0.1g/mL单独灭菌；
其中，所述的沼泽红假单胞菌种子液体培养基为: 氯化铵0.8-1.2g/L，磷酸二氢钾0.5-1g/L，二水氯化钙0.05-0.2g/L，氯化镁0.1-0.5g/L，醋酸钠2-10 g/L，碳酸钠1-3g/L，氯化钠1-2g/L，酵母膏0.5-1.5 g/L ，121℃灭菌15分钟，用灭菌醋酸调PH至7.0-7.2；
其中，所述的沼泽红假单胞菌平板固体培养基为种子液体培养基加入20 g/L的琼脂形成的。
其中，所述的发酵培养基为：氯化铵1g/L，磷酸二氢钾0.5g/L，二水氯化钙0.1g/L，氯化镁0.2g/L，醋酸钠6 g/L，硫代硫酸钠2g/L，酵母膏0.5 g/L ， 氯化钠2g/L，121℃灭菌15分钟，用醋酸调PH至7.0。
本复合光合细菌制剂含有一般常用的紫色非硫细菌中的沼泽红假单胞菌，沼泽红假单胞菌为光能异养菌，兼性好氧，可以在光下营厌氧生活，或在黑暗下营好氧生长。其能利用脂肪酸，C4二羧酸，氨基酸，氨态氮，苯甲酸，环已烷羧酸，乙醇等。分子氢和硫代硫酸钠只能在有少量酵母膏时才能利用。不利用：单糖类和糖醇类，硫化物的。沼泽红假单胞菌施入水体环境中后，它能够有效地将氨态氮，亚硝酸盐等有害物质与低分子有机质吸收组成菌体本身，大幅度降低水体中氨态氮，COD、BOD等。
本复合光合细菌制剂含有桃红荚硫菌，桃红荚硫菌为光能自养菌：有果糖、甘油或有机酸时所有菌株都能在微好氧到好氧的黑暗条件下生长。光合电子供体：硫化物，硫代硫酸盐，硫和分子氢。可光合同化醋酸盐、果糖、延胡索酸盐、甘油、苹果酸盐、丙酮酸和琥珀酸盐。大多数菌株具有同化型硫酸盐还原作用。桃红荚硫菌生活在光线能及的滞水和污泥中，尤其是在含硫化物丰富的环境中，具有较强的硫化氢的降解能力。
本发明的紫硫光合细菌--桃红荚硫菌与紫色非硫光合细菌--沼泽红假单胞菌是从全国各地300多处池塘底泥，河涌底泥，猪粪水处理池，污水处理厂，垃圾处理滤池中分离得到的1000多株光合细菌中筛选出来的，桃红荚硫菌对硫化氢降解效率明显，0.5克/升的硫化钠含量经过48小时后即可全部降解，该桃红荚硫菌（Thiocapsa roseopersicina）由本人保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），编号为CGMCCNO.10344。保藏日期为2015年1月12日。保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。沼泽红假单胞菌具有较强的COD，氨氮降解能力，且能够与该桃红荚硫菌共生共存，互相促进生长。该复合光合细菌制剂的各级培养基是经过多年的优化试验得到的，特别是其发酵培养基，是考察了30多种光合细菌培养基成份中筛选出来的，并充分考虑到了各个培养基成份相互影响，采用正交试验进行多次优化培养基与培养条件，优化后培养总菌数超过60亿cfu/ml，桃红荚硫菌的浓度超过25亿cfu/ml，远远高于现有桃红荚硫菌的培养浓度，而且沼泽红假单胞菌也能达到30亿cfu/ml以上的浓度。
采用上述技术方案的有益效果：本发明桃红荚硫菌种子培养基采用的半固体含硫化钠的培养基，能尽快使期形成无氧环境，从而能够快速促进桃红荚硫菌的生长，而发酵培养基中用硫代硫酸钠代替硫化物，以减少光合菌液中的硫化物带入到水体中而加重硫化氢对水产动物的毒性。同时，在发酵培养基中，利用硫代硫酸钠替代硫化钠减少了硫化钠对沼泽红假单胞的菌的抑制作用，将两种菌种接入发酵培养基的后，前期由于沼泽红假单胞菌的前期延滞期短，在酵母膏等营养物质的刺激下快速繁殖，而经过两至三天的延滞期，在沼泽红假单胞菌的某些产物的刺激下，桃红荚硫菌也在后期快速繁殖起来。从而可达到两种菌体浓度较高的复合型的光合菌制剂。这两种菌都能在微好氧到好氧的条件下进行生长与存活，增强了本复合菌制剂的应用范围。
本发明对培养桃红荚硫菌与沼泽红假单胞菌的混合培养的培养基配方与培养条件进行多次优化，大大缩短了了培养时间，只需发酵4-6天即可获得60亿/毫升以上的光合细菌制剂，提高了生产效率，降低了生产成本。
本复合光合细菌制剂结合了沼泽红假单胞菌能快速繁殖，降解COD，利用氨态氮，低分子有机质与桃红荚硫菌具有超强的降解硫化氢的能力从而能够应用于城市污水处理中降解COD，硫化氢与氨态氮等臭气。
下面结合试验说明本发明复合光合菌制剂在城市污水处理中的效果。
一、用本复合光合细菌制剂处理城市污水
我们在广州市某污水处理厂的2#滴滤塔中的循环液中添加1%的本复合光合细菌制剂，一天后，其出气的硫化氢含量低于0.01mg/m3，NH3小于2mg/m3，相比未加本复合光合细菌制剂前一天检测的数据（硫化氢0.04mg/m3，NH3小于5mg/m3），则有显著改善。
二、用本复合光合细菌制剂进行净化污水
用本光合菌制剂净化污水，具有有机物负荷高、处理效率高、投资小、操作简便、易管理、受季节影响小等优点。我们利用本光合细菌制剂以1%接种量处理炼焦化工污水，调PH至7.5，经过两天后，污水中COD去除率一般在90%以上，硫化氢从初始的150mg/L，下降至0.5mg/L。
具体实施方式
本发明实质性特点可从下述实施例中得以体现，但这些实施例仅作为说明，而不是对本发明进行限制。
实施例1
应用于污水处理中的复合光合细菌制剂的制备方法，采用紫硫光合细菌中的桃红荚硫菌菌种与紫色非硫光合细菌中的沼泽红假单胞菌按以下步骤进行培养：
、桃红荚硫菌半固体种子活化培养：将桃红荚硫菌种穿刺在半固体桃红荚硫菌培养基中， 30℃光照培养8天，待穿刺的菌线变红并长出菌苔，即可为活化的桃红荚硫菌种；
、沼泽红假单胞菌平板活化：将沼泽红假单胞菌菌种在平板上划线活化，温度30℃活化培养4天，挑取大个菌落作为活化种子；
、桃红荚硫菌种子培养：将活化的菌种接种至桃红荚硫菌种子液体培养基中，温度30℃，光照强度为： 3000lux，光照厌氧培养8天，检测种子的OD650为1.4，活菌数为7亿cfu/ml即为种子培养液；
、沼泽红假单胞菌种子培养：将挑取大个沼泽红假单胞菌菌落作为活化种子接种到种子培养基中，温度30℃，光照强度为： 3000lux，光照静置培养4天，检测种子的OD660为1.3，活菌数为11亿cfu/ml即为种子培养液；
、发酵培养：将桃红荚硫菌种子培养液与发酵培养基以1：4的接种量接种，同时将沼泽红假单胞菌种子培养液与发酵培养基按1：15的接种量接入，在光照培养罐中厌氧培养5天，培养温度30℃，光照强度为：3000lux，搅拌速度为120转/分钟，检测其OD650为7.5，活菌数≥66亿cfu/ml，桃红荚硫菌的菌浓度为30亿cfu/ml，沼泽红假单胞菌菌浓度为36亿cfu/ml，放罐，灌装，包装成品；
其中，所述的半固体桃红荚硫菌培养基为：氯化铵1g/L，磷酸二氢钾0.8g/L，二水氯化钙0.1g/L，氯化镁0.3g/L，醋酸钠6 g/L，苹果酸钠1.5g/L，九水硫化钠0.2g/L，琼脂10g/L，氯化钠2g/L， 121℃灭菌15分钟，用醋酸调PH至7.0-7.2，其中九水硫化钠先配制成0.1g/mL单独灭菌；
其中，所述的桃红荚硫菌种子液体培养基为：氯化铵1g/L，磷酸二氢钾0.8g/L，二水氯化钙0.1g/L，氯化镁0.3g/L，醋酸钠6 g/L，九水硫化钠0.2g/L，氯化钠2g/L，121℃灭菌15分钟，用醋酸调PH至7.0-7.2，其中九水硫化钠先配制成0.1g/mL单独灭菌
其中，所述的沼泽红假单胞菌种子液体培养基为: 氯化铵1g/L，磷酸二氢钾0.8g/L，二水氯化钙0.1g/L，氯化镁0.3g/L，醋酸钠4 g/L，碳酸钠2g/L，氯化钠1g/L，酵母膏1.5g/L ，121℃灭菌15分钟，用灭菌醋酸调PH至7.0-7.2；
其中，所述的沼泽红假单胞菌平板固体培养基为种子液体培养基加入20 g/L的琼脂形成的；
其中，所述的发酵培养基为：氯化铵1g/L，磷酸二氢钾0.5g/L，二水氯化钙0.1g/L，氯化镁0.2g/L，醋酸钠6 g/L，硫代硫酸钠2g/L，酵母膏0.5 g/L ， 氯化钠2g/L，121℃灭菌15分钟，用醋酸调PH至7.0。
实施例2
应用于污水处理中的复合光合细菌制剂的制备方法，采用紫硫光合细菌中的桃红荚硫菌菌种与紫色非硫光合细菌中的沼泽红假单胞菌按以下步骤进行培养：
、桃红荚硫菌半固体种子活化培养：将桃红荚硫菌种穿刺在半固体桃红荚硫菌培养基中， 30℃光照培养8天，待穿刺的菌线变红并长出菌苔，即可为活化的桃红荚硫菌种；
、沼泽红假单胞菌平板活化：将沼泽红假单胞菌菌种在平板上划线活化，温度30℃活化培养4天，挑取大个菌落作为活化种子；
、桃红荚硫菌种子培养：将活化的菌种接种至桃红荚硫菌种子液体培养基中，温度30℃，光照强度为： 3000lux，光照厌氧培养7天，检测种子的OD650为1.3，活菌数为6.5亿cfu/ml即为种子培养液；
、沼泽红假单胞菌种子培养：将挑取大个沼泽红假单胞菌菌落作为活化种子接种到种子培养基中，温度30℃，光照强度为： 3000lux，光照静置培养5天，检测种子的OD660为1.5，活菌数为14亿cfu/ml即为种子培养液；
、发酵培养：将桃红荚硫菌种子培养液与发酵培养基以1：4的接种量接种，同时将沼泽红假单胞菌种子培养液与发酵培养基按1：18的接种量接入，在光照培养罐中厌氧培养5天，培养温度30℃，光照强度为：3000lux，搅拌速度为120转/分钟，检测其OD650为7.4，活菌数≥64亿cfu/ml，桃红荚硫菌的菌浓度为31亿cfu/ml，沼泽红假单胞菌菌浓度为33亿cfu/ml，放罐，灌装，包装成品；
其中，所述的半固体桃红荚硫菌培养基为：氯化铵1.1g/L，磷酸二氢钾0.8g/L，二水氯化钙0.1g/L，氯化镁0.3g/L，醋酸钠6 g/L，苹果酸钠1.5g/L，九水硫化钠0.2g/L，琼脂10g/L，氯化钠2g/L， 121℃灭菌15分钟，用醋酸调PH至7.0-7.2，其中九水硫化钠先配制成0.1g/mL单独灭菌；
其中，所述的桃红荚硫菌种子液体培养基为：氯化铵1.1g/L，磷酸二氢钾0.8g/L，二水氯化钙0.1g/L，氯化镁0.3g/L，醋酸钠6 g/L，九水硫化钠0.2g/L，氯化钠2g/L，121℃灭菌15分钟，用醋酸调PH至7.0-7.2，其中九水硫化钠先配制成0.1g/mL单独灭菌
其中，所述的沼泽红假单胞菌种子液体培养基为: 氯化铵1g/L，磷酸二氢钾0.8g/L，二水氯化钙0.1g/L，氯化镁0.3g/L，醋酸钠4 g/L，碳酸钠2g/L，氯化钠1g/L，酵母膏1.0g/L ，121℃灭菌15分钟，用灭菌醋酸调PH至7.0-7.2；
其中，所述的沼泽红假单胞菌平板固体培养基为种子液体培养基加入20 g/L的琼脂形成的；
其中，所述的发酵培养基为：氯化铵1g/L，磷酸二氢钾0.5g/L，二水氯化钙0.1g/L，氯化镁0.2g/L，醋酸钠6 g/L，硫代硫酸钠2g/L，酵母膏0.5 g/L ， 氯化钠2g/L，121℃灭菌15分钟，用醋酸调PH至7.0。

Claims (1)

1.应用于污水处理中的复合光合细菌制剂，其特征在于：采用紫硫光合细菌中的桃红荚硫菌菌种与紫色非硫光合细菌中的沼泽红假单胞菌菌种经种子活化培养，种子培养，厌氧发酵罐光照培养等培养步骤所得的；
复合光合细菌制剂的制备方法在于按以下步骤进行培养：
A、桃红荚硫菌半固体种子活化培养：将桃红荚硫菌种穿刺在半固体桃红荚硫菌培养基中，25-30℃光照培养7-10天，待穿刺的菌线变红并长出菌苔，即可为活化的桃红荚硫菌种；
B、沼泽红假单胞菌平板活化：将沼泽红假单胞菌菌种在平板上划线活化，温度25-35℃活化培养3-5天，挑取大个菌落作为活化种子；
C、桃红荚硫菌种子培养：将活化的菌种接种至桃红荚硫菌种子液体培养基中，温度25-35℃，光照强度为1000-3000lux，光照厌氧培养7-10天，检测种子的OD650≥1.2，活菌数≥6亿cfu/ml即为种子培养液；
D、沼泽红假单胞菌种子培养：将挑取大个沼泽红假单胞菌菌落作为活化种子接种到沼泽红假单胞菌种子培养基中，温度25-35℃，光照强度为1000-3000lux，光照静置培养3-5天，检测种子的OD660≥1.2，活菌数≥10亿cfu/ml即为种子培养液；
E、发酵培养：将桃红荚硫菌种子培养液与发酵培养基以1：3-1：5的接种量接种，同时将沼泽红假单胞菌种子培养液与发酵培养基按1：10-1：20的接种量接入，在光照培养罐中厌氧培养4-6天，培养温度25-35℃，光照强度为1000-4000lux，搅拌速度为120转/分钟，待检测其OD650≥7，活菌数≥60亿cfu/ml，其中桃红荚硫菌菌浓度不低于25亿cfu/ml，沼泽红假单胞菌菌浓度不低于30亿cfu/ml，即可放罐，灌装，包装成品；
所述的半固体桃红荚硫菌培养基为：氯化铵0.4-1.2g/L，磷酸二氢钾0.5-1g/L，二水氯化钙0.05-0.2g/L，氯化镁0.1-0.5g/L，醋酸钠2-10g/L，苹果酸钠0.5-1.5g/L，九水硫化钠0.1-1g/L，琼脂8-10g/L，氯化钠0.5-4g/L，121℃灭菌15分钟，用醋酸调pH至7.0-7.2，其中九水硫化钠先配制成0.1g/mL单独灭菌；
所述的桃红荚硫菌种子液体培养基为：氯化铵0.4-1.2g/L，磷酸二氢钾0.5-1g/L，二水氯化钙0.05-0.2g/L，氯化镁0.1-0.5g/L，醋酸钠2-10g/L，九水硫化钠0.1-1g/L，氯化钠0.5-4g/L，121℃灭菌15分钟，用醋酸调pH至7.0-7.2，其中九水硫化钠先配制成0.1g/mL单独灭菌；
所述的沼泽红假单胞菌种子液体培养基为:氯化铵0.8-1.2g/L，磷酸二氢钾0.5-1g/L，二水氯化钙0.05-0.2g/L，氯化镁0.1-0.5g/L，醋酸钠2-10g/L，碳酸钠1-3g/L，氯化钠1-2g/L，酵母膏0.5-1.5g/L，121℃灭菌15分钟，用灭菌醋酸调pH至7.0-7.2；
所述的沼泽红假单胞菌平板固体培养基为种子液体培养基加入20g/L的琼脂形成的；
所述的发酵培养基为：氯化铵1g/L，磷酸二氢钾0.5g/L，二水氯化钙0.1g/L，氯化镁0.2g/L，醋酸钠6g/L，硫代硫酸钠2g/L，酵母膏0.5g/L，氯化钠2g/L，121℃灭菌15分钟，用醋酸调pH至7.0；
所述桃红荚硫菌菌种保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，编号为CGMCC NO.10344。
CN201510095918.3A 2015-03-04 2015-03-04 应用于污水处理中的复合光合细菌制剂及其制备方法 Expired - Fee Related CN104673724B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510095918.3A CN104673724B (zh) 2015-03-04 2015-03-04 应用于污水处理中的复合光合细菌制剂及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510095918.3A CN104673724B (zh) 2015-03-04 2015-03-04 应用于污水处理中的复合光合细菌制剂及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104673724A CN104673724A (zh) 2015-06-03
CN104673724B true CN104673724B (zh) 2017-10-13

Family

ID=53309318

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510095918.3A Expired - Fee Related CN104673724B (zh) 2015-03-04 2015-03-04 应用于污水处理中的复合光合细菌制剂及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104673724B (zh)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106244489B (zh) * 2016-08-29 2020-02-04 佛山市艳晖生物科技有限公司 一种金藻与光合细菌混合发酵的方法
CN108913680B (zh) * 2018-08-08 2020-09-15 国家海洋局第三海洋研究所 一种用于养殖水环境氨氮降解的微生物制剂及其应用
CN109666611A (zh) * 2019-01-28 2019-04-23 南通龙洋水产有限公司 一种水产养殖用光合细菌的制备及纯化方法
CN109929783A (zh) * 2019-04-22 2019-06-25 广东宏隆生物科技有限公司 沼泽红假单胞菌的培养基及培养方法
TWI708843B (zh) * 2019-04-29 2020-11-01 東吳大學 一種新穎紫硫菌株及其改善水質的用途
CN110241054B (zh) * 2019-07-18 2021-06-08 北京肇铭蓝天展望生物技术研究所有限公司 一种提高虾肉鲜味的光合细菌制剂及其应用
CN110964674B (zh) * 2019-12-31 2023-10-24 佛山市艳晖生物科技有限公司 高产纳米硒的光合细菌及其纳米硒活菌制剂的制备方法
CN112625956A (zh) * 2020-12-25 2021-04-09 江苏苏港和顺生物科技有限公司 一种利用膜浓缩沼液培养光合细菌的方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101407774A (zh) * 2008-11-20 2009-04-15 中国科学院广州地球化学研究所 一种光合细菌制剂的制备工艺
CN101698539A (zh) * 2009-10-13 2010-04-28 王颖 净化水体的微生态制剂及其制备方法
CN103114039A (zh) * 2013-02-22 2013-05-22 广州天壤生物科技有限公司 修复重金属污染土壤的生物制剂及土壤修复方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101407774A (zh) * 2008-11-20 2009-04-15 中国科学院广州地球化学研究所 一种光合细菌制剂的制备工艺
CN101698539A (zh) * 2009-10-13 2010-04-28 王颖 净化水体的微生态制剂及其制备方法
CN103114039A (zh) * 2013-02-22 2013-05-22 广州天壤生物科技有限公司 修复重金属污染土壤的生物制剂及土壤修复方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
一株硫氧化细菌的分离与鉴定;刘蔚等;《四川大学学报（自然科学版）》;20000630;第37卷(第3期);第438页最后一段 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN104673724A (zh) 2015-06-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104673724B (zh) 应用于污水处理中的复合光合细菌制剂及其制备方法
CN102250768B (zh) 一种处理污水污泥的酶菌复合剂的制备方法
CN1348987A (zh) 一种高效处理污水淤泥的微生物菌群的制备方法
CN110117567B (zh) 一种脱氮副球菌菌株筛选及其在除臭中的应用
CN108404647A (zh) 复合微生物除臭剂
CN107699513B (zh) 一种黑臭水体降解菌及其应用
CN111676150B (zh) 一株高效除臭菌及其应用
CN108018250A (zh) 一株嗜酸氧化亚铁硫杆菌及其在环境治理中的应用
CN101885543A (zh) 高效微生物菌体及酶制剂共同处理污水的方法
CN101318739B (zh) 一种制革废水氨氮处理方法
CN104894033A (zh) 一种降解cod的复合菌剂及其制备方法
CN107164284A (zh) 一种除臭微生物菌剂及其制备方法
CN104496017B (zh) 一种利用厌氧滤器快速启动厌氧氨氧化的方法
CN114890555B (zh) 一种用于治理农村黑臭水体的固体微生物制剂及其制备方法与应用
CN104496031B (zh) 一种污水处理兼水生植物种植基质填料制备方法和应用
CN103114062A (zh) 一株具有脱氮除磷双重能力的反硝化聚磷菌及其应用
CN102776140B (zh) 一株耐冷假单胞菌Den-05及其筛选方法和应用
CN110156509B (zh) 一种尿液有机液肥化的原位制备方法
CN109652328B (zh) 一种复合微生物活菌制剂及其在高浓度养猪废水中的应用
CN102070283B (zh) 一种高效处理畜禽养殖废水的技术
CN105969698A (zh) 一种水质净化微生物复合菌剂
CN115353210B (zh) 短小芽孢杆菌lzp02在处理养猪废水中的应用
CN113082998B (zh) 一种生物土壤除臭用复合滤料及其应用
CN113292159B (zh) 应用于含高氨氮假发废水处理的增强型cfbr工艺
CN111099722B (zh) 一种促进反硝化脱氮的组合物及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
CB03 Change of inventor or designer information

Inventor after: Jiang Changde

Inventor after: Zhu Da

Inventor after: Tian Peigen

Inventor before: Jiang Changde

COR Change of bibliographic data
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20160304

Address after: 100084, No. 8, building CB108-019, building 1, Zhongguancun East Road, Haidian District, Beijing

Applicant after: Beijing Juyichengguang Technology Co., Ltd.

Address before: Shaoyang City, Hunan province Longhui 422213 beach Group No. 32 Zhenlong County village

Applicant before: Jiang Changde

GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20171013

Termination date: 20210304

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee