CN104623676B - 一种防治慢性乙型肝炎的药物组合物及其应用 - Google Patents
一种防治慢性乙型肝炎的药物组合物及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104623676B CN104623676B CN201510087980.8A CN201510087980A CN104623676B CN 104623676 B CN104623676 B CN 104623676B CN 201510087980 A CN201510087980 A CN 201510087980A CN 104623676 B CN104623676 B CN 104623676B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- theanine
- bromine
- acid amides
- pharmaceutical composition
- chronic hepatitis
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Landscapes
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明公开了一种防治慢性乙型肝炎的药物组合物及其应用，该药物组合物由活性成分和药剂学上可接受的辅料制备而成，所述的活性成分包括茶氨酸溴香酰胺。该药物有较强的抗乙型肝炎病毒的生物活性，同时毒副作用低，所提供的注射液稳定性高，有望开发成抗HBV的一线药物。
Description
技术领域
本发明属于天然药物技术领域，具体涉及一种防治慢性乙型肝炎的药物组合物及其应用。
背景技术
乙型肝炎是由嗜肝的乙型肝炎病毒(HBV)引起的一种在世界范围的传染性疾病，全世界约有3.5亿人感染HBV，我国约占一半。乙型肝炎给人类健康造成极大的危害，寻求高效低毒的抗HBV的天然药物已经刻不容缓(刘健.联合抗病毒治疗慢性乙型肝炎新进展[J].临床合理用药杂志，2013，6(26)：174-176.)。
目前，市场上治疗慢性乙型肝炎的方法主要有干扰素、阿德福韦酯，恩替卡韦等药物以及注射乙肝疫苗。但上述药物或疫苗均存在比较大的缺点，如长期服用干扰素会造成患者出现流感感样症状、并可能使患者出现消化道症状、脱发等不良反应，严重者还能抑制骨髓导致白细胞、血小板减少，这样就会导致患者的凝血功能下降。而服用阿德福韦酯，恩替卡韦等核苷类似物类则会导致乳酸性酸中毒和重度的脂肪性肝肿大，且很多患者服用半年左右就会耐药，而且还不能随时停药，否则可能会导致病情迅速恶化，甚至转化为肝硬化、肝癌。虽然乙肝疫苗能够抑制HBV的复制，其安全性和耐受性都很好，但是还不足以打破慢性乙型肝炎的免疫耐受状态进而清除HBV，仍需辅以抗慢性乙型肝炎药物的治疗。
茶氨酸是一种酰胺类化合物，化学命名为：N-乙基-L-谷氨酰胺，通常说的茶氨酸是指L-茶氨酸，它是茶叶中的一种非蛋白氨基酸，约占茶叶中游离氨基酸总量的40％～70％。研究表明，茶氨酸具有：(1)促进大脑功能和神经的生长；(2)增加肠道有益菌群和减少血浆胆固醇；(3)降压安神、改善睡眠；(4)抑制肿瘤细胞浸润和转移。虽然茶氨酸具有多种生物活性，但是其治疗作用较弱，因此主要应用于食品添加剂和保健品(文慧，魏时来，张石蕊，等.L-茶氨酸在动物体内的免疫调节及抗氧化作用研究进展[J].中国畜牧兽医杂志，2012，48(21)：.84-87.)。为了提高茶氨酸的抗癌活性，季德鑫等人对其进行了结构修饰和改造，合成了茶氨酸的衍生物茶氨酸溴香酰胺(TBrC)，并确认其对高转移的小鼠肺癌细胞生长的抑制作用(Segesaka Kakusa Kawamura K，et al.Pharmaclogicoalbe effect oftheanine[J].The Organizing Committee of ISTS，2012：362-365.)。
发明内容
为了克服现有乙肝治疗药物毒副作用大的缺点，本发明提供一种新型的防治慢性乙型肝炎的药物组合物。
为了实现本发明的目的，发明人通过大量体外试验研究并不懈探索，最终获得了如下技术方案：
一种防治慢性乙型肝炎的药物组合物，由活性成分和药剂学上可接受的辅料制备而成，所述的活性成分包括茶氨酸溴香酰胺。
优选地，如上所述防治慢性乙型肝炎的药物组合物，其中所述药剂学上可接受的辅料包括磺丁基-β-环糊精。进一步优选地，磺丁基-β-环糊精与茶氨酸溴香酰胺的用量比为(0.2-0.8)：1。再进一步优选地，磺丁基-β-环糊精与茶氨酸溴香酰胺的用量比为(0.2-0.4)：1。
本发明所述防治慢性乙型肝炎的药物组合物，其为注射剂，所述的注射剂包括注射液、注射用冻干粉。在本发明最优选的实施例中，所述药剂学上可接受的辅料包括磺丁基-β-环糊精、氯化钠。
需要说明的是，本发明人采用转染HBV的人肝癌细胞HepG2.2.15作为研究对象，研究了茶氨酸溴香酰胺抗HBV的效果，结果发现茶氨酸溴香酰胺和乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的分泌均有抑制作用，可见其抗乙型肝炎病毒的效果很显著。因此，本发明还提供一种制药用途，即：茶氨酸溴香酰胺在制备防治慢性乙型肝炎的药物中的应用。
与现有技术相比，本发明涉及的含有茶氨酸溴香酰胺的药物组合物具有如下突出的优势：(1)有较强的抗乙型肝炎病毒的生物活性，同时毒副作用低；(2)磺丁基-β-环糊精的加入可避免茶氨酸溴香酰胺经长期储存后的降解，因此所提供的注射液稳定性高，有望开发成抗HBV的一线药物。
具体实施方式
下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但是应理解所述实施例仅是范例性的，不对本发明的保护范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神下可以对技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改或替换均落入本发明的保护范围。
实施例1：转染HBV的人肝癌细胞系HepG2.2.15的培养
将转染HBV的HepG 2.2.15细胞解冻后，接种入25cm2培养瓶，浓度为1×105个/mL，待细胞长满后，加0.25％(w/v)的胰酶溶液37℃消化3-5min。加培养液吹打，1∶3传代，每天收集上清，连续2周，冷藏待检。细胞培养液为MEN培养液，每100mL含胎牛血清10mL，3％(w/v)的谷氨酰胺溶液1mL，G418 380μg/mL，庆大霉素50U/mL；细胞消化液为0.25％(w/v)的胰酶溶液，用Hanks液配制。
实施例2：茶氨酸溴香酰胺对HepG2.2.15细胞的毒性试验
取实施例1培养的对数生长期HepG2.2.15细胞，用细胞培养液调整细胞浓度为1×105mL-1，将细胞接种于96孔板，每孔200μL，37℃5％CO2培养箱中培养，待其贴壁后，弃掉原培养液。在茶氨酸溴香酰胺不同剂量组各孔，分别加入茶氨酸溴香酰浓度为16、64、125、250、500μmol/L培养液200μL，另设不加药细胞培养孔为空白对照组，每组重复6孔。将各组细胞置CO2孵箱培养72h，向每孔细胞中加入5μg/mL MTT 10μL，每孔中存留有上清100μL，37℃5％CO2培养箱中培养4h后，用酶标仪在参考波长630nm，检测波长570nm处测定每个孔的光密度(0D)值。计算不同浓度茶氨酸溴香酰胺对HepG2.2.15细胞生长抑制率。细胞生长抑制率(％)＝(空白对照组OD值-茶氨酸溴香酰胺不同剂量组OD值)/空白对照组OD值×100％。根据Reed-Muench公式计算半数毒性浓度(TC50)。结果显示，茶氨酸溴香酰胺的TC50大于64μmol/L。因此，本实验选取小于或等于64μmol/L的浓度检测茶氨酸溴香酰胺的抗HBV活性。
实施例3：茶氨酸溴香酰胺对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg和HBeAg的抑制试验
取实施例1培养的对数生长期HepG2.2.15细胞，用细胞培养液调整细胞浓度为1×105mL-1，将细胞接种于96孔板，每孔200μL，37℃5％CO2培养箱中培养，待其贴壁后，弃掉原培养液。在茶氨酸溴香酰胺不同剂量组各孔，分别加入茶氨酸溴香酰浓度为8、16、32、64μmol/L培养液200μL，另设不加药细胞培养孔为空白对照组，每组重复6孔。将各组细胞置CO2孵箱培养72h，收集各组细胞培养的上清液进行酶联免疫吸附试验测定。测定方法按照HBeAg试剂盒、HBsAg试剂盒(华美生物工程有限公司)操作说明进行。用酶联免疫检测仪测定450nm处OD值，并计算抑制率。HBsAg或HBeAg抑制率＝(空白对照组OD值-茶氨酸溴香酰各剂量组OD值)/空白对照组OD值×100％。试验统计结果见表1、表2。
通过表1、表2的试验统计结果可以看出，茶氨酸溴香酰胺酮各剂量组和拉米夫定对HBsAg及HBeAg的分泌均有抑制作用，与空白对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。
表1茶氨酸溴香酰胺对HepG2.2.15细胞分泌HBeAg的影响
与空白对照组比较，*P＜0.05。
表2茶氨酸溴香酰胺对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg的影响
与空白对照组比较，*P＜0.05。
实施例4：茶氨酸溴香酰胺注射液的制备
制备工艺：(1)分别清洗输液瓶和丁基胶塞，然后121℃蒸汽热压灭菌20分钟，备用；(2)称取处方量的茶氨酸溴香酰胺、磺丁基-β-环糊精和氯化钠，溶解于注射用水中；(3)0.22μm微孔滤膜过滤，灌装入输液瓶中，121℃蒸汽热压灭菌20分钟。
质量检查：抽取制备的样品，置于40℃环境下，进行加速考察6个月，结果无肉眼可见的异物，输液瓶底部无沉淀，茶氨酸溴香酰胺含量99.3％。
实施例5：茶氨酸溴香酰胺注射液的制备
制备工艺：(1)分别清洗输液瓶和丁基胶塞，然后121℃蒸汽热压灭菌20分钟，备用；(2)称取处方量的茶氨酸溴香酰胺、磺丁基-β-环糊精和氯化钠，溶解于注射用水中；(3)0.22μm微孔滤膜过滤，灌装入输液瓶中，121℃蒸汽热压灭菌20分钟。
质量检查：抽取制备的样品，置于40℃环境下，进行加速考察6个月，结果无肉眼可见的异物，输液瓶底部无沉淀，茶氨酸溴香酰胺含量99.6％。
对比例1：茶氨酸溴香酰胺注射液的制备
制备工艺：(1)分别清洗输液瓶和丁基胶塞，然后121℃蒸汽热压灭菌20分钟，备用；(2)称取处方量的茶氨酸溴香酰胺、羟丙基-β-环糊精和氯化钠，溶解于注射用水中；(3)0.22μm微孔滤膜过滤，灌装入输液瓶中，121℃蒸汽热压灭菌20分钟。
质量检查：抽取制备的样品，置于40℃环境下，进行加速考察6个月，结果有肉眼可见的异物出现，输液瓶底部有沉淀，茶氨酸溴香酰胺含量91.7％。
Claims (3)
1.一种防治慢性乙型肝炎的药物组合物，由活性成分和药剂学上可接受的辅料制备而成，其特征在于，所述的活性成分包括茶氨酸溴香酰胺，所述药剂学上可接受的辅料包括磺丁基-β-环糊精，磺丁基-β-环糊精与茶氨酸溴香酰胺的用量比为（0.2-0.8）：1；所述的药物组合物为注射剂，所述的注射剂包括注射液、注射用冻干粉。
2.根据权利要求1所述防治慢性乙型肝炎的药物组合物，其特征在于，磺丁基-β-环糊精与茶氨酸溴香酰胺的用量比为（0.2-0.4）：1。
3.根据权利要求1所述防治慢性乙型肝炎的药物组合物，其特征在于，所述药剂学上可接受的辅料包括磺丁基-β-环糊精、氯化钠。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510087980.8A CN104623676B (zh) | 2015-02-26 | 2015-02-26 | 一种防治慢性乙型肝炎的药物组合物及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510087980.8A CN104623676B (zh) | 2015-02-26 | 2015-02-26 | 一种防治慢性乙型肝炎的药物组合物及其应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104623676A CN104623676A (zh) | 2015-05-20 |
| CN104623676B true CN104623676B (zh) | 2017-09-15 |
Family
ID=53203224
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201510087980.8A Active CN104623676B (zh) | 2015-02-26 | 2015-02-26 | 一种防治慢性乙型肝炎的药物组合物及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104623676B (zh) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101658677A (zh) * | 2009-09-09 | 2010-03-03 | 重庆大学 | 洛伐他汀-磺丁基醚-β-环糊精包合物、制剂及制备方法 |
| CN103110621A (zh) * | 2013-01-28 | 2013-05-22 | 烟台大学 | 茶双氯香酰胺和茶双溴香酰胺等在制备具有预防和治疗癌症等疾病的产品中的应用 |
| CN103690528A (zh) * | 2012-09-27 | 2014-04-02 | 烟台大学 | 茶氨酸溴香酰胺在制备具有预防和治疗癌症等疾病的产品中的应用 |
| CN103690530A (zh) * | 2012-09-27 | 2014-04-02 | 烟台大学 | 茶氨酸氯香酰胺等在制备具有预防和治疗癌症等疾病的产品中的应用 |
-
2015
- 2015-02-26 CN CN201510087980.8A patent/CN104623676B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101658677A (zh) * | 2009-09-09 | 2010-03-03 | 重庆大学 | 洛伐他汀-磺丁基醚-β-环糊精包合物、制剂及制备方法 |
| CN103690528A (zh) * | 2012-09-27 | 2014-04-02 | 烟台大学 | 茶氨酸溴香酰胺在制备具有预防和治疗癌症等疾病的产品中的应用 |
| CN103690530A (zh) * | 2012-09-27 | 2014-04-02 | 烟台大学 | 茶氨酸氯香酰胺等在制备具有预防和治疗癌症等疾病的产品中的应用 |
| CN103110621A (zh) * | 2013-01-28 | 2013-05-22 | 烟台大学 | 茶双氯香酰胺和茶双溴香酰胺等在制备具有预防和治疗癌症等疾病的产品中的应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 核转录因子Rel/NF-kB与乙型肝炎病毒;刘妍等;《世界华人消化杂志》;20040115;第12卷(第1期);145-148 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN104623676A (zh) | 2015-05-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104510747B (zh) | 一种环烯醚萜苷的药物新用途 | |
| CN109369747A (zh) | 淫羊藿次苷ⅰ化合物及其衍生物、药物组合物及其制备方法和应用 | |
| CN109320570A (zh) | 一种淫羊藿次苷ⅰ类化合物、衍生物、可药用盐及应用 | |
| TW201618801A (zh) | 用於輔助化療藥物之醫藥組合物及其用途 | |
| CN100522184C (zh) | 具有抗肿瘤和抗毒活性的提取物 | |
| CN104623676B (zh) | 一种防治慢性乙型肝炎的药物组合物及其应用 | |
| CN101618213B (zh) | 麻疹腮腺炎乙型脑炎联合减毒活疫苗及其制备方法 | |
| CN1249072C (zh) | 一种金丝桃苷的制备方法及药物新用途 | |
| CN101537011A (zh) | 预防或治疗帕金森病的药物组合物及其制备方法 | |
| CN108578399A (zh) | 氨基酸酯化合物在制备抗cvb3病毒药物中的应用 | |
| Dygai et al. | Hemostimulating effects of Erythropoietin immobilized by the Nanotechnology method of electron-beam synthesis | |
| CN113713028A (zh) | 一种具有抑制肿瘤细胞活性作用的组合物及其应用 | |
| CN103040827A (zh) | 神经激肽受体的拮抗剂sr140333在肝癌治疗中的用途 | |
| CN104116026B (zh) | 盐制巴戟天多糖在制备具有辅助抑制前列腺癌功效的功能食品中的应用 | |
| CN104337760B (zh) | 一种二盐酸组胺注射液及其制备方法 | |
| US11628199B2 (en) | Medicine for combined use in cancer treatment | |
| CN113521262A (zh) | 一种具有抗炎效果的溶菌酶制剂 | |
| CN103432569A (zh) | 重组人血清白蛋白-干扰素α融合蛋白的水溶液及其制备方法 | |
| CN102961443B (zh) | 北豆根抗肿瘤提取物、制备方法及用途 | |
| CN108853117A (zh) | 叶绿素铜钠在制备治疗肝病药物中的应用 | |
| CN103585119A (zh) | 一种包含依前列醇及其药用盐的稳定化制剂及其制备方法 | |
| CN103446211B (zh) | 一种牛心朴子总生物碱及其制备方法和应用 | |
| RU2380405C2 (ru) | Способ получения рекомбинантного альфа 16-интерферона человека и фармацевтическая композиция для лечения вирусных заболеваний на основе рекомбинантного альфа 16-интерферона человека | |
| CN110840885B (zh) | 一种素心腊梅碱的抗鼻咽癌用途 | |
| CN101190936A (zh) | 具有抗病毒活性的化合物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Lv Haixia Inventor after: Zhu Bin Inventor after: Yao Bingyang Inventor after: Lu Huijuan Inventor after: Di Desheng Inventor before: Zhu Bin Inventor before: Wang Tianbao Inventor before: Wei Xiaoxia Inventor before: Zeng Ping Inventor before: Dong Tingfang |
|
| CB03 | Change of inventor or designer information | ||
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20170808 Address after: No. 601 Xinxiang City, Henan province Jinsui road 453003 Applicant after: Xinxiang Medical College Address before: 453100 No. 88 health Road, Weihui, Henan, Xinxiang Applicant before: The First Affiliated Hospital of Xinxiang Medical University |
|
| TA01 | Transfer of patent application right | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |