CN104650168A

CN104650168A - 替比夫定一水合物化合物

Info

Publication number: CN104650168A
Application number: CN201310593358.5A
Authority: CN
Inventors: 严洁; 李轩
Original assignee: Tianjin Hankang Pharmaceutical Biotechnology Co Ltd
Current assignee: Tianjin Hankang Pharmaceutical Biotechnology Co Ltd
Priority date: 2013-11-23
Filing date: 2013-11-23
Publication date: 2015-05-27

Abstract

本发明属于医药技术领域，具体涉及替比夫定一水合物晶体及其制备方法，本发明得到的替比夫定一水合物，具有的优点：纯度高；稳定性好，即使在高湿度条件下吸湿增重也不明显。本发明还涉及使用这种水合物的组合物治疗慢性乙型肝炎的应用。

Description

替比夫定一水合物化合物

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及替比夫定一水合物及其制备方法，本发明还涉及使用这种化合物的组合物治疗慢性乙型肝炎的应用。

背景技术

乙型肝炎是由于感染HBV而引起的一种疾病，而人感染HBV后，病毒持续6个月仍未被清除者称为慢性乙型肝炎。慢性乙型肝炎最终归宿为逐渐发展成为肝硬化和肝癌。

慢性乙型肝炎呈世界流行，全球60亿人口中，约20亿人曾感染HBV，其中3.5~4亿人为慢性HBV感染，约占全球人口6%。据世界卫生组织报道，全球每年约100万人死于与HBV感染相关的肝病。

我国进行的全国性流行病学调查研究表明，HBV感染无明显的性别差异，但男性感染HBV后，易于成为慢性无症状的携带者，易于发生肝炎，发生肝炎后易发展成为慢性肝病。有研究表明，慢性乙型肝炎和早期肝硬化在性别分布上男性大于女性，证明男性易发生肝炎，并易发展为肝硬化。而从年龄上分析，慢性乙型肝炎、早期肝硬化患者平均年龄在35岁至45岁左右，肝硬化患者年龄高于慢性乙型肝炎患者，从病程研究来看，早期肝硬化患者病程明显高于慢性乙型肝炎患者的病程，而慢性乙型肝炎不同分型的病程无明显差异，说明乙型肝炎患者随病程的增加，患早期肝硬化的几率增加，而慢性乙型肝炎轻度、中度、重度的分型与病程无关。

对于慢性乙型肝炎患者，治疗的总体目标是：最大限度地长期抑制或消除HBV，减轻肝细胞炎症坏死及肝纤维化，延缓和阻止疾病进展，减少和防止肝脏失代偿、肝硬化、肝细胞肝癌（HCC）及其并发症的发生，从而改善生活质量和延长存活时间。慢性乙型肝炎治疗主要包括抗病毒、免疫调节、抗炎保肝、抗纤维化和对症治疗，其中抗病毒治疗是关键，只要条件允许，就应进行规范的抗病毒治疗。

核苷类药物口服给药方便，抑制病毒作用较强，不良反应少而轻微，可用于肝功能失代偿者，但其疗程相对不固定，疗效不够持久，长期应用可耐药，停药后可出现病情恶化。核苷类药物主要通过作用于HBV的聚合酶区而发挥抗HBV作用。药物进入体内后首先磷酸化为三磷酸盐或二磷酸盐形式，然后取代HBV复制过程中聚合酶链延长所需的结构相似的核苷，从而终止链的延长，达到抑制HBV DNA复制的目的。

拉米夫定是合成的二脱氧胞嘧啶核苷类似物，它与病毒聚合酶结合，可以竞争抑制聚合酶的活性造成HBV DNA的合成终止，从而抑制病毒复制，使肝脏炎症减轻，肝功能恢复，且能有效地抑制星状细胞的激活及胶原纤维的合成，从而阻止肝纤维化的发生发展。此外，拉米夫定能延缓乙肝、肝硬化和纤维化进展，降低肝失代偿和肝细胞癌的发生率。作为第一个获批准为口服抗HBV药物，拉米夫定推动了慢性乙型肝炎治疗的进程。

替比夫定于2006年被美国FDA批准用于治疗乙型肝炎，2007年被中国SFDA批准用于中国慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗。替比夫定是胸腺嘧啶核苷类药物，进入人体后被细胞激酶磷酸化为有活性的三磷酸替比夫定，与HBV DNA的天然底物dTTP竞争聚合酶结合位点，整合到HBV DNA中而终止HBV DNA链延长，从而抑制HBV DNA的复制。替比夫定对HBV DNA具有极高的专一性，而对人类DNA和其他病毒DNA没有作用。

一项为期2年的全球多中心临床试验表明，HBeAg阳性患者治疗52周时，替比夫定组HBV DNA下降至PCR法检测水平以下者为60.0%、ALT复常率为77.2%、耐药发生率为5.0%、肝组织学应答率为64.7%，均优于拉米夫定治疗组，但其 HBeAg血清转换率（22.5%）与后者相似；HBeAg阴性患者治疗52周时，其HBV DNA抑制、ALT复常率及耐药发生率亦优于拉米夫定组。治疗2年时，其总体疗效（除HBeAg消失及血清转换率外）和耐药发生率亦优于拉米夫定组。我国的多中心临床试验也表明其抗病毒活性和耐药发生率均优于拉米夫定。国内外临床研究提示，基线HBV DNA<109拷贝/mL 及ALT 2ULN的HBeAg阳性患者，或HBV DNA<107拷贝/mL 的HBeAg阴性患者，经替比夫定治疗24周时如达到HBVDNA﹤300拷贝/mL，治疗到1年、2年时有更好的疗效和较低的耐药发生率。替比夫定的总体不良事件发生率和拉米夫定相似，但治疗52周和104周时发生3-4级肌酸激酶（CK）升高者为分别7.5% 和12.9%，而拉米夫定组分别为3.1%和4.1%。

替比夫定在有效性和安全性上具有极大的优势，但是在实际生产过程中，申请人发现，替比夫定制备工艺中存在提纯困难、杂质含量较高和有一定的吸湿增重等问题。

本发明人在大量实验的基础上得到的替比夫定一水合物晶体，具有的优点：纯度高，最大杂质小于1‰；稳定性好，即使在高湿度条件下吸湿增重也不明显。

发明内容

本发明的一个目的，公开了一种替比夫定一水合物的晶体。

本发明的另一个目的，公开了这种替比夫定一水合物晶体的制备方法。

本发明的又一个目的，公开了包含该替比夫定一水合物晶体的药物组合物。

本发明还公开了该替比夫定一水合物晶体在制备治疗应用。

现结合本发明的目的对本发明内容进行具体描述。

本发明提供了一种替比夫定一水合物（式Ⅰ所示），

（式I）

卡尔费休法（Karl Fischer法）是一种测定物质中水分的各类化学方法中，对水最为专一、最为准确的方法，已被列为许多物质中水分测定的标准方法，尤其是有机化合物，结果可靠。经6个批次测定，所述的发明化合物含有的水分在6.90-6.93（重量百分比）之间替比夫定一水合物中水的理论含量是6.92%，可以认定发明化合物含有一个结晶水。

其中6个批次的测定结果如下：

该替比夫定一水合物，采用D/Max-2500.9161型X-射线衍射仪测定，测定条件：Cu Ka靶，管电压40KV，管电流100mA。X射线粉末衍射特征吸收峰（2θ）、D值和相对强度如下。

本发明中2θ值的测定使用光源，精度为±0.2°，因此代表上述所取的值允许有一定合理的误差范围，其误差范围为±0.2°。

红外光谱图测定时仪器的校正用聚苯乙烯薄膜，符合中国药典之规定。

该晶型红外光谱图（KBr压片法测定），在2200-2600cm^-1、1600-1800cm^-1、1000-1500cm^-1以及500-1000cm^-1处有特征吸收峰。

本发明的另外一个目的，公开了替比夫定一水合物的制备方法，通过将替比夫定在四氢呋喃—乙酸乙酯—水溶液中加热溶解，冷却到0℃，再保持一段时间得到。

具体包括下列步骤：将替比夫定加入3倍（体积比）水中，向上述水溶液中加入同样体积的四氢呋喃，搅拌半小时，过滤，滤液冷却至0℃，而后将备用液加入到同样温度的同体积的乙酸乙酯中，保持温度10小时析出结晶，过滤，干燥得晶体。

实验证明：四氢呋喃、乙酸乙酯的加入、混合液的配比、静置保持的温度和时间对得到本发明替比夫定一水合物至关重要。

本发明的又一个目的，提供了包含该替比夫定一水合物与一种或多种药学上可接受的载体组成的替比夫定的组合物。

本发明的药物组合物制备如下：使用标准和常规的技术，使本发明化合物与制剂学上可接受的固体或液体载体结合，以及使之任意地与制剂学上可接受的辅助剂和赋形剂结合制备成固体制剂。该组合物用于制备分散片。

药物组合物以及单元剂型中含有的活性成份（本发明化合物）的量可以根据患者的病情、医生诊断的情况特定的加以应用，所用的化合物的量或浓度在一个较宽的范围内调节，活性化合物的量范围为组合物的1％～30％（重量）。

本发明还提供了替比夫定在制造治疗慢性乙型肝炎的药物中的应用。

给予母体胞内有DHBV感染的两天龄幼鸭替比夫定和拉米夫定，给药14天对鸭采血，比较两种药物对鸭体内DHBV DNA抑制程度，实验结果显示：替比夫定对鸭体内DHBV DNA抑制更强，且其浓度下降更快。

稳定性试验

发明人对本发明的晶型的稳定性进行了研究，考察条件为高温（40℃±2℃）、强光（4500Lx±5001x），高湿（92.5%，RH）考察指标为外观，含量及有关物质。

结果：在强光、高温、高湿条件下从0-15天，外观，有关物质、含量没有改变，说明化学稳定性良好，适合药物制剂的制造及长期储存。

在40℃，不同相对湿度（RH）条件（75%，92.5%）下, 替比夫定中水分的测定：

结果：在40℃，不同相对湿度（RH）条件（75%，92.5%）下，水分保持恒定，说明稳定性良好，适合药物制剂的制造及长期储存。

具体实施方式：

下面结合实施例对本发明做进一步的说明，使本领域专业技术人员更好的理解本发明。实施例仅为解释性的，决不意味着它以任何方式限制本发明的范围。

实施例 1

在装有搅拌、温度计、冷凝器的1L反应瓶中，加入50克替比夫定和150ml水，150ml四氢呋喃，搅拌30分钟，过滤，滤液冷却至0℃，备用。

将350ml乙酸乙酯混合液冷却到0℃，搅拌下加入上述备用液中，保温10小时，析出结晶，过滤，干燥得到白色晶体53.45克。经卡尔费休法测定3次，取均值，含有6.92%（重量比）的水分。纯度99.9%（HPLC归一法），光学纯度99.97ee（手性HPLC）。

实施例 2

含有替比夫定一水合物的分散片

处方：替比夫定一水合物重量比25%，乳糖适量，微晶纤维素30%，预胶化淀粉18%，低取代羟丙基纤维素8%，十二烷基硫酸钠1%，硬脂酸镁0.8%，聚乙烯比咯烷酮适量。

工艺：将以上物料分别过100目筛，将替比夫定、乳糖、预胶化淀粉、微晶纤维素、低取代蒋丙基纤维素、十二烷基硫酸钠充分混匀，加入适量聚乙烯吡咯烷酮水溶液，20目筛制粒后烘干，加入硬脂酸镁混匀，控制片重，压片得替比夫定分散片。

Claims

1.式Ⅰ所示替比夫定一水合物的晶体，

（Ⅰ）

所述替比夫定一水合物晶体，用CuKa射线作为特征X射线粉末测定中，其图谱具有下列2θ衍射角，晶面间距(d值)和相对强度（I/I₀），

No. 2θ d（Å） I/I₀ 1 9.653 17.8456 11 2 10.259 9.5115 8 3 13.587 7.8754 15 4 18.989 6.1024 9 5 21.874 5.2458 100 6 23.869 5.1474 35 7 25.758 5.0147 87 8 27.398 4.8745 6 9 28.958 4.6587 3 10 30.874 4.0125 20 11 31.285 3.9668 10 12 31.956 3.8241 9 13 32.654 3.7587 11 14 32.668 3.6014 13 15 34.845 3.5894 6 16 36.158 3.4715 28 17 37.578 3.4510 30 18 38.785 3.2589 16 19 40.584 3.1124 10 20 43.048 2.1024 15

2θ衍射角的误差为±0.2。

2.权利要求1所述的替比夫定一水合物晶体，红外光谱图，溴化钾压片法测定，在2200-2600cm^-1、1600-1800cm^-1、1000-1500cm^-1以及500-1000cm^-1处有特征吸收峰。

3.权利要求1所述替比夫定一水合物晶体的制备方法，通过将替比夫定加入3倍（体积比）水中，向上述水溶液中加入同样体积的四氢呋喃，搅拌半小时，过滤，滤液冷却至0℃，而后将备用液加入到同样温度的同体积的乙酸乙酯中，保持温度10小时析出结晶，过滤，干燥得晶体。

4.一种含有权利要求1所述替比夫定一水合物与一种或多种要学上可接受的载体组成的替比夫定的组合物。

5.权利要求4所述的组合物，其特征在于该组合物用于制备口服制剂。

6.权利要求1所述的替比夫定一水合物在制造用于治疗慢性乙型肝炎的应用。